CZ292617B6 - Inhibitory metaloproteinázy a farmaceutický prostředek - Google Patents

Abstract

Popisuje se sloučenina 2S-cyklopentyl-N.sup.4.n.-[2,2-dimethyl-1S-/methylkarbamoyl/propyl]-N.sup.1.n.-hydroxy-3R-izobutylsukcinamid, její soli, solváty a hydráty, které jsou účinné jako inhibitory metaloproteináz působících na matrix.ŕ

Description

Inhibitory metaloproteinázy a farmaceutický prostředek

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká 2S-cyklopentyl-N⁴-[2,2-dimethyl-lS-(methylkarbamoyl)propyl)]NP-hydroxy-SH-izobutylsukcinamidu nebo jeho soli, solvátu nebo hydrátů. Tato sloučenina je inhibitorem metaloproteináz účastnících se degradace tkání a navíc je inhibitorem uvolňování tumorového nekrózního faktoru z buněk.

Dosavadní stav techniky

Předpokládá se, že sloučeniny, které mají vlastnosti inhibující působení metaloproteináz účastnících se rozpadu pojivových tkání, jako je kolagenáza, stromelyzin a gelatináza (známé jako „metaloproteinázy působící na matrix“ a dále označované jako MMP) jsou potenciálně použitelné pro léčení a prevenci stavů, jako je rozpad tkání, například revmatoidní artritida, osteoartritida, osteopenie, jako je osteoporóza, periodontitida, gingivitida, vředy rohovky, epidermis nebo žaludku a metastázy, invaze a růst tumorů. Inhibitory MMP mají také možné použití při léčení zánětů nervů včetně poruch zahrnujících degradaci myelinu, například roztroušené sklerózy, stejně jako při léčení onemocnění závislých na růstu nových cév, mezi které patří artritické stavy a růst pevných tumorů stejně jako lupénka, proliferativní retinopatie, neovaskulámí glaukom, tumory oka, angiofíbromy a hemangiomy.

Metaloproteinázy jsou charakterizovány přítomností místa obsahujícího zinečnatý iont v aktivní oblasti jejich struktury. Nyní je známo, že existuje celá řada metaloproteinázových enzymů, mezi které patří fibroblastová kolagenáza (typ 1), PMN-kolagenáza, 72 kDa-gelatináza, 92 kDa-gelatináza, stromelyzin, stromelyzin-2 a PUMP-1 (J. F. Woessner, FASEB J, 1991, 5, 2145-2154).

Tři známé třídy pseudopeptidových nebo peptidy napodobujících inhibitorů MMP mají jako vazebné skupiny pro zinek skupinu kyseliny hydroxamové, popřípadě skupinu N-formyl-Nhydroxyaminovou nebo skupinu karboxylovou. Až na několik málo výjimek mohou být tyto známé MMP popsány obecným strukturním vzorcem I

(1), kde X je hydroxamová kyselina (-CONHOH), skupina N-formyl-N-hydroxyaminová (-NH(OH)CHO) nebo skupina karboxylová (-COOH), vázající zinek a skupiny Ri až R₅ jsou proměnné v závislosti na konkrétních příkladech ve stavu techniky těchto sloučenin. Příklady patentových přihlášek zabývajících se těmito strukturami jsou uvedeny níže.

Tumorový nekrózní faktor (tumour necrosis factor, TNF) je cytokin, který je produkován na počátku jako prekurzor o molekulové hmotnosti 28 kD asociovaný s buňkou. Je uvolňován v aktivní formě o velikosti kD, která může zprostředkovat in vivo celou řadu škodlivých účinků. Jestliže se podává zvířatům nebo lidem, způsobuje záněty, horečku, kardiovaskulární poruchy, otoky, koagulaci a odezvy akutní fáze podobné stavům v průběhu akutních infekcí a šokových stavů. Chronické podávání může také způsobit sešlost a nechutenství. Hromadění většího množství TNF může mít za následek smrt.

-1 CZ 292617 B6

Existují dostatečné důkazy zjištěné na zvířecích modelech, že blokování účinků TNE specifickými protilátkami může být prospěšné u akutních infekcí, šokových stavů, reakcí hostitele na štěp a autoimunitních onemocnění. TNF je také vlastním růstovým faktorem pro některé myelomy a lymfomy a může působit jako inhibitor normální krvetvorby u pacientů s těmito tumory.

Předpokládá se tedy, že sloučeniny inhibující vytváření nebo působení TNF jsou potenciálně použitelné pro léčení nebo prevenci mnoha zánětlivých, infekčních, imunologických nebo rakovinných onemocnění. Mezi tato onemocnění patří bez omezení septicky šok, hemodynamický šok a septický syndrom, poškození po postischemické reperfuzi, malárie, Crohnova choroba, mykobakteriální infekce, meningitida, lupénka, městnavé poruchy srdce, fibrotická choroba, sešlost, odmítání štěpů, rakovina, autoimunní onemocnění, AIDS, revmatoidní artritida, roztroušená skleróza, radiační poškození, toxické stavy po podání imunosupresívních monoklonálních protilátek jako je OKT3 nebo CAMPATH-l a hyperoxické poškození plicních alveolů.

Protože u několika onemocnění nebo stavů, které jsou rovněž charakterizovány degradací tkání prostřednictvím MMP, byla pozorována nadměrná produkce TNF, sloučeniny inhibující tvorbu MMP a TNF mohou být zvláště výhodné při léčení nebo prevenci onemocnění nebo stavů, kterých se účastní oba mechanismy.

Jak bylo uvedeno výše, byly navrženy inhibitory MMP se skupinami kyseliny hydroxamové, N-formyl-N-hydroxaminové nebo karboxylové kyseliny jako vazebnými skupinami pro zinek. Inhibitory MMP jsou popsány v následujících patentových přihláškách.

US 4 599 361 EP-A-2321081 EP-A-0236872 EP-A-0274453 WO 90/05716 WO 90/05719 WO 91/02716 WO 92/09563 US 5 183 900 US 5 270 326 WO 92/17460 EP-A-0489577 EP-A-0489579 EP-A-0497192 US 5256657 WO 92/13831 WO 92/22523 WO 9309090 WO 93/09097 WO 93/20047 WO 93/24449 WO 93/24475 EP-A-0574758 EP-A-0575844 WO 94/02446 WO 94/02447 WO 94/21612 WO 94/21625 WO 94/24140 WO 94/25434 WO 94/25435 (Searle) (ICI) (Roche) (Bellon) (British Biotech) (British Biotech) (British Biotech) (Glycomed) (Glycomed) (Glycomed) (SB) (Celltech) (Celltech) (Roche) (Sterling) (British Biotech) (Research Corp) (Y amanouchi) (Sankyo) (British Biotech) (Celltech) (Celltech) (Roche) (Roche) (British Biotech) (British Biotech) (Otsuka) (British Biotech) (British Biotech) (Celltech) (Celltech)

-2CZ 292617 B6

WO 95/04033

WO 95/04735

WO 95/04715

WO 95/06031

WO 95/09841

WO 95/12603

WO 95/19956

WO 95/19957

WO 95/19961

WO 95/19965

WO 95/22966

WO 95/23790 (Celltech) (Syntex) (Kanebo) (Immunex) (British Biotech) (Syntex) (British Biotech) (British Biotech) (British Biotech) (Glycomed) (Sanofi Winthrop) (SB)

Podstata vynálezu

Předkládaný vynález poskytuje 2S-cyklopentyl-N⁴-[2,2-dimethyl-lS-(methylkarbamoyl)propylj-N^hydroxy-AR-izobutylsukcinamid, nebo jeho sůl, solvát nebo hydrát.

Sloučenina podle vynálezu je silný širokospektrý inhibitor metaloproteináz působících na matrix a inhibitor uvolňování TNF z buněk. Po orálním podání laboratorním hlodavcům a kosmanům (primáti) je dosaženo vysokých koncentrací aktivní sloučeniny v krvi. V dalším hledisku se vynález týká použití 2S-cyklopentyl-N⁴-[2,2-dimethyl-lS-(methylkarbamoyl)propyl]-N¹hydroxy-3R-izobutylsukcinamidu, nebo jeho soli, solvátu nebo hydrátu při výrobě prostředků pro prevenci nebo léčení onemocnění a stavů zprostředkovaných MMP a/nebo TNF.

Onemocnění nebo stavy zprostředkované MMP zahrnují stavy s degradací tkání, jako jsou resorpce kostí, zánětlivá onemocnění, dermatologické stavy a invaze tumorů sekundárními metastázami, a zvláště revmatoidní artritida, osteoartritida, periodontitida, gingivitida, vředy na rohovce a invaze tumorů sekundárními metastázami, stejně jako zánětlivé poruchy nervů včetně poruch s degradací myelinu, například roztroušené sklerózy. Onemocnění zprostředkované TNF zahrnují horečku, záněty, kardiovaskulární účinky, otoky, koagulace a odezvy akutní fáze, sešlost a nechutenství, akutní infekce, šokové stavy, reakce hostitele na štěp a autoimunní onemocnění.

dalším hledisku vynálezu se poskytuje farmaceutický nebo veterinární prostředek obsahující

2S-cyklopentyl-N⁴-[2,2-dimethyl-lS-(methylkarbamoyl)propyl]-N¹-hydroxy-3R-izobutylsukcinamid, nebo jeho sůl, solvát nebo hydrát spolu s farmaceuticky nebo veterinárně přijatelným excipientem nebo nosičem.

Sloučeniny podle vynálezu mohou být připraveny pro podávání jakoukoliv cestou vhodnou z hlediska jejich farmakokinetických vlastností, ale zvláště jsou tyto prostředky přizpůsobeny pro orální podávání. Prostředky pro orální podávání mohou být ve formě tablet, kapslí, prášků, granulí, pastilek, kapalných prostředků nebo prostředků ve formě gelů, jako jsou orální, místní anebo sterilní parenterálně podávané roztoky nebo suspenze. Tablety a kapsle pro orální podávání mohou být přítomny ve formě jednotkové dávky a mohou obsahovat běžné pomocné látky, jako jsou pojivá, například sirup, akácie, želatina, sorbitol, tragakant nebo polyvinylpyrrolidon; plniva, jako například laktóza, cukr, kukuřičný škrob, fosforečnan vápenatý, sorbitol nebo glycin; kluzné látky určené pro tablety, jako například stearan hořečnatý, talek, polyethylenglykol nebo oxid křemičitý; rozvolňovadla, jako například bramborový škrob, nebo přijatelná smáčedla, jako je lauiylsulfát sodný. Tablety mohou být také potahovány způsoby známými v obvyklé farmaceutické praxi. Orální kapalné prostředky mohou být ve formě například vodných nebo olejových suspenzí, roztoků, emulzí, sirupů nebo elixírů nebo mohou být přítomny ve formě suchého produktu pro rekonstituci s vodou nebo jiným vhodným nosičem před použitím. Tyto kapalné prostředky mohou obsahovat běžná aditiva, jako jsou suspendující látky, například sorbitol, sirup, methylcelulóza, glukózový sirup, želatina, hydrogenované jedlé tuky;

-3CZ 292617 B6 emulgační prostředky, jako například lecitin, monooleát sorbitoíu nebo akácie; nevodné nosiče (mezi které mohou patřit jedlé oleje), například mandlový olej, frakcionovaný kokosový olej, olejovité estery, jako je glycerin, propylenglykol nebo ethylalkohol; ochranné látky, například methyl- nebo propyl-p-hydroxybenzoát nebo kyselina sorbová a v případě potřeby běžné 5 ochucovací nebo barvicí prostředky. Dávkovači jednotka používaná při orálním podávání může obsahovat přibližně od 1 do 250 mg, s výhodou přibližně od 5 do 100 mg sloučeniny podle vynálezu. Vhodná denní dávka pro savce se může ve velkých mezích lišit v závislosti na stavu pacienta. Denní dávka sloučeniny obecného vzorce I však může být vhodně přibližně 0,1 až 10 mg/kg tělesné hmotnosti, zvláště od 0,1 do 3 mg/kg tělesné hmotnosti.

Pro místní použití na kůži může být léčivo ve formě krému, umývacího roztoku nebo masti. Krémy nebo masti používané pro léčiva jsou běžné prostředky známé v oboru, popisované například ve standardních učebnicích farmacie, jako je Britský lékopis.

Pro místní použití do oka může být léčivo ve formě roztoku nebo suspenze ve vhodném sterilním vodném nebo nevodném nosiči. Mohou být použity například pufry, jako je metabisulfid sodný nebo edeát dvojsodný; ochranné látky včetně baktericidních a fungicidních prostředků, jako je octan nebo dusičnan fenylrtuťnatý nebo benzalkoniumchlorid nebo chlorhexidin a zahušťující prostředky, jako je hypromellóza.

Dávkování při místním podávání bude samozřejmě záviset na velikosti ošetřované plochy. Pro použití v očích může být každá dávka typicky v rozmezí od 10 do 100 mg léčiva.

Aktivní složka může být také podávána parenterálně ve sterilním médiu. V závislosti na vehikulu 25 a použité koncentraci může být látka buď suspendována, nebo rozpuštěna. S výhodou mohou být ve vehikulu rozpuštěny pomocné látky jako jsou místní anestetika, ochranné látky a pufry.

Pro použití při léčení revmatoidní artritidy může být léčivo podáváno orální cestou nebo injekcí do postiženého kloubu.

Sloučeniny podle vynálezu mohou být připraveny způsoby popsanými v následujících příkladech:

Příklady provedení vynálezu

V následujícím textu byly použity následující zkratky:

	DIPE
40	DMAP DMF EDC HOBt NMR
45	NMM NaHMDS TESCI TFA THF
50	TLC

Diizopropylether

4-dimethyl-aminopyridin

N,N-dimethylformamid hydrochlorid N-ethyI-N'-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimidu

-hydroxybenztriazol

Nukleární magnetická rezonance

N-methylmorfolin

Bis(trimethylsilyl)amid sodný

Chlortriethylsilan

Kyselina trifluoroctová

Tetrahydrofuran

Tenkovrstvá chromatografie 'Ha ¹³NMR spektra byla pořizována přístrojem Bruker AC 250E spektrometr při 250,1 a 62,9 MHz. Mikroanalýza prvků byla vždy prováděna firmou CHN Analysis Lt., Alpha House, Countesthorpe Road, South Wigston, Leicester LE8 2PJ, UK, nebo MEDAC Ltd., Dept. 55 Of Chemistry, Brunel Univerzity, Uxbridge, Middlesex UB8 3PH, UK.

-4CZ 292617 B6

Příklad 1

2S-cyklopentyl-N⁴-[2,2-dimethyl-lS-(methylkarbamoyl)propyl]-N¹-hydroxy-3R-izobutylsukcinamid

Krok A:

4R-benzyl-3-cyklopentalacetyl-oxazolidin-2-on

Kyselina cyklopentyloctová (59 ml, 470,4 mmol) byla převedena do suchého THF (1 1) a ochlazena na -78 °C pod argonem. Byly přidány pivaloylchlorid (58 ml, 470,4 mmol) a triethylamin (85 ml, 611,5 mmol) a reakční směs byla míchána 15 min při -78 °C a potom ohřátá na 0 °C a míchána 40 min před opětným ochlazením na -78 °C. V oddělené baňce byl rozpuštěn 4R-benzyl-oxazolidin-2-on (100 g, 564 mmol) v suchém THF (1 1) a roztok byl ochlazen na -78 °C pod argonem. K tomuto míchanému roztoku byl přidán 2,5 M roztok M-butyllithia v hexanech (226 ml, 565 mmol). Po ukončení přidávání byl výsledný roztok jehlou převeden do původní reakční baňky a směs byla míchána 15 min při -78 °C a potom byla ohřátá na pokojovou teplotu a míchána přes noc. Reakce byla ukončena přídavkem 1 M roztoku hydrogenuhličitanu draselného (600 ml). Rozpouštědla byla odstraněna za sníženého tlaku a zbytek byl extrahován třikrát do ethylacetátu. Spojené ethylacetátové extrakty byly promyty roztokem soli, sušeny nad síranem hořečnatým a zfiltrovány. Roztok byl zakoncentrován za sníženého tlaku za poskytnutí žlutého oleje, který stáním krystalizoval (139,8 g, včetně zbytkového rozpouštědla).

'H-NMR; δ (CDC1₃), 7,37- 7,20 (5H, m), 4,69 (lH,m), 4,23 - 4,12 (2H, m), 3,30 (1H, dd, J = 13,3, 3,3 Hz), 3,04 (1H, dd, J = 16,6, 7,1 Hz), 2,91 (1H, dd, J = 16,6, 7,1 Hz), 2,77 (1H, dd, J = 13,3, 3,3 Hz), 2,34 (1H, m), 1,94 - 1,83 (2H, m), 1,69 - 1,52 (4H, m) a 1,30 - 1,14 (2H, m).

KrokB:

7erc-butylester kyseliny 4-(4R-benzyl-2-oxo-oxazolidin-3-yl-3R-cyklopentyM-oxomáselné 4R-benzyl-3-cyklopentalacetyl-oxazolidin-2-on (krok A) (135 g, 469,8 mmol) byl rozpuštěn v suchém THF (2 1) a roztok byl ochlazen na -78 °C pod argonem. K tomuto ochlazenému roztoku byl přidán 1,0 M roztok NaHMDS v THF (705 ml, 705 mmol). Výsledná směs byla míchána další hodinu při teplotě -78 °C, byl přidán fórc-butylbromacetát (114 ml, 705 mmol) a reakční směs byla potom 48 h uchovávána v chladicím boxu (-20 °C). Byl přidán nasycený roztok chloridu amonného (500 ml) a rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku. Získaný vodný zbytek byl třikrát extrahován do ethylacetátu. Ethylacetátové extrakty byly spojeny, promyty roztokem soli, sušeny nad síranem hořečnatým, zfiltrovány a odpařeny za sníženého tlaku za poskytnutí bílé pevné látky. Rekrystalizace z ethylacetátu/hexanu poskytla požadovaný produkt (98,5 g, 52 %).

-5CZ 292617 B6 ’Η-NMR; 8 (CDC1₃), 7,38 - 7,23 (5H, m), 4,67 (IH, m), 4,25 (IH, m), 4,15 - 4,13 (2H, m), 3,38 (IH, dd, J = 13,5, 3,2 Hz), 2,86 (IH, dd, J = 16,8, 11,2 Hz), 2,73 (IH, dd, J = 13,5, 11,2 Hz), 2,53 (IH, dd, J = 16,8, 3,2 Hz), 2,00 (IH, m), 1,83 - 1,44 (6H, m), 1,42 (9H, s) a 1,41 - 1,17 (2H, m).

KrokC:

1-benzylester 4-fórc-butylester kyseliny 2R-cyklopentyljantarové

Benzylalkohol (40 ml, 386,1 mmol) byl rozpuštěn v suchém THF (800 ml) a roztok byl umístěn 10 pod argonem a pomocí lázně methanol/led ochlazen na teplotu -5 °C. K tomuto míchanému roztoku byl přidán pomalu v průběhu 45 min 2,5 M roztok n-butyllithia v hexanech (116 ml, 290 mmol), takže teplota zůstala v průběhu přidávání nižší než 0 °C. Po ukončení přidávání byla reakční směs míchána dalších 40 min při -5 °C. Odděleně byl umístěn pod argonem roztok terc-butylesteru kyseliny 4-(4R-benzyl-2-oxo-oxazolidin-3-yl-3R-cyklopentyl-4-oxomásel15 né (krok B) (77,9 g, 193 mmol) v suchém THF (400 ml), ochlazen na -5 °C a jehlou převeden do původní reakční nádoby a směs byla míchána dalších 15 min při -5 °C a potom přes noc míchána při pokojové teplotě. Reakce byla ukončena nasyceným roztokem chloridu amonného (450 ml), rozpouštědla byla odstraněna za sníženého tlaku a zbytek byl dvakrát extrahován ethylacetátem. Spojené organické extrakty byly promyty roztokem soli, sušeny nad bezvodým síranem 20 hořečnatým a zfiltrovány. Filtrát byl koncentrován za sníženého tlaku za poskytnutí čirého oleje, který byl čištěn chromatografií na koloně (silikagel, 20 % ethylacetát v hexanu) za poskytnutí v názvu uvedené sloučeniny jako čirého oleje (40,9 g, 86 %).

’Η-NMR; δ (CDC1₃), 7,45 - 7,29 (5H, m), 5,19 (2H, m), 2,92 - 2,73 (2H, m), 2,49 (IH, m), 2,01 25 (IH, m), 1,84 - 1,49 (6H, m), 1,41 (9H, s) a 1,38 - 1,19 (2H, m).

KrokD:

1-benzylester kyseliny 2R-cyklopentyljantarové

1-benzylester 4—terc-butylester kyseliny 2R-cyklopentyljantarové (krok C) (36,43 g, 109,6 mmol) byl rozpuštěn v dichlormethanu (300 ml) a TFA (200 ml) a výsledný roztok byl uchován při 4 °C přes noc. Rozpouštědla byla odstraněna za sníženého tlaku a zbytek byl azeotropně destilován s toluenem (3 x) za poskytnutí produktu jako hnědého oleje (30,30 g, 35 kvantitativní výtěžek).

’Η-NMR; δ (CDC1₃), 11,50 (IH, br s), 7,45 - 7,29 (5H, m), 2,94 - 2,74 (2H, m), 2,60 (IH, m), 2,07 (IH, m), 1,84 - 1,52 (6H, m) a 1,38 - 1,22 (2H, m).

Krok E:

1-benzylester 4-(methylallyl)ester kyseliny 2R-cyklopentyljantarové

1-benzylester kyseliny 2R-cyklopentyljantarové (krok D) (23,5 g, 85 mmol) byl rozpuštěn 45 v dichlormethanu (200 ml) a EDC (19,5 g, 102 mmol), DMAP (200 mg, katalytické množství) a byl přidán 2-methyl 2-propen-l-ol (7,5 ml, 89 mmol). Výsledná směs byla míchána při pokojové teplotě přes noc. Rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku a zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu. Organický roztok byl postupně promyt 1 M kyselinou chlorovodíkovou, 1 M uhličitanem sodným a roztokem soli, potom sušen nad síranem hořečnatým a zfiltrován. 50 Rozpouštědlo bylo odstraněno za sníženého tlaku za poskytnutí oleje, který byl čištěn chromatografií na koloně (silikagel, 20 % ethylacetát v hexanu) za získání v názvu uvedené sloučeniny jako bezbarvého oleje (21,4 g, 76 %).

-6CZ 292617 B6 'H-NMR; δ (CDC1₃), 7,36 - 7,27 (5H, m), 5,19 - 5,07 (2H, m), 4,93 (2H, d, J = 5,4 Hz), 4,46 (2H, s), 2,89-2,71 (2H,m), 2,58 (1H, m), 2,03 (lH,m), 1,73 (3H, s), 1,64- 1,49 (6H, m), 1,36-1,16 (2H,m).

KrokF:

4—benzylester kyseliny 2S-cyklopentyl-3R-(2-methylallyl)jantarové

Diizopropylamin (29,3 ml, 209 mmol) byl převeden do suchého THF (700 ml) a ochlazen pod argonem na -78 °C před přídavkem 2,3 M roztoku butyllithia ve směsi hexanů (83,3 ml, 192 mmol). Reakční směs byla rychle ponechána ohřát na -30 °C a potom ochlazena zpět na -78 °C. Byl přidán 1-benzylester 4-(methylallyl)ester kyseliny 2R-cyklopentyljantarové (krokE) (57,54 g, 174 mmol) a získaná směs byla míchána 45 min. Potom byl přidán TESCI (32,2 ml, 192 mmol) a po míchání 30 min při teplotě -78 °C byla reakční směs ohřátá na 55 °C a míchána přes noc. Reakce byla zastavena přídavkem 1 M kyseliny chlorovodíkové v methanolu a rozpouštědla byla odstraněna za sníženého tlaku. Zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu a postupně promyt 1 M kyselinou chlorovodíkovou a roztokem soli, sušen nad síranem hořečnatým, zfíltrován a koncentrován za sníženého tlaku za získání hnědého oleje. Čištění chromatografíí na koloně (silikagel, 10 % methanol v dichlormethanu) poskytlo v názvu uvedenou sloučeninu jako žlutý olej (24,74 g, 43 %).

'H-NMR; δ (CDC1₃), 7,36 (5H, m), 5,12 (2H, m), 4,71 (2H, d, J = 11,2 Hz), 2,94 (1H, m), 2,74 (1H, dd, J = 8,3, 8,4 Hz), 2,33 (1H, m), 2,14 (2H, m), 1,89 - 1,45 (6H, br m), 1,68 (3H, s) a 1,28 (2H, brm).

KrokG:

Benzylester kyseliny 2S-cyklopentyl-3R-[2,2-dimethyl-l S-(methylkarbamoyl)propylkarbamoyl]-5-methylhexanové

4- benzylester kyseliny 2S-cyklopentyl-3R-(2-methylallyl)jantarové (krok F) (38,2 g, 115,6 mmol) byl rozpuštěn v ethylacetátu (1 1) a k roztoku byl přidán EDC (24,4 g, 127,1 mmol) a HOBt (17,18 g, 127 mmol). Směs byla pod argonem zahřívána k varu pod zpětným chladičem 2 h a potom byla ponechána ochladit na pokojovou teplotu. Organický roztok byl postupně promyt 1 M kyselinou chlorovodíkovou a 1 M roztokem uhličitanu sodného, sušen nad síranem hořečnatým a filtrován. K filtrátu byl přidán terc-leucin-N-methylamid (18,3 g, 127,1 mmol) a směs byla míchána a zahřívána pod zpětným chladičem přes noc pod argonem. Po ochlazení na pokojovou teplotu byla směs promyta 1 M kyselinou chlorovodíkovou a 1 M roztokem uhličitanu sodného, sušena nad síranem sodným, zfiltrována a odpařena za poskytnutí požadovaného produktu jako hnědého oleje (45,1 g, 85 %).

'H-NMR; δ (CDC1₃), 7,35 (5H, s), 6,68 (lH,m), 6,56 (1H, d, J= 9,2 Hz), 5,11 (2H, m), 4,60 (2H, d, J = 21 Hz), 4,32 (1H, d, J = 9,2 Hz), 2,75 (3H, d, J = 4,7 Hz), 2,31 (1H, m), 2,09 (1H, m), 1,40 - 1,81 (10H, br m), 1,62 (3H, s), 1,23 (1H, m) a 0,97 (9H, s).

KrokH:

Kyselina 2S-cyklopentyl-3R-[2,2-dimethyl-lS-(methylkarbamoyl)propylkarbamoyl]-5methylhexanová

Benzylester kyseliny 2S-cyklopentyl-3R-(2,2-dimethyl-l-methylkarbamoylpropylkarbamoyl)-

5- methylhexanové (krok G) (47,4 g, 103,7 mmol) byl rozpuštěn v ethanolu (1 1) a roztok byl umístěn do atmosféry argonu. Bylo přidáno 10% palladium na aktivním uhlí (0,34 g) a suspenzi byl 15 min prováděn jemný proud plynného vodíku a roztok byl ponechán v atmosféře plynného vodíku za míchání přes noc. Analýzou TLC bylo zjištěno, že veškerý výchozí materiál byl

-7CZ 292617 B6 spotřebován. Systém byl propláchnut argonem a katalyzátor byl odstraněn filtrací. Rozpouštědlo bylo odpařeno za poskytnutí požadovaného produktu jako bílé pěny (36 g, 94 %).

'H-NMR; δ (CD₃OD), 7,94 (1H, d, J= 4,6 Hz), 7,81 (1H, d, J= 9,2 Hz), 4,19 (1H, d, J = 9,2 Hz), 2,71 (1H, m), 0,89 (9H, s), 2,60 (3H, d, J = 4,6 Hz), 2,51 (1H, dd, J = 5,9, 6,0 Hz), 1,91 (1H, m), 1,15 - 1,80 (11H, br m), 0,79 (3H, d, J = 6,5 Hz) a 0,72 (3H, d, J = 6,5 Hz).

KrokJ:

2S-cyklopentyl-N⁴-[2,2-dimethyl-lS-(methylkarbamoyl)propyl]-N¹-hydroxy-3R-izobutylsukcinamid

K ochlazenému roztoku kyseliny 2S-cyklopentyl-3S-[2,2-dimethyl-lS-(methylkarbamoyl)propylkarbamoyl]-5-methylhexanové (17,45 g, 47,5 mmol) v DMF (180 ml) byl přidán HOBt (7,7 g, 56,9 mmol) a EDC (10,9 g, 56,9 mmol). Směs byla míchána při 0 °C 1 h, potom při pokojové teplotě 2 hodiny a tím bylo zajištěno úplné vytvoření aktivního esteru. Roztok byl opět ochlazen na 0 °C a byl přidán hydroxylaminhydrochlorid (4,95 g, 71,2 mmol) a potom NMM (7,83 ml, 71,2 mmol) a reakční směs byla ponechána ohřát na pokojovou teplotu a potom byla míchána přes noc. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a zbytek byl rozdělen mezi diethylether a vodu. Získaná sraženina byla oddělena filtrací a suspendována v ethylacetátu. Směs byla zahřáta pod zpětným chladičem 1 h, a potom ochlazena na pokojovou teplotu a bílá pevná látka byla odfiltrována. Rekrystalizace ze směsi methanol-DIPE poskytla v názvu uvedenou sloučeninu jako bílou pevnou látku (6,1 g, 35 %; směs diastereomerů 12 : 1), teplota tání 220 °C za rozkladu.

*H-NMR; 5 (CD₃OD, hlavní diastereomer), 7,82 (1H, d, J= 8,9 Hz), 4,13 (lH,m), 2,71 (1H, ddd, J= 10,8, 3,4, 3,4 Hz), 2,59 (3H, s), 2,17 (1H, dd, J= 10,4, 6,0 Hz), 1,80 (lH,m), 1,67 - 1,25 (8H, m), 1,16 - 0,99 (3H, m), 0,91 (9H, s), 0,80 (3H, d, J = 6,4 Hz) a 0,72 (3H, d, J = 6,4 Hz). ¹³C-NMR; δ (CD3OD), 177,1, 173,1, 172,5, 62,6, 50,9, 47,6, 42,7, 42,5, 35,0, 32,0, 29,6, 27,3, 27,0, 26,0, 25,6, 24,5, 22,0. IR; vmax(KBr); 3376, 3294, 2957, 1630, 1542, 1466, 1368 cm^-1. Nalezeno: C 62,58 %, H 9,78 %, N 10,95 %; pro C2oH₃₇N₃0₄ vypočteno C 62,63 %, H 9,72 %,N 10,96%.

Claims (3)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. 2S-cyklopentyl-N⁴-[2,2-dimethyl-lS-(methylkarbamoyl)propyl]-N¹-hydroxy-3R-izobutylsukcinamid, nebo jeho sůl, solvát nebo hydrát.
2. 2. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu podle nároku 1 spolu s farmaceuticky přijatelným nosičem.
3. 3. Farmaceutický prostředek podle nároku 2, vyznačující se tím, že je upraven pro orální podávání.