DE486914C

DE486914C - Process for the production of a preparation from ovaries and similar organs

Info

Publication number: DE486914C
Application number: DEF56105D
Authority: DE
Original assignee: OTFRIED FELLNER DR
Current assignee: OTFRIED FELLNER DR
Priority date: 1924-05-15
Filing date: 1924-05-15
Publication date: 1929-11-27

Description

Verfahren zur - terstellung eines Präparates aus Ovarien und ähnlichen Organen Durch das Hauptpatent 420 438 ist es bekannt geworden, aus Organen (Placenta, Eierstöcke, Hoden, Prostata, Thymus, Eihäute, Corpus luteum usw.) Substanzen herzustellen, welche wachstumfördernde Eigenschaften auf den Uterus usw. besitzen.Process for the production of a preparation from ovaries and the like Organs The main patent 420 438 made it known that organs (placenta, Ovaries, testicles, prostate, thymus, membranes, corpus luteum, etc.) to produce substances, which have growth-promoting properties on the uterus, etc.

Wesentlich ist bei obigem Verfahren eine Reinigung auf Grund der Löslichkeit der Substanzen in 75°/oigem Alkohol. Der durch Eindampfen des klaren Alkoholfiltrats erhaltene Rückstand wird mit Aceton extrahiert, die filtrierte Acetonlösung eingedampft und der Rückstand mit Äther extrahiert. Dieser klare Ätherextrakt mit wachstumfördernden Eigenschaften gibt beim Schütteln mit Wasser an dieses eine Substanz ab, die gegen Glykosurie wirksam ist, Wehen erzeugt und den Blutdruck erhöht. Die sehr geringe Ausbeute läßt sich durch das vorliegende Verfahren erhöhen und zugleich eine größere Reinheit der Produkte erzielen.In the above process, purification due to solubility is essential of the substances in 75 per cent alcohol. That by evaporation of the clear alcohol filtrate The residue obtained is extracted with acetone, and the filtered acetone solution is evaporated and the residue extracted with ether. This clear ether extract with growth-promoting Properties gives off a substance when shaken with water, which against Glycosuria works, creates labor and increases blood pressure. The very minor one Yield can be increased by the present process and at the same time a greater one Achieve product purity.

Das Ausgangsmaterial für das vorliegende Verfahren ist die durch ihre Löslichkeit in 75%igem Alkohol gekennnzeichnete Fraktion. Diese wird getrocknet und sodann mit Aceton heiß extrahiert. Die noch im warmen Zustande sich absetzenden unlöslichen t- Bestandteile werden vom Acetonextrakt getrennt und der letztere nunmehr abkühlen gelassen, beim Abkühlen fallen gewisse im kalten Aceton unlösliche Bestandteile aus, und der von diesem getrennte kalte Acetonextrakt wird nunmehr eingedampft und mit Äther extrahiert. Der Ätherextrakt wird von den unlöslichen Bestandteilen durch Dekantieren oder Filtrieren getrennt.The starting material for the present process is that of theirs Solubility in 75% alcohol marked fraction. This is dried and then extracted hot with acetone. Those that settle while still warm insoluble t-components are separated from the acetone extract and the latter now Allowed to cool, certain components which are insoluble in the cold acetone fall on cooling off, and the cold acetone extract separated from this is now evaporated and extracted with ether. The ether extract is made up of the insoluble constituents Decant or filter separately.

Auf diesem Wege erhält man nunmehr vier voneinander getrennte Präparate, und zwar z. den von der heißen Acetonextraktion verbleibenden acetonunlöslichen Rückstand, 2. die aus dem kalten Acetonextrakt ausfallende Substanz, welche rote Färbung aufweist, 3. den bei der Extraktion mit Äther anfallenden ätherunlöslichen Rückstand, 4. den Ätherextrakt.In this way you now get four separate preparations, namely z. the acetone-insoluble ones remaining from the hot acetone extraction Residue, 2. the substance precipitating from the cold acetone extract, which red Has color, 3. the ether-insoluble which is obtained during extraction with ether Residue, 4. the ether extract.

Es wurde nun gefunden, daß die unter z bis 3 angeführten Fraktionen sehr beträchtliche Anteile an wertvollen Substanzen enthalten, die zum Teil neue Eigenschaften aufweisen.It has now been found that the fractions listed under z to 3 contain very considerable amounts of valuable substances, some of which are new Have properties.

Von dieser durch Versuche gewonnenen neuen Erkenntnis ausgehend, hat das vorliegende Verfahren die Aufarbeitung der unter r, 2 und 3 angeführten Fraktionen zum Gegenstande.Based on this new knowledge gained through experiments, has the present process involves working up the fractions listed under r, 2 and 3 to the subject.

Der in der Extraktionshülse verbleibende, in heißem Aceton unlösliche Rückstand z wird mit Wasser aufgenommen, mit einem Überschuß an Äther versetzt und gut durchgeschüttelt, wobei sich zwei Schichten eine ätherische und eine wäßrige, bilden; die in der ätherischen Schicht verbleibende Substanz besitzt wachstumfördernde, die in der wäßrigen Schicht sich anreichernde Substanz antiglykosourische Wirkungen. Getrennt davon wird die beim Abkühlen des Acetonextrakts ausfallende Substanz 2 von charakteristisch roter Farbe gewonnen.The one that remains in the extraction thimble and is insoluble in hot acetone Residue z is taken up with water, mixed with an excess of ether and shaken well, with two layers, an ethereal and an aqueous, form; the substance remaining in the ethereal layer has growth-promoting, the substance accumulating in the aqueous layer has antiglycosmic effects. Separated of these, the substance 2 which precipitates out when the acetone extract is cooled becomes characteristic won red color.

Der Abdampfrückstand des Acetonextrakts wird mit Äther extrahiert, und die hierbei anfallende ätherunlösliche Fraktion 3, welche gleichfalls rote Färbung besitzt, wird mit der mit 2 bezeichneten Substanz vereint.The evaporation residue of the acetone extract is extracted with ether, and the ether-insoluble fraction 3, which is also red in color possesses, is combined with the substance labeled 2.

Diese zuletzt gewonnene rote Substanz 3 hat die Eigenschaft, bei Anwendung geringer Äthermengen suspendiert zu bleiben und erst beim Verdünnen auszufallen; dieses Verdünnen muß sorgfältig so lange fortgesetzt werden, bis auf neuerlichen Ätherzusatz nichts mehr ausfällt.This red substance 3 obtained last has the property of being used to remain suspended in small amounts of ether and to precipitate only when diluted; this dilution must be carefully continued until again Ether addition nothing fails.

Die hier in zwei Stufen gewonnene rote Substanz 2, 3 wird nunmehr mit Wasser aufgenommen und unter Zusatz der mehrfachen Menge eines wasserunlöslichen Lösungsmittels gut durchgeschüttelt, wobei sich in der Schicht des wasserunlöslichen Lösungsmittels die wachstumfördernde Substanz, in der wasserlöslichen Schicht die antiglykosourisch wirkende Substanz anreichert.The red substance 2, 3 obtained here in two stages is now taken up with water and with the addition of several times the amount of a water-insoluble The solvent is shaken well, being in the layer of the water-insoluble Solvent the growth-promoting substance, in the water-soluble layer the antiglycosouric substance enriches.

Die wachstumfördernde, wasserunlösliche Substanz hat, wie ferner gefunden, das Vermögen, die Blutgerinnungszeit zu kürzen und Blutungen zu erzeugen, während die antiglykosourisch wirkende wasserlösliche Substanz die Blutgerinnungszeit zu verlängern und Blutungen zu hemmen vermag. Ausführungsbeispiel Das Organ (Placenta, Eierstöcke, Hoden, Prostata, Thymus, Eihäute, Corpus luteum usw.) wird bei 3o bis 40' getrocknet, mit Alkohol im Soxleth durch viele Tage extrahiert, der Extrakt wird filtriert und eingedampft. Der Abdampfrückstand von der Alkoholextraktion wird mit Aceton im Soxleth extrahiert, filtriert und eingedampft. Die eingedampften Alkohol-und Acetonextrakte, evtl. noch ein Ätherextrakt, werden mit Alkohol im Soxleth extrahiert. Der Extrakt wird filtriert, auf Eis gestellt und von dem beim Abkühlen ausfallenden Niederschlag abdekantiert. Der so dargestellte Alkoholextrakt wird nunmehr mit 250/, Wasser des Alkoholvolumens versetzt, filtriert, das Filtrat eingedampft und mit Aceton im Soxleth extrahiert. Der filtrierte Acetonextrakt I wird aufgehoben. Die rote Substanz, welche beim Filtrieren mitgeht und sich im Spitzglas absetzt, wird aufgehoben (2 in der vorhergehenden Beschreibung). Der Rückstand von der Acetonextraktion i plus Filterrückstand wird mit 4o ccm Wasser aufgeschwemmt und mit i?o ccm Aceton versetzt, durchgeschüttelt, filtriert. Die wäßrig acetonige Lösung_wird eingedampft und der Abdampfrückstand mit Aceton im Soxleth gekocht. Die Acetonlösung II wird aufgehoben. Der Rückstand von der acetonwäßrigen und der Rückstand von der Acetonlösung II wird vereinigt, mit 40 ccm Wasser gut vermischt, mit z2o ccm Äther kräftig durchgeschüttelt und Ätherschicht von wäßriger Schicht getrennt. Acetonextrakt I und II werden auf Eis gestellt, vom Niederschlag abdekantiert; das Aceton wird verdampft, der Rückstand, mit wenigÄther heiß gelöst, in ein Spitzglas geschüttet; hierbei bleibt rote Substanz zurück, die in Wasser gelöst wird (3 in der vorhergehenden Beschreibung). Im Spitzglas fällt sofort rote Substanz aus, und von dieser wird abdekantiert. Der Äther wird nun so lange durch 24 Stunden verdünnt, wobei man hierzu zweckmäßig den Ätherextrakt I verwendet, bis keine rote Substanz mehr ausfällt. Von der roten Substanz wird abdekantiert. Der Äther wird nun neuerlich mit etwa io ccm Wasser so oft geschüttelt, bis das Wasser absolut farblos ist. Im Äther ist das wachstumfördernde, Blutung erzeugende und Blutgerinnungszeit verkürzende Lipoid gelöst. Das Wasser wird aufgehoben. Die roten Substanzen werden miteinander vereinigt und mit der dreifachen Menge Äther gut durchgeschüttelt. Die ätherische Lösung stellt gleichfalls die reine Lösung des wachstumfördernden Lipoids dar. Die wäßrigen Lösungen werden miteinander vereingt, erhitzt bis kein Äther mehr entweicht, filtriert, wobei am Filter und an der Flasche wachstumförderndes Lipoid zurückbleibt; das Filtrat wird mit der dreifachen Menge Äther geschüttelt, wobei wieder etwas Lipoid in Lösung geht; der Äther wird abgehoben, dasWasser abgedampft, mit Äther heiß extrahiert, wobei der Rest des Lipoids in Äther gelöst wird; der Rückstand wird in Alkohol gelöst, filtriert, das Filtrat eingedampft, neuerlich in Wasser gelöst und filtriert. Dieser Extrakt enhält die antiglykosourische blutungshemmende und Blutgerinnungszeit verlängernde Substanz.The growth-promoting, water-insoluble substance has, as also found, the ability to reduce blood clotting time and cause bleeding while the antiglycosmic water-soluble substance increases the coagulation time prolong and inhibit bleeding. Embodiment The organ (placenta, Ovaries, testes, prostate, thymus, membranes, corpus luteum, etc.) is at 3o to 40 'dried, extracted with alcohol in Soxleth for many days, the extract is filtered and evaporated. The evaporation residue from the alcohol extraction becomes extracted with acetone in Soxleth, filtered and evaporated. The evaporated alcohol and Acetone extracts, possibly an ether extract, are extracted with alcohol in a Soxleth. The extract is filtered, placed on ice and the one that precipitates out on cooling Decanted off precipitate. The alcohol extract shown in this way is now rated at 250 /, Added water of the alcohol volume, filtered, the filtrate evaporated and with Acetone extracted in Soxleth. The filtered acetone extract I is saved. the red substance, which goes with the filter and settles in the pointed glass canceled (2 in the previous description). The residue from the acetone extraction i plus filter residue is suspended with 40 cc of water and with 10 cc of acetone added, shaken, filtered. The aqueous acetone solution is evaporated and the evaporation residue is boiled with acetone in a Soxleth. The acetone solution II is canceled. The residue from the aqueous acetone and the residue from the acetone solution II is combined, mixed well with 40 cc of water, and shaken vigorously with 20 cc of ether and ether layer separated from aqueous layer. Acetone Extract I and II are on Ice placed, decanted from the precipitate; the acetone is evaporated, the residue, Dissolved hot with a little ether, poured into a pointed glass; this leaves a red substance which is dissolved in water (3 in the previous description). In a pointed glass red substance precipitates immediately and is decanted from it. The ether becomes now diluted for as long as 24 hours, using the ether extract for this purpose I used until no more red substance precipitates. From the red substance will decanted. The ether is now shaken again with about 10 ccm of water so often, until the water is absolutely colorless. In the ether there is the growth-promoting, bleeding dissolving lipoid producing and coagulation time shortening. The water is canceled. The red substances are combined with each other and with three times the amount of ether well shaken. The ethereal solution is also the pure solution of the growth-promoting lipoid. The aqueous solutions are combined with one another, heated until no more ether escapes, filtered, using the filter and the bottle growth-promoting lipoid remains; the filtrate is three times the amount Shaken ether, whereby some lipoid goes into solution again; the ether is lifted off, the water evaporated, hot extracted with ether, leaving the rest of the lipoid in ether is resolved; the residue is dissolved in alcohol, filtered, the filtrate is evaporated, redissolved in water and filtered. This extract contains the antiglycosouric anti-haemorrhagic and blood clotting time prolonging substance.

Claims

PATENT CLAIM: x. Further development of the process for the separation of lipoids from ovaries and similar organs, protected by patent q20 438, characterized in that the insoluble fractions which are produced when the alcoholic extract is extracted by acetone in the hot and cold and when the acetone solution is extracted by ether and with Further dilution of the ethereal suspension with ether precipitate further processing in such a way that on the one hand the fraction precipitated in the cold from the acetone solution with water and ether is shaken out at the same time and the fractions remaining in the aqueous and ethereal layer are separated from one another and on the other hand the evaporation residue of the acetone solution extracted with ether and the insoluble residue together with the substance precipitating in the cold from the acetone solution with water and a water-insoluble solvent shaken together, the water-soluble and water-insoluble substances separated from each other and getro be kneaded.

2. Methods of cleaning of the water-soluble fraction obtained according to claim i, characterized in that that the dried water-soluble part is extracted with ether, the ether-insoluble part Absorbs residue with alcohol, the alcohol-soluble part has recently dried up, finally taken up with water and filtered.