CN1706391A - 土霉素混悬乳剂 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种长效缓释的土霉素混悬乳剂，以重量比计的组分：土霉素20份、油酸3－8份、聚山梨酯3－8份、丙丁醇30－50份、抗氧化剂0.5份和防腐剂0.0006份，加水至100份。本发明土霉素混悬乳剂采用搅拌法制备，其性状为黄色至黄褐色、稍粘稠的乳剂。本发明制剂能够缓慢释放药物有效成分，提高药物的生物利用度，增强药物的疗效，一次用药能维持高效血药浓度的时间可达72小时，本混悬乳剂每3天用药1次，制剂的生产不需要特殊溶媒，成本低，生产工艺简单，易于实现产业化。

Description

土霉素混悬乳剂

技术领域

本发明涉及一种治疗畜禽疾病的土霉素药物剂型及其制备方法，特别涉及土霉素混悬乳剂的配方及其制备方法。

背景技术

药物的递药系统一直是医药界的热点研究领域之一。微乳是一种新型的递药系统，它是由表面活性剂、辅助表面活性剂、油和水在适当比例，自发形成的一种均匀、低粘度、热力学稳定的透明或半透明分散体系，该体系具有极高的稳定性和对溶质的高度分散性及吸附能力。应用微乳研制的药物制剂能够提高药物的生物利用度及机体的吸收速度，促进药物在机体内的吸收，增加难溶性药物的溶解度，增强药物的稳定性，并可使药物浓集在靶向器官，增强药物的疗效。由于微乳具有许多优点，因而近年来备受人们关注。

微乳的制备工艺简单，关键是选择合适的配方，在选择了适宜的配方后，将油、水、表面活性剂和辅助表面活性剂混合搅拌即可形成微乳。亲水亲油平衡值是制备微乳时选择表面活性剂的依据，W/O型微乳需用HLB值在3-6范围的表面活性剂，O/W型微乳需用HLB值在8-18范围的表面活性剂；表面活性剂的离子性质也是决定微乳形成的关键因素之一，阳离子型表面活性剂在pH3-7范围的介质中适用，阴离子型表面活性剂适用于pH8以上的介质，而非离子型表面活性剂在pH3-10的介质均可使用，此外，油相分子的大小对微乳的形成也较为重要，原则上油相分子体积越小，溶解力越强，越易形成微乳，而油相分子链过长则不易形成微乳。

由于微乳具有许多独特的优点，且其制剂可用于各种给药途径，因此，微乳制剂在医药领域的应用将日趋广泛。目前，微乳较多用于药物的递药系统，且已有许多制剂用于临床，在国外有关微乳制剂的研究较多，且已有商业化产品，国内多处在研究阶段。如以下文献中公开了微乳作为药物的载体的技术：

[1]中华人民共和国农业部.长效土霉素注射液[M].《进口兽药质量标准》，1993，3-4.

[2]徐士新，郭文林，仲锋，等.土霉素注射液在猪体内药代动力学比较[J]中国兽药杂志，1998，32(1)：10-13.

[3]汤丽娟.微乳递药系统[J].国外医学-合成药、生化药、制剂分册，1988，9(5)：294-296.

[4]王红喜.微乳制剂的研究进展[J].国外医学-药学分册，1996，23(4)：206-211.

[5]Neumayer HH，Farber L，Haller P，et al.Clinicalexperience transferring kidney transplant patients fromsandimmun to sandimmun neoral-resultsafter 3months[J].ClinNephrol，1995，43(Suppl 1)：S27.

土霉素为四环素族广谱抗生素，对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌、立克次氏体、衣原体、支原体、和螺旋体等均有抑制作用，可用于防治巴氏杆菌病、布氏杆菌病、炭疽、大肠杆菌和沙门氏杆菌感染、马鼻疽及猪支原体肺炎等疾病。土霉素属酸碱两性晶体物，能与酸和碱结合而成盐类，在水中溶解极微，易溶于稀酸和稀碱，在酸性水溶液中较稳定，碱性水溶液中易遭破坏而失效。

目前，土霉素制剂的剂型主要有粉剂、片剂、膏剂和注射剂，其中注射制剂包括：0.5％、5％常规注射液，10％、20％长效注射液，25％油制混悬液。由于常规注射液药物浓度低，药效持续时间短，因而存在注射剂量大，注射次数多，需注射2次/天等缺点，因此，人们探索了高浓度长效注射制剂的研究。国外在80年代研制成功了具有长效作用的土霉素注射液，其商品名为特效米先，并已进口我国。近年来，国内亦研制成了高浓度土霉素注射液，系采用聚乙烯吡咯烷酮、α-吡咯烷酮、丙二醇等不同的溶媒制成的。

虽然注射液和油制混悬液具有注射剂量少，长时间维持机体有效血药浓度，用药次数少等优点，但也存在不同程度的缺点，如药物成本高，稳定性差，生产工艺复杂，有的溶媒制成的注射剂尚需注射2次/天等缺点。

发明内容

本发明首要目的在于针对上述问题提供一种利用微乳体系作为土霉素递系统的土霉素混悬乳剂。

本发明另一目的在于提供一种土霉素混悬乳剂的制备方法。

为实现本发明目的，本发明的土霉素混悬乳剂包括以重量比计的组分：土霉素20份、油酸3-8份、聚山梨酯3-8份、丙丁醇30-50份、抗氧化剂0.5份、防腐剂0.006份，加水至100份。

本发明土霉素混悬乳剂的生产方法包括步骤：准备按重量比计的组分：土霉素20份、油酸3-8份、聚山梨酯3-8份、丙丁醇30-50份、抗氧化剂0.5份、防腐剂0.006份和加至100份的水；按处方量取聚山梨酯、油酸、丙丁醇、置于搅拌缸中混合均匀；缓慢加入水，并不断搅拌直至混匀；加入处方量的土霉素、抗氧化剂和防腐剂，搅拌均匀，将所获得的溶液灌装、密封即为土霉素混悬乳剂成品。

本发明土霉素混悬乳剂作为治疗畜禽疾病的四环素族广谱抗生素新型制剂，是利用了微乳形成理论并应用常规搅拌法而制备的一种长效缓释制剂。由于它是利用微乳体系作为土霉素的递药系统，因此与常规土霉素注射剂相比所具有以下优点：可以减少用药次数，降低用药成本，简化生产工艺，增加药物靶向性，提高药物的生物利用度及机体的吸收速度，增强药物的疗效。另外，本发明土霉素混悬乳剂的制备不需要特殊溶媒，因此成本低、生产工艺简单、易于实现产业化。

具体实施方式

实施例20％土霉素混悬乳剂

取土霉素20g、油酸5g、聚山梨酯5g、丙丁醇40g、抗氧化剂0.5g、防腐剂0.006g备用，并对土霉素、油酸、聚山梨酯进行灭菌处理；取处方量的油酸、聚山梨酯、丙丁醇、置于搅拌缸中，混合均匀；缓慢加入蒸馏水至100ml，并不断搅拌直至混匀；加入处方量的土霉素、抗氧化剂和防腐剂，搅拌均匀；将所获得的溶液灌装、密封即为土霉素混悬乳剂成品。

土霉素混悬乳剂的质量稳定性试验

1、物理性状

20％土霉素混悬乳剂为黄色至黄褐色、稍粘稠的乳剂，长期静置后会有分层，上清为黄色至黄褐色的液体，下层为黄色沉淀物，振荡后为均匀的黄色至黄褐色乳液，药液pH为3-4。

2、药物含量测定

(1)工作曲线的绘制

精确称取土霉素对照品10mg，置于100ml容量瓶中，用0.1mol/L的盐酸溶液稀释至刻度，制成土霉素浓度为100μg/ml储备液，再精取储备液适量分置100mL容量瓶中，用0.1mol/L的盐酸溶液稀释至刻度，制成浓度为2、4、6、8、10、12、15、17μg/ml的标准液，在268nm波长处测定吸收度。结果土霉素浓度在4-15μg/ml范围内，吸收度与浓度呈良好的线性关系，以吸收值A值对浓度C值进行回归，得回归方程C＝24.0904A+0.2406，r＝0.9998。

(2)回收率测定

制备浓度分别为190、195、200和205mg/ml的四种土霉素混悬乳剂，分取不同浓度的混悬乳剂适量，用0.1mol/L的盐酸溶液稀释，使土霉素的浓度在4-15μg/ml范围内，在268nm波长处测定每个浓度样品的吸收度，并计算其回收率。结果其平均回收率为100.62％，RSD为0.48％。

(3)药物含量测定

随机抽取5批不同保存时间的土霉素混悬乳剂5瓶，分别精确移取1.0ml混悬剂样品，用0.1mol/L的盐酸溶液稀释至土霉素浓度为10μg/ml的溶液，以0.1mol/L的盐酸溶液作空白对照，在268nm波长处测定稀释样品上清液的吸收度，由回归方程计算混悬剂样品中土霉素的含量。结果测定的土霉素含量分别为实际量的99.79％、98.46％、100.75％、100.82％、99.90％，符合质量要求。

3、稳定性试验

(1)粘度测定

取出口内径为1.2mm，上口内径为2.7mm的1ml玻璃吸管，分别吸取不同批次的混悬乳剂1ml，在室温条件下，记录微乳从1ml刻度垂直下降至0.4ml刻度，即流出0.4ml混悬乳剂所需要的时间(s)，结果混悬乳剂的粘稠度为3-4s。

(2)光加速试验

将制备的不同批次的土霉素混悬乳剂样品，分装于无色透明的玻璃瓶中，密封后，置光照度为4500LX左右的环境中放置10d，并在放置的0、5、7、10d采取样品，观察土霉素混悬乳剂的性状、药物絮凝情况、并测定沉降体积比、药物颗粒大小，药物含量。结果3批混悬乳剂样品除上清液颜色稍有加深外，其它性状，如混悬乳剂的pH值、沉降体积比、药物颗粒大小及药物含量等指标均未见明显变化，表明混悬乳剂对光具有稳定性。

(3)加温加湿试验

将制备的不同批次的土霉素混悬乳剂样品，置于水套式电热恒温培养箱内，调整培养箱温度为30±1℃，相对湿度为60％±5％，定期观察3个月，每月取样1次，检查土霉素混悬乳剂样品的物理性状、沉降体积比、药物絮凝情况、颗粒大小，并测定药物含量。结果混悬乳剂样品定期观察3个月，其质量指标均未见明显变化，说明土霉素混悬乳剂对温度、湿度的稳定性良好。

(4)重分散性

在室温环境中，将土霉素混悬乳剂静止放置30d后，用力上下振荡数次，然后检查混悬乳剂的重分散性、物理性状、絮凝性，结果表明土霉素混悬乳剂经过3-5次振荡，即可均匀分散，且瓶底无沉淀，混悬剂中无凝块，混悬剂的重散性良好。

4、通针性

取土霉素混悬乳剂振荡均匀后，分别用6-10号针头抽取混悬剂样品，测定不同型号针头抽取混悬剂的难易程度和速度，结果除用6号针头抽取速度较慢外，其余7-10号针头均可顺利抽取混悬乳剂，这说明混悬乳剂具有良好的通针性。

5、药物粒径测定

应用显微镜法测定土霉素颗粒粒径形状、大小及分布。取土霉素混悬乳剂样品用蒸馏水100倍稀释，充分摇匀，取1滴稀释样品滴于载玻片上，在400倍视野下观察土霉素微粒的形状、测定微粒的大小与分布。镜检可见混悬乳剂中的土霉素微粒呈球形，粒径大小在2-5μm之间的颗粒占药物总数的96％以上，晶型一致，粒径大小相对比例符合正态分布，混悬剂室温放置30d，未见药物颗粒增长、转型和凝结现象。未制成混悬剂的土霉素微粒为长柱形，粒径大小在2-3×35-95μm之间的颗粒占药物总数的90％以上。

6、药代动力学试验

(1)试验动物

试验动物为5头体重30-50kg的健康哈白猪，按照常规方式饲养，饲料中未添加任何药物。

(2)用药方法

猪耳后深部肌肉一次注射20％土霉素混悬乳剂0.1ml/kg体重，即注射土霉素20mg/kg体重。

(3)血样采集

在用药后1、2、4、8、12、24、36、48、60、72h分别采取血样5ml，注入装有1％肝素的离心管中，3000r/min离心15min，制备血浆，置-20℃冰箱保存待测。

(4)血药浓度测定

取血浆1ml，加20％三氯乙酸0.25ml，沉淀蛋白，置-4℃冰箱冷藏15min，4000r/min离心15min，吸取上清液适量，过已经活化的C18柱，待流尽后，用水1-2ml洗涤液洗涤，至流出液为中性，吹干。用洗脱液以上洗脱样品，收集洗脱液，取20μl用高压液相色谱测定。

将样品测定所得峰面积代入回归方程，计算出固相萃取洗脱液中的土霉素浓度，然后按下述公式计算注药后不同时间血样的血药浓度C(μg/ml)＝X×V₂×V₄/V₁×V₃×R。

(5)血药浓度测定结果

在注射20％土霉素混悬乳剂后不同时间，猪血样的血药浓度测定结果见表1。

                              表1  20％土霉素混悬乳剂在猪体内的的血药浓度(μg/ml)

时间(h)	1	2	4	8	12	24	36	48	60	72
											平均浓度	2.14	3.39	3.30	3.00	1.53	1.10	0.99	0.81	0.60	0.48
±SD	0.70	0.58	0.54	0.21	0.39	0.05	0.58	0.12	0.54	0.24

以血浆土霉素浓度0.5μg/ml为最小有效浓度，从表1可知，20％土霉素混悬乳剂能够维持有效血药浓度的时间为72h，因此，按每3天注药一次，即可达到理想疗效。

由此可见，20％土霉素混悬乳剂用药后吸收缓慢，可显著延长疗效，一次用药可维持有效血药浓度的时间为72h，每3天用药1次即可。

Claims (3)

1.一种土霉素混悬乳剂，包括以重量比计的组分：土霉素20份、油酸3-8份、聚山梨酯3-8份、丙丁醇30-50份、抗氧化剂0.5份和防腐剂0.0006份，加水至100份。

2.如权利要求1所述的土霉素混悬乳剂，其中所述油酸为5份，所述聚山梨酯为5份，所述丙丁醇为40份。

3.如权利要求1或2所述的土霉素混悬乳剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)按照所述配比准备土霉素、油酸、聚山梨酯、丙丁醇、抗氧化剂、防腐剂和水；

(2)按处方量取聚山梨酯、油酸、丙丁醇置于搅拌缸中混合均匀；

(3)缓慢加入水，并不断搅拌直至混匀；

(4)加入处方量的土霉素、抗氧化剂和防腐剂，搅拌均匀；

(5)将获得的溶液灌装、密封即为土霉素混悬乳剂成品。