DE19859611C2

DE19859611C2 - Fibrin glue granules and process for their production

Info

Publication number: DE19859611C2
Application number: DE19859611A
Authority: DE
Inventors: Mirna Rapp
Original assignee: Aventis Behring GmbH
Current assignee: CSL Behring GmbH Deutschland
Priority date: 1998-12-23
Filing date: 1998-12-23
Publication date: 2003-07-03
Anticipated expiration: 2018-12-24
Also published as: DE19859611A1

Description

Gegenstand der Erfindung ist ein rieselfähiges Fibrinklebergranulat, das alle zur Bildung eines stabilen Fibringels erforderlichen Substanzen enthält und direkt zur Wundverklebung eingesetzt werden kann. Es wird durch die Sprühtrocknung in der Wirbelschicht mittels eines Fluidisationsgases erzeugt.The invention relates to a free-flowing granular fibrin glue, all for Formation of a stable fibrin gel contains necessary substances and directly for Wound adhesive can be used. It is spray dried in the Fluidized bed generated by means of a fluidizing gas.

Es ist bekannt, daß nach der Entstehung einer Wunde die Wundheilung durch eine Aktivierungskaskade mehrerer hintereinandergeschalteter Gerinnungsfaktoren ein geleitet wird. Daraus resultiert am Ende die Reaktion zwischen dem aktivierten Thrombin und Fibrinogen in Gegenwart von Calziumionen zur Bildung einer Fibrin matrix, die schließlich die Wunde abdeckt und somit eine Hämostase bewirkt. Diese Fibrinmatrix wird durch den aktivierten Faktor XIII (F XIIIa) über zusätzliche kovalente Bindungen weiter verfestigt, wodurch deren mechanische Stabilität und Resistenz gegen einen vorzeitigen proteolytischen Abbau erhöht wird.It is known that after the formation of a wound, wound healing by a Activation cascade of several coagulation factors connected in series is directed. This ultimately results in the reaction between the activated Thrombin and fibrinogen in the presence of calcium ions to form a fibrin matrix that finally covers the wound and thus causes hemostasis. This Fibrin matrix is activated by factor XIII (F XIIIa) via additional covalent Bonds further solidified, increasing their mechanical stability and resistance is increased against premature proteolytic degradation.

In der modernen Chirurgie gewinnt die Hämostase durch Fibrinklebung zunehmend an Bedeutung, da es sich bei dem sogenannten Fibrinkleber um ein gut verträgliches und die Wundheilung förderndes Biomaterial handelt. Diese Methode eignet sich hervorragend zur Hämostase von stark blutenden Wunden bei Operationen an paren chymatösen, inneren Organen, bei Hauttransplantationen, in der Notfallchirurgie bei inneren und äußeren Verletzungen, vor allem aber auch zur unterstützenden Abdich tung von Nähten zur Vermeidung postoperativer Blutungen. In der HNO- und Ge sichts-Chirurgie wird für die Heilung äußerer Wunden der Fibrinkleber dem Naht verschluß aus kosmetischen Gründen vorgezogen. Auch wird der Fibrinkleber zuneh mend in der endoskopischen Chirurgie z. B. zur Blutstillung von Magengeschwüren eingesetzt.In modern surgery, hemostasis is increasingly gaining through fibrin gluing of importance, since the so-called fibrin glue is a well tolerated and biomaterial that promotes wound healing. This method is suitable excellent for hemostasis of heavily bleeding wounds during operations on paren chymatic, internal organs, for skin grafts, in emergency surgery internal and external injuries, but above all for supportive sealing sutures to prevent postoperative bleeding. In the ENT and Ge Visible surgery is used to heal external sores using fibrin glue closure preferred for cosmetic reasons. The fibrin glue is also increasing mend in endoscopic surgery e.g. B. for hemostasis of gastric ulcers used.

Die heute im Handel befindlichen Fibrinkleber wie Beriplast® (Centeon Pharma GmbH, Marburg, Deutschland) enthalten neben anorganischen Salzen und Aminosäu ren, die aus dem Humanplasma gewonnenen Gerinnungsfaktoren Fibrinogen, Throm bin und Faktor XIII, zusätzlich auch Albumin und Fibronektin zur Förderung der Wund heilung. Obwohl das Präparat sehr gute biochemische und hämostatische Eigen schaften aufweist, bedarf es einer aufwendigen Vorbereitung vor seiner Anwendung. Die voneinander getrennten Fibrinogen- und Thrombinlyophilisate werden separat aufgelöst, in zwei voneinander getrennten Spritzen aufgezogen und in eine spezielle Halterung/Vorrichtung eingespannt. Dieses Verfahren erfordert neben viel Zeit auch gut geschultes Personal. Eine Variante des Fibrinklebers wird als Tissucol® (Immuno AG, Wien, Österreich) wird bereits in fertig gelöster Form in Spritzen in den Handel gebracht, ist jedoch nur bei tiefen Temperaturen von -20°C lagerfähig und muß vor der Anwendung im Wasserbad aufgetaut werden. Somit finden beide Varianten des Fibrinklebers keine Anwendung in Situationen, wo ein gebrauchsfertiger und sofort ohne Vorbereitungen einsetzbarer Fibrinkleber von Nöten ist. Außerdem wäre ein gebrauchsfertiger und gut dosierbarer Fibrinkleber auch deshalb kostengünstiger, weil überschüssiges Material weder unnötig vorbereitet noch verworfen zu werden braucht.Fibrin glues such as Beriplast® (Centeon Pharma GmbH, Marburg, Germany) contain in addition to inorganic salts and amino acid ren, the coagulation factors fibrinogen, throm am and factor XIII, in addition also albumin and fibronectin to promote the wound cure. Although the preparation has very good biochemical and hemostatic properties features, extensive preparation is required before use. The separate fibrinogen and thrombin lyophilisates are separated dissolved, drawn up in two separate syringes and into a special one Bracket / device clamped. In addition to a lot of time, this procedure also takes time well-trained staff. A variant of the fibrin adhesive is called Tissucol® (Immuno AG, Vienna, Austria) is already sold in syringes in a fully dissolved form brought, but is only storable at low temperatures of -20 ° C and must be be thawed in a water bath. So both variants of the Fibrin glue does not apply in situations where a ready to use and immediate Fibrin glue that can be used without preparations is required. It would also be a Ready-to-use and easy-to-dose fibrin glue is also cheaper because Excess material does not need to be prepared or disposed of unnecessarily.

Eine mögliche Verbesserung der Handhabung des Fibrinklebers könnte ein Einkom ponentenkleber sein, der alle zur Bildung des Fibrins nötigen Komponenten in einem Kompartiment beinhaltet. Die Entwicklung eines Einkomponentenklebers in einer wässrigen Lösung ist allerdings in der Praxis sehr schwer realisierbar. Eine Möglichkeit besteht allenfalls darin, die Komponenten des Fibrinklebers im getrockneten Zustand zu mischen, womit sich diese nach Applikation auf der Wunde in der Blutflüs sigkeit oder dem Wundexsudat lösen und in situ eine Fibrinmatrix ausbilden, die eine Hämostase bewirkt. Dafür ist auch notwendig, das naturgemäß schwer lösliche Fibrinogen in eine derartige trockene Form zu bringen, aus der es rasch in Lösung geht und dabei sofort mit dem Thrombin reagiert.A possible improvement in the handling of the fibrin glue could be an income be component glue, all the components necessary for the formation of fibrin in one Compartment includes. The development of a one-component adhesive in one aqueous solution is, however, very difficult to implement in practice. A possibility consists at most in the components of the fibrin glue in the dried Mix state, which means that after application to the wound in the bloodstream dissolve liquid or wound exudate and form a fibrin matrix in situ, the one Causes hemostasis. For this is also necessary, which is naturally difficult to dissolve Bring fibrinogen into such a dry form from which it quickly dissolves goes and immediately reacts with the thrombin.

Es hat auch schon Versuche gegeben, mit einem gezielten Lyophilisationsverfahren Partikel zu entwickeln, die Fibrinogen oder Thrombin enthalten und nach der Herstel lung miteinander vermischt auf der Wunde aktiviert werden. So wird in der Internatio nalen Patentanmeldung WO 97/44015 A1 die Herstellung sogenannter Mikropartikel auf Fibrinogen- oder Thrombinbasis beschrieben, die jeweils einzeln sprühgetrocknet werden. Diese Mikropartikel bestehen zu über 90% aus Körnchen mit einer Größe bis zum 20 µm. Sie sollen gut löslich sein und können miteinander vermischt zur Wund heilung eingesetzt werden. Ein Nachteil dieser Mikropartikel ist allerdings, daß es sich dabei um ein sehr stark staubendes Pulver handelt, wodurch eine direkte Applikation wie das Aufstreuen auf eine Wunde nicht möglich ist. Ein derartiges Pulver benötigt daher ein spezielles Applikationssystem, was seine Handhabung und klinische Indika tionen drastisch einschränkt.There have also been attempts with a targeted lyophilization process Develop particles that contain fibrinogen or thrombin and according to the manufacturer mixed with each other can be activated on the wound. So in the internatio nalen patent application WO 97/44015 A1 the production of so-called microparticles described on fibrinogen or thrombin basis, each spray dried individually become. These microparticles consist of over 90% granules with a size up to for 20 µm. They should be readily soluble and can be mixed to form a wound healing can be used. A disadvantage of these microparticles, however, is that they are it is a very dusty powder, which means that it can be applied directly how sprinkling on a wound is not possible. Such a powder is required therefore a special application system, what its handling and clinical indicators restrictions drastically.

Es stellte sich deshalb die Aufgabe, ein Fibrinklebergranulat zu entwickeln, das gut löslich, rieselfähig und nicht staubend ist und damit direkt auf die Wunde aufgestreut werden kann z. B. nach dem Prinzip eines Salzstreuers.The task therefore was to develop a fibrin glue granulate that was good is soluble, free-flowing and not dusty and is therefore sprinkled directly onto the wound can be z. B. on the principle of a salt shaker.

Diese Aufgabe wird erfindungsgemäß durch ein rieselfähiges Fibrinklebergranulat gelöst, das Thrombin, Faktor XIII, Fibrinogen und ein Calziumsalz in Granulatkörnchen mit einer Partikelgröße von über 50 bis etwa 1000 µm, vorzugsweise mit einer Parti kelgröße von 100 bis 200 µm enthält. Aufgrund dieser Partikelgröße ist das erfin dungsgemäße Fibrinklebergranulat nicht staubend, gut löslich und rieselfähig und kann hervorragend auf eine Wundfläche oder ein feuchtes Gewebe aufgetragen werden, wo es sofort eine Fibrinmatrix ausbildet.According to the invention, this object is achieved by a free-flowing granular fibrin adhesive dissolved, the thrombin, factor XIII, fibrinogen and a calcium salt in granules with a particle size of over 50 to about 1000 microns, preferably with a particle contains from 100 to 200 µm. This is invented due to this particle size Fibrin adhesive granules according to the invention are not dusty, readily soluble and free-flowing and can be applied excellently on a wound surface or a damp tissue where it immediately forms a fibrin matrix.

Einem derartigen Fibrinklebergranulat können auch noch Albumin, Fibronektin, Ami nosäuren und physiologisch verträgliche anorganische Salze zugesetzt werden. Es kann außerdem als ein Freisetzungssystem für biologische, pflanzliche und/oder synthetische Faktoren verwendet werden. Diese Faktoren können die Wundheilung unterstützen oder als Antifibrinolytika, Antibiotika, Chemotherapeutika oder Immunmo dulatoren wirken. Sie werden dem Fibrinklebergranulat während des Sprühtrock nungsprozesses zugesetzt.Such fibrin glue granules can also albumin, fibronectin, Ami noacids and physiologically acceptable inorganic salts are added. It can also be used as a release system for biological, plant and / or synthetic factors are used. These factors can affect wound healing support or as antifibrinolytics, antibiotics, chemotherapeutics or immunmo dulators work. They become the fibrin glue granulate during the spray coat added process.

Ein geeignetes Verfahrensprinzip für die Herstellung des erfindungsgemäßen Fibrin klebergranulats ist bereits aus der Internationalen Patentanmeldung WO 96/15849 A1 bekannt. Dort ist ein Verfahren zur Trocknung von Blutplasma, Blutplasmafraktionen oder daraus gewonnen Blutplasmaprodukten beschrieben, bei dem das Behandlungs gut im flüssigen oder gelösten Zustand in einen evakuierbaren Behälter gesprüht wird, wodurch die Trocknung - bis zur Granulatform - mittels eines Fluidisationsgases in der Wirbelschicht durchgeführt wird. Auf Fibrinogen und Thrombin kann dieses Verfahren jedoch nicht ohne weiteres angewendet werden, da diese Substanzen bekannterweise nach Kontakt mit wässrigen Lösungen zu Fibrin reagieren. Deshalb kommt die An wendung wässriger Lösungen für die Sprühtrocknung dieser Komponenten nicht in Frage. Um trotzdem beide Komponenten in einem Partikel zu erhalten, werden die Komponenten erfindungsgemäß in einem organischen Lösungsmittel suspendiert und daraus sprühgetrocknet. Fibrinogen, Thrombin und Faktor XIII lassen sich in organi schen Lösungsmitteln wie den niederen Alkoholen, Aceton, Nitrilen, flüssigen Karbon säureestern, Ethern, Chloroform, Dimethylformamid und Dimethylsulfoxid mehr oder weniger homogen suspendieren, ohne daß sie eine Reaktion zu Fibrin zeigen. Nach Entfernung des organischen Lösungsmittels sind sie in wässriger Phase wieder zur Fibrinbildung befähigt. A suitable process principle for the production of the fibrin according to the invention Adhesive granules are already from the international patent application WO 96/15849 A1 known. There is a process for drying blood plasma, blood plasma fractions or blood plasma products obtained therefrom, in which the treatment is sprayed well into an evacuable container in liquid or dissolved state, whereby the drying - up to the granulate form - by means of a fluidizing gas in the Fluidized bed is carried out. This procedure can be used on fibrinogen and thrombin however, are not readily used, as these substances are known react to fibrin after contact with aqueous solutions. That's why the arrives Do not use aqueous solutions for spray drying these components Question. In order to still get both components in one particle, the Components suspended according to the invention in an organic solvent and spray dried from it. Fibrinogen, thrombin and factor XIII can be organized solvents such as lower alcohols, acetone, nitriles, liquid carbon acid esters, ethers, chloroform, dimethylformamide and dimethyl sulfoxide more or suspend less homogeneously without showing a reaction to fibrin. To Removal of the organic solvent they are again in the aqueous phase Enables fibrin formation.

Erfindungsgemäß erfolgt die Sprühtrocknung dabei entweder durch das Top-Spray- Verfahren, bei dem die Flüssigkeit im Gegenstrom zum Fluidisationsverfahren geführt wird oder im Gleichstrom (Bottom-Spray-Verfahren). Durch das Einsprühen des flüssigen Behandlungsgutes in den evakuierbaren Behälter durch eine geeignete Düse wird eine feine Verteilung erreicht. Das Fluidisationsgas dient dabei sowohl zur Ver wirbelung des zu behandelnden Gutes als auch zur Wärmeübertragung. Deshalb wird ein erwärmtes Gas als Fluidisationsgas eingesetzt. Durch die Messung der Produkt temperatur während des Wirbelschichtprozesses und einer darauf basierenden Prozeßsteuerung kann eine produktschonende Trocknung eingehalten werden. Als Fluidisationsgas kann entweder Luft oder ein Inertgas wie Stickstoff eingesetzt wer den. Die Trocknung wird dabei so lange fortgeführt, bis das Behandlungsgut in fein verteilter Granulatform und einer Partikelgröße von 50 bis etwa 1000 µm, vorzugswei se von 100 bis 200 µm vorliegt.According to the invention, spray drying is carried out either by the top spray Process in which the liquid flows countercurrent to the fluidization process is or in direct current (bottom spray method). By spraying the liquid material to be treated in the evacuable container through a suitable nozzle a fine distribution is achieved. The fluidizing gas serves both for ver whirling of the material to be treated as well as for heat transfer. That is why a heated gas is used as the fluidizing gas. By measuring the product temperature during the fluidized bed process and a process based on it Process control allows gentle drying of the product. As Fluidizing gas can be either air or an inert gas such as nitrogen the. The drying is continued until the material to be treated is fine distributed granular form and a particle size of 50 to about 1000 microns, preferably two se from 100 to 200 µm is present.

Das erfindungsgemäße Fibrinklebergranulat kann mit oder ohne ein in den evakuier baren Behälter vorgelegtes Trägermaterial hergestellt werden. Als Trägermaterial kommen dabei vor allem Zucker und Zuckeralkohole wie Sacharose, Lactose oder Mannit in Betracht, die gut bioverträglich sind.The fibrin glue granulate according to the invention can be evacuated with or without one baren presented container material can be produced. As a carrier material come mainly sugar and sugar alcohols such as sucrose, or lactose Mannitol, which are well biocompatible.

Ein besonders bevorzugtes Verfahren besteht in einer zweistufigen Sprühtrocknung, bei der zuerst ein Fibrinogengranulat hergestellt wird. Dieses Granulat kann neben Fibrinogen auch andere Proteine, Kohlenhydrate, Aminosäuren und physiologisch verträglich anorganische Salze enthalten. Die Partikelgröße dieses Granulates beträgt mehr als 50 bis etwa 1000 µm, bevorzugt wird jedoch eine Partikelgröße von 70 bis 200 µm. Auf dieses Fibrinogengranulat wird eine feine Thrombin-Suspension in einem organischen Lösungsmittel aufgesprüht, die bereits gelöste Calziumionen enthält. Die Konzentration der Calziumionen beträgt 1 bis 100 mmol/l, vorzugsweise 10 bis 50 mmol/l. Man erhält auf diese Weise ein Fibrinklebergranulat mit einer Partikelgröße, die vorzugsweise zwischen 100 und 200 µm liegt und eine körnige, sehr gut lösliche Struktur aufweist. Dabei entstehen keine kompakten Partikel wie kleine Kügelchen, sondern ein Granulat mit vielen feinen Kanälen. Dadurch erreicht man eine relativ große Partikelgröße, wodurch das Produkt gleichzeitig staubfrei und gut löslich wird, ähnlich wie der bekannte Instant-Kaffee. Dieses Granulat läßt sich hervorragend auf eine Wundfläche aufstreuen und bildet nach Kontakt mit einem wässrigen Medium sofort ein festes und elastisches Fibringel.A particularly preferred process consists of two-stage spray drying, in which a fibrinogen granulate is first produced. This granulate can besides Fibrinogen also contains other proteins, carbohydrates, amino acids and physiologically contain compatible inorganic salts. The particle size of this granulate is more than 50 to about 1000 μm, but a particle size of 70 to is preferred 200 µm. A fine thrombin suspension in one is placed on these fibrinogen granules sprayed organic solvent that already contains dissolved calcium ions. The Concentration of calcium ions is 1 to 100 mmol / l, preferably 10 to 50 mmol / l. In this way, fibrin adhesive granules with a particle size of preferably between 100 and 200 microns and a granular, very soluble Has structure. There are no compact particles like small balls, but a granulate with many fine channels. This way you achieve a relative large particle size, which makes the product dust-free and easily soluble, similar to the well-known instant coffee. This granulate can be excellently opened sprinkle on a wound surface and forms after contact with an aqueous medium immediately a firm and elastic fibrin gel.

Das erfindungsgemäße Fibrinklebergranulat ist jedoch auch durch Sprühtrocknung von Fibrinogen-Konzentrat aus einer wässrigen Lösung auf eine Vorlage z. B. Mannit, erhätlich. Dabei wird zunächst ein Fibrinogen/Mannit-Granulat erhalten, auf das dann anschließend Thrombin/Calziumsalz, z. B. aus isopropanolischer Suspension, aufge sprüht wird. Das organische Lösungsmittel verhindert die Bildung von Fibrin nach Kontakt von Fibrinogen mit dem Thrombin.However, the fibrin glue granules according to the invention can also be spray dried of fibrinogen concentrate from an aqueous solution on a template z. B. mannitol, erhätlich. First, a fibrinogen / mannitol granulate is obtained, then on then thrombin / calcium salt, e.g. B. from isopropanolic suspension is sprayed. The organic solvent prevents the formation of fibrin Contact of fibrinogen with the thrombin.

Schließlich ist es aber auch möglich, separat Fibrinogen- und Thrombin-Granulate mit der vorstehend genannten Partikelgröße in getrennten Verfahren herzustellen, wobei beide Substanzen aus wässrigen Lösungen sprühgetrocknet werden können. Aller dings benötigt man dann bei der Herstellung des Thrombingranulates einen ausrei chenden Anteil an Trägermaterial, da im Fibrinkleber die Menge an Thrombin ge wichtsmäßig um den Faktor 10² bis 10³ kleiner ist als diejenige von Fibrinogen. Diese beiden Granulate werden miteinander vermischt und können dann entsprechend zur Hämostase und Wundheilung eingesetzt werden.Finally, however, it is also possible to separately produce fibrinogen and thrombin granules with the abovementioned particle size in separate processes, it being possible for both substances to be spray-dried from aqueous solutions. However, you then need a sufficient proportion of carrier material in the production of the thrombin granules, since the amount of thrombin in the fibrin glue is by a factor of 10 ² to 10 ³ smaller than that of fibrinogen. These two granules are mixed together and can then be used for hemostasis and wound healing.

Die nach den vorstehend genannten Verfahren hergestellten Fibrinklebergranulate wurden anschließend auf ihre biomechanischen Eigenschaften untersucht und dabei die folgenden Ergebnisse erzielt:
Reisskraft nach in vitro Hautklebung (Klebefläche: 2,25 cm²) The fibrin glue granules produced by the abovementioned methods were then examined for their biomechanical properties and the following results were achieved:
Tear strength after in vitro skin adhesive (adhesive surface: 2.25 cm ² )

Ergebnis einer Vergleichsstudie anhand einer Randomisierungsliste zu der Reisskraft des einheitlichen Granulates (Thrombin, Fibrinogen und Faktor XIII in einem Partikel), des Granulat-Gemisches (Fibrinogen-Granulat + Thrombin-Granulat) und des flüssi gen Fibrinklebers (Beriplast®):
Result of a comparative study based on a randomization list on the tensile strength of the uniform granulate (thrombin, fibrinogen and factor XIII in one particle), the granulate mixture (fibrinogen granulate + thrombin granulate) and the liquid fibrin glue (Beriplast®):

Die gemessenen Werte zeigen deutlich den Vorteil des einheitlichen Granulates gegenüber dem Granulatgemisch bezüglich der biomechanischen Eigenschaften. Die Menge an aktiven Komponenten war in allen drei Testsubstanzen annähernd iden tisch.The measured values clearly show the advantage of the uniform granulate compared to the granulate mixture in terms of biomechanical properties. The The amount of active components was approximately the same in all three test substances table.

Das erfindungsgemäße rieselfähige Fibrinklebergranulat unterscheidet sich durch eine einfachere Handhabung von den bisher bekannten Fibrinklebern, da keine Vorberei tungsmaßnahmen notwendig sind und es sich stets im gebrauchsfertigen Zustand befindet. Es ist deshalb ganz besonders für die Notfallchirurgie geeignet. Es hat außerdem den Vorteil der außerordentlich einfachen Anwendung durch Auftragen auf die Wundflächen nach der Art eines Salzstreuers. Es eignet sich hervorragend für chirurgische Anwendungen, bei denen eine rasche Hämostase durch Aufsaugen von Blut und gleichzeitige Fibrinklebung erreicht werden sollen.The free-flowing fibrin glue granulate according to the invention differs by one easier handling of the previously known fibrin glue, because no preparation measures are necessary and it is always in a ready-to-use condition located. It is therefore particularly suitable for emergency surgery. It has also the advantage of extremely easy application by application the wound surfaces like a salt shaker. It is great for surgical applications in which rapid hemostasis by suction of Blood and simultaneous fibrin adhesion should be achieved.

Die Erfindung wird durch die nachfolgenden Beispiele erläutert.The invention is illustrated by the following examples.

example 1 a) Production of fibrinogen granules without submission

Eine 10%ige Proteinlösung von Beriplast®-Fibrinogenkonzentrat, enthaltend als aktive Bestandteile: 65 bis 115 mg Fibrinogen und 40 bis 80 Einheiten F XIII in 1 ml, wurde nach dem Top-Spray-Verfahren in Wirbelschicht sprühgetrocknet. Dieses Verfahren wurde in einer GPCG 1-Anlage der Firma Glatt GmbH durchgeführt und ist in der Internationalen Patentanmeldung WO 96/15849 beansprucht und detailliert beschrieben. Die Bedingungen sind:
Eingangstemperatur: 37°C
Ausgangstemperatur: 30°C
Sprühdruck: 0,3 megaPa
Sprührate: 3,2 g/minA 10% protein solution of Beriplast® fibrinogen concentrate, containing as active ingredients: 65 to 115 mg of fibrinogen and 40 to 80 units of F XIII in 1 ml, was spray-dried in a fluidized bed using the top spray method. This process was carried out in a GPCG 1 system from Glatt GmbH and is claimed and described in detail in international patent application WO 96/15849. The conditions are:
Inlet temperature: 37 ° C
Initial temperature: 30 ° C
Spray pressure: 0.3 megaPa
Spray rate: 3.2 g / min

Das derart hergestellte Fibrinogen-Granulat hatte eine mittlere Partikelgröße von 100 µm und war sehr gut löslich. Analytische Aktivitätsmessungen haben gezeigt, daß die Aktivität von Fibrinogen und F XIII durch den Sprühtrocknungsprozeß bei diesen Bedingungen nicht beeinträchtigt wird.The fibrinogen granules produced in this way had an average particle size of 100 µm and was very soluble. Analytical activity measurements have shown that the activity of fibrinogen and F XIII by the spray drying process these conditions are not affected.

b) Production of fibrinogen granules with template

200 g Mannit oder Albumin wurden in die Sprühtrocknungskammer vorgelegt. Auf die Vorlage wurde 100 g Fibrinogenkonzentrat in Wirbelschicht unter folgenden Bedingung aufgesprüht:
Eingangstemperatur: 30°C
Ausgangstemperatur: 24°C
Sprühdruck: 0,25 megaPa
Sprührate: 3,0-8,0 g/min200 g of mannitol or albumin were placed in the spray drying chamber. 100 g of fibrinogen concentrate in a fluidized bed were sprayed onto the template under the following conditions:
Inlet temperature: 30 ° C
Initial temperature: 24 ° C
Spray pressure: 0.25 megaPa
Spray rate: 3.0-8.0 g / min

Es resultierte ein rieselfähiges und gut lösliches Granulat mit einer mittleren Partikelgröße von 100 µm, bei dem die Fibrinogen- und F XIII-Aktivität voll wiederfindbar ist.The result was a free-flowing and readily soluble granulate with a medium size Particle size of 100 microns, in which the fibrinogen and F XIII activity fully is recoverable.

c) Production of fibrin glue granules

Auf das in Beispiel a) oder b) hergestellte Fibrinogen-Granulat wurde eine isopropanolische Thrombin/CaCl₂-Suspension aufgesprüht. Der Prozeß lief unter folgenden Bedingungen ab:
Eingangstemperatur: 30°C
Ausgangstemperatur: 25°C
Sprühdruck: 0,25 megaPa
Sprührate: 3,0-8,0 g/minAn isopropanolic thrombin / CaCl ₂ suspension was sprayed onto the fibrinogen granules produced in example a) or b). The process ran under the following conditions:
Inlet temperature: 30 ° C
Initial temperature: 25 ° C
Spray pressure: 0.25 megaPa
Spray rate: 3.0-8.0 g / min

Das auf diese Weise hergestellte Fibrinkleber-Granulat mit einer mittleren Partikelgröße von 100 µm war rieselfähig, staubt nicht und bildete sofort nach Kontakt mit einer wässrigen Lösung ein stabiles, d. h. durch F XIII kovalent vernetztes Fibringerinnsel. The fibrin glue granules produced in this way with a medium Particle size of 100 µm was free-flowing, does not dust and immediately replicated Contact with an aqueous solution is a stable, i.e. H. covalently by F XIII cross-linked fibrin clot.

Comparative example Production of thrombin granules

Auf eine Vorlage von Mannit oder Humanserumalbumin wurde eine wässrige 0,3%ige Thrombin-Lösung aufgesprüht. Die Bedingungen waren wie folgt:
Eingangstemperatur: 30°C
Ausgangstemperatur: 23°C
Sprühdruck: 0,25 megaPa
Sprührate: 4,2 g/minAn aqueous 0.3% thrombin solution was sprayed onto a template of mannitol or human serum albumin. The conditions were as follows:
Inlet temperature: 30 ° C
Initial temperature: 23 ° C
Spray pressure: 0.25 megaPa
Spray rate: 4.2 g / min

Die mittlere Partikelgröße des gebildeten Granulates betrug ca. 65 µm. Es war rieselfähig und nicht staubend. Es ließ sich gut mit dem Fibrinogen-Granulat mischen und war auch als Fibrinkleber einsetzbar.The average particle size of the granules formed was approximately 65 μm. It was free-flowing and not dusty. It worked well with the fibrinogen granules mix and was also used as a fibrin glue.

Claims

1. Free-flowing fibrin glue granules, characterized in that it contains uniform granules with a particle size of more than 50 to 1000 microns, which contain thrombin, factor XIII, fibrinogen and a calcium salt.

2. fibrin glue granules according to claim 1, characterized in that the Granules have a particle size of 100 to 200 microns.

3. fibrin glue granules according to claims 1 and 2, characterized records that it additionally contains at least one substance from one of the following Substance classes contains: antifibrinolytics, antibiotics, chemotherapeutics and Im munmodulatoren.

4. fibrin glue granules according to claims 1 and 3, characterized records that albumin and / or fibronectin is also included.

5. A process for the production of the fibrin glue granules of claims 1 to 4, characterized in that components of the fibrin glue in an organic Suspended solvent and in an evacuable container using a Fluidisa tion gas in the fluidized bed up to a particle size of over 50 to 1000 µm be spray dried.

6. The method according to claim 5, characterized in that it with an in the container submitted carrier material is produced.

7. The method according to claim 5, characterized in that first a Fibrinogen granules are produced by spray drying from an aqueous solution which is a suspension containing thrombin and a calcium salt in an organi solvent is sprayed on.

8. Use of a fibrin glue granulate according to claims 1 to 4, characterized in that it is used for wound healing in surgery, the Ge weaving therapy and / or as a carrier material for biological factors.