Verfahren zur Herstellung eines zur Gonokokkentoxingewinnung geeigneten
Nährbodens Es ist bekannt, daß menschliche Plaeenten zu Bakteriennährböden verarbeitet
werden können. Diese Nährböden sind aber an und für sich keine optimalen und für
das Wachstum der Gonokokken ohne weitere Zusätze nicht brauchbar.Process for the preparation of one suitable for obtaining gonococcal toxin
Culture media It is known that human plaques are processed into bacteria media
can be. However, these nutrient media are in and of themselves not optimal and for
the growth of the gonococci cannot be used without further additives.
Es wurde nun gefunden, daß ein außerordentlich guter Nährboden für
Gonokokken gewonnen werden kann, wenn man darauf achtet, daß bei der Herstellung
des Extraktes durch Auskochen von Placenten mit Wasser die Mengenverhältnisse so
gewählt werden, daß auf etwa 1,5 Teile Placenta etwa i Teil wäßriger Extrakt erhalten
wird.It has now been found that an extremely good breeding ground for
Gonococci can be obtained if care is taken during manufacture
of the extract by boiling placents with water, the proportions are as follows
be chosen so that about 1 part of aqueous extract is obtained for about 1.5 parts of placenta
will.
Dies kann erreicht werden, indem man entweder drei Placenten auf einmal
in etwa i 1 Wasser auskocht und bei Verwendung größerer Placenten diese Proportionen
wahrt, oder aber daß man eine Placenta in etwa i 1 Wasser auskocht, diese sodann
entfernt und nach Ersatz des verlorengegangenen Wassers in der entstandenen Bouillon
eine zweite Placenta auskocht, und nach deren Entfernung eine dritte schließlich
in der Weise, daß man eine Placenta mit Wasser auskocht und nach Entfernung der
Placenta die so erhaltene Nährbouillon auf das oben angegebene Volumen einengt,
zweckmäßig im Vakuum. Die Arbeitsweise des wiederholten Kochens weiterer Placenten
im Saft der vorhergehenden Abkochung hat sich jedoch als vorteilhafter erwiesen.This can be achieved by either getting three placentas at a time
Boils in about i 1 of water and these proportions when using larger placentas
or that you boil a placenta in about 1 liter of water, then this
removed and after replacing the lost water in the resulting bouillon
decoys a second placenta, and finally, after its removal, a third
in such a way that one boils a placenta with water and after removing the
Placenta constricts the nutrient broth obtained in this way to the volume indicated above,
expediently in a vacuum. The workings of repeatedly boiling more placentas
however, in the juice of the previous decoction turned out to be more beneficial.
Das so erhaltene Fleischwasser wird durch die üblichen Zusätze zu
einer Nährbouillon ergänzt, die jedoch nur o,i °1o (nicht wie sonst o,5 °f,) Kochsalz
benötigt. Die Bouillon wird zweckmäßig auf eine Wasserstoffionenkonzentration entsprechend
PH - 7,2 - 7,¢ eingestellt. Natürlich kann man diese Bouillon durch die sonst in
der Bakteriologie verwandten Zusätze, z. B. Molke, geeignete Kohlenhydrate usw.,
ergänzen.The meat water obtained in this way is made by the usual additives
a nutrient broth supplemented, however, only 0.110 (not as usual 0.55) table salt
needed. The broth is appropriately adjusted to a hydrogen ion concentration
PH - 7.2 - 7, ¢ adjusted. Of course you can get this bouillon through the otherwise in
the bacteriology related additives, z. B. whey, suitable carbohydrates, etc.,
add to.
In diesem Nährboden wachsen die Gonokokken als dicke, schlierige,
fadenziehende Masse, ohne sie zu trüben, und geben besonders reichlich Toxine an
die Nährflüssigkeit ab, die durch Injektion beim Menschen und Komplementbindung
mit Gonorrhoiker Serum nachgewiesen werden können. Beispiel Eine normale, etwa 5oo
g schwere Placenta wird nach üblicher Zerkleinerung in i 1 Leitungswasser über Nacht
im Eisschrank mazeriert, unter sorgfältigem Umrühren auf offener Flamme etwa 2o
Minuten unter Rückfluß gekocht und dann unter Ausdrücken koliert. Das erhaltene
Fleischwasser
wird. durch Leitungswasser auf 1 1 aufgefüllt, mit
einer zerkleinerten frischen Placenta in gleicher Weise unter Rückfluß gekocht und
koliert, das Kolat- erneut auf 1 1 aufgefüllt und nach Zusatz einer frischen Placenta
zum dritten Male ao Minuten lang unter ständigem Umrühren unter Rückfluß aufgekocht
und koliert. Zu dem so hergestellten Placentaextrakt werden 1 °/o Pepton Witte und
o, i °%o Kochsalz zugefügt. Diese Bouillon wird etwa 15 Minuten im Kochschen Dampftopf
gehalten, mit Normalsodalösung auf 7,2 pii eingestellt, wiederum 15 Minuten
im Kochschen Dampftopf gehalten, sodann heiß mehrmals durch Papierfilter bis zur
Klarheit filtriert, heiß in vorher sterilisierte gestopfte Glasgefäße eingefüllt
und schließlich nochmals sterilisiert.In this nutrient medium, the gonococci grow as a thick, streaky, stringy mass without clouding them, and release particularly abundant toxins into the nutrient fluid, which can be detected by injection in humans and complement fixation with gonorrhoeic serum. EXAMPLE A normal placenta weighing about 500 g is macerated in 1 liter tap water overnight in the refrigerator after the usual comminution, refluxed for about 20 minutes over an open flame with careful stirring and then colourized with squeezing. The meat liquor obtained is. topped up with tap water to 1 liter, refluxed with a crushed fresh placenta in the same way and colourized, the colate again made up to 1 liter and, after adding a fresh placenta, refluxed for a third time for ao minutes with constant stirring and colourized. 1% Pepton Witte and 0.1% table salt are added to the placenta extract produced in this way. This bouillon is kept in the Koch's steam pot for about 15 minutes, adjusted to 7.2 pii with normal soda solution, again kept in the Koch steam pot for 15 minutes, then filtered hot several times through paper filters until clarity, poured hot into previously sterilized glass jars and finally sterilized again.