CZ298445B6 - Lécivo pro lécbu pneumonie ovcí a hovezího dobytka obsahující derivát pleuromutilinu a zpusob jehoprípravy - Google Patents

Abstract

Použití slouceniny vzorce I ve forme volné báze nebo veterinárne prijatelné soli, výhodne ve forme hydrochloridové adicní soli s kyselinou, k príprave léciva pro lécbu pneumonie u jehnat, ovcí a hovezího dobytka spojené s infekcí Pasteurella haemolytica a zpusob prípravy takového léciva smícháním terapeuticky úcinného množství slouceniny vzorce I ve forme volné báze nebo veterinárne prijatelné soli dohromady s alespon jedním veterinárne prijatelným nosicem nebo redidlem.

Description

Léčivo pro léčbu pneumonie ovcí a hovězího dobytka obsahující derivát pleuromutilinu a způsob jeho přípravy

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká derivátů pleuromutilinu. Předmětem vynálezu je veterinární použití sloučeniny vzorce I

tj. 14-0-[l-[(R)-2-amino-3-methylbutyrylamino]-2-methylpropan-2-ylthioacetyl]mutilinu, ve formě volné báze nebo veterinárně přijatelné soli k přípravě léčivo pro léčbu sekundární pneumonie vepřů spojené s infekcí Pasteurella haemolytica, což se dále stručně označuje jako „použití vynálezu“.

Dosavadní stav techniky

Sloučenina obecného vzorce I ve formě volné báze nebo ve formě veterinárně přijatelné soli (Econor®) se níže stručně nazývá „činidlo podle vynálezu“. S výhodou se vyskytuje ve formě soli, zejména hydrochloridu. V této formě je tato látka známá pod názvem hydrochlorid valnemulinu.

Termín „léčba“ znamená použití pro profylaxi a také pro léčbu.

Sloučenina obecného vzorce I ve formě volné báze nebo ve formě chemoterapeuticky nebo veterinárně přijatelné soli, je známá například zEP 153 277 a jejích ekvivalentů, například US 4 675 330, zejména v příkladu 12 zde uvedeném.

Odtud je dále známa:

• inhibíční aktivita proti různým bakteriím in vitro, při koncentraci asi 0,08 až 25 pg/ml;

• inhibíční aktivita in vitro proti mykoplazmám s chlamydii obecně, při koncentraci asi 0,008 až 0,5 pg/ml;

• inhibíční aktivita in vivo u myší, s využitím různých kmenů bakterií, a u slepic, s využitím kmenů mykoplazmy, v dávkách asi 12 až 50 mg/kg tělesné hmotnosti;

-1 CZ 298445 B6 • antiparazitální aktivita, zejména in vivo proti kokcidii u slepic, v dávkách 20 až 150 mg/kg krmivá; a • aktivita podporují růst u slepic a vepřů in vivo, při dávkách 10 až 50 mg/kg krmivá, z čehož vyplývá, že sloučenina je vhodná jako antibakteriálně účinné antibiotikum obecně a, jako veterinární činidlo, zejména pro chemoterapeutickou léčbu kokcidiózy u slepic, stejně jako činidlo podporující růst u slepic a vepřů.

Nyní bylo překvapivě zjištěno, že činidlo podle předkládaného vynálezu je zvláště účinné při léčbě veterinárních onemocnění, jejichž exprese se zvyšuje při rostoucí hustotě chovu, jako je pneumonie u jehňat, ovcí a hovězího dobytka (lodní horečka, přepravní horečka, dýchací komplex telat, hovězí pneumonická pasteurellóza) spojená s infekcí Pasteurella haemolytica.

Dále se ještě překvapivě zjistilo, že indukce odolnosti k léčivu je extrémně nízká.

Podstata vynálezu

Předkládaný vynález se tedy týká veterinárního použití definovaného výše.

Dále se předpokládaný vynález týká způsobu přípravy léčiva, jak je definováno výše, který zahrnuje smísení činidla podle předkládaného vynálezu s nejméně jedním veterinárně přijatelným nosičem nebo ředidlem.

Léčivo připravené podle vynálezu lze použít při způsobu léčby výše uvedené sekundární pneumonie jehňat, ovcí a hovězího dobytka, jejíž exprese se zvyšuje při rostoucí hustotě chovu, který zahrnuje podávání terapeuticky účinného množství činidla podle vynálezu živočichům v případě, že takovou léčbu potřebují.

Zvířata trpící veterinárními onemocněními, jejichž exprese se zvyšuje při rostoucí hustotě chovu, mohou například být léčena antibakteriálně činidlem podle vynálezu a již nemusí dostávat činidlo podle vynálezu pro podporu růstu.

Pneumonie u jehňat, ovcí a hovězího dobytku spojená s infekcí Pasteurella haemolytica

Infekce Pasteurella haemolytica může být diagnostikována běžným způsobem, například jak je popsáno ve veterinární příručce jako je Veterinary Medicine, osmé vydání (1994), vyd. Radostits O. M. Blood D.C. a Gay C.C., publ. Bailliere Tindal, Londýn, VB, na stranách 748 až 770. Výhodná aktivita sloučeniny podle předkládaného vynálezu při tomto použití může být prokázána například následujícím způsobem:

Klinická účinnost se určí u dvou prostředků hydrochloridu valnemulinu při léčbě pneumonie u telat způsobené kontrolovanou nákazou Pasteurella Haemolytica Al:

Ve dni -6 se 24 telat, u kterých byl proveden nosní výtěr a bylo prokázáno, že nemají P. haemolytica Al, zvážilo a rozdělilo do čtyř léčebných skupin po šesti. Skupiny byly navážené podle tělesné hmotnosti a podle pohlaví. Telata se umístila do jednotlivých ohrad v běžné chovné jednotce pro telata, kde se aklimatizovala 33 dní před rozdělením. Krevní vzorky byly v období před testem odebírány dvakrát a analyzovaly se leukotoxinové protilátky jako možný indikátor předchozího vystavení P. haemolytica Al.

Léčba byla zahájena ve dni -1, asi 27 hodin před nakažením.

-2CZ 298445 B6

Skupina 1 - kontrolní;

Skupina 2 - hydrochlorid valnemulinu 2,5 % injekčně (2,5 mg/kg dvakrát denně;

Skupina 3 - hydrochlorid valnemulinu 10 % orálně pomocí mléka (5,0 mg/kg dvakrát denně);

Všechna telata byla nakažena ve dni 0 pomocí endobronchiálního nanesení 30 ml bujónu kultury Pasteurella haemolytica Al (M4/1/3, Moredun Research Institute - 1,25x10⁷ cfu/ml) za použití vláknového optického bronchoskopu. Klinická pozorování se prováděla jednou denně ve dnech -3 a -2 a dvakrát denně od dne -1 do dne 3. Klinické stavy byly rozděleny podle čtyř parametrů: rektální teplota, rychlost dýchání, povaha dýchání a chování. Injekční místa byla také testována. Všem telatům, která ležela a/nebo vykazovala depresi a/nebo známky dýchacích obtíží, nebo která měla celkové klinické skóre vyšší než 5 při jednom testování mezi dny 0 až 3, byly z humánních důvodů okamžitě poskytnuta euthanasie pomocí nitrožilního podání letální dávky sodné soli pentabarbitonu BP(Vet) 20% hmotnost/objem a nekropsie byla provedena během 24 hodin. Telatům, která přežila do dne 4 po nakažení P. Haemolytica, byla podána euthanasie ve dni 4 stejným způsobem, jako bylo popsáno pro dny 0 až 3. Všem telatům byly vyjmuty plíce a testovaly se vizuálně na sloučené leze a pleuritickou adhezi. Z osmi standardních míst byly vyříznuty vzorky plicní tkáně a testovaly se na přítomnost P. haemolytica, aby se určily hodnoty pro index izolace. Telatům, která právě zemřela, byla odebrány výtěry krve ze srdce a byly testovány na přítomnost P. haemolytica.

Jednotlivá telata a součty skupin, průměry skupin a středy skupin se vypočetly pro všechny následující parametry: celkové klinické skóre, skóre sloučených lézí, index izolace, skóre pohrudnice a celkové skóre. Jednotlivá telata a součty skupin, průměry skupin a středy skupin se vypočetly pro všechny kategorie tvořící celkové klinické skóre: rektální teplota, rychlost dýchání, povaha dýchání a chování. Pro určení, zdaje rozdíl mezi jakýmkoli skóre skupin pro všechny parametry se použila základní analýza podle Kruskal-Wallisova testu (Minitab 9): celkové klinické skóre, skóre sloučených lézí, index izolace, skóre pohrudnice a celkové skóre. Kruskal-Wallisův test ukazuje, že skupiny nejsou ani všechny stejné, ani každá jiná. Pro zjištění, které skupiny jsou různé, se páry skupin testovaly za použití Mann-Whitneyova testu (Minitab 9).

Pro srovnání sneléčenými telaty (skupina 1), celkové klinické skóre (p=0,013) se ukázalo být významně nižší u telat, která byla léčena valnemulinem při 10 % ve směsi při 5,0 mg/kg/dávku dvakrát denně orálně pomocí mléka 5 dní, přičemž se léčba zahájila 27 hodin před nakažením P. haemolytica Al.

Celkové klinické skóre bylo také sníženo, ale statisticky ne významně, u telat léčených intramuskulámě valnemulinem 2,5 % injekčně při 2,5 mg/kg/dávku dvakrát denně 5 dní, přičemž se léčba zahájila 27 hodin před nakažením P. haemolytica Al.

Když se porovná celkové klinické skóre, neexistovaly žádné významné rozdíly mezi léčenými skupinami.

Činidlo podle předkládaného vynálezu je tedy vhodné při léčbě pneumonie u jehňat, ovcí a dobytka spojené s infekcí Pasteurella haemolytica. Pro toto použití se bude samozřejmě účinné množství měnit v závislosti na konkrétní použité soli, způsobu podávání, velikosti a věku zvířete a na požadovaném účinku; například pro profylaktickou léčbu se bude podávat relativně malé množství dlouhou dobu. Avšak obecně bylo dosaženo uspokojivým výsledků, když se činidlo podávalo v denně dávce 5 až 15 mg/kg hmotnosti zvířete, vhodně podávané libovolně v krmivu nebo v rozdělených dávkách dvakrát až čtyřikrát denně nebo ve formě s pomalým uvolňováním. Pro většinu zvířat se celková denní dávka pohybuje mezi 250 až 3000 mg, s výhodou 250 až 1000 mg, při podávání jednou nebo dvakrát denně nebo při podávání libovolně v krmivu.

-3 CZ 298445 B6

Pro použití podle vynálezu může být sloučenina použita ve formě volné báze nebo ve formě veterinárně přijatelné soli, například kvartémí soli, nebo, zejména, ve formě adiční soli s kyselinou.

Tyto solné formy mají stejný druh účinku jako sloučenina ve formě volné báze. Příklady vhodných adičních solí s kyselinou j sou hydrogenfumarát, fumarát, naftalen-l,5-sulfát a, zejména, hydrochlorid.

Činidla podle předkládaného vynálezu mohou být podána orálně, místně nebo parenterálně a ve směsi s běžně chemoterapeuticky přijatelnými ředidly a nosiči a, popřípadě, jinými přísadami a mohou být podávána ve formě tablet, tobolek nebo prostředků pro injekční podávání. Také tvoří vynikající přísady pro krmné směsi (předem připravené) nebo je možné je přidávat do pitné vody.

Mezi výhodné veterinární přijatelné nosiče patří například běžně používané farmaceutické přísady jako je cukr, kukuřičný škrob, laktóza, celulóza, stejně jako nosné systémy ze zrní a vedlejších produktů ze zrní jako rýžové slupky, pšeničné zbytky a sojová moučka; dále pevná ředidla, jako je vápenec, síran sodný, uhličitan vápenatý a kaolin, nebo kapalné látky, jako veterinárně přijatelné oleje (rostlinné oleje nebo minerální oleje), propylenglykol a polyethylenglykol. Vhodně se tyto prostředky podávají zvířatům orálně, s výhodou ve směsi s krmivém ve formě medikované moučky nebo medikované píce.

Pro podávání v pitné vodě se použití roztoky ve vodě s nebo bez rozpouštědel, jako jsou ethanol, propylenglykol, polyethylenglykol, osvědčené povrchově aktivní látky a sorbitol.

Například pro mezisvalovou injekci se prostředek typicky připraví jako roztok ve vodě, který může obsahovat rozpouštědla, jako je ethanol nebo propylenglykol nebo ve veterinárně přijatelném oleji. Příklady přijatelných olejů jsou sezamový olej, triglyceridy se středním řetězcem (například Miglyol), isopropyl myristát a ethyloleát. Prostředky mohou obsahovat konzervační látky, pufry a jiné běžné přísady.

Veterinární prostředky pro použití podle předkládaného vynálezu mohou být připraveny smísením složek v příslušných poměrech. Prostředky se potom balí do vhodných nádob vhodných pro podávání.

Příklady provedení vynálezu

Předkládaný vynález ilustruje následující příklad:

Složka	Množství (g/100 μΐ)
hydrochlorid valnemulinu	10,0
fenol	0, 5
Miglyol 840	do 100 ml

Činidlo podle předkládaného vynálezu je dobře snášenlivé. Akutní toxicita sloučeniny obecného vzorce I ve formě hydrochloridu u krys byla určena při jednotlivé dávce 1000 a 2000 mg/kg při orálním podávání 5 samcům a 5 samicím kiys ve skupině. K úmrtí došlo za 1-8 dní. Hodnota LD₅₀ je > 1000 mg/kg p.o.

Claims (3)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Použití sloučeniny vzorce I ve formě volné báze nebo veterinárně přijatelné soli k přípravě léčiva pro léčbu pneumonie u jehňat, ovcí a hovězího dobytka spojené s infekcí Pasteurella haemolytica.
2. 2. Použití podle nároku 1, při němž je sloučenina vzorce I ve formě hydrochloridové adiční soli s kyselinou.
3. 3. Způsob přípravy léčiva z nároku 1, vyznačující se tím, že se smísí terapeuticky účinné množství sloučeniny vzorce I ve formě volné báze nebo veterinárně přijatelné soli dohromady s alespoň jedním veterinárně přijatelným nosičem nebo ředidlem.