DE102010012546A1 - Processing and optimizing cell- or tissue material for cytology and histology, comprises subjecting cell- or tissue material to dewatering, embedding and/or blocking, preferably in paraffin, where the material is coated with gelatin layer - Google Patents
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Abstract
Description
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Aufarbeitung und Optimierung von Zell- oder Gewebematerial für die Zytologie bzw. Histologie, bei dem das gewonnene Zell- oder Gewebematerial zumindest die Schritte Entwässern, Einbetten und/oder Einblocken, insbesondere in Paraffin, durchläuft.The invention relates to a method for the processing and optimization of cell or tissue material for cytology or histology, in which the cell or tissue material obtained undergoes at least the steps of dewatering, embedding and / or blocking in particular in paraffin.
Des Weiteren betrifft die Erfindung die Verwendung eines Gelatine-Membranfilters für ein solches Verfahren.Furthermore, the invention relates to the use of a gelatin membrane filter for such a method.
Verfahren der eingangs genannten Art sind aus dem Bereich der Histologie bzw. der Zytologie seit langem bekannt. Dabei wird Zell- oder Gewebematerial aufgearbeitet und optimiert, welches beispielsweise mit zytologischen Abstrichtechniken oder nicht invasiven oder minimal invasiven Entnahmemethoden gewonnen wurde.Methods of the type mentioned are known from the field of histology and cytology for a long time. In the process, cell or tissue material is worked up and optimized, which was obtained, for example, by means of cytological extraction techniques or non-invasive or minimally invasive removal methods.
So werden Zell-, oder Gewebeproben für eine nachfolgende zytologische bzw. histologische Begutachtung im Allgemeinen durch Abstriche mit sterilen Wattetupfern oder Spateln, oder durch minimal invasive Eingriffe (Bürstenbiopsie, Exzisionsbiopsie, Punktion) erhalten.For example, cell or tissue specimens for subsequent cytological or histological evaluation are generally obtained by swabbing with sterile cotton swabs or spatulas, or by minimally invasive procedures (brush biopsy, excisional biopsy, puncture).
Um eine mikroskopische Beurteilung zu ermöglichen, muss das Zell- bzw. Gewebematerial danach aufgearbeitet und optimiert werden. Das gängige Verfahren stellt hierbei die Paraffineinbettung nach Formalinfixierung (FFPE) dar. Dabei wird das Material zunächst mit Formalin zur Stabilisierung des Gewerbes fixiert, ggf. zugeschnitten, und danach mit Alkohol entwässert. Danach kann das Gewebe mit erwärmtem, verflüssigtem Paraffin durchtränkt und eingebettet werden. Ggf. wird auch eine Einblockung in Paraffin vorgenommen.In order to enable a microscopic assessment, the cell or tissue material must then be worked up and optimized. The common method here is the paraffin embedding after Formalinfixierung (FFPE). The material is first fixed with formalin to stabilize the industry, possibly cut to size, and then dehydrated with alcohol. Thereafter, the tissue can be soaked with heated, liquefied paraffin and embedded. Possibly. is also a Einblockung made in paraffin.
Aus der eingeblockten Probe können danach Dünnschnitte am Mikrotom erstellt werden, welche einer mikroskopischen Beurteilung zugänglich sind. Das Einfärben von solchem Zell- oder Gewebematerial ist in diesem Zusammenhang ebenfalls bekannt.Thin sections of the microtome can then be created from the blocked sample, which are accessible to a microscopic assessment. The staining of such cell or tissue material is also known in this context.
Die bekannten Verfahren zur Aufarbeitung und Optimierung von Zell- oder Gewebematerial für die Zytologie bzw. Histologie weisen jedoch Nachteile auf.The known methods for processing and optimization of cell or tissue material for cytology or histology, however, have disadvantages.
Bei der Gewinnung von zytologischen Abstrichen durch geeignete Instrumente, z. B. Spateln oder Bürsten, bleibt beim Ausstrich der größere Teil des gewonnenen Zell- und/oder Gewebematerials am Entnahmegerät hängen, so dass nur ein kleiner Teil zur mikroskopischen Beurteilung gelangt.In the extraction of cytological smears by suitable instruments, eg. As spatulas or brushes, the smear of the greater part of the cell and / or tissue material obtained on the sampling device remains, so that only a small part reaches the microscopic assessment.
Ein Einbringen der Instrumente in geeignete Flüssigkeiten, Vereinzelung der Zellen und Aufarbeitung von Filtraten oder Zentrifugaten – die sogenannte „flüssigkeitsbasierte” oder „Dünnschichtzytologie” hat den Nachteil, dass gerade die diagnostisch besonders relevanten Zellverbände und -„straßen” aufgelöst werden, auch hier gelangt nur ein Teil des gewonnenen Materials, allerdings zufällig verteilt, zur mikroskopischen Untersuchung.The introduction of the instruments into suitable liquids, separation of the cells and processing of filtrates or centrifugates - the so-called "liquid-based" or "Dünnschichtzytologie" has the disadvantage that just the diagnostically particularly relevant cell associations and - "streets" are dissolved, even here only passes a part of the material obtained, but randomly distributed, for microscopic examination.
Das sogenannte „Blockverfahren” d. h. Einblocken von Restmaterial nach Zentrifugation in Paraffin, wird seit langem v. a. in der extragenitalen Zytologie angewendet, spielt aber wegen der geringen Gewebe-/Zellausbeute bei der herkömmlichen Aufarbeitung von Abstrichen eine untergeordnete Rolle, da bei dem für die Paraffineinbettung nötigen Entwässerungsverfahren ein hoher Prozentsatz der einzelnen Zellen und kleinsten Gewebefragmente verloren geht.The so-called "block process" d. H. Blocking of residual material after centrifugation in paraffin, has long been v. a. used in extragenital cytology, but plays a minor role in the conventional workup of smears because of the low tissue / cell yield, since in the dewatering process required for paraffin embedding a high percentage of the individual cells and smallest tissue fragments is lost.
Auch bei der Fixierung des Materials, z. B. auf Papier, erfordert die herkömmliche Paraffineinbettung das „Abkratzen” des Materials mit der Pinzette, und dies bedeutet wiederum einen Verlust und eine Schädigung der einzelnen Zellen und Gewebefragmente.Also in the fixation of the material, for. On paper, conventional paraffin embedding requires "scraping" of the material with the forceps, and this in turn means loss and damage to individual cells and tissue fragments.
Besonders nachteilig ist dann, dass im Paraffinblock das Zell- oder Gewebematerial in verschiedenen Ebenen liegt, wodurch auch bei Stufenschnitten, d. h. mehreren sequentiellen Schnitten, nicht alle Elemente für die mikroskopische Untersuchung erfasst werden können.It is then particularly disadvantageous that in the paraffin block the cell or tissue material lies in different planes, whereby even in step cuts, ie. H. several sequential cuts, not all elements can be detected for microscopic examination.
Somit muss festgestellt werden, dass bei der alleinigen Untersuchung von Zellausstrichen, bei der flüssigkeitsbasierten Zytologie, aber auch bei Anwendung der konventionellen Zellblock-Methode, aussagekräftiges Zell- oder Gewebematerial zwangsläufig verloren geht und kohärente Gewebeanteile, welche im Schnittpräparat diagnostisch am aussagekräftigsten sind, unter Umständen ganz verloren gehen oder unvollständig zur Darstellung gelangen.Thus, it must be noted that in the sole study of cell smears, in the liquid-based cytology, but also when using the conventional cell block method, meaningful cell or tissue material is inevitably lost and coherent tissue components, which are diagnostically most meaningful in the cutting preparation, may completely lost or incomplete.
Der vorliegenden Erfindung liegt daher die Aufgabe zugrunde, ein Verfahren zur Aufarbeitung und Optimierung von Zell- oder Gewebematerial der eingangs genannten Art derart auszugestalten und weiterzubilden, dass eine schonende und verlustarme Aufarbeitung und Optimierung von Zell- oder Gewebematerial bei gleichzeitig optimaler Beurteilbarkeit des Materials in nachfolgenden Untersuchungen realisiert ist.The present invention is therefore based on the object, a method for processing and optimization of cell or tissue material of the type mentioned in such a way and further, that a gentle and low-loss workup and optimization of cell or tissue material at the same time optimal assessability of the material in subsequent Investigations is realized.
Diese Aufgabe ist durch ein Verfahren mit den Merkmalen des Anspruchs 1 gelöst.This object is achieved by a method having the features of claim 1.
Erfindungsgemäß ist erkannt worden, dass eine besonders schonende und verlustarme Aufarbeitung gewährleistet ist, falls das Zell- oder Gewebematerial vor dem Entwässerungsschritt zumindest teilweise mit einer Gelatine aufweisenden Schicht ummantelt wird.According to the invention it has been recognized that a particularly gentle and low-loss workup is ensured if the cell or tissue material before the dewatering step at least partially coated with a gelatin-containing layer.
Die Gelatine aufweisende Schicht schützt das Material vor mechanischen Einwirkungen und verhindert eine Auflösung von kleinsten Gewebefragmenten. Des Weiteren ist in besonders raffinierter Weise verhindert, dass Zellen oder Gewebefragmente innerhalb eines Gefäßes bzw. einer Kapsel, in der nachfolgend die Entwässerung durchgeführt wird, dispergieren. Das Material bleibt vielmehr aufgrund der Ummantelung mit der Gelatine aufweisenden Schicht am selben Ort konzentriert, wodurch eine nachfolgende Untersuchung, insbesondere anhand von Dünnschichtschnitten, erheblich vereinfacht oder überhaupt erst möglich wird.The gelatin-containing layer protects the material against mechanical influences and prevents the dissolution of minute tissue fragments. Furthermore, it is particularly sophisticated to prevent cells or tissue fragments from disperse within a vessel or capsule where dehydration is subsequently performed. On the contrary, the material remains concentrated at the same place due to the coating with the gelatin-containing layer, as a result of which a subsequent examination, in particular based on thin-layer sections, is considerably simplified or even possible at all.
Im Rahmen der vorliegenden Erfindung ist gefunden worden, dass eine Gelatine aufweisende Schicht in überraschender Weise eine hervorragende Eignung zur Ummantelung des Zell- oder Gewebematerials bereitstellt. Die Schicht hält einem nachfolgenden Entwässerungsschritt Stand und lässt sich problemlos mitschneiden. Darüber hinaus ist erkannt worden, dass je nach Ausgestaltung der Gelatine aufweisenden Schicht diese dazu neigt, sich beim Befeuchten oder beim Auftropfen von Zell-/Gewebematerial unwillkürlich „einzurollen”, und so das aufgebrachte Zell- oder Gewebematerial teilweise oder vollständig in vorteilhafter Weise zu ummanteln.Within the scope of the present invention, it has been found that a gelatin-containing layer surprisingly provides excellent suitability for encasing the cell or tissue material. The layer withstands a subsequent dewatering step and can be easily cut. In addition, it has been recognized that, depending on the design of the gelatin-containing layer, it tends to "involute" upon moistening or when dripping cell / tissue material, thus partially or completely covering the applied cell or tissue material in an advantageous manner ,
Mit dem erfindungsgemäßen Verfahren können mikroskopische Begutachtungen, welche bisher lediglich an Zellausstrichen vorgenommen werden konnten, nunmehr am histologischen Schnitt von zusammenhängenden Gewebefragmenten vorgenommen werden. Hierdurch ist die Aussagekraft einer histologischen bzw. zytologischen Untersuchung stark erhöht, da bestimmte Veränderungen nur anhand einer Untersuchung von zusammenhängenden Gewebefragmenten festgestellt werden können.With the method according to the invention, microscopic examinations, which hitherto could only be performed on cell smears, can now be carried out on the histological section of coherent tissue fragments. As a result, the validity of a histological or cytological examination is greatly increased, since certain changes can only be determined by an examination of coherent tissue fragments.
Das erfindungsgemäße Verfahren ist besonders vorteilhaft, falls kleinste Zellproben oder Gewebefragmente mit minimalem Materialverlust mikroskopisch zu begutachten sind.The inventive method is particularly advantageous if the smallest cell samples or tissue fragments are to be examined microscopically with minimal loss of material.
Dabei ist das – ggf. farblich gekennzeichnete – Zell- oder Gewebematerial mit der vorliegenden Erfindung mit wenigen Stufenschnitten nahezu vollständig in anzufertigenden histologischen Schnitten erfassbar.In this case, the - optionally color-coded - cell or tissue material with the present invention with a few step cuts almost completely recorded in histological sections to be made.
Folglich ist ein Verfahren zur Aufarbeitung und Optimierung von Zell- oder Gewebematerial für die Zytologie bzw. Histologie bereitgestellt, mit dem eine schonende und verlustarme Aufarbeitung und Optimierung von Zell- oder Gewebematerial bei gleichzeitig optimaler Beurteilbarkeit des Materials in nachfolgenden Untersuchungen realisiert ist.Consequently, a method for processing and optimization of cell or tissue material for the cytology or histology is provided, with the gentle and low-loss processing and optimization of cell or tissue material while optimally assessing the material is realized in subsequent investigations.
In einer bevorzugten Ausführungsform des erfindungsgemäßen Verfahrens wird als Gelatine aufweisende Schicht eine vollständig aus Gelatine bestehende Schicht verwendet. Eine solche Schicht ist problemlos schneidbar und mit allen eingesetzten Chemikalien verträglich bzw. übersteht weitere Verfahrensschritte zur Aufarbeitung und Optimierung des Materials.In a preferred embodiment of the method according to the invention, a gelatin-comprising layer is used as a layer consisting entirely of gelatin. Such a layer is easily cut and compatible with all chemicals used or survives further process steps for processing and optimization of the material.
In einer weiteren zweckmäßigen Ausgestaltung wird die Gelatine aufweisende Schicht aus zumindest einem dünnen, blattartigen Schichtelement und/oder aus zumindest einem membranartigen Schichtelement gebildet. Beispielsweise kann ein Gelatine aufweisendes oder aus Gelatine bestehendes Blatt oder dergleichen Membran vorgelegt werden, auf das bzw. auf die das Zellmaterial aufbringbar ist. Wie bereits erwähnt, ist im Rahmen der Erfindung festgestellt worden, dass dünne Gelatineblätter bzw. -membrane die Eigenschaft aufweisen können, sich bei Befeuchtung einzurollen. Unter Zuhilfenahme dieses Effekts kann daher bereits mit einem einzigen Blatt bzw. einer einzigen Membran als Schichtelement eine teilweise oder vollständige Ummantelung von Zell- oder Gewebematerial erreicht werden.In a further expedient embodiment, the gelatin-comprising layer is formed from at least one thin, sheet-like layer element and / or from at least one membrane-like layer element. For example, a gelatin-containing or consisting of gelatin sheet or the like membrane may be presented, on or to which the cell material can be applied. As already mentioned, it has been found in the context of the invention that thin gelatin sheets or membranes can have the property of curling when moistened. With the aid of this effect, a partial or complete sheathing of cell or tissue material can therefore already be achieved with a single sheet or a single membrane as the layer element.
In einer besonders bevorzugten Weiterbildung des Erfindungsgedankens wird die Gelatine aufweisende Schicht aus zumindest einem Gelatine-Membranfilter gebildet. Im Rahmen der vorliegenden Erfindung ist erkannt worden, dass üblicherweise bei der Bestimmung der Anzahl und Art von Luftkeimen verwendete Gelatine-Membranfilter in überraschender Weise eine hervorragende Eignung für eine Verwendung innerhalb des erfindungsgemäßen Verfahrens aufweisen. Dabei hat sich insbesondere die Verwendung eines Gelatine-Membranfilters mit einer Porengröße von 3,0 μm als vorteilhaft erwiesen. Solche Filter werden beispielsweise von der Firma Sartorius AG, Göttingen, DE zum Sammeln und Analysieren von Luftkeimen und Viren vertrieben. Es ist festgestellt worden, dass solche Gelatine-Membranfilter aufgetropftes oder aufgebrachtes Zellmaterial umschließen, sobald diese befeuchtet werden. Mit anderen Worten rollt sich der Gelatine-Membranfilter beim Befeuchten selbsttätig ein und umschließt so das aufgebrachte Zell- oder Gewebematerial „teigtaschenartig”. Das so ummantelte Material kann anschließend problemlos entwässert und eingebettet werden. Des Weiteren ist der Gelatine-Membranfilter problemlos im Mikrotom mitschneidbar. Alternativ ist auch die Verwendung von Gelatinefiltern denkbar, wie sie aus der Fotografie bekannt sind. Selbstverständlich kann alternativ auch jedes geeignete, blattartige und Gelatine aufweisende Material zur Bildung der Gelatine enthaltenden Schicht verwendet werden.In a particularly preferred embodiment of the inventive idea, the gelatin-comprising layer is formed from at least one gelatin membrane filter. In the context of the present invention, it has been recognized that gelatin membrane filters commonly used in the determination of the number and type of airborne germs surprisingly have an outstanding suitability for use within the method according to the invention. In particular, the use of a gelatin membrane filter having a pore size of 3.0 microns has proven to be advantageous. Such filters are sold for example by the company Sartorius AG, Göttingen, DE for collecting and analyzing airborne germs and viruses. It has been found that such gelatin membrane filters encapsulate dropped or deposited cell material once wetted. In other words, the gelatin membrane filter curls automatically when moistened and thus encloses the applied cell or tissue material "pastry-like". The coated material can then be easily dewatered and embedded. Furthermore, the gelatin membrane filter can easily be cut in the microtome. Alternatively, the use of gelatin filters is conceivable, as they are known from photography. Of course, any suitable sheet-like and gelatin-containing material may alternatively be used to form the gelatin-containing layer.
In einer weiteren Ausgestaltung der Erfindung wird das Zell- oder Gewebematerial zumindest an der Unterseite von der Gelatine aufweisenden Schicht umgeben, ggf. wobei ein Schichtelement mit einer vieleckigen oder sternförmigen Grundfläche verwendet wird. Ein Zuschnitt eines Schichtelements als Vieleck oder in Sternform hat dabei den Vorteil, dass sich dieses nach dem Aufbringen von Zell- oder Gewebematerial und dem damit einhergehenden oder zusätzlichen Befeuchten so einrollen kann, dass eine vollständige Ummantelung darstellbar ist. Selbstverständlich kann dabei ein Einrollen des Materials auch manuell vorgenommen bzw. unterstützt werden.In a further embodiment of the invention, the cell or tissue material Surrounding at least on the bottom of the gelatin layer, optionally where a layer element is used with a polygonal or star-shaped base. A blank of a layer element as a polygon or star has the advantage that this can roll up after the application of cell or tissue material and the associated or additional moistening so that a complete sheathing can be displayed. Of course, a rolling of the material can also be done manually or supported.
In diesem Zusammenhang ist eine Weiterbildung des Verfahrens bevorzugt, bei der das Zell- oder Gewebematerial von der Gelatine aufweisenden Schicht auch an den Seiten und ggf. auch an der Oberseite umgeben wird, ggf. wobei als obere Deckschicht ein separates Schichtelement verwendet wird. Eine derart erreichte vollständige Ummantelung des Zell- oder Gewebematerials ist hinsichtlich einer Schonung und Konzentration des Materials bevorzugt. Dazu kann das aufgebrachte Material mit einem weiteren, Gelatine aufweisenden Schichtelement als Deckschicht versehen werden.In this context, a further development of the method is preferred in which the cell or tissue material is surrounded by the gelatin-containing layer also on the sides and possibly also on the upper side, optionally where a separate layer element is used as the upper covering layer. Such a complete covering of the cell or tissue material is preferred in terms of conservation and concentration of the material. For this purpose, the applied material can be provided with a further gelatin-comprising layer element as a cover layer.
Wie bereits erwähnt, ist es zweckmäßig, das gewonnene und ggf. markierte Zell- oder Gewebematerial in einer insbesondere formalinhaltigen Suspension auf die Gelatine aufweisende Schicht aufzutropfen. Dabei werden die Zellen bzw. die Gewebefragmente besonders schonend behandelt, gleichzeitig lassen sich diese so in optimaler Weise innerhalb der entstehenden Ummantelung konzentrieren. Bei der Verwendung eines vorgenannten Gelatine-Membranfilters kann die aufgetropfte Flüssigkeit abfließen, wobei das Zell- oder Gewebematerial auf dem Filter verbleibt. Gleichzeitig kann aufgrund der Benetzung eine Ummantelung des Materials durch Einrollen der Membran erreicht werden. Da es sich bei Formalin um das gängige Mittel zur Fixierung des Materials handelt, wird es üblicherweise in einer solchen Suspension vorhanden sein. Selbstverständlich können jedoch auch andere Reagenzien und/oder lediglich Wasser das Trägermedium für die Suspension bilden.As already mentioned, it is expedient to drop the recovered and optionally marked cell or tissue material in a suspension containing in particular a formalin-containing layer onto the gelatin. At the same time, the cells or the tissue fragments are treated with particular care, while at the same time they can be optimally concentrated within the resulting sheath. When using an aforementioned gelatin membrane filter, the dripped liquid may flow off leaving the cell or tissue material on the filter. At the same time due to the wetting a sheathing of the material can be achieved by rolling the membrane. Since formalin is the common means of fixing the material, it will usually be present in such a suspension. Of course, however, other reagents and / or only water can form the carrier medium for the suspension.
In einer besonders zweckmäßigen Ausführungsform wird das gewonnene Zell- oder Gewebematerial auf eine in einer Einbettkapsel vorgelegte, Gelatine aufweisende Schicht aufgebracht, insbesondere wobei eine schneidbare Einbettkapsel verwendet wird. Mit anderen Worten kann eine Gelatine aufweisende Schicht, insbesondere ein Gelatineblatt oder eine Gelatinemembran, in eine – an sich bekannte – Einbettkapsel eingebracht und dort ggf. fixiert werden. Dabei kann insbesondere ein Gelatine-Membranfilter verwendet werden, welcher auf die entsprechende Größe zugeschnitten worden ist. Dabei kann die Gelatine aufweisende Schicht auch eine zweckmäßige Stern- oder Vieleckform aufweisen. Wird danach das Zell- oder Gewebematerial auf die Gelatine aufweisende Schicht aufgebracht bzw. aufgetropft, kann sich diese einrollen und so das Material umschließen. Ggf. kann das Material mit einer weiteren Deckschicht versehen werden. Eine solche Deckschicht kann auch im Kapseldeckel fixiert und damit bereits vorbereitet sein. Die Verwendung von schneidbaren Einbettkapseln (z. B. Paraform Biopsy Cassette System Tissue Tek der Firma Sakura) bietet dabei den Vorteil, dass eine nochmalige Entnahme des entwässerten Zell- oder Gewebematerials aus der Einbettkapsel zur Einblockung entfallen kann. Dadurch wird ein weiterer Materialverlust vermieden. Des Weiteren ist sichergestellt, dass das Material in der einmal festgelegten Position im Block verbleibt. Eine Dispersion ist aufgrund der Gelatineummantelung und der Klippfixierung in der Einbettkassette nicht mehr möglich.In a particularly expedient embodiment, the cell or tissue material obtained is applied to a gelatin-comprising layer provided in a embedding capsule, in particular a cuttable embedding capsule being used. In other words, a gelatin-containing layer, in particular a gelatin sheet or a gelatin membrane, can be introduced into a potting capsule known per se and optionally fixed there. In this case, in particular, a gelatin membrane filter can be used, which has been cut to the appropriate size. In this case, the gelatin-containing layer may also have an expedient star or polygonal shape. If the cell or tissue material is then applied or dripped onto the gelatin-containing layer, it can curl up and thus enclose the material. Possibly. The material can be provided with another cover layer. Such a cover layer can also be fixed in the capsule lid and thus already prepared. The use of cuttable embedding capsules (eg Paraform Biopsy Cassette System Tissue Tek from Sakura) offers the advantage that a repeated removal of the dehydrated cell or tissue material from the embedding capsule for blocking can be dispensed with. This avoids further loss of material. Furthermore, it is ensured that the material remains in the once defined position in the block. Dispersion is no longer possible due to the gelatin coating and the Klippfixierung in Einbettkassette.
In diesem Zusammenhang ist eine Ausführungsform des Verfahrens bevorzugt, bei der das in die Einbettkapsel eingebrachte Zell- oder Gewebematerial nachfolgend auch in der Einbettkapsel entwässert und eingebettet und/oder eingeblockt wird.In this connection, an embodiment of the method is preferred in which the cell or tissue material introduced into the embedding capsule is subsequently also dehydrated and embedded in the embedding capsule and / or blocked.
Das Zell- oder Gewebematerial kann durch einen Abstrich, insbesondere eine Bürstenentnahme, aus einem Körpererguss, durch eine Feinnadelaspiration oder durch eine Feinnadelpunktion gewonnen werden.The cell or tissue material may be obtained by a smear, in particular brush removal, effusion, fine needle aspiration, or fine needle aspiration.
Für die Entnahme von Zellen und kleinsten Gewebefragmenten hat sich dabei im Zusammenhang mit dem erfindungsgemäßen Verfahren die Verwendung hierfür geeigneter Bürsten als besonders vorteilhaft herausgestellt. Insbesondere kann Material aus plattenepithelialen Schleimhäuten besonders vorteilhaft mit einer gedrehten Bürste mit stumpfer Öse (am Besatz geschlossen) und mit zusätzlich angebogener Öse am Griffende gewonnen werden. Dabei hat sich ein Besatz von ca. 8 mm Durchmesser, eine Besatlänge von ca. 10 mm, eine Gesamtlänge von ca. 150 mm mit einem Drehdraht von 1,0 mm und einem Besatzmaterial aus Polyamid 6 mit ca. 0,15 mm Durchmesser (beispielsweise vertrieben durch Firma Kullen GmbH und Co. KG, Reutlingen, DE) als besonders vorteilhaft herausgestellt.For the removal of cells and the smallest tissue fragments, the use of brushes suitable for this purpose has proven to be particularly advantageous in connection with the method according to the invention. In particular, material from slab epithelial mucous membranes can be obtained particularly advantageously with a twisted brush with a blunt eyelet (closed at the trimming) and with additionally bent eyelet at the handle end. It has a stocking of about 8 mm in diameter, a Besatlänge of about 10 mm, a total length of about 150 mm with a rotary wire of 1.0 mm and a trimming material made of polyamide 6 with about 0.15 mm diameter ( for example, sold by Kullen GmbH and Co. KG, Reutlingen, DE) has been found to be particularly advantageous.
Sofern Zentrifugate bzw. Stanzzylinder vorliegen, können diese direkt eingekapselt werden.If centrifuges or punching cylinders are present, they can be encapsulated directly.
Schließlich wird mit den Merkmalen von Anspruch 11 die Verwendung eines Gelatine-Membranfilters für ein erfindungsgemäßes Verfahren vorgeschlagen. Dabei ist insbesondere auf einen Gelatine-Membranfilter für die Luftkeim-Bestimmung abzustellen, welcher die bereits genannten Spezifikationen aufweisen kann. Dazu wird auf obenstehende Ausführungen verwiesen. Im Rahmen der vorliegenden Erfindung lassen sich jedoch auch andere, insbesondere blatt- oder membranartige, Gelatine aufweisende Schichten verwenden, beispielsweise Gelatineblätter oder auch aus der Fotografie bekannte Gelatinefilter.Finally, the use of a gelatin membrane filter for a method according to the invention is proposed with the features of claim 11. It is particularly important to focus on a gelatin membrane filter for airborne determination, which may have the specifications already mentioned. Reference is made to the above remarks. In the context of the present invention, however, it is also possible to use other, in particular sheet-like or membrane-like, gelatin-comprising layers, for example gelatine sheets or gelatin filters known from photography.
Es sei hervorgehoben, dass die voranstehend beschriebenen Ausführungsbeispiele die beanspruchte Lehre erörtern, diese jedoch nicht auf die Ausführungsbeispiele einschränken. Es gibt vielmehr verschiedene Möglichkeiten, die Lehre der vorliegenden Erfindung in vorteilhafter Weise auszugestalten und weiterzubilden. Dazu ist einerseits auf die nachgeordneten Ansprüche zu verweisen. Andererseits sind weitere mannigfaltige Ausgestaltungen und Weiterbildungen der erfindungsgemäßen Lehre denkbar, ohne den Rahmen des erfinderischen Gedankens zu verlassen.It should be emphasized that the embodiments described above discuss the claimed teaching, but do not limit it to the embodiments. Rather, there are various ways to advantageously design and develop the teaching of the present invention. On the one hand, reference should be made to the subordinate claims. On the other hand, further various embodiments and developments of the teaching of the invention are conceivable without departing from the scope of the inventive concept.
Claims (11)
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2010
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