CZ260798A3

CZ260798A3 - Benzothiofeny, přípravky s jejich obsahem a způsoby

Info

Publication number: CZ260798A3
Application number: CZ982607A
Authority: CZ
Inventors: George J. Cullinan; Alan D. Palkowitz
Original assignee: Eli Lilly And Company
Priority date: 1996-02-22
Filing date: 1997-02-19
Publication date: 1999-05-12
Also published as: BR9707657A; AU713204B2; PT791591E; EP0791591A1; ATE204869T1; AR005970A1; DE69706338T2; CA2246721A1; NZ331461A; DE69706338D1; AU2276497A; AR005969A1; TR199801612T2; PL328832A1; ES2162196T3; NO983802D0; EA000767B1; YU6797A; CN1211921A; NO983802L

Description

(57) Anotace:

Řešení poskytuje nové sloučeniny benzothiofenu obecného vzorce I, kde substituenty Ri, R2, R3, R4 a X mají specifický význam; farmaceutické přípravky s jejich obsahem a způsoby použití těchto sloučenin k inhibici kostního úbytku při osteoporóze, ke snížení hladin sérového cholesterolu a k inhibici estrogendependentních nádorů.

CZ 2607-98 A3 • ·

I · · · · ·

BENZOTHIOFENY, PŘÍPRAVKY S JEJICH OBSAHEM A ZPŮSOBY

Oblast techniky

Vynález se týká oblastí farmaceutické a organické chemie a poskytuje benzothiofenové sloučeniny, které jsou užitečné k léčení různých lékařských indikací spojených s ošetřováním a prevencí postmenopauzálního syndromu a rakoviny prsu. Vynález se dále týká farmaceutických přípravků.

Dosavadní stav techniky

Osteoporóza popisuje skupinu chorob, které vycházejí z různých etiologií, ale které se vyznačují čistým úbytkem kosti na jednotku objemu. Důsledkem tohoto úbytku kostní hmoty a vzniklé lomivosti kostí je neschopnost skeletu poskytnout adekvátní strukturní oporu pro tělo. Jeden z nejběžnějších typů osteoporózy je spojený s menopauzou. Většina žen ztrácí za 3 až 6 let po zástavě menses přibližně 20 5 až přibližně 60 i kostní hmoty v trabekulární části kosti. Tento rychlý úbytek je obvykle spojen se zvýšením kostní resorpce a novotvorby. Přesto je resorpční cyklus více dominantní a výsledkem je čistý úbytek kostní hmoty. Osteoporóza je mezi postmenopauzálními ženami běžné a závažné onemocnění.

Odhaduje se, že touto chorobou trpí pouze v USA miliónu žen. Důsledky osteoporózy jsou pro jedince škodlivé a také odpovídají za velkou ekonomickou ztrátu díky • ·

• · • ·· Λ její chronicitě a potřebě rozsáhlé a dlouhodobé podpory (hospitalizace a domácí výživné péče) od následků onemocnění. To platí zvláště u starších žen. Kromě toho, přestože na osteoporózu se obecně nepomýšlí jako na život ohrožující stav, se zlomeninami starších žen spojen 20% až 30% procento tohoto podílu mortality může být přímo spojeno s postmenopauzální osteoporózou.

kostí kyčelních je u podíl mortality. Velké

Nejzranitelnější tkáň v kosti na účinky postmenopauzální osteoporózy je trabekulární kost. Tato tkáň se často uvádí jako spongiózní neboli houbovitá kost a je soustředěná zejména u konců kostí (blízko kloubů) a v obratlích páteře. Trabekulární tkáň se vyznačuje malými strukturami vzájemně propojených osteoidů, stejně jako pevnější a hustší kortikální tkání, která vytváří vnější povrch a centrální osu kosti. Tato síť vzájemně propojených trabekul poskytuje laterální oporu k vnější kortikální struktuře a je rozhodující pro biomechanickou pevnost celéstruktury. Při postmenopauzální osteoporóze je to především celková resorpce a trabekulární ztráty, co vede k poškození a lomivosti kosti. Při objasnění trabekulárních ztrát u postmenopauzálních žen není překvapující, že nejběžnější zlomeniny jsou spojeny s kostmi, které jsou velmi závislé na trabekulární opoře, například obratle, krček zatěžovaných kostí, jako například femuru (stehenní kosti) nebo paže. Zlomenina kyčelní kosti, zlomeniny krčků a drtivé zlomeniny obratlů jsou vskutku charakteristickými znaky postmenopauzální osteoporózy.

V současnosti jsou obecně přípustné pouze dva způsoby ošetřování postmenopauzální osteoporózy, estrogensubstituční terapie a podávání difosfonátú. Přestože je (spolupráce) pacienta nízká, neboť léčení

- 3 terapie obvykle úspěšná, compliance při terapii estrogeny je zpočátku estrogeny často způsobuje nežádoucí vedlejší účinky. Terapie difosfonáty při ošetřování osteoporózy je úspěšná s málo závažnými vedlejšími účinky, ale nemá žádný účinek na jiné symptomy vztahující se k menopauze.

V průběhu premenopauzálního období má většina žen nižší incidenci kardiovaskulárních onemocnění, než stejně staří muži. Po menopauze ale podíl kardiovaskulárních onemocnění u žen pomalu stoupá k odpovídajícímu poměru pozorovanému u mužů. Tato ztráta ochrany je spojena se ztrátou estrogenů a zvláště se ztrátou schopnosti estrogenů regulovat hladiny sérových lipidů.

Schopnost estrogenů regulovat hladiny sérových lipidů není zcela objasněná vlastnost, ale existují důkazy ukazující, že estrogen může způsobit upregulaci receptorú pro lipoproteiny LDL v játrech k odstranění nadbytečného cholesterolu. Kromě toho se zdá, že estrogeny mají nějaký účinek na biosyntézu cholesterolu a jiné blahodárné účinky na stav kardiovaskulárního systému.

V literatuře se uvádí, že u postmenopauzálních žen se substituční terapií estrogeny se hladiny sérových lipidů vrátily na koncentrace v premenopauzálním stavu. Tudíž estrogeny by se zdály být přijatelnou léčbou pro tento stav. Nicméně vedlejší účinky substituční terapie estrogeny nejsou přijatelné pro mnoho žen a omezují tak použití této terapie. Ideální terapií pro tento stav by bylo léčivo, které by regulovalo hladiny sérových lipidů jako estrogen, ale postrádalo by vedlejší účinky a rizika spojená s terapií estrogeny.

• 9

Β · » · • « ·

Estrogen-dependentní nádory, zvláště karcinom prsu, jsou hlavním léčebným problémem u žen, zvláště ve věku 35 až 65 let. Odhaduje se, že většina žen má šanci 1:10, že se u nich v průběhu života vyvine rakovina prsu. Karcinom prsu je hlavní příčinou mortality u žen, stejně jako příčinou invalidity, psychického traumatu a ekonomické ztráty. Velké procento žen, které onemocní touto chorobou, případně i jejím vlivem zemře, buďto přímo, nebo nepřímo na komplikace, například na metastázy, ztrátu přirozené odolnosti, nebo současné účinky terapeutických zásahů, jako například chirurgie, ozáření nebo chemoterapie.

použitím hormonech.

Velkého terapeutických podílu přínosu se dosáhlo zásahů založených na

Nejrozsáhlejší používanou terapií je použití tamoxifenu. Podíl žen s karcinomem prsu s pětiletým přežitím se touto terapií prudce zvýšil, nicméně podíl žen s dlouhotrvajícím přežitím (10 let a více) se nezvýšil ve stejném rozsahu. Tedy dokonce L- s nej lepšími kombinacemi terapeutických způsobů, například chirurgie, ozáření a/nebo chemoterapie, je dlouhodobá prognóza pro pacienty špatná, zvláště jsou-li přítomny metastázy. Nepochybně existuje velká potřeba lepších terapeutických postupu a možná více důležitá potřeba primární prevence tohoto onemocněni.

a ošetření estrogenvynález

Jako odpověď na zřejmou potřebu nových farmaceutických účinných látek, které jsou schopny zmírnit symptomy mimo jiné i postmenopauzálního syndromu dependentních nádorů, poskytuje tento benzothiofenové sloučeniny, farmaceutické přípravky s jejich obsahem a způsoby použití těchto sloučenin k inhibici kostního úbytku při osteoporóze, ke snížení hladin sérového cholesterolu a k inhibici estrogen-dependentních nádorů.

• · · · • φ · · · • * · · » · · · · · · · • · · • · · ·

V oboru organické chemie je dobře známo, že oxidace dusíku ve sloučenině vede ke snížení jeho bazicity a zvýšení jeho polarity, tj . tyto sloučeniny se stanou neutrálnějšími a obvykle rozpustnějšími ve vodě. In vivo je běžné, že mnoho léčiv obsahujících amin se oxiduje na své N-oxidy jako součást jejich metabolismu a exkrece a je to běžný mechanismus eliminace bázických sloučenin u žijících organismů. Oxidace dusíku vede často ke sloučeninám, které jsou farmakologicky méně účinné nebo inaktivní ve srovnání s jejich původními bázemi, nicméně to je nepředvídatelné a musí se zjišťovat u báze případ od případu, viz Goodman a Gilman, The Pharmacological Basis of Therapeutics, 6. vyd., Macmillan Publishing Co., New York, kap. 1, 1980. Například N-oxidace protirakovinných sloučenin vincinových alkaloidů vede k biologické inaktivitě, viz. C. J. Barnett a kol., J. Med. Chem., 21 (1), 88 - 96 (1978).

Podstata vynálezu

Tento vynález poskytuje sloučeniny obecného vzorce I

R¹ představuje atom vodíku, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, alkoxykarbonyloxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, • · • · • · · · • 0 ιι

O

II o

II

o

II

-O-COÍCi-Cg alkyl), -oc-(Ci-C₆ alkyl), -OC-O-Ar, -OC-Ar kde Ar představuje popřípadě substituovanou fenylovou nebo OSCf-alkyl s přímým řetězcem se 4 až 6 atomy uhlíku v alkylové části,

R² představuje R¹, atom chloru nebo fluoru,

R³ a R⁴ nezávisle představují alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo se spojují a vytváří polymethylenový řetězec se 4 až 6 atomy uhlíku, nebo dohromady s atomem dusíku, ke kterému jsou připojeny, tvoří morfolin a

X představuje skupinu -CH₂-, -CHOH₂-, -0-, nebo -C(=0)-, nebo jejich farmaceuticky přijatelný solvát nebo jeho sůl.

Tento vynález se dále týká farmaceutických přípravků obsahujících sloučeninu obecného vzorce I samotnou, nebo v kombinaci s jinými účinnými složkami.

Detailní popis vynálezu

Tento vynález se týká zjištění, že zvolená skupina 2aryl-3-aroyl (3-arylmethyl nebo 3-fenoxy)benzo[b]thiofenamin-N-oxidú, například sloučeniny obecného vzorce I, jsou užitečné k léčbě nebo prevenci osteoporózy, hyperlipidémie a estrogen-dependentních nádoru, zvláště karcinomu prsu.

Ve výše uvedeném vzorci představuje výraz alkylová ·<·« · · · · · * · »· · · » φ · · · ·

-ϊ ··»····· ··· ··· / · » · · · Φ · · · ·· ···· ·· ·* *· ·· skupina s 1 až 6 atomy uhlíku přímý nebo rozvětvený alkylový řetězec s 1 až 6 atomy uhlíku. Typické alkylové skupiny s 1 až 6 atomy uhlíku zahrnují methyl, ethyl, norm. propyl a norm. butyl. Výraz alkoxyskupina s 1 až 4 atomy uhlíku představuje skupiny, jako například methoxyskupinu, ethoxyskupinu, norm. propoxyskupinu, a norm. butoxyskupinu.

Popřípadě substituovaná fenylová skupina zahrnuje fenylovou skupinu a fenylovou skupinu jednou nebo dvakrát substituovanou alkylovou skupinou s 1 až 6 atomy uhlíku, alkoxyskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové čřásti, hydroxyskupinou, nitroskupinou, atomem chloru, fluoru nebo trichlormethylovou nebo trifluormethylovou skupinou.

Jestliže R³ a R⁴ tvoří polymethylenový řetězec se 4 až 6 atomy uhlíku, tento řetězec zahrnuje tetramethylen, pentamethylen a hexamethylen. S dusíkem, ke kterému se R³ a R⁴ připojují, vytváří například pyrrolidino-, piperidino- a hexamethyleniminoskupinu. _

Výraz šolvát představuje komplex, který se skládá z jedné nebo více molekul solutu, jako například sloučeniny obecného vzorce I, a molekuly rozpouštědla.

Výraz inhibovat je definován k zahrnutí jeho obecně přijatého významu, který zahrnuje potlačování, prevenci, omezování, mírnění, zlepšování, zpomalování, zastavení nebo zvrácení progrese nebo závažnosti, nebo tento účinek na výsledný symptom. Tento vynález je sám o sobě vhodný k léčebnému podání zahrnující jak terapeutické, tak i/nebo profylaktické.

Upřednostňované sloučeniny podle tohoto vynálezu • · · · • · · • · · • · · · · · • · • · · · zahrnuj ί [2-(4-hydroxyfenyl)-6-hydroxybenzo[b]thien-3-yl] [4-/2- (1piperidyl)ethoxy/fenyl]methylketon-N-oxid, [2- (4-hydroxyfenyl)-6-hydroxybenzo[b]thien-3-yl][4-/2-(1piperidyl)ethoxy/fenyl]methylketon-N-oxidhydrochlorid, [2-(4-hydroxyfenyl)-6-hydroxybenzo[b]thien-3-yl][4-/2-(1piperidyl)ethoxy/fenyl]methan-N-oxid, {6-hydroxy-3-[4-/2-(1-piperidinyl)ethoxy/fenoxy]-2-(4methoxyfenyl)}benzo[b]thiofen-N-oxid a {6-hydroxy-3-[4-/2-(1-piperidinyl)ethoxy/fenoxy]-2-(4hydroxyfenyl)}benzo[b]thiofen-N-oxid.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu (obecného vzorce I) se připravuji selektivní oxidací bazického dusíku sloučenin níže uvedeného obecného vzorce II

R³ z

Sloučeniny obecného vzorce II se mohou vyrobit podle stanovených postupů. Sloučeniny obecného vzorce II, kde X představuje skupinu -CO- se mohou připravit způsoby podrobně popsanými v US patentu č. 4 133 814, 4 418 068 a 4 380 635, které jsou všechny začleněny odkazem na tomto místě.

Způsob obecně začíná benzo[b]thiofenem obsahujícím 6hydroxyskupinu a 2-(4-hydroxyfenylovou) skupinu. Výchozí sloučenina se chrání, acyluje a odštěpí se ochranná skupina k vytvoření sloučenin obecného vzorce II. Příklady přípravy

ΦΦ ·· • · « těchto sloučenin poskytují výše uvedené US patenty.

Sloučeniny obecného vzorce II, které jsou estery karboxylových nebo sulfonových kyselin, se mohou připravit způsoby popsanými v US patentu č. 5 393 763, 5 482 949 a 5 482 949, které jsou všechny začleněny odkazem na tomto místě.

Obměny výše uvedených způsobů mohou být nezbytné při přizpůsobení se reaktivitám jednotlivých substituentú. Tyto obměny by byly jak známy, tak okamžitě zjištěny odborníkem v oboru organické chemie.

Sloučeniny obecného vzorce II, kde X představuje skupinu -CH;- nebo -CHOH-, se mohou připravit způsoby popsanými v US patentu č. 5 484 798, který je začleněn odkazem na tomto místě. Stručně, redukce karbonylu na karbinol a dále na methylen se může dosáhnout po krocích nebo v jednom kroku z karbonylu na methylen.

Karbonylové sloučeniny obecného vzorce II se mohou redukovat na karbinol LiAlH₄, NaBH.₄ a podobně v příslušných rozpouštědlech, jako jsou například chlorované uhlovodíky, tetrahydrofuran, ether, atd. při teplotách 0 až 30 C. Karbinol se může redukovat na methylen alkylsilany a kyselinou trifluoroctovou, například triethylsilanem v příslušných rozpouštědlech, jako je například dichlormethan nebo tetrahydrofuran při teplotě místnosti. Alternativně se může karbonylová sloučenina redukovat přímo na methylen použitím LÍAIH4 ve vysoce vroucím rozpouštědle, jako například propylbenzenu, při teplotách refluxování.

Sloučeniny obecného vzorce II, kde X představuje

- 10 ··«· ·· · · · * * • · · 9 · · · · · · • · · 9 9 · * ♦ 999999

9 9 9 9 9 9 9 ·

9 9 9 9 99 ·· ·· ·· skupinu -0-, se mohou připravit způsoby popsanými v US patentu č. 5 488 058, který je začleněn odkazem na tomto místě. Stručně, 2-arylbenzo[b]thiofen se brómuje v poloze 3. Tento bromid se nahradí fenoxidem obsahujícím bazický postranní řetězec v podmínkách Ullmanovy reakce.

Oxidace dusíku 3-aroylovém, 3-fenoxy- nebo 3arylmethylovém postranním řetězci sloučenin obecného vzorce II se uskuteční použitím zředěných vodných roztoků peroxidu vodíku se společným rozpouštědlem (kosolventem), jako například methanolem nebo ethanolem nebo halogenovanými uhlovodíky. Reakční podmínky pro tuto reakci mohou být v rozmezí teploty místnosti až 100 ^,;'C a trvání 1 až 72 h. Mělo by se připomenout, že se musí věnovat pozornost výběru oxidačního činidla, a že mnoho obvykle používaných činidel schopných oxidace dusíku, například oxid chromový, manganistan draselný, a podobně, se nesmí použít, neboť by také mohly oxidovat síru benzo[b]thiofenu. Upřednostňuje se ludíž mírnější činidlo, jako napří_klad peroxid vodíku. Příklady přípravy sloučenin obecného vzorce I používající tento postup jsou uvedeny dále.

Dále jsou uvedeny příklady přípravy sloučenin obecného vzorce I. Jsou uvedeny za účelem ilustrace a žádným způsobem nejsou zamýšleny k omezení rozsahu tohoto vynálezu.

Příklady provedení vynálezu

PŘÍKLAD 1 [2-(4-Hydroxyfenyl)-6-hydroxybenzo[b]thien-3-yl][4-/2-(l-piperidyl)ethoxy/fenyl]methylketon-N-oxid

0 0 0 ·· · ·

0 0 0 0 0 0 «· 000 0 0000 0 0 0 0 0 0 0

000· 00 ·· ·· g (4,23 mmol) [2-(4-hydroxyfenyl)-6-hydroxybenzo-[b]thien-3-yl][4-/2-(1-piperidyl)ethoxy/fenyl]methylketonu se rozpustilo ve 150 ml refluxujícího ethanolu a přidalo se 15 ml 30% vodného roztoku peroxidu vodíku. Reakční směs se 18 h vařila pod zpětným chladičem, pak se tenkovrstevnou chromatografií. ověřilo ukončení. Přidalo se dalších 15 ml 30% peroxidu vodíku a reakce se nechala pokračovat na dalších 18 h při teplotě refluxování. Reakce se nechala ochladit a těkavá rozpouštědla se odstranila odpařením ve vakuu. Surová látka se znovu rozpustila v trichlormethanu a oddělila vodou. Vrstva trichlormethanu se vysušila filtrací bezvodým síranem sodným a odpařila do sucha. Dostal se výtěžek 1590 mg sloučeniny pojmenované v nadpise v podobě světle žlutého amorfního prášku.

PMR: (CDCl₃-DMSO-d₆) ^:	7,70 δ (d, J = 6 Hz, 2H);	7, 43	(d,
J - 4 Hz,	1H) ; 7,27	(d, J = 1 Hz, 1H) ; 7,15	(d,	J = 5 Hz,
2H) ; 6,87	(dd, Ji = 6	Hz, J₂ = 1 Hz, 1H) ; 6, 77	(d,	J = 5 Hz,
2H); 6, 65	(d, J = 6	Hz, — 1H) ; 4, 54 (t, J = 2	Hz,	2H) ;	3,71
(t, J = 2	Hz, 2H); 3,	38 (m, 4H); 2,16 (m, 2H);	1.72	(m,	3H) ;

1, 48 (m, 1H) .

MS: m/e = 490 (M+) FD.

pKa: 6,28

Zdáni, relat. molek. hmotnost = 487 (66% dimethylformamid)

R, : 0,05 silikagel, trichlormethan:methanol v poměru 19:1 obj .

Analýza (%): C.HXGS.HG: Vypočteno: C, 66,3; H, 5,73; N,

2,76. Nalezeno: C, 66,46; H, 5,62; N, 2,76.

PŘÍKLAD 2 • · [2-(4-Methoxyfenyl)-6-methoxybenzo[b]thien-3-yl][4-/2-(1-piperidyl)ethoxy/fenyl]methylketon-N-oxid

1190 mg (2,38 mmol) [2-(4-methoxyfenyl)-6-methoxybenzo-[b]thien-3-yl] [4-/2-(1-piperidyl)ethoxy/fenyl]methylketonu se rozpustilo ve 100 ml methanolu a přidalo se 30 ml 30% vodného roztoku peroxidu vodíku. Reakční směs se zakalila, ale za několik hodin se vyjasnila. Reakce se nechala probíhat 72 h při teplotě místnosti. Reakční směs se do sucha odpařila a extrahovala do 100 ml ethylacetátu. Roztok ethylacetátu se promyl zředěným vodným roztokem chloridu sodného a vysušil filtrací bezvodým síranem sodným. Přidal se hexan a roztok se nechal krystalizovat při -20 oC. Žlutohnědá pevná látka se odfiltrovala a vysušila za vytěžení 720 mg sloučeniny pojmenované v nadpise.

PMR: shodné s předchozí strukturou

MS: m/e = 501 (M-16) FD pKa :6,39 _

Zdáni, relat. molek. hmnotnost = 517 (66% dimethylformamid)

R, : 0,07 silikagel, trichlormethan:methanol v poměru 19:1 obj .

PŘÍKLAD 3 [2-(4-Hydroxyfenyl)-6-hydroxybenzo[b]thien-3-yl][4-/2-(Ν,N-diethyl)ethoxy/fenyl]methylketon-N-oxid

2000 mg (4,33 mmol) [2-(4-hydroxyfenyl)-6-hydroxybenzo- [ b ]thien-3-yl] [4-/2-(N, N-diethyl)ethoxy/fenyl]methylketonu se rozpustilo v 60 ml methanolu a přidalo se 10 ml 30% vodného roztoku peroxidu vodíku. Reakce se nechala probíhat

h při teplotě místnosti. Reakční směs se do sucha odpařila a znovu rozpustila ve 100 ml ethylacetátu. Roztok ethylacetátu se promyl vodou a vysušil síranem sodným a odpařil do sucha. Tím se dostalo 1150 mg sloučeniny pojmenované v nadpise v podobě žlutohnědého amorfního prášku.

PMR: shodné s předchozí strukturou

MS: m/e = 478 (M+) a 462 (M-16) FD pKa: 6,15

Zdáni, relat. molek. hmnotnost = 498 (66% dimethylformamid) R_f: 0,14 silikagel, tríchlormethan:methanol v poměru 19:1 obj .

PŘÍKLAD 4 [2-(4-Hydroxyfenyl)-6-hydroxybenzo[b]thien-3-yl][4-/2-(1-morfolino)ethoxy/fenyl]methylketon-N-oxid

1100 mg (2,23 mmol) [2-(4-hydroxyfenyl)-6-hydroxybenzo-[b]thien-3-yl] [4-/2-(1-morfolino)ethoxy/fenyl]methylketonu se rozpustilo v 50 ml methanolu a přidalo se 30 ml 30% vodného roztoku peroxidu vodíku. Reakce se nechala probíhat 18 h při teplotě místnosti. Reakce se ověřila tenkovrstevnou chromatografii a přidalo se dalších 10 ml 30% peroxidu vodíku. Reakce pokračovala dalších 18 h. Reakční směs se do sucha odpařila a znovu rozpustila ve 100 ml ethylacetátu. Roztok ethylacetátu se promyl zředěným vodným roztokem chloridu sodného a vysušil síranem sodným a odpařil do sucha. To poskytlo 460 mg sloučeniny pojmenované v nadpise v podobě žlutohnědého amorfního prášku.

PMR: shodné s předchozí strukturou

MS: m/e = 492 (M+) a 475 (M-16) FD

R_f: 0,04 silikagel, trichlormethan:methanol v poměru 19:1 obj .

PŘÍKLAD 5 [2-(4-norm. Butylsulfonyloxyfenyl)-6-norm. butylsulfonyloxy-benzo[b]thien-3-yl][4-/2-(1-piperidyl)ethoxy/fenyl]methyl-keton-N-oxid

1250 mg (1,27 mmol) [2-(4-norm. butylsulfonyloxyfenyl)6-norm.butylsulfonyloxybenzo[b]thien-3-yl] [4-/2- (1piperidyl)ethoxy/fenyl]methylketonu se rozpustilo ve 125 ml methanolu a 25 ml ethanolu a přidalo se 30 ml 30% vodného roztoku peroxidu vodíku. Reakce se nechala probíhat 18 h při teplotě místnosti. Reakční směs se do sucha odpařila a znovu rozpustila ve 100 ml ethylacetátu. Roztok ethylacetátu se promyl vodou a vysušil síranem sodným a odpařil do sucha. Tím se- dostalo 390 mg sloučeniny pojmenované v nadpise v podobě žlutohnědého amorfního prášku.

PMR: shodné s předchozí strukturou

MS: m/e = 730 (M+) a 714 (M-16) FD

R_f: 0,16 silikagel, trichlormethan:methanol v poměru 19:1 obj .

PŘÍKLAD 6 [2-(4-Hydroxyfenyl)-6-hydroxybenzo[b]thien-3-yl][4-/2-(1-piperidyl)ethoxy/fenyl]methanol-N-oxid

Připravil se roztok z 10 ml 10% peroxidu vodíku a φ · • φ •φ φφφφ

100 ml methanolu. Κ tomuto roztoku se přidalo 476 mg (1 mmol) [2-(4-hydroxyfenyl)-6-hydroxybenzo[b]thien-3-yl] [4-/2-(1-piperidyl)ethoxy/fenyl]methanolu. Reakce se nechala probíhat 20 h při teplotě místnosti. Reakční směs se do sucha odpařila a triturovala se několikrát toluenem. Produkt se vysušil ve vakuu. To poskytlo výtěžek 230 mg sloučeniny pojmenované v nadpise v podobě žlutohnědého amorfního prášku.

PMR: shodné s předchozí strukturou

MS: m/e = 492 (M+) a 476 (M-16) FD pKa: 6,41

Analýza (%): C28H29NO5S. 2H₂O: Vypočteno: C, 63,7; H, 5,87; N, 2,65. Nalezeno: C, 63,13; H, 5,81; N, 2,43.

PŘÍKLAD 7 [2-(4-Hydroxyfenyl)-6-hydroxybenzo[b]thien-3-yl][4-/2-(1-piperidyl)ethoxy/fenyl]methan-N-oxid

Připravil se roztok z 20 ml 107 peroxidu vodíku a 100 ml methanolu. K tomuto roztoku se přidalo 1500 mg (3,27 mmol) [2-(4-hydroxyfenyl)-6-hydroxybenzo[b]thien-3-yl] [4-/2-(1-piperidyl)ethoxy/fenyl]methanu Reakční směs se mísila 20 h při teplotě místnosti. Reakční směs se do sucha odpařila ve vakuu a triturovala se několikrát toluenem. Produkt reakce se sušil ve vakuu po několik dní při teplotě místnosti. To poskytlo výtěžek 1090 mg sloučeniny pojmenované v nadpise v podobě žlutohnědého amorfního prášku.

PMR: (CDC1,)^: 7,42 δ (d, J = 4 Hz, 4H); 7,40 (d, J =

Hz,

1H) ;	7,	38	(d,	j =	= 1 Hz,	1H)	; 7,18	(d, J = 4	Hz,	2H) ;
7, 00	(d,	J =	4	Hz,	2H); 6,	, 98	(m, 1H)	, 6,92 (d,	J = 4	Hz,
2H) ;	4,	69 (	t,	J =	2 Hz,	2H) ;	4,27	(s, 2H);	3,78	(t,
J = 2	Hz	, 2h:	);	2,35	- 2, 60	(m,	4H) ; 2	, 38 (m, 2H) ;	1, 83	(m,

2H); 1.60 (m, 1H).

MS: m/e = 459 (M-16) FD pKa: 6,4 9

Zdáni, relat. molek. hmotnost = 461

Analýza (%): C28H₂₉NO₄S: Vypočteno: C, 70,71; H, 6,15; N,

2,95. Nalezeno: C, 70,12; H, 6,11; N, 3,09.

PŘÍKLAD 9 {6-Hydroxy-3-[4-/2-(1-piperidyl)ethoxy/fenoxy]-2-(4-methoxyfenyl)}benzo[b]thiofen-N-oxid

K roztoku 50 mg (0,10 mmol){6-hydroxy-3-[4-/2-(1piperidyl) ethoxy/fenoxy] -2r- (4-methoxyfenyl) }benzo [b] thiofenu ve 3 ml směsi methanolu a trichlormethanu v poměru 1:1 se přidalo 0,5 ml 30¾ roztoku peroxidu vodíku. Vzniklá směs se opatrně zahřívala na vodní lázni dokud analýza tenkovrstevnou chromatografií neukázala ukončení reakce (1 až 2 h) . Rozpouštědlo se potom odstranilo ve vakuu, aby se dostala žlutá pevná látka, která se triturovala směsí ethanolu a ethylacetátu. Filtrace poskytla 46 mg (92 7) (6hydroxy-3-[4-/2-(1-piperidyl)ethoxy/fenoxy]-2-(4-methoxy-fenyl)}benzo[b]thiofen-N-oxidu jako žluté pevné látky.

Teplota tání 120 až 125 C.

Ή NMR: (DMSO-dř,) ^: δ 10,30 (široký s, 1H) ; 7,53(d, J = 8,8 Hz,

2H); 7,15 (d, J = 2,0 Hz, 1H) ; 7,00 (d, J = 8,7 Hz, 1H) ;

6,93 (d, J = 8,8 Hz, 2H); 6,79 (s, 4H) ,

6,72 (dd, • · · · · · · · ······ ··· · · · · · · ·· ···· ·· ·· ·· ··

J = 8,7 Hz, 2,0 Hz, ÍH) ; 4,38 (m, 2H) ; 3,71 (s, 3H) ; 3,50 3,03 (m, 6H) ; 2,02 (m, 2H) ; 1,51 - 1,13 (m, 3H) ; 1.05 (m,

ÍH) .

FD MS: 492, 475, 390, 364.

Analýza (%): C28H29NO5S. 0, 45 H₂O: Vypočteno: C, 67,30; H, 6,03; N, 2,80. Nalezeno: C, 67,31; H, 5,96; N, 2,57.

PŘÍKLAD 10 {6-Hydroxy-3-[4-/2-(1-piperidyl)ethoxy/fenoxy]-2-(4hydroxyfenyl)}benzo[b]thiofen-N-oxid

Sloučenina pojmenovaná v nadpise se připraví podobným způsobem, jako je popsáno v příkladě 10.

Teplota tání 125 až 130 'C.

^ΧΗ NMR:	(DMSO-dg	)^: δ 7,39 (d, J = 8,6 Hz, 2H); 7,15	(d,
J = 2,1 Hz, ÍH) ;	6,99 (d, J = 8,7 Hz, ÍH) ; 6,77 (s,	4H) ,
6,7-3 (dd,	J = 8, 7	Hz, 2,1 Hz, 2H); 6,71 4d, J = 8,6 Hz,	2H) ;
4,37 (m,	2H); 3,	52 (m, 2H) ; 3, 38 - 3, 03 (m, 4H) ; 2,04	(m,
2H) ; 1,53	- 1,49	(m, 3H); 1.31 (m, ÍH).

FD MS: 477, 47.5, 460.

Analýza (%): C/7H27NO9S. 0, 5 Hů: Vypočteno: C, 66,65; H, 5,80; N, 2,88. Nalezeno: C, 66,66; H, 5,98; N, 2,89.

Dále uvedené příklady ilustrují způsoby použití sloučenin obecného vzorce I u experimentálních modeleu nebo v klinických studiích.

Postup testování

- 18 ♦ · ··

Obecný postup přípravy

V příkladech ilustrujících způsoby se použil postmenopauzální model, u kterého se určily účinky různých ošetření na hladiny cirkulujících lipidů.

dní staré samice krys kmene Sprague-Dawley (hmotnostní rozmezí 200 až 225 g) se získají z Charles-River Laboratoires (Portage, MI). U zvířat se v Charles-River Laboratoires buďto provede oboustranná ovarektomie, nebo se podrobí kontrolnímu chirurgickému postupu bez provedení poškození a za týden se potom dopraví lodí. Po příjezdu se umístí do kovových závěsných klecí ve skupinách 3 nebo 4 jedinců na klec a mají po dobu jednoho týdne dle libosti dostatek potravy (obsah vápníku přibližně 0,5 %) a vody. Teplota místnosti se udržuje na 22,2 °C ± 1,7 °C s relativní vlhkostí vzduchu minimální 40 %. Periodicky se v místnosti střídá 12 h světla a 12 h tmy.

Dávkovači režim, odběr tkáně

Po jednom týdnu období aklimatizace (tedy dva týdny po ovarektomii) se započne denní podávání testované sloučeniny. 17a-Ethinylestradiol nebo testovaná sloučenina se podává perorálně, pokud není ustanoveno jinak, v podobě suspenze v 1¾ roztoku karboxymethylcelulózy, nebo rozpuštěný ve 20¾ roztoku cyklodextrinu. Podává se zvířatům denně po 4 dny. Po dávkovacím režimu se zvířata zváží a anestetizují směsí ketaminu a xylazinu v poměru 2:1 obj. a kardiálním vpichem se odebere vzorek krve. Zvířata se pak usmrtí zadušením oxidem uhličitým, děloha se odstraní mediálním řezem a určí se hmotnost vlhké dělohy.

·· ·«·· ·· • · · 9 · · · · · ·

9 · 9 9 9 9 9 9 _ j Q _ ······ ·· ··· 99

X J 9 9 9 9 9 9 9 · ·· ···· 99 99 99 99

Analýza cholesterolu

Krevní vzorky se nechají srážet 2 h při teplotě místnosti a po centrifugací po dobu 10 min při 3000 x g se získá sérum. Obsah cholesterolu v séru se určí použitím Boehringer Mannheim Diagnostics o vysoké citlivosti ke zkoušení cholesterolu. Stručně, cholesterol se oxiduje na 4cholesten-3-on a peroxid vodíku. Peroxid vodíku potom reaguje s fenolem a 4-aminofenazonem v přítomnosti peroxidázy za vzniku p-chinoniminového barviva, které se detekuje spektrofotometricky při 500 nm. Koncentrace cholesterolu se potom vypočítá ze standadní křivky. Celé zkoušení je automatizované použitím Biomek Automated Workstation.

Zkoušení děložní eozinofilní peroxidázy (EPO)

Dělohy se až do enzymatického_ zkoušení uchovávají při 4 oC. Dělohy se potom homogenizují v 50 objemech 50mM TRIS pufru (pH 8,0) obsahujího 0,005¾ Triton X-100. Po přidání 0,01 i peroxidu vodíku a 10 mM O-fenylendiamin (konečné koncentrace) do TRIS pufru se po dobu 1 min při 450 nm zaznamenává zvýšení v absorbanci. Přítomnost eozinofilů v děloze je ukazatelem estrogenní aktivity sloučeniny. Maximální rychlost v intervalu 15 s je vymezena počáteční lineární částí reakční křivky.

Zdroj sloučeniny:

17a-Ethinylestradiol se ziskal od Sigma Chemical Co. ,

St. Louis, MO.

9 f> J · * • · · ·

9 * • · ·

Hyperlipidemie

Údaje uvedené v tabulce 1 ukazují výsledky k porovnání mezi krysami po ovarektomii, krysami ošetřenými 17?ethinylestradiolem (EE₂) a krysami ošetřenými určitými sloučeninami podle tohoto vynálezu. Přestože 17?ethinylestradiol při perorálním podání v množství 0,1 mg/kg za den způsobil snížení hladin sérového cholesterolu, také vykázal stimulační efekt na dělohu, takže hmotnost dělohy u EE₂ byla podstatně větší než hmotnost dělohy u zvířat po ovarektomii. Tato odpověď dělohy na estrogen je v oboru dobře známa.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu snížily hladinu sérového cholesterolu ve srovnání se zvířaty po ovarektomii.

Jak vyjadřují dále uvedené údaje, estrogennost byla také stanovena zhodnocením odpovědi děložní infiltrace eosinofily. Sloučeniny podle tohoto vynálezu nezpůsobily velké zvýšení v počtu eosinofilů pozorovaných ve vrstvě stromatu děloh u krys po ovarektomii. EE₂ způsobily podstatné a očekávané zvýšení infiltrace eosinofily.

Údaje uvedené v tabulce 1 ukazuji odpověď 5 až 6 krys z ošetřované skupiny.

• ·

Tabulka 1

Sloučenina č.	Dávka	Hmotnost	Děložní	Sér.
(Příklad č.)	mg/kg'¹	dělohy	eosinofily	chol.
		% zvýš.^L	(v_max) ^c	%rozkl.
EE₂ ^e	0, 1	207,5'	205, 8*	87,3*
1	0,1	31,2*	4,4	44, 9*
	1,0	29, 6'	4, 6	68,7*
	10, 0	8,3	2,5	70,3*
2	1,0	49, 2*	11,2	65, 7*
3	1,0	77,5*	21,7*	64,2*
4	1,0	62,5*	4,1	56, 2*
5	1,0	44, 4*	4,7	74,9*

^a 17á-ethinylestradiol ^b zvýšení hmotnosti dělohy v 1 oproti kontrolní skupině po ovarektomii ^c v_max eosinofilní peroxidázy _ ^d snížení hladiny sérového cholesterolu oproti kontrolní skupině po ovarektomii p<0,05

Postup testování osteoporózy

Dále je uveden obecný postup přípravy, krysy se denně ošetřují po dobu 35 dní (6 krys v ošetřované skupině) a 36. den se usmrtí udušením oxidem uhličitým. Období 35 dní postačuje k umožnění maximální redukce v kostní denzitě, měřené zde popsaným způsobem. V době usmrcení se dělohy odstraní, odřízne se vnější tkáň a obsahy látek se před stanovením vlhké hmotnosti vyloučí, aby se potvrdila deficience estrogenů spojená s úplnou ovarektomii. Děložní * 4 4 « 4 · · · ·

Β · · * · 44 444 444 • 4 4444 4 9

4444 ««' 44 4 4 44 hmotnost se při odpovědi na ovarektomii běžně sníží o přibližně 75 %. Dělohy se potom umístí do 10% formaldehydu pufrovaného na neutrální pH, aby se umožnila následná histologická analýza.

Pravé stehenní kosti se vyjmou a vystaví se RTGpaprskům, vytvořeným a analyzovaným programem analyzujícím zobrazení (NIH zobrazení) distální metafýzy. Proximální náhledy holenních kostí u těchto zvířat se také snímají kvantitativní počítačovou tomografií.

Ve shodě s výše uvedenými postupy se perorálně podávají testovaným zvířatům sloučeniny podle tohoto vynálezu a ethinylestradiol (EE₂) ve 20% roztoku hydroxypropyl-βcyklodextrinu.

V souhrnu způsobuje ovarektomie u testovaných zvířat významné snížení denzity stehenní kosti v porovnání s netknutou kontrolní skupinou ošetřenou vehikulem. Perorálně podaný ethinylestradiol (EE₂) bránil tomuto úbytku, ale stále existuje riziko děložní stimulace při tomto ošetření.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu zabraňují úbytku kosti obvyklým, na dávce závislým způsobem.

Zkoušení MCF-7 proliferace

Buňky adenokarcinomu prsu MCF-7 (ATCC HTB 22) se udržují v MEM (minimální esenciální medium, zbaveno fenolové červeně, Sigma, St. Louis, MO) obohaceném 10 % obj. fetálního bovinního séra (EBS), 2 mM L-glutaminu, 1 mM pyruvátu sodného, 10 mM HEPES (N-[2-hydroxyethyl]piperazinN'-[2-ethansulfonové kyseliny]}, neesenciálními • · ·· • · · aminokyselinami a bovinním inzulínem v koncentraci 1 (Lg/ml (kultivační medium). 10 dní před zkouškami se buňky MCF-7 přemístí do udržovacího media obohaceného 10 % fetálního bovinního séra stripovaného dextranem a povlečeným aktivním uhlím (DCC-FBS testovací medium) místo 10 % FBS, aby se spotřebovaly vnitřní zásoby steroidů. Buňky MCF-7 se odstraní z kultivačních lahví použitím media k oddělování buněk (Ca^+t/Mg^{+ +} zbaveného HBSS, t j . fenolové červeně), obohaceného 10 mM HEPES a 2 mM EDTA) . Buňky se promyjí dvakrát testovacím mediem a upraví na obsah 80 000 buněk/ml. Do mikrokultivačních jamek s plochým dnem (Costar 3596) se přidá přibližně 100 μΐ (8 000 buněk) a inkubují se 48 h při 37 oC ve zvlhčeném inkubátoru s 5% oxidem uhličitým, aby se umožnila adheze buněk a ustavení rovnováhy po přenosu. Sériová ředění léčiv a DMSO (dimethylsulfoxid) jako kontrolní ředidlo se připravují v testovacím mediu a 150 μί se přemístí ke trojicím mikrokultivací a následně se přidá 50 μΐ testovacího media ke konečnému objemu 200 μΐ. Po dalších 48 h při 37 oC ve zvlhčeném inkubátoru s 5% oxidem uhličitým se mikrokultivace na 4 h vystaví pulsnímu působení thymidinu (1 μΟΐ^ηπ^β) . Kultivace se ukončí mrazením po dobu 24 h při -70 oC a následným rozmrazováním a sběrem mikrokultur použitím Skatron Semiautomatic Cell Harvester. Vzorky se počítají kapalinovou scintilací použitím počítače Wallac BetaPlace β. Například sloučenina příkladu 1 má v tomto zkoušení ΙΟ_)υ přibližně 1 μΜ.

Inhibice nádoru mléčné žlázy indukovaná DMBA

Estrogen-dependentní nádory mléčné žlázy se vytvoří u krys kmene Sprague-Dawley, které se získají od Harlan Industries, Indianapolis, Indiana. Ve věku přibližně 55 dní tyto krysy obdrží jednotnou perorální dávku 20 mg 7,1244 « ·

• · ·

4 4 4 · • * · • · · • #4 é

4 4 4

dimethylbenz[a]anthracenu (DMBA). Přibližně za 6 týdnů po podání DMBA se mléčné žlázy v týdenních intervalech prohmatávají na výskyt nádorů. Jakmile se vyskytne jeden nebo více nádorů, změří se metrickou průměrkou nejdelší a nej kratší průměr každého nádoru, měření se zaznamenávají a toto zvíře se vybere ke zkoušení. Vynakládá se úsilí rovnoměrně rozdělit různé velikosti nádorů u ošetřovaných a kontrolních skupin tak, že mezi testovanými skupinami jsou stejnoměrně rozděleny nádory o průměrné velikosti. Kontrolní skupiny a testované skupiny pro každý experiment obsahují 5 až 9 zvířat.

Sloučeniny obecného vzorce I se podávají buďto v intraperitoneálních injekcích ve 2% roztoku arabské gumy, nebo perorálně. Perorálně podávané sloučeniny se buďto rozpustí nebo suspendují v 0,2 ml kukuřičného oleje. Každé ošetření, včetně kontrolních ošetření arabskou gumou a kukuřičným olejem se každému testovanému zvířeti podává jednou denně. Po počátečním měření nádoru a výběru testovaných zvířat se nádory měří každý týden výše uvedeným způsobem. Ošetřování a měření zvířat pokračuje po dobu 3 až 5 týdnů, v průběhu kterých se určují konečné plochy nádorů.

Pro každou sloučeninu a kontrolní ošetření se určí změna ve středním rozsahu nádoru.

Aktivita v nejméně jedné z výše uvedených zkoušek ilustruje užitečnost sloučenin obecného vzorce I.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu tvoří farmaceuticky přijatelné adiční soli s kyselinami a bázemi a zahrnují fyziologicky přijatelné soli, které se často používají ve farmaceutické chemii. Takové soli jsou také součástí vynálezu. Typické anorganické kyseliny používané k vytvoření kyselin, fenylovou a

takových solí zahrnují kyselinu chlorovodíkovou, bromovodíkovou, jodovodíkovou, dusičnou, sírovou, fosforečnou, fosforičitou a podobně. Mohou se také použít soli odvozené od organických kyselin, jako například alifatických mono a dikarboxylových alkylkarboxylových kyselin substituovaných skupinou, hydroxyakylkarboxylových hydroxyalkyldikarboxylových kyselin, aromatických kyselin, alifatických a aromatických sulfonových kyselin.

Takové farmaceuticky přijatelné soli tedy zahrnují acetát, fenylacetát, trifluoracetát, akrylát, askorbát, benzoát, chlorbenzoát, dinitrobenzoát, hydroxybenzoát, methoxybenzoát, methylbenzoát, o-acetoxybenzoát, naftalen-2benzoát, bromid, isobutyrát, fenylbutyrát, β-hydroxybutyrát, butin-1,4-dikarboxylát, hexin-1,4-dikarboxylát, kaproát, kaprylát, chlorid, cinnamát, citrát, formiát, glykolát, heptanoát, hippurát, laktát, malát, hydroxymaleát, malonát, mandelát, mesylát, fumarát, maleát, nikotinát, isonikotinát, nitrát, oxalát, ftalát, tereftalát, fosfát, monohydrogenfosfát, dihydrogenfosfát, metafosfát, pyrofosfát, hydroxypropionát, propionát, fenylpropionát, salicylát, sebakát, sukcinát, suberát, sulfát, hydrogensulfát, pyrosulfát, sulfit, hydrogensulfit, sulfonát, benzensulfonát, p-bromfenylsulfonát, chlorbenzensulfonát, ethansulfonát, 2-hydroxyethansulfonát, methansulfonát, naftylen-l-sulfonát, naftylen-2-sulfonát, ptoluensulfonát, xylensulfonát, tartarát a podobně. Upřednostňovanou solí je hydrochloridová sůl.

kyselinami vzorce I se s

Farmaceuticky přijatelné adiční soli s typicky tvoří reakcí sloučeniny obecného ekvimolárním množstvím nebo nadbytkem kyseliny. Reaktanty se obvykle slučují ve společném rozpouštědle, jako například • · · · • 9 ♦ · * · • · · · · · · · · a 9 ···« ·· ·· · 9 ·· etheru, benzenu, methanolu, ethanolu nebo acetonu. Sůl se obvykle vysráží z roztoku během přibližně 1 h až 10 dní a může se izolovat filtrací, nebo se rozpouštědlo může oddělit běžnými způsoby.

Báze obvykle používané ke tvorbě solí zahrnují hydroxid amonný a hydroxidy alkalických kovů a kovů alkalických zemin, karbonáty, stejně jako alifatické a primární, sekundární a terciální aminy, alifatické diaminy. Báze zvláště užitečné při přípravě adičních solí zahrnují hydroxid amonný, uhličitan draselný, methylamin, diethylamin, etylendiamin a cyklohexylamin.

Farmaceuticky přijatelné soli obvykle mají vlastnosti zlepšené rozpustnosti v porovnání se sloučeninou, od které se odvozují, a jsou tedy často přístupnější k přípravě tekutin nebo emulzí.

Obvykle __se upřednostňuje podávat sloučeninu obecného vzorce I ve formě adiční soli s kyselinou, jak je běžné při podání léčebně významné bázické skupiny, jako je například piperidinový cyklický kruh. Je také výhodné podat takovou sloučeninu perorální cestou.

Jak se zde používá, výraz účinné množství znamená množství sloučeniny obecného vzorce množství sloučeniny obecného vzorce I

I, nebo popřípadě spojené s množstvím sloučeniny obecného vzorce II, které je schopné zmírnit symptomy různých zde popsaných patologických stavů. Konkrétní podaná dávka sloučeniny podle tohoto vynálezu bude samozřejmě určena konkrétními okolnostmi okolo případu, zahrnujícími například podanou sloučeninu, cestu podání, stav pacienta a ošetřovaný patologický stav. Typická denní ·· ·· ·· ···· *· »· ···· · · · β ♦ ♦ · dávka sloučeniny podle tohoto vynálezu bude obsahovat netoxickou dávkovou hladinu od přibližně 0,1 mg do přibližně 1000 mg za den a zvláště bude přibližně 20 mg až přibližně 200 mg za den.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu se mohou podávat různými cestami zahrnujícími perorální, rektální, transdermální, podkožní, intravenózní, intramuskulární a intranasální podání. Tyto sloučeniny se přednostně připravují těsně před podáním, o jejich výběru rozhodne ošetřující lékař.

Celkové množství účinných složek v těchto přípravcích zahrnuje 0,1 % až 99,9 % hmotnosti přípravku.

Farmaceuticky přijatelným se míní, že nosná látka, ředidlo, excipienty a sůl musí být kompatibilní s ostatními složkami přípravku a nesmí být pro jejich příjemce zdraví škodlivé.

Účinnou složkou v dále uvedených přípravcích se míní sloučenina obecného vzorce I.

Farmaceutické přípravky podle tohoto vynálezu se mohou připravit způsoby známými v oboru s použitím dobře známých a snadno dostupných složek. Například sloučeniny obecného vzorce I, spolu s nebo bez další účinné složky, jako například sloučeniny obecného vzorce II, se mohou přetvářet s běžnými excipienty, ředidly, nebo nosnými látkami a formovat do tablet, tobolek, suspenzí, prášků a podobně. Excipienty, ředidla a nosné látky, které jsou pro takové přípravky vhodné, zahrnují tyto příklady: plniva a bobtnavé látky, jako například škrob, cukry, mannitol a deriváty • » « · · · křemičitanů, pojivá, jako například karboxymethylcelulózu a jiné deriváty celulózy, algináty, želatinu a polyvinylpyrrolidon, vlhčiva, jako například glycerol, desintegrační činidla, jako například uhličitan vápenatý a uhličitan sodný, látky zpomalující rozpouštění, jako například parafín, urychlovače absorpce, jako například kvarterni amoniové sloučeniny, povrchově aktivní látky, jako například cetylalkohol, gljcerolmonostearát, adsorpční nosné látky, jako například kaolín a bentonit a lubrifikační činidla, jako například mastek, stearát vápenatý a hořečnatý a pevné polyethylenglykoly.

Sloučeniny se mohou také připravit ve formě tinktur nebo roztoků vhodných pro perorální podání nebo jako roztoky vhodné pro parenterální podání, například intramuskulární, podkožní nebo intravenózní cestou.

Navíc jsou sloučeniny zcela vhodné k přípravě dávkových forem s. opožděným uvolňováním a podobně. Přípravky se mohou sestavit tak, že uvolňují aktivní složku pouze nebo přednostně v určitém místě organismu, popřípadě v časovém úseku. Potahy, obaly a ochranné matrice mohou být vyrobeny například z polymemích substancí nebo vosků.

Dále uvedené příklady přípravků jsou pouze ilustrací a nejsou zamýšleny k omezení rámce tohoto vynálezu.

PŘÍPRAVEK 1 Želatinové kapsle

Tvrdé želatinové kapsle se připravují použitím těchto • · · · · ·

9 9 9 9 · ·· «····· · · · · · 5 · · • » «··· 9 9 9 9 9 9 9 9 složek:

Složka

Množství (mg/kapsle) účinná složka škrob, NF škrob ve formě sypkého prášku tekutý silikon, 350 centistokes

Výše uvedený přípravek se může stanovenými přijatelnými odchylkami.

0,1 - 1000 0 - 650

- 650

0-15 obměnit v souladu se

Přípravek ve formě tablety se připraví použitím těchto složek:

PŘÍPRAVEK 2 Tablety

Složka účinná složka mikrokrystalická celulóza oxid křemičitý (vyžíhaný) kyselina stearová

Složky se promísí a vylisují

Alternativně se tablety, 2,5 až 1000 mg účinné složky,

PŘÍPRAVEK 3

Tablety

Množství (mg/tableta)

2,5- 1000 200 - 650

- 650

5-15 do formy tablet.

nichž každá obsahuje tímto způsobem:

z připraví

- 30 Složka

Φ · * · · φ « · ΦΦΦΦΦΦ ··« · · · » · · • · « · a · φ Φ φ · ·· » Φ

Množství (mg/tableta)

- 1000

4,5 0, 5 účinná složka škrob mikrokrystalická celulóza polyvinylpyrrolidon (jako 10% vodný roztok) natriumkarboxymethylcelulóza stearát horečnatý mastek

Účinná složka, škrob a celulóza se proseje sítem na rozměr částice 0,3 mm a důkladně promísí. Roztok polyvinylpyrrolidonu se promísí se vzniklými prášky, a potom se proseje sítem na rozměr částice 1,168 mm. Takto připravené granule se suší při 50 až 60 °C a prosejí sítem na rozměr částice 0,912 mm. Potom se ke granulím přidá natriumkarboxymethylcelulóza, stearát hořečnatý a mastek, předem proseté sítem na rozměr částice 0,246 mm, a po promísení se lisují na tabletovačce, aby se dostaly tablety.

Suspenze obsahující v každé 5ml dávce 0,1 až 1000 mg léčiva se připraví tímto způsobem:

PŘÍPRAVEK 4

Suspenze

Složka Množství (mg/5 ml)

0,1 - 1000 mg účinná složka natriumkarboxymethylcelulóza s i rup mg 1,25 mg • »

- 31 -	• · * ♦ · · « · » · · · *· ···· · ·
roztok kyseliny benzoové	0,1 ml
ochucovadlo	dle potřeby
barvivo	dle potřeby
čištěná voda k celk. množství	5 ml

Léčivo se proseje sítem na rozměr částice 0,3 mm a smísí se s natriumkarboxymethylcelulózou a sirupem tak, aby se vytvořila jemná pasta. Roztok kyseliny benzoové, ochucovadlo a barvivo se zředí trochou vody a za míšení se přidají. Potom se přidá přiměřené množství vody, aby vznikl požadovaný objem.

Roztok aerosolu se připraví s obsahem těchto složek:

PŘÍPRAVEK 5

Aerosol

Složka

Množství (% hmot.) účinná složka 0,25 ethanol 25,75 propelent 22 (chlordifluormethan) 70,00

Účinná složka podílu propelentu plnícího zařízení, nádoby z nerezavěj Potom se na nádobu se smísí s ethanolem a směs se přidá k 22, ochladí na -30 °C, a přemístí do

Potom se požadované množství plní do ící oceli a zředí zbývajícím propelentem. připevní ventilová jednotka.

Čípky se připraví tímto způsobem:

PŘÍPRAVEK 6 • · β · • ·

Čípky

Složka

Množství (mg/čípek) účinná složka 250 glyceridy nasycených mastných kyselin 2000

Účinná 0,246 mm a nasycených nezbytného přibližnou složka se proseje sítem na rozměr částice suspenduje v předem roztavených glyceridech mastných kyselin za použití minimálního tepla. Směs se potom vlévá do čípkové formy s kapacitou 2 g a nechá se zchladit.

Intravenózní přípravek se připraví tímto způsobem:

PŘÍPRAVEK 7

Intravenózní roztok

Složka

Množství účinná složka 50 mg

Isotonický roztok chloridu sodného 1000 ml

Roztok výše uvedených složek se podává intravenózně rychlostí přibližně 1 ml za minutu.

pacientovi

PŘÍPRAVEK 8

Kombinovaná kapsle I

Složka

Množství (mg/kapsle) účinná složka premarin

4 4 ·

	4 4 4 4 0 0 0 9 0 9 0 9 9 0 0 0 9 9 9
- 33 -	4 4 4 44 4 44 4444 444 4444 4 44 4444 44 44 44 4
Avicel pH 101	50
škrob 1500	117,50
silikonový olej	2
Tween 80	0, 50
Cab-O-Sil	0,25

PŘÍPRAVEK 9
Kombinovaná kapsle II
Složka	Množství (mg/kapsle)
účinná složka	50
norehylnordrel	5
Avicel pH 101	82,50
škrob 1500	90
silikonový olej	2
Tween 80	0,50

PŘÍPRAVEK 10
Kombinovaná tableta
Složka	Množství (mg/tabl.)
účinná složka	50
premarin	1
kukuřičný škrob, NE	50
Povidone, K29 - 32	6
Avicel pH 101	41,50
Avicel pH 102	136,50
Crospovidone XL10	2,50
stearát hořečnatý	0, 50
Cab-O-Sil	0, 50

- 34 -

• · »· ·· ···· · · ·· • · · · ·· · ···· ·· ···· · · · · • · · · · · · · ······ • · · · · · · · · ·· 9 · · · · · · · · · · ·

PŘÍPRAVEK 8
Želatinové kapsle

Tvrdé želatinové kapsle se připraví použitím těchto složek:

Složka	Množství (mg/kapsle)
sloučenina obecného vzorce I	0,1 - 1000
sloučenina obecného vzorce II	0,1 - 1000
škrob, NF	0 - 650
škrob ve formě sypkého prášku	0 - 650
tekutý silikon, 350 centistokes	0-15
Výše uvedený přípravek se může	obměnit v souladu se
stanovenými přijatelnými odchylkami.

Přípravek v podobě tablety se připraví použitím těchto složek:

PŘÍPRAVEK 9

Tablety

Složka	Množství (mg/tabl.)
sloučenina obecného vzorce II	2,5- 1000
sloučenina obecného vzorce I	0,25- 100
mikrokrystalická celulóza	200 - 650
oxid křemičitý, vyžíhaný	10 - 650
kyselina stearová	5-15

Složky se promísí a vylisují do formy tablet.

Alternativně se tablety obsahující každá 25 až 1000 mg účinné složky připraví tímto způsobem:

PŘÍPRAVEK 10

Tablety

Složka sloučenina obecného vzorce sloučenina obecného vzorce škrob mikrokrystalická celulóza polyvínylpyrrolidon (jako 10% vodný roztok) natriumkarboxymethylcelulóza stearát hořečnatý mastek

Množství (mg/tabl

II 24,75 - 990

0,25 - 10 45

4,5 0, 5

Účinné složky, škrob a celulóza se prosejí sítem na rozměr částice 0,3 mm a pečlivě promísí. Roztok polyvinylpyrrolidonu se promísí se vzniklými prášky, a potom se proseje sítem na rozměr částice 1,168 mm. Takto připravené granule se suší při 50 až 60 °C a prosejí sítem na rozměr částice 0,912 mm. Potom se ke granulím přidá natriumkarboxymethylcelulóza, stearát hořečnatý a mastek, předem prosítované na rozměr částice 0,246 mm, a po promísení se lisují na tabletovačce, aby se dostaly tablety.

PŘÍPRAVEK 11

Tablety

Složka sloučenina obecného vzorce sloučenina obecného vzorce škrob mikrokrystalická celulóza polyvinylpyrrolidon (jako 10% vodný roztok) natriumkarboxymethylcelulóza stearát hořečnatý mastek

Množství (mg/tabl

II 25 - 1000

0, 025 - 1,0 45

4,5 0, 5

Účinné složky, škrob a celulóza se prosejí sítem na rozměr částice 0,3 mm a pečlivě promísí. Roztok polyvinylpyrrolidonu se promísí se vzniklými prášky, a potom se proseje sítem na rozměr částice 1,168 mm. Takto připravené granule se suší při 50 až 60 °C a prosejí sítem na rozměr částice 0,912 mm. Potom se ke granulím přidá natriumkarboxymethylceiulóz-a, stearát hořečnatý a mastek, předem prosítované na rozměr částice 0,246 mm, a po promísení se lisují na tabletovačce, aby se dostaly tablety.

PŘÍPRAVEK 12

Tablety

Složka

Množství (mg/tabl.)

0,06 - 0,18 45 sloučenina obecného vzorce II sloučenina obecného vzorce I škrob mikrokrystalická celulóza polyvinylpyrrolidon (jako 10% vodný roztok) 4 natriumkarboxymethylcelulóza 4,5 stearát hořečnatý 0,5 mastek 1

Účinné složky, škrob a celulóza se prosejí sítem na rozměr částice 0, 3 mm a pečlivě promísí. Roztok polyvinylpyrrolidonu se promísí se vzniklými prášky, a potom se proseje sítem na rozměr částice 1,168 mm. Takto připravené granule se suší při 50 až 60 °C a prosejí sítem na rozměr částice 0,912 mm. Potom se ke granulím přidá natriumkarboxymethylcelulóza, stearát hořečnatý a mastek, předem prosítované na rozměr částice 0,246 mm, a po promísení se lisují na tabletovačce, aby se dostaly tablety.

Claims

R¹ představuje atom vodíku, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové části, alkoxykarbonyloxyskupinu s 1 až 6 atomy uhlíku v alkylové části, o O 0 0

II II II II

-O-CO(C!-C₆ alkyl)- -OC-(Ci-C₆ alkyl), -OC-O-Ar, -OC-Ar,kde Ar představuje popřípadě substituovanou fenylovou nebo OSO₂-alkyl s přímým řetězcem se 4 až 6 atomy uhlíku v alkylové části,

R² představuje R¹, atom chloru nebo fluoru,

R³ a R⁴ nezávisle představují alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo se spojují a vytváří polymethylenový řetězec se 4 až 6 atomy uhlíku, nebo dohromady s atomem dusíku, ke kterému jsou připojeny, tvoří morfolin a

X představuje skupinu -CH.·-, -CHOH -, -0-, nebo -C(=0)-,

16 O nebo její farmaceuticky přijatelný solvát nebo jeho sůl.
2. Sloučenina podle nároku 1, kde řečenou sloučeninou je [ 2-(4-hydroxyfenyl)-6-hydroxybenzo[b]thien-3-yl] [4-/2(1-piperidyl)ethoxy/fenyl]methylketon-N-oxid.
3. Sloučenina podle nároku 2, kterou je její hydrochloridová sůl.
4. Sloučenina podle nároku 1, kterou je {6-hydroxy-3[4-/2-(1-piperidyl)ethoxy/fenoxy]-2-(4-methoxyfenyl)[benzo[b]thiofen-N-oxid.
5. Sloučenina podle nároku 1, kterou je {6-hydroxy-3[4-/2- (1-piperidyl)ethoxy/fenoxy]-2-(4-hydroxyfenyl) }benzo[b]thiofen-N-oxid.
6. Sloučenina podle nároku 4, kterou je její hydrochloridová sůl.
7. Způsob inhibice osteoporózy vyznačující se tím, že zahrnuje podání účiného množství sloučeniny podle nároku 1 pacientovi, který to potřebuje.
8. Způsob snížení hladiny sérového cholesterolu vyznačující se tím, že zahrnuje podání účiného množství sloučeniny podle nároku 1 pacientovi, který to potřebuj e.
9. Způsob inhibice estrogen-dependentní rakoviny, vyznačující se tím, že zahrnuje podání účiného množství sloučeniny podle nároku 1 pacientovi, který to potřebuje.

4« 44·· ··· ···
10. Farmaceutický přípravek vyznačující se tím, že sestává ze sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1, a popřípadě z farmaceuticky přijatelné nosné látky, ředidla nebo excipientu.
11. Farmaceutický přípravek vyznačující se tím, že sestává ze sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1 a dále z [2-(4-hydroxyfenyl)-6-hydroxybenzo-[b]thien-3-yl][4/2-(1-piperidyl)ethoxy/fenyl]methanonhydrochloridu a popřípadě z pro něj farmaceuticky přijatelné nosné látky, ředidla nebo excipientu.
12. Farmaceutický přípravek podle nároku 3, vyznačující se tím, že sloučenina obecného vzorce I zahrnuje méně než 10 % hmot. všech účinných složek.
13. Farmaceutický přípravek podle nároku 12 vyznačující se tím, že sloučenina obecného vzorce I zahrnuje méně než 1 % hmot. všech účinných složek.
14. Farmaceutický přípravek podle nároku 12 vyznačující se tím, že sloučenina obecného vzorce I zahrnuje méně než 0,3 % hmot. všech účinných složek.
15. Farmaceutický přípravek podle nároku 11 vyznačující se tím, že řečenou sloučeninu obecného vzorce I je [2-(4-hydroxyfenyl)-6-hydroxybenzo[b]thien-3-yl] [4-/2-(1-piperidyl)ethoxy/fenyl]methanon-N-oxid.