Die Erfindung betrifft eine Zellzüchtungsvorrichtung für die Züchtung bis hin zur Analyse der
Zellen in den zell-, bzw. molekularbiologischen Arbeiten. Die Vorrichtung besteht aus einer
Zellzüchtungskammer, einem Träger, auf dem die Zellen wachsen, einer Färbungskammer
und einer Mikroskopiereinrichtung. Bei einer Anwendung dieser Vorrichtung werden die
Zellen in einem gewünschten Wachstumsmedium in der mit dem Träger in Kontakt stehenden
Kammer gegeben und das Medium wird dann inkubiert, so dass die Gewebekultur auf dem
Träger wachsen kann. Ohne das flüssige Medium zu entfernen, werden die Träger aus der
Kammer herausgeholt und gegebenenfalls durch Neue ersetzt. Die auf dem Träger wachsende
Gewebekultur kann dann wie gewünscht behandelt werden.The invention relates to a cell growth device for the cultivation up to the analysis of the
Cells in cell and molecular biological work. The device consists of a
Cell growth chamber, a support on which the cells grow, a staining chamber
and a microscope. When using this device, the
Cells in a desired growth medium in contact with the support
Chamber is given and the medium is then incubated so that the tissue culture on the
Carrier can grow. Without removing the liquid medium, the carriers are removed from the
Chamber removed and replaced with new ones if necessary. The one growing on the carrier
Tissue culture can then be treated as desired.
Es ist in molekularbiologischer Forschung, so wie in der medizinischen Laborpraxis häufig
erwünscht, verschiedene Zellen oder Gewebe in bestimmten Medien zu züchten, um dann die
Kultur zu untersuchen. Die Anwendung dieses Verfahren ist insbesondere in der
Tumorforschung oder in virologischen Untersuchungen gegeben.It is common in molecular biological research, as in medical laboratory practice
Desired to grow different cells or tissues in certain media, then the
To examine culture. The application of this method is particularly in the
Given tumor research or in virological studies.
Im allgemeinen werden nach dem Stand der Technik Gewebekulturen folgendermaßen
erhalten. Die zu züchtenden Zellen werden in einem flüssigen Wachstumsmedium in den
Kulturflaschen oder Kulturschalen inkubiert. Nach dem die Zellen gewachsen sind, werden
die Zellen aus den Behältern herausgeholt und auf einen Träger gebracht, um sie
immunzytochemisch bzw. molekularbiologisch (FISH, FICTION) untersuchen zu können.
Dieses Verfahren ist geeignet für die Zellen, die in der Suspension wachsen. Das Verfahren
stellt aber ein Problem für die Analyse der Zellen, die auf Adhärenz wachsen, dar. Um solche
Analyse durchführen zu können, müssen die Zellen erst vom Boden abgelöst und auf einen
geeigneten Objektträger gebracht werden. Dabei können die Zellen einige für die
Untersuchung-gewünschten Merkmale verlieren. Um diesem Problem zu entkommen, werden
die Zellen auf die Deckgläschen in Kulturschalen gezüchtet. Die Zellen auf den Deckgläschen
werden dann direkt analysiert. Dieses Verfahren wird sehr oft in der Molekularbiologie
praktiziert. Ein großes Problem bei diesem Verfahren liegt darin, dass die Deckgläschen in
den Kulturschalen sehr dünn und leicht verschiebbar sind. Bei einer unvorsichtigen
Bewegung der Schale (z. B. beim Mikroskopieren) werden die Deckgläschen leicht
aufeinander geschoben. Dieses Problem kann behoben werden, in dem die kleineren
Kulturschalen, in denen nur ein Deckgläschen platziert ist, benutzt werden. Mit dieser
Maßnahme kann nur ein Teil der Probleme gelöst werden. Der andere Nachteil dieses
Verfahrens ist, dass die Deckgläschen sehr dünn sind. Die Deckgläschen sind leicht
zerbrechlich, so dass die kleinste Unaufmerksamkeit unangenehme Folgen haben kann. Zum
Beispiel wenn die Deckgläschen auf den Boden fallen, ist es meist sehr schwierig diese
aufzuheben. Ein anderes Problem bei diesen Deckgläschen liegt darin, dass die Seite des
Trägers, auf der die Zellen haften, nicht immer leicht zu erkennen ist.In general, according to the prior art, tissue cultures are as follows
receive. The cells to be grown are in a liquid growth medium in the
Culture bottles or culture dishes incubated. After the cells have grown
the cells are removed from the containers and placed on a carrier to support them
to be able to investigate immunocytochemically or molecular biologically (FISH, FICTION).
This method is suitable for the cells that grow in the suspension. The procedure
poses a problem for the analysis of the cells that grow for adherence
To be able to carry out analysis, the cells must first be detached from the ground and onto one
appropriate slides are brought. The cells can do some for the
Lose investigation-desired features. To escape this problem, be
the cells are grown on the coverslips in culture dishes. The cells on the coverslips
are then analyzed directly. This procedure is very common in molecular biology
practiced. A major problem with this process is that the cover slips in
the culture dishes are very thin and easy to move. With a careless
Movement of the dish (e.g. when microscoping) makes the coverslips easy
pushed onto each other. This problem can be fixed in the smaller one
Culture dishes in which only a cover slip is placed can be used. With this
Measure can only solve some of the problems. The other disadvantage of this
The procedure is that the cover slips are very thin. The coverslips are light
fragile so the slightest inattention can have unpleasant consequences. To the
For example, if the coverslips fall on the floor, it is usually very difficult
repealed. Another problem with these coverslips is that the side of the
Carrier on which the cells adhere is not always easy to see.
Die Firma NUNC (Lab-Tek) vertreibt Chamber Slides aus Glas mit unterschiedlichen
Einheiten mit patent no. 3,726,764. Auf diesen Objektträger können die Zellen gezüchtet
werden, um im nachhinein analysiert zu werden. Der größte Nachteil dieser Kultur-Kammern
liegt darin, dass sie aus Einheiten bzw. Untereinheiten bestehen, welche ein fester Bestandteil
der gesamten Kultur-Kammern sind. Deshalb ist die Nutzung solcher Kammern nur sehr
beschränkt möglich.The company NUNC (Lab-Tek) sells chamber slides made of glass with different
Units with patent no. 3,726,764. The cells can be grown on this slide
to be analyzed afterwards. The biggest disadvantage of these cultural chambers
is that they consist of units or sub-units, which are an integral part
of the entire culture chambers are. Therefore the use of such chambers is only very
limited possible.
Ähnliche Kultur-Kammer sind unter Patentnummern 2238251; 2602241; 4,301,252;
5,605,813 oder 5,618,731 zu finden.Similar culture chambers are available under patent numbers 2238251; 2602241; 4,301,252;
5,605,813 or 5,618,731.
Die vorliegende Erfindung wird die Nachteile der schon patentierten Vorrichtungen wie folgt
lösen:
Die vorliegende Erfindung ist ein komplettes System für die Zellzüchtung bis hin zur Analyse
der Zellen in einem Kit. Das Kit besteht aus einer unbeschichteten speziell für runde bzw.
viereckige Objektträger von einem Durchmesser von 9 bis 20 mm, besser 20 mm, am besten
19 mm ausgebuchteten Petrischalen. Höhe der Ausbuchtung beträgt zwischen 1 bis 2 mm,
besser 1,5 mm, am besten 1,2 mm (Siehe Abb. 1). Die Petrischale hat einen
Durchmesser von 5 cm bis 14 cm, besser 9 cm, am besten 8,9 cm. Das Kit besteht weiterhin
aus runden bzw. viereckigen aus Glas-bestehenden Objektträgern, passend zu den jeweiligen
Ausbuchtungen in den Petrischalen. Die Höhe der Objektträger liegt zwischen 0,5 bis 1,5 mm,
besser 1,2 mm, am besten 1 mm. Die Objektträger sind auf der Unterseite durchgehend,
stellenweise oder an einer Stelle schräg abgeschliffen. Außerdem beinhaltet das Kit eine mit
Silan beschichtete, speziell für runde bzw. viereckige Objektträger von einem Durchmesser
von 9 bis 20 mm, besser 20 mm, am besten 19 mm ausgebuchtete Petrischale. Höhe der
Ausbuchtung beträgt zwischen 1 bis 2 mm, besser 1,5 mm, am besten 1,2 mm (Siehe
Abb. 1). Die Petrischale hat einen Durchmesser von 5 cm bis 14 cm, besser 9 cm, am
besten 8,9 cm. Eine Mikroskopiereinrichtung gehört ebenfalls zu dem Kit. Die
Mikroskopiereinrichtung ist ein aus Kunststoff hergestellter viereckiger Gegenstand mit einer
Höhe von 1 bis 2 mm, besser 1,5 am besten 1,3 mm und einer Länge von 7-9 cm, besser 7,5 cm
und einer Breite von 2-3 cm, besser 2,6 cm. Die Mikroskopiereinrichtung ist für die
mikroskopische Analyse der auf den Objektträgern gewachsenen Zellen vorgesehen. Diese
Einrichtung ist mit Löchern versehen, die auf der oberen Seite der Einrichtung einen
Durchmesser von 1, 2 bis 20 mm und auf der Rückseite einen Durchmesser von 0,9 bis 17 mm
aufweisen.The present invention will solve the disadvantages of the already patented devices as follows:
The present invention is a complete system for cell growth up to the analysis of the cells in a kit. The kit consists of an uncoated Petri dishes specially designed for round or square slides with a diameter of 9 to 20 mm, better 20 mm, preferably 19 mm. The height of the bulge is between 1 and 2 mm, better 1.5 mm, best 1.2 mm (see Fig. 1). The Petri dish has a diameter of 5 cm to 14 cm, better 9 cm, best 8.9 cm. The kit also consists of round or square glass slides, matching the respective bulges in the Petri dishes. The height of the slides is between 0.5 to 1.5 mm, better 1.2 mm, ideally 1 mm. The slides are ground continuously on the underside, in places or at an angle. The kit also includes a petri dish coated with silane, specially for round or square slides with a diameter of 9 to 20 mm, better 20 mm, preferably 19 mm. The height of the bulge is between 1 and 2 mm, better 1.5 mm, best 1.2 mm (see Fig. 1). The Petri dish has a diameter of 5 cm to 14 cm, better 9 cm, best 8.9 cm. A microscope is also part of the kit. The microscope is a square object made of plastic with a height of 1 to 2 mm, better 1.5, best 1.3 mm and a length of 7-9 cm, better 7.5 cm and a width of 2-3 cm , better 2.6 cm. The microscope device is provided for the microscopic analysis of the cells grown on the specimen slides. This device is provided with holes which have a diameter of 1.2 to 20 mm on the upper side of the device and a diameter of 0.9 to 17 mm on the back.
Durch die Platzierung der Objektträger in Ausbuchtungen werden drei Ziele erreicht. Zum
Einen wird das Ausbuchtungsvolumen fast ausgeglichen bzw. ausgefüllt. Zum Anderen
können die Zellen auf dem Objektträger wachsen. Die Ausbuchtungsresthöhe sorgt dafür,
dass die Objektträger sich nicht verschieben können. Somit wird sicher gestellt, dass die
Objektträger beim Transport immer auf ihrer Stelle liegen bleiben. Die Objektträger sind ca.
1 mm dick und sind nicht leicht zerbrechlich. Sie sind auf der Unterseite schräg abgeschliffen.
Diese Maßnahme bietet zwei Vorteile. Die Vorteile bestehen darin, dass zum Einen eine
Grifffläche für die Pinzette geschaffen wird und zum Anderen die Unterseite der Objektträger
markiert ist, und somit die Seite auf der die Zellen wachsen, leicht erkennbar ist. Ein großer
Vorteil dieser Objektträger liegt darin, dass sie leicht zu Hand haben sind und sie können
problemreduziert wie gewünscht beschichtet werden.By placing the slides in bulges, three goals are achieved. To the
The bulge volume is almost balanced or filled out. On the other hand
the cells can grow on the slide. The residual bulge height ensures
that the slides cannot move. This ensures that the
Slides always remain in place during transport. The slides are approx
1 mm thick and are not easily fragile. They are bevelled on the underside.
This measure has two advantages. The advantages are that on the one hand
Grip area for the tweezers and the bottom of the slide
is marked, and thus the side on which the cells grow is easily recognizable. A large
The advantage of these slides is that they are easy to handle and they can
can be coated with reduced problems as required.
Da die Objektträger nicht ein fester Bestandteil der Kulturschale sind, können sie beliebig und
in jeder Zeit entnommen und durch andere ersetzt werden. Durch diese Flexibilität können
viele Versuche optimal gestaltet werden. Was mit den anderen verfügbaren Einrichtungen
nicht ohne Weiteres möglich ist.Since the slides are not an integral part of the culture dish, they can be anything and
removed at any time and replaced by others. This flexibility allows
many attempts can be optimally designed. What about the other facilities available
is not easily possible.
Ein Beispiel für die Anwendung dieser Vorrichtung wäre die Untersuchung der malignen
adhärenten Zellen in der Apoptoseforschung. Die auf dem Objektträger gewachsenen Zellen
können nach photographischer Dokumentation beliebig mit verschiedenen Medikamenten
behandelt werden. Die Objektträger können nach zeitlichen Abständen aus der Kammer
herausgeholt werden. Die auf den Objektträger befindlichen Zellen können dann weiter
immunologisch bzw. molekularbiologisch untersucht werden. Für die Beurteilung können die
Objektträger in der Mikroskopiereinrichtung platziert, eingedeckelt und mikroskopisch
untersucht werden.An example of the application of this device would be the examination of the malignant
adherent cells in apoptosis research. The cells grown on the slide
can, according to photographic documentation, with any medication
be treated. The slides can be removed from the chamber at intervals
be brought out. The cells on the slide can then continue
be examined immunologically or molecular biologically. For the assessment, the
Slides placed in the microscope, capped and microscopic
to be examined.