DE2344451C2

DE2344451C2 - 7-[β-Aminoacylamino]-3-substituierte-3-cephem-4-carbonsäure-Derivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und sie enthaltende pharmazeutische Mittel

Info

Publication number: DE2344451C2
Application number: DE2344451A
Authority: DE
Inventors: Masaru Takatsuki Kurita; Osamu Sakai Nishiwaki; Kunihiko Toyonaka Tanaka
Original assignee: Fujisawa Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Fujisawa Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1972-11-17
Filing date: 1973-09-04
Publication date: 1983-02-03
Also published as: FR2206934A1; SE415019B; NL7312366A; CH589658A5; FR2206934B1; GB1438872A; DE2344451A1; CA1032534A

Description

(a) eine 7-Amino-3-substituierte-3-cephem-4-carbonsäure der allgemeinen Formel

H₂N-, (

yy-

CH₂-S-R₃
COOM

(Π)

worin R3 und M die in Anspruch angegebenen Bedeutungen haben,

mit einem jJ-Aminocarbonsäurederivat der allgemeinen Formel

R₁

H-C-CH₂-COOH
X

(HI)

worin Ri die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung hat und X eine geschützte Aminogruppe bedeutet oder

mit einem reaktionsfähigen Derivat davon acyliert und anschließend erforderlichenfalls die Aminoschutzgruppe entfernt; oder

eine 7-acylierte Aminocephalosporansäure der allgemeinen Formel

I J-CH₂-OCOCHj

COOM

(IV)

worin R- und M die oben angegebenen Bedeutungen haben und X' eine Aminogruppe oder eine geschützte Aminogruppe bedeutet,
mit einem Nuclenphil der allgemeinen Forme!

R,SH (V)

worin Rj die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung hat. umsetzt und dann erforderlichenfalls die Aminoschutzgrrrpe entfernt.

Die Erfindung betrifft neue 7[/?-Aminoacylamino]-3-subslituierle-S-cephem^-carbonsäure-Denvate. die eine wertvolle antibakierielle Aktivität aufweisen. Verfahren /u ihrer Herstellung sowie sie enthaltende pharmazeutische Mittel.

Es sind bereits verschiedene Cephalosporine bzw. Cephemcarbonsäurederivate bekannt, die eine antibakterielle Aktivität aufweisen, So sind beispielsweise in "den deutschen Öffenlegungsscnrifteri 16 70 600 Und 18600 anlibiotisch wirksame Cephalospofinverbindüngen mit einer Aminöäcylamidögruppe in der 7-Slellung des Cephalosporinkerns bzw, antibiotisdh wirksame 3'ThiadiazOlyllhio· und 3-Telfäzolylthiöcephälösporine bekannt, die das Wachstum sowohl von gramnegaliven als auch von gramposiiiven Bakterien hemmen.

Da aber einerseits die antiobakterielle Wirksamkeit der bihser bekannten Cephalosporine doch gewissen Beschränkungen unterliegt, andererseits das Auftreten von durch Mutation entstandenen, gegenüber den bekannten Cephalosporinen resistenten Mikroorganis-

ω menstämmen nicht ausgeschlossen werden kann, war Aufgabe der Erfindung die Suche nach neuen antibäkte* riell wirksamen Verbindungen mit einer noch höheren antibaktefieilett Aktivität, die ferner die Möglichkeit bieten, der Entwicklung von resistenten Mikroörganis^ men entgegenzuwirken.

ßs wurde nun gefunden, daß diese Aufgabe erfindungsgeinäß gelöst werden kann durch neue [SAili

bonsäure-Derivate der nachstehend angegebenen allgemeinen Formel (I), die eine deutlich höhere antibakterielle Aktivität aufweisen als einschlägige Handelsprodukte (vgl. das v/eiter unten folgende Vergleichsbeispiel) und durch das Verfahren zu ihrer Herstellung.

Das erfindungsgemäße Verfahren zur Herstellung der Verbindungen I ist dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Weise

(a) eine Z-Amino-S-substituierteO-cephem^carbonsäure der allgemeinen Formel

m

COOM

worin R₃ und M die angegebenen Bedeutungen haben,

mit einem /9-Aminocarbonsäurederivat der allgemeinen Formel

H-C-CH₂-COOH

(IFl

worin R, die angegebene Bedeutung hat und X eine geschützte Aminogruppe bedeutet, oder mit einem reaktionsfähigen Derivat davon acyliert and anschließend erforderlichenfalls die Aminoschutzgruppe entfernt; oder

eine 7-acyIierte Aminocephalosporansäure der allgemeinen Formel

H -C-CH₂CONH-, /'

X'

"J-CH₂-OCOCH₃ (IV)

COOM

worin Ri und M die angegebenen Bedeutungen haben und X' eine Aminogruppe oder eine geschützte Aminogruppe bedeutet, mit einem Nuclt- "phil der allgemeinen Formel

R₃SH V

worin R₃ die angegebene Bedeatunr hat, umsetzt und dann erforderlichenfalls die Aminoschutzgruppe entfernt.

Die erfindungsgemäßen 7-[/?-Aminoacylamino]-3-substituierte-3-cephem-4-carbonsäure-Derivate der allgemeinen Formel

R₁

H-C-CH₂CONH-, 1^

NH,

worin bedeuten:

CH₂-SR₃

(D

45

50

Ri eine Phenyl- oder Thienylgruppe, R₃ eine 3-MethyI-1,2,4-thiadiazol-5-yl-, 5-Methyl-l,3.4-thiadiazolyl-, 1 -Methyl-1 H-tetrazolyl- oder

2-Methyl-2Htetrazolylgruppe und M ein Wasserstoffatom oder ein nicht-toxisches, pharmazeutisch verträgliches Kation,

60

Weisen eine höhe antibakterielle Aktivität auf und verhindern wirksam: das; Wachstum einer Vielzahl· von Mikroorganismen einschließlieh der grarnpositiven und grarrinegativeri Bakterien- In bezug auf ihre äntibäkterielle Wirksamkeit sind sie den einschlägigen Händeisprodukfen eindeutig überlegen, wie die in dem weiter unten folgenden Vergleichsbeispiel angegebenen Er^ gebnisse von Verglcichsversuchcn belegen, Gemäß einem weiteren Aspekt betrifft die Erfindung ferner pharmazeutische Mittel, die dadurch gekennzeichnet sind, daß sie al^c Wirkstoff eine Verbindung der vorstehend angegebenen allgemeinen Formel (I) in Mischung mit einem pharmazeutisch verträglichen Träger oder Verdünnungsmittel enthalten, das für die orale oder parenteral Verabreichung geeignet ist. Die Träger oder Verdünnungsmittel sind organischer oder anorganischer Natur.

Die erfindungsgemäßen pharmazeutischen Mittel können in fester Form, z. B. in Form von Kapseln, Tabletten oder Dragees, oder in flüssige.· Form, z. B. in Form von Lösungen, Suspensionen oder Emulsionen, vorliegen. Gewünschtenfalls können die erfindungsgemäßen pharmazeutischen Mittel zusätzlich noch weitere Hilfssubstanzen enthalten, wie z. B. Stabilisatoren, Netzmittel oder Emulgiermittel, Puffer oder andere, auf diesem Gebiet üblicherweise verwendete Zusätze.

Wenn auch die Dosierung der antibakteriell wirksamen erfindungsgemäßen Verbindungen in Abhängigkeit von dem Alter und dem Gesundheitszustand des Patienten abhängt, hat sich eine durchschnittliche Einzeldosis von etwa 100 mg. 250 mg und 500 mg Verbindung als wirksam zur Behandlung von Erkran kungen erwiesen, die durch eine bakterielle Infektion hervorgerufen werden. Im allgemeinen können Mengen zwischen 10 mg und etwa 1000 mg oder auch noch höhere Mengen verabreicht werden.

Der hier verwendete Ausdruck »pharmazeutisch verträgliches Kation« steht für im wesentlichen nichttoxische Kationen, wie solche der Alkalimetalle, z. B. Natrium und Kalium.

Der Ausdruck »geschützte Aminogruppe«, für den das Symbol X in der Formel (MI) steht, bezeichnet einen Aminöfest mit einer Schutzgruppe, wie Benzyloxycarbohyl,

4^jNitroben2yloxycarbonyl,

4-BrombenzyloxycarbonyI,

4ⁱMethoxybenzyIoxycarbonyi, 3,4-Dimethoxybenzyloxycarbonyl, 4-(Phenyläzo)benzyloxycäfbönyl,

4-(4-Methoxyphenylazo)benzyIoxycarbonyl,

t-Butoxycarbonyl, t-Pentyloxyearbonyl,

Isopropoxycarbonyl,

Diphenylmethoxycarbonyl,

2-PyridyImethoxycarbonyl,

^^-Trichloräthoxycarbonyl,

2,2,2-Tribromäthoxycarbonyl,

1 -Cyclopropyläthoxycarbonyl,

3-Jod-propoxycarbonyl,

2-Fun'uryIoxycarbonyl,

1 - Adamantyloxycarbonyl,

S-Chinolyloxycarbonyl.Trifluoracetyl,

Trityl, 2-NitrophenyIthio,

2,4-DinitrophenyIthio,2-Hydroxybenzyliden,

2-Hydroxy-5-chlorbenzyliden,

2-Hydroxy-1 -napbthylmethyien,

S-Hydroxy-'t-pyridylmethylen,

l-lVtethoxycarbonyI-2-propyliden,

1 -Äthoxy-carbonyl-2-propyIiden,

S-Äthoxycarbonyl^-butyliden,

1 - Acetyl-2-propyliden,

1 -Propionyl-2-propyliden,

1 -Benzoyl-2-propyliden,

13-Bis-(äthoxycarbonyl)-2-propylides,

l-(N-M':thylcarbamüyI)-2-propyIiden,

1 -(N₁N- DimethyIcarbamoyl)-2-propyliden,

1-[N-(2 Methoxyphenyl)carbamoyl]-2-picpyüder.,

1 [N-(4 Methoxyphenyl)carbamoyl]-2-propyliden,

]-(N-PbenylcarbamoyI)-2-propyIiden,

2-Äthoj-ycarbonylcyclopentyliden,

2-ÄthoxycarbonylcycIohexyIiden,

2-Acetylcyciohexyliden und

SJ-Dimethyl-S-oxocyclohexyliden.
Weitere Beispiele für geschützte Amino sind die Säuresalze der freien Aminogruppe wie Hydrochloride, Hypobromide und Hydrojodide.

Die Acylierungsreaktion kann in üblicher Weise durchgeführt werden, z. B. in einem Lösungsmittel, wie Aceton, Dioxan, Acetonitril, Chloroform, Äthylenchlorid, Tetrahydrofuran. Äthylacetat. Dimethylformamid, Pyridin oder Wasser, oder irgendeinem anderen geeigneten organischen Lösungsmittel. Die Reaktion kann vorzugsweise unter Kühlen oder bei Raumtemperatur durchgeführt werden.

Wenn das /J-AminoLarbonsäure-Derivat der Formel (III) in Form der freien Säure oder des Salzes eingesetzt wird, kann die Acylierungsreaktion in Gegenwart eines Kondensationsmitte's wie N.N'-Dicyclohexylcarbodiimid oder Thionylchlorid, durchgeführt werden. Geeignete reaktionsfähige Derivate der jS-Aminocarbonsäure-Derivate der Formel (111) sind Carbonsäurehalogenide, aktive Amide, aktive Ester. Säureanhydride oder gemischte Anhydride mit anderen Carbonsäuren.

Die Acylierungsrekation kann auch durchgeführt werden, nachdem die 7-Amino-3-substituierte-3-cephem-4-carbonsäure der Formel (II) mit einem Silylierungsmittel. wie Chlortnmethylsilan. Llis-[N,N-trimethyliilyljacetamid oder N Trimethylsilylacetamid, behandelt worden ist.

_r„; Nach der Acylierung werden, falls erforderlich, die Schutzgruppe vom Aminörest und die Silylgruppe entfernt.

Die Reaktion zur Entfernung der Schutzgruppe Vom Aminörest kann ίη sich bekannter Weise durchgeführt Werden, z. B. durch Behandlung des Acylierungsprodukts mit Säuren, wie Ameisensäure oder Trifluoressig^ säure, oder durch katalytische Reduktion, in Abhängigkeit von der jeweils zu entfernenden Schutzgruppe.

Di» Abspaltungsreaklion unter Verwendung von Säuren kann beispielsweise für solche Verbindungen eingesetzt werden, die als Schutzgruppe z. B. Benzyloxycarbonyl, substituiertes Benzyloxycarbonyl, Alkoxycarbonyl, substituiertes Alkoxycarbonyl, Aralkoxyearbonyl, Adamantyloxycarbonyl,Trityi,substituiertes Phenylthio, substituiertes Aralkyliden, substituiertes Alkyliden oder ίο substituiertes Cycloalkyliden aufweisen. Die katalytische Reduktion ais Abspaltungsreaktion kann auf solche Verbindungen angewandt werden, die als Schutzgruppen z. B. Benzyloxycarbonyl, substituiertes Benzyloxycarbonyl oder 2-Pyndylmethoxycarbijnyl enthalten, π Wenn die Schutzgruppe eine Trifluoracetyl-Gruppe ist, kann sie durch Behandlung des Acylierungsproduktes mit Wasser entfernt werden. Wenn die Schutzgruppe Halogenalkoxycarbonyl- oder 8-Chinolyl-oxycarbonyl ist, kann sie durch Behandlung des Acylierungsproduktes mk Kupfer oder Zink entfernt werden.

Die Entfernung der Silylgr.^pe, die in der Regel

leicht durch die nachbehandlung d_s Acylierungsreaktionsproduktes in der Acylierungsreaktion entfernt wird, kann durch Behandlung des Acylierung«reaktionsproduktes mit Wasser erfolgen.

LMe Reaktionen zur Entfernung der Schutzgruppen am Aminörest und der Silylgruppe können ohne Isolierung des Acylierungsreaktionsproduktes aus dem Reaktionsmedium erfolgen.

Die Umsetzung einer 7-acylierten Aminocephalosporansäure der Formel (IV) mit einem Nucleophil der Formel (V) kann in einem Lösungsmittel, wie Wasser, Aceton, Chloroform. Nitrobenzol, Dimethylformamid. Methanol, Äthanol. Dimethvlsulfoxid oder irgendeinem anderen geeigneten organischen Lösungsmittel, durchgeführt werden. Die Reaktion kann bei Raumtemperatur oder unter Erwärmen ausgeführt werden. Wenn das Nucleophil der Formel (V) in Form des freien Thiols verwendet wird, wird die Reaktion vorzugsweise in Gegenwart einer Base ausgeführt, z. B. eines Aikalime· tallhydroxids, eines Alkalimetallcarbonate, eines Alkalirnetallbicarbonats oder eines Trialkylamins. Wenn die 7-acyiierte Aminocephalosporansäure der Formel (IV). in der X' eine geschützte Aminogruppe bedeutet. eingesetzt wird, können die gewünschten Ve-bindungen der Formel (I) dadurch erhalten werden, daß man die Schutzgruppe an der Aminogruppe in üblicher Weise wie oben dargelegt entfernt.

Es ist allgemein bekannt, daß die Mehrzahl der Verbindungen der Formel (I) ein asymmetrisches Kohlenstoffatom hat und deshalb in zwei optisch aktiven isomeren Formen, den D- und L-Fo^rmen, vorliegt. Die Erfindung umfaßt sowohl die D- als auch du." L,-Formen und die DL-Gemische dieser Verbindun-

gen.

Die für das Verfahren gemäß der Erfindung verwendeten Reaktionskomponenten sind im Handel erhältlich oder können nach üblichen, allgemein bekannten Verfahren oder nach Analogieverfahren, die auf die Herstellung solcher Reaktionskomponenten anwendbar sind, hergestellt werden.

Gemäß -dem . Verfahren der Erfindung kann ein Niederschlag, der sich während der Reaktion bildet, aus dem Reaktionsgemisch nach Verfahren, wie sie üblicherweise hierfür eingesetzt werden_t enifcrnt werden, und die erhaltenen Reaktionsprodukte können den routinemäßig eingesetzten Reinigungsverfahren unterworfen werden z, B, einer Umkristallisation aus

einem geeigneten Lösungsmittel oder einem Lösungsmittelgemisch.

Die Verbindungen der Formel (I) können nach üblichen Methoden der Salzbildung aus den Säuren in ihre pharmazeutisch verträglichen, im wesentlichen nicht-toxischen Salze überführt werden, z. B. durch Umsetzung mit einem Alkalimetallhydroxid, einem Alkalimetallbicarbonat, einem Alkalimetalicarbonat, oder einer organischen Base. Die Natriumsalze sind bevorzugt. Das bevorzugte Verfahren zur Herstellung der Salze besteht darin, daß die Säure in einem Lösungsmittel gelöst wird, tn dem das Salz unlöslich ist, und daß dann eine Lösung der salzbildenden Verbindung der Base zugegeben wird. Dabei fällt das Salz als Niederschlag aus dem Reaktionsgemisch aus.

Die Erfindung wird anhand der nachfolgenden Beispiele erläutert.

Beispiel 1

Pivaloylchlorid (4.9 g) wurde auf einmal zu einer trockenen Acetonlösung(150 ml) von 3-(N-tert.-Butoxycarbonylamino)-3-phenyl-DL-propionsäure (10,8 g) und Triäthylamin (4.1 g) unter Rühren bei - 10 bis -15°C gegeben. Das erhaltene Gemisch wurde 1 Stunde bei —10 bis - 15^rC gerührt. Dann wurde auf einmal bei -30 bis -40° C unter Rühren ein Gemisch von

7-Amino- 3-(5-methyl-1 3,4-thiadiazoI-2-yl)thiomethy!-3-cephem-4-carbonsäure (14.0 g), Triäthylamin (12.2 g), Wasser (40 ml) und Aceton (160 ml) gegeben. Das Gemisch wurde 1.5 Stunden lang bei —30 bis - 40° C und dann 1.5 Stunden lang bei Raumtemperatur gerührt. Nachdem das Aceton aus dem Reaktionsgemisch unier vermindertem Druck entfernt worden war, UuHe der erhaltene Rückstand mit Äthylacetat gev,a,then Die VVasserschicht wurde abgetrennt, mit JO°/oiger Salzsäure auf etwa pH 1 eingestellt und mit Äthylacetat (1000 ml) extrahiert. Die organische Schicht wurde mit Wasser und einer wäßrigen Lösung von Natriumchlorid gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und mit Aktivkohle behandelt Die organische Lösung wurde dann unter vermindertem Druck auf ein Volumen von etwa 100 ml konzentriert, und das Konzentrat wurde filtriert, wobei

7-[3-(N-tert.-ButoxycarbonyIamino)-3-phenyl-DL-propionamido]-3-(5-methyl-l3.4-thiadiazol 2yl)thiomethyI-3-cephem-4-carbonsäure (1.48 g),
F. 150 bis 155° C (Zers.) erhalten wurde.

Die Mutterlauge wurde ebenfalls unter vermindertem Druck eingeengt, und der abgeschiedene Niederschlag wurde filtriert als nur noch wenig Äthylacetat zurückblieb Dabei wurden 13 g des gleichen Produkts erhalten.

IR (Nujol)

3350.1775,1710,1685.1660.1525 cm-'
UV (Phosphatpuffer, pH 6,4)

A_rat272mu,E=208

Die oben erwähnte 7-[3-(N-tert-ButoxycarbonyIamino)-3-phenyl-DL-propionamido]-3-(5-methyI-l_r3,4-thiadiazoI-2-yI)-thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure (1,0 g) wurde zu Seiger Ameisensäure gegeben, und das Gemisch wurde 3 Stunden bei 40⁰C gerührt Nachdem das Reaktionsgemisch unter vermindertem Druck auf ein Volumen von etwa 5 ml eingeengt worden war, wurden Wasser (etwa 2 ml) und Methylisobutylketon en:haltend Amberlite LA-I (etwa 5 ml) zum Rückstand gegeben, Und das Gßmisch wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Der Niederschlag: wurde filtriert, wobei ein schwach-gelbes Pulver von 7-(3-Airiino-3-phenyl-DL-propioriamido)-3-(5-methyi^ll,J,4-thiadiazo!-2-y!)tniomelhyI-3-cephem-4-earbunsäure (170 mg) erhalten wurde.

IR (Nujol)

3300,1760,1650,1590,1530 cm-' to UV(Phosphatpüffer,pH6,4)

Beispiel 2

3-(N-lert.-Butoxycarbonylamino)-3-(2-thienyl)-DL-propionsäure (10,8 g) und Triäthylamin (4,04 g) wurden in trockenem Aceton (200 ml) unter Rühren bei Raumtemperatur gelöst. Nach Abkühlen der Lösung auf -10 bis -15° C wurde Pivaloylchlorid (4,82 g) auf einmal unter Rühren zur Lösung gegeben. Das Gemisch wurde 1 Stunde bei - 10 bis - 15°C gerührt und dann auf -40 bis -5O⁰C abgekühlt. Zum Gemisch wurde eine Mischung aus 7-Amino-3-(5-methyl-l,3,4-lhiodiazol-2-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure (13,76 g),

Triäthylamin (12,0 g), Wasser (4OmI) und Aceton (160 ml) auf einmal gegeben. Das erhaltene Gemisch wurde 1,5 Stunden bei -40 bis -40⁰C und dann 2 Stunden be'. Raumtemperatur gerührt. Das Aceton wurde unter vermindertem Druck aus dem Reaktionsgemisch entfernt, und der Rückstand wurde mit Äthylacetat gewaschen. Die wäßrige Schicht wurde abgetrennt, mit 10%iger Salzsäure auf pH 1 eingestellt und mit Äthylacetat extrahiert. Der Extrakt wurde mit Wasser und einer wäßrigen Lösung von Natriumchlorid gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet, mit Aktivkohle behandelt und dann unter vermindertem Druck konzentriert. Zum Konzentrat wurde Äther gegeben, und das Gemisch wurde 3 Stunden gerührt. Der Niederschlag wurde abfiltriert, wobei 7-[3-(N-tert-

■Ό Butoxycarbonylamino)-3-(2-thienyl)-DL-propionamido]-3-(5-methyl-13,4-thiadiazoF-2-yi)thiomethyI-3-cephem-4-carbonsäure (15,1 g) F. 130 bis 135°C (Zers.) erhalten wurde.

IR (Nujol)

3350,1780,1710,1690.1650 cm -' UV (Phosphatpuffer, pH 6,4)

A_ma* 235πιμ,£=255

λ_5Α 272mu,£=199

Die so erhaltene 7-[3-(N-tert-Butoxycarbonylamin;. )⁴-3-(2-thienyl)-DL-propionamido]-3-(5-methyl-13,4-thiadiazoI-2-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure (10 g) wurde mit 99%iger Ameisensäure (100 ml) unter

κ Eiskühlung 2 Stunden gerührt Das Reaktionsgemisch wurde dann unter vermindertem Druck konzentriert, wobei ein schwach-brauner pastenartiger Rückstand erhalten wurde. Das Konzentrat wurde nacheinander mit Äther (100 ml), Äthylacetat (100 ml) und Acetonitril (100 ml) gewaschen. Der Niederschlag wurde filtriert wobei ein schwachgelbes Pulver (5,6 g) erhalten wurde. Das so erhaltene Produkt (43 g) wurde in Wasser (etwa 10 ml) gelöst Hierzu wurde Amberlite® LA-I (etwa 60 mi) gegeben. Das Gemisch wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt Der Niederschlag wurde filtriert, mit Aceton digeriert und mit Aceton und mit Äther gewaschen, wobei ein schwach-gelbes Pulver (133 g) 7-[3-Amino-3-(2-thienyI)-DL-propionamido]-3-

(5-methyI-l,3.4-thiadiazol-2-yl)thiomethy['3-cephem4-ciarbonsäure, F. 185 bis 186°G (Zers.) erhalten wurde. Nachdem die so erhaltene Mutterlauge ebenfalls unter Vermindertem Druck konzentriert Worden war, Wurde das Konzentrat mit Aceton und Äther gewaschen, wobei das gleiche Produkt (1,1 g) erhallen wurde» Gesamtausbeute; 2,43 g,

IR(Nujol)

3300,1780,1660,1630,1580,1520 crh-' UV (Phosphatpuffer, pH 6,4)

A_m„ 232 πιμ, E= 286

λ,Α 273 mn, E= 237

Beispiel 3

7-[3-(N-tert.-ButoxycarbonyIamino)-3-phenyl-DL-propionamido]-3-(3-methyl-1.2,4-thiadiazol-5-yl)thio- methyiö-cepnem^-carbonsaure (2,ög) wurde mit

Ameisensäure umgesetzt, wobei 7-(3-Amino-3-phenyl-DL-propionamido)-3-(3-methyl-1,2,4-thiadiazoI-5-yl)-

thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure (1,8 g), F. 135 bis 140⁰C (Zers.) erhalten wurde.

UV(Phosphatpuffer, pH 6,4)

Beispiel 4

Zu einem Gemisch von 7-[3-(N-tert.-Butoxycarbonyl_t äiiiino)-3-phenyl-DL-propionamido]cephalosporansäu- -' re (2 g) und 5-Methyl-l,3,4-thiadiazol-2-thiol (0,5 g) in ;Phosphatpuffer (pH 6,4, 60 ml) wurde nach und nach langsam Natriumhydrogencarbonat (0,5 g) gegeben. Die J.'erhaltene Lösung wurde 6 Stunden bei 60⁰C gerührt, abgekühlt und mit Äther geschüttelt. Die wäßrige Schicht wurde abgetrennt, mit 10%iger Salzsäure unter Kühlen auf pH 2 eingestellt und mit Äthylacetat extrahiert. Die organische Schicht wurde nacheinander mit Wasser und einer gesättigten wäßrigen Kochsalzlösung geweschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck konzentriert. Der erhaltene Rückstand wurde mit Äther digeriert, wobei ein Pulver _Λ (0,85 g) von 7-[3-(N-tert-Butoxycarbonylamino)-3-phenyl-DL-propionamido]-3-(5-methyl-13,4-thiadiazoI-2-yl)-thiomethyI-3-cephem-4-carbonsäure erhalten wurde. Dieses Pulver wurde in Äthylacetat gelöst Dann wurde der größte Teil des Äthylacetats unter vermindertem Druck entfernt Nach dem Abkühlen wurde der Niederschlag abfiltriert und getrocknet, wobei die gewünschte Verbindung (0,55 g), F. 148 bis 154°C erhalten wurde.

IR(NuJoI)

3350,1775,1710,1685,1660,1525 cm-· UV (Phosphatpuffer pH 6,4)

propionamidö]-3-[l -methyl-1 -H-letrazol-5-yl]thiomethyl-3-cepheffi-4-carbofisäure erhalten Wurde.

Beispiel 6

S-fN-tert'Butoxycarbonylaminoj-S-^-thieny^DL-propionylchlorid und 7-Ariiino-3-(l -methyl- lH-tetrazol-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäüre Wurden als Ausgangsstoffe in analoger Weise wie in den obigen Beispielen beschrieben behandelt, wobei 7-[3-Αιτίίηο^ (2-thienyl)-DL-propionarriido]-3-( 1-methyl-IH-tetfäzol-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure erhalten wurde.

Vergleichsbeispiel

Zum Nachweis der überlegenen antibakteriellen Wirksamkeit der erfindungsgemäßen Verbindungen wurden die nachstehend beschriebenen Vergleichsversüche durchgeführt, deren Ergebnisse in den weiter unten folgenden Tauellen zusammengefaßt sind.
Es wurde die antibakterielle Wirksamkeit

Die Weiterverarbeitung von gewünschtem Endprodukt erfolgt analog Beispiel 1.

Beispiel 5

3-[N-tert-Butoxycarbonylamino]-3-phenyl-DL-propionylchlorid und 7-Amino-3-[l-methyI-lH-tetrazoI-5-yl]thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure als Ausgangsprodukte wurden in analoger Weise wie in den obigen Beispielen behandelt, wobei 7-[3-Amino-3-phenyI-DL-der

folgenden Verbindungen miteinander verglichen:

Verbindung A:

7-(3-Amino-3-phenyl-DL-propionamido)-3-(3-methyll,2,4-thiadiazol-5-yl)thiomethyl-3-

cephem-4-carbonsäure (beschrieben in dem obigen

Beispiel 3);
Verbindung B:

7-[3-Amino-3-(2-thienyl)-DL-propionamido]-3-( 1 -methyl-1 H-tetrazol-5-yl)thiomethyl-3-

cephem-4-carbonsäure (beschrieben in dem obigen

Beispiel 6);
Verbindung C:

7-D-et-PhenylglycylcephaIosporansäure (Handelsname »Cefaloglycin«, beschrieben in Beispiel 1 der

DE-OS 16 70 600);
Verbindung D:

7-D-Mande!amido-3-(l-methyl-1.2,3,4-tetra-

zol-5-thiomethyI)-d³-cephem-4-carbonsäure
(Handelsname »Cefamandol«, beschrieben in Bp·-

spiel 4 der DE-OS 20 18 600);
Verbindung E:

Cefalexin.

45 Testverfahren

Die bakterielle Aktivität in vitro wurde ermittelt unter Anwendung des Zweifach-Agarplatten-Verdünnungsverfahrens.

Eine Ösenfüllung einer Übernachtkultur jedes der in den nachfolgenden Tabellen angegebenen Mikroorgahismen-Teststämme in Trypticase-Soja-Brühe (10⁸ lebensfähige Zellen pro ml) wurde auf einem Herzinfusions-Agar (HI-Agar) ausgestrichen* der abgestufte

Konzentrationen der jeweils untersuchten Verbindung enthielt und es wurde die minimale Hemmkonzentration (MIC), ausgedrückt in μg/ml, nach 20stündiger Inkubation bei 37°Cbestimmt

Versuchsergebnjs
TabeUe(A)

Mikroorganismen-Teststamm

Untersuchte Verbindung
ACDE

Staphylococcus
aureus 213

0,78 25 1,56 6,25

12

Fortsetzung

Mikrobfgänismen-Teststamm

Untersuchte Verbindung ACDE

Stäphylococcüs aureus 226

Tabelle (B)

0,78 12,5 1,56 6,^5

Mikroorganismenteststamfn

Untersuchte Verbindung BCDE

E. GoIi NIHJ JG-2 6,25 25 12,5

Klebsieila 3,13 200 50 6,25

pneumoniae 418

Aus den vorstehenden Tabellen ergibt sich, daß die 20 tibakterielle Aktivität aufwiesen, die derjenigen der erfiridungsgemäßeh Verbindungen A und B bei den bekannten Vergleichsprodukte G, D und E um vorgenannten Mikröörganismen-Teststämmen eine an-^ mindestens 100% überlegen waren.

Claims

Patentansprüche:

1. 7-fJ?-Aminoacyiamino]-3-substituierte-3-cephem-4-carbonsäure-Derivate, gekennzeichnet durch die allgemeine Formel

H-C-CH₂CONH

COOM

(I)

worin bedeuten:

Ri eine Phenyl- oder Thienylgruppe,

S-Methyl-l^-thiadiazolyi-,

25

30

2-MethyI-2H-tetrazoIylgruppe und
M ein Was-.erstoffatom oder ein nicht-toxisches, pharmazeutisch verträgliches Kation.

2. 7-[3-Amino-3-phenyI-DL-propionamido]-3-(3-methyl-1,2.4-thiadiazoI-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure.

3. 7-[3-Amino-3-(2-thienyl)-DL-propionamido]-3-(1 -methyl-1 H-tetrazoI-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure.

4. Pharmazeutisches Mittel, dadurch gekennzeichnet daß es als Wirkstoff eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 3 in Mischung mit einem pharmazeutisch verträglichen Träger oder Verdünnungsmittel enthält

R,

H -C-CH₃CONH

I
χ

5. Verfahren zur Herstellung von 7-[/?-Aminoacylamino]-3-substituierten-3-cephem-4-carbonsäure-Derivaten gemäß den Ansprüchen 1 bis 3 dadurch gekennzeichnet, daß man in an sich bekannter Weise