CN118679186A - 用于减少使用egfr/met双特异性抗体治疗的患者的输注相关反应的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及减少使用抗表皮生长因子受体(EGFR)/肝细胞生长因子受体(c‑MET)抗体治疗的受试者的输注相关反应(IRR)的发生率或严重程度的方法，该方法包括向该受试者施用(a)地塞米松；(b)孟鲁司特；或(c)甲氨蝶呤。

Description

用于减少使用EGFR/MET双特异性抗体治疗的患者的输注相关 反应的方法

相关申请的交叉引用

本申请要求2022年2月7日提交的美国临时专利申请63/307,375号和2022年7月14日提交的美国临时专利申请63/389,042号的权益，其公开内容全文以引用的方式并入本文。

以电子方式提交的参考序列表

本申请的序列表以电子方式作为XML格式化序列表经由美国专利商标中心专利中心(The United States Patent and Trademark Center Patent Center)提交，其文件名为“JBI6706WOPCT1SEQLIST.xml”，创建日期为2023年1月23日，大小为20千字节(KB)。提交的该序列表是本说明书的一部分并且全文以引用方式并入本文。

技术领域

本发明涉及减少使用抗表皮生长因子受体(EGFR)/肝细胞生长因子受体(c-MET)抗体治疗的受试者的输注相关反应(IRR)的发生率或严重程度的方法，该方法包括向该受试者施用(a)地塞米松；(b)孟鲁司特；或(c)甲氨蝶呤。

背景技术

埃万妥单抗(Amivantamab)是一种双特异性EGF受体导向和MET受体导向的抗体，经FDA批准用于治疗患有局部晚期或转移性NSCLC的成年患者。经FDA批准的测试所检测的结果显示，这些患者具有EGFR外显子20插入突变，他们的疾病在使用铂基化学疗法期间或之后已有进展。埃万妥单抗施用可导致在一部分患者中出现输注相关反应(IRR)。IRR的体征和症状包括但不限于呼吸困难、潮红、发烧、发冷、恶心、胸部不适、低血压和呕吐。当引入新的蛋白质治疗输注时，经常观察到包括严重反应在内的全身性IRR，但诱导反应的机制各不相同。

发明内容

需要改进的治疗剂组合，其能够减少使用EGFR/c-Met双特异性抗体(诸如埃万妥单抗)治疗的患者的输注相关反应(IRR)。

本公开总体上涉及用于治疗使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗的患者中的IRR的方法。

在一个方面，本公开提供了一种减少使用抗表皮生长因子受体(EGFR)/肝细胞生长因子受体(c-Met)抗体治疗的受试者的输注相关反应(IRR)的发生率或严重程度的方法，该方法包括施用(a)地塞米松；(b)孟鲁司特；或(c)甲氨蝶呤。

在一些实施方案中，该抗体包含：

-特异性结合EGFR的第一结构域，其包含分别为SEQ ID NO:1、

2、3、4、5和6的重链互补决定区1(HCDR1)、HCDR2、

HCDR3、轻链互补决定区1(LCDR1)、LCDR2和LCDR3氨基酸序列；以及

-特异性结合c-Met的第二结构域，其包含分别为SEQ ID NO:7、8、

9、10、11和12的HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3氨基酸序列。

在某些实施方案中，第一结构域包含SEQ ID NO:13的重链可变区(VH)和SEQ IDNO:14的轻链可变区(VL)，并且第二结构域包含SEQ ID NO:15的VH和SEQ ID NO:16的VL。

在一些实施方案中，该抗体是IgG1同种型。

在一些实施方案中，该抗体包含SEQ ID NO:17的第一重链(HC1)、SEQ ID NO:18的第一轻链(LC1)、SEQ ID NO:19的第二重链(HC2)和SEQ ID NO:20的第二轻链(LC2)。

在一些实施方案中，该抗体是分离的双特异性抗体。

在一些实施方案中，该双特异性抗体是埃万妥单抗。

在一些实施方案中，该抗体以约700mg至约1,400mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约700mg、约1,050mg或约1,400mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约1,400mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约1,050mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约700mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体每周施用一次或每两周施用一次。

在一些实施方案中，该抗体在前4周内每周施用一次，然后每2周施用一次。

在一些实施方案中，该抗体作为单一疗法施用。

在一些实施方案中，使用该抗EGFR/c-Met抗体治疗的该受试者被进一步施用一种或多种化学治疗剂。

在一些实施方案中，该一种或多种化学治疗剂包括酪氨酸激酶抑制剂(TKI)。

在一些实施方案中，该一种或多种化学治疗剂包括拉泽替尼。

在一些实施方案中，该一种或多种化学治疗剂包括奥希替尼。

在一些实施方案中，在施用该抗EGFR/c-Met抗体之前7天至3天之间施用甲氨蝶呤。

在一些实施方案中，甲氨蝶呤以25mg的剂量施用。

在一些实施方案中，在施用该抗EGFR/c-Met抗体之前4天开始每天施用孟鲁司特。

在一些实施方案中，孟鲁司特施用5次。

在一些实施方案中，孟鲁司特以10mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该方法还包括在施用该抗EGFR/c-Met抗体的第一天和第二天施用IV地塞米松，其中在施用该抗EGFR/c-Met抗体之前45分钟至60分钟施用地塞米松。

在一些实施方案中，IV地塞米松以10mg的剂量施用。

在一些实施方案中，口服地塞米松在施用该抗EGFR/c-Met抗体之前1天施用。

在一些实施方案中，口服地塞米松以8mg的日总剂量施用。

在一些实施方案中，该方法还包括在施用该抗EGFR/c-Met抗体的第一天和第二天施用IV地塞米松，其中IV地塞米松以介于10mg至20mg之间的剂量施用。

在一些实施方案中，该方法还包括施用具有抗组胺剂、退热剂或糖皮质素中的一种或多种的前驱药。

在一些实施方案中，该前驱药还包含苯海拉明。

在一些实施方案中，苯海拉明以25mg至50mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该前驱药还包含对乙酰氨基酚。

在一些实施方案中，对乙酰氨基酚以650mg至1,000mg的剂量施用。

具体实施方式

定义

本说明书中所引用的所有出版物，包括但不限于专利和专利申请均以引用方式并入本文，如同在本文中完整给出。

应当理解，本文所用的术语只是为了描述具体实施方案，并非旨在进行限制。除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语的含义与本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的含义相同。

虽然与本文所述的那些方法和材料相似或等效的任意方法和材料都可以用于检验本发明的实践中，然而本文中描述示例性材料和方法。在描述和要求保护本发明时，将使用以下术语。

当提供一个列表时，除非另行指出，否则应当理解，该列表中的每个单独元素和该列表的每种组合都是单独的实施方案。例如，作为“A、B或C”呈现的实施方案的列表将被理解为包括实施方案“A”、“B”、“C”、“A或B”、“A或C”、“B或C”或者“A、B或C”。

如本说明书和所附权利要求中所用，除非内容另有明确说明，否则单数形式“一个”、“一种”和“所述”包括复数指代。因此，例如，对“一个细胞”的提及包括两个或更多个细胞的组合等等。

多个列举的要素之间的连接术语“和/或”被理解为涵盖单个选项和组合选项两者。例如，在两个要素由“和/或”连接的情况下，第一种选项是指在没有第二个要素的情况下适用第一个要素。第二种选项是指在没有第一个要素的情况下适用第二个要素。第三种选项是指适合一起使用第一要素和第二要素。这些选项中的任一种均被理解为落在含义内，并且因此满足如本文所用的术语“和/或”的要求。多于一种选项的并行适用性也被理解为落在含义内，并且因此满足术语“和/或”的要求。

过渡术语“包括”、“基本上由……组成”和“由……组成”旨在暗示它们在专利用语中的公认含义；即，(i)“包括”与“包含”、“含有”或“其特征在于”同义，并且是包括端值在内或末端开放的，并且不排除附加的、未列出的要素或方法步骤；(ii)“由……组成”排除权利要求书未指定的任何要素、步骤或成分；以及(iii)“基本上由……组成”将权利要求的范围限制于指定的材料或步骤“以及本质上不影响受权利要求书保护的发明的基本及新颖特征的材料或步骤”。还提供了以短语“包括”(或其等同形式)描述的实施方案，如以“由……组成”和“基本上由……组成”独立描述的那些实施方案。

“约”意指处于如本领域的普通技术人员所确定的特定值的可接受误差范围之内，其将部分取决于该值是如何测量或测定的，即，测量系统的限制。在特定测定、结果或实施方案的上下文中，除非实施方案或说明书其他地方内另有明确说明，否则“约”意指在根据本领域惯例的一个标准偏差之内或多至5％的范围(取较大者)。

术语“抗体”广义上意指并且包括免疫球蛋白分子，具体包括单克隆抗体，包括鼠科动物单克隆抗体、人单克隆抗体、人源化单克隆抗体和嵌合单克隆抗体、全长抗体、抗原结合片段，多特异性抗体(诸如双特异性抗体、三特异性抗体、四特异性抗体等)，二聚、四聚或多聚抗体，单链抗体、结构域抗体，以及包含具有所需特异性的抗原结合位点的免疫球蛋白分子的任何其他经修饰构型。

“特异性结合”、“特异性地结合”或“结合”是指抗体以比针对其他抗原更高的亲和力结合至抗原或抗原内的表位。通常，抗体与抗原或抗原内的表位结合，平衡解离常数(K_D)为约5×10^-8M以下，例如约1×10^-9M以下、约1×10^-10M以下、约1×10^-11M以下、或约1×10^-12M以下，通常K_D比该抗体与非特异性抗原(例如，BSA、酪蛋白)结合的K_D低，最多为后者的1/100。解离常数可使用已知方案来测量。然而，结合至抗原或抗原内的表位的抗体可能对其他相关的抗原具有交叉反应性，例如，对来自其他物种(同源)(诸如人或猴，例如食蟹猕猴(Macaca fascicularis)(cynomolgus，cyno)或黑猩猩(Pan troglodytes)(chimpanzee，chimp)的相同抗原具有交叉反应性。单特异性抗体结合一个抗原或一个表位，而双特异性抗体结合两个不同的抗原或两个不同的表位。

“互补决定区”(CDR)是结合抗原的抗体区。CDR可以使用各种描绘来定义，诸如Kabat(Wu等人，(1970)J Exp Med 132:211-50)(Kabat等人，Sequences of Proteins ofImmunological Interest，第5版，Public Health Service,National Institutes ofHealth,Bethesda,Md.,1991)、Chothia(Chothia等人，(1987)J Mol Biol 196:901-17)、IMGT(Lefranc等人，(2003)Dev Comp Immunol 27:55-77)和AbM(Martin和Thornton(1996)，J Bmol Biol263:800-15)。描述了各种描绘与可变区编号之间的对应关系(参见例如，Lefranc等人，(2003)Dev Comp Immunol 27:55-77；Honegger和Pluckthun,(2001)JMol Biol 309:657-70；International ImMunoGeneTics(IMGT)数据库；Web资源，http://www_imgt_org)。可用程序(诸如UCL Business PLC的abYsis)可用于描绘CDR。除非说明书中另有明确地说明，否则如本文所用，术语“CDR”、“HCDR1”、“HCDR2”、“HCDR3”、“LCDR1”、“LCDR2”和“LCDR3”包括由任何上述方法(Kabat、Chothia、IMGT或AbM)定义的CDR。

“全长抗体”由通过二硫键互连的两条重链(HC)和两条轻链(LC)以及它们的多聚体(例如，IgM)构成。每条重链由重链可变区(VH)和重链恒定区(由结构域CH1、铰链、CH2和CH3构成)构成。每条轻链由轻链可变区(VL)和轻链恒定区(CL)构成。VH区和VL区可进一步细分为超变区，该超变区称为互补决定区(CDR)并间插有框架区(FR)。各个VH和VL由三个CDR和四个FR片段构成，并按以下顺序从氨基端至羧基端排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3和FR4。

“抗原结合片段”是指免疫球蛋白分子的结合抗原的部分。抗原结合片段可以是合成的、可酶促获得的或经遗传工程改造的多肽，并且含有VH、VL、VH和VL、Fab、F(ab')2、Fd和Fv片段、由一个VH结构域或一个VL结构域组成的结构域抗体(dAb)、鲨鱼可变IgNAR结构域、驼峰化VH结构域、由模拟抗体的CDR诸如FR3-CDR3-FR4部分、HCDR1、HCDR2和/或HCDR3以及LCDR1、LCDR2和/或LCDR3的氨基酸残基组成的最小识别单元。VH和VL结构域可经由合成接头连接在一起以形成各种类型的单链抗体设计，其中在VH和VL结构域由单独的单链抗体构建体表达的情况下，VH/VL结构域可在分子内或分子间配对，以形成单价抗原结合位点，诸如单链Fv(scFv)或双价抗体；例如在国际专利公布WO1998/44001号、WO1988/01649号、WO1994/13804号和WO1992/01047号中。

“单克隆抗体”是指从抗体分子的基本上同质群体获得的抗体，即，包含该群体的各个抗体是相同的，可能的熟知改变除外，诸如从抗体重链移除C-末端赖氨酸或者翻译后修饰，诸如氨基酸异构化或脱酰胺、甲硫氨酸氧化，或者天冬酰胺或谷氨酰胺脱酰胺。单克隆抗体通常结合一个抗原表位。双特异性单克隆抗体结合两个不同的抗原表位。单克隆抗体可在抗体群内具有异质糖基化。单克隆抗体可以是单特异性的或多特异性的，诸如双特异性的、单价的、二价的或多价的。

“人源化抗体”是指其中抗原结合位点来源于非人物种且可变区框架来源于人免疫球蛋白序列的抗体。人源化抗体可包含在框架区中特意引入的突变，使得该框架可能不是表达的人免疫球蛋白序列或种系基因序列的精确拷贝。

“人抗体”是指具有重链可变区和轻链可变区的抗体，其中框架和抗原结合位点均来源于人起源的序列。如果抗体包含恒定区或恒定区的一部分，则该恒定区也来源于人起源的序列。“人抗体”的定义中不包括抗原结合位点来源于非人物种的抗体。

如果抗体的可变区由使用人种系免疫球蛋白或重排免疫球蛋白基因的系统获得，则人抗体包含来源于人起源序列的重链可变区或轻链可变区。非限制性示例性系统包括在噬菌体上展示的人免疫球蛋白基因文库，以及转基因非人动物，诸如携带人免疫球蛋白基因座的小鼠或大鼠。在与人种系免疫球蛋白序列或重排免疫球蛋白序列进行比较时，人抗体通常包含由于例如天然存在的体细胞突变、框架或抗原结合位点中的特意取代以及非人动物中克隆或VDJ重组期间引入的取代所引起的氨基酸差异。通常，人抗体在氨基酸序列上与由人种系或重排免疫球蛋白基因编码的氨基酸序列至少80％相同。例如，约80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同。在一些情况下，人抗体可以含有来源于人框架序列分析的共有框架序列(参见例如Knappik等人，J.Mol.Biol.，296:57-86(2000))，或掺入到在噬菌体上展示的人免疫球蛋白基因文库中的合成HCDR3(参见例如Shi等人，J.Mol.Biol.，397:385-96(2010)和国际专利公布WO2009/085462号)。

“双特异性”是指特异性结合两个不同抗原或同一抗原内的两个不同表位的抗体。双特异性抗体可能对其他相关的抗原具有交叉反应性，例如，对来自其他物种(同源)(诸如人或猴，例如食蟹猕猴(cynomolgus,cyno)或黑猩猩)的相同抗原具有交叉反应性，或者可结合两个或更多个不同抗原之间所共享的表位。

“双特异性抗EGFR/c-Met抗体”或“双特异性EGFR/c-Met抗体”是指具有特异性结合EGFR的第一结构域和特异性结合c-Met的第二结构域的双特异性抗体。特异性结合EGFR和c-Met的结构域通常为VH/VL对，并且双特异性抗EGFR/c-Met抗体在结合EGFR和c-Met方面是一价的。

“分离的”是指已从产生分子的系统(诸如重组细胞)的其他组分中基本上分离和/或纯化出来的分子(诸如合成多核苷酸、多肽载体或病毒)的同质群体，以及已经接受至少一个纯化或分离步骤的蛋白质。“分离的”是指基本上不含其他细胞材料和/或化学物质的分子，并且涵盖分离至更高纯度(诸如80％、81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％纯度)的分子。

免疫球蛋白可根据重链恒定结构域氨基酸序列被指定为五种主要种类，即IgA、IgD、IgE、IgG和IgM。IgA和IgG进一步亚分类为同种型IgA1、IgA2、IgG1、IgG2、IgG3和IgG4。基于其恒定域的氨基酸序列，可将任何脊椎物种的抗体轻链指定为两种完全不同的类型即κ和λ中的一种。

如本申请中所用，“低岩藻糖”或“低岩藻糖含量”是指抗体的岩藻糖含量大约介于1％至15％之间。

如本文所用，“正常岩藻糖”或“正常岩藻糖含量”是指抗体的岩藻糖含量大约高于50％，通常大约高于80％或高于85％。

“重组体”是指当将来自不同来源的片段连接以产生重组DNA、抗体或蛋白质时，通过重组手段制备、表达、形成或分离的DNA、抗体和其他蛋白质。

“载剂”是指本发明的抗体与其一起施用的稀释剂、佐剂、赋形剂或媒介物。此类媒剂可以是液体，诸如水和油，包括来源于石油、动物、植物的油或合成的那些油，诸如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。例如，0.4％盐水和0.3％甘氨酸可用于配制双特异性抗EGFR/c-Met抗体。这些溶液是无菌的，并且通常不含颗粒物。它们可通过常规的公知灭菌技术(例如过滤)进行灭菌。对于肠胃外施用，载剂可包括无菌水，并且可添加其他赋形剂以增加溶解度或防腐性。注射用混悬剂或溶液剂还可利用水基载剂连同合适的添加剂来制备。包含其他人类蛋白(例如，人类血清白蛋白)在内的合适的媒介物和制剂在例如“Remington:The Science and Practice of Pharmacy”，第21版，Troy,D.B.编辑，Lipincott Williams and Wilkins，Philadelphia，PA，2006年，第5部分，“PharmaceuticalManufacturing”，第691至1092页(特别参见第958至989页)中有所描述。

“给药方案”是指受试者要服用的治疗剂或药物的量和受试者要服用的治疗剂的次数的频率的信息。“剂量”是指每次要服用的治疗剂或药物的量或用量。

“治疗有效量”是指在所需剂量和时间段有效实现期望的治疗结果的量。治疗有效量可根据以下因素变化：诸如个体的疾病状态、年龄、性别和体重，以及治疗剂或治疗剂组合在个体中引发期望的应答的能力。有效的治疗剂或治疗剂的组合的示例性指标包括例如改善患者的健康。

“共同施用”、“与……一起施用”、“与……组合施用”、“与……组合”等涵盖向单个患者施用所选择的治疗剂或药物，并且旨在包括将这些治疗剂或药物通过相同或不同的施用途径或者在相同或不同的时间施用的治疗方案。

“固定组合”是指包含两种或更多种化合物的单一药物组合物。

“非固定组合”是指单独的药物组合物，其中每一种均包含一种或多种化合物。一种或多种化合物或者单位剂型可以作为独立实体同时、并行或顺序施用，没有特定的间隔时间限制，其中这种施用在受试者体内提供有效水平的两种化合物。

“拮抗剂”或“抑制剂”是指当与细胞蛋白质结合时阻抑由蛋白质的天然配体诱导的至少一种反应或活性的分子。当至少一种反应或活性被抑制的程度比不存在拮抗剂(例如，阴性对照)时抑制的至少一种反应或活性至少多约20％、30％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或100％时，或者当与不存在拮抗剂时的抑制相比，抑制具有统计意义上的显著性时，分子为拮抗剂。

疾病或病症(诸如癌症)的“治疗”是指实现以下结果中的一种或多种：降低病症的严重程度和/或缩短病症的持续时间、抑制所治疗病症的特征性症状的恶化、限制或防止先前患有病症的受试者中该病症的复发，或者限制或防止先前有病症的症状的受试者中症状的复发。

“预防”疾病或病症意指预防受试者中出现病症。

“响应”、“响应性”或“可能响应”是指任何类型的改善或阳性应答，诸如一种或多种症状减轻或改善、疾病程度减弱、疾病状态稳定(即，未恶化)、预防疾病传播、疾病进展延迟或减慢、疾病状态改善或缓和，以及缓解(不论是部分缓解还是全部缓解)，不论是可检测的还是不可检测的。

“受试者”包括任何人或非人动物。“非人动物”包括所有脊椎动物，例如哺乳动物和非哺乳动物，诸如非人灵长类、绵羊、狗、猫、马、牛、鸡、两栖动物、爬行动物等。术语“受试者”和“患者”在本文中可互换使用。

“癌症”是指细胞的异常生长，这些细胞倾向于以不受控制的方式增殖，并且在一些情况下，会转移(扩散)到患者身体的其他区域。

“表达EGFR或c-Met的癌症”是指具有可检测的EGFR或c-Met表达，或者具有EGFR或c-Met突变或扩增的癌症。EGFR或c-Met表达、扩增和突变状态可以使用已知方法检测，诸如测序、下一代测序、荧光原位杂交、免疫组织化学、流式细胞术或蛋白质印迹。

“表皮生长因子受体”或“EGFR”是指具有以GenBank登录号NP_005219示出的氨基酸序列的人类EGFR(也称为HER1或ErbB1(Ullrich等人，Nature 309:418-425,1984))，以及其天然存在的变体。

如本文所用，“肝细胞生长因子受体”或“c-Met”是指具有以GenBank登录号NP_001120972示出的氨基酸序列的人类c-Met及其天然变体。

“新诊断”是指已被诊断患有表达EGFR或c-Met的癌症但尚未接受CRC(例如，mCRC)治疗的受试者。

“难治性”是指对治疗无应答的疾病。难治性疾病可在治疗之前或治疗开始时对治疗具有耐药性，或者难治性疾病可在治疗期间变得耐药。

“复发”是指在先前用治疗剂治疗之后改善一段时间之后疾病或疾病的迹象和症状的再现。

“诊断”是指确定受试者是否患有给定疾病或病症，或者是否可能在将来发展成给定疾病或病症，或者是否可能响应对既往诊断的疾病或病症的治疗(即，根据响应治疗的可能性对患者群体进行分层)的方法。诊断通常由医师基于待诊断的疾病的一般指南或指示受试者可能响应特定治疗的其他标准来执行。

“生物样品”是指从受试者分离的类似流体、细胞或组织的采集物，以及存在于受试者体内的流体、细胞或组织。示例性样本是生物流体，诸如血液、血清和浆膜液、血浆、淋巴液、尿液、唾液、囊液、泪液、排泄物、痰、分泌组织和器官的粘膜分泌物、阴道分泌物、腹水、胸膜液、心包液、腹膜液、腹腔液和其他体腔液、由支气管灌洗液收集的流体、滑液、与受试者或生物来源接触的液体溶液(例如细胞和器官培养基(包括细胞或器官条件培养基)、灌洗液等)、组织活检物、肿瘤组织活检物、肿瘤组织样本、细针抽吸物、手术切除组织、器官培养物或细胞培养物。

本公开的方法

在一个方面，本公开提供了一种减少使用抗表皮生长因子受体(EGFR)/肝细胞生长因子受体(c-Met)抗体治疗的受试者的输注相关反应(IRR)的发生率或严重程度的方法，该方法包括施用甲氨蝶呤、孟鲁司特或地塞米松中的一种或多种。

在一个方面，本公开提供了一种用于减少使用联合治疗的受试者的输注相关反应(IRR)的发生率或严重程度的方法，该联合治疗包含抗表皮生长因子受体(EGFR)/肝细胞生长因子受体(c-Met)抗体，该方法包括施用甲氨蝶呤、孟鲁司特或地塞米松中的一种或多种。

减少IRR的方法

本公开提供了一种用于减少使用抗体治疗的受试者的输注相关反应(IRR)的发生率或严重程度的方法，该抗体特异性结合抗表皮生长因子受体(EGFR)/肝细胞生长因子受体(c-Met)。在一个实施方案中，受试者使用包含特异性结合EGFR和/或c-Met的抗体的联合治疗。在一个实施方案中，受试者使用包含埃万妥单抗的联合治疗。

肠胃外施用的EGFR/c-Met双特异性抗体可在患者或受试者的引起不良反应或不良事件(AE)，特别是输注相关反应(IRR)。如在RYBREVANT(amivantamab)的美国处方信息(www.janssenlabels.com/package-insert/product-monograph/prescribing-information/RYBREVANT-pi.pdf)中所报道的，在CHRYSALIS研究中，302名患有局部晚期或转移性非小细胞肺癌(NSCLC)的患者以II期推荐剂量(RP2D)作为单药接受了IV埃万妥单抗治疗，其中IRR是最常发生的不良反应之一，发生率为66％。

不良反应或不良事件(AE)是指正在施用或已经施用EGFR/c-Met双特异性抗体的患者或受试者发生的任何不良医学事件。在一些实施方案中，AE是IRR。在一些实施方案中，IRR是指轻度IRR，表现为但不限于在输注期间或输注之后出现发冷、恶心、呼吸困难、潮红、胸部不适、低血压、呕吐、心动过速、发烧或任何其他症状。在一些实施方案中，IRR是指在引入新的蛋白质治疗输注(诸如EGFR/c-Met双特异性抗体)时出现的全身性IRR，包括严重反应。在一些实施方案中，EGFR/c-Met双特异性抗体是埃万妥单抗。在一些实施方案中，根据美国国家癌症研究所不良事件通用术语标准(NCI-CTCAE)5.0版对IRR的严重程度进行分级。严重程度等级范围为1级(轻度)至5级(死亡)。1级＝轻度，2级＝中度，3级＝重度，4级＝危及生命，5级＝与不良事件相关的死亡。在一些实施方案中，在第1周期第1天开始至使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗结束后30天结束的任何时间评估患者或受试者中是否存在IRR。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗的第1周期第1天评估患者或受试者是否存在IRR。在一些实施方案中，在开始使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗后最多至3个月的时间评估患者或受试者是否存在IRR。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗结束后1天至30天之间的任何时间评估患者或受试者是否存在IRR。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗结束后1天至5天之间的任何时间评估患者或受试者是否存在IRR。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗结束后1天至10天之间的任何时间评估患者或受试者是否存在IRR。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗结束后1天至15天之间的任何时间评估患者或受试者是否存在IRR。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗结束后1天至20天之间的任何时间评估患者或受试者是否存在IRR。

在一些实施方案中，减少发生率或严重程度的方法包括施用甲氨蝶呤、孟鲁司特或地塞米松中的一种或多种。在一些实施方案中，减少IRR的发生率或严重程度的方法包括施用甲氨蝶呤。在一些实施方案中，减少IRR的发生率或严重程度的方法包括施用孟鲁司特。在一些实施方案中，减少IRR的发生率或严重程度的方法包括施用地塞米松。

甲氨蝶呤

甲氨蝶呤(MTX)[N-[4-[[(2,4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]甲氨基]苯甲酰基]-L谷氨酸]是一种经FDA批准用于治疗类风湿性关节炎的叶酸拮抗剂。MTX是一种抗代谢药，通常用于化学疗法和自身免疫性疾病中的免疫抑制剂。甲氨蝶呤抑制二氢叶酸还原酶，干扰DNA合成、修复和细胞复制。增殖活跃的组织诸如恶性细胞、骨髓、胎儿细胞、口腔黏膜和肠粘膜以及膀胱细胞通常对甲氨蝶呤的这种作用更敏感。

在一些实施方案中，甲氨蝶呤皮下(SC)施用。在一些实施方案中，甲氨蝶呤口服施用。在一些实施方案中，甲氨蝶呤肌内施用。在一些实施方案中，甲氨蝶呤在静脉内施用。

在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前数天施用甲氨蝶呤。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前1天至7天施用甲氨蝶呤。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前1天至5天施用甲氨蝶呤。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前1天至6天施用甲氨蝶呤。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前1天至4天施用甲氨蝶呤。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前1天至3天施用甲氨蝶呤。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前1天至2天施用甲氨蝶呤。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前3天至7天施用甲氨蝶呤。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前3天至6天施用甲氨蝶呤。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前3天至5天施用甲氨蝶呤。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前2天至7天施用甲氨蝶呤。

在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前1天施用甲氨蝶呤。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前2天施用甲氨蝶呤。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前3天施用甲氨蝶呤。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前4天施用甲氨蝶呤。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前5天施用甲氨蝶呤。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前6天施用甲氨蝶呤。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前7天施用甲氨蝶呤。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前8天施用甲氨蝶呤。

在一些实施方案中，甲氨蝶呤以12mg至30mg的剂量施用。在一些实施方案中，甲氨蝶呤以20mg至30mg的总剂量施用。在一些实施方案中，甲氨蝶呤以25mg的总剂量施用。在一些实施方案中，甲氨蝶呤以20mg至30mg的单剂量施用。在一些实施方案中，甲氨蝶呤以25mg的单剂量施用。在一些实施方案中，甲氨蝶呤以20mg的单剂量施用。在一些实施方案中，甲氨蝶呤以21mg的单剂量施用。在一些实施方案中，甲氨蝶呤以22mg的单剂量施用。在一些实施方案中，甲氨蝶呤以23mg的单剂量施用。在一些实施方案中，甲氨蝶呤以24mg的单剂量施用。在一些实施方案中，甲氨蝶呤以26mg的单剂量施用。在一些实施方案中，甲氨蝶呤以27mg的单剂量施用。在一些实施方案中，甲氨蝶呤以28mg的单剂量施用。在一些实施方案中，甲氨蝶呤以29mg的单剂量施用。在一些实施方案中，甲氨蝶呤以30mg的单剂量施用。

在一些实施方案中，甲氨蝶呤以单剂量施用。在一些实施方案中，甲氨蝶呤以两个剂量施用。在一些实施方案中，甲氨蝶呤以两个或更多个剂量施用。

孟鲁司特

孟鲁司特是一种口服药物，经FDA批准用于治疗慢性哮喘和预防以及防止运动诱发的支气管收缩。其也被批准用于减轻季节性和常年性过敏性鼻炎的症状。孟鲁司特抑制肥大细胞介导的白三烯释放，可用于减轻炎症和支气管收缩。孟鲁司特是一种高度选择性的白三烯受体拮抗剂，其以高亲和力与白三烯结合，白三烯由各种类型的细胞(包括肥大细胞)分泌，并且参与可引起哮喘和过敏性鼻炎的体征和症状的炎性过程。白三烯受体存在于气道细胞中，诸如巨噬细胞和平滑肌细胞中。当与白三烯受体结合时，孟鲁司特会抑制白三烯的生理效应(诸如气道水肿、平滑肌收缩和正常细胞活性受损)。这作为孟鲁司特潜在地减少与EGFR/c-Met双特异性抗体IRR相关联的症状学(例如呼吸困难)的基本原理。

在一些实施方案中，孟鲁司特口服施用。在一些实施方案中，孟鲁司特注射施用。在一些实施方案中，孟鲁司特皮下施用。在一些实施方案中，孟鲁司特在静脉内施用。在一些实施方案中，孟鲁司特肌内施用。

在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前施用孟鲁司特。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前施用孟鲁司特1-7次。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前施用孟鲁司特1次。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前施用孟鲁司特2次。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前施用孟鲁司特3次。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前施用孟鲁司特4次。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前施用孟鲁司特5次。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前施用孟鲁司特6次。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前施用孟鲁司特7次。

在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前5天开始施用孟鲁司特。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前4天开始施用孟鲁司特。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前3天开始施用孟鲁司特。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前2天开始施用孟鲁司特。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前2天开始施用孟鲁司特。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前4天开始施用孟鲁司特，其中在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗的第一天进行孟鲁司特的末次施用。

在一些实施方案中，孟鲁司特以4mg至20mg的剂量施用。在一些实施方案中，孟鲁司特以5mg至10mg的剂量施用。在一些实施方案中，孟鲁司特以4mg的剂量施用。在一些实施方案中，孟鲁司特以5mg的剂量施用。在一些实施方案中，孟鲁司特以8mg的剂量施用。在一些实施方案中，孟鲁司特以10mg的剂量施用。在一些实施方案中，孟鲁司特以15mg的剂量施用。在一些实施方案中，孟鲁司特以16mg的剂量施用。在一些实施方案中，孟鲁司特以20mg的剂量施用。

地塞米松

地塞米松是一种合成肾上腺皮质类固醇，有口服和IV两种剂型，经FDA批准用于治疗过敏状态。IV地塞米松(10mg)是在所有患者接受IV埃万妥单抗之前施用的标准前驱药。本公开提供了一种增强的类固醇预载以减少EGFR/c-Met双特异性抗体IRR的发生率的新方法。

在一些实施方案中，地塞米松口服施用。在一些实施方案中，地塞米松皮下施用。在一些实施方案中，地塞米松在静脉内施用。在一些实施方案中，地塞米松肌内施用。

在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前施用地塞米松。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前2天施用地塞米松。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前1天施用地塞米松。在一些实施方案中，在使用EGFR/c-Met双特异性抗体治疗之前3天或更多天施用地塞米松。

在一些实施方案中，地塞米松每天施用一次。在一些实施方案中，地塞米松每天施用两次。

在一些实施方案中，地塞米松以2mg至10mg的剂量施用。在一些实施方案中，地塞米松以4mg至8mg的剂量施用。在一些实施方案中，地塞米松以4mg的剂量施用。在一些实施方案中，地塞米松以8mg的剂量施用。

在一些实施方案中，除了甲氨蝶呤、孟鲁司特或口服地塞米松之外，还施用IV地塞米松。

在一些实施方案中，IV地塞米松以10mg至20mg的剂量施用。在一些实施方案中，IV地塞米松以10mg的剂量施用。在一些实施方案中，IV地塞米松以15mg的剂量施用。在一些实施方案中，IV地塞米松以20mg的剂量施用。

在一些实施方案中，在使用IV EGFR/c-Met双特异性抗体之前45分钟至60分钟施用IV地塞米松。在一些实施方案中，在使用IV EGFR/c-Met双特异性抗体之前，在同一天施用IV地塞米松与IV EGFR/c-Met双特异性抗体。在一些实施方案中，在施用IV EGFR/c-Met双特异性抗体的第一天和第二天施用IV地塞米松。

患者群体

在一些实施方案中，使用特异性结合EGFR和/或c-Met的抗体治疗的受试者已被诊断患有癌症。在一些实施方案中，癌症是实体瘤。在一些实施方案中，实体瘤是肺癌、非小细胞肺癌或小细胞肺癌。在一些实施方案中，癌症是非小细胞肺癌(NSCLC)。在一些实施方案中，实体瘤是结肠直肠癌(CRC)。在一些实施方案中，实体瘤是肝癌。在一些实施方案中，实体瘤是肝细胞癌。在一些实施方案中，实体瘤是胃癌。在一些实施方案中，实体瘤是食道癌。在一些实施方案中，实体瘤是头颈癌。在一些实施方案中，实体瘤是头颈部的鳞状细胞癌。

在一些实施方案中，癌症是上皮细胞癌。在一些实施方案中，癌症是乳腺癌。在一些实施方案中，癌症是卵巢癌。在一些实施方案中，癌症是肺癌。在一些实施方案中，癌症是肺腺癌。在一些实施方案中，癌症是鳞状细胞肺癌。在一些实施方案中，癌症是小细胞肺癌。在一些实施方案中，癌症是结直肠癌。在一些实施方案中，癌症是肛门癌。在一些实施方案中，癌症是前列腺癌。在一些实施方案中，癌症是肾癌。在一些实施方案中，癌症是膀胱癌。在一些实施方案中，癌症是头颈癌。在一些实施方案中，癌症是咽癌。在一些实施方案中，癌症是鼻癌。在一些实施方案中，癌症是胰腺癌。在一些实施方案中，癌症是皮肤癌。在一些实施方案中，癌症是口腔癌。在一些实施方案中，癌症是舌癌。在一些实施方案中，癌症是食道癌。在一些实施方案中，癌症是阴道癌。在一些实施方案中，癌症是宫颈癌。在一些实施方案中，癌症是脾癌。在一些实施方案中，癌症是睾丸癌。在一些实施方案中，癌症是胃癌。在一些实施方案中，癌症是胸腺癌。在一些实施方案中，癌症是结肠癌。在一些实施方案中，癌症是甲状腺癌。在一些实施方案中，癌症是肝癌。在一些实施方案中，癌症是HCC。在一些实施方案中，癌症是PRCC。

在一些实施方案中，癌症是表达EGFR或c-Met的癌症。

在一些实施方案中，癌症是表达EGFR和c-Met的癌症。

在一些实施方案中，癌症是表达EGFR的癌症。

在一些实施方案中，癌症是表达c-Met的癌症。

在一些实施方案中，表达EGFR或c-Met的癌症与野生型EGFR、EGFR突变、EGFR基因扩增、循环HGF的水平升高、野生型c-Met、c-Met突变、c-Met基因扩增或突变体KRAS相关联。EGFR突变可以是激活突变，诸如外显子19缺失或L858R突变。在一些实施方案中，EGFR突变是EGFR外显子19突变。在一些实施方案中，EGFR突变是L858R突变。

可与癌症相关联的示例性EGFR突变诸如EGFR激活突变包括引起EGFR的至少一种生物活性增加(诸如酪氨酸激酶活性升高、受体同源二聚体和异源二聚体形成、配体结合增强等)的点突变、缺失突变、插入突变、倒置或基因扩增。突变可以位于EGFR基因或与EGFR基因相关联的调控区域的任何部分中，并且包括外显子18、19、20或21的突变。EGFR激活突变的其他示例在本领域中是已知的(参见例如美国专利公布号US 2005/0272083中所述)。关于EGFR和其他ErbB受体(包括受体同源二聚体和异源二聚体、受体配体、自磷酸化位点和参与ErbB介导的信号传导的信号传导分子)的信息在本领域中是已知的(参见例如Hynes andLane,Nature Reviews Cancer 5:341-354,2005)。

在一些实施方案中，EGFR突变是E709K、L718Q、L718V、G719A、G719X、G724X、G724S、I744T、E746K、L747S、E749Q、A750P、A755V、V765M、C775Y、T790M、L792H、L792V、G796S、G796R、G796C、C797S、T854I、L858P、L858R、L861X、delE746-A750、delE746_T751InsKV、delE746_A750InsHS、delE746_T751InsFPT、delE746_T751InsL、delE746_S752InsIP、delE746_P753InsMS、delE746_T751InsA、delE746_T751InsAPT、delE746_T751InsVA、delE746_S752InsV、delE746_P753InsVS、delE746_K754InsGG、delE746_E749、delE746_E749InsP、delL747_E749、delL747_A750InsP、delL747_T751InsP、delL747_T751InsN、delL747_S752InsPT、delL747_P753InsNS、delL747_S752InsPI、delL747_S752、delL747_P753InsS、delL747_K754、delL747_T751InsS、delL747_T751、delL747_P753InsS、delA750_I759InsPT、delT751_I759InsT、delS752_I759、delT751_I759InsN、delT751_D761InsNLY、delS752_I759、delR748-P753、delL747-P753insS、delL747-T751、M766_A767InsA、S768_V769InsSVA、P772_H773InsNS、D761_E762InsX、A763_Y764InsX、Y764_Y765 InsX、M766_A767InsX、A767_V768 InsX、S768_V769 InsX、V769_D770 InsX、D770_N771 InsX、N771_P772 InsX、P772_H773 InsX、H773_V774 InsX、V774_C775 InsX、EGFR外显子20中的一个或多个缺失、或EGFR外显子20中的一个或多个插入、EGFR外显子19中的一个或多个缺失、或EGFR外显子19中的一个或多个插入或它们的任何组合，其中X是指任何天然存在的氨基酸，并且可以是1到7个氨基酸长。在一些实施方案中，EGFR突变是L858R。突变的命名是熟知的。

在一些实施方案中，EGFR突变是外显子19或L858R的一个或多个缺失或它们的任何组合。示例性外显子19缺失是delE746-A750、delE746_T751InsKV、delE746_A750InsHS、delE746_T751InsFPT、delE746_T751InsL、delE746_S752InsIP、delE746_P753InsMS、delE746_T751InsA、delE746_T751InsAPT、delE746_T751InsVA、delE746_S752InsV、delE746_P753InsVS、delE746_K754InsGG、delE746_E749、delE746_E749InsP、delL747_E749、delL747_A750InsP、delL747_T751InsP、delL747_T751InsN、delL747_S752InsPT、delL747_P753InsNS、delL747_S752InsPI、delL747_S752、delL747_P753InsS、delL747_K754、delL747_T751InsS、delL747_T751、delL747_P753InsS、delA750_I759InsPT、delT751_I759InsT、delS752_I759、delT751_I759InsN、delT751_D761InsNLY、delS752_I759、delR748-P753和delL747-P753insS、delL747-T751。

示例性c-Met突变包括引起c-Met蛋白的至少一种生物活性增加(诸如酪氨酸激酶活性升高、受体同源二聚体和异源二聚体形成、配体结合增强等)的点突变、缺失突变、插入突变、倒置或基因扩增。突变可以位于c-Met基因或与该基因相关联的调控区的任何部分中，诸如突变在c-Met的激酶结构域中。示例性c-Met突变是在残基位置N375、V13、V923、R175、V136、L229、S323、R988、S1058/T1010和E168处的突变或者外显子14跳过突变。在一些实施方案中，c-Met突变是c-Met外显子14跳过突变。

用于检测EGFR和c-Met突变或基因扩增的方法是熟知的。

在一些实施方案中，受试者在施用包含EGFR/c-Met双特异性抗体的疗法之前经诊断患有EGFR突变。

在一些实施方案中，受试者患有新诊断的癌症。在一些实施方案中，受试者患有新诊断的表达EGFR或c-Met的癌症。在一些实施方案中，受试者患有新诊断的表达EGFR和c-Met的癌症。在一些实施方案中，受试者患有新诊断的表达EGFR的癌症。在一些实施方案中，受试者患有新诊断的表达c-Met的癌症。

在一些实施方案中，患有新诊断的癌症的受试者具有一个或多个EGFR外显子20突变。在一些实施方案中，患有新诊断的表达EGFR或c-Met的癌症的受试者具有一个或多个EGFR外显子20突变。外显子20突变(一个或多个氨基酸的插入)通常对EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)具有抗性(参见例如国际专利公布号WO 2018/094225)。示例性外显子20突变包括M766_A767InsA、S768_V769InsSVA、P772_H773InsNS、D761_E762InsX、A763_Y764InsX、Y764_Y765 InsX、M766_A767InsX、A767_V768 InsX、S768_V769 InsX、V769_D770 InsX、D770_N771 InsX、N771_P772 InsX、P772_H773 InsX、H773_V774 InsX和V774_C775 InsX，其中X是一个至七个氨基酸。

在一些实施方案中，受试者未接受过EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗。

在一些实施方案中，受试者对用第一代EGFR TKI治疗具有抗性或会复发。

在一些实施方案中，第一代EGFR TKI是埃罗替尼或吉非替尼。

在一些实施方案中，受试者对用第二代EGFR TKI治疗具有抗性或会复发。

在一些实施方案中，第二代EGFR TKI是阿法替尼。

在一些实施方案中，受试者对用第三代EGFR TKI治疗具有抗性或会复发。

在一些实施方案中，第三代EGFR TKI是奥希替尼。

在一些实施方案中，受试者对用既往抗癌疗法进行的治疗具有抗性或已获得对用既往抗癌疗法进行的治疗的抗性。

在一些实施方案中，既往抗癌疗法是化学疗法、靶向抗癌疗法或激酶抑制剂。在一些实施方案中，既往抗癌疗法是双重铂类化学疗法。

在一些实施方案中，TKI是EGFR、c-Met、HER2、HER3、HER4、VEGFR或AXL的抑制剂。

在一些实施方案中，TKI是莫博替尼、埃罗替尼、吉非替尼、拉帕替尼、凡德他尼、阿法替尼、奥希替尼、波齐替尼、克里替尼、卡博替尼、卡马替尼、阿昔替尼、乐伐替尼、尼达尼布、瑞格非尼、帕唑帕尼、索拉非尼或舒尼替尼。

在一些实施方案中，受试者对EGFR抑制剂具有耐药性或已获得对EGFR抑制剂的耐药性。癌症可获得其抗性的示例性EGFR抑制剂是抗EGFR抗体西妥昔单抗帕尼单抗马妥珠单抗、尼妥珠单抗、小分子EGFR抑制剂埃罗替尼吉非替尼EKB-569(培利替尼，不可逆EGFRTKI)、泛ErbB和其他受体酪氨酸激酶抑制剂、拉帕替尼(EGFR和HER2抑制剂)、培利替尼(EGFR和HER2抑制剂)、凡德他尼(ZD6474、ZACTIMA^TM、EGFR、VEGFR2和RET TKI)、PF00299804(达克替尼、不可逆泛ErbB TKI)、CI-1033(不可逆泛erbB TKI)、阿法替尼(BIBW2992、不可逆泛ErbB TKI)、AV-412(双重EGFR和ErbB2抑制剂)、EXEL-7647(EGFR、ErbB2、GEVGR和EphB4抑制剂)、CO-1686(不可逆突变体选择性EGFR TKI)、AZD9291(不可逆突变体选择性EGFR TKI)和HKI-272(来那替尼，不可逆EGFR/ErbB2抑制剂)。

抗EGFR/c-Met抗体

在一些实施方案中，抗EGFR/c-Met抗体是双特异性抗体。在某些实施方案中，该抗体是分离抗体。在具体实施方案中，该抗体是分离的双特异性抗体。

在一些实施方案中，该抗体(例如，双特异性抗体)包含特异性结合EGFR的第一结构域和特异性结合c-Met的第二结构域。

EGFR结合臂

在一些实施方案中，特异性结合EGFR的第一结构域包含：

a)分别为SEQ ID NO:1、2和3的重链互补决定区1(HCDR1)、HCDR2和HCDR3氨基酸序列；和/或

b)分别为SEQ ID NO:4、5和6的轻链互补决定区1(LCDR1)、LCDR2和LCDR3氨基酸序列。

在某些实施方案中，特异性结合EGFR的第一结构域包含：

a)分别为SEQ ID NO:1、2和3的HCDR1、HCDR2和HCDR3氨基酸序列；以及

b)分别为SEQ ID NO:4、5和6的LCDR1、LCDR2和LCDR3氨基酸序列。

HCDR1：TYGMH(SEQ ID NO:1)

HCDR2：VIWDDGSYKYYGDSVKG(SEQ ID NO:2)

HCDR3：DGITMVRGVMKDYFDY(SEQ ID NO:3)

LCDR1：RASQDISSALV(SEQ ID NO:4)

LCDR2：DASSLES(SEQ ID NO:5)

LCDR3：QQFNSYPLT(SEQ ID NO:6)

在一些实施方案中，第一结构域包含与SEQ ID NO:13至少90％相同，例如，与SEQID NO:13约91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、99.1％、99.2％、99.3％、99.4％、99.5％、99.6％、99.7％、99.8％或99.9％相同的重链可变区(VH)氨基酸序列。在一些实施方案中，序列同一性是约90％-99.9％、90％-99.8％、92％-99.8％、92％-99.6％、94％-99.6％、94％-99.5％、95％-99.5％、95％-99.4％、96％-99.4％、96％-99.2％、97％-99.2％或97％-99％。在具体实施方案中，第一结构域包含SEQ ID NO:13的VH。

在某些实施方案中，第一结构域包含与SEQ ID NO:14至少90％相同，例如，与SEQID NO:14约91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、99.1％、99.2％、99.3％、99.4％、99.5％、99.6％、99.7％、99.8％或99.9％相同的轻链可变区(VL)氨基酸序列。在一些实施方案中，序列同一性是约90％-99.9％、90％-99.8％、92％-99.8％、92％-99.6％、94％-99.6％、94％-99.5％、95％-99.5％、95％-99.4％、96％-99.4％、96％-99.2％、97％-99.2％或97％-99％。在具体实施方案中，第一结构域包含SEQ ID NO:14的VL。

如本文所用，术语“相同”或“具有序列同一性”是指当比对序列以实现最大同一性水平时，两个氨基酸序列在相同位置具有相同残基的程度，以百分比表示。对于序列比对和比较，通常将一个序列指定为参考序列，将测试序列与其进行比较。参考序列与测试序列之间的序列同一性表示为在参考序列和测试序列比对以实现最大同一性水平时，整个长度的参考序列上参考序列和测试序列共享相同氨基酸的位置百分比。举例来说，当比对以实现最大同一性水平时，在整个长度的参考序列上的70％相同位置处测试序列具有相同氨基酸残基时，该两个序列被认为具有70％序列同一性。

在一些实施方案中，第一结构域包含：

a)与SEQ ID NO:13至少90％相同的VH氨基酸序列；和/或

b)与SEQ ID NO:14至少90％相同的VL氨基酸序列。

在一些实施方案中，第一结构域包含：

a)与SEQ ID NO:13至少90％相同的VH氨基酸序列；和

b)与SEQ ID NO:14至少90％相同的VL氨基酸序列。

在一些实施方案中，第一结构域包含：

a)SEQ ID NO:13的VH；和/或

b)SEQ ID NO:14的VL。

在具体实施方案中，第一结构域包含：

a)SEQ ID NO:13的VH；和

b)SEQ ID NO:14的VL。

VH：QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSTYGMHWVRQAPGKGLEWV AVIWDDGSYKYYGDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYC ARDGITMVRGVMKDYFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:13)

VL：AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISSALVWYQQKPGKAPKLLIYDA SSLESGVPSRFSGSESGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFNSYPLTFGGGTK VEIK(SEQ ID NO:14)

在一些实施方案中，第一结构域包含与SEQ ID NO:17至少80％相同，例如，与SEQID NO:17约81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、99.1％、99.2％、99.3％、99.4％、99.5％、99.6％、99.7％、99.8％或99.9％相同的第一重链(HC1)氨基酸序列。在某些实施方案中，序列同一性是约80％-99.9％、80％-99.8％、85％-99.8％、85％-99.6％、90％-99.6％、90％-99.5％、95％-99.5％、95％-99.4％、96％-99.4％、96％-99.2％、97％-99.2％或97％-99％。在具体实施方案中，第一结构域包含SEQ ID NO:17的HC1氨基酸序列。

在一些实施方案中，第一结构域包含与SEQ ID NO:18至少80％相同，例如，与SEQID NO:18约81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、99.1％、99.2％、99.3％、99.4％、99.5％、99.6％、99.7％、99.8％或99.9％相同的第一轻链(LC1)氨基酸序列。在某些实施方案中，序列同一性是约80％-99.9％、80％-99.8％、85％-99.8％、85％-99.6％、90％-99.6％、90％-99.5％、95％-99.5％、95％-99.4％、96％-99.4％、96％-99.2％、97％-99.2％或97％-99％。在具体实施方案中，第一结构域包含SEQ ID NO:18的LC1氨基酸序列。

在一些实施方案中，第一结构域包含：

a)与SEQ ID NO:17至少80％相同的HC1氨基酸序列；和/或

b)与SEQ ID NO:18至少80％相同的LC1氨基酸序列。

在一些实施方案中，第一结构域包含：

a)与SEQ ID NO:17至少80％相同的HC1氨基酸序列；和

b)与SEQ ID NO:18至少80％相同的LC1氨基酸序列。

在一些实施方案中，第一结构域包含：

a)SEQ ID NO:17的HC1；和/或

b)SEQ ID NO:18的LC1。

在一些实施方案中，第一结构域包含：

a)SEQ ID NO:17的HC1；和

b)SEQ ID NO:18的LC1。

HC1：QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSTYGMHWVRQAPGKGLEWVAVIWDDGSYKYYGDSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARDGITMVRGVMKDYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFLLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:17)

LC1：AIQLTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQDISSALVWYQQKPGKAPKLLIYDASSLESGVPSRFSGSESGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQFNSYPLTFGGGTKVEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ ID NO:18)

c-Met结合臂

在某些实施方案中，特异性结合c-Met的第二结构域包含：

a)分别为SEQ ID NO:7、8和9的HCDR1、HCDR2和HCDR3氨基酸序列；和/或

b)分别为SEQ ID NO:10、11和12的LCDR1、LCDR2和LCDR3氨基酸序列。

在某些实施方案中，特异性结合c-Met的第二结构域包含：

a)分别为SEQ ID NO:7、8和9的HCDR1、HCDR2和HCDR3氨基酸序列；以及

b)分别为SEQ ID NO:10、11和12的LCDR1、LCDR2和LCDR3氨基酸序列。

HCDR1：SYGIS(SEQ ID NO:7)

HCDR2：WISAYNGYTNYAQKLQG(SEQ ID NO:8)

HCDR3：DLRGTNYFDY(SEQ ID NO:9)

LCDR1：RASQGISNWLA(SEQ ID NO:10)

LCDR2：AASSLLS(SEQ ID NO:11)

LCDR3：QQANSFPIT(SEQ ID NO:12)

在一些实施方案中，第二结构域包含与SEQ ID NO:15至少90％相同，例如，与SEQID NO:15约91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、99.1％、99.2％、99.3％、99.4％、99.5％、99.6％、99.7％、99.8％或99.9％相同的VH氨基酸序列。在一些实施方案中，序列同一性是约90％-99.9％、90％-99.8％、92％-99.8％、92％-99.6％、94％-99.6％、94％-99.5％、95％-99.5％、95％-99.4％、96％-99.4％、96％-99.2％、97％-99.2％或97％-99％。在具体实施方案中，第二结构域包含SEQ ID NO:15的VH。

在某些实施方案中，第二结构域包含与SEQ ID NO:16至少90％相同，例如，与SEQID NO:16约91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、99.1％、99.2％、99.3％、99.4％、99.5％、99.6％、99.7％、99.8％或99.9％相同的VL氨基酸序列。在一些实施方案中，序列同一性是约90％-99.9％、90％-99.8％、92％-99.8％、92％-99.6％、94％-99.6％、94％-99.5％、95％-99.5％、95％-99.4％、96％-99.4％、96％-99.2％、97％-99.2％或97％-99％。在具体实施方案中，第二结构域包含SEQ ID NO:16的VL。

在一些实施方案中，第二结构域包含：

a)与SEQ ID NO:15至少90％相同的VH氨基酸序列；和/或

b)与SEQ ID NO:16至少90％相同的VL氨基酸序列。

在一些实施方案中，第二结构域包含：

a)与SEQ ID NO:15至少90％相同的VH氨基酸序列；和

b)与SEQ ID NO:16至少90％相同的VL氨基酸序列。

在一些实施方案中，第二结构域包含：

a)SEQ ID NO:15的VH；和/或

b)SEQ ID NO:16的VL。

在具体实施方案中，第二结构域包含：

a)SEQ ID NO:15的VH；和

b)SEQ ID NO:16的VL。

VH：QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCETSGYTFTSYGISWVRQAPGHGLEWM GWISAYNGYTNYAQKLQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYC ARDLRGTNYFDYWGQGTLVTVSS(SEQ ID NO:15)

VL：DIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISNWLAWFQHKPGKAPKLLIYA ASSLLSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQANSFPITFGQGT RLEIK(SEQ ID NO:16)

在一些实施方案中，第二结构域包含与SEQ ID NO:19至少80％相同，例如，与SEQID NO:19约81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、99.1％、99.2％、99.3％、99.4％、99.5％、99.6％、99.7％、99.8％或99.9％相同的第二重链(HC2)氨基酸序列。在某些实施方案中，序列同一性是约80％-99.9％、80％-99.8％、85％-99.8％、85％-99.6％、90％-99.6％、90％-99.5％、95％-99.5％、95％-99.4％、96％-99.4％、96％-99.2％、97％-99.2％或97％-99％。在具体实施方案中，第二结构域包含SEQ ID NO:19的HC2氨基酸序列。

在一些实施方案中，第二结构域包含与SEQ ID NO:20至少80％相同，例如，与SEQID NO:20约81％、82％、83％、84％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、99.1％、99.2％、99.3％、99.4％、99.5％、99.6％、99.7％、99.8％或99.9％相同的第二轻链(LC2)氨基酸序列。在某些实施方案中，序列同一性是约80％-99.9％、80％-99.8％、85％-99.8％、85％-99.6％、90％-99.6％、90％-99.5％、95％-99.5％、95％-99.4％、96％-99.4％、96％-99.2％、97％-99.2％或97％-99％。在具体实施方案中，第二结构域包含SEQ ID NO:20的LC2氨基酸序列。

在一些实施方案中，第二结构域包含：

a)与SEQ ID NO:19至少80％相同的HC2氨基酸序列；和/或

b)与SEQ ID NO:20至少80％相同的LC2氨基酸序列。

在一些实施方案中，第二结构域包含：

a)与SEQ ID NO:19至少80％相同的HC2氨基酸序列；和

b)与SEQ ID NO:20至少80％相同的LC2氨基酸序列。

在一些实施方案中，第二结构域包含：

a)SEQ ID NO:19的HC2；和/或

b)SEQ ID NO:20的LC2。

在一些实施方案中，第二结构域包含：

a)SEQ ID NO:19的HC2；和

b)SEQ ID NO:20的LC2。

HC2：QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCETSGYTFTSYGISWVRQAPGHGLEWMGWISAYNGYTNYAQKLQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARDLRGTNYFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO:19)

LC2：DIQMTQSPSSVSASVGDRVTITCRASQGISNWLAWFQHKPGKAPKLLIYAASSLLSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQANSFPITFGQGTRLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ ID NO:20)

在一些实施方案中，该抗体(例如，双特异性抗体)包含：

a)特异性结合EGFR的第一结构域，其包含分别为SEQ ID NO:1、2、3、4、5和6的HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3氨基酸序列；和/或

b)特异性结合c-Met的第二结构域，其包含分别为SEQ ID NO:7、8、9、10、11和12的HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3氨基酸序列。

在某些实施方案中，该抗体(例如，双特异性抗体)包含：

a)特异性结合EGFR的第一结构域，其包含分别为SEQ ID NO:1、2、3、4、5和6的HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3氨基酸序列；以及

b)特异性结合c-Met的第二结构域，其包含分别为SEQ ID NO:7、8、9、10、11和12的HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3氨基酸序列。

在一些实施方案中，该抗体(例如，双特异性抗体)包含：

a)包含与SEQ ID NO:13至少90％相同的VH氨基酸序列的第一结构域；

b)包含与SEQ ID NO:14至少90％相同的VL氨基酸序列的第一结构域；

c)包含与SEQ ID NO:15至少90％相同的VH氨基酸序列的第二结构域；和/或

d)包含与SEQ ID NO:16至少90％相同的VL氨基酸序列的第二结构域。

在某些实施方案中，该抗体(例如，双特异性抗体)包含：

a)包含与SEQ ID NO:13至少90％相同的VH氨基酸序列的第一结构域；

b)包含与SEQ ID NO:14至少90％相同的VL氨基酸序列的第一结构域；

c)包含与SEQ ID NO:15至少90％相同的VH氨基酸序列的第二结构域；和

d)包含与SEQ ID NO:16至少90％相同的VL氨基酸序列的第二结构域。

在一些实施方案中，该抗体(例如，双特异性抗体)包含：

a)包含SEQ ID NO:13的VH的第一结构域；

b)包含SEQ ID NO:14的VL的第一结构域；

c)包含SEQ ID NO:15的VH的第二结构域；和/或

d)包含SEQ ID NO:16的VL的第二结构域。

在一些实施方案中，该抗体(例如，双特异性抗体)包含：

a)包含SEQ ID NO:13的VH的第一结构域；

b)包含SEQ ID NO:14的VL的第一结构域；

c)包含SEQ ID NO:15的VH的第二结构域；和

d)包含SEQ ID NO:16的VL的第二结构域。

在某些实施方案中，该抗体(例如，双特异性抗体)包含：

a)与SEQ ID NO:17至少80％相同的HC1氨基酸序列；

b)与SEQ ID NO:18至少80％相同的LC1氨基酸序列；

c)与SEQ ID NO:19至少80％相同的HC2氨基酸序列；和/或

d)与SEQ ID NO:20至少80％相同的LC2氨基酸序列。

在某些实施方案中，该抗体(例如，双特异性抗体)包含：

a)与SEQ ID NO:17至少80％相同的HC1氨基酸序列；

b)与SEQ ID NO:18至少80％相同的LC1氨基酸序列；

c)与SEQ ID NO:19至少80％相同的HC2氨基酸序列；和

d)与SEQ ID NO:20至少80％相同的LC2氨基酸序列。

在某些实施方案中，该抗体(例如，双特异性抗体)包含：

a)SEQ ID NO:17的HC1；

b)SEQ ID NO:18的LC1；

c)SEQ ID NO:19的HC2；和/或

d)SEQ ID NO:20的LC2。

在具体实施方案中，该抗体(例如，双特异性抗体)包含：

a)SEQ ID NO:17的HC1；

b)SEQ ID NO:18的LC1；

c)SEQ ID NO:19的HC2；和

d)SEQ ID NO:20的LC2。

在一些实施方案中，该抗体(例如，双特异性抗体)为IgG同种型。在某些实施方案中，该抗体(例如，双特异性抗体)为IgG1同种型。IgG1恒定结构域内存在一些变异(例如，熟知的同种异型)，例如，其中变异处于位置214、356、358、422、431、435和/或436(根据EU编号的残基编号)(参见例如，IMGT Web资源；IMGT组库(IG和TR)；蛋白质和等位基因；同种异型)。双特异性抗EGFR/c-Met抗体可以是任何IgG1同种异型，诸如G1m17、G1m3、G1m1、G1m2、G1m27或G1m28。

在一些实施方案中，抗体是人抗体。

在具体实施方案中，该抗体是埃万妥单抗。埃万妥单抗或JNJ-61186372(JNJ-372)是美国专利9,593,164号中描述的一种IgG1抗EGFR/c-Met双特异性抗体。

其他抗EGFR/c-Met抗体(例如，双特异性抗体)也可以用于本公开的方法中，例如，通过组合公众可获得的EGFR结合VH/VL结构域和c-Met结合VH/VL结构域。

在一些实施方案中，该抗体(例如，双特异性抗体)包含岩藻糖含量介于约1％至约15％之间的双触角聚糖结构。

岩藻糖含量减小的抗体可以使用所报告的用于引起具有双触角复合物型Fc低聚糖的相对较高去岩藻糖基化抗体的成功表达的不同方法制成，这些方法诸如控制培养物渗透压(Konno等人，Cytotechnology 64:249-65,2012)、应用变体CHO细胞系Lec13作为宿主细胞系(Shields等人，J Biol Chem 277:26733-26740,2002)、应用变体CHO细胞系EB66作为宿主细胞系(Olivier等人，MAbs；2(4),2010；印刷出版前的电子版；PMID:20562582)、应用大鼠杂交瘤细胞系YB2/0作为宿主细胞系(Shinkawa等人，J Biol Chem 278:3466-3473,2003)、引入特异性针对α1,6-岩藻糖基转移酶(FUT8)基因的小干扰RNA(Mori等人，Biotechnol Bioeng88:901-908,2004)，或者共表达β-1,4-N-乙酰葡糖胺基转移酶III和高尔基体α-甘露糖苷酶II或强效α-甘露糖苷酶I抑制剂几夫碱(Ferrara等人，J BiolChem281:5032-5036,2006；Ferrara等人，Biotechnol Bioeng93:851-861,2006；Zhou等人，Biotechnol Bioeng 99:652-65,2008)。通常，降低抗体的聚糖中的岩藻糖含量增强了抗体介导的细胞毒性(ADCC)。

生成抗EGFR/c-Met抗体

用于本公开方法中的抗EGFR/c-Met抗体可以例如使用两个单特异性二价抗体之间的Fab臂交换(或半分子交换)通过下列方式生成：在每个半分子中的重链CH3交界处引入取代，以促成在体外无细胞环境中或使用共表达形成具有不同特异性的两个抗体半分子的异源二聚体。Fab臂交换反应是二硫键异构化反应和CH3结构域解离-缔合的结果。亲本单特异性抗体的铰链区中的重链二硫键被还原。亲本单特异性抗体之一的所得游离半胱氨酸与第二亲本单特异性抗体分子的半胱氨酸残基形成重链间二硫键，同时亲本抗体的CH3结构域通过解离-缔合而释放和重新形成。可将Fab臂的CH3结构域改造成促成异源二聚化而非同源二聚化。所得产物是具有各自结合不同表位(即，EGFR上的表位和c-Met上的表位)的两个Fab臂或半分子的双特异性抗体。例如，本发明的双特异性抗体可以使用国际专利公布WO2011/131746号中所述的技术生成。在IgG1抗体的情况中，可使用一条重链中的突变F405L和另一条重链中的K409R。对于IgG2抗体，可使用具有F405L和R409K取代的野生型IgG2和IgG2抗体。对于IgG4抗体，可使用具有F405L和R409K取代的野生型IgG4和IgG4抗体。为了产生双特异性抗体，将第一单特异性二价抗体和第二单特异性二价抗体工程化以在Fc区中具有前述突变，在足以允许铰链区中的半胱氨酸发生二硫键异构化的还原条件下将抗体一起温育；从而通过Fab臂交换生成双特异性抗体。温育条件最理想地可恢复到非还原条件。可使用的示例性还原剂为2-巯基乙胺(2-MEA)、二硫苏糖醇(DTT)、二硫赤藓糖醇(DTE)、谷胱甘肽、三(2-羧乙基)膦(TCEP)、L-半胱氨酸和β-巯基乙醇。例如，可使用如下条件：在至少25mM 2-MEA的存在下或至少0.5mM二硫苏糖醇的存在下，在5-8的pH例如pH 7.0或pH7.4，至少20℃的温度下，温育至少90分钟。

用于本公开方法中的双特异性抗EGFR/c-Met抗体也可以使用诸如杵臼(Genentech)、CrossMAbs(Roche)和静电匹配(Chugai,Amgen,NovoNordisk,Oncomed)、LUZ-Y(Genentech)、链交换工程改造结构域体(SEEDbody)(EMD Serono)和Biclonic(Merus)的设计来生成。

在“杵臼”策略(参见，例如国际公布WO 2006/028936号)中，在人IgG中形成CH3结构域的交界的选定氨基酸可以在影响CH3结构域相互作用的位置处突变，从而促进异源二聚体形成。将具有小侧链(杵)的氨基酸引入特异性地结合第一抗原的抗体的重链中，并将具有大侧链(杵)的氨基酸引入特异性地结合第二抗原的抗体的重链中。在两种抗体共表达后，由于具有“扣”的重链与具有“杵”的重链的优先相互作用而形成异源二聚体。形成杵和臼的示例性CH3取代对(表示为第一重链的第一CH3结构域中的修饰位置/第二重链的第二CH3结构域中的修饰位置)为：T366Y/F405A、T366W/F405W、F405W/Y407A、T394W/Y407T、T394S/Y407A、T366W/T394S、F405W/T394S和T366W/T366S_L368A_Y407V。

除利用“杵臼”策略促进Fab臂交换之外，CrossMAb技术还利用一个半臂中的CH1/CL结构域更换，以确保所得双特异性抗体正确地轻链配对(参见例如，美国专利8,242,247号)。

可使用其他交换策略如下产生本发明的全长双特异性抗体：在双特异性抗体的一个或两个臂中，在重链与轻链之间或重链之内交换可变结构域或恒定结构域、或这两种结构域。这些交换包括例如VH-CH1与VL-CL、VH与VL、CH3与CL以及CH3与CH1，如在国际专利公布WO2009/080254号、WO2009/080251号、WO2009/018386号和WO2009/080252号中有所描述。

还可使用其他策略，诸如通过在一个CH3表面取代带正电荷的残基并在第二CH3表面取代带负电荷的残基使用静电相互作用促进重链异源二聚化，如美国专利公布US2010/0015133号、美国专利公布US2009/0182127号、美国专利公布US2010/028637号或美国专利公布US2011/0123532号中所述。在其他策略中，可通过下面的取代(表示为第一重链的第一CH3结构域中的修饰位置/第二重链的第二CH3结构域中的修饰位置)促进异源二聚化：L351Y_F405A_Y407V/T394W、T366I_K392M_T394W/F405A_Y407V、T366L_K392M_T394W/F405A_Y407V、L351Y_Y407A/T366A_K409F、L351Y_Y407A/T366V_K409F、Y407A/T366A_K409F或T350V_L351Y_F405A_Y407V/T350V_T366L_K392L_T394W，如美国专利公布US2012/0149876号或美国专利公布US2013/0195849号中所述。

SEEDbody技术可用于产生本发明的双特异性抗体。SEEDbody在其恒定域中具有所选择的经IgA残基取代的IgG残基，以促进异源二聚化，如在美国专利US20070287170号中有所描述。

通常使用标准方法以DNA水平到分子水平(诸如抗体的恒定域)上进行突变。

施用

抗EGFR/c-Met抗体(例如，双特异性抗体)可在药物组合物中施用。在一些实施方案中，该药物组合物还包含药学上可接受的载剂。

在一些实施方案中，包含抗EGFR/c-Met抗体(例如，双特异性抗体)的药物组合物经由静脉内输注来施用。

在一些实施方案中，包含抗EGFR/c-Met抗体的药物组合物是皮下(SC)施用的。

在一些实施方案中，抗体以约700mg至约2,240mg的剂量施用。在一些实施方案中，抗体以约700mg、约1,050mg、约1,400mg、约1,600mg或约2,240mg的剂量施用。在一些实施方案中，抗体以约1,050mg的剂量施用。在某些实施方案中，抗体以约1,400mg的剂量施用。在具体实施方案中，抗体以约700mg的剂量施用。在一些实施方案中，抗体以约1,600mg的剂量施用。在一些实施方案中，抗体以约2,240mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约350mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约750mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约800mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约850mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约900mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约950mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约1,000mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约1,100mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约1,150mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约1,200mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约1,250mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约1,300mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约1,350mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约1,500mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约1,600mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约1,700mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约1,800mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约1,900mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约2,000mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约2,100mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约2,200mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约2,240mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体以约2,300mg的剂量施用。

在某些实施方案中，对于体重<80kg，该抗体以1,050mg的剂量施用；对于体重≥80kg，该抗体以1,400mg的剂量施用。

在具体实施方案中，对于体重<80kg，该抗体以700mg的剂量施用；对于体重≥80kg，该抗体以1,050mg的剂量施用。

在某些实施方案中，对于体重<80kg，该抗体以1,600mg的剂量施用；对于体重≥80kg，该抗体以2,240mg的剂量施用。

在一些实施方案中，该抗体每周施用两次。

在某些实施方案中，该抗体每周施用一次。

在一些实施方案中，该抗体每两周施用一次。

在某些实施方案中，该抗体每三周施用一次。

在一些实施方案中，该抗体每四周施用一次。

在某些实施方案中，该抗体每周施用一次或每两周施用一次。在具体实施方案中，该抗体在前4周内每周施用一次，然后每2周施用一次。

在一些实施方案中，该抗体以28天周期施用。

在一些实施方案中，受试者的体重<80kg，该抗体(例如，双特异性抗体，诸如埃万妥单抗)以700mg的剂量在前4周内每周施用一次，然后以28天周期每2周施用一次。在其他实施方案中，受试者的体重<80kg，该抗体(例如，双特异性抗体，诸如埃万妥单抗)以1,050mg的剂量在前4周内每周施用一次，然后以28天周期每2周施用一次。在其他实施方案中，受试者的体重<80kg，该抗体(例如，双特异性抗体，诸如埃万妥单抗)以1,600mg的剂量在前4周内每周施用一次，然后以28天周期每2周施用一次。

在某些实施方案中，受试者的体重≥80kg，该抗体(例如，双特异性抗体，诸如埃万妥单抗)以1,050mg的剂量在前4周内每周施用一次，然后以28天周期每2周施用一次。在其他实施方案中，受试者的体重≥80kg，该抗体(例如，双特异性抗体，诸如埃万妥单抗)以1,400mg的剂量在前4周内每周施用一次，然后以28天周期每2周施用一次。在其他实施方案中，受试者的体重≥80kg，该抗体(例如，双特异性抗体，诸如埃万妥单抗)以2,240mg的剂量在前4周内每周施用一次，然后以28天周期每2周施用一次。

包含1,400mg、1,050mg和700mg的剂量的抗EGFR/c-Met抗体的药物组合物可以用单剂量小瓶中的350mg/7mL(50mg/mL)溶液，分别以约28mL、21mL和14mL的总体积施用。

关于埃万妥单抗的附加信息可以在例如(amivantamab-vmjw)的处方信息产品说明书中找到(www.janssenlabels.com/package-insert/product-monograph/prescribing-information/RYBREVANT-pi.pdf)，其以引用方式并入本文。

在一些实施方案中，该抗体作为单一疗法施用。

附加的治疗剂

在一个方面，本公开提供了一种用于减少使用联合治疗的受试者的输注相关反应(IRR)的发生率或严重程度的方法，该联合治疗包含抗表皮生长因子受体(EGFR)/肝细胞生长因子受体(c-Met)抗体，该方法包括施用甲氨蝶呤、孟鲁司特或地塞米松中的一种或多种。

在一些实施方案中，包含EGFR/c-Met双特异性抗体的联合治疗还包含一种或多种抗癌疗法，其包含一种或多种化学治疗剂、检查点抑制剂、靶向抗癌疗法或激酶抑制剂或它们的任何组合。

在一些实施方案中，激酶抑制剂是EGFR抑制剂、c-Met抑制剂、HER2抑制剂、HER3抑制剂、HER4抑制剂、VEGFR抑制剂或AXL抑制剂。

在一些实施方案中，激酶抑制剂是埃罗替尼、吉非替尼、拉帕替尼、凡德他尼、阿法替尼、奥希替尼、拉泽替尼、莫博替尼、波齐替尼、克里替尼、卡博替尼、卡马替尼、阿昔替尼、乐伐替尼、尼达尼布、瑞格非尼、帕唑帕尼、索拉非尼或舒尼替尼。在一些实施方案中，激酶抑制剂是拉泽替尼。在一些实施方案中，激酶抑制剂是奥希替尼。在一些实施方案中，激酶抑制剂是莫博替尼。

在一些实施方案中，一种或多种既往抗癌疗法包括卡铂、紫杉醇、吉西他滨、顺铂、长春瑞滨、多西他赛、帕博西尼、克唑替尼、PD-(L)1轴抑制剂、EGFR抑制剂、c-Met抑制剂、HER2抑制剂、HER3抑制剂、HER4抑制剂、VEGFR抑制剂、AXL抑制剂、埃罗替尼、吉非替尼、拉帕替尼、凡德他尼、阿法替尼、奥希替尼、拉泽替尼、莫博替尼、波齐替尼、克里替尼、卡博替尼、卡马替尼、阿昔替尼、乐伐替尼、尼达尼布、瑞格非尼、帕唑帕尼、索拉非尼或舒尼替尼，或者它们的任何组合。

拉泽替尼是第三代EGFR酪氨酸激酶抑制剂(TKI)；拉泽替尼的结构和合成在美国专利9,593,098号中有所描述，该专利以引用方式并入本文。由本文式(I)表示的拉泽替尼游离碱的化学名是N-(5-(4-(4-((二甲基氨基)甲基)-3-苯基-1H-吡唑-1-基)嘧啶-2-基氨基)-4-甲氧基-2-吗啉代苯基)丙烯酰胺(本文称为拉泽替尼)。拉泽替尼的甲磺酸盐可由式II表示：

拉泽替尼(例如盐和结晶形式)的实施方案在PCT/KR2018/004473中有所描述，该专利也以引用方式并入本文。

根据具体实施方案，游离碱形式的拉泽替尼对野生型EGFR几乎没有影响，并且其是高度选择性且不可逆的EGFRTKI，具有对T790M的单突变和双突变的强抑制活性，例如，其靶向激活的EGFR突变del19和L858R，以及T790M突变。在本发明的一个方面，突变可以是delE746-A750、L858R或T790M，并且其可以是选自delE746-A750/T790M或L858R/T790M的双突变。

本公开的实施方案提供了一种治疗患有癌症的受试者的方法，该方法包括向受试者施用联合疗法，其中该联合疗法包含治疗有效量的分离的双特异性抗表皮生长因子受体(EGFR)/肝细胞生长因子受体(c-Met)抗体和治疗有效量的式(I)的化合物：

或其溶剂化物、水合物、互变异构体或药学上可接受的盐。

本公开的实施方案提供了一种药物组合，其包含治疗有效量的分离的双特异性抗表皮生长因子受体(EGFR)/肝细胞生长因子受体(c-Met)抗体和治疗有效量的式(I)的化合物或其溶剂化物、水合物、互变异构体或药学上可接受的盐，以用作药物，特别是用作受试者的药物。

在每个实施方案中，双特异性抗EGFR/c-Met抗体和拉泽替尼化合物、或其溶剂化物、水合物、互变异构体、或药学上可接受的盐可同时(例如作为相同药物组合物的一部分，或在单独的药物组合物中)或在不同时间施用，如本文所述。

药学上可接受的盐形式包括药学上可接受的酸性盐/阴离子盐或碱性盐/阳离子盐。药学上可接受的酸性盐/阴离子盐包括乙酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、碳酸氢盐、酒石酸氢盐、溴化物、依地酸钙、樟脑磺酸盐、碳酸盐、氯化物、柠檬酸盐、二盐酸盐、依地酸盐、乙二磺酸盐、依托酸盐、乙磺酸盐、延胡索酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、对羟乙酰氨基苯胂酸盐、己基间苯二酚盐、氢溴酸盐、盐酸盐、羟萘酸盐、碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、粘液酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、双羟萘酸盐、泛酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、聚半乳糖醛酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、次乙酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、鞣酸盐、酒石酸盐、茶氯酸盐、甲苯磺酸盐和三乙碘化物盐。药学上可接受的碱性盐/阳离子盐包括钠盐、钾盐、钙盐、镁盐、二乙醇胺盐、N-甲基-D-葡糖胺盐、L-赖氨酸盐、L-精氨酸盐、铵盐、乙醇胺盐、哌嗪盐和三乙醇胺盐。

药学上可接受的酸式盐通过式(I)的化合物的游离碱形式与合适的无机酸或有机酸反应形成，该无机酸或有机酸包括但不限于氢溴酸、盐酸、硫酸、硝酸、磷酸、琥珀酸、马来酸、甲酸、乙酸、丙酸、富马酸、柠檬酸、酒石酸、乳酸、苯甲酸、水杨酸、谷氨酸、天冬氨酸、对甲苯磺酸、苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸、萘磺酸(诸如2-萘磺酸)或己酸。式(I)的化合物的药学上可接受的酸加成盐可包括或是例如氢溴酸盐、盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、甲酸盐、乙酸盐、丙酸盐、延胡索酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、乳酸盐、苯甲酸盐、水杨酸盐、谷氨酸盐、天冬氨酸盐、对甲苯磺酸盐、苯磺酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、萘磺酸盐(例如2-萘磺酸盐)或己酸盐。

式(I)的化合物的游离酸或游离碱形式可分别由对应的碱加成盐或酸加成盐形式制备。例如，酸加成盐形式的本发明化合物可通过用合适的碱(例如氢氧化铵溶液、氢氧化钠等)处理而转化为对应的游离碱形式。碱加成盐形式的本发明化合物可通过用合适的酸(例如盐酸等)处理而转化为对应的游离酸。

在某些实施方案中，该方法还包括向受试者施用一种或多种附加的治疗剂。一种或多种附加的治疗剂的非限制性示例包括表达嵌合抗原受体(CAR)的T细胞(CAR-T细胞)、表达CAR的自然杀伤细胞(CAR-NK细胞)、表达CAR的巨噬细胞(CAR-M细胞)、化学治疗剂、免疫检查点抑制剂、T细胞重定向剂、放射疗法、外科手术和护理药物标准。在某些实施方案中，一种或多种附加的治疗剂包括化学疗法、放射疗法、外科手术、靶向抗癌疗法、激酶抑制剂，或它们的组合。

在一些实施方案中，一种或多种附加的治疗剂是一种或多种抗癌疗法。在一些实施方案中，一种或多种附加的治疗剂包括一种或多种化学治疗剂。

考虑用于联合疗法中的化学治疗剂的不完全列表包括阿那曲唑比卡鲁胺硫酸博来霉素白消安甲酰四氢叶酸钙、美法仑6-巯嘌呤甲氨蝶呤米托蒽醌吉妥单抗、紫杉醇菲尼克斯(Yttrium90/MX-DTPA)、喷司他丁、含卡莫司汀植入剂的聚苯丙生20更生霉素(放线菌素D，Cosmegan)、盐酸柔红霉素枸橼酸柔红霉素脂质体注射液地塞米松、多西他赛盐酸阿霉素依托泊苷白消安注射液卡培他滨N4-戊氧羰基-5-脱氧-5-氟胞苷、卡铂卡莫司汀苯丁酸氮芥顺铂克拉屈滨环磷酰胺(或)、阿糖胞苷、胞嘧啶阿拉伯糖苷阿糖胞苷脂质体注射液达卡巴嗪磷酸氟达拉滨5-氟尿嘧啶氟他胺替扎他滨(tezacitibine)、吉西他滨(二氟脱氧胞苷)、羟基脲伊达比星异环磷酰胺伊立替康L-天冬酰胺酶枸橼酸他莫昔芬替尼泊苷6-硫鸟嘌呤、噻替派、替拉扎明注射用盐酸拓扑替康长春花碱长春新碱和长春瑞滨

示例的烷基化剂包括但不限于氮芥类物质、乙烯亚胺衍生物、烷基磺酸盐、亚硝基脲和三氮烯、乌拉莫司汀(Aminouracil Uracil Nitrogen )、氮芥环磷酰胺( Revimmune^TM)、异环磷酰胺美法仑苯丁酸氮芥哌泊溴烷 )、三亚乙基三聚氰胺 三亚乙基硫代磷酰胺、替莫唑胺噻替哌白消安卡莫司汀洛莫司汀链脲霉素和达卡巴嗪附加的示例烷基化剂包括但不限于奥沙利铂美法仑(也称为L-PAM、L-溶肉瘤素和苯丙氨酸氮芥，)、六甲蜜胺(也称为六甲基蜜胺(HMM)，)；卡莫司汀苯达莫司汀白消安(和)、卡铂替莫唑胺(和)、更生霉素(也称为放线菌素-D，)、洛莫司汀(也称为CCNU，)、顺铂(也称为CDDP、和)、苯丁酸氮芥环磷酰胺(和)、达卡巴嗪(也称为DTIC、DIC和咪唑甲酰胺、)、六甲蜜胺(也称为六甲基蜜胺(HMM)，)；异环磷酰胺泼尼氮芥(Prednumustine)；丙卡巴肼双氯乙基甲胺(也称为氮芥、莫司汀和双氯乙基甲胺盐酸盐，)；链脲霉素噻替哌(也称为硫代磷酰胺、TESPA和TSPA、)；环磷酰胺以及苯达莫司汀盐酸盐

在一些实施方案中，一种或多种附加的治疗剂包括激酶抑制剂。在一些实施方案中，激酶抑制剂包括EGFR抑制剂、c-Met抑制剂、HER2抑制剂、HER3抑制剂、HER4抑制剂、VEGFR抑制剂、AXL抑制剂，或它们的组合。在某些实施方案中，激酶抑制剂是EGFR抑制剂。在具体实施方案中，激酶抑制剂是c-Met抑制剂。在一些实施方案中，激酶抑制剂是HER2抑制剂。在某些实施方案中，激酶抑制剂是HER3抑制剂。在具体实施方案中，激酶抑制剂是HER4抑制剂。在一些实施方案中，激酶抑制剂是VEGFR抑制剂。在某些实施方案中，激酶抑制剂是AXL抑制剂或AXL。

在一些实施方案中，激酶抑制剂包括埃罗替尼、吉非替尼、拉帕替尼、凡德他尼、阿法替尼、奥希替尼、拉泽替尼、莫博替尼、波齐替尼、克里替尼、卡博替尼、卡马替尼、阿昔替尼、乐伐替尼、尼达尼布、瑞格非尼、帕唑帕尼、索拉非尼、舒尼替尼，或它们的组合。在某些实施方案中，激酶抑制剂是埃罗替尼。在具体实施方案中，激酶抑制剂是吉非替尼。在一些实施方案中，激酶抑制剂是拉帕替尼。在某些实施方案中，激酶抑制剂是凡德他尼。在一些实施方案中，激酶抑制剂是阿法替尼。在一些实施方案中，激酶抑制剂是奥希替尼。在某些实施方案中，激酶抑制剂是拉泽替尼。在具体实施方案中，激酶抑制剂是波齐替尼。在一些实施方案中，激酶抑制剂是克里替尼。在某些实施方案中，激酶抑制剂是卡博替尼。在一些实施方案中，激酶抑制剂是卡马替尼。在一些实施方案中，激酶抑制剂是阿昔替尼。在某些实施方案中，激酶抑制剂是乐伐替尼。在一些实施方案中，激酶抑制剂是尼达尼布。在具体实施方案中，激酶抑制剂是瑞格非尼。在某些实施方案中，激酶抑制剂是帕唑帕尼。在一些实施方案中，激酶抑制剂是索拉非尼。在具体实施方案中，激酶抑制剂是舒尼替尼。在一些实施方案中，激酶抑制剂是莫博替尼。

在某些实施方案中，一种或多种既往抗癌疗法包括卡铂、紫杉醇、吉西他滨、顺铂、长春瑞滨、多西他赛、帕博西尼、克唑替尼、PD-(L)1轴抑制剂、EGFR抑制剂、c-Met抑制剂、HER2抑制剂、HER3抑制剂、HER4抑制剂、VEGFR抑制剂、AXL抑制剂、埃罗替尼、吉非替尼、拉帕替尼、凡德他尼、阿法替尼、奥希替尼、拉泽替尼、波齐替尼、克里替尼、卡博替尼、卡马替尼、阿昔替尼、乐伐替尼、尼达尼布、瑞格非尼、帕唑帕尼、索拉非尼或舒尼替尼，或者它们的任何组合。

可以在本公开的方法中与抗EGFR/c-Met抗体(例如，双特异性抗体)组合施用的抗癌疗法包括本领域技术人员已知的化学治疗药物或其他抗癌治疗剂中的任何一种或多种。化学治疗剂是可用于治疗癌症的化学化合物，并且包括生长抑制剂或其他细胞毒性剂，并且包括烷基化剂、抗代谢药、抗微管抑制剂、拓扑异构酶抑制剂、受体酪氨酸激酶抑制剂、血管生成抑制剂等。化学治疗剂的示例包括：烷基化剂，诸如噻替哌和环磷酰胺烷基磺酸盐，诸如白消安、硫丹和嗪消安；氮丙啶，诸如苯并多巴(benzodopa)、卡波醌(carboquone)、麦曲多巴(meturedopa)和尤利多巴(uredopa)；乙撑亚胺和甲基蜜胺，包括六甲蜜胺、三乙撑蜜胺、三乙撑磷酰胺(triethylenephosphoramide)、三乙撑硫代磷酰胺(triethylenethiophosphoramide)和三羟甲蜜胺(trimethylomelamine)；氮芥(nitrogen mustards)，诸如苯丁酸氮芥、萘氮芥(chlornaphazine)、胆磷酰胺(cholophosphamide)、雌莫司汀(estramustine)、异环磷酰胺、双氯乙基甲胺、盐酸氧氮芥(mechlorethamine oxide hydrochloride)、美法仑、新氮芥(novembichin)、苯芥胆甾醇(phenesterine)、泼尼莫司汀(prednimustine)、曲磷胺(trofosfamide)、尿嘧啶氮芥(uracil mustard)；亚硝脲(nitrosoureas)，诸如卡莫司汀、氯脲霉素、福莫司汀(fotemustine)、洛莫司汀(lomustine)、尼莫司汀(nimustine)、雷莫司汀(ranimnustine)；抗生素，诸如阿克拉霉素(aclacinomysins)、放线菌素、氨茴霉素(anthramycin)、偶氮丝氨酸(azaserine)、博来霉素、放线菌素(cactinomycin)、加利车霉素(calicheamicin)、carabicin、洋红霉素(carminomycin)、嗜癌霉素(carzinophilin)、色霉素、更生霉素、柔红霉素、地托比星(detorubicin)、6-二氮-5-氧-L-正亮氨酸、多柔比星、表柔比星、依索比星、伊达比星、麻西罗霉素(marcellomycin)、丝裂霉素类(mitomycins)、霉酚酸(mycophenolic acid)、诺拉霉素(nogalamycin)、橄榄霉素(olivomycin)、培洛霉素(peplomycin)、potfiromycin、嘌呤霉素(puromycin)、三铁阿霉素(quelamycin)、罗多比星(rodorubicin)、链黑菌素(streptonigrin)、链脲霉素、杀结核菌素(tubercidin)、乌苯美司(ubenimex)、净司他丁(zinostatin)、佐柔比星(zorubicin)；抗代谢药，诸如甲氨蝶呤和5-FU；叶酸类似物，诸如二甲叶酸(denopterin)、甲氨蝶呤、蝶罗呤(pteropterin)、三甲曲沙(trimetrexate)；嘌呤类似物，诸如氟达拉滨(fludarabine)、6-巯嘌呤、硫咪嘌呤(thiamiprine)、硫鸟嘌呤；嘧啶类似物，诸如安西他滨(ancitabine)、阿扎胞苷(azacitidine)、6-氮尿苷(azauridine)、卡莫氟(carmofur)、阿糖胞苷、双脱氧尿苷(dideoxyuridine)、去氧氟尿苷(doxifluridine)、依诺他滨(enocitabine)、氟尿苷；雄激素类，诸如卡鲁睾酮(calusterone)、丙酸屈他雄酮(dromostanolone propionate)、环硫雄醇(epitiostanol)、美雄烷(mepitiostane)、睾内酯(testolactone)；抗肾上腺类，诸如氨鲁米特、米托坦、曲洛司坦(trilostane)；叶酸补充剂，诸如亚叶酸(frolinic acid)；醋葡醛内酯(aceglatone)；醛磷酰胺糖苷(aldophosphamide glycoside)；氨基乙酰丙酸(aminolevulinic acid)；安吖啶；bestrabucil；比生群(bisantrene)；依达曲沙；地磷酰胺(defofamide)；地美可辛(demecolcine)；地吖醌；elfornithine；依利醋铵(elliptiniumacetate)；依托格鲁(etoglucid)；硝酸镓；羟基脲；香菇多糖(lentinan)；氯尼达明(lonidamine)；米托胍腙(mitoguazone)；米托蒽醌；莫哌达醇(mopidanmol)；二胺硝吖啶(nitrarine)；喷司他丁(pentostatin)；蛋氨氮芥(phenamet)；吡柔比星(pirarubicin)；鬼臼酸(podophyllinic acid)；2-乙基酰肼；丙卡巴肼；雷佐生(razoxane)；西佐喃(sizofiran)；螺旋锗(spirogermanium)；细交链孢菌酮酸(tenuazonic acid)；三亚胺醌(triaziquone)；2,2',2”-三氯三乙胺；乌拉坦(urethan)；长春地辛；达卡巴嗪；甘露莫司汀(mannomustine)；二溴甘露醇(mitobronitol)；二溴卫矛醇(mitolactol)；哌泊溴烷(pipobroman)；gacytosine；阿糖胞苷(arabinoside)(“Ara-C”)；环磷酰胺；噻替哌；新型紫杉类或紫杉烷家族的成员，诸如紫杉醇(多西他赛)及其类似物；苯丁酸氮芥；吉西他滨；6-硫鸟嘌呤；巯嘌呤；甲氨蝶呤；铂类似物，诸如顺铂和卡铂；长春碱；铂；依托泊苷(VP-16)；异环磷酰胺；丝裂霉素C；米托蒽醌；长春新碱；长春瑞滨；去甲长春碱；诺安托(novantrone)；替尼泊苷；道诺霉素；氨基蝶呤(aminopterin)；希罗达；伊本膦酸盐(ibandronate)；CPT-11；拓扑异构酶抑制剂RFS2000；二氟甲基鸟氨酸(DMFO)；视黄酸；埃斯波霉素(esperamicins)；卡培他滨；受体酪氨酸激酶和/或血管生成的抑制剂，包括索拉非尼舒尼替尼帕唑帕尼(VOTRIENT^TM)、托西尼布(PALLADIA^TM)、凡德他尼(ZACTIMA^TM)、西地尼布瑞格非尼(BAY 73-4506)、阿昔替尼(AG013736)、来他替尼(CEP-701)、埃罗替尼吉非替尼阿法替尼(BIBW 2992)、拉帕替尼来那替尼(HKI-272)等，以及以上物质中任一种的药学上可接受的盐、酸或衍生物。该定义中还包括用于调节或抑制激素对肿瘤的作用的抗激素剂，诸如抗雌激素药，包括例如他莫昔芬、雷洛昔芬、抑制芳香化酶的4(5)-咪唑、4-羟基他莫昔芬、曲沃昔芬、keoxifene、LY 117018、奥那司酮和托瑞米芬和抗雄激素药，诸如氟他胺、尼鲁米特、比卡鲁胺、亮丙瑞林和戈舍瑞林；以及以上中的任一种的药学上可接受的盐、酸或衍生物。其他常规的细胞毒性化学化合物如在Wiemann等人，1985，Medical Oncology(Calabresi等人编辑)，第10章，McMillan Publishing中所公开的那些，也适用于本发明的方法。

在一些实施方案中，抗EGFR/c-Met抗体(例如，双特异性抗体)和一种或多种附加的治疗剂(例如，化学治疗剂)同时施用。在其他实施方案中，该抗体和一种或多种附加的治疗剂分开(例如，依序)施用。

对于联合疗法，可以使用抗癌剂的推荐剂量和剂型来施用一种或多种抗癌剂。

受试者

术语“受试者”和“患者”在本文中可以互换使用。“对其有需要的患者”或“对其有需要的受试者”是指被诊断患有或怀疑患有疾病，根据本发明的方法将向其施用或已经向其施用双特异性抗EGFR抗MET抗体的哺乳动物受试者，优选人类。“对其有需要的患者”或“对其有需要的受试者”包括已经患有非期望的生理改变或疾病的那些受试者，以及倾向于患有生理改变或疾病的那些受试者。

在一些实施方案中，受试者为18岁或更大，例如18岁至40岁以下、18岁至45岁以下、18岁至50岁以下、18岁至55岁以下、18岁至60岁以下、18岁至65岁以下、18岁至70岁以下、18岁至75岁以下、40岁至75岁以下、45岁至75岁以下、50岁至75岁以下、55岁至75岁以下、60岁至75岁以下、65岁至75岁以下、60岁至75岁以下、40岁或更大、45岁或更大、50岁或更大、55岁或更大、60岁或更大、65岁或更大、70岁或更大、或75岁或更大。

在一些实施方案中，受试者是儿童。在一些实施方案中，受试者是18岁或更年轻，例如0-18岁、0-12岁、0-16岁、0-17岁、2-12岁、2-16岁、2-17岁、2-18岁、3-12岁、3-16岁、3-17岁、3-18岁、4-12岁、4-16岁、4-17岁、4-18岁、6-12岁、6-16岁、6-17岁、6-18岁、9-12岁、9-16岁、9-17岁、9-18岁、12-16岁、12-17岁或12-18岁。

在一些实施方案中，受试者已被诊断患有CRC(例如，mCRC)至少约1个月，例如至少约：2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、1年、18个月、2年、30个月、3年、4年、5年、6年、7年、8年、9年或10年。在具体实施方案中，受试者被新诊断患有CRC(例如，mCRC)。在一些实施方案中，CRC为腺癌。

在某些实施方案中，受试者未接受过治疗。

在一些实施方案中，受试者已接受了一种或多种既往抗癌疗法。在某些实施方案中，一种或多种既往抗癌疗法包括一种或多种化学治疗剂、检查点抑制剂、靶向抗癌疗法或激酶抑制剂，或者它们的任何组合。在具体实施方案中，受试者对于用一种或多种既往抗癌疗法进行的治疗具有复发性或抵抗性。

在一些实施方案中，受试者对EGFR抑制剂具有耐药性或已获得对EGFR抑制剂的耐药性。癌症可获得其抗性的示例性EGFR抑制剂是抗EGFR抗体西妥昔单抗帕尼单抗马妥珠单抗、尼妥珠单抗、小分子EGFR抑制剂埃罗替尼吉非替尼EKB-569(培利替尼，不可逆EGFRTKI)、泛ErbB和其他受体酪氨酸激酶抑制剂、拉帕替尼(EGFR和HER2抑制剂)、培利替尼(EGFR和HER2抑制剂)、凡德他尼(ZD6474、ZACTIMA^TM、EGFR、VEGFR2和RET TKI)、PF00299804(达克替尼、不可逆泛ErbB TKI)、CI-1033(不可逆泛erbB TKI)、阿法替尼(BIBW2992、不可逆泛ErbB TKI)、AV-412(双重EGFR和ErbB2抑制剂)、EXEL-7647(EGFR、ErbB2、GEVGR和EphB4抑制剂)、CO-1686(不可逆突变体选择性EGFR TKI)、AZD9291(不可逆突变体选择性EGFRTKI)和HKI-272(来那替尼，不可逆EGFR/ErbB2抑制剂)。

可使用各种定性和/或定量方法来确定受试者是否对用抗癌疗法进行的治疗具有耐药性或者已产生或易于产生对这种治疗的耐药性。可与对抗癌疗法的耐药性相关联的症状包括患者的健康状况下降或停滞、肿瘤的尺寸增加、肿瘤生长的下降受到遏制或减慢和/或体内癌细胞从一个位置扩散到其他器官、组织或细胞。与癌症相关联的各种症状的重建或恶化也可以是以下指征：受试者已产生或易于产生对抗癌疗法的耐药性，诸如厌食症、认知功能障碍、抑郁症、呼吸困难、疲劳、激素失调、中性粒细胞减少症、疼痛、周围神经病变和性功能障碍。与癌症相关联的症状可根据癌症的类型而变化。例如，与宫颈癌相关联的症状可包括异常出血、异常大量阴道分泌物、与正常月经周期无关的盆腔疼痛、排尿期间膀胱疼痛或疼痛以及在正常月经期之间、性交、冲洗或盆腔检查之后出血。与肺癌相关联的症状可包括持续性咳嗽、咳血、呼吸短促、喘息胸痛、食欲不振、体重无故减轻以及疲劳。肝癌的症状可包括食欲不振和体重减轻、腹痛(尤其是可能延伸到背部和肩部的腹部右上部分)、恶心和呕吐、全身无力和疲劳、肝脏增大、腹部肿胀(腹水)以及皮肤和眼白黄变(黄疸)。肿瘤学技术人员可很容易地鉴定与特定癌症类型相关联的症状。

示例性PD-(L)1轴抑制剂是结合PD-1的抗体(诸如纳武单抗派姆单抗信迪利单抗、西米普利单抗的黎波里单抗(tripolibamab)、替雷利珠单抗、斯巴达珠单抗、卡瑞利珠单抗、多塔利单抗、杰诺单抗或西利单抗)或结合PD-L1的抗体(诸如PD-L1抗体是恩沃利单抗、阿替利珠单抗度伐鲁单抗和阿维鲁单抗

市售抗体可经由授权分销商或药房购买。小分子的氨基酸序列结构可以见于由CAS登记公司提交的USAN和/或INN。

前驱药

在一些实施方案中，包含EGFR/c-Met抗体的联合治疗还包含一种或多种前驱药。在一些实施方案中，前驱药包含抗组胺剂、退热剂或糖皮质素。在一些实施方案中，前驱药包含抗组胺剂。在一些实施方案中，前驱药包含退热剂。在一些实施方案中，前驱药包含糖皮质素。在一些实施方案中，如表1中所述施用一种或多种前驱药。

表1.

^*所有剂量都需要。

初始剂量需要(第1周、第1天和第2天)；后续剂量可选。

实施方案

1.一种减少使用抗表皮生长因子受体(EGFR)/肝细胞生长因子受体(c-Met)抗体治疗的受试者的输注相关反应(IRR)的发生率或严重程度的方法，所述方法包括：向所述受试者施用

a)地塞米松，

b)孟鲁司特，或

c)甲氨蝶呤。

2.根据实施方案1所述的方法，其中所述抗体包含：

a)特异性结合EGFR的第一结构域，其包含分别为SEQ ID NO:1、2、3、4、5和6的重链互补决定区1(HCDR1)、HCDR2、HCDR3、轻链互补决定区1(LCDR1)、LCDR2和LCDR3氨基酸序列；以及

b)特异性结合c-Met的第二结构域，其包含分别为SEQ ID NO:7、8、9、10、11和12的HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3氨基酸序列。

3.根据实施方案2所述的方法，其中所述第一结构域包含SEQ ID NO:13的重链可变区(VH)和SEQ ID NO:14的轻链可变区(VL)，并且所述第二结构域包含SEQ ID NO:15的VH和SEQID NO:16的VL。

4.根据实施方案1至3中任一项所述的方法，其中所述抗体为IgG1同种型。

5.根据实施方案1至4中任一项所述的方法，其中所述抗体包含SEQ ID NO:17的第一重链(HC1)、SEQ ID NO:18的第一轻链(LC1)、SEQ ID NO:19的第二重链(HC2)和SEQ IDNO:20的第二轻链(LC2)。

6.根据实施方案1至5中任一项所述的方法，其中所述抗体是分离的双特异性抗体。

7.根据实施方案6所述的方法，其中所述双特异性抗体是埃万妥单抗。

8.根据实施方案1至7中任一项所述的方法，其中所述抗体包含岩藻糖含量为约1％至约15％的双触角聚糖结构。

9.根据实施方案1至8中任一项所述的方法，其中所述抗体以约700mg至约2,240mg的剂量施用。

10.根据实施方案9所述的方法，其中所述抗体以约700mg、约1,050mg、约1,400mg、约1,600mg或约2,240mg的剂量施用。

11.根据实施方案10所述的方法，其中所述抗体以约1,400mg的剂量施用。

12.根据实施方案10所述的方法，其中所述抗体以约1,050mg的剂量施用。

13.根据实施方案10所述的方法，其中所述抗体以约700mg的剂量施用。

13a.根据实施方案10所述的方法，其中所述抗体以约1,600mg的剂量施用。

13b.根据实施方案10所述的方法，其中所述抗体以约2,240mg的剂量施用。

14.根据实施方案1至13中任一项所述的方法，其中所述抗体每周施用一次或每两周施用一次。

15.根据实施方案14所述的方法，其中所述抗体在前4周内每周施用一次，然后每2周施用一次。

16.根据实施方案1至15中任一项所述的方法，其中所述抗体以28天周期施用。

17.根据实施方案1至16中任一项所述的方法，其中所述抗体作为单一疗法施用。

18.根据实施方案1至16中任一项所述的方法，其中使用所述抗EGFR/c-Met抗体治疗的所述受试者被进一步施用一种或多种化学治疗剂。

19.根据实施方案18所述的方法，其中所述一种或多种化学治疗剂包括酪氨酸激酶抑制剂(TKI)。

20.根据实施方案18所述的方法，其中所述一种或多种化学治疗剂包括拉泽替尼、奥希替尼、卡马替尼或莫博替尼。

20a.根据实施方案20所述的方法，其中所述一种或多种化学治疗剂包括拉泽替尼。

20b.根据实施方案20所述的方法，其中拉泽替尼以240mg的剂量施用。

20c.根据实施方案20所述的方法，其中所述一种或多种化学治疗剂包括奥希替尼。

20d.根据实施方案20所述的方法，其中所述一种或多种化学治疗剂包括莫博替尼。

20e.根据实施方案20所述的方法，其中所述一种或多种化学治疗剂包括卡马替尼。

21.根据实施方案1至20中任一项所述的方法，其中癌症是非小细胞肺癌(NSCLC)、上皮细胞癌、乳腺癌、卵巢癌、肺癌、鳞状细胞肺癌、肺腺癌、小细胞肺癌、结直肠癌、肛门癌、前列腺癌、肾癌、膀胱癌、头颈癌、咽癌、鼻癌、胰腺癌、皮肤癌、口腔癌、舌癌、食管癌、阴道癌、宫颈癌、脾癌、睾丸癌、胃癌、胸腺癌、结肠癌、甲状腺癌、肝癌、肝细胞癌(HCC)或者散发性或遗传性乳头状肾细胞癌(PRCC)、头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)。

22.根据实施方案21所述的方法，其中所述癌症是NSCLC。

22a.根据实施方案1、21或22中任一项所述的方法，其中癌症与EGFR外显子19缺失相关联。

22b.根据实施方案1、21或22中任一项所述的方法，其中癌症与L858R突变相关联。

23.根据实施方案1至22中任一项所述的方法，其中所述受试者已被诊断患有左侧mCRC。

24.根据实施方案1至22中任一项所述的方法，其中所述受试者已被诊断患有右侧mCRC。

25.根据实施方案1至24中任一项所述的方法，其中所述受试者未接受过抗EGFR疗法。

26.根据实施方案1至24中任一项所述的方法，其中所述受试者已接受既往抗EGFR疗法。

27.根据实施方案1至25中任一项所述的方法，其中所述受试者未接受过治疗。

28.根据实施方案1至26中任一项所述的方法，其中所述受试者对于用一种或多种既往抗癌疗法进行的治疗具有复发性或抵抗性。

28a.根据实施方案28所述的方法，其中所述既往抗癌疗法是奥希替尼。

28b.根据实施方案28所述的方法，其中所述既往抗癌疗法是铂类化学疗法。

29.根据实施方案1至28中任一项所述的方法，其中所述受试者为18岁或更大。

30.根据实施方案1至29中任一项所述的方法，还包括施用具有抗组胺剂、退热剂或糖皮质素中的一种或多种的前驱药。

30a.根据实施方案30所述的方法，其中所述前驱药包含抗组胺剂。

30b.根据实施方案30所述的方法，其中所述前驱药包含退热剂。

30c.根据实施方案30所述的方法，其中所述前驱药包含糖皮质素。

31.根据实施方案1至30中任一项所述的方法，其中在施用所述抗EGFR/c-Met抗体之前5天至1天之间施用甲氨蝶呤。

32.根据实施方案31所述的方法，其中甲氨蝶呤以25mg的剂量施用。

33.根据实施方案1至30中任一项所述的方法，其中在施用所述抗EGFR/c-Met抗体之前4天开始每天施用孟鲁司特。

34.根据实施方案33所述的方法，其中孟鲁司特施用5次。

35.根据实施方案33所述的方法，其中孟鲁司特以10mg的剂量施用。

36.根据实施方案30至35中任一项所述的方法，还包括在施用所述抗EGFR/c-Met抗体的第一天和第二天施用IV地塞米松，其中在施用所述抗EGFR/c-Met抗体之前45分钟至60分钟施用地塞米松。

37.根据实施方案36所述的方法，其中IV地塞米松以10mg的剂量施用。

38.根据实施方案1至30中任一项所述的方法，其中在施用所述抗EGFR/c-Met抗体之前1天施用口服地塞米松。

39.根据实施方案38所述的方法，其中口服地塞米松以8mg的日总剂量施用。

40.根据实施方案38至39中任一项所述的方法，还包括在施用所述抗EGFR/c-Met抗体的第一天和第二天施用IV地塞米松，其中IV地塞米松以介于10mg至20mg之间的剂量施用。

41.根据实施方案40所述的方法，其中IV地塞米松在第一天以20mg的剂量施用，并且在第二天以10mg的剂量施用。

42.根据实施方案1至41中任一项所述的方法，还包括施用具有抗组胺剂、退热剂或糖皮质素中的一种或多种的前驱药。

43.根据实施方案42所述的方法，其中所述前驱药包含苯海拉明。

44.根据实施方案43所述的方法，其中所述苯海拉明以25mg至50mg的剂量施用。

45.根据实施方案42所述的方法，其中所述前驱药包含对乙酰氨基酚。

46.根据实施方案45所述的方法，其中所述对乙酰氨基酚以650mg至1,000mg的剂量施用。

实施例1.甲氨蝶呤、孟鲁司特或地塞米松用于减少埃万妥单抗输注相关反应

目标和终点

主要目的是评估甲氨蝶呤、孟鲁司特或地塞米松在拉泽替尼和IV埃万妥单抗输注之前的预防功效，以减少IRR的发生率和/或严重程度。

总体设计

这是一项在具有EGFR外显子19缺失或L858R突变的NSCLC的参与者中进行的概念验证、开放标签和多中心研究，这些参与者的病情在奥希替尼施用期间或之后以及铂类化学疗法施用期间或之后已有进展，并且可能受益于IV埃万妥单抗+拉泽替尼联合疗法。在研究中，参与者将接受抗组胺剂、退热剂和糖皮质素的标准预防治疗。

该研究有三个群组。

●群组A：除所有其他标准前驱药之外，参与者将在拉泽替尼和IV埃万妥单抗联合疗法之前第-1天(第1周期)每天两次口服施用地塞米松(4mg)(日总剂量8mg)。

●群组B：参与者将在拉泽替尼和IV埃万妥单抗联合疗法之前第-4天、第-3天、第-2天、第-1天和C1D1(共5个剂量)的早晨口服施用孟鲁司特(10mg)。

●群组C：参与者将在拉泽替尼和IV埃万妥单抗联合疗法之前第-7天至第-3天(第1周期)之间的任何一天皮下(SC)施用单剂量的25mg甲氨蝶呤。

研究治疗将在所有其他标准前驱药的基础上施用。

研究群体

有资格的参与者的筛查将在施用拉泽替尼和IV埃万妥单抗之前的28天内执行。本研究中招募参与者的纳入和排除标准在下文中描述。

纳入标准：

在知情同意时≥18岁(或在进行研究的管辖区中同意的法定年龄)。

参与者必须患有晚期或转移性NSCLC。

在使用奥希替尼和铂基化学疗法的既往治疗期间或之后已有进展。如果在奥希替尼之前施用，则允许先使用第一代或第二代EGFR TKI。

先前鉴定的EGFR突变的NSCLC(EGFR外显子19缺失或L858R)(在临床实验室改进修正案[CLIA]认证的实验室[或等同物]中局部鉴定)

ECOG表现状态等级为0或1(东部肿瘤协作组，Robert Comis M.D，协作组主席(Oken，1982))。

受试者必须具有如下器官和骨髓功能：

a)血红蛋白≥9g/dL

b)ANC≥1.5×109/L

c)血小板≥75×10 9/L

d)AST和ALT≤3×ULN

e)总胆红素≤1.5×ULN；如果结合胆红素在正常范围内，患有吉尔伯特综合症的受试者可纳入研究。

f)基于肾病改良饮食(MDRD)4-变量公式(参见附件5)，具有>30mL/min的估算肾小球滤过率(eGFR)。

治疗组和持续时间

EGFR外显子19或L858R突变的晚期NSCLC受试者，其病情在奥希替尼和双重铂类化学疗法期间或之后已有进展，并将继续进行由研究者决定的IV埃万妥单抗+拉泽替尼的研究治疗。

研究治疗的描述。

甲氨蝶呤

甲氨蝶呤(MTX)[N-[4-[[(2,4-二氨基-6-蝶啶基)甲基]甲氨基]苯甲酰基]-L谷氨酸]是一种经FDA批准用于治疗类风湿性关节炎的叶酸拮抗剂。MTX是一种抗代谢药，通常用于化学疗法和自身免疫性疾病中的免疫抑制剂。

甲氨蝶呤抑制二氢叶酸还原酶，干扰DNA合成、修复和细胞复制。增殖活跃的组织诸如恶性细胞、骨髓、胎儿细胞、口腔黏膜和肠粘膜以及膀胱细胞通常对甲氨蝶呤的这种作用更敏感。

类风湿性关节炎的作用机制尚不清楚，其可能通过抑制氨基咪唑羧酰胺核苷转化酶来影响免疫功能，导致腺苷和鸟嘌呤代谢受阻、腺苷积累；由于腺苷的抗炎作用，导致T细胞活化抑制、B细胞下调、活化的CD-95T细胞敏感性增加；抑制甲基转移酶活性，以及抑制β-1白介素与其细胞表面受体的结合。

孟鲁司特

孟鲁司特是一种口服药物，经FDA批准用于治疗慢性哮喘和预防以及防止运动诱发的支气管收缩。其也被批准用于减轻季节性和常年性过敏性鼻炎的症状。

孟鲁司特抑制肥大细胞介导的白三烯释放，可用于减轻炎症和支气管收缩。

孟鲁司特是一种高度选择性的白三烯受体拮抗剂，其以高亲和力与白三烯结合，白三烯由各种类型的细胞(包括肥大细胞)分泌，并且参与可引起哮喘和过敏性鼻炎的体征和症状的炎性过程。白三烯受体存在于气道细胞中，诸如巨噬细胞和平滑肌细胞中。当与白三烯受体结合时，孟鲁司特会抑制白三烯的生理效应(诸如气道水肿、平滑肌收缩和正常细胞活性受损)。这作为孟鲁司特潜在地减少与埃万妥单抗IRR相关联的症状(例如，呼吸困难)的基本原理。

地塞米松

地塞米松是一种合成肾上腺皮质类固醇，有口服和IV两种剂型，经FDA批准用于治疗过敏状态。IV地塞米松(10mg)是在所有患者接受IV埃万妥单抗之前施用的标准前驱药。该研究将探讨增强的类固醇预载以减少IV埃万妥单抗IRR的发生率的作用。

将在施用拉泽替尼+IV埃万妥单抗的背景抗癌联合方案之前探讨地塞米松、孟鲁司特和甲氨蝶呤的研究治疗，以评估IRR的发生率。

研究治疗将在所有其他标准前驱药的基础上施用。推荐使用具有抗组胺剂、退热剂和/或糖皮质素的标准前驱药，包括以IV埃万妥单抗初始剂量(第1周、第1天和第2天)使用10mg地塞米松IV的前驱药。

表2中示出了活性时间表汇总。建议的施用顺序如表3至表5中所示。

表2.活性时间表汇总。

表3.群组A中建议的施用顺序。

^*埃万妥单抗所需的前驱药

表4.群组B中建议的施用顺序。

^*埃万妥单抗所需的前驱药

表5.群组C中建议的施用顺序。

^*埃万妥单抗所需的前驱药

剂量修改

根据有资格的研究现场人员的决定，IV埃万妥单抗或拉泽替尼的剂量可进行修改。如果认为所经历的毒性可归因于IV埃万妥单抗或拉泽替尼，则应优先修改负责药剂的剂量。

在一些实施方案中，当需要修改剂量时，可以如下表所列进行修改(表6)。

表6.拉泽替尼和IV埃万妥单抗的剂量修改

在一些实施方案中，如果认为暂停拉泽替尼或IV埃万妥单抗具有临床指征，则可基于两种治疗的安全特性，根据所经历的毒性以及任一种治疗导致毒性的可能性来指导是否暂停拉泽替尼或IV埃万妥单抗给药。

在一些实施方案中，如果两种治疗都被暂停，并将重新开始，则可首先重新开始施用拉泽替尼，并在下一次输注IV埃万妥单抗之前大约7天给药。

输注相关反应的治疗

经历IRR早期症状(表现为但不限于发冷、恶心、呼吸困难、潮红、胸部不适、呕吐或输注期间出现的任何其他症状)的参与者可以中断其输注(如有指示)，并且根据表7中提供的建议管理症状。在IV埃万妥单抗的初始剂量下(第1周期，第1天和第2天)，即使出现轻度症状也可考虑中断输注，以防止更严重的IRR表现。

表7.输注相关反应的管理

^*根据NCI不良事件通用术语标准(CTCAE)4.03版

输注相关反应

在使用各种单克隆抗EGFR抗体治疗期间已观察到输注相关反应。在使用双特异性抗EGFR/抗MET抗体治疗期间也已观察到输注相关反应。输注反应的严重程度各不相同。

IRR的体征和症状可包括发冷、呼吸困难、潮红、恶心、胸部不适、呕吐、心动过速、低血压和发烧。

伴随疗法注意事项

甲氨蝶呤群组

禁忌疗法必须在首次剂量的研究治疗(地塞米松、孟鲁司特或甲氨蝶呤)之前至少中止3周或5个半衰期，以时间较短者为准。

妊娠、酗酒或肝病、免疫缺陷综合征、原有血液恶质病以及对甲氨蝶呤(MTX)有超敏反应者禁用甲氨蝶呤。

NSAID、水杨酸盐、TMP、青霉素、华法林、丙戊酸盐、质子泵抑制剂、环孢菌素、顺铂会增加血液中MTX的毒性风险；氨基糖苷类、新霉素、丙磺舒会减少MTX的吸收。

药物相互作用：

阿司匹林、NSAID和类固醇：伴随使用可能会升高和延长血清甲氨蝶呤水平并导致毒性增加。

质子泵抑制剂：伴随使用可能会升高和延长血清甲氨蝶呤水平并导致毒性增加。

口服抗生素

肝毒素

茶碱

叶酸和叶酸拮抗剂

巯嘌呤

一氧化二氮

由于甲氨蝶呤与血浆蛋白高度结合，任何从蛋白质中置换甲氨蝶呤的药物都会增加其血液水平。

孟鲁司特群组

对药物或其成分有超敏反应史的患者禁用孟鲁司特。对于患有苯丙酮尿症(PKU)的患者，应谨慎使用含苯丙氨酸的制剂。

拉泽替尼和IV埃万妥单抗

在研究期间禁止使用以下伴随药物和疗法：

任何化学疗法、抗癌疗法(拉泽替尼和IV埃万妥单抗除外)或实验性疗法。

应避免伴随使用已知对CYP3A4/A5活性具有强效诱导或抑制作用的药物、草药补充剂和/或伴随摄入对其具有该抑制作用的食物。在施用拉泽替尼之前，必须中止作为CYP3A4活性强效抑制剂的药物一段适当的时间。

拉泽替尼是P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药蛋白4(MRP4)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)和有机阳离子转运蛋白1(OCT1)的抑制剂。因此，不建议伴随服用含有P-gp、MRP4、BCRP或OCT1底物的药物、草药补充剂和/或伴随摄入含有该底物的食物。

拉泽替尼有可能对CYP3A4产生可逆的、时间依赖性的抑制作用。在施用拉泽替尼之前，必须中止对CYP34A底物药物的伴随使用。

疗效评价

主要目的是评估甲氨蝶呤、孟鲁司特或地塞米松在拉泽替尼和IV埃万妥单抗输注之前的预防功效，以减少首次剂量IRR。主要终点是在施用拉泽替尼和IV埃万妥单抗联合疗法之后第1周期第1天发生的IRR的比率。IRR的体征和症状可包括发冷、呼吸困难、潮红、恶心、胸部不适、呕吐、心动过速、低血压和/发烧。

在IV埃万妥单抗输注期间，应定期对受试者进行临床监测(包括输注开始之前的评估)。应当在IV埃万妥单抗施用之前30分钟内测量生命体征。在第1周期第1天，还应在IV埃万妥单抗施用之后2小时±15分钟测量生命体征。监测应当包括脉搏/心率、血压、体温、呼吸速率和氧饱和度测量。

次要终点是根据NCI CTCAE标准5.0版的定义，在第1周期第1天出现的与IRR体征和症状(发冷、呼吸困难、潮红、恶心、胸部不适、呕吐、心动过速、低血压、发烧)相关联的单个AE的比率和严重程度、这些AE在后续最多至3个月的施用期间的比率和严重程度、输注相关反应的严重程度、其他AE的发生率，以及埃万妥单抗前输注药物、IV埃万妥单抗输注、埃万妥单抗后输注药物的中值输注持续时间，研究者评估肿瘤反应和反应持续时间。

该研究不作为背景抗癌疗法(IV埃万妥单抗和拉泽替尼)的衡量标准，然而，将根据RECIST 1.1版标准(《欧洲癌症杂志》45(2009)228-247)对实体瘤的应答进行评估。

安全性评价

研究治疗(甲氨蝶呤、孟鲁司特和地塞米松)的安全性将通过体检、临床实验室试验、生命体征、心电图、不良事件(AE)监测和伴随药物使用进行评估。

背景抗癌疗法(IV埃万妥单抗和拉泽替尼)的安全性将通过体检、临床实验室试验、生命体征、心电图、不良事件(AE)监测和伴随药物使用进行评估。

在治疗的前三个月期间并且直到研究结束前，将对受试者进行主动安全性监测；在开放标签期间，研究机构可根据当地惯例对受试者进行被动安全性监测，以评估疾病和监测安全性。

统计方法

本研究的主要假设是通过使用地塞米松、甲氨蝶呤或孟鲁司特进行预防性治疗，第1周期第1天的IV埃万妥单抗IRR的发生率将会减少。

在本研究中，将针对每个预防群组的单侧替代方案对真实IRR率为0.67或更高的零假设进行测试。

在确定样品量时，将对每个群组分别采用西蒙两阶段设计(西蒙，1989)。每个群组都可被扩展。

主要终点是在施用拉泽替尼和IV埃万妥单抗联合疗法之后第1周期第1天发生的IRR的比率。对IRR比率的主要分析将在最后一名受试者接受第一次输注之后或在研究结束时进行，以先发生者为准。经治疗的受试者群体将用于主要分析。将估算出各群组的IRR比率和95％置信区间。

次要终点是在第1周期第1天出现的IRR的单个AE体征和症状(发冷、呼吸困难、潮红、恶心、胸部不适、呕吐、心动过速、低血压、发烧)的比率和严重程度、在后续最多至3个月的IV埃万妥单抗施用期间的比率和严重程度、输注相关反应的严重程度、其他不良事件的发生率、后续施用之后的IRR比率，埃万妥单抗前输注药物、IV埃万妥单抗输注、埃万妥单抗后输注药物的中值输注持续时间，研究者评估ORR和反应持续时间。

对具有确认的最佳总体反应的ORR的次要终点分析将在最后一名受试者接受第一次输注后大约12周或在研究结束时进行，以先发生者为准。ORR被定义为实现完全反应(CR)或部分反应(PR)的受试者的百分比，其中PR或CR如研究者使用RECIST 1.1版的评估结果所定义。观察到的ORR连同其双侧精确95％置信区间(CI)将视情况针对每个群组呈现。

反应持续时间将使用卡普兰-梅尔分析(Kaplan-Meier)方法被估算并且被计算为从CR或PR的初始反应到进行性疾病(PD)或由于基础疾病而导致的死亡的时间，以先发生者为准，仅针对实现CR或PR的受试者。

Claims (34)

1.一种减少使用抗表皮生长因子受体(EGFR)/肝细胞生长因子受体(c-Met)抗体治疗的受试者的输注相关反应(IRR)的发生率或严重程度的方法，所述方法包括：向所述受试者施用

a)地塞米松，

b)孟鲁司特，或

c)甲氨蝶呤。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述抗体包含：

a)特异性结合EGFR的第一结构域，所述第一结构域包含分别为SEQ ID NO:1、2、3、4、5和6的重链互补决定区1(HCDR1)、HCDR2、HCDR3、轻链互补决定区1(LCDR1)、LCDR2和LCDR3氨基酸序列；以及

b)特异性结合c-Met的第二结构域，所述第二结构域包含分别为SEQ ID NO:7、8、9、10、11和12的HCDR1、HCDR2、HCDR3、LCDR1、LCDR2和LCDR3氨基酸序列。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述第一结构域包含SEQ ID NO:13的重链可变区(VH)和SEQ ID NO:14的轻链可变区(VL)，并且所述第二结构域包含SEQ ID NO:15的VH和SEQ ID NO:16的VL。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中所述抗体为IgG1同种型。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中所述抗体包含SEQID NO:17的第一重链(HC1)、SEQ ID NO:18的第一轻链(LC1)、SEQ ID NO:19的第二重链(HC2)和SEQ ID NO:20的第二轻链(LC2)。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述抗体是分离的双特异性抗体。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述双特异性抗体为埃万妥单抗。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中所述抗体以约1,050mg、约1,400mg、约1,600mg或约2,240mg的剂量施用。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述抗体以约1,400mg的剂量施用。

10.根据权利要求8所述的方法，其中所述抗体以约1,050mg的剂量施用。

11.根据权利要求8所述的方法，其中所述抗体以约1,600mg的剂量施用。

12.根据权利要求8所述的方法，其中所述抗体以约2,240mg的剂量施用。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，其中所述抗体每周施用一次或每两周施用一次。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述抗体在前4周内每周施用一次，并且然后每2周施用一次。

15.根据权利要求1至14中任一项所述的方法，其中所述抗体作为单一疗法施用。

16.根据权利要求1至15中任一项所述的方法，其中使用所述抗EGFR/c-Met抗体治疗的所述受试者被进一步施用一种或多种化学治疗剂。

17.根据权利要求16所述的方法，其中所述一种或多种化学治疗剂包括酪氨酸激酶抑制剂(TKI)。

18.根据权利要求17所述的方法，其中所述一种或多种化学治疗剂包括拉泽替尼。

19.根据权利要求17所述的方法，其中所述一种或多种化学治疗剂包括奥希替尼。

20.根据权利要求1至19中任一项所述的方法，其中在施用所述抗EGFR/c-Met抗体之前7天至3天之间施用甲氨蝶呤。

21.根据权利要求20所述的方法，其中甲氨蝶呤以25mg的剂量施用。

22.根据权利要求1至19中任一项所述的方法，其中在施用所述抗EGFR/c-Met抗体之前4天开始每天施用孟鲁司特。

23.根据权利要求22所述的方法，其中孟鲁司特施用5次。

24.根据权利要求23所述的方法，其中孟鲁司特以10mg的剂量施用。

25.根据权利要求20至24中任一项所述的方法，还包括在施用所述抗EGFR/c-Met抗体的第一天和第二天施用IV地塞米松，其中在施用所述抗EGFR/c-Met抗体之前45分钟至60分钟施用地塞米松。

26.根据权利要求25所述的方法，其中IV地塞米松以10mg的剂量施用。

27.根据权利要求1至19中任一项所述的方法，其中在施用所述抗EGFR/c-Met抗体之前1天施用口服地塞米松。

28.根据权利要求27所述的方法，其中口服地塞米松以8mg的日总剂量施用。

29.根据权利要求27至28中任一项所述的方法，还包括在施用所述抗EGFR/c-Met抗体的第一天和第二天施用IV地塞米松，其中IV地塞米松以介于10mg至20mg之间的剂量施用。

30.根据权利要求1至29中任一项所述的方法，还包括施用具有抗组胺剂、退热剂或糖皮质素中的一种或多种的前驱药。

31.根据权利要求30所述的方法，其中所述前驱药包含苯海拉明。

32.根据权利要求31所述的方法，其中所述苯海拉明以25mg至50mg的剂量施用。

33.根据权利要求30所述的方法，其中所述前驱药包含对乙酰氨基酚。

34.根据权利要求33所述的方法，其中所述对乙酰氨基酚以650mg至1,000mg的剂量施用。