DE2530015A1

DE2530015A1 - Extraction of samples from thin layer chromatography - having sample tubes with gas flow agitation

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Publication number: DE2530015A1
Application number: DE19752530015
Authority: DE
Inventors: Rudolf Dipl Chem Dr Mueller
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1975-07-03
Filing date: 1975-07-03
Publication date: 1977-01-27

Abstract

Process for gentle mixing and/or extraction in sample tubes is carried out by gas flows. The mounting plate for the tubes is provided with several gas injection tubes, which are connected to each other and to a common feed branch by hoses or pipes. The mounting plate has >=2 guide rods joined to collars on the mounting frame. The gas flow is controlled by a valve, esp. a solenoid valve. The leaf sample from the thin layer chromatogram is mounted either vertically or inclined to vertical by means of a mounting clamp. The sample glasses can have grooves or slots in them for holding the leaf sample vertically or inclined to the vertical. For treating small samples in test tubes esp. leaf samples from thin layer chromatography. Generally the silica gel used for this is extracted with a solvent and the concn. determined by colorimetry. Agitation can cause the adsorption layer of the silica gel sheet to be dissolved and interfere with the determination. Filtration is not practical because of solvent and component losses. The system described allows simple and economic extraction which can be done on a routine basis.

Description

Burchmischunfs- und Extraktionsvorrichtung für Probenröhrchen Die Erfindung betrifft eine Durchmischung- und Extraktionsvorrichtung für Probenröhrchen, vorzugsweise für Reagenzgläser, mit der es gestattet ist, eine schonende Durchmischung oder Extraktion von Proben, insbesondere von Dünnschicht- oder Panierchromatogrammen, durch Buft- oder Inertgaseinblasen in die Probenlösung bzw. Extraktionsflüssigkeit, durchzuführen.Burchmischunfs- and extraction device for sample tubes The invention relates to a mixing and extraction device for sample tubes, preferably for test tubes that allow gentle mixing or extraction of samples, in particular of thin-layer or breading chromatograms, by blowing air or inert gas into the sample solution or extraction liquid, perform.

Um Lösungen in kleinen Probengläsern wie z.B. Reagenzgläsern ut zu durchmischen, werden eine Vielzahl Apparate wie z.3.In order to use solutions in small sample tubes such as test tubes mix, a variety of devices such as 3.

Schüttler oder Magnetrührer angeboten, mit denen diese Aufgaben in vielen Fällen zur vollen Zufriedenheit durchgeführt werden könne. Bei empfindlichem Extraktionsgut, wo durch intensives Schütteln oder Rühren ein unerwünschtes zerkleinern oder Zerstören fester Bestandteile in den Proben erfolgt, versagen diese Nethoden zum großen Teil.Shakers or magnetic stirrers are offered to perform these tasks in many cases can be carried out to full satisfaction. With sensitive Extraction material, where an undesired crushing by intensive shaking or stirring or destruction of solid components in the samples occurs, these methods fail for a great part.

In der quantitativen Dünnschichtchromatographie wird zum Beispiel eine Methode praktiziert, bei der auf Folien, die mit Adsobtionsmittel, wie Kieselgel, beschichtet sind, chro:natographiert wird. Die getrennten Substanzen werden mit der Folie und dem darauf befindlichem Kieselgel ausgestanzt oder von Hand ausgeschnitten, in Probenröhrchen gegeben und anschließend mit einer bestimmten Menge Lösungsmittel versetzt; dam die an dem Kieselgel adsorbierte Substanz herauslöst, so daß anschließend eine photometrische Messung zur quantitativen Bestimmung durchgeführt werden kann.In quantitative thin layer chromatography, for example a method practiced in which on foils that are coated with adsorbents, such as silica gel, are coated, chromatographed. The separated substances are with the film and the silica gel on it punched out or cut out by hand, put in test tubes and then with a certain amount of solvent offset; dam dissolves the substance adsorbed on the silica gel, so that subsequently a photometric measurement for quantitative determination can be carried out.

Um ein vollständiges Herauslösen der Substanz zu gewährleisten und um eine homogene Lösung zu erzielen, müßte die Lösung scrEihrt werden, was jedoch bei d en herkömmlichen Methoden den Nachteil hat, daß die Adsorbtionsschicht der Folien-.nusschnitte mit abgelöst wird und die nhotometrischen Messungen erheblich stört oder sogar unmöglich macht, Eine filtration der Lösung vor der Messung fuhrt zu unkontrollierbarren Lösunrnsmittelverlusten sowie Substanzverlusten und ist wegen des großen Arbeits- und Zeitaufwandes, besonders in Routinebetrieben mit einem hohen Probendurchsatz kaum durchführbar.To ensure that the substance is completely removed and in order to achieve a homogeneous solution, the solution would have to be be honored However, this has the disadvantage in the conventional methods that the adsorption layer the foil .nusschnitte is also detached and the photometric measurements considerably interferes or even makes impossible, a filtration of the solution leads before the measurement to uncontrollable solvent losses and substance losses and is due to the large amount of work and time required, especially in routine operations with a high Sample throughput hardly feasible.

Eine andere Methode, bei der die Substanz auf den Ausschnitten durch eine Tropfelution extrahiert wird, bringt zwar einwandfreie Ergebnisse, bedingt aber einen sehr erheblichen apparativen und zeitlichen Aufwand, so daß auch diese Methode aus wirtschaftlichen Gründen in dem Routinebetrieb kaum einsetzbar ist.Another method where the substance on the cutouts through a drop elution is extracted brings perfect results, conditionally but a very considerable expenditure in terms of equipment and time, so that this too Method can hardly be used in routine operation for economic reasons.

Außerdem müssen für diese Arbeiten teure Fachkräfte eingesetzt werden, um einwandfreie Ergebnisse zu erhalten, was ebenfalls zur Verteuerung der Routineanalytik beiträgt.In addition, expensive skilled workers must be used for this work, in order to obtain perfect results, which also makes routine analysis more expensive contributes.

Die Aufgabe der Erfindung bestand darin, eine Vorrichtung zu entwickeln, die frei von den oben genannten Nachteilen ist und die sich auf wirtschftlicher Basis mit einfachen Mitteln realisieren läßt.The object of the invention was to develop a device which is free from the above disadvantages and which is more economical Can be implemented with simple means.

Erfindungsgemäß wurde die Aufgabe dadurch gelöst, daß eine orrichtung gemäß Abb. I - III zur schonenden Durchmischung und Extraktion in Probengläsern entwickelt wurde, die dadurch gekennzeichnet ist, daß mehrere Begasungskanülen, die untereinander durch Rohr oder Schlauchleitungen verbunden sind und einenkemeinsamen Gasanschluß besitzen, an einer Halteplatte im entspre chendem Probengläserabstand angebracht sind und daß zur Gasdurchflußregelung die Zuleitung mit einer Drossel und einem Ventil, vorzugsweise Magnetventil, ausgerüstet ist, das von Hand oder über ein Zeitschaltwerk angesteuert wird.According to the invention the object was achieved in that a device according to fig. I - III for gentle mixing and extraction in sample tubes was developed, which is characterized in that several fumigation cannulas, which are connected to one another by pipes or hoses and have no common Have gas connection on a retaining plate in the corresponding sample tube spacing are attached and that the supply line with a throttle for gas flow control and a valve, preferably a solenoid valve, is fitted by hand or is controlled via a timer.

Die Vorrichtung ist weiterhin dadurch rekennzeichnet, aaß die Halteplatte mit mindestens zwei Führungsstäben ausgerüstet ist, dne in Führungshülsen geführt werden, sie sich an dem Proben gläsergestell befinden und ein sicheres Einfädeln der Bezasungskanülen in die Probengläser gewährleisten.The device is further characterized in that the retaining plate ate is equipped with at least two guide rods, which are guided in guide sleeves they are on the specimen glass rack and secure threading of the gassing cannulas in the sample tubes.

Eine erweiterte Ausführung ist dadurch gekennzeichnet, daß eine 1alteklammer aus inertem Naterial, vorzugsweise aus Chrom-Nickel-Stahldraht, in vorzugsweise greiferform gebogen, auf dem oden es Probenglases steht und die Bünnschichtchromatograrhieolienausschnitte zwangsführt, so daß sie senkrecht oder schräg gehalten werden. In einer weiteren Version wird die Halteklammer dadurch ersetzt, daß das Probenglas durch Einbuchtungen der Wandung so gestaltet ist, daß der Folienausschnitt zwangsläufig senkrecht oder schräg stehen muß. An expanded version is characterized by the fact that a holding bracket made of inert material, preferably made of chrome-nickel steel wire, in preferably bent gripper shape, on which the sample glass stands and the thin-layer chromatographic foil cut-outs forcibly so that they are held vertically or at an angle. In another Version the retaining clip is replaced by indentations in the sample tube the wall is designed so that the film section is necessarily vertical or must stand at an angle.

Die oben genannte Erfindung soll mit ihren Vorteilen an Hand der nachstehenden Beschreibung in Verbindung mit den Zeichnungen erläutert werden.The above invention, with its advantages, is intended to be based on the following Description will be explained in conjunction with the drawings.

Die Zeichnungen zeigen: Abb. I Halteplatte mit Begasungskanülen und Zuführungsleitung sowie Ventil und Führungsstäbe, von vorne gesehen Abb. II Halteplatte mit Begasungskanülen und Zuführungsleitung sowie Ventil und Führungsstäben, eingesetzt in Probenglöser, die sich in einem Probengläsergestell befinden das mit Führungshülsen ausgerüstet ist, von vorne gesehen.The drawings show: Fig. I Holding plate with gassing cannulas and Supply line as well as valve and guide rods, seen from the front Fig. II Retaining plate with aeration cannulas and supply line as well as valve and guide rods in Sample glasses that are in a sample tube rack with guide sleeves is equipped, seen from the front.

Abb. III Halteplatte mit 12 Begasungskanülen und zwei Führungsstäben von unten in der Draufsicht gezeichnet.Fig. III Holding plate with 12 gassing cannulas and two guide rods drawn from below in plan view.

Abb. TV Folienausschnitt im Probenglas am Boden liegend ohne Halteklammer.Fig. TV film cut-out in the sample tube lying on the floor without a retaining clip.

Abb. V Folienausschnitt im Probenglas, schrägstehend, gehalten durch Halteklammer Abb. VI Halteklammer in greiferform Abb. VII Probenglas mit Einbuchtungen und schrägstehendem Folienausschnitt.Fig. V Section of film in the sample tube, inclined, held through Retaining clip Fig. VI Retaining clip in the form of a gripper Fig. VII Sample tube with indentations and inclined film cut-out.

Die Dünnschichtromatographie-Folienausschnitte, im folgenden DC-Folienausschnitte genannt, die je nach Ausschneidetechnik kreisförmig, quadratisch oder rechteckig sind, werden in die Probenxläser 6 gegeben, die in dem Probengläsergestell 7 stehen.The thin-layer chromatography film sections, in the following TLC film sections called, which are circular, square or rectangular depending on the cutting technique are placed in the sample glasses 6 standing in the sample glass rack 7.

erden DC-Folienausschnitte verwendet, die in ihrem größten Durclimessermaß kleiner als der Innendurchmesser der Probengläser sind, wie z.B. bei kreisförmigen Ausschnitten, so wird vorher die Halteklammer 16 aus inertem Material auf den Boden des Probenglases gesetzt, die die Aufgabe hat, sie zwangs zu führen und in senkrechter oder schräger Stellung zu halten.earth DC foil cut-outs used in their largest diameter are smaller than the inside diameter of the sample tubes, e.g. circular Cutouts, the retaining clip 16 is previously made of inert material on the ground of the sample glass set, which has the task of forcing them to lead and in a vertical position or to hold at an inclined position.

Diese gezielte Stellung ist deshalb erforderlich, da sie ohne Zwangsführung und Halterung flach auf dem Boden des Glases liegen würden, so daß j @l unterhalb des DC-Ausschnittes ein toter Raum entsteht, der die spätere Messung stark beeinflußt und verfälscht.This targeted position is necessary because it does not require forced guidance and holder would lie flat on the bottom of the glass so that j @l below of the DC excerpt dead space arises, which the later measurement strongly influenced and falsified.

Die Halteklemmer 16 ist so gebogen, daß die Klammerarme stark nach außen gespreizt sind, so daß sie stramm an der Wandung des Probenglases liegen und die Halteklammer nach den Einbringen fet auf dem Boden halten. Dieser feste Sitz verhindert ein ungewolltes Dazwischenfallen des DC-Folienausschnittes, zwischen Wandung und Halteklammer und hat außerdem den Vorteil, daß sie während der Reinigung in dem Probenglas verbleiben kann, so daß ein umständliches Entfernen und wieder Einbringen entfällt.The retaining clip 16 is bent so that the clip arms strongly to are spread on the outside so that they lie tightly against the wall of the sample tube and keep the retaining clip firmly on the floor after insertion. That tight fit prevents the DC foil cut-out from falling in between Wall and retaining clip and also has the advantage that they can be used during cleaning can remain in the sample tube, so that cumbersome removal and again Bringing in is not necessary.

Eine weitere Ausführung zur schrägen oder senkrechten Halterung der DC-Folienausschnitte sieht vor, die Probengläser 6 bei der Herstellung mit Einbuchtungen 17,18 zu versehen, die die Aufgabe der Halteklammern übernehmen und somit eine zusätzliche Vorrichtung ersparen.Another version for angled or vertical mounting of the TLC foil cutouts provide the sample glasses 6 with indentations during manufacture 17,18 to be provided, which take on the task of the retaining clips and thus an additional Save device.

Werden DC-Folienausschnitte verwendet, die eine rechteckige Form haben und bei denen die längeren Seiten größen als der Innendurchmesser des Glases sind, kann die Halteklammer selbstverständlich entfallen, da sich eine aufrechtstehende Lage zwangsläufig ergibt, so daß bei ihnen eine einwandfrei Extraktion erfolgt. DC cutouts are used that have a rectangular shape and where the longer sides are larger than the inside diameter of the glass are, the retaining clip can of course be omitted, as there is an upright Location inevitably results, so that a proper extraction takes place with them.

Nachdem die DC-Folienausschnitte in die Probengläser eingebracht woflen sind, wird die zur Elution erforderliche Lösungsmittelmenge einpipettiert oder mit einem entsprechenden Dosiergerät zugegeben. Anschließend wird die Halteplatte 4 mit den Begasungskanülen 5 auf die Probengläser 6 gesetzt , so daß die Begansungskanülen 5 tief in das Lösungsmittel eintauchen.After the TLC foil cutouts have been placed in the sample tubes the amount of solvent required for elution is pipetted in or with added to an appropriate metering device. Then the holding plate 4 with the gassing cannulas 5 placed on the sample glasses 6 so that the gassing cannulas 5 Immerse deeply in the solvent.

Um ein einfaches und sicheres infdeln der Begasungskanälen 5 in die Probengläser 6 zu gewährleisten, befinden sich an der Halteplatte 4 mindestens zwei Führungsstäbe 8,9, die in den Führungshülsen 13,14, die sich am Probenglässergestell 7 erfinden, geführt werden Damit die gesamte Last der Halteplatte 4 nicht auf den Rändern der Probengläser 6 lastet, sind die Führungsstäbe 8,9 so lang gehalten, daß sie bis auf die Standfläche des Probengläsegestelles reichen und die Halteplatte 4 selbsttragend abstützen. lurch diese einfache Konstruktion wird ein schnelles und sicheres Aufsetzen gewährleistet und ein unbeabsichtigtes Verschieben der Halteplatte ausgeschlossen.In order to easily and safely infdeln the gassing channels 5 into the To ensure sample glasses 6, there are at least two on the holding plate 4 Guide rods 8,9, which are in the guide sleeves 13,14, which are located on the sample glass rack 7 invent to be performed So that the entire load of the retaining plate 4 is not on the The edges of the sample glasses 6, the guide rods 8.9 are kept so long that that they extend to the standing surface of the sample glass rack and the holding plate 4 self-supporting. This simple construction makes it a fast one and secure placement guaranteed and unintentional displacement of the retaining plate locked out.

Nach dem die Begasungskanülen 5 in die Probengläser 6 eingebracht worden sind, bleiben die Proben einige Zeit ohne weitere Behandlung stehen, um eine Vorlösung durch Diffusion einzuleiten.After that, the gassing cannulas 5 are introduced into the sample glasses 6 have been, the samples are left to stand for a while without further treatment Initiate preliminary solution by diffusion.

Diese Vorlösezeit ist selbstverständlich für jedes Problem pmnirisch zu ermitteln. In den häufigsten Fällen reicht jedoch eine Vorlösezeit von 30 mit aus.This pre-release time is of course pmnirical for every problem to investigate. In most cases, however, a pre-release time of 30 is sufficient the end.

Um den Verdunstungsverlust so klein wie möglich zu halten, ist dio Halteplatte 4 an der TJnterneite mit einer Dicbtungsfolie aus inertem Material belegt, die die Probengläser 6 weitgehenst abschließt. Dadurch, daß bei quantitativen Relativmessungen ein Vergleichsstand mitgeführt wird, der dieselbe Behandlung erfährt wie die Proben, treten geringfügige Verdunstungsverluste nicht als Fehler in Erscheinung, wenn sie in allen Probengläsern leich sind, was erfahrungsgemäß schon durch eine zugfreie Umgebungstemperatur erreicht wird. In extremen Fällen, bei denen mit sehr leicht flüchtigen Lösungsmitteln gearbeitet wird, durch eine entsprechende Thermostatisierung, wie z.B.In order to keep the evaporation loss as small as possible, dio Retaining plate 4 covered on the underside with a sealing film made of inert material, which closes the sample glasses 6 as far as possible. The fact that with quantitative relative measurements a comparison stand is kept which is subjected to the same treatment as the samples, Minor evaporation losses do not appear as errors if they are light in all sample tubes, which experience has shown by a draft-free one Ambient temperature is reached. In extreme cases, where with very easily volatile solvents are used, through a corresponding Thermostatic control, e.g.

@@sserbad oder Kühlblock, dafür gesorgt werden, daß dieses Ziel erreicht wird.@@ sserbad or cooling block, ensure that this goal is achieved will.

l'ach Beendigung der Vorlösezeit wird über den Anschlußstutzen 1 ein gleichmäßiger leichter Gasstrom, der bei weniger empfindlichen Substanzen atmosnhärische Luft sein kann, in die Lösung der Probengläser einxeleitet. Er wird mit einer Drossel so geregelt, d er eine schonende, die Adsorbtionsschicht nicht verletzende Durchmischung gewährleistet und Konzentrationsbildungen, die durch das Herausdiffundieren der Substanz aus der Adsorbtionsschicht entstehen, aufhebt. Gleichzeitig werden nocht nicht herausgelöste Restmengen der Substanz durch die Bewegung der Flüssigkeit schonend freigesetzt, so daß eine vollständige Elution gewährleistet ist.After the end of the pre-release time, a steady, light flow of gas, which is atmospheric in the case of less sensitive substances Air can be introduced into the solution of the sample tubes. He is using a thrush regulated in such a way that a gentle mixing that does not damage the adsorption layer guaranteed and concentration build-ups caused by the diffusion of the Substance arising from the adsorption layer, cancels. At the same time are not Non-detached residual amounts of the substance gently through the movement of the liquid released so that complete elution is ensured.

Die Durchmischungzeit, die in der Regel bis zu 1 Minute betragen kann, sollte zur Reproduzierbarkeit über eine Zeitschaltuhr gesteuert erden. Da in den häufigsten Fällen zur Elution und Durchmischung eine Intervall-Begasung zweckmäßig ist, kann bei einer erweiterten Ausführung der Vorrichtung, die Zeitschaltuhr mit einem Impulsgeber oder Intervallschalter gekoppelt werden, so daß nur kurzfristige Begasungsstöße, die durch längere Pausen unterbrochen werden, entstehen, was außerdem den Vorteil hat, daß durch diese Art der Begasung eine zusätzliche Sicherung zur Unterdrückung des Verdunstungsverlustet geschaffen wird.The mixing time, which can usually be up to 1 minute, should be controlled by a timer for reproducibility. Since in the In most cases, interval gassing is advisable for elution and mixing is, in an extended version of the device, the timer with be coupled to a pulse generator or interval switch, so that only short-term Gassing surges, which are interrupted by longer breaks, arise, what else has the advantage that this type of fumigation provides an additional backup Evaporation loss suppression is created.

Wird z.B. für die Durchmischung der Proben atmosphärische Luft über einen kleinen elektrisch betriebenen Laborkompressor eingeleitet, so wird dieser über eine Zeitschaltuhr, die vorzugsweise mit mehreren variablen Zeiteinstellungen ausgerüstet ist, esteNiert, so daß die Extraktionszeit jedem Problem auf einfache Weise angepaßt werden kann. Bei Verwendung eines Inertgases oder Preßluft aus Stahlflaschen, kann z.B. auch das Magnetventil 2 über die Zeitschaltuhr direkt angesteuert werden, so daß auch bei dieser Ausführung eine einwandfreie Reproduzierbarkeit der Extraktionszeit gewährleistet ist.Is used e.g. to mix the samples with atmospheric air If a small electrically operated laboratory compressor is initiated, it will be via a timer that preferably with several variables Time setting is equipped, esteNed, so that the extraction time any problem can be easily adapted. When using an inert gas or compressed air from steel bottles, e.g. the solenoid valve 2 can also be operated directly via the timer be controlled, so that a perfect reproducibility also in this version the extraction time is guaranteed.

Eine weitere Möglichkeit, während des Gaseinleitvorganges die Verdunstungsverluste so gering wie möglich zu halten besteht darin, den Gasstrom vorher über eine Gaswaschflasche zu leiten, die mit dem Lösungsmittel gefüllt ist, wie es auch für die Proben verwendet wird, so daß das Gas lösungsmittelgesättigt durch die Probenlösung strömt und für den entsprechenden Verdunstungsausgleich sorgt. Selbstverständlich muß in diesem Fall die Gaswaschflasche in dem gleichen Temperaturmilieu aufbewahrt werden wie die zu begasenden Proben, damit die einwandfreie Funktion gewährleistet ist.Another possibility, the evaporation losses during the gas introduction process To keep the gas flow as low as possible is to use a gas washing bottle beforehand to conduct, which is filled with the solvent, as it is also used for the samples is so that the gas flows solvent-saturated through the sample solution and for ensures the corresponding evaporation compensation. Of course it must be in this one If the gas washing bottle is to be stored in the same temperature environment as the samples to be fumigated so that proper function is guaranteed.

Unmittelbar nach der Durchmischung stehen die Proben zur Messung zur Verfügung. Die Vorrichtung wird von den Probengläsern abgehoben und kann sofort wieder für bereits vorbereitete Proben verwendet werden.Immediately after mixing, the samples are available for measurement Disposal. The device is lifted off the sample tubes and can be used immediately can be used again for samples that have already been prepared.

Tlm eine Kontamination auszuschließen, sind die Begasungskanülen 5 mit einem PTFE-Schlauch überzogen, der die Benetzung der Außenseite der Begasungskanülen verhindert. Bei starj wechselnden Probenkonzentrationen besteht die Möglichkeit, eine Spüllung der Begasungskanülen durch Einbringen derselben in Probenxlaser mit reinem Lösungsmittel und anschließendem Trodkenblasen durchzuführen, so daß eine absolut saubere Vorrichtung für die folgenden groben vorhanden ist. Dieser Spüllvorgang sollte vor jeder längeren Stillstandzeit in jedem Fall durchgeführt werden, dtnit bei einem ,iedereinsatz ein fehlerfreies Arbeiten gewährleistet ist und zeitraubende Wiederholungen vermieden werden.The gassing cannulas 5 are to rule out contamination covered with a PTFE tube, which wets the outside of the gas injection cannulas prevented. If the sample concentrations vary greatly, it is possible to rinsing the gassing cannulas by introducing them into the sample laser pure solvent and then blow Trodken, so that a absolutely clean device for that following rough available is. This rinsing process should always be carried out before any lengthy downtime can be carried out, i.e. error-free work is guaranteed in the event of a second use and time-consuming repetitions are avoided.

Die nachfolgenden Vergleichsmeßreihen sollen verdeutlichen, welchen entscheidenden Einfluß die Halteklammer 16 aul die Meßwerte hat und welche Präzision durch das Arbeiten mit der beschriebenen Burchmischungs- und Extraktionsvorrichtung zu erreichen ist.The following series of comparative measurements should clarify which The holding clamp 16 has a decisive influence on the measured values and what precision by working with the mixing and extraction device described can be achieved.

Auf mehreren DC-Folien aus Aluminium 20 X 20 cm, die mit Kieselgel und Fluoreszenzindikator beschichtet waren ( Schichtdicke O,25 mm ). wurden mit einem automatischen DC-Auftragegerät jeweils 8 Flecke eines Steroid-Standards, gelöst in Äthylenchlorid, aufgetragen. Je Fleck wurden 15 µl = 61,7 µg der Standardlösung aufgetragen und anschließend ausgestanzt.On several aluminum TLC foils 20 X 20 cm, covered with silica gel and fluorescent indicator were coated (layer thickness 0.25 mm). were with an automatic DC applicator, 8 spots of a steroid standard at a time in ethylene chloride applied. 15 µl = 61.7 µg of the standard solution were used per spot applied and then punched out.

Die ausgestanzten DC-Folienausschnitte fielen direkt in die Probengläser. Zwei Serien hatten keine Halteklammern in den Probengläsern, so daß die DG-Folienausschnitte auf dem Boden laien, hrend bei zwei weiteren Serien die oben beschriebenen Halteklammern 16 in Anwendung kamen. Die Proben wurden mit 10 ml UV-Methanol versetzt, 30 min. vorgelöst, dann durch leichtes Lufteinblasen durchmischt und am Sprektralphotometer bei einer Wellenlänge von (240 nm gemessen.The punched out TLC foil cutouts fell directly into the sample tubes. Two series had no retaining clips in the sample tubes, so the DG film cutouts on the floor, listening to the retaining clips described above for two other series 16 came into use. The samples were mixed with 10 ml of UV methanol, 30 min. pre-dissolved, then mixed by gently blowing in air and using the spectrophotometer measured at a wavelength of (240 nm.

Zur Charakterisierung der Güte des Verfahrens mit der beschiebienen Vorrichtung und Halteklammer wurde die Näherungsstandardabwiechungen der Meßreihen nach der Formel erstellt.In order to characterize the quality of the process with the described device and retaining clip, the approximate standard deviations of the series of measurements were made according to the formula created.

s = Näherungsstandardabweichung Xi = -Einzelwerte x = Mittelwert N = Anzahl der Messungen Die Meßreihen stellen die Extinktionswerte für die angegebene Konzentration dar, wobei der Blindwert, d.h. Extinktion des Folienausschinttes ohne Substanz, bereits berücksichtit worden ist. ohne Halteklammer mit Halteklammer 1. Folie 2. Folie 1. Folie 2. Folie 1 0,331 0,291 0,330 0,329 2 0,327 0,328 0,329 0,329 3 0,318 0,302 0,331 0,330 4 0,321 0,325 0,327 0,331 5 0,331 0,326 0,327 0,331 6 0,331 0,326 0,332 0,332 7 | 0,323 | 0,330 | 0,331 | 0,332 8 0,327 0,315 0,331 0,330 x 0s326 0,318 0,330 0,330 s + 0,005 0,0142 0,0019 0,0013 s # %| 1,53 | 4,47 | 0,58 | 0,4 .ie aus den Werten deutlich zu erkennen ist, wird durch den Einsatz der Halteklammer eine erhebliche Verbesserung der Analysenwerte erreicht, was Ziel der Aufgabe war und was sich mit mit wenig Aufwand realisieren läßt.s = approximate standard deviation Xi = individual values x = mean value N = number of measurements The series of measurements represent the extinction values for the specified concentration, whereby the blank value, ie the extinction of the film without substance, has already been taken into account. without retaining clip with retaining clip 1. Slide 2. Slide 1. Slide 2. Slide 1 0.331 0.291 0.330 0.329 2 0.327 0.328 0.329 0.329 3 0.318 0.302 0.331 0.330 4 0.321 0.325 0.327 0.331 5 0.331 0.326 0.327 0.331 6 0.331 0.326 0.332 0.332 7 | 0.323 | 0.330 | 0.331 | 0.332 8 0.327 0.315 0.331 0.330 x 0s326 0.318 0.330 0.330 s + 0.005 0.0142 0.0019 0.0013 s #% | 1.53 | 4.47 | 0.58 | 0.4 As can be clearly seen from the values, a considerable improvement in the analysis values is achieved through the use of the retaining clip, which was the aim of the task and which can be achieved with little effort.

Die Zeitdauer des Bufteinblasens spielt für eine einwandfreie Elution ebenfalls eine wesentliche Rolle. Ein zu langes und sterkes Lufteinblasen zeigt erhebliche Schwankungen in den Meßergebnissen, so daß zur Erreic-hung reproduzierbarer Ergebnisse eine maximale Durchmischungszeit von 45 bis 60 sec. als am günstigsten festgestellt wurde.The time it takes to blow the air in plays a role in proper elution also play an essential role. Too long and too strong an air injection shows considerable fluctuations in the measurement results, so that the results are more reproducible Results a maximum mixing time of 45 to 60 seconds as the most favorable was established.

Es wurde für diesen Versuch wie vorher eine Steroid-Standardlösung benutzt, jedoch wurden je Fleck nur 59,3 µg aufgetragen. 45 sec. Durch- 60sec. Durch- 2 min. Durch- mischungszeit mischungszeit mischungszeit 1. Folie 2. Folie 1. Folie 2. Folie 1. Folie 2. Folie 1 0,317 0,313 0,315 0,316 0,315 0,325 2 0,315 0,319 0,321 0,317 0,314 0,333 3 0,318 0,317 0,317 0,320 0,318 0,322 4 0,315 0,314 0,319 0,320 0,318 0,326 5 0,316 0,318 0,321 0,315 0,334 0,321 6 0,319 0,318 0,318 0,318 0,321 0,327 7 0,321 0,318 0,321 0,320 0,322 0,323 8 0,319 0,317 0,322 0,315 0,318 0,329 # 0,318 0,317 0,319 0,318 0,320 0,326 s # 0,0022 0,00214 0,00245 0,0063 0,0037 s%# 0,69 0,68 0,76 0,7 1,9 1,13 As before, a steroid standard solution was used for this experiment, but only 59.3 µg were applied to each spot. 45 sec. Through 60sec. Diameter- 2 min. mix time mix time mix time 1. slide 2. slide 1. slide 2. slide 1. slide 2. slide 1 0.317 0.313 0.315 0.316 0.315 0.325 2 0.315 0.319 0.321 0.317 0.314 0.333 3 0.318 0.317 0.317 0.320 0.318 0.322 4 0.315 0.314 0.319 0.320 0.318 0.326 5 0.316 0.318 0.321 0.315 0.334 0.321 6 0.319 0.318 0.318 0.318 0.321 0.327 7 0.321 0.318 0.321 0.320 0.322 0.323 8 0.319 0.317 0.322 0.315 0.318 0.329 # 0.318 0.317 0.319 0.318 0.320 0.326 s # 0.0022 0.00214 0.00245 0.0063 0.0037 s% # 0.69 0.68 0.76 0.7 1.9 1.13

Claims

Claims for protection 1. Device for gentle mixing and / or Extraction in sample tubes by introducing gas, characterized by the holding plate (4) is equipped with several gassing cannulas (5) that run through each other Hose or pipe lines (3) are connected and have a common connection piece own.

2.) Device according to claim 1, characterized in that the holding plate (4) is equipped with at least two guide rods (8,9), their guide sleeves (13,14) are located on the sample glass rack (7).

3.) Device according to claim 1 and 2, characterized in that the gas supply is controlled via a valve with a throttle, preferably a solenoid valve.

4.) Device according to claim 1 to 3, characterized in that the sample tubes preferably with retaining clips (16) for vertical or inclined Position of the film cut-outs are equipped.

5.) Vorrichtun according to claim 1 to 3, characterized in that the Sample glasses with indentations for vertical or inclined positioning of the film cut-outs are provided.

L e r s e i t e