CN219810954U - 一种唾液胰岛素水平的膜层析检测结构 - Google Patents

Abstract

本实用新型公开了一种唾液胰岛素水平的膜层析检测结构，为唾液采样结构和层析检测结构的可拆装式组合套装，唾液采样结构含有采样头和采样连接结构，层析检测结构含有检测试剂条和加样连接结构，层析检测结构所包含的检测试剂条中的标记物结合垫上包被有由指示剂标记的第一抗胰岛素抗体，硝酸纤维素膜上包被有非标记的第二抗胰岛素抗体，适用于唾液样本的胰岛素水平的测定，提高了检测效率、便捷性和准确性，具有重要的临床意义。

Description

一种唾液胰岛素水平的膜层析检测结构

技术领域

本实用新型涉及医疗器械技术领域，尤其涉及一种唾液胰岛素水平的膜层析检测结构。

背景技术

胰岛素是由胰脏内的胰岛β细胞分泌的一种蛋白质激素，由A和B两个肽链组成，受内源性或外源性物质如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的调节。胰岛素是人体促进合成代谢的最重要的蛋白质激素，对糖代谢可促进组织细胞对葡萄糖的摄取和利用，促进糖原合成，抑制糖异生，使血糖降低；对脂肪代谢可促进脂肪酸合成和脂肪贮存，减少脂肪分解；对蛋白质可促进氨基酸进入细胞，促进蛋白质合成的各个环节以增加蛋白质合成。

免疫学检测技术是目前常用的唾液胰岛素水平检测方法，有免疫比浊法、化学发光法、酶联免疫法、化学发光免疫分析法、时间分辨免疫荧光法、量子点免疫荧光层析法、胶乳免疫比浊法、胶乳增强免疫比浊法、荧光免疫层析法等。高灵敏度、快速、便捷、小型化、全定量、自动化、家用化是目前临床免疫检测技术的发展趋势。床旁快检（POCT）是目前免疫学检测技术领域发展最快的一个分支，层析免疫检测是其最常用的检测方法，其中胶体金层析、荧光层析和乳胶微球层析技术的产品使用最广，所用检测样本包括血液、尿液、唾液、痰液、汗液、拭子粘液等多种。与其它样本比较，血液的应用最多，但由于其采样方式为介入性的，接受度不及其它样本检测。目前胰岛素水平的临床检测均采用血液样本，从采样、检测到结果判读仍限于检验室和专业人员操作使用，无法向家庭和缺乏相应检测条件的医疗机构推广使用。但唾液胰岛素水平研究已有大量的报道，并且与血液胰岛素水平均有明显的相关性。大量的研究证明，胰岛素已经成为直接影响包括糖尿病在内的各种代谢相关疾病及不良健康状态的蛋白质激素及重要的调节指标和标志物，适用于各种院内和院外的疾病及健康状态检测，因此，开发可用于居家自测和缺乏相应检测条件的医疗机构检测使用，同时又具有操作简便、使用快捷、成本低廉的唾液胰岛素水平快速检测技术，利于提高医疗质量和效率，具有重要的临床意义和应用价值。

发明内容

本实用新型的目的是提供一种唾液胰岛素水平的膜层析检测结构，与现有技术比较，具有检测操作方便、快速、成本低等优点，提高了检测质量。

针对上述目的，本实用新型提供的一种唾液胰岛素水平的膜层析检测结构,其特征在于：

1）所述膜层析检测结构为唾液采样结构和层析检测结构的可拆装式组合套装；

2）所述层析检测结构包括检测试剂条、位于所述检测试剂条外侧的检测外壳和对应于所述检测试剂条近端的位于所述检测外壳近端的加样连接结构；

3）所述检测试剂条包括样本垫、标记物结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其中所述样本垫位于所述加样连接结构的对应位置并与其形成液相交通连接，所述标记物结合垫上包被有由指示剂标记的第一抗胰岛素抗体，所述硝酸纤维素膜上包被有非标记的第二抗胰岛素抗体；

4）所述唾液采样结构包括具有液体吸附特性的采样头、与所述采样头直接连接的手柄样结构和固定所述采样头和手柄样结构非采样端的连接的固定结构，共同形成可以与所述加样连接结构进行可拆装式连接的采样连接结构；

5）所述加样连接结构为相互交通的双层结构，包括放置所述检测试剂条的试剂检测层和可拆装式放置所述采样头的样本采集层，所述试剂检测层内放置有所述检测试剂条的近端部分，所述样本采集层设置有所述采样头的接入口和样本采集通道以及与所述试剂检测层形成液相交通流动开口的液相交通通道。

所述检测试剂条为PVC底片上依次粘贴的样本垫、标记物结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述检测试剂条放置于检测外壳内，检测外壳选择刚性结构或柔性结构。

上述膜层析检测结构中，所述采样头由固定臂和设置于所述固定臂外侧的吸水垫组成，所述吸水垫为吸水性材料结构。

所述吸水材料选择海绵制品、聚乙烯醇制品，包括淀粉系列、纤维素系列、其他天然产物系列、聚乙烯酸盐系列、聚乙烯醇系列和聚氧乙烯系列等天然及改性高分子高吸水性树脂和人工合成吸水性树脂。

上述膜层析检测结构中，所述加样连接结构的试剂检测层和样本采集层为上下双层结构，样本采集层在上，试剂检测层在下，样本采集层和试剂检测层之间设有所述液相交通通道，使用时将所述采样头插入样本采集层的样本采集通道内使用，其中样本采集通道的容积小于所述采样头的体积，插入过程中样本采集通道对采样头形成挤压，吸附于所述采样头的液相经所述液相交通通道流入位于所述试剂检测层的检测试剂条上。

上述膜层析检测结构中，所述加样连接结构的试剂检测层和样本采集层为左右双层结构，样本采集层在一侧，试剂检测层在另一侧，样本采集层和试剂检测层之间设有所述液相交通通道，使用时将所述采样头插入样本采集层的样本采集通道内使用，其中样本采集通道的容积小于所述采样头的体积，插入过程中样本采集通道对采样头形成挤压，吸附于所述采样头的液相经所述液相交通通道流入位于所述试剂检测层的检测试剂条上。

上述膜层析检测结构中，所述液相交流通道为开口朝向所述检测试剂条近端的样本垫和/或标记物结合垫的液流开口的，进而形成样本采集通道与所述试剂检测层中的检测试剂条相互液流交通的开口结构。

上述膜层析检测结构中，所述可拆装式组合套装连接方式选择槽压式、插入式或柱推式，其中：

1）槽压式的所述采样连接结构的采样头部设置有块状吸水结构，所述加样连接结构为上下双层结构，其样本采集通道为槽型结构，使用时将块状采样头放入槽型样本采集通道内，挤压，液相待检样本经液相交流通道，流入检测试剂条，启动检测；

2）插入式的所述采样连接结构的采样头由片状吸水结构包裹，所述加样连接结构为上下双层结构，其样本采集通道为管道结构，使用时将吸水结构包裹的采样头插入管道样样本采集通道内，挤压，液相待检样本经液相交流通道，流入检测试剂条，启动检测；

3）柱推式的所述采样连接结构的采样头由片状吸水结构包裹，所述加样连接结构为左右双层结构，其样本采集通道为管道结构，使用时将吸水结构包裹的采样头插入管道样样本采集通道内，挤压，液相待检样本经液相交流通道，流入检测试剂条，启动检测。

上述膜层析检测结构中，所述检测试剂条为胶体金免疫检测试剂条、荧光免疫检测试剂条、乳胶微球免疫检测试剂条的至少一种，所述指示剂为彩色微球和荧光物质的至少一种。

上述膜层析检测结构中，所述膜层析检测结构配置有与所述指示剂颜色一致的半定量比色卡，所述比色卡上印制有3个及以上的不同颜色深度的比色条带。

上述膜层析检测结构中，所述膜层析检测结构配置有便携式的定量检测仪，包括色度定量分析仪和荧光定量分析仪的至少一种。

上述膜层析检测结构中，所述检测试剂条的制备还包括生物素/亲和素反应系统，所述标记物结合垫上包被有由所述指示剂标记的第一抗胰岛素抗体和生物素标记第二抗胰岛素抗体，所述硝酸纤维素膜上包被有非标记的亲和素及其类似物。此时待检样本中的胰岛素在标记物结合垫开始同时与所述指示剂标记的第一抗胰岛素抗体和生物素标记第二抗胰岛素抗体结合，形成所述指示剂标记的第一抗胰岛素抗体-胰岛素-生物素标记第二抗胰岛素抗体复合物，然后流经亲和素包被的硝酸纤维素膜，被捕获形成所述指示剂标记的第一抗胰岛素抗体-胰岛素-生物素标记第二抗胰岛素抗体-亲和素复合物，在包被条带上聚集并显示可见的颜色或荧光，作为定量或半定量的依据。亲和素及其类似物包括亲和素、链亲和素及其它具有与生物素特异性结合的物质。

上述膜层析检测结构中，所述膜层析检测结构的操作使用，包括如下步骤：

1）取出层析检测结构和唾液采样结构，暴露唾液采样结构的采样头；

2）手持唾液采样结构的手柄结构，将唾液采样结构的采样头放入口腔内，自然吸收唾液样本并至采样头被唾液完全浸润；

3）取出并将唾液采样结构的采样头放入层析检测结构的样本采集通道内，挤压，唾液样本经液相交通通道流入试剂检测层的检测试剂条的样本垫上；

4）唾液样本经样本垫，向前流经标记物结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫；

5）从观察窗口读取检测结果，完成检测。

上述的一种唾液胰岛素水平的膜层析检测结构在唾液胰岛素水平快速检测产品开发中的应用。

本实用新型由于采取以上技术方案，其具有以下优点：

1、本实用新型为一种唾液胰岛素水平的膜层析检测结构，包括唾液采样结构和层析检测结构的可拆装式组合套装，可以采用唾液进行人体胰岛素水平的检测，不需要进行介入性采集血液样本，不仅检测方便，而且可接受度高，这样可以显著提高临床检测的及时性和普及推广的可行性，提高临床诊治效果。

2、本实用新型采用唾液采样结构的采样头为设置有吸水性材料结构的检测采样结构，这些吸水性材料同时具有吸附液体的定量作用，通过设置吸附材料结构的大小控制唾液样本的采集容量，同时采集过程是自然虹吸，不需要专用的定量设备，使得定量可行且便于操作，实现了技术产品的便捷和快速的可操作性。

3、本实用新型采用加样连接结构为相互交通的双层结构，有放置检测试剂条的试剂检测层和可拆装式放置采样头的样本采集层，双层之间设置有液相交通流动开口的液相交通通道，且样本采集层容积小于采样头体积，当采样头插入时形成挤压作用，使吸附于采样头上的唾液流入试剂检测层内放置的检测试剂条的近端部分，启动试剂条检测反应，这样不仅不需要配置采样容器，同时简化了操作过程，是检测更为便捷。

4、本实用新型设置了用于半定量检测的检测条带颜色强度的比色卡，可以通过比色卡比对进行检测结果的半定量判断，适用于不需要精准定量，只需观察唾液胰岛素水平变化趋势的临床应用场景，提高了临床应用价值。

5、本实用新型操作步骤简单，易于实现家庭化使用或自我检测，不仅使用方便、减少原料的浪费，同时也显著提高工作效率，可以应用于专业和业余检测的诸多领域。

附图说明

图1为本实用新型的整体结构示意图；

图2为本实用新型的可拆装式组合结构纵切面示意图；

图3为本实用新型的检测试剂条结构示意图；

图4为本实用新型的槽压式组合结构示意图；

图5为本实用新型的槽压式组合结构纵切面示意图；

图6为本实用新型的插入式组合结构示意图；

图7为本实用新型的插入式组合结构纵切面示意图；

图8为本实用新型的柱推式组合结构示意图；

图9为本实用新型的柱推式组合结构纵切面示意图。

图中标记如下：

唾液采样结构1；层析检测结构2；检测试剂条3；手柄样结构4；固定结构5；采样头6；试剂检测层7；样本采集通道8；样本垫9；标记物结合垫10；硝酸纤维素膜垫11；吸水垫12；观察窗13；检测外壳14；检测试剂条托槽15；加样孔16；液相交通通道17；PVC支撑底片18；检测线19；质控线20；槽压式手柄样结构24；槽压式固定结构25；槽压式采样头26；槽压式试剂检测层27；槽压式样本采集通道28；槽压式观察窗33；槽压式检测外壳34；槽压式检测试剂条托槽35；槽压式加样口36；槽压式液相交通通道37；槽压式采样头固定臂38；槽压式采样头吸水垫39；插入式手柄样结构44；插入式固定结构45；插入式采样头46；插入式试剂检测层47；插入式样本采集通道48；插入式样本采集通道近端49；插入式观察窗53；插入式检测外壳54；插入式检测试剂条托槽55；插入式加样口56；插入式液相交通通道57；插入式采样头固定臂58；插入式采样头吸水垫59；柱推式手柄样结构64；柱推式固定结构65；柱推式采样头66；柱推式试剂检测层67；柱推式样本采集通道68；柱推式观察窗73；柱推式检测外壳74；柱推式检测试剂条托槽75；柱推式加样口76；柱推式液相交通通道77；柱推式采样头固定臂78；柱推式采样头吸水垫79；柱推式采样头固定臂80；柱推式采样头吸水垫81。

实施方式

为更进一步阐述本实用新型为达成预定目的所采取的技术手段及功效，以下所述实施例结合附图对本实用新型进行进一步说明，但本实用新型并不局限于以下说明。

如图1、图2所示，本实用新型整体结构包括唾液采样结构1；层析检测结构2和检测试剂条3，其中唾液采样结构1包含手柄样结构4，与其直接连接的固定结构5和与固定结构5直接连接采样头6，以及设置于采样头外侧的吸水垫，共同形成可以与位于层析检测结构2上的加样连接结构进行可拆装式连接的采样连接结构；层析检测结构2设置有包含有试剂检测层7、样本采集通道8、加样孔16和液相交通通道17的加样连接结构，以及检测外壳14、观察窗13和位于检测外壳14内的检测试剂条托槽15。

如图3所示，本实用新型检测试剂条包括样本垫9；标记物结合垫10；硝酸纤维素膜垫11和吸水垫12，依次排列设置于PVC支撑底片18上，标记物结合垫10上喷置包被有由指示剂标记的第一抗胰岛素抗体作为检测指示剂，指示剂常用胶体金颗粒、彩色乳胶微球和荧光微球，硝酸纤维素膜垫11上包被有非标记的第二抗胰岛素抗体作为检测线19，同时还包被有非标记的非胰岛素特异性结合的抗体，如羊抗鼠IgG，作为质控线20，使用时唾液样本被加载至检测试剂条的标记物结合垫10上，样本中胰岛素与指示剂标记的第一抗胰岛素抗体结合，形成指示剂标记第一抗胰岛素抗体与胰岛素结合的第一复合物，流经硝酸纤维素膜垫11，被包被于硝酸纤维素膜垫11上的非标记的第二抗胰岛素抗体所捕获，形成指示剂标记第一抗胰岛素抗体、胰岛素以及第二抗胰岛素抗体结合的第二复合物，被固定积累于硝酸纤维素膜垫11，并显色，形成显色或荧光显色的检测线19，其显色深度与样本中的胰岛素含量成正比，进而完成唾液胰岛素水平检测。

如图4、图5所示，本实用新型的可拆装式组合套装的槽压式连接方式结构，其中唾液采样结构1也是由手柄样结构24，与其直接连接的固定结构25和与固定结构25直接连接采样头26，以及设置于采样头外侧的吸水垫29所共同组成，采样头26所设置的吸水垫29为吸水材料结构，设置于固定臂30的一侧，为块状结构，通过固定结构26与手柄样结构24形成具有杠杆挤压样功能的结构为特点，为可以与位于层析检测结构2上的加样连接结构进行可拆装式连接的采样连接结构；层析检测结构2也设置有包含有试剂检测层27、样本采集通道28、加样孔36和液相交通通道37的加样连接结构，以及检测外壳34、观察窗33和位于检测外壳34内的检测试剂条托槽35；样本采集通道28为开口向上的槽型结构，槽型结构的入口为加样孔36，位于槽型结构的底部与试剂检测层27相通的液流开孔为液相交通通道37；采样头26的吸水垫29以可拆装式向下压入至加样连接结构的槽形样本采集通道28内，挤压吸水垫29，通过底部的开孔结构，即液相交通通道37，向位于试剂检测层27内的检测试剂条1转移待检样本，启动检测反应。

如图6、图7所示，本实用新型的可拆装式组合套装的插入式连接方式结构，其中唾液采样结构1也是由手柄样结构44，与其直接连接的固定结构45和与固定结构45直接连接采样头46，以及设置于采样头外侧的吸水垫59所共同组成，采样头46所设置的吸水垫59为吸水材料结构，包裹设置于固定臂58外侧，为检测拭子样采样结构，可以与位于层析检测结构2上的加样连接结构进行可拆装式连接，完成加样；层析检测结构2也设置有包含有试剂检测层47、样本采集通道48、加样孔56和液相交通通道57的上下双层加样连接结构，以及检测外壳54、观察窗53和位于检测外壳54内的检测试剂条托槽55；样本采集通道48为开口在近端的管道状结构，样本采集通道48的入口为加样孔56，经延伸段49进入样本采集通道48，底部近端设置有与试剂检测层47相通的液流开孔为液相交通通道57。使用时将采样头46的检测拭子样结构经加样孔56插入至样本采集通道48内，挤压，液相待检样本通过液相交通通道57，向位于试剂检测层47内的检测试剂条1转移待检样本，启动检测反应。

如图8、图9所示，本实用新型的可拆装式组合套装的柱推式连接方式结构，其中唾液采样结构1也是由手柄样结构64，与其直接连接的固定结构65和与固定结构65直接连接采样头66，以及设置于采样头外侧的吸水垫79所共同组成，采样头66所设置的吸水垫79为吸水材料结构，包裹设置于固定臂78外侧，为检测拭子样采样结构，可以与位于层析检测结构2上的加样连接结构进行可拆装式连接，完成加样；层析检测结构2也设置有包含有试剂检测层67、样本采集通道68、加样孔76和液相交通通道77的左右双层加样连接结构，以及圆筒状的检测外壳74、观察窗73和位于检测外壳74内的检测试剂条托槽75；样本采集通道68为开口在近端的管道状结构，样本采集通道68的入口为加样孔76，直立放置时双层加样连接结构的底部设置有与试剂检测层67相通的液流开孔为液相交通通道77；固定结构65中段外侧设置有弹性封堵结构81，当插入至样本采集通道68入口延伸段80时，与样本采集通道68入口延伸段80形成密封状连接。使用时将采样头66的检测拭子样结构经加样孔76、样本采集通道68入口延伸段80插入至样本采集通道8内，挤压，液相待检样本从采样头66返流流入样本采集通道68入口延伸段80，经密封状连接，推送至液相交通通道77，使液相待检样本向位于试剂检测层67内的检测试剂条3转移，启动检测反应。

这样在实际操作时，当本实用新型膜层析检测结构为胶体金免疫检测结构时，检测试剂条3用胶体金法制备，在PVC底片上依次粘贴有样本垫、包被有胶体金标记第一抗胰岛素抗体的胶体金结合垫、包被有非标记第二抗胰岛素抗体的硝酸纤维素膜垫和吸水垫；当本实用新型膜层析检测结构为彩色乳胶微球免疫检测结构时，检测试剂条3用彩色乳胶微球免疫法制备，在PVC底片上依次粘贴有样本垫、包被有彩色乳胶微球标记物的乳彩色胶微球结合垫、包被有非标记捕获试剂的硝酸纤维素膜垫和吸水垫；当本实用新型膜层析检测结构为荧光免疫检测结构时，检测试剂条3用荧光免疫法以荧光微球或荧光素为指示剂进行制备，在PVC底片上依次粘贴有样本垫、包被有荧光标记物的荧光标记物结合垫、包被有非标记捕获试剂的硝酸纤维素膜垫和吸水垫。

半定量检测具体操作包括如下步骤：1）取出唾液采样结构1、层析检测结构2、半定量比色卡82，暴露唾液采样结构1采样头；2）将唾液采样结构的采样头放入口腔内，自然吸收唾液样本并至采样头被唾液完全浸润；3）将采样后的唾液采样结构1采样头插入至层析检测结构2的加样连接结构内，转移采集的唾液样本至样本垫，向前流经标记物结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫；4）从观察窗口读取检测结果，与半定量比色卡82比对检测线的颜色深度，读取半定量范围值，完成检测。

定量检测具体操作包括如下步骤：1）取出唾液采样结构1、层析检测结构2、半定量比色卡82，暴露唾液采样结构1采样头；2）将唾液采样结构的采样头放入口腔内，自然吸收唾液样本并至采样头被唾液完全浸润；3）将采样后的唾液采样结构1采样头插入至层析检测结构2的加样连接结构内，转移采集的唾液样本至样本垫，向前流经标记物结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫；4）将层析检测结构2置于定量检测仪，读取检测结果，定量计算测定值，完成检测。

本实用新型的实验研究：下述实验说明本实用新型的检测方法及其效果，但不是对本实用新型的限定。下述实验中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

实验一：免疫胶体金法唾液胰岛素检测实验：

一、检测试剂条制备：

采用常规免疫胶体金检测技术双抗体夹心法制备检测试剂条，采用本实用新型膜层析检测结构制备检测试剂盒进行唾液胰岛素检测实验，其中检测试剂条的检测线T的胶体金标记指示抗体为10ug/ml的第一抗胰岛素单克隆抗体，采用粒径50nm的胶体金颗粒，包被在玻璃纤维素膜胶体金结合垫上；检测试剂条的检测线T的捕获抗体为1.2mg/ml的配对的第二抗胰岛素单克隆抗体，包被在硝酸纤维素膜垫上；检测试剂条的质控线C的捕获抗体为1.0mg/ml的羊抗鼠IgG多克隆抗体，包被在硝酸纤维素膜垫上，用于捕获未被特异性捕获的胶体金标记抗胰岛素单克隆抗体。在硝酸纤维素膜垫印膜两端分别粘贴吸水垫及胶体金标记结合垫，在胶体金标记结合垫一侧粘贴样本垫。置粘贴好的检测片于切条机上，切成3.0mm的检测试剂条。

二、本实用新型膜层析检测结构制备：

采用Solidworks设计本实用新型膜层析检测结构推压式连接检测的检测外壳的上盖、底座和唾液采样结构并用3D打印样品，制备的膜层析检测结构样品用于实验检测。印制不同颜色深度的红色比色卡。

三、实验方法及结果：

实验时取上述制备的检测试剂条和膜层析检测结构，装配成一体化的检测结构，将装配好的检测结构放入有干燥剂的铝箔密封袋内，在封口机上封口，加贴标签。用新鲜采集的健康人唾液，10000rpm/min离心10分钟，取上清，配置1、5、10、15、20、25、30 uIU/ml的长秀霖重组甘精胰岛素注射液（100 IU/ml）。取地特胰岛素溶液100ul，直接滴加不同浓度的地特胰岛素溶液至层析检测结构加样窗，静置20分钟，经观察窗查看检测线的颜色深度，拍照，依此拍照结果设计并打印半定量比色卡，作为后续唾液样本半定量检测结果判读的对比标准。

用制备的唾液采样结构分别采集10例健康捐献者的空腹和餐后1小时唾液样本，分别直接插入至层析检测结构的样本采集通道，静置20分钟，经观察窗查看检测线的颜色深度，与半定量比色卡比色，判断比色结果的浓度范围，结果空腹在1-10uU/ml左右，餐后2小时在5-25uU/ml左右，符合正常人检测范围。

实验二：彩色乳胶微球免疫层析法唾液胰岛素检测实验：

一、检测试剂条制备：

采用常规乳胶微球免疫层析技术双抗体夹心法制备检测试剂条，采用本实用新型膜层析检测结构制备可拆装式层析检测结构检测试剂盒进行胰岛素检测实验，其中彩色乳胶微球均采用度生物300nm红色微球，检测试剂条的检测线T的彩色乳胶微球标记指示抗体为50ug/ml的第一抗胰岛素单克隆抗体，包被在玻璃纤维素膜结合垫上；检测试剂条的检测线T的捕获抗体为1.2mg/ml的配对的第二抗胰岛素单克隆抗体，包被在硝酸纤维素膜垫上；检测试剂条的质控线C的捕获抗体为1.0mg/ml的羊抗鼠IgG多克隆抗体，包被在硝酸纤维素膜垫上，用于捕获未被特异性捕获的彩色乳胶微球标记抗胰岛素单克隆抗体。在硝酸纤维素膜垫印膜两端分别粘贴吸水垫及彩色乳胶微球标记结合垫，在彩色乳胶微球标记结合垫一侧粘贴样本垫。置粘贴好的检测片于切条机上，切成 3.0mm的检测试剂条。

二、本实用新型膜层析检测结构制备：

采用Solidworks设计本实用新型膜层析检测结构插入式连接检测的检测外壳的上盖、底座和唾液采样结构并用3D打印样品，制备的膜层析检测结构样品用于实验检测。印制不同颜色深度的红色比色卡。

三、实验方法及结果：

实验时取上述制备的检测试剂条和膜层析检测结构，装配成一体化的检测结构，将装配好的检测结构放入有干燥剂的铝箔密封袋内，在封口机上封口，加贴标签。用新鲜采集的健康人唾液，10000RPM/min离心10分钟，取上清，配置1、5、10、15、20、25、30 uIU/ml的长秀霖重组甘精胰岛素注射液（100 IU/ml）。取地特胰岛素溶液100ul，直接滴加不同浓度的地特胰岛素溶液至层析检测结构加样窗，静置20分钟，经观察窗查看检测线的颜色深度，拍照，依此拍照结果设计并打印半定量比色卡，作为后续唾液样本半定量检测结果判读的对比标准。

用制备的唾液采样结构分别采集10例健康捐献者的空腹和餐后1小时唾液样本，分别直接插入至层析检测结构的样本采集通道，静置20分钟，经观察窗查看检测线的颜色深度，与半定量比色卡比色，判断比色结果的浓度范围，结果空腹在1-10uU/ml左右，餐后2小时在5-30uU/ml左右，符合正常人检测范围。

Claims (9)

1.一种唾液胰岛素水平的膜层析检测结构,其特征在于：

1）所述膜层析检测结构为唾液采样结构和层析检测结构的可拆装式组合套装；

2）所述层析检测结构包括检测试剂条、位于所述检测试剂条外侧的检测外壳和对应于所述检测试剂条近端的位于所述检测外壳近端的加样连接结构；

3）所述检测试剂条包括样本垫、标记物结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，其中所述样本垫位于所述加样连接结构的对应位置并与其形成液相交通连接，所述标记物结合垫上包被有由指示剂标记的第一抗胰岛素抗体，所述硝酸纤维素膜上包被有非标记的第二抗胰岛素抗体；

4）所述唾液采样结构包括具有液体吸附特性的采样头、与所述采样头直接连接的手柄样结构和固定所述采样头和手柄样结构非采样端的连接的固定结构，共同形成可以与所述加样连接结构进行可拆装式连接的采样连接结构；

5）所述加样连接结构为相互交通的双层结构，包括放置所述检测试剂条的试剂检测层和可拆装式放置所述采样头的样本采集层，所述试剂检测层内放置有所述检测试剂条的近端部分，所述样本采集层设置有所述采样头的接入口和样本采集通道以及与所述试剂检测层形成液相交通流动开口的液相交通通道。

2.如权利要求1所述膜层析检测结构，其特征在于，所述采样头由固定臂和设置于所述固定臂外侧的吸水垫组成，所述吸水垫为吸水性材料结构。

3.如权利要求1所述膜层析检测结构，其特征在于，所述加样连接结构的试剂检测层和样本采集层为上下双层结构，样本采集层在上，试剂检测层在下，样本采集层和试剂检测层之间设有所述液相交通通道，使用时将所述采样头插入样本采集层的样本采集通道内使用，其中样本采集通道的容积小于所述采样头的体积，插入过程中样本采集通道对采样头形成挤压，吸附于所述采样头的液相经所述液相交通通道流入位于所述试剂检测层的检测试剂条上。

4.如权利要求1所述膜层析检测结构，其特征在于，所述加样连接结构的试剂检测层和样本采集层为左右双层结构，样本采集层在一侧，试剂检测层在另一侧，样本采集层和试剂检测层之间设有所述液相交通通道，使用时将所述采样头插入样本采集层的样本采集通道内使用，其中样本采集通道的容积小于所述采样头的体积，插入过程中样本采集通道对采样头形成挤压，吸附于所述采样头的液相经所述液相交通通道流入位于所述试剂检测层的检测试剂条上。

5.如权利要求1所述膜层析检测结构，其特征在于，所述液相交流通道为开口朝向所述检测试剂条近端的样本垫和/或标记物结合垫的液流开口的，进而形成样本采集通道与所述试剂检测层中的检测试剂条相互液流交通的开口结构。

6.如权利要求1所述膜层析检测结构，其特征在于，所述可拆装式组合套装选择槽压式、插入式或柱推式，其中：

1）槽压式的所述采样连接结构的采样头部设置有块状吸水结构，所述加样连接结构为上下双层结构，其样本采集通道为槽型结构，使用时将块状采样头放入槽型样本采集通道内，挤压，液相待检样本经液相交流通道，流入检测试剂条，启动检测；

2）插入式的所述采样连接结构的采样头由片状吸水结构包裹，所述加样连接结构为上下双层结构，其样本采集通道为管道结构，使用时将吸水结构包裹的采样头插入管道样样本采集通道内，挤压，液相待检样本经液相交流通道，流入检测试剂条，启动检测；

3）柱推式的所述采样连接结构的采样头由片状吸水结构包裹，所述加样连接结构为左右双层结构，其样本采集通道为管道结构，使用时将吸水结构包裹的采样头插入管道样样本采集通道内，挤压，液相待检样本经液相交流通道，流入检测试剂条，启动检测。

7.如权利要求1所述膜层析检测结构，其特征在于，所述检测试剂条为胶体金免疫检测试剂条、荧光免疫检测试剂条、乳胶微球免疫检测试剂条的至少一种，所述指示剂为彩色微球和荧光物质的至少一种。

8.如权利要求1所述膜层析检测结构，其特征在于，所述膜层析检测结构配置有与所述指示剂颜色一致的半定量比色卡，所述比色卡上印制有3个及以上的不同颜色深度的比色条带。

9.如权利要求1所述膜层析检测结构，其特征在于，所述膜层析检测结构配置有便携式的定量检测仪，包括色度定量分析仪和荧光定量分析仪的至少一种。