DE10103196A1 - Absorption and storing of specimens of body fluid for diagnostic purposes comprises applying specimen to soluble microporous substrate, both substrate and specimen being dissolved and analysis carried out on solution produced - Google Patents
Absorption and storing of specimens of body fluid for diagnostic purposes comprises applying specimen to soluble microporous substrate, both substrate and specimen being dissolved and analysis carried out on solution producedInfo
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Abstract
Description
Die Erfindung betrifft die Verwendung einer mikroporösen lös lichen Membran.The invention relates to the use of a microporous solution membrane.
Die Erfindung betrifft weiterhin ein Verfahren zum Aufnehmen und Speichern einer zu analysierenden flüssigen Probe, bei dem die flüssige Probe auf einem Träger aufgebracht wird, auf dem sie eintrocknen und zu einem beliebig späteren Zeitpunkt einem Analyseverfahren zugeführt werden kann.The invention further relates to a method for recording and storing a liquid sample to be analyzed which the liquid sample is applied to a carrier which they dry up and at any later time can be fed to an analysis method.
Die meisten der klinischen diagnostischen Analysen werden heute mit einer Apparatur ausgeführt, die mit flüssigen bio logischen Proben arbeitet. Hierzu ist eine Vielzahl unter schiedlicher diagnostischer Tests bekannt. Sie alle prüfen das Vorhandensein oder die Abwesenheit von spezifischen Mar kern. Immunologische Tests prüfen das Vorhandensein von spe zifischen Antikörpern oder Antigenen im Serum, chemische Tests prüfen das Vorhandensein oder die Abwesenheit von spe zifischen Molekülen im Blut und molekulare biologische Tests arbeiten mit DNS-Extrakten von Blutzellen bzw. Blutkörper chen.Most of the clinical diagnostic analyzes will be today carried out with an apparatus that with liquid bio logical samples works. There is a multitude under different diagnostic tests known. Check them all the presence or absence of specific mar core. Immunological tests check for the presence of spe specific antibodies or antigens in the serum, chemical Tests check the presence or absence of spe specific molecules in the blood and molecular biological tests work with DNA extracts from blood cells or blood cells chen.
So werden viele von diesen Proben von biologischen Flüssig keiten, wie Blut, Serum, Urin oder zerebrospinale Flüssigkeit aufgenommen und in kleinen Röhrchen zur späteren Analyse ge speichert bzw. gelagert. Da die Analysenmethoden der klini schen Chemie immer genauer werden, zum einen wegen verbesserten Apparaturen und zum anderen wegen spezifischeren Reagen tien erfordern die verbesserten Analysemethoden immer weniger Probevolumen.So many of these samples are made from biological fluid such as blood, serum, urine or cerebrospinal fluid recorded and ge in small tubes for later analysis stores or stored. Since the analytical methods of the clini chemistry are becoming more and more precise, partly because of improved Equipment and secondly because of more specific reagents The improved analytical methods require less and less Sample volume.
Für einige von diesen klinischen Tests, welche auf einer ho hen Stufe ausgeführt werden, werden die Proben auf einem kleinen Stück Papier oder Vliesstoff als Träger aufgenommen bzw. gespeichert. Dieser Trägertyp erlaubt einen kleinen Tropfen einer flüssigen Probe zu sammeln und erlaubt nach Trocknung der Probe, entweder bei Raumtemperatur oder durch einen gesteuerten Trocknungsvorgang, eine einfache Lagerung. Ein einfacher Träger aus Papier kann daher helfen, verschie dene Proben zu handhaben und ist geeignet zum Aufbau einer Mustersammlung in einer Art Bibliothek.For some of these clinical tests, which are based on a ho hen stage are executed, the samples are on one small piece of paper or nonwoven as a carrier or saved. This type of carrier allows a small one Collect drops of a liquid sample and allowed after Drying the sample, either at room temperature or by a controlled drying process, easy storage. A simple paper carrier can therefore help to keep it different to handle samples and is suitable for building a Collection of samples in a kind of library.
Beispielsweise bei Neugeborenen wird der sogenannte Guthrie- Test durchgeführt, um Stoffwechselerkrankungen bzw. das Feh len von kritischen Stoffwechselenzymen festzustellen. Dabei werden Bluttropfenproben auf ein Filterpapier als Träger auf gebracht, getrocknet und der Träger in ein Labor zur Analyse geschickt. In der gleichen Weise sammelt und lagert die US- Armee Blutproben von all ihren Soldaten um sie später, falls notwendig, einer DNS-Analyse unterziehen zu können.In newborns, for example, the so-called Guthrie Test performed to identify metabolic diseases or the mistake of critical metabolic enzymes. there blood drop samples are placed on a filter paper as a carrier brought, dried and the carrier into a laboratory for analysis cleverly. In the same way the US collects and stores Army blood samples from all of their soldiers around them later, if necessary to be able to undergo a DNA analysis.
Aus der DE 195 23 061 A1 ist ein Verfahren zur Analyse flüs sigen Probenmaterials bekannt, bei dem flüssiges Probenmate rial auf einen Träger aus einem saugfähigen Matrixmaterial gebracht wird. Bevorzugte faserige saugfähige Matrixmateria lien sind dabei Vliese, Gewebe oder Gewirke.DE 195 23 061 A1 discloses a method for analysis known sample material, in which liquid sample material rial on a carrier made of an absorbent matrix material brought. Preferred fibrous absorbent matrix material lien are nonwovens, woven or knitted fabrics.
Nachteilig bei den bekannten Verfahren ist, dass zur Analyse die getrocknete Probe eluiert, d. h. aus dem Träger ausgewa schen werden muss. Aus der Waschlösung muss zur Analyse das Trägermaterial entfernt werden. Dabei ist nicht sicher, dass der meiste Teil der Probe sich auch wirklich in der flüssigen Phase bzw. Lösung befindet. Der zusätzliche Schritt, die Probe aus dem Trägermaterial auszuwaschen ist lästig und zugleich schwierig zu automatisieren. Dies führt zudem infol ge von Inhomogenitäten des Trägermaterials, wie Filterpapier oder Vliesstoff, und wegen unterschiedlicher Ergebnisse des Eluationsschrittes zu relativ hohen Abweichungen der Analyse ergebnisse.A disadvantage of the known methods is that for analysis the dried sample elutes, d. H. weighed out of the carrier must be For analysis, this must be from the washing solution Carrier material are removed. It is not certain that most of the sample is actually in the liquid Phase or solution. The additional step, the sample Washing out of the carrier material is annoying and difficult to automate at the same time. This also leads to ge of inhomogeneities of the carrier material, such as filter paper or nonwoven, and because of different results of the Elution step to relatively high deviations in the analysis Results.
Aus der WO 99/51765 ist ein Verfahren zum Nachweis von Mikro organismen in Gasen bekannt. Hierzu wird das zu untersuchende Gas zur Sammlung der Mikroorganismen durch ein Gelatinememb ranfilter geströmt, der Gelatinemembranfilter mit den gesam melten Mikroorganismen in einer wässrigen Lösung, dies ein mit dem Mikroorganismen Fluoreszens hervorrufendes enzymatisches Markierungsmittel enthält, aufgelöst, die erhaltene Lösung mit den Mikroorganismen durch eine Analysenmembran filtriert und die auf der Analysenmembran verbleibenden fluoreszieren den Mikroorganismen ausgezählt. Das Verfahren, dass sich grundsätzlich zur Bestimmung einer Keimzahlbelastung der un tersuchten Gase bewährt hat, wird nicht für die Untersuchung von flüssigen Proben eingesetzt. Zum einen wird hier ein zu sätzlicher Verfahrensschritt, nämlich die Filtrierung der Probenlösung mit der aufgelösten Gelatinemembran durchgeführt und zum anderen ist die Aufnahme und Speicherung von flüssi gen Proben, die zu einem späteren Zeitpunkt analysiert werden sollen, in eine andere oben dargestellte Richtung verlaufen.WO 99/51765 describes a method for the detection of micro organisms known in gases. For this, the thing to be examined Gas to collect the microorganisms through a gelatin membrane ran filter, the gelatin membrane filter with the total melded microorganisms in an aqueous solution, this with enzymatic agent which causes fluorescence to the microorganisms The marker contains, dissolved, the solution obtained filtered with the microorganisms through an analysis membrane and the fluorescent remaining on the analysis membrane counted the microorganisms. The procedure that itself basically to determine a bacterial count of the un Gases tested have not been used for the investigation of liquid samples. For one thing, there is a too additional process step, namely the filtration of Sample solution carried out with the dissolved gelatin membrane and on the other hand, the absorption and storage of liquid samples that will be analyzed at a later date should run in another direction shown above.
Lösbare Membranfilter zur Sammlung von Mikroorganismen aus Gasen sind beispielsweise auch aus der DE 11 73 640 und aus der DE 197 50 215 C1 bekannt.Detachable membrane filters for collecting microorganisms Gases are, for example, from DE 11 73 640 and from known from DE 197 50 215 C1.
Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es daher, die bekann ten Verfahren zur Aufnahme und Speicherung einer zu einem späteren Zeitpunkt zu analysierenden flüssigen Probe so zu verbessern, dass sie einfacher und mit einer geringeren Vari ation des späteren Analyseergebnisses durchgeführt werden können. It is therefore an object of the present invention that known methods for recording and storing one at a time liquid sample to be analyzed later improve that they are easier and with less vari ation of the later analysis result can.
Diese Aufgabe wird durch die Verwendung einer mikroporösen löslichen Membran als Träger für die Aufnahme und die Spei cherung einer zu einem späteren Zeitpunkt zu analysierenden flüssigen Probe gelöst.This task is accomplished through the use of a microporous soluble membrane as a carrier for the intake and the Spei backup of one to be analyzed at a later point in time liquid sample dissolved.
Durch die Verwendung einer mikroporösen löslichen Membran, wie sie beispielsweise aus der DE 11 73 640, der DE 197 50 215 C1 und der WO 99/51765 bekannt ist, wird durch deren mik roporöse Struktur vorteilhaft erreicht, dass die flüssige Probe wie in einem Filterpapier oder einem Vliesstoff aufge nommen und gespeichert werden kann. Zugleich wird durch die Verwendung einer löslichen Membran vorteilhaft erreicht, dass auf den unerwünschten und mit Ungenauigkeiten verbundenen Schritt des Auswaschens der getrockneten Probe verzichtet werden kann, da die Membran mit Probe lediglich in einer ent sprechenden Lösung aufgelöst und einem üblichen Analysever fahren zugeführt werden braucht.By using a microporous soluble membrane, as for example from DE 11 73 640, DE 197 50 215 C1 and WO 99/51765 is known, is by their mik Roporous structure advantageously achieved that the liquid Sample as in a filter paper or a nonwoven fabric can be taken and saved. At the same time, the Using a soluble membrane advantageously achieves that on the unwanted and associated with inaccuracies No step of washing out the dried sample can be, since the membrane with sample only in one ent speaking solution and a usual analysis ver driving needs to be fed.
Nach einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung wird als Träger bzw. als Membran eine wasserlösliche Gelatinemembran verwendet. Solche Membranen lassen sich, wie beispielsweise aus der DE 197 50 215 C1 bekannt, leicht herstellen und prob lemlos in wässrigen Lösungen, wie z. B. aus der WO 99/51765 bekannt, auflösen. Grundsätzlich ist es aber auch möglich, die Membran aus einem löslichen Polymer-Material herzustel len. Auch ist es möglich, zur Verbesserung der Handhabung der Gelatinemembran mindestens 1% eines Polymers, wie Polyvinyl pyrrolidon (PVP) oder Polyvinylacetat (PVA), hinzuzufügen.According to a preferred embodiment of the invention is as Carrier or as a membrane, a water-soluble gelatin membrane used. Such membranes can be, for example known from DE 197 50 215 C1, easy to manufacture and prob lemless in aqueous solutions, such as B. from WO 99/51765 known to dissolve. In principle, it is also possible to manufacture the membrane from a soluble polymer material len. It is also possible to improve the handling of the Gelatin membrane at least 1% of a polymer such as polyvinyl pyrrolidone (PVP) or polyvinyl acetate (PVA).
Nach einer weiteren bevorzugten Ausführungsform der Erfindung wird der Membran mindestens ein Reagenz zur Unterstützung der später durchzuführenden Analyse hinzugefügt. Durch die Hinzu fügung von Reagentien kann der Träger bzw. die Membran exakt auf die zu speichernden flüssigen Proben abgestimmt werden. Durch die der Membran zugesetzten Reagentien kann die durchzuführende Analyse mittelbar durch Begünstigung der Speicher eigenschaften der Membran und ihre Wirkung auf die Probe und durch Unterstützung der Auflösung der Membran unterstützt werden. Der Membran können aber auch Reagentien zugesetzt werden, die die später durchzuführende Analyse direkt unter stützen. Es ist aber auch möglich, die die Analyse unterstüt zenden Reagentien in die Lösung zur Auflösung der Membran zu geben. So können Reagentien zugesetzt werden, die spezifische Eigenschaften, die für eine detaillierte Analyse benötigt werden, verbessern bzw. unterstützen. So kann die Notwendig keit bestehen, dass Wachstum von Mikroorganismen zu verhin dern, die Speicherung von Vollblut zu verbessern oder Reagen tien hinzuzufügen, die eine schnelle Lösung von Blutzellen und eine gute Bindung der freigegebenen DNS an die mikroporö se Struktur unterstützen.According to a further preferred embodiment of the invention the membrane will have at least one reagent to support it added analysis to be performed later. By adding Reagents can be added exactly to the carrier or membrane be matched to the liquid samples to be stored. Due to the reagents added to the membrane, the one to be carried out Analysis indirectly by favoring the memory properties of the membrane and its effect on the sample and supported by aiding the dissolution of the membrane become. However, reagents can also be added to the membrane the analysis to be performed later directly below support. But it is also possible to support the analysis reagents into the solution to dissolve the membrane give. So reagents can be added, the specific Properties needed for a detailed analysis become, improve or support. So the necessary There is no possibility of preventing the growth of microorganisms to improve the storage of whole blood or reagent tien add a quick solution of blood cells and good binding of the released DNA to the micropores support this structure.
Nach einer weiteren bevorzugten Ausführungsform der Erfindung ist die Membran auf einem Kunststoffträger angeordnet, aus dem ein mit der Probe versehener Bereich der Membran zur Ana lyse abgetrennt werden kann.According to a further preferred embodiment of the invention the membrane is arranged on a plastic carrier a sample area of the membrane to the ana lysis can be separated.
Durch die Verwendung eines Kunststoffträgers kann die Be schriftung, Lagerung und Versendung von auf die Membran auf gebrachten Proben vereinfacht werden. Der durchzuführenden Analyse vorausgehend wird dann lediglich ein mit der Probe versehener Bereich der Membran von dem Kunststoffträger abge trennt, beispielsweise durch Ausstanzen, Ausdrücken oder Ab brechen, und in wässriger Lösung aufgelöst und in einem her kömmlichen Analyseverfahren analysiert.By using a plastic carrier, the Be writing, storage and dispatch of on the membrane brought samples can be simplified. The one to be carried out The preceding analysis is then only a sample Abge provided area of the membrane from the plastic carrier separates, for example by punching, pressing or ab break, and dissolved in aqueous solution and forth in one conventional analysis methods analyzed.
In einer weiteren bevorzugten Ausführungsform der Erfindung ist der Träger in einem gasdicht verschließbaren Behälter, zum Beispiel in Form eines Umschlages, als Probenset unterge bracht, wobei der Behälter in seinem Inneren vorzugsweise ein Trocknungsmittel, zum Beispiel Silicagel enthält. Dadurch wird verhindert, dass bei Langzeitlagerung und Temperaturwechsel durch Wasseraufnahme der Probenset unbrauchbar oder beeinträchtigt wird.In a further preferred embodiment of the invention the carrier is in a gas-tight sealable container, for example in the form of an envelope, as a sample set brings, the container preferably inside Contains drying agents, for example silica gel. Thereby is prevented during long-term storage and temperature changes unusable due to water absorption or is affected.
Als Proben eignen sich biologische Flüssigkeiten, wie Blut, Serum, Urin oder zerebrospinale Flüssigkeit.Biological liquids such as blood, Serum, urine or cerebrospinal fluid.
Die Aufgabe wird weiterhin erfindungsgemäß in Verbindung mit dem Oberbegriff des Anspruches 9 dadurch gelöst, dass der Träger als eine lösliche mikroporöse Membran ausgebildet ist, und dass die Probe zur Analyse mit der Membran in Flüssigkeit gelöst und anschließend analysiert wird.According to the invention, the object is furthermore in connection with the preamble of claim 9 solved in that the Carrier is designed as a soluble microporous membrane, and that the sample for analysis with the membrane in liquid solved and then analyzed.
Insbesondere durch die Ausbildung des Trägers als lösliche mikroporöse Membran entstehen die oben genannten Vorteile, d. h. das Verfahren lässt sich durch den Wegfall des Auswa schungsschrittes vereinfachen und zugleich in seiner Genauig keit verbessern. Weitere Verfahrensschritte sind den Unteran sprüchen zu entnehmen.In particular through the formation of the carrier as soluble microporous membrane, the above advantages arise, d. H. the procedure can be done by eliminating the selection Simplification step and at the same time in its accuracy improve speed. Further procedural steps are the Unteran to take sayings.
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| 8127 | New person/name/address of the applicant |
Owner name: SARTORIUS BIOTECH GMBH, 37079 GOETTINGEN, DE |
|
| 8110 | Request for examination paragraph 44 | ||
| 8127 | New person/name/address of the applicant |
Owner name: SARTORIUS STEDIM BIOTECH GMBH, 37079 GOETTINGE, DE |
|
| 8139 | Disposal/non-payment of the annual fee |