DE3000628A1

DE3000628A1 - Neue epoxybernsteinsaeurederivate

Info

Publication number: DE3000628A1
Application number: DE19803000628
Authority: DE
Inventors: Takashi Adachi; Kazunori Hanada; Shigeo Morimoto; Kiyoshi Oguma; Sadafumi Omura; Masaharu Tamai
Original assignee: Taisho Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Taisho Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1979-02-27
Filing date: 1980-01-09
Publication date: 1980-09-04
Also published as: US4382889A; GB2046730B; GB2046730A; JPH0154348B2; FR2450256B1; IT8047529A0; JPS55115878A; FR2450256A1; DE3000628C2; IT1188891B; IT8047529A1; US4333879A

Description

HOFFMANN · EITLE & PARTNER

DR. ING. E. HOFFMANN (1930-1976) - DIPL.-l NG. W. EITLE · D R. RER. NAT. K. HOFFMANN - DIPL.-ING. W. LEHN

DIPL.-ING. K. FDCHSiE · DR. RER. NAT. B. H ANS E N ARABELIASTRASSE 4 {STERNHAUS) ■ D-8000 MO NCHEN 81 · TELEFO N (08?) 911087 . TELEX 05-2951? (PATH E)

32 934 o/wa

-X-

TAISHO PHARMACEUTICAL CO., LTD., TOKYO/JAPAN

Neue Epoxybernsteinsaurederivate

Bekannt sind E-64 (US-PS 3 911 111), dessen Zwischenprodukte (Chemical Abstracts, ΣΓ7, 2O21O8y (1977), ibid., 82, 85238c (1977), ibid., 8T_, 202125b (1977), ibid. ΣΓ7, 68128z (1988)) und Epoxybernsteinsaurederivate gemäss DE-OS 28 09 036 und Chemical Abstracts £7, 68129a (1977).

Die erfindungsgemässen Verbindungen unterscheiden sich'von den bekannten Verbindungen durch ihre

030036/0550

Inhibierungsaktivität gegenüber kalziumaktivierter, neutraler Thiolprotease (nachfolgend abgekürzt als CANP), die im überschuss bei muskeldistrophischen Säugern vorkommt und durch gute Absorption und Verteilung im Gewebe nach der Verabreichung an Sauger, ohne dass die vaskuläre Permeabilität beschleunigt wird.

Die Erfindung betrifft neue Epoxybernsteinsäurederivate der allgemeinen Formel

H. CONHCHCON

\_R4 (D

worin bedeuten:

R Wasserstoff, ein Alkalimetall, Alkyl mit 1 bis 2 Kohlenstoffatomen, Cycloalkyl mit 5 bis 6 Kohlenstoffatomen oder Benzyl,

R Alkyl mit 3 bis 4 Kohlenstoffatomen oder Benzyl,

R Wasserstoff oder Methyl, und

4
R Alkyl mit 1 bis 10 Kohlenstoffatomen, Phenyl, Benzyl, Phenäthyi, Cycloalkyl mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen oder eine Gruppe der Formel

-CH

,6

030036/0550

worin R⁵ Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen oder Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, das durch Hydroxy, Methylmercapto, Phenyl, Hydroxyphenyl, Indolyl substituiert ist, ein gegebenenfalls geschütztes Carboxy, ein gegebenenfalls geschütztes Amino oder gegebenenfalls geschütztes Guanidino bedeutet, und

R Hydroxy, Alkylmetalloxy, Alkoxy mit 1 bis 2 Kohlenstoffatomen, Benzyloxy, Amino oder Dimethylamine oder

3 4
R und R zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen 5- bis 6-gliedrigen heterozyklischen Ring, der eine geschützte Carboxygruppe tragen kann, bilden.

Der Ausdruck "Alkyl" bedeutet sowohl geradkettige wie verzweigte Alkylgruppen und die Epoxybernsteinsäurederivate sind auf die Transisomere, bei denen zwei Carbonylgruppen am Oxyranring in trans-Stellung stehen, beschränkt.

Die Schutzgruppen in den geschützten Carboxy-, Amino- und Guanidinogruppen sind übliche auf dem Gebiet der Aminosäurechemie bekannte Schutzgruppen, wie Carbobenzoxy, Methylbenzyloxycarbonyl, Butoxycarbonyl, Tosyl, Benzyl, Methyl, Äthyl, Acetyl, Formyl, Nitro und dergleichen.

Bevorzugte Verbindungen der Erfindung sind Verbindungen der Formel (I), worin P. Wasserstoff oder Alkalimetall,

2 "Ϊ

R Alkyl mit 3 bis 4 Kohlenstoffatomen, R Wasserstoff

und R Alkyl mit 1 bis 10 Kohlenstoffatomen bedeutet. Besonders bevorzugte Verbindungen der Erfindung sind die

1 2

Verbindungen der Formel (I), worin R Wasserstoff, R

0 30036/0550 "⁷ ~

"4 Alkyl mit.4 Kohlenstoffatomen und R Isoamyl bedeuten.

Eine Verbindung der Formel (I) kann z.B. in folgender Weise hergestellt werden: Ein Epoxybernsteinsäuremonoester der Formel

COOR⁷

R⁸OOC

' "7 ·'■■■-"--"■ R

worin R Wasserstoff oder Alkalimetall bedeutet und R Alkyl mit 1 bis 2 Kohlenstoffatomen, Cycloalkyl mit 5 bis 6 Kohlenstoffatomen oder Benzyl darstellt, wird mit einem Chlorierungsmittel, wie Oxalylchlorid, Thionylchlorid und dergleichen, behandelt, unter Bildung des entsprechenden Säurechlorids. Zu dem Säurechlorid gibt man eine Aminosäureverbindung der Formel

H-NCHCON (III)

¹ 2 ^\ 4

R^ R*

2 3 4
worin R , R und R die vorher angegebenen Bedeutungen haben, tropfenweise unter Eiskühlung, wobei man die Ver-

18 bindung der Formel (I) erhält, in welcher R=R ist. Bei dieser Amidierung kann die Aminosäureverbindung zusammen mit einer Base, wie Triethylamin, Pyridin, Methylmorpholin oder dergleichen verwendet werden. Wird die Verbindung der Formel (III) in Form eines Säureadditionssalzes verwendet, so kann man sie für die Umsetzung einsetzen, nachdem "man die Säure mit einer Base, wie einem

03,0036/055 0

Alkalihydroxid, Triäthylamin, Pyridin oder Methylmorpholin entfernt hat oder indem man sie in Gegenwart einer der erwähnten Basen umsetzt.

Die Verbindung der Formel (II) / in welcher R Wasserstoff bedeutet, kann ebenfalls direkt in die Verbindung der For-

1 8

mel (I), in welcher R=R ist, ohne Chlorierung überführt werden. In diesem Fall kann man die Verbindung der

2 7

Formel R , in welcher R Wasserstoff bedeutet, mit einer Verbindung der Formel (III) in Gegenwart eines Kondensierungsmittels, wie N,N¹ -Dicyclohexylcarbodiimid, 1-Jtthyl-3-(3-dimethylaminopropyl)-carbodiimid (nachfolgend als W.S.C. abgekürzt) und dergleichen umsetzen. Bei dieser Umsetzung ist die Zugabe einer N-Hydroxyverbindung, wie N-Hydroxybernsteinsäureimid, 1-Hydroxybenzotriazol und dergleichen, beovrzugt.

Alternativ kann die Verbindung der Formel (I), in welcher R¹ R⁸ bedeutet, erhalte:
bindung der Formel (IV)

R R bedeutet, erhalten werden durch Amidierung der Ver-

H_% GONHCHCOOH

2 8

in welcher R und R die vorher angegebenen Bedeutungen haben, mit einem Amin der Formel

NH (V)

030036/0550

in welcher R und R die vorher angegebenen Bedeutungen haben. Diese Amidierung kann durchgeführt werden in gleicher Weise wie die Umsetzung der Verbindung der Formel (II), in welcher R Wasserstoff bedeutet, mit der Verbindung der Formel (III) .-

Alternativ kann die Verbindung der Formel (I), in welcher

1 8
R = R ist, hergestellt werden durch Esteraustausch der Verbindung der Formel (I), in welcher R ein anderer Ester innerhalb es ümfangs von R ist. Dieser Esteraustausch kann in Gegenwart eines Alkohols durchgeführt werden, weleher die gewünschte Estergruppe in R bildet, wie Methanol, Äthanol, Propanol, Isopropanol, Cyclohexanol und dergleichen, und in Gegenwart eines Katalysators, wie Schwefelsäure, einem Alkalialkoholat oder einem Alkalihydroxid, wie Natriumhydroxid oder Kaliumhydroxid.

Die Verbindung der Formel (I), in welcher R ein Alkalimetall bedeutet, wird erhalten, indem man dieVerbindung

1 8

der Formel (I), in welcher R = R ist, mit einem Alkalihydroxid, wie Natriumhydroxid oder Kaliumhydroxid, umsetzt und dann, sofern erforderlich, anschliessend ein organisches Lösungsmittel, wie Äthanol, Aceton, Äthyläther, Petroläther und dergleichen, zugibt.

Die Verbindung der Formel (I), in welcher R Wasserstoff bedeutet, kann hergestellt werden, indem man die Verbindung der Formel (I), in welcher R ein Alkalimetall bedeutet, mit einer anorganischen Säure, wie Chlorwasserstoff säure oder Schwefelsäure,oder einer organischen Säure, wie Ameisensäure oder Essigsäure, ansäuert und dann mit einem geeigneten organischen Lösungsmittel, wie Äthylacetat,

- 10 -

03003670550

Äthyläther, Benzol oder Chloroform extrahiert.

Falls die Verbindung der Formel (I) ein durch Carbobenzoxy geschütztes Amino, durch eine Nitrogruppe geschütztes Guanidino oder eine Carboxygruppe, die durch Benzyl gescgützt ist, hat, können solche Schutzgruppen durch katalytisch^ Reduktion unter Verwendung von Palladium auf Kohle oder Palladiumschwarz entfernt werden.

Die Verbindungen der Formeln (II) und (IV) kann man gemäss dem Verfahren der DE-OS 2 8 09 036, gegebenenfalls mit gewissen Modifizierungen, herstellen.

Die Verbindung der Formel (III) wird wie folgt hergestellt: Die Verbindung der Formel (IV)

R⁹NHCHCOOH (IV)

R²

2 9

in welcher R die vorher angegebene Bedeutung hat und R eine Schutzgruppe ist, wird mit der Verbindung der Formel (V) umgesetzt und anschliessend werden die Schutzgruppen unter Erhalt der gewünschten Verbindung entfernt. Beispiele für Schutzgruppen sind die üblichen bei der Peptidsynthese verwendete, wie t-Butoxycarbonyl, Carbobenzoxy oder Methylbenzyloxycarbonyl. Die Amidierung der Verbindung der Formel (VI) mit der Verbindung der Formel (V) kann in gleicher Weise durchgeführt werden wie die Umsetzung der Formel (II), in welcher R Wasserstoff bedeutet, mit der Verbindung der Formel (III). Die Entfernung der Schutzgruppe

- 11 -

030036/0550

kann in in der Peptidchemie üblichen Weise vorgenommen werden.

Die Verbindungen der Formeln (V) und (VI) sind in den meisten Fällen im Handel erhältlich.

Die erfindungsgemässen Verbindungen haben eine ausgezeichnete Inhibierungsaktivität gegenüber CANP die im Überschuss in den Muskeln von muskeldistrophischen Säugern vorkommt und haben eine gute Absorption und Verteilung im Gewebe nach der Verabreichung an Säuger im Vergleich zu den Epoxybernsteinsäurederivaten gemäss DE-OS 28 09 036 und Chemical Abstracts, 87, 68129a (1977). Die muskeldistrophische Inhibierungsaktivität wurde nach dem Verfahren von Ishiura et al (J. of Biochem., i54, 225 (1978)) untersucht unter Verwendung von CANP, das aus den Muskeln von unter angeborener Muskeldistrophie leidenden Hühnern bereitet war. Die Werte für eine 50 %-ige Inhibierung, ausgedrückt durch die Molverhältnisse des Enzyms durch IDc₀ (Mol/Mol) werden in Tabelle 1 gezeigt.

Die erfindungsgemässen Verbindungen werden von Säugern, wie Ratten oder Kaninchen, subkutan absorbiert und mit den Epoxybernsteinsäurederivaten gemäss der vorerwähnten DE-OS und Chemical Abstracts ΕΓ7 68129a (1977) verglichen. Um die Absorption festzustellen, wurden diese Verbindungen subkutan an Ratten in einer Menge von 50 mg/kg verabreicht und die Konzentration der Versuchsverbindung in Rattenplasma wurde 1 Stunde nach der Verabreichung gemessen und wird in Tabelle 1 gezeigt.

* - 12 -

030036/0550

Tabelle 1

Verbindung Beispiel Nr.	CANP-Inhibierungsak tivität ID₅₀(MoIZMoI)	Konzentration in Rattenplasma ( lig/ml)
12	65	1,3
15	35	20
16	90	12
19	23	1,5
30	100	2,0
36	200	1,8
42	120	1,1
43	100	7,0
45	64	15
A	5400	unter 1,0
B	410	unter 1,0
C	580	unter 1,0
D	574	unter 1,0
E	4600	unter 1,0

Anmerkung: A: fithylhydrogenepoxysuccinat B: Benzylhydrogenepoxysuccinat C: N-(3-Äthoxy-carbonyloxiran-2-carbonyl)-L·-

leucin-benzylester D: N- (3-Carboxyoxiran-2-carbonyl)-L-phenyl-

alanin-benzylester E: N-(3-Carboxyoxiran-2-carbonyl)-L-leucin.

- 13 -

030036/0550-

Die erfindungsgemässen Verbindungen inhibieren auch wirksam und spezifisch Thiolprotease, wie Papain, Bromelaine und einige Arten von Cathepsin, in denen einige Sulfhydrylgruppen für deren Aktivität wesentlich sind. Andererseits haben sie keine Inhibierungsaktivität gegen die Proteolyse von Casein durch Trypsin, Chymotrypsin, Pepsin, einer Säureprotease von Paecilomyces varioti und Nagase (Handelsnamen der Nagase Industry), gegen Esteolyse von Benzoylaganinäthylester durch Kallikrein oder gegen Fibrinolyse durch Humanplasmin.

Die Papaininhibierungsaktivität der erfindungsgemässen Verbindungen wurde nach dem Verfahren von K. Hanada et al (Argric. Biol. Chem., _42^ Nr. 3, 523 (1978)) unter Verwendung von Papain (8Oug/ml , Sigma Chemical Co., 2 χ cry.) untersucht. Die Inhibierungsaktivität für eine 50 %-ige Inhibierung wurde als ID₅₀ ausgedrückt und wird in Tabelle 2 gezeigt.

, - 14

0 30036/055 0

Tabelle 2

Verbin dung Bsp.Nr.	ID₅₀(^g)	Verbin dung Bsp.Nr.	ID₅₀(^g)	Verbin dung Bsp.Nr.	ID₅₀(^g)
1	0,439	10	0,510	19	0,123
2	0,227	11	0,184	20	0,255
3	1,10	12	0,260	21	0,169
4	0,417	13	0,255	22	8,28
5	0,284	14	0,187	23	0,221
6	0,410	15	0,112	24	0,219
7	0,410	16	0,123	25	0,223
8	0,446	17	0,255	26	0,139
9	0,313	18	29,07	27	0,216
28	0,156	35	0,212	42	0,595
29	0,35	36	0,595	43	0,195
30	0,391	37	2,50	44	0,250
31	0,375	38	0,305	45	0,236
32	0,227	39	0,408	46	0,105
33	0,255	40	0,481	47	0,260
34	0,298	41	0,272	48	0,215

Die erfindungsgemässen Verbindungen zeigen keine Nebenwirkungen, wie eine Beschleunigung der Vaskularpermeabilität, und unterscheiden sich darin von E-64 und dessen Zwi schenprodukten.

Als Arzneimittel können die erfindungsgemässen Verbindungen für orale, parenterale und rektale Verabreichung formuliert

- 15 -

030036/0550

werden, z.B. als Tabletten, Pulver, Pastillen, Dragees, Kapseln, Lösungen, Suspensionen, sterile injizierbare Zubereitungen, Suppositorien und dergleichen. Als Träger kann entweder ein Feststoff oder eine Flüssigkeit dienen. Beispiele für feste Träger sind Lactose, Terra alba, Sucrose, Talkum, Gelatine, Agar, Pectin, Acacia, Magnesiumstearat, Stearinsäure und dergleichen. Beispiele für flüssige Träger sind Sirup, Erdnussöl, Olivenöl, Wasser und dergleichen. Das Verdünnungsmittel oder der Träger können auch verzögernde Substanzen enthalten, wie Glyzerxnmonostearat oder Glyzerindistearat, gegebenenfalls zusammen mit einem Wachs.

Die erfindungsgemässen Verbindungen können zum Inhibieren von CANP, dessen Überschuss im Muskel von unter Muskeldistrophie leidenden Säugern durch Verabreichung von etwa 5 bis 40 mg/kg/Tag in Einzeldosierungen oder in zwei bis vier unterteilten Dosen oral oder durch Injektionen verabreicht werden.

Die Toxizität der erfindungsgemässen Verbindungen ist ausserordentlich niedrig. Sie zeigen bei oraler Verabreichung praktisch keine akute Toxizität bei Mäusen bei Dosierungen unterhalb 2 g/kg Körpergewicht. Weiterhin wird bei oraler Verabreichung von 1 g/kg/Tag während 30 Tagen bei Versuchstieren keine Nebenwirkung beobachtet.

Die nachfolgenden Beispiele beschreiben die Erfindung, ohne sie in irgendeiner Weise einzuschränken.

- 16

0 3 0 0 3 6/0550

Beispiel 1

In 30 ml Tetrahydrofuran wurden 1,09 g N-(DL-3-trans-Äthoxycarbonyloxiran-2-carbonyl)-L-leucin, 0,43 g Hexylamin, 0,60 g 1-Hydroxybenzotriazol und 0,44 g N-Methylmorpholin gelöst. Zu der Lösung wurde nach und nach 0,84 g W.S.C.-Hydrochlorid unter Eiskühlung und Rühren gegeben. Die Mischung wurde 2 Stunden unter Aufrechterhaltung der Temperatur und dann weitere 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die Lösung wurde konzentriert und zu dem Rückstand wurden 80 ml Wasser und 80 ml Äthylacetat gegeben. Die Mischung wurde geschüttelt und die Äthylacetatschicht wurde abgetrennt. Die wässrige Schicht wurde nich zweimal mit Äthylacetat extrahiert. Die Extrakte wurden mit der Äthylacetatschicht vereint, nacheinander mit 10 %-iger wässriger Chlorwasserstoffsäurelösung, einer gesättigten Natriumbicarbonatlösung und einer gesättigten NAtriumchloridlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und zur Trockne konzentriert. Der erhaltene Rückstand wurde durch Kieselgelchromatografie (Chloroform: Aceton = 40:1) und Umkristallisieren aus Chloroform/Äthyläther gereinigt, wobei man 0,97 g N-/N'-(DL-3-trans-Äthoxycarbonyloxiran-2-carbonyl)-L-leucyl7-cyclohexylamin, F: 168 bis 169°C, erhielt.

Beispiel 2

Arbeitet man wie in Beispiel 1 aber verwendet 1,09 g

- 17 -

03OQ36/0550

N- (DL-3-trjans_-Äthoxycarbonyloxiran-2-carbonyl) -L-leucin und 0,69 g n-Decylamin, so erhält man 1,0g N-/N¹-(DL-3-trans-Äthoxycarbonyloxiran-2-carbonyl)-L-leucyl7-n-decylamin in Form eines viskosen Öls.

max

(cm"¹):

NMR(60 MHz,CDCl₃)6 =

3270 (Amin), 1750 (Ester), 1635, 1560 (Amid), 897 (Epoxy)

0,92 (d, J=5Hz, 6H), 1,25 (b.s.,22H), 1,6 (b.s., 3H), 3,18 (m, 2H), 3,42 (d, J=2Hz, 0,5H), 3,48 (d, J=2Hz, 0,5H), 3,63 (d, J=2Hz, 1H), 4,19 (q, J=7Hz, 2H), 4,0-4,7 (m, 1H), 6,2-6,6 (br., 1H), 6,6-7,1 (br. 1H).

Massenspektrum m/e =412 (M )

Beispiel 3

Arbeitet man gemäss Beispiel 1 unter Verwendung von 1,09 g'N-(DL-3-trans-Äthoxycarbonyloxiran-2-carbonyl)-L-leucin und 0,31 g Pyrrolidin, so erhält man 0,89 g öliges N-^N¹-(DL-3-trans-Äthoxycarbonyloxiran-2-carbonyl)-L-leucy!/-pyrrolidin.

,rein , -1, . max ^Ultl ' '

3250 (Amin), 1740 (Ester), 1680, 1620, 1540 (Amid), 895 (Epoxy)

- 18 -

03Q036/0550

NMR(6O MHz, CDCl₃) ($ = 0,94 (d, J=5Hz, 3H), 0,96 (d, J=5Hz,

3H), 1,28 (t, J=7Hz, 3H), 1,20-2,40 (m, 7H), 3,10-3,60 (m, 5H), 3,69 (d, J=2Hz, 1H), 4,20 (q, J=7Hz, 2H), 4,50-5,00 (m, 1H), 6,80-7,50 (br., 1H)

Massenspektrum ifr/e = 326 (M )

Beispiel 4

Arbeitet man gemäss Beispiel 1 und verwendet 1,09 g von N-(DL-3-trans-Äthoxycarbonyloxiran-2-carbonyl)-L-leucin und 0,37 g Piperidin, so erhält man 0,7 g eines öligen N-^N¹-(DL-3-trans-Äthoxycarbonyloxiran-2-carbonyl)-L-leucyl/-piperidins.

IR0 ^rein(cm"¹): 3250 (Amin), 1735 (Ester),

IU el X

1620, 1540 (Amid), 895 (Epoxy)

NMR(60 MIIz, CDCl₃) ό = 0,93 (t, 5Hz, 6H), 1,29 (t, J=7Hz,

3H), 1,60 (b.s., 9H), 3,45 (b.s., 4H), 4,17 (q, J=7Hz, 2H), 4,65-5,2 (m, 1H), •6,8-7,4 (br., 1H)

Massenspektrum m/e = 340 (M⁺)

- 19 -r

030Q36/055Q

Beispiele 5 bis 9

Arbeitet man gemäss Beispiel 1 unter Verwendung der entsprechenden Ausgangsverbindungen, so erhält man die in Tabelle 3 angegebenen Verbindungen der Formel (I)

Tabelle 3

R¹OOC

, CONHCHCON

.R"

(D

Beispiel	R¹	₃CH₂-	R²	R³ 4	^CH 2^CHN_CH	F (⁰C)
5	CH	Il	^CH3\ JTCHCH₉- ^CH3		2-©	148-149
6 '		Il	Il		2^CH3	146,5- 147,5
7		ti	Il	-NHCH₂CH	108-110
8		Il	ti	-NHCH₂CH	131-132
9		Il	-NHCH₂CH	122-124

- 20 -

030Q36/0550

Beispiel 1O

In 10 ml Tetrahydrofuran wurden 0,36 g DL-trans-Benzylhydrogenoxiran-2,3-dicarboxylat, O,35 g N-L-Leucyl-N-methylanilin, 0,23 g 1-Hydroxybenzotriazol und 0,17 g N-Methylmorpholin gelöst. Zu der Lösung wurden nach und nach 0,33 g W.S.C.-Hydrochlorid unter Eiskühlung und Rühren gegeben. Die Mischung wurde 2 Stunden bei dieser Temperatur und weitere 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Von der Lösung wurde nahezu alles Tetrahydrofuran abdestilliert und der Rückstand wurde in 50 ml Wasser suspendiert und dreimal mit 50 ml Äthylacetat extrahiert. Die Extrakte wurden vereint, nacheinander mit einer 5 %-igen wässrigen Chlorwasserstoffsäurelösung, einer gesätti-ten Natriumbicarbonatlösung und einer gesättigten wässrigen Natriumchloridlösung gewaschen, getrocknet und zur Trockne konzentriert. Das entstandene Öl wurde durch Kieselgelchromatografie (Chloroform:Aceton = 40:1) gereinigt, wobei man 0,57 g öliges N-/N'-(DL-3-trans-Benzyloxycarbonyloxiran-2-carbonyl)-L-leucylJ-L-niethylanilin erhielt.

NMR(60MHz, CDCl,) 6 =

3265 (Amin), 1753 (Ester), 1650, 1530 (Amid), 893 (Epoxy)

0,38 (d, J=5Hz, 3H), 0,70 (d, J=5Hz, 3H), 1,10-1,80 (m, 3H), 3,16 (d, J=2Hz, 0,5H), 3,18 (s, 3H), 3,42 (d, J=2IIs, 0,5H), 3,58 (d, J=2Hz, 1H), 4,20-4,80 (m, 1H), 4,95 (s, 1H), 5,08 (s, 1H), 6,40-6,90 (br., 1H), 6,90-7,70 (m, 10H)

030036/0550

- 21 -

Massenspektrum m/e = 424 (M )

Beispiel 11

Arbeitet man gemäss Beispiel 10 und verwendet 1,4 g DL-trans-Benzylhydrogenoxiran-2,3-dicarboxylat und 0,99 g N-L--Leucyldimethylamin, so erhält man 1,68 g öliges N-^N¹-(DL-3~trans-Benzyloxycarbonyloxiran-2-carbonyl)-L-leucyiy-dimethylainin.

IR\? ^re:i:ⁿ(cm~¹) : 3260 (Amin) , 1753 (Ester),

ItI 3.x

1690, 1630, 1540 (Amid), 895 (Epoxy)

NMR(60 MHz, CDCl₃)C = 0,92 (d, J=5Hz, 3H), 0,99 (d, J=5Hz,

3H), 1,10-1,80 (m, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,04 (s, 3H), 3,49 (d, J=2Hz, 0,5H), 3,56 (d, J=2Hz, 0,5 H), 3,66 (d, J=2Hz), 4,70-5,00 (m, 1H), 5,14 (s, 2H), 6,50-7,10 (br., 1H), 7,27 (s, 5H)

Massenspektrum m/e = 362 (M )

Beispiel 12

Arbeitet man gemäss Beispiel 10 und verwendet 2,9 g DL-trans-Benzylhydrogenoxiran-2,3-dicarboxylat und 2,3 g

- 22 -

0 30036/0550

N-L-Isoleucyl-N-methylbenzylamin, so erhält man 2,8 g öliges N-/N'-(DL-3-trans-Benzyloxycarbonyloxiran-2-earbonyl) L-isoleucylZ-N-methylbenzylamin.

IR\>^rein(cm"¹) : 3255 (Amin), 1750 (Ester), max

1685, 1630, 1535 (Amid), 897 (Epoxy)

NMR(6OMHz, CDCl₃) 6 = 0,89 (b.s., 6H), 1,0-2,0 (m, 3H),

2,95 (s, 3H), 3,47 (d, J=2Hz, 0,5H), 3,52 (d, J=2Hz, 0,5H), 3,68 (d, J=2Hz, 1H), 4,1-4,95 (m, 3H), 5,10 (2, 2H), 6,5-7,4 (m, 11H)

Massenspektrum m/e = 438 (M )

Beispiel 13

0,2 g N-/N'-(DL-3-trans-ÄthoxycarbonylQxiran-2-carbonyl)-L-leucylZ-cyclohexylamin wurden in einer Mischung aus 1 ml Cyclohexylalkohol und 5 ml Benzol gelöst. Nach Zugabe eines Tropfens konzentrierter Schwefelsäure wurde die Lösung 15 Stunden unter Rückfluss behandelt. Anschliessend wurden 50 ml Benzol zu der Lösung gegeben. Die Mischung wurde hintereinander mit einer gesättigten wässrigen Natriumbicarbonatlösung und einer gesättigten, wässrigen Natriumchloridlösung gewaschen und zur Trockne konzentriert. Der Rückstand wurde durch Kieselgelchromatografie (Chloroform: Aceton = 70:1) und Umkristallisieren aus Chloroform/Äthyläther gereinigt, wobei man 0,16 g N-/N'-(DL-3-trans-Cyclohexyloxycarbonyloxiran-2-carbonyl)-L-leucylZ-cyclohexylamin, F 185,5 bis 186,5°C, erhielt.

0 30036/0550 "²³ "

Beispiel 14

Arbeitet man nach dem Verfahren von Beispiel 13 unter Verwendung von 0,2 g N-/N'-(DL-3-trans-Äthoxycarbonyloxiran-2-carbonyl)-L-leucyl/-cyclopentylamin und 1 ml Cyclopentylalkohol, so erhält man 0,15 g N-^N¹-(DL-3-trans-Cyclopentyloxycarbonyl)-L-leucylZ-cyclopentylamin, F 158 bis 16O°C.

Beispiel 15

0,34 g N-/N¹- (DL-3-trans_-Äthoxycarbonyloxiran-2-carbonyl)-L-leucyl7~isopropylamin wurden in 5 ml Äthanol gelöst und anschliessend wurden unter Eiskühlung und Rühren 0,056 g Kaliumhydroxid in 2 ml Äthanol zugegeben. Die Mischung wurde' 2 Stunden unter Eiskühlung gerührt. Zu der Mischung wurden 50 mg Äthyläther gegeben und der Niederschlag wurde durch Filtrieren gesammelt, wobei man 0,23 g N-^N¹-(DL-3-trans-Carboxyoxiran-2-carbonyl)-L-leucyl7-isopropylamin-kaliumsalz, F 174 bis 175°C (unter Zersetzung) erhielt.

Beispiel 16

Arbeitet man nach dem Verfahren von Beispiel 15 und verwendet 0,37 g N-^N'-(DL-3-trans_-Äthoxycarbonyloxiran-2-carbonyl)-L-leucyl/-phenäthylamin und 0,056 g Kaliumhydroxid,

- 24 -

030036/0550

so erhält man 0,23 g N-/N'-(DL-3-trans-Carboxyoxiran-2-carbonyl)-L-leucyl7-phenäthylamin-kaliumsalz, F 163 bis 165°C (unter Zersetzung).

Beispiel 17

Zu 30 ml einer Benzollösung, enthaltend 1,5 g L-Leucyl-L-leucin-benzylester und 0,55 g Triäthylamin, wurden unter Eiskühlung und Rühren im Laufe von 30 Minuten tropfenweise 20 ml einer Benzollösung, enthaltend 1,2 g Epoxybernsteinsäuremonobenzylesterchlorid, gegeben. Die Mischung wurde 2 Stunden unter Eiskühlung und eine weitere Stunde bei Raumtemperatur gerührt. Der gebildete Niederschlag wurde abfiltriert. Das Filtrat wurde nacheinander mit 5 %-iger wässriger Chlorwasserstoffsäure, einer gesättigten Natriumbicarbonatlosung und einer gesättigten wässrigen Natriumchloridlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und zur Trockne konzentriert. Der Rückstand wurde durch Kieselgelchromatografie (Äthylacetat: n-Hexan = 1:2) und Umkristallisieren aus Äthyläther/Petroläther gereinigt, wobei man 1,8 g N-(DL-3-trans-Benzyloxycarbonyloxiran-2-carbonyl)-L-leucyl-L-leucin-benzylester, F 91 bis 93°C, erhielt.

Beispiel 18

Arbeitet man nach dem Verfahren gemäss Beispiel 17 unter

- 25 -

030036/0550

Verwendung von 0,46 g L-Phenylalanyl-L-phenylalaninmethylester und 0,26 g Epoxybernsteinsäuremonoäthylesterchlorid, so erhält man 0,27 gN-(DL-3-trans-Äthoxycarbonyloxiran-2-carbonyl)-L-phenylalanyl-L-phenylalanin-methylester, F 142 bis 143°C.

Beispiel 19

Arbeitet man nach dem Verfahren gemäss Beispiel 17 unter Verwendung von 1,3 g L-Leucyl-L-prolin-methylester und 1,4 g Epoxybernsteinsäuremonobenzylesterchlorid, so erhält man 1,32 g öligen N-(DL-3-txans_-Benzyloxycarbonyloxiran-2-carbonyl)-L-leucyl-L-prolin-methylester.

IR\)^re^ⁿ(cm"¹) : 3300 (Amin) , 1750 (Ester), 1690,

IUaX

1630, 1550 (Amid), 900 (Epoxy)

NMR(60MHz, CDCl₃) 6 = 0,96 (d, J=5Hz, 6H), 1,10-2,40

(m, 7H), 3,30-3,90 (m, 4H), 3,64

(s, 3H), 4,10-4,90 (m, 2H), 5,11

(s, 2H), 6,30-7,00 (br., 1H), 7,27 (s, 5H)

Massenspektrum m/e = 446 (M⁺)

, -

030036/0550

Beispiel 20

Zu einer Lösung aus 1,5 g DL-transBenzylhydrogenoxiran-2,3-dicarboxylat, 1,75 g L-Leucin-L-glutamsäure-dimethylester, 0,88g 1-Hydroxybenzotriazol und 0,66 g N-Methylmorpholin in 50 ml Tetrahydrofuran wurden unter Eiskühlung und Rühren nach und nach 1,24 g W.S.C.-Hydrochlorid gegeben. Die Mischung wurde 1 Stunde unter Eiskühlung und weitere 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Tetrahydrofuran wurde weitgehend unter vermindertem Druck abdestilliert. 80 ml Wasser wurden zu dem Rückstand gegeben und die Mischung wurde zweimal mit 80 ml Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetatextrakte wurden vereint, nacheinander mit 5 %-iger wässriger Chlorwasserstoffsäure, einer gesättigten NAtriumbicarbonatlösung und einer gesättigten wässrigen Natriumchloridlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und zur Trockne konzentriert. Der Rückstand wurde durch Kieselgelchromatografie (Chloroform: Aceton = 70:1) und Umkristallisieren aus Chloroform/ Äthyläther gereinigt, wobei man 1,65 g N-(DL-3-trans-Benzyloxycarbonyloxiran-2-carbonyl)-L-leucyl-l-glutamsäuredimethylester, F 126 bis 128°C, erhielt.

Beispiel 21

Arbeitet man nach dem Verfahren gemä-s Beispiel 20 unter Verwendung von 1,3 g DL-trans-Benzylhydrogenoxiran-2,3-dicarboxyla't und 1,3 g L-Leucyl-L-isoleucin-methylester, so erhält man 2,2 g öligen N-(DL-3-trans-Benzyloxycarbonyloxiran-2-carbonyl)-L-leucyl-L-isoleucin-methylester.

030036/0550

BAD ORIGINAL

^rein(cm~¹): 3300 (Amin), 1740 (Ester), 1660,

ITl 3.x

1550 (Amid), 900 )Epoxy)

NMR(60 MHz, CDCl₃) 6 =0,92 (b.s., 12H), 1,3-2,0 (m, 6H),

3,45 (d, J=2Hz, 0,5 H), 3,49 (d, J=2Hz, 0,5 H), 3,63 (d, J=2Hz, 1H), 3,66 (s, 3H), 4,2-4,7 (m, 2H), 5,13 (s, 2H), 6,3-6,7 (br., 2H), 7,26 (s, 5H)

Massenspektrum m/e = 462 (M )

Beispiel 22

Arbeitet man nach dem Verfahren gemäss Beispiel 20 unter Verwendung von 0,96 g DL-trans-Benzylhydrogenoxiran-2,3-dicarboxylat und 1,12 g D-Leucyl-L-leucin-methylester, so erhält man 1,3 g N-(DL-3-trans-Benzyloxycarbonyloxiran-2-carbonyl)-D-leucyl-L-leucin-methylester als viskoses öl.

_mav ,_... '): 3260 (Amin), 1740 (Ester), 1670,

IUaX

1645, 1553 (Amid), 897 (Epoxy)

NMR(60MHz, CDCl₃)6 = 0,91 (d, J=&Hz, 12H), 1,2-2,0 (m,

6H), 3,46 (d, J=2Hz, 0,5H), 3,59 (s, 3H), 3,60 (d, J=2Hz, 0,5H), 3,66 (d, J=2Hz, 1H), 4,20-4,90 (m, 2H), 5,12 Cs, 2H), 6,30-6,70 (br., 2H), 7,24 (s, 5H)

Massenspektrüm m/e = 462 (M ) _r

- 28 -

030036/0550

Beispiel 23

Arbeitet man nach dem Verfahren gemäss Beispiel 20 unter Verwendung von 0,95 g DL-trans-Benzylhydrogenoxiran-2,3 dicarboxylat und 1,1 g L-Leucyl-D-leucin-methylester, so erhält man 1,38 g N-(DL-3-trans-Benzyloxycarbonyloxiran-2· carbonyl)-L-leucyl-D-leucin-methylester als viskoses öl.

IR \> ^rein(cm~¹) : 3270 (Amin) , 1740 (Ester), 1670. max

1645, 1545 (Amid), 895 (Epoxy)

NMR(6OMHz, CDCl₃) d = 0,90 (d, J=5Hz, 6H), 1,30-1,90

(m, 3H), 3,45 (d, J=2Hz, 0,5 H), 3,55-3,70 (m, 1m5H), 3,62 (s, 3H), 4,10-4,80 (m_r 2H), 5,12 (s, 2H), 6,30-6,70 (br., 2H), 7,22 (s, 5H)

Massenspektrum m/e =462 (M )

Beispiel 24

0,5 g N-(DL-3-trans-Benzyloxycarbonyloxiran-2-carbonyl)-L-leucyl-D-leucin-methylester, erhalten gemäss Beispiel 23, wurden durch Kieselgelchromatografie (1,5 cm χ 40 cm, Chloroform) adsorbiert. 5 g des Kieselgels wurden jeweils in ein Reagenzglas gegeben und durch Dünnschichtchromatografie (Kieselgel, Chloroform:Aceton = 40:1) behandelt; wobei man zwei Fraktionen erhielt und die eine die Verbindung mit dem höheren Rf-Wert und die andere die Verbindung mit

- 29 030036/0550

einem niedrigeren Rf-Wert enthielt.

Die Fraktion mit der Verbindung, die den höheren Rf-Wert aufwies,wurde konzentriert und der Rückstand wurde aus Xthyläther/Petroläther umkristallisiert, wobei man 0,15 g N-(D-3-trans-Benzyloxycarbonyloxiran-2-carbonyl)-L-leucyl-D-leucin-methylester, F 95 bis 97°C, Z⁵L/^⁸ =-51,1 (c=1, Äthanol) erhielt-.

Beispiel 25

Die Fraktion mit dem niedrigern Rf-Wert, die aus dem Kieselgel in Beispiel 2'4 gewonnen wurde, wurde konzentriert und der Rückstand würde aus Äthyläther/Petroläther umkristallisiert, wobei man 0,14 g N-(L-3-trans-Benzyloxycarbony!oxiran-2-carbonyl)-L-leucyl-D-leucin-methylester erhielt. F 72 bis 73°C. L^il^ =+4 4,0 (C=I, Äthanol).

Beispiele 26 bis 42

Arbeitet man nach dem Verfahren gemäss Beispiel 20 unter Verwendung der entsprechenden Ausgangsverbindungen, so erhält man die in Tabelle 4 aufgezählten Verbindungen der Formel (Ι),

- 30

0 3O0 36/055Q

Tabelle

H R¹OOC-jconhchcon/

/ l2 V-4

Beispiel

F (	°C)
184	.-185
141	-142
130	-132
102	-103
146	-149
118	-120
120	-122

26

27 28

29 30 31 32 33

34 35

36

37 38

(OVCH₂-

CH₃-

(D-Isomer)

CO)-CH₂-

-CH₃. SV - Arg

-Met-OCH,

-Thr-OCH.

-LeU-OCH₃

-LeU-OCH₃ (D-Isomer)

-Leu-NIU

-Leu-OCH>

-Phe-OCH.

-Trp-OCH₃

106 -108

186 -187 109^5-110/5

147 -148 113 -114

173 -175

30036/Q55Q

- 31 -

Fortsetzung Tabelle 4

Bei spiel	R¹	R²	-Tyr-OCH₃	F (⁰C)
39	@~^CH2~	CH C H >^CH~ ^2 5	-GAy-OC₃H₅	113 --115
40	Il	It	-VaJl-OCH₃	167_,5~168_,5
41	It	It	-A£a-0CH₃	153 -154
42		CH3>^CH-	192 -195

In dieser Tabelle bedeutet Arg(NO„) die N -Nitro-L-arginylgruppe, Met die Methionylgruppe, Thr die Threonylgruppe, Om(z) die J-Carboxybenzoxy-L-ornithylgruppe, Phe die Phenylalanylgruppe, Leu die Leucylgruppe, Trp die Trypsinylgruppe, Tyr die Tyroxinylgruppe, GIy die Glycylgruppe, VaI die Valylgruppe, Aöa die Alanylgruppe. Die nicht als D-Isomere beschriebenen Verbindungen sind L-Isomere.

Beispiel 43

In einer Mischung aus 8 ml Methanol, 2 ml Essigsäure und 1 ml Wasser wurden 0,1 g des gemäss Beispiel 26 erhaltenen N-(DL-3-transBenzyloxycarbonyloxiran-2-carbonyl)-L-leucyl-N -nitro-L-arginin-methy!esters gelöst. Nach Zugabe von 50 mg

32 -

030036/0550

5 %-igem Palladium auf Kohle wurde die Mischung 4 Stunden bei Raumtemperatur in einem schwachen Wasserstoffstrom gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde filtriert und das FiI-trat konzentriert. Der Rückstand wurde säulenchromatografisch über Sephadex LH-20 (Methanol) behandelt und dann aus Methanol/Chloroform umkristallisiert, wobei man 0,068 g N-(DL-3-trans-Carboxyoxiran-2-carbonyl)-L-leucyl-L-arginin-methylester, F 160 bis 165 C (unter Zersetzung), erhielt.

Beispiel 44

Arbeitet man nach dem Verfahren gemäss Beispiel 43 und verwendet 0,31 g des gemäss Beispiel 30 erhaltenen N-(DL-3-trans-Benzyloxycarbony!oxiran-2-carbonyl)-L-leucyl-6 -carbobenzoxy-L-ornithin-benzylesters und katalysiert das erhaltene Produkt aus Wasser/Aceton, so erhält man 0,1 g N-(DL-3-trans-Carboxyoxiran-2-carbonyl)-L-leucyl-L-ornithin, F 187 bis 188°C.

Beispiel 45

In 20 ml Äthanol wurden 0,5 g des gemäss Beispiel 17 erhaltenen N-(DL-3-tran£-Benzyloxycarbonyloxiran-2-carbonyl)-L-leucyl-L-leucin-benzylesters gelöst. Nach Zugabe von 0,2 g Palladium auf Kohle wurde die Mischung 6 Stunden bei Raumtemperatur in einem schwachen Wasserstoffstrom

- 33 -

030036/0550

gerührt. Das Reaktions,gemisch wurde filtriert und das Filtrat konzentriert. Der Rückstand wurde aus Äthanol/ Äthyläther umkristallisiert, wobei man 0,32 g N-(DL-3-trans-Garboxyoxiran-2-carbonyl)-L-leucyl-L-leucin, F 121 bis 123°C, erhielt.

Beispiel 46

Arbeitet man nach dem Verfahren gemäss Beispiel 45 und verwendet 0>21 g des gemäss Beispiel 19 erhaltenen N-(DL-3-trans-Benzyloxycarbonyloxiran-2-carbonyl)-L-leucyl-L-prolin-methylesters und reinigt das erhaltene Konzentrat durch Kieselgelchromatografie (Chloroform:Methanol = 20:1), so erhält man 0,095 g des Öligen N-(DL-3-trans-Carboxyoxiran-2-carbonyl)-L-leucyl-L-prolin-methylesters.

3250 (Amin), 1740 (Ester), 1620, 1560 (Amid), 900 (Epoxy)

0,96 (d, J=5Hz, 6H), 1,20-2,60 (m, 7H), 3,40-3,90 (m, 4H), 3,68 (s, 3H), 4,10-5,00 (m, 2H), 7,60-8,00 (br., 1H), 8,80-9,30 (br., 1H)

max

NMR(60 MHz, CDCl.,) ο'

Beispiel 47

Arbeitet man nach dem Verfahren gemäss Beispiel 46 und

- 34 -

030036/DBSO

verwendet 0,188 g des gemäss Beispiel 20 erhaltenen N-(DL-3~trans~Benzyloxycarbonyloxiran-2-carbonyl)-L-leucyl-L-glutamsäure-dimethylesters, so erhält man 0,1 g des öligen N-(DL-3-trans-Carboxyoxiran-2-carbonyl)-L-leucyl-L-glutamsäure-dimethylesters.

IRs)^rein(cm"¹): 3280 (Amin) , 1730 (Ester), 1650, max

1550 (Amid), 900 (Epoxy)

NMR (60 MHz, CDCl₃)Ci =0,92 (d, J=5Hz, 6H), 1,20-2,70

(m, 7H), 3,57 (s, 3H), 3,63 (s, 3H), 3,45-3,70 (m, 2H), 4,10-4,80 (m, 2H), 5,90-6,50 (m, 2H), 7,10-7,70 (br., 1H)

Beispiel 48

In Benzylalkohol wurden 0,54 g des gemäss Beispiel 17 erhaltenen N-(DL-3-trans-Benzyloxycarbonyloxiran-2-carbonyl)-L-leucyl-L-leucin-benzylester gelöst. Zu der Lösung wurden tropfenweise unter Eiskühlung und Rühren 5 ml einer Benzylalkohollösung, enthaltend 0,56 g Kaliumhydroxid, gegeben. Die Mischung wurde 2 Stunden unter Eiskühlung gerührt. Dann wurde zu dem Reaktionsgemisch Petroläther gegeben und der Niederschlag wurde auf einem Filter gesammelt. Er wurde dann in 10 ml einer 5 %-igen wässrigen Chlorwasserstoff säurelösung gelöst und zweimal mit 10 ml Äthylacetat extrahiert. Die Extrakte wurden vereint, mit einer gesättigten Natriumchloridlösung gewaschen und konzentriert. Der erhaltene Rückstand wurde durch Kieselgelchromatografie

- 35 030036/0550

(Chloroform:Methanol = 4:1) und Umkristallisieren aus Chloroform/n-Hexan) gereinigt, wobei man 0,23 g N-(DL-3-trans-Carboxyoxiran-2-carbonyl)-L-leucyl-L-leucinbenzylester, F 103 bis 1O4°C, erhielt.

030 036/0550

Claims

HOFFMANN · ΕΙΤΙ,Ε &. PARTNER

PATENTANWALT 13 3 0 Q U Ό 2

DR. ING. E. HOFFMANN (1930-1970) · Ul PL.-I N G. V/. EITLE · D R. R ER. N AT. K. H O F FMAt-I N · D I PL.-1 N G. W. LE H N

DlPL.-ING. K. FOCHSLE · DR. RER. NAI. E. HANSEN ARABELLASTRASSE 4 (STeRNHAUS) - D-8000 MD N CH EN 81 . TELE FO N (06») 911087 · TELE X 05-2961? (PATH E)

32 934 o/va

TAISHO PHARMACEUTICAL CO. , LTD., TOKYO/JAPAN

Neue Epoxybernsteinsäurederivate

PATENTANSPPÜCHE

1J Epoxybernsteinsäurederivate der allgemeinen Formel

H_v CONHCHCON

worin bedeuten:

030036/0550

R¹ Wasserstoff, ein Alkalimetall, Alkyl mit 1 bis 2 Kohlenstoffatomen, Cycloalkyl mit 5 bis 6 Kohlenstoffatomen oder Benzyl,

R Alkyl mit 3 bis 4 Kohlenstoffatomen oder Benzyl,

R Wasserstoff oder Methyl, und

4
R Alkyl mit 1 bis 10 Kohlenstoffatomen, Phenyl, Benzyl, Phenäthyl, Cycloalkyl mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen oder eine Gruppe der Formel

R⁵
-CH

COR⁶

worin R Wasserstoff, Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen oder Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, das durch Hydroxy, Methylmercapto, Phenyl, Hydroxyphenyl, Indolyl, substituiert ist, ein gegebenenfalls geschütztes Carboxy, ein gegebenenfalls geschütztes Amino oder ein gegebenenfalls geschütztes Guanidino bedeutet, und

R Hydroxy, Alkylmetalloxy, Alkoxy mit 1 bis 2 .Kohlenstoffatomen, Benzyloxy, Amino oder Dimethylamine oder

R^J und R zusammen mit dem Stickstoffatom, an das sie gebunden sind, einen 5- bis 6-gliedrigen heterozyklischen Ring,der eine geschützte Carboxygruppe tragen kann, bilden.

030036/0550

™" O ""
2. Verbindung gemäss Anspruch T, dadurch g e k e η η -

zeichnet, dass R Wasserstoff oder Alkali-• metall, R Alkyl mit 3 bis 4 Kohlenstoffatomen, R Wasserstoff und R⁴ Alkyl mit 1 bis 10 Kohlenstoffatomen bedeutet.

3. Verbindung gemäss Anspruch 2, dadurch g e k e η η -

1 ■ 2

zeichnet , dass R Wasserstoff, R Alkyl mit 4 Kohlenstoffatomen, R Wasserstoff und R Isoamyl ist.

0300 3 6/0550