CN1189189A - 液化淀粉的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了液化淀粉的一种方法,该方法包括:在液化淀粉之前或与之同时向淀粉中加入钠组合物;在改性淀粉中加入α淀粉酶;再在液化改性淀粉的有效温度下使改性淀粉反应一段时间。优选的钠组合物包括:氯化钠、碳酸氢钠、苯甲酸钠、硫酸钠、亚硫酸氢钠、抗坏血酸钠、乙酸钠、硝酸钠、酒石酸钠、四硼酸钠、丙酸钠、柠檬酸钠、琥珀酸钠、谷氨酸一钠、柠檬酸三钠、磷酸钠或其混合物。

Description

液化淀粉的方法

本发明涉及改进α淀粉酶在把谷物淀粉转化为下游产品如葡萄糖、果糖和酒精中的应用。具体地说，本发明涉及在液化之前或液化期间将钠离子加入淀粉混合物以提高在低pH，即在≤约pH5.9时液化的效率。

谷物如玉米长期以来被用作一种淀粉源。人所熟知的分离和纯化淀粉以用于工业加工过程的方法之一是湿磨法，该方法已发展成高度专一性的和综合的体系，设计成尽可能完全地分离谷粒中的主要成分(参见Stanley A.Watson，Starch：Chemistry & Technology，Vol.II，IndustrialAspects，Academic Press，New York，1967，pp.30-51)。

在常用的湿磨法中，用于生产淀粉制品的干谷物先经历被称为浸渍的浸泡处理过程。在浸渍期间，谷物受逆流水流作用以分离多种溶解物，包括谷物颗粒的植酸酯(phytate)和植酸、糖类、盐类和蛋白质。然后从浸泡水(浸渍水)中分离浸泡过的谷粒，进行机械破碎和磨碎操作。然后应用浮选和离心法分离淀粉中的胚芽，纤维和蛋白质；再将所得胚乳(淀粉)、纤维和蛋白质的浆料进一步磨碎并筛选以分离出纤维。最后，基于密度通过逆流冲洗而分离蛋白质和胚乳相关组分，通过离心作用从蛋白质/面筋流中分离淀粉。再充分冲洗已分离的淀粉流以除去任何非粒状淀粉相关的溶解物，包括溶解物如无机盐，和化合物如植酸酯和植酸盐。所得产物是高度纯化过的不溶性粒状淀粉浆，它被用作糖化至果糖的起始产品。

通常，从淀粉至果糖的加工过程由四步构成：液化粒状淀粉，糖化已液化的淀粉而成葡萄糖，纯化，和异构化成果糖。淀粉液化加工处理的目的是，将浓缩的淀粉聚合物颗粒悬浮液转化成低粘度、链长更短的可溶性糊精溶液。该步骤对于用标准设备方便地加工和有效地糖化成葡萄糖或其它糖相当重要。为了液化粒状淀粉，要求提高粒状淀粉的温度至高于约72℃以糊化颗粒，加热处理时立即破坏不溶性淀粉颗粒而产生水溶性淀粉溶液。再用α淀粉酶(E3.2.1.1.)液化已溶解的淀粉溶液。

通常的酶促液化处理过程包括：调节粒状淀粉浆的pH至6.0～6.5，该pH适于得自地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)的α淀粉酶，是通过加入氢氧化钙、氢氧化钠或碳酸钠来调节pH的。加入氢氧化钙的优势在于还提供钙离子，已知钙离子能稳定α淀粉酶以抗失活。加入α淀粉酶时，将悬浮液泵送通过蒸汽喷嘴以至立即升温至80°～115℃。淀粉被迅速糊化，并且由于存在α淀粉酶，通过α淀粉酶无规水解α(1-4)糖苷键使淀粉解聚而得易于泵送的流体物质。

在液化处理的第二种变化形式中，将α淀粉酶加入淀粉悬浮液，该悬浮液被保持在80-100℃的温度下以部分地水解淀粉颗粒，再将部分水解后的淀粉悬浮液泵送通过温度高于约105℃的喷嘴以完全糊化任何残留的粒状结构。待糊化淀粉冷却后，可以第二次加入α淀粉酶以进一步水解淀粉。

该处理过程的第三种变化形式称为干法磨粉加工。在干法磨粉中，将整谷粒磨碎并与水混合。可任意通过浮选分离或相当的工艺除去胚芽；用α淀粉酶液化所得混合物，其中含淀粉、纤维、蛋白质和谷物的其它成分。当采用干法磨粉工艺时，本领域中通常的实际操作是在较低温度下进行酶促液化。一般认为，将淀粉糖化成可溶性糊精时，低温液化不如高温液化有效。

通常地，在α淀粉酶的存在下将糊化后的淀粉溶液保持在较高的温度直至达到10-20的DE，一般需要1～3小时。葡萄糖值(DE)是衡量总还原糖浓度的工业标准，是基于干重以D-葡萄糖计算的。未水解的粒状淀粉的DE实际上为零，而定义D-葡萄糖的DE为100。

含α淀粉酶的淀粉溶液可保持的最高温度由获得酶的微生物源和α淀粉酶分子的分子结构而定。从野生型枯草芽孢杆菌(B.Subtilis)菌株或解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)菌株生产的α淀粉酶使用温度通常不高于约90℃，因为高于该温度时会导致过快的热失活；而从野生型地衣芽孢杆菌菌株生产的α淀粉酶可在高达约110℃的温度下使用。

已知淀粉和钙离子的存在可稳定α淀粉酶以抗失活。然而，α淀粉酶在大于6的pH下使用以防过快失活。在低温下，已知得自地衣芽孢杆菌的α淀粉酶在低到5的pH下显示出优良的水解淀粉底物活性。不过，当该酶被用于在通常的喷嘴温度即102℃～109℃下淀粉的水解时，pH必须维持在至少大于pH5.7以避免过快失活。遗憾的是该pH要求提供窄范围的加工机会，因为pH值大于6.0会产生不需要的副产物如麦芽寡糖类。因此，实际上液化pH必须保持在5.9～6.0以获得理想产率的水解淀粉。

有关液化时pH的另一个问题是要求将淀粉悬浮液的pH从4左右，它是得自湿磨阶段的玉米淀粉悬浮液的pH，提高到5.9～6.0。该pH调节中需要加入昂贵的酸中和化学药品，而且还要求额外的离子交换来精制最后的淀粉糖化产品以除去化学药品。此外，液化后的下一步加工，一般是将已液化淀粉糖化成葡萄糖，要求pH为4～4.5；因此，必须将pH从5.9～6.0下调到4～4.5；需要另外加入化学药品和额外的精制步骤。

在美国专利No.5,322,778中，通过在液化浆中加入下述物质于pH4.0～6.0下完成液化：抗氧化剂如亚硫酸氢盐，抗坏血酸或其盐，异抗坏血酸，或酚类抗氧化剂如丁基化羟基苯甲醚、丁基化羟基甲苯、或α生育酚。依该发明的权利要求，必须加入浓度大于5mM的抗氧化剂。

在美国专利No.5,180,669中，是通过在磨碎的淀粉浆中加入过量于缓冲该溶液所需量的碳酸根离子而实现pH5.0～6.0间的液化。由于加入碳酸根离子引起pH增大，所以浆料中通常要加入能生成氢离子的物质例如无机酸如盐酸或硫酸来进行中和。

在PCT Publication No.WO94/02597中，描述了氧化稳定性得到改善的突变型α淀粉酶，其中一个或多个蛋氨酸被除半胱氨酸或蛋氨酸之外的任意氨基酸取代。

在PCT Publication No.94/18314中，描述了氧化稳定性得到改善的突变型α淀粉酶，其中一个或多个蛋氨酸、色氨酸、半胱氨酸、组氨酸或酪氨酸残基被不可氧化的氨基酸取代。

在PCT Publication No.WO91/00353中，研究了通过基因工程化处理α淀粉酶来解决液化时的有关问题，包括特性如更高的热稳定性、酸稳定性和碱稳定性。

在美国专利No.4,914,029中，在玉米浸泡的浓缩液中加入植酸酶以减小玉米浸泡的浓缩液中的植酸量，于是更有效地将玉米浸渍母液用于动物饲料。

尽管现有技术中取得了进展，但仍需要在低pH值下应用可商购的α淀粉酶进行淀粉液化的有效方法。

本发明的一个目的是，应用易得到的突变型或野生型α淀粉酶为低pH液化淀粉提供更好的效率。

本发明的进一步目的是，提供不需添加昂贵的抗氧化剂而液化淀粉的方法。

根据本发明，液化淀粉溶液的方法包括如下几步：(a)向淀粉淀液中加入钠组合物，其中淀粉溶液中最终钠浓度大于20ppm；(b)向淀粉溶液中加入α淀粉酶；和(c)将包括钠组合物和α淀粉酶的淀粉溶液保温一定时间，并且是在适合于把淀粉溶液液化成液化的淀粉溶液的条件下进行保温的；进行步骤(c)的条件使得存在于淀粉溶液中抗氧化剂的最终浓度小于2.5mM。依本发明优选的实施方案，钠组合物的最终浓度约为20ppm或更大；优选约20ppm～约10,000ppm；更优选约50ppm～约1000ppm；且最优选约100～500ppm。步骤(c)也优选在低于约5.9的pH下进行；更优选低于约5.7；且最优选低于约5.5。

如下文更详细指出的那样，实施本发明可赋予商业化淀粉液化方法以重要的优势。尽管不想受理论约束，申请人仍然认为加入钠组合物可消除用α淀粉酶低pH液化淀粉的有关问题，这是由于酶本身稳定性的提高或是钠与淀粉溶液中使淀粉不稳定的一种或多种组合物的作用。申请人惊奇地发现，加入的钠赋予α淀粉酶更大的低pH活性，这就能用可商购的α淀粉酶在低于约5.9的pH值下有效地液化粒状淀粉。

参照下述详细说明并结合附图，就可更好地理解本发明和进一步的目的以及伴随的优点。

“液化作用”或“液化”表示淀粉被转化成链长更短、粘性更小的糊精的加工过程。该过程一般包括淀粉糊化的同时或随后加入α淀粉酶。在工业加工中，粒状淀粉优选得自包括玉米、小麦、买罗高梁、高梁、黑麦或焦干碎麦(bulgher)的来源。不过，本发明可应用于适于液化作用的任何谷物淀粉源，例如已知能产生适合于液化作用的淀粉的其它任何谷物或植物来源。

“浸泡浓缩液”表示浸渍谷颗粒期间从中抽取的液体。浸泡浓缩液含显著量的谷物可溶性成分。

“粒状淀粉”或“淀粉颗粒”表示可食用谷物的水不溶性组分，是通过浸渍、机械破碎、分离、筛选、逆流冲洗和离心作用等谷物湿磨加工典型处理步骤而除去壳、纤维、蛋白质、脂肪、胚芽和溶解物之后的残余物。粒状淀粉包括完整的淀粉颗粒，它几乎仅含填充的淀粉分子(即支链淀粉和直链淀粉)。对于玉米，粒状淀粉组分包括约99％淀粉，余下的1％含蛋白质、脂肪、灰分、纤维和与颗粒密切相关的微量成分。粒状淀粉的堆砌结构严重阻滞α淀粉酶水解淀粉的能力。淀粉的糊化可破坏颗粒而形成可溶性淀粉溶液并有利于酶促水解。

“淀粉溶液”表示加热粒状淀粉而产生的水溶性糊化淀粉。当加热颗粒至高于约70℃后，粒状淀粉分解而形成松散淀粉分子的水溶性混合物。例如，对于黄色臼齿形玉米，包括约75％支链淀粉和25％直链淀粉的该混合物在水中形成粘稠溶液。在生成葡萄糖或果糖的商业化加工过程中，是将淀粉溶液液化而形成可溶性糊精溶液。

“α淀粉酶”表示分解或水解例如淀粉、支链淀粉或直链淀粉聚合物中α(1-4)糖苷键的酶活性。合适的α淀粉酶有天然α淀粉酶和适用于淀粉液化的重组的或突变型淀粉酶。本发明中优选的淀粉酶有得自芽孢杆菌属且具体是得自地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌或嗜热脂肪芽孢杆菌的α淀粉酶。

“钠组合物”或“钠”表示含钠的组合物或混合物，当它溶于水溶液时，导致存在游离钠离子。钠组合物可以是游离钠离子、钠金属、含钠的盐或可在水溶液中引入游离钠离子的本领域公认的其它任意方法。合适的钠盐包括氯化钠、碳酸氢钠、苯甲酸钠、硫酸钠、亚硫酸氢钠、抗坏血酸钠、乙酸钠、硝酸钠、酒石酸钠、四硼酸钠、丙酸钠、柠檬酸钠、琥珀酸钠、谷氨酸一钠、柠檬酸三钠、磷酸钠或其混合物。

钠组合物在淀粉溶液中的最终浓度通常应该是依本发明足以有效液化淀粉的浓度。加入淀粉中的含钠组合物的最终浓度通常是20ppm或更大；优选是约20ppm～约10,000ppm；更优选约50ppm～约1000ppm；且最优选约100～500ppm。

本发明的淀粉液化使得液化反应，即淀粉、支链淀粉或直链淀粉的酶促水解，与现有技术液化方法相比，在小于5.9或甚至小于5.5的pH下有效地进行。液化反应优选在小于5.9的pH下进行；更优选在约4.5～约5.7之间；且最优选在约4.5～约5.5之间。

液化作用的温度范围一般是已知对淀粉液化有效的任意液化温度。淀粉的温度优选在约80℃～约115℃之间，更优选约100℃～约110℃，且最优选约105℃～约108℃。

在本发明一个优选的实施方案中，在加入α淀粉酶和液化淀粉之前或同时向粒状淀粉或淀粉溶液中加入含钠化合物。然后按公知技术，在合适的pH和合适的温度下将浆料保温适当的时间以进行淀粉液化。依本发明，通过先于液化即先于加入α淀粉酶而加入钠组合物，大为改善了有效液化淀粉的能力。

下述实施例为举例性的而不是限制性的，本发明的应用具有一些优势。然而，本领域普通技术人员应能替换上述公开说明中的条件、谷物、温度、酶等等。

实施例

实施例1

分析测定α淀粉酶活性

通过分析测定α淀粉酶的活性，该分析基于淀粉与碘形成蓝色络合物的能力和当淀粉水解成更短的糊精分子后该颜色的消失。以产生颜色变化所需的消化时间定义α淀粉酶活性，其中的颜色变化指示淀粉糊精化的一定状态。

所用试剂如下：磷酸盐缓冲液-将磷酸二氢钾(340g)和氢氧化钠(25.3g)溶于水后稀释至约2升。该缓冲液被冷却至室温，调节pH至6.2±0.1。在容量瓶中稀释缓冲液至2升。淀粉底物-将10克(干物质)可溶性林特纳淀粉悬浮于50ml水后洗入约300ml沸水。又将该悬浮液煮沸并在不停地搅拌下煮沸5分钟。在不断搅拌下冷却该淀粉溶液至室温，加入125ml磷酸盐缓冲液。用水稀释该溶液至500ml。贮备碘溶液-将碘晶体(5.5g)和碘化钾(11.0g)溶于水后，于容量瓶中稀释至250ml。该溶液被避光保存。稀碘溶液-将碘化钾(20g)和2ml贮备碘溶液溶于水后，在容量瓶中稀释至500ml。酶稀释溶液-将氯化钙(11.1g)溶于4升水。所有试剂中用到的水或是蒸馏水或是去离子水。

用酶稀释溶液将待测活性的α淀粉酶样本稀释至10-15LU/ml(如下述定义)。对许多商品化α淀粉酶制剂，合适的稀释度为2000倍。将5毫升等分稀碘溶液分配入13×100mm试管，并取10ml淀粉底物置于23×200mm试管。所有试管均置于30℃水浴中。用装有特殊α淀粉酶色板(目录号620-s5)的Hellige比色卡进行读数。将5毫升已稀释的酶(也在30℃下)与淀粉底物混合并开始计时。以适当的时间间隔，例如在反应早期间隔为1分钟而反应后期间隔为15秒，将1ml等分酶-底物混合物转入含调节过的稀碘溶液的试管。该淀粉碘溶液混合后被转入13mm精密的矩形管(squaretube)，并用Hellige比色卡中的标准α淀粉酶色板比色。当接近终点时，以0.25分钟间隔取样。

记录样本颜色与色板颜色相当所需的时间，并按下式计算活性(以每克或每ml的淀粉酶活性单位数表示)：其中：LU＝淀粉酶活性单位

   V＝酶体积(5ml)

   t＝糊精化时间(分)

   D＝稀释因子：稀释体积除以己稀释酶的毫升数或克数。

实施例2

淀粉液化条件-测定液化淀粉DE(葡萄糖值)

利用这种反应器进行淀粉液化：将50英尺直径为0.24英寸(0.21英寸i.d.)不锈钢管形材料弯成直径约为10英寸高约5.5英寸的旋管。该旋管装有一个11.5英寸的在线静态混合器(Cole-Parmer#G-04669-60)，固定在离前端约4英尺处。在旋管后端装有一个Swagelok在线可调减压阀(#SS-4CA-3)，设定开启压力约为20psi。用活塞计量泵以约70ml/min的速率向旋管装入淀粉浆料。将旋管浸入加热至105.5℃的甘油-水浴而进行加热，用循环加热器/温度控制器(Fisher Scientificmodel 7305)保持浴液温度。

粒状淀粉得自湿磨玉米且在两天内使用。另一个淀粉源LO-DEX^TX10(由玉米淀粉极限水解产生的水溶性纯化糊精)，购自AmericanMaize-Products Company，Hammond，Indiana。本文所用的LO-DEX^TM10的初始DE为约9.5。

用去离子水稀释淀粉或麦芽糖糊精至约30-35％干物质的所需固含量，并用2.5％NaOH或6％HCl调节pH至所需值。以CaCl₂·2H₂O的形式加入钙。典型的液化条件是：

淀粉或LO-DEX^TM10          32％～35％固体物

钙                         40～60ppm(30ppm为加入的)

pH                         5.0～6.0

α淀粉酶                   12～14LU/g糖(干基)

以约70ml/min往反应器中加入含酶和CaCl₂·2H₂O形式的钙的淀粉或LO-DEX^TM10。将反应器浸入甘油-水浴中而保持反应器的温度在105.5℃。从反应器将淀粉样转入95℃的第二步液化浴并保持90分钟。第二步液化后立即测定淀粉液化度，这是按the Standard Analytical Methods of the Member Companies ofthe Corn Refiners Association，Inc.，sixth ed.，AnalyticalProcedure Committee(1980)中所述方法通过测定样本的葡萄糖值(DE)而进行测定的。

淀粉的液化也可应用水加热器M103-M喷汽器(Hydro-Thermal Corp.，Milwaukee，WI)，在混合室后装有2.5升延迟旋管(delay coil)，并装有末端止回阀。由Moyno泵将淀粉以大约360ml/min泵入喷汽器，由150psi蒸汽管道提供蒸汽，减压至90～100psi且受控制使浆料温度至约105.5℃，这可由后部的温度传感器测定。温度传感器被装在水加热器喷汽器后面约10cm和止回阀前面约5cm处。

实施例3

阳离子对低pH下由α淀粉酶液化玉米淀粉的影响

干玉米淀粉(Clinton Brand 106-B Pearl corn starch，ADM CornProcessing，Clinton，lowa)用去离子水(约23kg于约50升中)调成浆，让它水化16小时。过滤、再悬浮于去离子水中来洗涤淀粉2次，以除去溶解性物质，然后用去离子水稀释至35％固形物。于淀粉中加入钙(以CaCl₂·2H₂O加入，50ppm)，用2.5％NaOH调节pH至大约5.5。加入约5mM待评定的阳离子至淀粉浆料中，并以12LU/g糖的比率加入α淀粉酶(SPEZYME AA20，由地衣芽孢杆菌菌株产生，可从GenencorInternational，Inc.商购)，再根据需要加入2.5％NaOH或6％HCl调节溶液pH至pH5.5。用实施例2中所述的反应器系统和方法水解该溶液。第二次保温后通过测定葡萄糖值(DE)而立即测定淀粉浆料的水解度。

下表表明，在pH5.5时玉米淀粉液化期间，由加入的钠盐而不是其它阳离子阻止α淀粉酶失活的情况。

表1

阳离子对pH5.5下玉米淀粉液化的影响

待评定的化合物	DE
		无	4.9
NaCl	9.7
		LiCl	3.0
KCl	6.5
		NH4Cl	5.3
(NH4)2SO4	5.4
		CaCl2	5.1

申请人证实，某些阳离子(即K⁺和NH₄ ⁺)的较小效果与加入用于pH调节的NaOH较小改变量一致。然而，申请人认为，较小效果也可由钾离子提供，例如大约为钠组合物引起效果的10-25％。

实施例4

平衡阴离子的改变对钠稳定化α淀粉酶的影响

干玉米淀粉(Clinton Brand 106-B Pearl corn starch，ADM CornProcessing，Clinton，lowa)用去离子水(约23kg于约50升中)调成浆，让它水化16小时。过滤、再悬浮于去离子水中来洗涤淀粉2次，以除去溶解性物质，然后用去离子水稀释至35％固形物。于淀粉中加入钙(以CaCl₂·2H₂O加入，50ppm)，用5％KOH调节pH至大约5.5。加入各种钠盐于淀粉浆料中至最终钠浓度为5mM。以12LU/g糖的比率加入α淀粉酶(SPEZYME AA20，由地衣芽孢杆菌菌株产生，可从Genencor International，Inc.商购)，再根据需要加入5％KOH或6％HCl调节溶液pH至pH5.5。用实施例2中所述的反应器系统和方法水解该溶液。第二次保温后通过测定葡萄糖值(DE)而立即测定淀粉浆料的水解度。

如表2所示，加入不同来源的钠离子可阻止pH5.5时玉米淀粉液化期间α淀粉酶的失活。但溴酸钠明显无效，这是由于溴酸盐和蛋白质之间发生强烈的氧化作用。

表2

钠离子对pH5.5时液化期间α淀粉酶稳定性的影响

待评定的钠盐	DE
		无	2.3
NaH2PO4	8.9
		苯甲酸钠	11.7
Na2SO4	10.7
		NaNO3	10.8
酒石酸钾钠	9.8
		四硼酸钠	10.7
丙酸钠	11.2
		柠檬酸钠	6.6
琥珀酸钠	10.4
		谷氨酸一钠	10.6
溴酸钠	～0

实施例5钠离子和α淀粉酶浓度对玉米淀粉液化的影响

用去离子水将得自湿法玉米淀粉制造厂的玉米淀粉浆稀释至35％固形物，以Ca(OH)₂形式加入30ppm钙。于淀粉浆中加入各种钠离子浓度至所需钠离子浓度。对每个α淀粉酶浓度，至少评定两个钠离子浓度，淀粉浆中钠离子浓度由钠离子电极(Corning#476138)测定。用Whatman#3滤纸过滤已知固形物的淀粉浆，按钠电极说明书所述测定滤液的钠浓度。报道的钠离子浓度以每百万份整个淀粉浆中的份数表示。

依所需用5％KOH或6％HCl调节淀粉浆的pH至大约所需的pH(5.5和5.9之间)。以12、15或18LU/g糖干固形物的比率加入α淀粉酶(SPEZYME AA20，由地衣芽孢杆菌菌株产生，可从Genencor International，Inc.商购)，视所需加入5％KOH或6％HCl调节溶液的pH至所需pH。用实施例2中所述的蒸汽喷嘴和方法水解该溶液。在第二次保温后通过测定葡萄糖值(DE)而立即测定淀粉浆的水解度。

对于每一个待评定的α淀粉酶用量，调节用于液化的钠离子浓度，得到大于和小于10的DE值。然后测定每个酶用量下产生DE 10液化淀粉所需的钠离子浓度，以DE值对钠离子浓度描点，并在数据点之间用内推法。

如表3所示，随着液化时pH降低或随着α淀粉酶浓度的降低，需要更多钠离子以产生DE10的液化淀粉。

表3

产生DE10液化作用所需的钠浓度

pH	钠浓度(ppm)
				12LU/g	15LU/g	18LU/g
	5.9	100	28				5
5.7				155	95	22
	5.5	322	200				63

当然，应懂得可对上述优选的实施方案作大范围的改变和改进。因此应这样看待上述详细说明，旨在用下述权利要求、包括所有的等效内容限定本发明的范围。

Claims (10)

1.液化淀粉溶液的方法，它包括如下步骤：

(a)向所述淀粉溶液中加入钠组合物，其中所述淀粉溶液中的最终钠浓度大于20ppm；

(b)向所述淀粉溶液中加入α淀粉酶；和

(c)在适合于液化所述淀粉溶液的条件下保温含该钠组合物和该α淀粉酶的所述淀粉溶液达一定时间以形成液化了的淀粉溶液；

在一定条件下进行步骤(c)，使得所述淀粉溶液中存在的抗氧化剂的最终浓度是含少于2.5mM抗氧化剂。

2.权利要求1的方法，其中所述钠组合物包括：氯化钠、碳酸氢钠、苯甲酸钠、硫酸钠、亚硫酸氢钠、抗坏血酸钠、乙酸钠、硝酸钠、酒石酸钠、四硼酸钠、丙酸钠、柠檬酸钠、琥珀酸钠、谷氨酸一钠、柠檬酸三钠、磷酸钠或其混合物。

3.权利要求1的方法，其中存在的所述钠组合物最终浓度为约20ppm～约10,000ppm。

4.权利要求1的方法，其中存在的所述钠组合物最终浓度为约50ppm～约1000ppm。

5.权利要求1的方法，其中存在的所述钠组合物最终浓度为约100ppm～约500ppm。

6.权利要求1的方法，其中所述步骤(c)是在小于约5.9的pH下进行的。

7.权利要求1的方法，其中所述步骤(c)是在约4.5～约5.7的pH下进行的。

8.权利要求1的方法，其中所述步骤(c)是在约4.5～约5.5的pH下进行的。

9.权利要求1的方法，其中所述步骤(a)先于所述步骤(b)。

10.权利要求1的方法，其中所述步骤(a)与所述步骤(b)同时进行。