CN118846067A - 一种预防或治疗瘢痕妊娠的药物 - Google Patents

Abstract

本申请涉及一种预防或治疗瘢痕妊娠的药物。瘢痕妊娠是一种高风险的异位妊娠形式，现有的治疗手段效果有限，易导致子宫破裂和大量出血，严重威胁患者的生命安全。现有技术主要集中在药物治疗和手术干预，但这些方法存在一定的局限性和副作用。本申请的药物能在孕早期安全地、有效地减少瘢痕妊娠的发生率。

Description

一种预防或治疗瘢痕妊娠的药物

技术领域

本申请属于生物医药技术领域，具体涉及一种预防或治疗瘢痕妊娠的药物。

背景技术

瘢痕妊娠(CSP)是指胚胎着床于子宫瘢痕上的一种非常罕见的妊娠形式，这种瘢痕大多由之前的剖宫产手术留下。子宫切口未能完全愈合或愈合不良可能导致子宫壁变薄，形成瘢痕，如果在这些瘢痕上发生胚胎着床，就可能形成瘢痕妊娠。这种情况非常危险，因为瘢痕组织硬度较大，承载力远不如正常子宫壁，极有可能导致子宫破裂，对母体和胎儿造成严重威胁。瘢痕妊娠的发生率很低，但随着剖宫产率的上升，其发生率也有所增加。瘢痕妊娠的诊断通常需要超声检查来确认，而治疗方式可能包括药物治疗(如聚桂醇或甲氨蝶呤等)、手术干预，以及在某些情况下，可能需要进行子宫切除术来防止严重并发症。这些治疗方式往往具有较高的风险和并发症。因此，寻找有效的方法来预防和治疗瘢痕妊娠成为当前医学研究的一个重要方向。

细胞出泡是指细胞膜局部膨胀形成泡状结构，这一过程通常与细胞迁移、分裂和凋亡等生理活动有关。研究表明，当细胞受到压缩时，核膜的拉伸和展开会触发钙释放和细胞质磷脂酶A2(cPLA2)的激活。cPLA2是一种关键的信号和代谢调节分子，其激活会进一步催化花生四烯酸(ARA)的生成，进而促进肌球蛋白II的收缩活性，从而引发细胞主动收缩反应，产生细胞膜出泡现象，帮助细胞迅速摆脱压缩环境。在某些病理状态下，如癌症和炎症，细胞膜出泡也可能显著增加，导致异常的细胞行为和疾病进展。通过使用细胞出泡抑制剂，可以调控这些过程，从而提供新的治疗手段来应对癌症、炎症等疾病。典型的细胞出泡抑制剂例如AACOCF3、Y-27632、Blebbistatin或Latrunculin A等。

发明内容

本申请要解决的技术问题是克服现有技术的不足，提供一种利用细胞出泡抑制剂来改善胚胎在子宫瘢痕部位着床的方法，以减少瘢痕妊娠的发生率，从而为瘢痕妊娠的临床治疗提供更多选择。

本申请提供一种细胞出泡抑制剂在制备预防或治疗瘢痕妊娠的组合物的用途。

本申请还提供一种细胞出泡抑制剂在制备减少或避免胚胎在瘢痕组织处着床的组合物的用途。

在一些实施方式中，组合物为药物。

在一些实施方式中，组合物中还包括其他预防或治疗瘢痕妊娠的药物或制剂。

在一些实施方式中，其他预防或治疗瘢痕妊娠的药物或制剂包括聚桂醇、甲氨蝶呤、米非司酮、氯化钾、氟尿嘧啶(5-Fu)、或天花粉中的一种或多种。

在一些实施方式中，细胞出泡抑制剂包括细胞质磷脂酶A2的抑制剂、Rho激酶抑制剂、非肌球蛋白II ATPase抑制剂、或肌动蛋白去聚合剂。

在一些实施方式中，细胞质磷脂酶A2的抑制剂为AACOCF3；或所述Rho激酶抑制剂为Y-27632；或所述非肌球蛋白II ATPase抑制剂为Blebbistatin；或所述肌动蛋白去聚合剂为Latrunculin A。

在一些实施方式中，组合物被非侵入式施用(例如子宫灌注或宫腔灌注)或侵入式施用；局部施用或全身施用。

在一些实施方式中，组合物为洗剂、栓剂、喷剂、膏剂、贴剂、糊剂、丸剂、栓剂、乳剂、胶囊剂、口服剂或注射剂。

在一些实施方式中，组合物在孕早期被施用，优选为受精后3天内、10天内、1-2周内、3-4周内、5-6周内、7-8周内、9-10周内、或11-12周内被施用；更优选的，组合物在胚胎发育的一周内被施用。

本申请的优点：

(1)高效抑制细胞出泡：细胞出泡抑制剂高效减少细胞出泡现象。

(2)减少瘢痕妊娠的潜力：通过改善抑制胚胎在瘢痕组织中的着床，减少了瘢痕妊娠的发生率。

(3)减少副作用：相较于传统的药物治疗和手术干预，本方法通过局部使用细胞出泡抑制剂，减少了全身副作用的风险。

(4)操作简便：通过简单的子宫灌注方式，即可实现对瘢痕组织中胚胎植入的有效干预，操作简便且可行性高。

附图说明

图1、灌注药物操作示意图。

图2、子宫形态与胚胎着床位置图。其中，左侧子宫为造模子宫，造模子宫下1/2为瘢痕处，右侧子宫为健康子宫。

图3、NS组和AA组的健康侧下1/2和造模侧瘢痕处着床率。

图4、NS组和AA组的健康侧子宫着床总数。

具体实施方式

瘢痕妊娠发生在胚胎着床子宫瘢痕上，瘢痕妊娠的发生率随着既往剖宫产次数的增加而增加。瘢痕妊娠的确切发病机制尚不清楚，但子宫瘢痕的力学性能与其他部位有明显不同。通过超声弹性成像测量，与子宫完整的肌层相比，子宫瘢痕的硬度明显增加，这也可能影响胚胎着床。此外，病理状态下子宫内膜的硬度明显高于正常状态下的。发明人发现，在正常和病变的人类子宫内膜组织特征(刚度差异)的背景下，滋养层迁移和附着的力学生物学调控可能在着床过程中起着关键作用。当前的瘢痕妊娠治疗方法主要依赖于药物和手术干预，但这些方法通常具有较高的风险和并发症。例如，药物治疗可能对母体和胎儿产生不良影响，而手术干预则可能导致子宫损伤或其他并发症。此外，现有的预防措施并不能有效降低瘢痕妊娠的发生率。因此，迫切需要一种新的、安全有效的方法来预防和治疗瘢痕妊娠。

针对这一问题，本申请提出使用细胞出泡抑制剂通过抑制细胞出泡，来改善胚胎在瘢痕部位的着床问题。发明人发现，小鼠胚胎在体外环境中更倾向于向硬度较高的区域移动，而子宫瘢痕组织的硬度明显高于健康子宫组织，子宫瘢痕处与健康组织硬度的区别可能会诱导胚胎从原本的着床位点向瘢痕处迁移，从而引发瘢痕妊娠。细胞出泡抑制剂可以阻断细胞压缩响应中的一系列反应，影响细胞出泡和细胞迁移，从而有效减少胚胎在瘢痕部位的着床,降低瘢痕妊娠的发生率。这一方法不仅具有明确的生物学机制支持，而且能够提供一种新的非侵入性治疗方案，减少治疗过程中的风险和并发症，具有广泛的临床应用前景。

术语和定义

AACOCF3(Arachidonyl trifluoromethyl ketone)，化学名为花生四烯酸三氟甲基酮，是一种含氟化合物。其结构中包含一个花生四烯酸基团和一个三氟甲基酮基团，这使得AACOCF3具有高亲脂性和化学稳定性。AACOCF3属于细胞出泡抑制剂的一种，被用作细胞质磷脂酶A2(cPLA2)的抑制剂。三氟甲基基团的引入增强了其对cPLA2的抑制能力，主要通过电子吸引效应影响酶的活性中心。cPLA2的活化是细胞出泡过程中的一个重要步骤，AACOCF3通过与cPLA2的活性位点结合，抑制其催化活性，从而阻止花生四烯酸的释放，抑制cPLA2可以减少细胞出泡现象。因此，通过抑制cPLA2，AACOCF3可以有效阻断细胞出泡过程，减少细胞在受压条件下的出泡行为。AACOCF3已经展示了在多种疾病治疗中的广泛潜力：其通过抑制cPLA2活性，在心血管疾病中有效减缓血管平滑肌细胞的钙化并减少动脉斑块中的脂质沉积；在脑胶质母细胞瘤中，通过降低ATP和腺苷水平，抑制肿瘤细胞的增殖和转移；在肝纤维化治疗中,AACOCF3能够通过抑制cPLA2活性，显著减轻肝纤维化；cPLA2是脂质小滴(LDs)生成的关键分子，AACOCF3的应用能够抑制LDs生成并促进自噬，减轻纤维化进程；在抗癌研究中，AACOCF3通过抑制cPLA2的活性，减少了肿瘤细胞内ATP的生成，进而抑制了肿瘤细胞的增殖和迁移。总之，AACOCF3在心血管疾病、癌症、炎症和神经保护等多个医学领域展示了显著的治疗效果。

Y-27632是一种选择性Rho激酶(ROCK)抑制剂，通过抑制ROCK，减少肌球蛋白轻链的磷酸化，从而降低肌球蛋白II的收缩活性，进而抑制细胞膜出泡；Blebbistatin是一种特异性的非肌球蛋白II ATPase抑制剂，通过直接抑制肌球蛋白II的收缩功能，阻止出泡的形成；Latrunculin A(LatA)是一种从红海海绵Latrunculia magnifica中提取的毒素，是活细胞实验中广泛使用的肌动蛋白去聚合剂，Latrunculin A通过与G-actin高亲和力结合，阻止其聚合成F-actin，进而抑制肌动蛋白丝的形成。这种结合导致细胞骨架的破坏，影响细胞膜出泡的形成和动态。Y-27632目前在抗癌和神经保护方面展示出了良好的应用前景：研究表明，Rho信号通路在抗癌药物诱导的神经毒性中发挥了关键作用，通过抑制该通路可以有效减轻药物的神经毒性。Y-27632通过抑制RhoA–NF-kB信号通路，减少细胞增殖并增强细胞凋亡，从而抑制肿瘤生长；同时，它还能减轻顺铂引起的外周神经损伤，保护神经功能。此外，Y-27632在化疗过程中保护神经元免受药物损伤，并显示出在心血管疾病治疗方面的潜力，为心脏病治疗提供了理论依据。

Blebbistatin在神经科学中用于研究神经元的发育和再生。它通过抑制肌球蛋白-肌动蛋白相互作用，减少氧化应激引起的神经元凋亡。例如，在内耳毛细胞中，Blebbistatin通过维持线粒体功能和减少活性氧(ROS)水平，有效抑制新霉素诱导的毛细胞凋亡，表明Blebbistatin可能具有预防氨基糖苷类抗生素诱导的毛细胞损伤及听力损失的潜在临床应用价值。此外，Blebbistatin还有降低眼内压，缓解青光眼症状的治疗潜力。

Latrunculin A在抗癌研究中也展示出潜在的应用前景。Latrunculin A作为F-肌动蛋白抑制剂，通过阻断肌动蛋白聚合，抑制了CAR-NK细胞与肿瘤细胞之间的吞噬作用。这种抑制作用防止了CAR-NK细胞的功能耗竭，从而增强了其抗肿瘤活性，并延长了其在体内的抗癌效力。

本申请提出了一种使用细胞出泡抑制剂改善胚胎在瘢痕着床的方法，通过实验验证细胞出泡抑制剂在减少瘢痕妊娠发生率中的有效性。具体设计思路如下：

(1)选择造模子宫瘢痕小鼠作为实验对象。

(2)使用浓度为10μM的细胞出泡抑制剂进行实验。

(3)通过子宫灌注的方式施用药物。

(4)通过对比实验组和对照组的胚胎着床位置和数量，评估细胞出泡抑制剂作为药物预防或治疗瘢痕妊娠的有效性。

实施例1

实验对象：造模子宫瘢痕小鼠。

药物使用：AACOCF3(浓度为10μM)，生理盐水，1％蓝色染料溶液，麻醉剂。

耗材：1ml注射器，一次性侧开口牙科冲洗针头。

具体实验步骤：

(1)准备工作：实验小鼠见栓后，将其分为两组，实验组和对照组。

实验组(AA组)：AACOCF3，浓度为10μM，给药4次，0.02ml/次。

对照组(NS组)：生理盐水，浓度为0.9％，给药4次，0.02ml/次。

(2)灌注药物：在E3.5(胚胎发育第3.5天)时，麻醉小鼠后，使用一次性侧开口牙科冲洗针头，通过子宫灌注的方式向实验组小鼠子宫中灌注AACOCF3溶液，对照组灌注等体积的生理盐水。

(3)染色与解剖：在E5.5(胚胎发育第5.5天)时，麻醉小鼠后，对所有小鼠进行尾静脉注射1％蓝色染料溶液。注射染料5分钟后，解剖小鼠，分离子宫，观察并记录胚胎着床的位置和数量。

(4)数据记录与分析：统计并比较实验组和对照组小鼠胚胎着床位置的分布，分析AACOCF3对胚胎趋硬性迁移的影响。

结果分析：

1.健康侧下1/2：

NS组和AA组的着床率没有显著差异(p＝0.4)，这表明在健康侧下1/2，AA处理不会影响胚胎的正常着床。

2.造模侧瘢痕处：

NS组的瘢痕处着床率较高，而AA组的着床率较低。NS组的着床率显著高于AA组(p＝0.0089)，说明在造模侧瘢痕处，AA处理可能有助于降低着床率。这一结果表明AA处理可能对胚胎在瘢痕组织着床有抑制作用。

3.健康侧总着床数：

NS组和AA组在健康侧子宫的着床总数上的差异不显著(p＝0.688)，表明使用AA处理不会影响胚胎在整体子宫的正常着床。并且，NS组和AA组的平均着床数分别为4.73和5.12，二者无显著差异，进一步支持了AA处理对整体着床率无负面影响。

结论：

AA处理不会影响胚胎在子宫中的正常着床。

AA处理在造模侧瘢痕处有显著降低着床率的作用，可能有助于降低瘢痕组织区域的异常着床风险。

总体来看，AA处理在胚胎着床中的应用是安全的且有效的，并有较高的临床应用价值。

以上仅为本申请的优选实施例而已，并不用于限制本申请，对于本领域的技术人员来说，本申请可以有各种更改和变化。凡在本申请的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本申请的保护范围之内。

Claims (10)

1.细胞出泡抑制剂在制备预防或治疗瘢痕妊娠的组合物的用途。

2.细胞出泡抑制剂在制备减少或避免胚胎在瘢痕组织处着床的组合物的用途。

3.如权利要求1或2的用途，其特征在于，所述的组合物为药物或保健用品。

4.如权利要求1-3之一所述的用途，其特征在于，所述组合物中还包括其他预防或治疗瘢痕妊娠的药物或制剂。

5.如权利要求4所述的用途，其特征在于，所述其他预防或治疗瘢痕妊娠的药物或制剂包括聚桂醇、甲氨蝶呤、米非司酮、氯化钾、氟尿嘧啶、或天花粉中的一种或多种。

6.如权利要求1-5之一所述的用途，其特征在于，所述细胞出泡抑制剂包括细胞质磷脂酶A2的抑制剂、Rho激酶抑制剂、非肌球蛋白II ATPase抑制剂、或肌动蛋白去聚合剂。

7.如权利要求6所述的用途，其特征在于，所述细胞质磷脂酶A2的抑制剂为AACOCF3；

或所述Rho激酶抑制剂为Y-27632；或所述非肌球蛋白II ATPase抑制剂为Blebbistatin；

或所述肌动蛋白去聚合剂为Latrunculin A。

8.如权利要求1-7之一所述的用途，其特征在于，所述组合物被非侵入式施用(例如子宫灌注或宫腔灌注)或侵入式施用；局部施用或全身施用。

9.如权利要求1-8之一所述的用途，其特征在于，所述组合物为洗剂、喷剂、膏剂、贴剂、糊剂、丸剂、栓剂、乳剂、胶囊剂、口服剂或注射剂。

10.如权利要求1-8之一所述的用途，其特征在于，所述组合物在孕早期被施用(如胚胎发育的一周内被施用)。