CZ286094B6 - Reesterifikace a jiné konverzní reakce derivátů kyseliny s amidinovou bází - Google Patents
Reesterifikace a jiné konverzní reakce derivátů kyseliny s amidinovou bází Download PDFInfo
- Publication number
- CZ286094B6 CZ286094B6 CS19922202A CS220292A CZ286094B6 CZ 286094 B6 CZ286094 B6 CZ 286094B6 CS 19922202 A CS19922202 A CS 19922202A CS 220292 A CS220292 A CS 220292A CZ 286094 B6 CZ286094 B6 CZ 286094B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- ester
- peptide
- lithium
- base
- metal compound
- Prior art date
Links
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 title claims abstract description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 24
- 238000007127 saponification reaction Methods 0.000 title claims abstract description 14
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims description 19
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 title description 3
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M Lithium hydroxide Chemical compound [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 29
- 150000002736 metal compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 14
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 claims abstract description 6
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 claims abstract description 6
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 claims abstract description 6
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 4
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 4
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 4
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M hydroxide Chemical compound [OH-] XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 4
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-M perchlorate Inorganic materials [O-]Cl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 4
- VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N perchloric acid Chemical compound OCl(=O)(=O)=O VLTRZXGMWDSKGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 12
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- -1 amino acid ester Chemical class 0.000 claims description 6
- 159000000006 cesium salts Chemical class 0.000 claims description 5
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 claims description 3
- TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N caesium atom Chemical class [Cs] TVFDJXOCXUVLDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- GQHTUMJGOHRCHB-UHFFFAOYSA-N DBU Substances C1CCCCN2CCCN=C21 GQHTUMJGOHRCHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 12
- 150000001409 amidines Chemical class 0.000 description 10
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- AMXOYNBUYSYVKV-UHFFFAOYSA-M lithium bromide Chemical compound [Li+].[Br-] AMXOYNBUYSYVKV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 8
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 230000006340 racemization Effects 0.000 description 6
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 6
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 6
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 description 5
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 4
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 4
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 4
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 4
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 4
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 3
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 3
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 3
- 229910003002 lithium salt Inorganic materials 0.000 description 3
- 159000000002 lithium salts Chemical class 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 3
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000007068 beta-elimination reaction Methods 0.000 description 2
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 2
- VSGNNIFQASZAOI-UHFFFAOYSA-L calcium acetate Chemical compound [Ca+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O VSGNNIFQASZAOI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000001639 calcium acetate Substances 0.000 description 2
- 229960005147 calcium acetate Drugs 0.000 description 2
- 235000011092 calcium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 230000032050 esterification Effects 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- SGUVLZREKBPKCE-UHFFFAOYSA-N 1,5-diazabicyclo[4.3.0]-non-5-ene Chemical compound C1CCN=C2CCCN21 SGUVLZREKBPKCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N D-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-MRVPVSSYSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-SCSAIBSYSA-N D-valine Chemical compound CC(C)[C@@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-SCSAIBSYSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UEEJHVSXFDXPFK-UHFFFAOYSA-N N-dimethylaminoethanol Chemical compound CN(C)CCO UEEJHVSXFDXPFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000001980 alanyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000006136 alcoholysis reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 125000002619 bicyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 150000003983 crown ethers Chemical class 0.000 description 1
- 229960002887 deanol Drugs 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000007257 deesterification reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002118 epoxides Chemical class 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 description 1
- 231100001261 hazardous Toxicity 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 150000002642 lithium compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- NBTOZLQBSIZIKS-UHFFFAOYSA-N methoxide Chemical compound [O-]C NBTOZLQBSIZIKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KQKWBQWQIAVCLZ-JSGCOSHPSA-N methyl (2S)-2-[[(2S)-2-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonylamino]-3-phenylpropanoyl]amino]propanoate Chemical compound COC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)CC1=CC=CC=C1 KQKWBQWQIAVCLZ-JSGCOSHPSA-N 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000007030 peptide scission Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000011218 segmentation Effects 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-M triflate Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C(F)(F)F ITMCEJHCFYSIIV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C67/00—Preparation of carboxylic acid esters
- C07C67/03—Preparation of carboxylic acid esters by reacting an ester group with a hydroxy group
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/12—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by hydrolysis, i.e. solvolysis in general
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/12—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length by hydrolysis, i.e. solvolysis in general
- C07K1/126—Aminolysis
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Abstract
Zmýdelnění se provádí s nejméně 0,1 molárním množstvím hydroxidu lithného jako báze, vztaženo na štěpící se ester. Kromě lithia se může použít sůl hořčíku nebo cézia. Sloučeninou kovu je bromid, chlorid, hydroxid, chloristan, octan, síran nebo uhličitan.ŕ
Description
Způsob zmýdelnění esteru aminokyseliny nebo esteru peptidu
Oblast techniky
Vynález se týká způsobu zmýdelnění esteru aminokyseliny nebo esteru peptidu ve vodném prostředí v přítomnosti sloučeniny kovu jako báze.
Dosavadní stav techniky
V literatuře byly popsány různé způsoby reesterifikace nebo zmýdelnění uvedených sloučenin. Při tom se pracuje například za silně kyselých nebo bazických podmínek, s enzymy /D. Seebach, Angew. Chem., 1990, 102, 13631/, a titanáty /D. Seebach, B. Weidmann, L. Widler v „Modem Synthetic Methods“, 1983/, s KF/korunovým etherem /B. Lejczak, P. Kafarski, J. Szewczyk, Synthesis 1982, 412/ a iontoměničovými pryskyřicemi /W. Pereira, V. Glose, W. Patton, B. Halpfem, J. Org. Chem. 1969, 34, 2032// nebo distanoxany /J. Otera, S. Ioka, H. Kozaki, J. Org. Chem. 1989, 54, 4013/. Dále byl popsán způsob reesterifikace popřípadě zmýdelnění derivátů esterů amidinové báze DBU v roztoku /EP 0 110 629, 0 150 962/ nebo polymemě vázané /T. Ishikava, Y. Ohsumi, T. Kawai, Bull. Chem. Soc. Jpn. 1990, 63 819/.
Z EP 0 110 629 Al je známo použití amidinové báze pro reesterifikaci. Amidin se zde nejčastěji podporuje epoxidy. Z tohoto spisu nelze seznat obzvláště mírné podmínky, které jsou nezbytné při reakci především opticky aktivních biomolekul. Ve všech příkladech se popisují jednoduché, stálé sloučeniny bez dalších funkčních skupin nebo optických aktivit.
Z Int. J. Peptide Protein Res. 37, 1991, 451—456 jsou známy reesterifikace za použití kalciumacetátu v methanolu. Jako substrát se nejčastěji používají pouze peptidy s C-terminálním glycinovým zbytkem. Takové peptidy jsou necitlivé vůči racemizaci. Při použití C-terminálního alanylového zbytku je reakce již inhibována. Kromě toho vyžaduje tato reakce zcela specifické chránící skupiny. Všeobecný mírný způsob reakce především biomolekul není použitím kalciumacetátu dán.
ZJ. Org. Chem. 38 /1973/, 1223-1225 je známo štěpení methylesterů karboxylové kyseliny sDBU při 165 °C po dobu 48 h. Takovéto podmínky jsou pro nejčastější štěpení esterů příliš drastické, to platí zejména pro opticky aktivní esteiy, které mají v α-poloze ke skupině esteru centrum chirality.
Z CA 114, 186011 /1991/ a Tetrahedron Letters 21 /1990/, 1181-1184 je známa β-eliminace s DBU nebo DBN. Jak je u β-eliminací všeobecně obvyklé a zde rovněž zmíněno, může se použít v principu téměř každá báze, například i kaliumhydroxid. Obecně použitelné mírné reakční podmínky nejsou ani zde popsány.
Všechny až dosud známé způsoby s výjimkou enzymatické metody vyžadují normálně zvýšené teploty, extrémní hodnoty pH a/nebo reakční doby. Pro citlivé deriváty esterů, které nesou například další funkční skupiny nebo mají jeden nebo několik chirálních atomů C, zejména pro takové sloučeniny, které mají v α-poloze k esterové funkci chirální atom C, je největší počet uvedených metod na základě reakčních podmínek nevhodný.
Úlohou předloženého vynálezu je proto způsob reakce, zmýdelnění a štěpení polymemě vázaných molekul, který má tak mírné reakční podmínky, že se mohou používat opticky aktivní sloučeniny a biomolekuly jako peptidy, aminokyseliny nebo nukleové kyseliny.
- 1 CZ 286094 B6
Podstata vynálezu
Tato úloha byla vyřešena způsobem zmýdelnění esteru aminokyseliny nebo esteru peptidu ve vodném prostředí pomocí báze, při kterém se zmýdelnění provádí s nejméně 0,1 molámím množstvím hydroxidu lithného jako báze, vztaženo na štěpící se ester.
Při zmýdelnění esterů peptidu se ukázalo, že se zde může štěpit i bez amidinové báze, již samotným lithiumhydroxidem za mírných podmínek.
S překvapením bylo zjištěno, že použití amidinové báze v kombinaci s kovovou solí urychlí tak velice zmýdelnění uvedených derivátů kyseliny, že se mohou nechat úspěšně zreagovat za šetrných podmínek, to znamená nízkých teplot a krátkých reakčních dob i citlivé deriváty kyseliny.
Podle výhodného provedení způsobu podle vynálezu se pracuje v přítomnosti sloučeniny kovu, vybrané ze solí lithia, hořčíku nebo cézia.
Sloučenina kovu se používá v 0,1 až 20 molámím množství, vztaženo na štěpící se ester.
Způsob se provádí při teplotě v rozmezí -20 °C až +65 °C.
Zmýdelňovat se mohou například citlivé estery peptidu bez racemizace na C-atomu C-terminální aminokyseliny. Při tom zůstávají případně chráněné funkčnosti bočních řetězců, které neobsahují žádnou funkci esteru. Tak bylo například možné zmýdelnit ester heptapeptidu s DBU/LiBr v THF/H2O při krátkých reakčních dobách kvantitativně a bez racemizace. Zmýdelnění neproběhlo naproti tomu s vodným NaOH bez rozkladu a racemizace.
Sloučeninou kovu je bromid, chlorid, hydroxid, chloristan, octan, síran nebo uhličitan.
Pro kompenzaci vznikající volné kyseliny se používá triethylamin.
Podle výhodného provedení způsobu podle vynálezu se používá hydroxid lithný v 1,0 až 20 molámím množství, vztaženo na štěpící se ester.
S překvapením je možné převést pomocí způsobu podle vynálezu jednoduše estery jako například methylester na komplexní ester, jako například methylester.
Pomocí novějších technik se dnes synthetizují peptidy a polynukleotidy na polymemích nosičích /Merrifieldova syntéza/. Spojení s polymemím nosičem tvoří při tom nejčastěji esterová nebo amidová vazba. Odštěpení od nosného materiálu vyžaduje často drastické reakční podmínky a vede zpravidla ke ztrátě všech chránících skupin popřípadě chráněných funkcí v peptidu nebo v polynukleotidu. Tak se jako běžná činidla pro odštěpování používají kyselina trifluoroctová/HBr/TMS-trifluormethansulfonát, HF/anisol, NaOH/dioxan/H2O2 nebo dimethylaminoethanol/thaliummethanolát. Oproti těmto drastickým podmínkám se hodí kombinace činidel amidinová báze/kovová sůl a zejména lithná sůl výborně ke štěpení vazby peptidu a polynukleotidu od polymemího nosiče. Při tom se mohou při odštěpení získat neštěpící se, neracemizující volitelné estery, amidy nebo odpovídající volné kyseliny peptidu nebo polynukleotidu.
Chrániči skupiny, které nejsou labilní vůči bázím, eventuelně další funkční skupiny v molekule, zůstanou při tom nedotčeny. Tato metoda se při tom hodí zejména pro uvolňování citlivých molekul, jakož i pro vytvoření chráněných segmentů peptidu na polymemím nosiči, které se
-2CZ 286094 B6 používají pro další kopulaci segmentu na delší řetězce peptidů. Obzvláště výhodné při tom dále je, že se může upustit od citlivých, zčásti nebezpečných činidel jako HF, TlOEt n.j.
Pro zmýdelnění derivátů kyseliny, s výhodou esteru se způsobem podle vynálezu pracuje obvykle následovně:
derivát kyseliny se rozpustí nebo suspenduje v rozpouštědle, s výhodou se používají ethery jako THF nebo dioxan. Po přídavku vody /1 +, s výhodou 10 až lOOnásobném molámím množství/, báze amidinu, například DBU nebo DBN, která se používá v 1 až 10 molámím množství, s výhodou 1 až 4 molámím množství, a přídavku kovové sloučeniny, s výhodou se používají sole lithia, hořčíku nebo cézia v 0,1 až 20 molámím množství, zejména 1 až 4 molámím množství, a přísadě kovové sloučeniny, s výhodou se přidávají sole lithia, hořčíku nebo cézia ve 2 až 10 molámím množství, se nechá zreagovat při teplotách -20 °C až 65 °C. Sled přídavků je libovolný. U derivátů citlivých na racemizaci se reakce provádí s výhodou mezi -20 °C až 30 °C při krátkých reakčních dobách.
Jako kovové sloučeniny se u výše uvedeného způsobu používají s výhodou halogenidy, zejména bromid nebo i chlorid /zejména při zmýdelňování/, hydroxid, chloristan, acetát, síran nebo uhličitan. Při reesterifíkaci nebo alkoholýze jsou vhodné i alkoholáty nebo sloučeniny kovů.
Amidinové báze jsou organické sloučeniny se strukturním prvkem přičemž volné valence atomů dusíku jsou spojeny s vodíkem a zejména /zejména všechny/ s atomy uhlíku. Volná valence na atomu uhlíku je s výhodou spojena s dalším uhlíkem, ale je možný například i další atom dusíku.
Jako amidinové báze se s výhodou používají nenukleofilní terciární báze. Obzvláště výhodné jsou bicyklické sloučeniny l,8-diazabicyklo[5.4.0]undec-7-en /DBU/ nebo l,5-diazabicyklo[4.3.0]non-5-en /DBN/. Amidinová báze se obvykle používá v 0,01 až 20 molámím množství vůči derivátu kyseliny. K lepším výsledkům vedla 0,2 až 4 molámí množství. Vzhledem k tomu, že při zmýdelnění esteru vznikne volná skupina kyseliny, musí se zde amidinová báze použít nejméně v molámím množství, když se funkčnost kyseliny nemá podpořit další pomocnou bází, s výhodou terciárním aminem, jako například triethylaminem. Pomocná báze může být přítomna i v pufračním systému.
Kovové sloučeniny, zvláště výhodné jsou lithné sole a dále hořečnaté a cézné sole, se používají obvykle v 0,1 až 20 molámím množství. Zejména výhodná jsou 2 až 10 molámí množství kovové sloučeniny, vždy vztaženo na ten který derivát kyseliny.
Při pokusech, které vedly k předloženému vynálezu, se ukázalo také, že se v některých případech může použít samotný lithiumhydroxid, nebo jiná lithná sůl a báze, takže v reakčním roztoku jsou přítomné lithné a hydroxidové ionty, pro zmýdelnění esterů aminokyseliny nebo esterů peptidů. Při tom je vhodné 1,0 až 20 molámí množství lithiumhydroxidu vůči sloučenině, která se má zmýdelnit. Jestliže je lithiumhydroxid přítomný v pufračním systému popřípadě je přítomna pomocná báze, pak se může používat lithná sloučenina již i v 0,1 molámím množství. Vznikající
-3CZ 286094 B6 volná kyselina se potom neutralizuje pomocnou bází a pufračním systémem, takže zůstane zachován alkalický charakter reakčního roztoku pro zmýdelnění.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Štěpení peptidu-pryskyřice, výroba Boc-Leu-Ala-Gly-Val-OH /15c/
Po suspendování Boc-Leu-Ala-Gly-Val-/PS-Pam-pryskyřice/ /15/ a /150 mg, 0,093 mmol peptidu/ v roztoku LiBr /40 mg, 0,46 mmol/ v THF /1,8 ml/ v roztoku LiBr /40 mg, 0,46 mmol/ v THF /1,8 ml/ a vodě /0,2 ml/ a míchání po dobu 15 minut při teplotě místnosti, byl přidán DBU /7 μΐ, 0,047 mmol/. Po 4 hodinovém míchání při teplotě místnosti byla reakční směs zfiltrována, pryskyřice byla promyta ethylacetátem /10 ml/, zpracována 1 N HC1 /10 ml/ a dvakrát extrahována ethylacetátem /10 ml/. Po usušení spojených organických extraktů sMgSO4, filtraci a oddestilování rozpouštědla byla sušena při vysokém vakuu. Získaný produkt /81 mg/ byl mírně znečištěn podílem D-Val 1 % /plynová chromatografie GC/. Výtěžek byl určován pomocí ’Η-NMR na surovém produktu acetonitrilem jako vnitřním standardem: 34 mg /81%/. Esterifikace surového produktu CH2N2 vedla k produktu s ’Η-NMR spektrem odpovídajícím spektru 15 b.
Příklad 2
Štěpení peptidu pryskyřice, výroba Boc-Leu-Ala-Gly-Phe-OH /16c/
Po suspendování Boc-Leu-Ala-Gly-Phe /PS-Pam-pryskyřice/ /16a/ /150 mg, 0,084 mmolu peptidu/ v roztoku LiBr /36 mg, 0,41 mmol/ v THF /10 % obj/obj H2O/ /2 ml/ se přidalo po 15ti minutovém míchání při teplotě místnosti DBU /6,3 μΐ, 0,042 mmol/. Po 4 hodinovém míchání při teplotě místnosti se reakční směs zfiltrovala, pryskyřice se promyla ethylacetátem /asi 10 ml/, zpracovala IN HC1 /asi 10 ml/ a dvakrát extrahovala ethylacetátem /asi 10 ml/. Po zpracování, jako výše, bylo izolováno 96 mg znečištěného 16c s podílem D-Phe 2% /plynová chromatografie GC/. Podíl 16c byl zjišťován pomocí lH-NMR u surového produktu s acetonitrilem jako vnitřním standardem ve výši 40 mg /93 %/. Esterifikace surového produktu CH2H2 poskytla ’Η-NMR spektrum odpovídající 16b.
Příklad 3
Ac-D-Nal-D-p-Phe-D-Pal-Ser-Tyr-D-Cit-Leu-OH
250 mg /0,233 mmolu/ Ac-D-Nal-D-p-Cl-Phe-D-Pal-Ser-Tyr-D-Cit-Leu-OMe bylo suspendováno v 15 ml THF, suspenze byla doplněna 1 ml vody a roztokem 11,2 mg /0,468 mmolů/ LiOH v 1 ml vody a reakční směs se míchala 4 hodiny při teplotě místnosti. Pak již podle HPLC nebyl přítomen žádný adukt. Reakční roztok se pomocí 1 N kyseliny chlorovodíkové upravil na pH 4, ve vakuu se odstranil THF, zbytek se zředil 15 ml vody a odsál. Produkt byl digerován při 80 °C 30 ml acetonitrilu za horka, znovu odsát a usušen. Nakonec se získalo /220 mg /90 %/ Ac-D-Nal-D-p-Cl-Phe-D-Pal-Ser-Tyr-D-Cit-Leu-OH, podle HPLC s čistotou 98,5 %. V ’Η-NMR spektru nebyl signál methylesteru při 3,6 ppm již přítomný, jinak spektrum odpovídalo srovnávacímu spektru nezávisle vyrobenému Ac-D-Nal-D-p-Ci-Phe-D-Pal-Ser
-4CZ 286094 B6
Tyr-O-Cit-Leu-OH. Test na racemát prováděný plynovou chromatografii neukázal žádnou významnou racemizaci leucinu /D-Leu-0,5 %/.
Příklad 4
Amonolýza, výroba Boc-Phe-Ala-NH2
Ve 30 ml suchého THF se rozpustí 300 mg /0,86 mmolů Boc-Phe-Ala-OMe a 274 mg /2,6 mmolů, 3 ekv./ a suspenduje se v něm 400 ml KF na A12O3 /odpovídající 2,2 mmolů F7. Při 0 °C se nechá protékat suchý plynný NH3. Po 24 h se adukt z největší části spotřebuje. ‘H-NMR poskytla podíl esteru asi 10%; chromatografii na tenké vrstvě nebyly zjištěny žádné vedlejší produkty.
Claims (7)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Způsob zmýdelnění esteru aminokyseliny nebo esteru peptidu ve vodném prostředí pomocí báze, vyznačující se tím, že se zmýdelnění provádí s nejméně 0,1 molámím množstvím hydroxidu lithného jako báze, vztaženo na štěpící se ester.
- 2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že se provádí v přítomnosti sloučeniny kovu, vybrané ze solí lithia, hořčíku nebo cézia.
- 3. Způsob podle nároku 2, vyznačující se tím, že se sloučenina kovu používá v 0,1 až 20 molámím množství, vztaženo na štěpící se ester.
- 4. Způsob podle jednoho z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že se provádí při teplotě v rozmezí -20 °C až +65 °C.
- 5. Způsob podle jednoho zpředcházejících nároků 2 až 4, vyznačuj ící se tím, že sloučeninou kovu je bromid, chlorid, hydroxid, chloristan, octan, síran nebo uhličitan.
- 6. Způsob podle jednoho zpředcházejících nároků, vyznačující se tím, že se pro kompenzaci vznikající volné kyseliny používá triethylamin.
- 7. Způsob podle jednoho zpředcházejících nároků, vyznačující se tím, že se používá hydroxid lithný v 1,0 až 20 molámím množství, vztaženo na štěpící se ester.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE4123408 | 1991-07-15 | ||
| DE4124283A DE4124283A1 (de) | 1991-07-15 | 1991-07-22 | Umesterung von peptiden |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ220292A3 CZ220292A3 (en) | 1993-02-17 |
| CZ286094B6 true CZ286094B6 (cs) | 2000-01-12 |
Family
ID=25905493
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS19922202A CZ286094B6 (cs) | 1991-07-15 | 1992-07-14 | Reesterifikace a jiné konverzní reakce derivátů kyseliny s amidinovou bází |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6090913A (cs) |
| EP (2) | EP0675101B1 (cs) |
| JP (1) | JPH05271104A (cs) |
| AT (2) | ATE165078T1 (cs) |
| CA (1) | CA2073818A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ286094B6 (cs) |
| DE (3) | DE4124283A1 (cs) |
| DK (1) | DK0523461T3 (cs) |
| ES (1) | ES2097242T3 (cs) |
| HU (2) | HU220069B (cs) |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4825448A (en) * | 1986-08-07 | 1989-04-25 | International Mobile Machines Corporation | Subscriber unit for wireless digital telephone system |
| ES2156037B1 (es) * | 1997-04-01 | 2002-03-01 | Nicolau Francisco E Palomo | Sales de aminoacidos solubles en disolventes organicos y su uso en la preparacion de dipeptidos. |
| ES2156050B1 (es) * | 1998-03-31 | 2002-03-16 | Nicolau Francisco E Palomo | "sales de aminoacidos solubles de disolventes organicos y su uso en la preparacion de dipeptidos". |
| DE10107051C2 (de) | 2001-02-13 | 2003-06-26 | Dorma Gmbh & Co Kg | Elektromechanischer Drehflügelantrieb |
| US8541477B2 (en) | 2011-03-04 | 2013-09-24 | International Business Machines Corporation | Methods of depolymerizing terephthalate polyesters |
| CN107043339B (zh) | 2011-07-19 | 2019-09-06 | 希默赛生物技术有限责任公司 | 新交联试剂、大分子、治疗用偶联物及其合成方法 |
| GB201119871D0 (en) | 2011-11-17 | 2011-12-28 | Davy Process Techn Ltd | Process |
| GB201218078D0 (en) | 2012-10-09 | 2012-11-21 | Davy Process Techn Ltd | Process |
| US10308677B2 (en) | 2014-12-19 | 2019-06-04 | Cem Corporation | Coupling method for peptide synthesis at elevated temperatures |
| US9969769B2 (en) | 2014-12-19 | 2018-05-15 | Cem Corporation | Coupling method for peptide synthesis at elevated temperatures |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NL8005121A (nl) * | 1979-09-20 | 1981-03-24 | Erba Farmitalia | Biologisch actieve peptiden. |
| AU568516B2 (en) * | 1982-11-26 | 1988-01-07 | Bp Chemicals Limited | Transesterification of esters employing novel catalyst |
| JPH062397B2 (ja) * | 1983-11-28 | 1994-01-12 | 三井石油化学工業株式会社 | 共縮合ポリエステル層を有する積層体 |
| GB8401919D0 (en) * | 1984-01-25 | 1984-02-29 | Bp Chem Int Ltd | Transesterification process |
| US5015753A (en) * | 1986-07-14 | 1991-05-14 | The Dow Chemical Company | Process for preparing poly(alkylene carbonate) monoahls and polyahls useful as surfactants |
| US4876378A (en) * | 1988-05-23 | 1989-10-24 | Eastman Kodak Company | Recovery of dialkyl naphthalene-2,6-dicarboxylates from naphthalene-2,6-dicarboxylic acid-containing polyesters |
-
1991
- 1991-07-22 DE DE4124283A patent/DE4124283A1/de not_active Withdrawn
-
1992
- 1992-07-02 AT AT95108067T patent/ATE165078T1/de not_active IP Right Cessation
- 1992-07-02 EP EP95108067A patent/EP0675101B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1992-07-02 DE DE59207927T patent/DE59207927D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1992-07-02 AT AT92111238T patent/ATE148090T1/de not_active IP Right Cessation
- 1992-07-02 DE DE59209289T patent/DE59209289D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1992-07-02 ES ES92111238T patent/ES2097242T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1992-07-02 EP EP92111238A patent/EP0523461B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1992-07-02 DK DK92111238.9T patent/DK0523461T3/da active
- 1992-07-14 CA CA002073818A patent/CA2073818A1/en not_active Abandoned
- 1992-07-14 JP JP4186658A patent/JPH05271104A/ja active Pending
- 1992-07-14 HU HU9202315A patent/HU220069B/hu not_active IP Right Cessation
- 1992-07-14 CZ CS19922202A patent/CZ286094B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1992-07-14 HU HU0004999A patent/HU221753B1/hu not_active IP Right Cessation
-
1997
- 1997-03-27 US US08/826,258 patent/US6090913A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0523461B1 (de) | 1997-01-22 |
| EP0675101B1 (de) | 1998-04-15 |
| HU0004999D0 (en) | 2001-03-28 |
| US6090913A (en) | 2000-07-18 |
| CA2073818A1 (en) | 1993-01-16 |
| ATE148090T1 (de) | 1997-02-15 |
| HU9202315D0 (en) | 1992-10-28 |
| EP0523461A3 (en) | 1993-10-20 |
| CZ220292A3 (en) | 1993-02-17 |
| JPH05271104A (ja) | 1993-10-19 |
| DE59207927D1 (de) | 1997-03-06 |
| HU220069B (hu) | 2001-10-28 |
| ATE165078T1 (de) | 1998-05-15 |
| DK0523461T3 (da) | 1997-05-12 |
| DE4124283A1 (de) | 1993-01-21 |
| HU221753B1 (hu) | 2002-12-28 |
| HUT61577A (en) | 1993-01-28 |
| ES2097242T3 (es) | 1997-04-01 |
| EP0675101A1 (de) | 1995-10-04 |
| EP0523461A2 (de) | 1993-01-20 |
| DE59209289D1 (de) | 1998-05-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU616054B2 (en) | Urethane-protected amino acid-n-carboxyanhydrides | |
| US4914226A (en) | Malonic acid derivatives and methods for their synthesis | |
| US6251625B1 (en) | Process for preparing peptides and N-carbamoyl-protected peptides | |
| CZ286094B6 (cs) | Reesterifikace a jiné konverzní reakce derivátů kyseliny s amidinovou bází | |
| EP0098865B1 (en) | Peptide synthesis and amino acid blocking agents | |
| KR930002966B1 (ko) | 디펩티드의 제조방법 | |
| EP0149594A2 (en) | Enzymatic coupling of n-formyl amino acids and/or peptide residues | |
| US4182654A (en) | Production of polypeptides using polynucleotides | |
| US4315074A (en) | Molecular transformation procedure | |
| EP0536324B1 (en) | Method for forming an amino acid thiohydantoin using an n-substituted ketenimine activator | |
| WO2013131978A1 (en) | Process for the preparation of intermediates useful in the preparation of a viral protease inhibitor | |
| US5214195A (en) | Allyl esters and the use thereof for the build-up of solid phase systems for solid phase reactions | |
| US5028693A (en) | Urethane-protected amino acid-N-carboxyanhydrides | |
| US4929671A (en) | Allylic side chain-containing solid phase systems, processes for the preparation thereof and the use thereof in solid phase reactions | |
| EP0665229A1 (en) | Process for the production of nucleic acid base derivatives | |
| EP0277561B1 (en) | New arginine derivative, process for the preparation thereof and its use in peptide synthesis | |
| US4581167A (en) | Peptide synthesis and amino acid blocking agents | |
| US4508657A (en) | Peptide synthesis and amino acid blocking agents | |
| WO2006074466A2 (en) | Synthesis of epoxide based inhibitors of cysteine proteases | |
| US5455363A (en) | Amino acid derivatives for peptide synthesis | |
| JP2748897B2 (ja) | 新規なアルギニン誘導体およびこれを用いるペプチドの製造方法 | |
| JP2002521364A (ja) | アミノ−アルデヒド固相支持体、そのためのリンカー並びにそれを製造する方法およびその用途 | |
| WO2007020620A1 (en) | Novel coupling agent and uses thereof | |
| JP3265378B2 (ja) | 異種の光学活性なα−アミノ酸からなるＮ，Ｎ´−エチレン架橋したジペプチドおよびそれらの合成法 | |
| CA1114762A (en) | Molecular transformation procedure |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| IF00 | In force as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20100714 |