[go: up one dir, main page]

CN118678948A - 粉末组合物 - Google Patents

粉末组合物 Download PDF

Info

Publication number
CN118678948A
CN118678948A CN202280091545.0A CN202280091545A CN118678948A CN 118678948 A CN118678948 A CN 118678948A CN 202280091545 A CN202280091545 A CN 202280091545A CN 118678948 A CN118678948 A CN 118678948A
Authority
CN
China
Prior art keywords
nitrite
particles
proton source
solution
solid powder
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202280091545.0A
Other languages
English (en)
Inventor
H·S·芒罗
N·布特
A·霍纳
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Trio Healthcare Ltd
Original Assignee
Trio Healthcare Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Trio Healthcare Ltd filed Critical Trio Healthcare Ltd
Publication of CN118678948A publication Critical patent/CN118678948A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1617—Organic compounds, e.g. phospholipids, fats
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/04—Nitro compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/141—Intimate drug-carrier mixtures characterised by the carrier, e.g. ordered mixtures, adsorbates, solid solutions, eutectica, co-dried, co-solubilised, co-kneaded, co-milled, co-ground products, co-precipitates, co-evaporates, co-extrudates, co-melts; Drug nanoparticles with adsorbed surface modifiers
    • A61K9/143—Intimate drug-carrier mixtures characterised by the carrier, e.g. ordered mixtures, adsorbates, solid solutions, eutectica, co-dried, co-solubilised, co-kneaded, co-milled, co-ground products, co-precipitates, co-evaporates, co-extrudates, co-melts; Drug nanoparticles with adsorbed surface modifiers with inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/141—Intimate drug-carrier mixtures characterised by the carrier, e.g. ordered mixtures, adsorbates, solid solutions, eutectica, co-dried, co-solubilised, co-kneaded, co-milled, co-ground products, co-precipitates, co-evaporates, co-extrudates, co-melts; Drug nanoparticles with adsorbed surface modifiers
    • A61K9/145—Intimate drug-carrier mixtures characterised by the carrier, e.g. ordered mixtures, adsorbates, solid solutions, eutectica, co-dried, co-solubilised, co-kneaded, co-milled, co-ground products, co-precipitates, co-evaporates, co-extrudates, co-melts; Drug nanoparticles with adsorbed surface modifiers with organic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/1641—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poloxamers
    • A61K9/1647—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1682—Processes
    • A61K9/1694—Processes resulting in granules or microspheres of the matrix type containing more than 5% of excipient
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5005—Wall or coating material
    • A61K9/501—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5005—Wall or coating material
    • A61K9/5015—Organic compounds, e.g. fats, sugars
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5005—Wall or coating material
    • A61K9/5021—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/5031—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poly(lactide-co-glycolide)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5089—Processes

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

一种固体粉末组合物，其包含：(i)一个或多个含有亚硝酸盐和质子源的粒子；或(ii)粒子附聚物，其中所述粒子附聚物包括一个或多个含有亚硝酸盐的粒子和一个或多个含有质子源的粒子。还公开了包含所述固体粉末组合物的药物组合物、生产所述固体粉末组合物的方法、使用所述固体粉末组合物的治疗方法、包含所述固体粉末组合物的材料和装置、其制造方法和将其植入人体或动物体内的方法。

Description

粉末组合物
本发明涉及包括亚硝酸盐和质子源的粉末组合物。本发明还涉及制备这样的粉末组合物的方法、包括所述粉末组合物的产品、所述粉末组合物在产品中的用途以及涉及所述粉末组合物的治疗方法。
背景
一氧化氮(NO)和一氧化氮前体已经作为潜在药剂被广泛研究。在一氧化氮、其它氮氧化物及其前体的高效生成和递送至生物体和细胞以进行治疗方面仍然存在实质性问题。用于生成一氧化氮的广泛采用的系统依赖于使用质子源(如酸)酸化亚硝酸盐以最初产生亚硝酸(HNO2)，该亚硝酸然后容易分解成一氧化氮和硝酸根以及氢离子和水。该分解可以由以下平衡方程式(1)表示：
3 HNO2→2 NO+NO3 -+H++H2O (1)
酸和亚硝酸盐通常作为预定浓度的单独水溶液提供。这两种溶液因此作为双组分体系提供，以使这两种单独的溶液能够在需要时组合以防止在需要之前释放一氧化氮。
在需要时组合双组分体系具有在组合这两种组分时引入例如剂量不准确性的可能性。希望作为单组分提供亚硝酸盐和酸化源。此外，单组分产品的提供可以减少包装。但是，在亚硝酸盐的酸化中的传统双组分溶液方法不能作为单组分体系提供，因为该体系在制造阶段会损失相当大比例的一氧化氮，并且有可能在需要阶段无法提供足够的一氧化氮。
发明概述
本发明人不仅试图提供用于通过亚硝酸盐的酸化递送一氧化氮的单组分体系，而且试图提供固体形式的这种体系，其在该固体形式与水性环境接触时递送显著量的一氧化氮。
最一般地，本发明提供一种固体粉末组合物，其包含固体形式的亚硝酸盐和质子源，并且其中至少一部分亚硝酸盐和至少一部分质子源在分散到介质中或表面上时不可分离。以这种方式，至少一部分亚硝酸盐和至少一部分质子源保持紧密靠近(或紧密结合)，以在与水性环境接触时提供亚硝酸盐的酸化。
可以通过将质子源的溶液与亚硝酸盐源的溶液混合并在亚硝酸盐发生显著酸化之前除去溶剂来生产粉末组合物。以这种方式，该组合物可以含有一个或多个粒子，其在同一粒子中含有有效量的亚硝酸盐和质子源。
作为替代方案，可以通过将一个或多个含有亚硝酸盐的粒子和一个或多个含有质子源的粒子组合以使至少一部分亚硝酸盐和至少一部分质子源在分散到介质中时不可分离来生产粉末组合物。
在第一个方面，本发明提供一种固体粉末组合物，其包含：
(i)一个或多个含有亚硝酸盐和质子源的粒子；或
(ii)粒子附聚物，其中所述粒子附聚物包括一个或多个含有亚硝酸盐的粒子和一个或多个含有质子源的粒子。
在第二个方面，本发明提供一种固体粉末组合物，其包含：
(i)通过在小于一秒内(例如通过喷雾干燥)和/或在反应延迟条件下(例如通过冷冻干燥)从含有亚硝酸盐溶液和质子源溶液的混合物中除去溶剂而形成的一个或多个粒子；或
(ii)将含亚硝酸盐的固体与含质子源的固体组合以形成粒子附聚物，其中所述粒子附聚物包括一个或多个含有亚硝酸盐的粒子和一个或多个含有质子源的粒子。
将含亚硝酸盐的固体与含质子源的固体组合以形成粒子附聚物可以例如如下实现：(a)将一个或多个亚硝酸盐粒子和一个或多个质子源粒子共混，其中所述亚硝酸盐粒子通过喷雾干燥亚硝酸盐溶液形成，并且所述质子源粒子通过喷雾干燥质子源溶液形成；或(b)通过亚硝酸盐固体与质子源固体一起微粉化而形成一个或多个粒子。
在第三个方面，本发明提供一种固体粉末组合物，其包含涂覆在疏水材料中的粒子，其中所述涂覆粒子是：
(i)含有亚硝酸盐和质子源并用疏水材料涂覆的粒子；和/或
(ii)用疏水材料涂覆的粒子附聚物，并且所述粒子附聚物包括(a)含有亚硝酸盐和质子源的粒子和/或(b)一个或多个含有亚硝酸盐的亚硝酸盐粒子和一个或多个含有质子源的质子源粒子的混合物。
以这种方式，涂覆粒子在同一涂层内包括亚硝酸盐和质子源。
在第四个方面，本发明提供一种药物组合物，其包括第一、第二或第三个方面的固体粉末组合物和任选一种或多种赋形剂和/或辅助剂。
在第五个方面，本发明提供一种生产固体粉末组合物的方法，所述方法包括以下步骤：在亚硝酸盐溶液和质子源溶液混合之后小于30秒内(例如通过喷雾干燥)除去溶剂以形成固体，和/或在溶剂去除过程中以及在混合亚硝酸盐溶液和质子源溶液之前、期间和/或之后立即提供反应延迟条件(例如冷冻干燥)。
在第六个方面，本发明提供一种生产固体粉末组合物的方法，所述方法包括步骤：
(i)喷雾干燥或冷冻干燥亚硝酸盐溶液以形成亚硝酸盐粒子；
(ii)喷雾干燥或冷冻干燥质子源溶液以形成质子源粒子；和
(iii)将所述亚硝酸盐粒子和所述质子源粒子共混。
在第七个方面，本发明提供一种生产固体粉末组合物的方法，所述方法包括将亚硝酸盐固体与质子源固体一起微粉化以生产固体粉末组合物的步骤。
在第八个方面，本发明提供一种制备固体粉末组合物的方法，所述固体粉末组合物包含涂覆在疏水材料中的粒子，所述方法包括以下任一步骤：
(i)用疏水材料涂覆含有亚硝酸盐和质子源的粒子；或
(ii)将一个或多个含有亚硝酸盐的亚硝酸盐粒子和一个或多个含有质子源的质子源粒子组合以形成含有亚硝酸盐粒子和质子源粒子的粒子附聚物，然后涂覆所述粒子附聚物。
在第九个方面，本发明提供根据第一、第二或第三个方面的固体粉末组合物或根据第四个方面的药物组合物，其用在治疗或预防呼吸系统疾病或障碍的方法中。
在第十个方面，本发明提供一种治疗或预防呼吸系统疾病或障碍的方法，所述方法包括施用治疗有效量的根据第一、第二或第三个方面的固体粉末组合物或根据第四个方面的药物组合物。
在第十一个方面，本发明提供一种材料，其包含基材和根据第一、第二或第三个方面的固体粉末组合物，其中将所述固体粉末组合物的粒子掺入或包封到所述基材中。
在第十二个方面，本发明提供一种将根据第一或第二个方面的固体粉末组合物掺入或包封到基材中的方法，所述方法包括步骤：(i)将根据第一、第二或第三个方面的固体粉末组合物与含有基材或基材前体的非水性或非极性液体混合以形成液体-粒子混合物，和(ii)固化所述液体-粒子混合物以形成掺有或包封第一、第二或第三个方面的固体粉末组合物的材料。
在第十三个方面，本发明提供一种材料或装置，其中所述材料或装置包括基材和在所述基材的外表面上的喷雾干燥涂层，所述喷雾干燥涂层由含有亚硝酸盐溶液和质子源溶液的混合物的喷雾干燥形成。
在第十四个方面，本发明提供一种材料或装置，其中所述材料或装置包括基材和在所述基材的外表面上的涂层，所述涂层是含有亚硝酸盐和质子源的均质固体。
在第十五个方面，本发明提供一种提供材料或装置的方法，所述方法包括将含有亚硝酸盐溶液和质子源溶液的混合物喷雾干燥到基材的外表面上以提供所述材料或装置的步骤。
在第十六个方面，本发明提供一种将根据第十四或第十五个方面的材料或装置植入人体或动物体内的方法。
详述
现在更详细地描述本发明。实施例和以下附图提供本发明的示例。
图1显示实施例1A、2、3和4的粉末在具有Hanks平衡盐溶液和pH指示剂(酚红)的琼脂糖上的沉积模式。
图2显示实施例1A、2、3和4的累积NO生成。
图3显示通过图像分析系统量化的用实施例1B和6A处理的HUVEC球状体的萌发强度(sprouting intensity)，以测定相对于基础对照的每球状体的累积萌发长度(CSL)。
图4显示如本文所述的喷雾干燥粉末的SEM图像。
图5显示如本文所述的喷雾干燥粉末的EDX分析。
图6显示对于如本文所述的喷雾干燥粉末，在x2000的显微镜放大倍率下，氮(绿色)相对于背散射电子图像(BSE)和氮相对于碳(蓝色)的EDX图。
一种或多种亚硝酸盐与质子源之间的生成一氧化氮、任选其它氮氧化物和/或任选其前体的反应在本文中称为“NOx生成反应”或“生成NOx的反应”或类似措辞，并且“NOx”用于指亚硝酸盐的酸化产物，特别是一氧化氮、其它氮氧化物及其前体，单独地和以任何组合共同地。要理解的是，生成的NOx的各组分可以作为气体析出，或者可以溶解在反应混合物中，或者可以最初溶解并随后作为气体析出，或其任何组合。
术语“约”在本文中用于表示数值不是严格限制性的，并且技术人员将理解的是，该值可以根据技术人员对该值的理解在精确值之上或之下(视情况而定)延伸。术语“约”可以表示该值的最多±10％的值。
除非另有说明，如本文所述的粒度是指体积平均直径(VMD)。
固体粉末组合物
本发明的固体粉末组合物包括亚硝酸盐和质子源。以这种方式，该固体粉末组合物可以在暴露于水性环境或大气中的水分时通过亚硝酸盐的酸化而释放一氧化氮。
亚硝酸盐
对亚硝酸盐的选择没有特别限制。亚硝酸盐可选自一种或多种碱金属亚硝酸盐或碱土金属亚硝酸盐。例如，所述一种或多种亚硝酸盐可选自LiNO2、NaNO2、KNO2、RbNO2、CsNO2、FrNO2、AgNO2、Be(NO2)2、Mg(NO2)2、Ca(NO2)2、Sr(NO2)2、Mn(NO2)2、Ba(NO2)2、Ra(NO2)2及其任何混合物。亚硝酸盐可以是NaNO2或KNO2。亚硝酸盐可以是NaNO2。
亚硝酸盐可以是可药用等级的亚硝酸盐。换言之，亚硝酸盐可以遵循关于亚硝酸盐的一个或多个有效药典专论。例如，亚硝酸盐可以遵循美国药典(USP)、欧洲药典或日本药典中的一种或多种的亚硝酸盐专论。
特别地，所用的亚硝酸盐可具有如WO 2010/093746的段落[0032]至[0060]和/或段落[0204]中的表1中提供的一种或多种特征，其公开内容整体经此引用并入本文。
质子源
质子源可以是能够充当用于亚硝酸盐的酸化的质子源的任何物类。对质子源的选择没有特别限制。质子源可以是例如酸。
酸可以选自一种或多种有机羧酸或有机非羧酸类还原酸。
表述“有机羧酸”在本文中是指在分子中含有一个或多个-COOH基团的任何有机酸。有机羧酸可以是直链或支链的。该羧酸可以是饱和或不饱和的。该羧酸可以是脂族或芳族的。该羧酸可以是无环或环状的。该羧酸可以是插烯羧酸。
该有机羧酸可带有一个或多个取代基，例如一个或多个羟基。可用于本公开的羟基取代的有机羧酸的实例包括α-羟基-羧酸、β-羟基-羧酸和γ-羟基-羧酸。
表述“有机非羧酸类还原酸”在本文中是指在分子中不含-COOH基团的任何有机还原酸。有机非羧酸类还原酸可以是直链或支链的。该非羧酸类还原酸可以是饱和或不饱和的。该非羧酸类还原酸可以是脂族或芳族的。该非羧酸类还原酸可以是无环或环状的。该非羧酸类还原酸可以是插烯物。
该有机非羧酸类还原酸可带有一个或多个取代基，例如一个或多个羟基。可用于本公开的羟基取代的有机非羧酸类还原酸的实例包括酸性还原酮，例如还原酸(reducticacid)(2,3-二羟基-2-环戊酮)。
所述一种或多种有机羧酸或非羧酸类还原酸可具有小于约7的pKa1。
所述一种或多种有机羧酸可包含一种或多种还原性羧酸、由一种或多种还原性羧酸组成、或是一种或多种还原性羧酸。该有机羧酸可以例如选自水杨酸、乙酰水杨酸、乙酸、柠檬酸、乙醇酸、扁桃酸、酒石酸、乳酸、马来酸、苹果酸、苯甲酸、甲酸、丙酸、α-羟基丙酸、β-羟基丙酸、β-羟基丁酸、β-羟基-β-丁酸、萘甲酸、油酸、棕榈酸、双羟萘酸(pamoic acid)(扑酸(emboic acid))、硬脂酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、葡庚糖酸、葡糖醛酸、乳糖酸(lactobioic acid)、肉桂酸、丙酮酸、乳清酸、甘油酸、甘草酸、山梨酸、透明质酸、海藻酸、草酸、其盐及其组合。
该有机羧酸可以是柠檬酸或其盐。
该羧酸可以是或包含聚合型或聚合的羧酸，例如聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸、丙烯酸和甲基丙烯酸的共聚物、聚乳酸、聚乙醇酸或乳酸和乙醇酸的共聚物。本文所用的术语“有机羧酸”也涵盖有机羧酸的部分酯或完全酯或其部分盐或完全盐，条件是这些可充当根据本发明使用的质子源。
该有机非羧酸类还原酸可以例如选自抗坏血酸；抗坏血酸棕榈酸酯(ascorbatepalmitic acid)(ascorbyl palmitate)；抗坏血酸衍生物，如3-O-乙基抗坏血酸、其它3-烷基抗坏血酸、6-O-辛酰抗坏血酸、6-O-十二烷酰抗坏血酸、6-O-十四烷酰抗坏血酸、6-O-十八烷酰抗坏血酸和6-O-十二烷二酰抗坏血酸；酸性还原酮如还原酸(reductic acid)；异抗坏血酸；其盐；及其组合。
有机非羧酸类还原酸可以是抗坏血酸或其盐。
质子源的所述一种或多种有机羧酸或有机非羧酸类还原酸可以合适地与其共轭碱一起存在。当与水性环境接触或暴露于水性环境时，该酸及其共轭碱可以合适地形成缓冲液。该酸及其共轭碱可以以在暴露于水性环境时实现所需pH的比率提供。
可以选择缓冲体系，以在暴露于水性环境时实现所需pH并在NOx生成反应进行时保持所需pH。可以选择缓冲体系，以使该反应的pH可以在约3至9，例如约4至8的范围内。对于生理接触或与活细胞和生物体接触，该反应的pH可以在约5至约8的范围内。当存在时，共轭碱可以单独加入，或者可以通过使用酸和/或碱，例如无机酸和/或无机碱调节pH而由质子源原位生成。
质子源可以是柠檬酸/柠檬酸盐缓冲体系，例如柠檬酸/柠檬酸三钠缓冲体系。
技术人员会理解的是，可以根据固体粉末组合物的所需用途选择酸组分/质子源的选择。
固体粉末组合物中的粒子
该固体粉末组合物可包括粒子，所述粒子是：
(a)含有亚硝酸盐和质子源的粒子；和/或
(b)粒子附聚物，其中所述粒子附聚物包括一个或多个含有亚硝酸盐的亚硝酸盐粒子和一个或多个含有质子源的质子源粒子。
以这种方式，即使在粉末分散时(例如通过吸入粉末)，质子源组分和亚硝酸盐组分也可以保持紧密靠近。要理解的是，当粒子含有质子源和亚硝酸盐时，粒子可以在同一粒子内含有亚硝酸盐和质子源。
本文中的表述“附聚物”、“附聚”和“附聚在一起”是指表现出可识别的集合行为(collective behaviour)的初级粒子的聚集或集合。在本发明中，初级粒子可以是含有亚硝酸盐的亚硝酸盐粒子、含有质子源的质子源粒子或含有亚硝酸盐和质子源的粒子。在本发明中，可识别的集合行为可以是对机械分离的抵抗力，即粒子彼此粘附。
该固体组合物的粒子或附聚物可以是适合其期望用途或应用的粒度。例如，该固体组合物的粒子或附聚物可具有约10μm或更小，例如约5μm或更小、约4μm或更小、约3μm或更小、约2μm或更小或约1μm或更小的粒度。
或者，该固体组合物的粒子或附聚物可具有大于5μm的粒度。例如，该固体组合物的粒子或附聚物可具有大于50μm、大于100μm、大于250μm、大于500μm、大于750μm、大于1000μm的粒度。
该固体组合物中的亚硝酸盐与质子源的重量比可以在约1:1至约1:99的范围内，如在约1:4至约1:49或约1:7至约1:24的范围内。
该固体粉末组合物可包含另外的任选添加剂，如粘合剂或有机多元醇。
粘合剂
该固体粉末组合物可以基本不含一种或多种粘合剂。或者，该固体粉末组合物可以进一步包括一种或多种粘合剂。本文所用的“粘合剂”是指促进粒子粘附，即促进粒子附聚物形成的试剂。
合适的粘合剂可包括糖、天然粘合剂或合成或半合成聚合物粘合剂。糖物类可包括例如蔗糖或液体葡萄糖。天然粘合剂可包括例如阿拉伯树胶、黄蓍胶、明胶、淀粉糊、预胶化淀粉、海藻酸或纤维素。合成或半合成聚合物粘合剂可包括例如甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素钠、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚乙二醇(PEG)、聚乙烯醇、聚甲基丙烯酸酯。粘合剂可以是1-乙烯基-2-吡咯烷酮和乙酸乙烯酯的共聚物(共聚维酮)。粘合剂可以是微晶纤维素。
粘合剂可以以约5％w/w至约30％w/w的％w/w掺入该组合物中。例如，粘合剂可以以约10％w/w至约25％w/w的％w/w掺入该组合物中。
有机多元醇
该固体粉末组合物可以基本不含一种或多种有机多元醇。或者，该固体粉末组合物可以进一步包括一种或多种有机多元醇。当该固体粉末组合物包括一种或多种有机多元醇时，优选在涉及除去溶剂的任何加工之后(例如在喷雾干燥或冷冻干燥步骤之后)将有机多元醇添加到该组合物中。换言之，可以将多元醇添加到包括一个或多个含有亚硝酸盐和质子源的粒子的组合物中；或添加到包括一个或多个含有亚硝酸盐的粒子和/或一个或多个含有质子源的粒子的组合物中(在形成这些粒子的附聚物之前或之后)。
本文中的表述“有机多元醇”是指具有两个或更多个羟基的有机分子，其不是质子源，特别是对于亚硝酸盐反应，并且不是糖或多糖(术语“糖”和“多糖”包括寡糖、聚糖和糖胺聚糖)。有机多元醇因此具有约7以上的pKa1。
本文中的表述“有机多元醇”优选不包括还原剂。作为具有两个或更多个羟基的有机分子而不是糖或多糖的还原剂的实例是硫代甘油(例如，1-硫代甘油)、氢醌、丁基化氢醌、抗坏血酸、抗坏血酸酯、异抗坏血酸和异抗坏血酸酯。硫代甘油(例如，1-硫代甘油)、氢醌、丁基化氢醌、抗坏血酸酯和异抗坏血酸酯因此优选从表述“有机多元醇”中排除，因为它们是还原剂。无论如何，从该表述中排除抗坏血酸和异抗坏血酸，因为它们是质子源，特别是对于亚硝酸盐反应。
有机多元醇可以是环状或无环的，或者可以是一种或多种环状有机多元醇和一种或多种无环有机多元醇的混合物。例如，所述一种或多种有机多元醇可选自一种或多种被两个或更多个OH基团取代的烷烃、一种或多种被两个或更多个OH基团取代的环烷烃、一种或多种被两个或更多个OH基团取代的环烷基烷烃及其任何组合。有机多元醇可以不带有OH以外的任何取代基。
所述一种或多种有机多元醇可以是一种或多种无环有机多元醇。所述一种或多种无环有机多元醇可选自具有4、5、6、7、8、9、10、11或12个碳原子的糖醇。所述一种或多种无环有机多元醇可选自醛糖醇，例如具有4、5、6、7、8、9、10、11或12个碳原子的醛糖醇。所述一种或多种有机多元醇可以不包括皂苷、皂苷配基、类固醇或甾体糖苷。
或者，所述一种或多种有机多元醇可以是一种或多种环状有机多元醇。所述一种或多种环状有机多元醇可以是环状糖醇或环状醛糖醇。例如，所述一种或多种环状多元醇可以是具有4、5、6、7、8、9、10、11或12个碳原子的环状糖醇或具有4、5、6、7、8、9、10、11或12个碳原子的环状醛糖醇。环状多元醇的一个具体实例是肌醇。
所述一种或多种有机多元醇可具有7个或更多的羟基。所述一种或多种有机多元醇可以是具有7个或更多羟基的糖醇或醛糖醇。所述一种或多种有机多元醇可具有9个或更多的羟基。所述一种或多种有机多元醇可以是具有9个或更多羟基的糖醇或醛糖醇。所述一种或多种有机多元醇可具有20个或更少的羟基。所述一种或多种有机多元醇可以是具有20个或更少羟基的糖醇或醛糖醇。所述一种或多种有机多元醇可具有15个或更少的羟基。所述一种或多种有机多元醇可以是具有15个或更少羟基的糖醇或醛糖醇。所述一种或多种有机多元醇可具有在7至20的范围内，例如在9至15的范围内的羟基数。所述一种或多种有机多元醇可包括9、12、15或18个羟基。
所述一种或多种有机多元醇可以是包含一个或多个单糖单元和一个或多个无环糖醇单元，例如由一个或多个单糖单元和一个或多个无环糖醇单元组成的糖醇化合物。所述一种或多种有机多元醇可以是包含一个或多个单糖单元和一个或多个无环糖醇单元的直链或一个或多个单糖单元和一个或多个无环糖醇单元的支链，例如由其组成的糖醇化合物。
如本文所用的“单糖单元”是指与化合物中的至少一个其它单元(无论是另一单糖单元还是无环糖醇单元)共价连接的单糖。如本文所用的“无环糖醇单元”是指与化合物中的至少一个其它单元(无论是单糖单元还是另一无环糖醇单元)共价连接的无环糖醇。该化合物中的单元可以经由醚键连接。一个或多个单糖单元可以经由糖苷键与该化合物的其它单元共价连接。各单糖单元可以经由糖苷键与该化合物的其它单元共价连接。糖醇化合物可以是具有单糖或寡糖糖基(glycone)和无环糖醇糖苷配基(aglycone)的糖苷。
无环糖醇单元可以是具有4、5、6、7、8、9、10、11或12个碳原子的糖醇单元。无环糖醇单元可选自赤藓糖醇、苏糖醇、阿拉伯糖醇、木糖醇、核糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、半乳糖醇、岩藻糖醇、艾杜糖醇和庚七醇的单元。
一个或多个单糖单元可以是C5或C6单糖单元，即戊糖或己糖单元。各单糖单元可以是C5或C6单糖单元。一个或多个糖醇单元可以是C5或C6糖醇单元。各糖醇单元可以是C5或C6糖醇单元。
糖醇化合物可包含n个单糖单元和m个无环糖醇单元，例如可由n个单糖单元和m个无环糖醇单元组成，其中n是整数且至少为1，m是整数且至少为1，并且(n+m)不大于10。糖醇化合物可包含用一个无环糖醇单元封端的n个单糖单元的链，例如可由其组成，其中n是在1至9之间的整数。单糖单元的链可以通过糖苷键共价连接。各单糖单元可以通过糖苷键共价连接至另一单糖单元或无环糖醇单元。糖醇化合物可包含用一个无环醇单元封端的1、2或3个单糖单元的链，例如可由其组成。1个、2个、3个或每个单糖单元可以是C5或C6单糖单元。无环醇单元可以是C5或C6糖醇单元。糖醇化合物的实例包括但不限于：异麦芽酮糖醇、麦芽糖醇和乳糖醇(n＝1)；麦芽三糖醇(n＝2)；和麦芽四糖醇(n＝3)。
这样的糖醇化合物可以被描述为衍生自二糖或寡糖的糖醇。如本文所用，“寡糖”是指由3至10个单糖单元组成的糖。衍生自二糖或寡糖的糖醇可以由二糖、寡糖或多糖(例如来自水解和氢化)合成(例如通过氢化)，但不限于由二糖、寡糖或多糖合成的化合物。例如，衍生自二糖的糖醇可以由单糖和糖醇的脱水反应形成。所述一种或多种有机多元醇可以是衍生自二糖、三糖或四糖的糖醇。衍生自二糖的糖醇的实例包括但不限于异麦芽酮糖醇、麦芽糖醇和乳糖醇。衍生自三糖的糖醇的实例包括但不限于麦芽三糖醇。衍生自四糖的糖醇的实例包括但不限于麦芽四糖醇。
有机多元醇可选自赤藓糖醇、苏糖醇、阿拉伯糖醇、木糖醇、核糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、半乳糖醇、岩藻糖醇、艾杜糖醇、肌醇、庚七醇、异麦芽酮糖醇、麦芽糖醇、乳糖醇、麦芽三糖醇、麦芽四糖醇、聚糖醇(polyglycitol)及其任何组合。可以使用甘油，并且当存在时，优选与一种或多种其它有机多元醇结合，例如赤藓糖醇、苏糖醇、阿拉伯糖醇、木糖醇、核糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇、半乳糖醇、岩藻糖醇、艾杜糖醇、肌醇、庚七醇、异麦芽酮糖醇、麦芽糖醇、乳糖醇、麦芽三糖醇、麦芽四糖醇、聚糖醇或其任何组合。
许多有机多元醇含有一个或多个手性中心，因此以立体异构形式存在。有机多元醇的所有立体异构形式和光学异构体和异构体混合物旨在包括在本发明的范围内。特别地，可以使用所有手性有机多元醇的D和/或L形式及其所有混合物。
粒子附聚
粒子的附聚可以通过本领域技术人员已知的任何合适的手段实现。
粒子的附聚可以通过机械手段实现，例如通过机械地将粒子压在一起。通过机械手段的附聚可以通过亚硝酸盐粒子和质子源粒子的微粉化实现。或者，通过机械手段的附聚可以通过提供基本无静电的粒子实现。
粒子的附聚可以通过化学手段实现，例如化学促进的粘附或化学涂覆。通过化学方法的附聚可以通过附着力促进剂，例如水分实现。或者，通过化学方法的附聚可以通过将亚硝酸盐的初级粒子和质子源的初级粒子粘合在一起的涂层材料实现。先前讨论了合适的粘合剂，合适的涂层材料在下面的“涂覆粒子”部分中讨论。
涂覆粒子
该固体粉末组合物可包括用疏水材料涂覆的粒子(在本文中也称为涂覆粒子)。
涂覆粒子可包括含有亚硝酸盐和质子源并用疏水材料涂覆的单个粒子。
或者，涂覆粒子可以是用疏水材料涂覆的粒子附聚物，并且该粒子附聚物包括(a)含有亚硝酸盐和质子源的粒子和/或(b)一个或多个含有亚硝酸盐的亚硝酸盐粒子和一个或多个含有质子源的质子源粒子的混合物。
以这种方式，涂覆粒子在同一涂层内包括亚硝酸盐和质子源。
疏水材料可以是能够涂覆粒子或附聚物以使粒子或附聚物被疏水层涂覆的任何材料。疏水材料可以是聚合物材料，例如有机聚合物材料。疏水材料可以是两亲性物类，例如表面活性剂型物类，如非离子、阴离子、阳离子或两性表面活性剂型物类。疏水材料可以是例如无机矿物材料和形成3D骨架的无机矿物材料。疏水材料可以是生物相容的。疏水材料可包括聚(乳酸-共-乙醇酸)(PLGA)、二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)、硬脂酸镁和介孔二氧化硅的一种或多种。疏水材料可包含不含酸端基的聚合物材料聚(乳酸-共-乙醇酸)(PLGA)，或者可包含具有酸端基的聚合物材料聚(乳酸-共-乙醇酸)(PLGA)。
如本文所用的“表面活性剂”是指可以降低介质中的物类的表面张力或介质之间的界面张力的表面活性剂。表面活性剂物类通常具有亲水头和疏水尾。
疏水材料可以通过化学键合或通过静电力或分子间力附着到粒子或附聚物上。
当涂覆粒子或涂覆附聚物暴露于水性环境时，涂覆粒子或涂覆的粒子附聚物的涂层可影响亚硝酸盐的酸化的反应动力学，例如反应运动学。
该固体组合物的涂覆粒子或涂覆的粒子附聚物可以是适合期望用途或应用的粒度。该固体组合物的涂覆粒子或涂覆的粒子附聚物可具有约10μm或更小，例如约5μm或更小、约4μm或更小、约3μm或更小、约2μm或更小或约1μm或更小的粒度。或者，该固体组合物的涂覆粒子或涂覆附聚物可具有大于约5μm的粒度。例如，该固体组合物的粒子或附聚物可具有大于约50μm、大于约100μm、大于约250μm、大于约500μm、大于约750μm、大于约1000μm的粒度。
由含有亚硝酸盐溶液和质子源溶液的混合物形成粒子
该固体粉末组合物的粒子可以由含有亚硝酸盐溶液和质子源溶液的混合物形成。以这种方式形成的粒子应该通过在混合亚硝酸盐溶液和质子源溶液之后在短时间内(例如30秒或更短)除去溶剂，和/或在混合亚硝酸盐溶液和质子源溶液之后和为了除去溶剂而将混合物置于反应延迟条件下(例如在低于溶剂冻结点的温度下)而形成。以这种方式，从该混合物中除去溶剂，同时使亚硝酸盐的酸化最小化。因此在所得粉末组合物中可存在有效量的亚硝酸盐和质子源。
当在混合亚硝酸盐溶液和质子源溶液之后在短时间内除去溶剂时，可以在混合亚硝酸盐溶液和质子源溶液之后在30秒或更短时间内除去溶剂。在一些实例中，在混合亚硝酸盐溶液和质子源溶液之后在10秒或更短时间、5秒或更短时间、2秒或更短时间或1秒或更短时间内除去溶剂。在一些实例中，在混合亚硝酸盐溶液和质子源溶液之后在500毫秒或更短时间、100毫秒或更短时间、50毫秒或更短时间或10毫秒或更短时间内除去溶剂。
在一个实例中，可以通过喷雾干燥含有亚硝酸盐溶液和质子源溶液的混合物来形成粒子。该混合物的喷雾干燥可以使得能够在混合亚硝酸盐溶液和质子源溶液之后在30秒或更短时间内除去溶剂。材料的喷雾干燥本身是已知的。
该混合物通常是亚硝酸盐水溶液和质子源水溶液的混合物。当使用水溶液时，使混合这两种水溶液之间的时间最小化以抑制亚硝酸盐的酸化。可以在喷雾干燥发生之前将亚硝酸盐的水溶液和酸的水溶液在线混合约1至约10毫秒，例如约3至约5毫秒。喷雾干燥可以在亚硝酸盐和酸溶液混合之后立即进行。要理解的是，如所述，混合和喷雾干燥含有亚硝酸盐溶液和质子源溶液的混合物限制了质子源和亚硝酸盐组分之间的潜在反应时间。
通过喷雾干燥含有亚硝酸盐溶液和酸溶液的混合物而形成的粒子可具有约10μm或更小，例如约5μm或更小、约4μm或更小、约3μm或更小、约2μm或更小或约1μm或更小的粒度。
如所述喷雾干燥含有亚硝酸盐溶液和酸溶液的混合物可以产生固体粉末组合物，其中每个粒子含有亚硝酸盐和质子源组分。
通过喷雾干燥含有亚硝酸盐溶液和质子源溶液的混合物而形成的粒子可以是任何合适的形态。例如，通过喷雾干燥含有亚硝酸盐溶液和质子源溶液的混合物而形成的粒子可以是结晶形式或无定形形式。通过喷雾干燥含有亚硝酸盐溶液和质子源溶液的混合物而形成的粒子可以是无定形形式。
附加地或替代性地，在混合亚硝酸盐溶液和质子源溶液之前、期间或之后立即将亚硝酸盐溶液和质子源溶液的混合物置于反应延迟条件下(例如在低于溶剂冻结点的温度下)并用于除去溶剂。以这种方式，延迟亚硝酸盐的酸化，直至除去溶剂。特别地，溶剂可以是水性溶剂。
反应延迟条件的一个特定实例是混合物的温度低于溶剂的冻结点。以这种方式，可以在除去溶剂的同时减慢亚硝酸盐的酸化的反应速率。在该混合物的温度低于溶剂的冻结点的情况下，亚硝酸盐溶液和质子源溶液通常在高于溶剂的冻结点的温度下混合，然后将该混合物的温度降低至低于溶剂的冻结点。以这种方式，可以实现溶液的良好混合。
在一些实例中，溶剂去除可以在降低的气体压力下进行。特别地，溶剂去除可以在降低的气体压力下以及在低于要去除的溶剂的冻结点的温度下进行。
在反应延迟条件下除去溶剂的一种特别有用的技术是冷冻干燥(也称为“冻干”)。
应该指出，本文所用的术语“除去溶剂”和/或“干燥”是为了获得固体粉末组合物。这些术语包括但不限于完全除去溶剂。在一些实例中，固体粉末组合物可包括痕量的残余溶剂。例如，该粉末组合物可含有至多约10％的残余溶剂，例如至多约5％的残余溶剂、至多约3％的残余溶剂或至多约1％的残余溶剂。可以在初始除去溶剂后采用另外的干燥技术，如真空干燥以提供固体粉末组合物。
组合固体以形成粒子附聚物
可以通过将含亚硝酸盐的固体与含质子源的固体组合以形成粒子附聚物来形成固体粉末组合物，其中所述粒子附聚物包括一个或多个含有亚硝酸盐的粒子和一个或多个含有质子源的粒子。
将含亚硝酸盐的固体与含质子源的固体组合以形成粒子附聚物可以例如如下实现：(a)将一个或多个亚硝酸盐粒子和一个或多个质子源粒子共混，其中所述亚硝酸盐粒子通过喷雾干燥亚硝酸盐溶液形成，并且所述质子源粒子通过喷雾干燥质子源溶液形成；或(b)通过亚硝酸盐固体与质子源固体一起微粉化而形成一个或多个粒子。
共混的喷雾干燥的亚硝酸盐粒子和喷雾干燥的酸粒子
该固体粉末组合物可以是亚硝酸盐粒子和质子源粒子的共混物，其中亚硝酸盐粒子通过喷雾干燥亚硝酸盐溶液形成，并且质子源粒子通过喷雾干燥质子源溶液形成。喷雾干燥的亚硝酸盐粒子和喷雾干燥的质子源粒子可以通过本领域技术人员已知的标准手段共混以提供共混的固体粉末组合物。
喷雾干燥的亚硝酸盐粒子和喷雾干燥的质子源粒子可以以约1:1至约1:99，如在约1:4至约1:49或约1:7至约1:24的范围内的亚硝酸盐/质子源重量比共混。
喷雾干燥的亚硝酸盐粒子和喷雾干燥的质子源粒子可以共混约5至约60分钟的时间，例如约10至约40分钟的时间，或约15至约30分钟的时间。喷雾干燥的亚硝酸盐粒子和喷雾干燥的质子源粒子可以共混约20分钟的时间。
如所述通过喷雾干燥亚硝酸盐溶液和喷雾干燥酸溶液并共混这些组分而形成的粒子可具有约10μm或更小，例如约5μm或更小、约4μm或更小、约3μm或更小、约2μm或更小或约1μm或更小的粒度。
如所述喷雾干燥亚硝酸盐溶液和喷雾干燥质子源溶液并共混这些组分可产生包括粒子附聚物的固体粉末组合物，其中所述附聚物包括一个或多个含有亚硝酸盐的粒子和一个或多个含有质子源的粒子。
通过喷雾干燥亚硝酸盐溶液和喷雾干燥质子源溶液并共混这些组分而形成的粒子可以是任何合适的形态。例如，通过喷雾干燥亚硝酸盐溶液和喷雾干燥质子源溶液并共混这些组分而形成的粒子可以是结晶形式或无定形形式。通过喷雾干燥含有亚硝酸盐溶液和质子源溶液的混合物而形成的粒子可以是无定形形式。
由亚硝酸盐固体与酸固体一起微粉化而形成的粒子
可以通过亚硝酸盐固体与质子源固体一起微粉化而形成粒子。
如本文所用的表述“微粉化”是指用于将固体组合物的平均粒度降低至通常微米级内的方法。微粉化可以通过本领域技术人员已知的标准方法实现。例如，微粉化可以通过碾磨或研磨粒子或通过利用超临界流体实现。
在质子源是缓冲酸体系的情况下，质子源固体可以是两种组分——固体酸组分和固体共轭碱组分。亚硝酸盐固体和质子源固体可以以约1:1至约1:99，如在约1:4至约1:49或约1:7至约1:24的范围内，例如1:9w/w亚硝酸盐:质子源的比率微粉化。
通过亚硝酸盐固体与质子源固体一起微粉化而形成的粒子可具有约10μm或更小，例如约5μm或更小、约4μm或更小、约3μm或更小、约2μm或更小、或约1μm或更小的粒度。
如所述的亚硝酸盐溶液与质子源溶液一起的微粉化可产生含有亚硝酸盐的粒子和含有质子源的粒子的固体粉末组合物。如所述的亚硝酸盐溶液与质子源溶液一起的微粉化可产生包含附聚物的固体粉末组合物，所述附聚物包含含有亚硝酸盐的粒子和含有质子源的粒子。
通过亚硝酸盐溶液与质子源溶液一起微粉化而形成的粒子可以是任何合适的形态。例如，通过亚硝酸盐溶液与质子源溶液一起微粉化而形成的粒子可以是结晶形式或无定形形式。通过亚硝酸盐溶液与质子源溶液一起微粉化而形成的粒子可以是结晶形式。
通过微粉化形成的粒子可以包括一种或多种如上所述的任选添加剂(除了质子源和亚硝酸盐外)。特别地，通过微粉化形成的粒子可以包括如上所述的粘合剂。粘合剂可以与亚硝酸盐固体和质子源固体一起微粉化。
药物组合物
本文公开的固体粉末组合物可以包括在药物组合物中，任选与一种或多种可药用载体、赋形剂和/或辅助剂一起。当需要用于体内时，这样的载体、赋形剂和/或辅助剂可以是生理相容的。
载体和/或赋形剂的实例，例如生理相容的载体和/或赋形剂，包括但不限于乳糖、淀粉、磷酸氢钙、硬脂酸镁、糖精钠、滑石、纤维素、纤维素衍生物、交联羧甲基纤维素钠、葡萄糖、明胶、蔗糖、碳酸镁、氯化镁、硫酸镁、氯化钙等。
一般而言，根据预期的施用模式，该药物组合物含有约0.005重量％至约95重量％，优选约0.5重量％至约50重量％的本发明的组合或组合物或其组分。制备这样的剂型的实际方法是已知的，或是本领域技术人员显而易见的。
根据预期用途或施用途径，赋形剂可选自已知赋形剂，由此将反应物和/或反应产物递送至靶位点以递送一氧化氮、任选其它氮氧化物和/或任选其前体。例如，可以通过将亚硝酸盐掺入赋形剂如乳膏、洗剂和软膏基质或其它增稠剂和增粘剂(例如EudragitL100、carbopol、羧甲基纤维素或羟甲基纤维素)中来配制乳膏、洗剂和软膏。可以将质子源掺入选自carbopol、羧甲基纤维素、羟甲基纤维素、甲基纤维素、乙醇、乳糖的赋形剂中或水性基质中。如果需要形成膜，可以使用成膜赋形剂，例如丙二醇、聚乙烯吡咯烷酮(聚维酮)、明胶、瓜尔胶和虫胶。
任选的附加组分可以例如选自甜味剂、掩味剂、增稠剂、增粘剂、润湿剂、润滑剂、粘合剂、成膜剂、乳化剂、增溶剂、稳定剂、着色剂、增味剂、盐、包衣剂、抗氧化剂、药物活性剂和防腐剂。这样的组分是本领域中公知的，并且对它们的详细讨论对于本领域技术人员而言不是必需的。辅助物质如润湿剂、乳化剂、润滑剂、粘合剂和增溶剂的实例包括例如磷酸钠、磷酸钾、阿拉伯树胶、聚乙烯吡咯烷酮、环糊精衍生物、脱水山梨糖醇单月桂酸酯、三乙醇胺乙酸酯、三乙醇胺油酸酯等。甜味剂或掩味剂可以例如包括糖、糖精、阿斯巴甜、三氯蔗糖、纽甜或有益地影响味道、余味、感知的令人不快的咸味、酸味或苦味，降低口服或吸入制剂刺激接受者的倾向(例如通过引起咳嗽或咽喉痛或其它不良副作用，如可能减少递送剂量或不利地影响患者对处方治疗方案的依从性)的其它化合物。某些掩味剂可以与一种或多种亚硝酸盐形成复合物。上文已经给出增稠剂、增粘剂和成膜剂的实例。
可以掺入根据本发明的组分和组合物中或与根据本发明的组分和组合物共同施用的药物活性剂的实例包括抗生素、类固醇、麻醉剂(例如局部麻醉剂，如利多卡因(lignocaine)(lidocaine))、阿美索卡因(丁卡因)、赛罗卡因、布比卡因、丙胺卡因、ropivfacaine、苯佐卡因、mepivocaine、可卡因或其任何组合)、镇痛剂、抗炎剂(例如非甾体抗炎药(NSAID))、抗感染剂、疫苗、免疫抑制剂、抗惊厥剂、抗痴呆药、前列腺素、退热剂、anticycotics、抗银屑病药、抗病毒剂、血管扩张剂或血管收缩剂、防晒制剂(例如PABA)、镇痛剂、抗组胺剂、激素如雌激素、孕酮或雄激素、抗皮脂溢剂、心血管治疗剂如α或β阻断剂或Rogaine、维生素、皮肤软化剂、酶、肥大细胞稳定剂、杀疥螨剂、杀虱剂、角质层分离剂(keratolytics)、润滑剂、麻醉剂、洗发剂、抗痤疮制剂、烧伤治疗制剂、清洁剂、除臭剂、脱色剂、尿布疹治疗产品、润肤剂、保湿剂、光敏剂、毒葛或毒栎或漆树产品、晒伤治疗制剂、蛋白质、肽、蛋白聚糖、核苷酸、寡核苷酸(如DNA、RNA等)、矿物质、生长因子、含焦油制剂、含蜂蜜制剂(例如，含麦卢卡蜂蜜的制剂)、疣治疗制剂、湿敷料、伤口护理产品或其任何组合。
特定实例包括镇痛剂，如布洛芬、吲哚美辛、双氯芬酸、乙酰水杨酸、扑热息痛、普萘洛尔、美托洛尔和羟考酮；甲状腺释放激素；性激素，如雌激素(oestragen)、孕酮和睾酮；胰岛素；维拉帕米；加压素；氢化可的松；东莨菪碱；硝酸甘油；二硝酸异山梨酯(isosorbidedintirate)；抗组胺药，如特非那定；可乐定；尼古丁；非甾体免疫抑制药物，如环孢菌素、甲氨蝶呤、硫唑嘌呤、mycophenylate、环磷酰胺、TNF-α拮抗剂和抗IL5、-IL4Ra、-IL6、-IL13、-IL17、-IL23细胞因子单克隆抗体；抗惊厥药；和用于阿尔茨海默病、痴呆和/或帕金森病的药物，如阿朴吗啡(apamorphine)和卡巴拉汀。
如果将任选的添加剂添加到包含本文公开的固体粉末组合物的药物组合物中，这些任选添加剂可为固态，例如干燥微粒形式。
生产固体粉末组合物的方法
通过除去溶剂而生产固体粉末组合物的方法
制造固体粉末组合物的方法可以包括从亚硝酸盐溶液和质子源溶液的混合物中除去溶剂，以使得在粉末组合物形成之前的酸化最小化。
在一个实例中，该方法包括在混合亚硝酸盐溶液和质子源溶液之后在小于30秒内除去溶剂(例如通过喷雾干燥)以形成固体的步骤。
在另一个实例中，该方法包括在溶剂去除过程中以及在混合亚硝酸盐溶液和质子源溶液之前、期间和/或之后立即提供反应延迟条件(例如冷冻干燥)。
在一个实例中，该方法可以包括从含有亚硝酸盐溶液和质子源溶液的水性混合物中除去溶剂以形成固体粉末的步骤。
亚硝酸盐的水溶液可具有在约0.1M至约5M的范围内的浓度。亚硝酸盐的水溶液可具有至少约0.1M、至少约0.2M、至少约0.5M、至少约0.75M或至少约1M的浓度。亚硝酸盐的水溶液可具有至多约5M、至多约4M、至多约3M或至多约2M的浓度。例如，亚硝酸盐的水溶液可具有在约1M至约2M的范围内，如约1.5M的浓度。亚硝酸盐的水溶液可具有约6.5至约9，例如约7至约8的pH。
质子源的水溶液可具有在约0.1M至约5M的范围内的浓度。亚硝酸盐的水溶液可具有至少约0.1M、至少约0.2M、至少约0.5M、至少约0.75M或至少约1M的浓度。亚硝酸盐的水溶液可具有至多约5M、至多约4M、至多约3M或至多约2M的浓度。例如，亚硝酸盐的水溶液可具有在约0.5M至约1.5M的范围内，如约1M的浓度。柠檬酸的水溶液可具有约4至6的pH。可以使用例如无机碱如氢氧化钠调节质子源的水溶液的pH。
在一些实例中，除去溶剂的步骤在混合亚硝酸盐溶液和质子源溶液之后花费20秒或更短时间、10秒或更短时间、5秒或更短时间、2秒或更短时间或1秒或更短时间。在一些实例中，在混合亚硝酸盐溶液和质子源溶液之后在500毫秒或更短时间、100毫秒或更短时间、50毫秒或更短时间或10毫秒或更短时间内除去溶剂。
喷雾干燥
该固体粉末组合物可以通过亚硝酸盐溶液和质子源溶液的喷雾干燥生产。
可以在喷雾干燥发生之前将亚硝酸盐的水溶液和酸的水溶液在线混合约1至约10毫秒，例如约3至约5毫秒。喷雾干燥可以在亚硝酸盐和质子酸溶液混合之后立即进行。要理解的是，如所述，混合和喷雾干燥含有亚硝酸盐溶液和质子源溶液的混合物极大限制了质子源和亚硝酸盐组分之间的潜在反应时间，并且在快速除去水分时完全停止反应。
喷雾干燥可以在约60至约80℃，如约65至约75℃或约68至约70℃的出口温度下进行。喷雾干燥可以在约1至6巴的雾化压力下进行。喷雾干燥可以在约1至约5g/min，如约2g/min至约4g/m、或约3g/min的液体进料速率下进行。
反应延迟条件
作为替代方案，该方法可以包括在溶剂去除过程中以及在混合亚硝酸盐溶液和质子源溶液之前、期间和/或之后立即提供反应延迟条件(例如冷冻干燥)。
反应延迟条件的一个特定实例是混合物的温度低于溶剂的冻结点。以这种方式，可以在除去溶剂的同时减慢亚硝酸盐的酸化的反应速率。在该混合物的温度低于溶剂的冻结点的情况下，亚硝酸盐溶液和质子源溶液通常在高于溶剂的冻结点的温度下混合，然后将该混合物的温度降低至低于溶剂的冻结点。以这种方式，可以实现溶液的良好混合。
在一些实例中，溶剂去除可以在降低的气体压力下进行。特别地，溶剂去除可以在降低的气体压力下以及在低于要去除的溶剂的冻结点的温度下进行。
在反应延迟条件下除去溶剂的一种特别有用的技术是冷冻干燥(也称为“冻干”)。
在延迟反应条件下在混合亚硝酸盐溶液和质子源溶液后除去溶剂所花费的时间可为约10分钟或更短时间。在这些条件下，如此快速地除去溶剂(例如水)可能不太重要。但是，也希望在相对较短的时间范围内除去溶剂以进一步限制亚硝酸盐的酸化。在一些实例中，在反应延迟条件下在将亚硝酸盐溶液和质子源溶液混合后约8分钟或更短时间，例如约7分钟或更短时间、约6分钟或更短时间、约5分钟或更短时间、约4分钟或更短时间、约3分钟或更短时间或约2分钟或更短时间内除去溶剂。在进一步实例中，除去溶剂的步骤在混合亚硝酸盐溶液和质子源溶液后花费约1分钟或更短时间、约30秒或更短时间、约20秒或更短时间、约15秒或更短时间或约10秒或更短时间。
应该指出，本文所用的术语“除去溶剂”和/或“干燥”是为了获得固体粉末组合物。这些术语包括但不限于完全除去溶剂。在一些实例中，固体粉末组合物可包括痕量的残余溶剂。例如，该粉末组合物可含有至多约10％的残余溶剂，例如至多约5％的残余溶剂、至多约3％的残余溶剂或至多约1％的残余溶剂。可以在初始除去溶剂后采用另外的干燥技术，如真空干燥以提供固体粉末组合物。
组合粒子以形成粒子附聚物的方法
可以以多种方式实现形成包括含有亚硝酸盐的粒子和含有质子源的粒子的粒子附聚物。
在一个实例中，该方法可包括步骤：
(i)喷雾干燥或冷冻干燥亚硝酸盐溶液以形成亚硝酸盐粒子；
(ii)喷雾干燥或冷冻干燥质子源溶液以形成质子源粒子；和
(iii)将所述亚硝酸盐粒子和所述质子源粒子共混。
亚硝酸盐的水溶液可具有在约0.1M至约5M的范围内的浓度。亚硝酸盐的水溶液可具有至少约0.1M、至少约0.2M、至少约0.5M、至少约0.75M或至少约1M的浓度。亚硝酸盐的水溶液可具有至多约5M、至多约4M、至多约3M或至多约2M的浓度。例如，亚硝酸盐的水溶液可具有在约1M至约2M的范围内，如约1.5M的浓度。亚硝酸盐的水溶液可具有约6.5至约9，例如约7至约8的pH。
质子源的水溶液可具有在约0.1M至约5M的范围内的浓度。亚硝酸盐的水溶液可具有至少约0.1M、至少约0.2M、至少约0.5M、至少约0.75M或至少约1M的浓度。亚硝酸盐的水溶液可具有至多约5M、至多约4M、至多约3M或至多约2M的浓度。例如，亚硝酸盐的水溶液可具有在约0.5M至约1.5M的范围内，如约1M的浓度。柠檬酸的水溶液可具有约4至6的pH。可以使用例如无机碱如氢氧化钠调节质子源的水溶液的pH。
喷雾干燥可以在约60至约80℃，如约65至约75℃或约68至约70℃的出口温度下进行。喷雾干燥可以在约1至6巴的雾化压力下进行。喷雾干燥可以在约1至约5g/min，如约2g/min至约4g/m、或约3g/min的液体进料速率下进行。
在一些实例中，将喷雾干燥的粒子进一步干燥，例如通过真空干燥。
喷雾干燥或冷冻干燥的亚硝酸盐粒子和喷雾干燥或冷冻干燥的质子源粒子可以通过本领域技术人员已知的标准手段共混，以提供共混的固体粉末组合物。
喷雾干燥或冷冻干燥的亚硝酸盐粒子和喷雾干燥或冷冻干燥的质子源粒子可以以约1:1至约1:99，如在约1:4至约1:49或约1:7至约1:24的范围内的亚硝酸盐/质子源重量比共混。
喷雾干燥的亚硝酸盐粒子和喷雾干燥的质子源粒子可以共混约5至约60分钟的时间，例如约10至约40分钟的时间，或约15至约30分钟的时间。喷雾干燥的亚硝酸盐粒子和喷雾干燥的质子源粒子可以共混约20分钟的时间。
通过微粉化生产固体粉末组合物的方法
生产固体粉末组合物的方法可包括将亚硝酸盐固体与质子源固体一起微粉化以生产固体粉末组合物的步骤。微粉化本身是已知的。微粉化可以通过本领域技术人员已知的标准方法实现。例如，微粉化可以通过碾磨或研磨粒子或通过利用超临界流体实现。
亚硝酸盐固体可以与质子源固体一起微粉化约5至约30分钟，例如约5至约20分钟、或约5至约15分钟的时间。亚硝酸盐固体可以与质子源固体一起微粉化约10分钟的时间。
亚硝酸盐固体可以与质子源固体一起在8巴的文丘里压力和2巴的研磨压力下微粉化。
本发明人已经发现，与通过将单独微粉化的亚硝酸盐粉末和单独微粉化的质子源粉末共混形成的固体粉末组合物相比，亚硝酸盐固体与质子源固体一起(即同时)微粉化可以产生在暴露于水性环境时更好地一氧化氮的固体粉末组合物。
生产具有涂覆粒子的固体粉末组合物的方法
可以生产包含涂覆在疏水材料中的粒子的固体粉末组合物。该方法可以包括以下任一步骤：
(i)用疏水材料涂覆含有亚硝酸盐和质子源的粒子；或
(ii)将一个或多个含有亚硝酸盐的亚硝酸盐粒子和一个或多个含有质子源的质子源粒子组合，然后涂覆所述混合物。
疏水材料可以是如上所述的相同疏水材料。
可以以本领域技术人员已知的任何合适的方式涂覆粒子或粒子附聚物。
可以通过将粒子或附聚物分散在含有疏水材料的溶液中并干燥该溶液来涂覆粒子或粒子附聚物，以提供涂覆有疏水材料层的粒子或粒子附聚物。在一些实例中，该溶液包括非极性溶剂。在特定实例中，该溶液不含极性溶剂(例如甲醇)。这样的极性溶剂可溶解至少一部分粒子。特别地，该溶液可以是无水的。
疏水材料可以是例如PLGA。粒子或粒子附聚物可以与疏水材料以1:1w/w比率干燥。粒子或粒子附聚物分散或悬浮在其中的溶液可以是DCM和疏水材料的溶液。
在特定实施方案中，通过喷雾干燥来干燥粒子在疏水材料溶液中的悬浮液。粒子或粒子附聚物分散在其中的含有疏水材料的溶液可以在约28至30℃的出口温度下喷雾干燥。粒子或附聚物分散在其中的含有疏水材料的溶液可以在约1巴的雾化压力下喷雾干燥。粒子或附聚物分散在其中的含有疏水材料的溶液可以约2g/min的液体进料速率下喷雾干燥。
涂覆粒子或涂覆的粒子附聚物可具有小于约10μm，例如小于约9μm，例如小于约8μm、小于约7μm、小于约6μm或小于约5μm的粒度。
可以通过将粒子或粒子附聚物与疏水材料共混来涂覆粒子或粒子附聚物，以提供涂覆有疏水材料层的粒子或附聚物。疏水材料可以是例如DPPC、硬脂酸镁、介孔二氧化硅或其组合。粒子或附聚物可以与疏水材料以1:1w/w的比率共混。疏水材料可以在共混之前进行筛分。或者，疏水材料可以在共混之前不进行筛分。
粒子或粒子附聚物可以与疏水材料共混约10至约40分钟的时间，或约15至约30分钟的时间。喷雾干燥的亚硝酸盐粒子和喷雾干燥的质子源粒子可以共混约20分钟的时间。
水性环境
本发明的固体粉末组合物通常在与水性环境接触时释放NOx。对水性环境没有特别限制。
水性环境可以是水性生物流体，如体液。这样的体液可以包括伤口渗液、气道表面液体(如呼吸道粘液)和/或血液(如血浆、血清)。
或者，水性环境可以是无菌水溶液。水性环境可以是盐水溶液。
在一些实施方案中，固体粉末组合物可以足够吸湿以从空气中吸收水分，这足以开始释放NOx。
治疗或预防方法
治疗或预防呼吸系统疾病或障碍的方法
本发明包括治疗或预防呼吸系统疾病或障碍的方法，所述方法包括施用治疗有效量的如本文公开的固体粉末组合物或药物组合物。
此外，本发明提供如本文公开的固体粉末组合物或药物组合物，其用在治疗或预防呼吸系统疾病或障碍的方法中。
该固体组合物或药物组合物的粒子或粒子附聚物可具有适合于深肺吸入和呼吸应用的粒度。当用于治疗或预防呼吸系统疾病或障碍时，该固体粉末组合物中的粒子可具有10微米或更小的平均粒度。例如，该固体组合物或药物组合物的粒子或粒子附聚物可具有约10μm或更小，例如约5μm或更小、约4μm或更小、约3μm或更小、约2μm或更小或约1μm或更小的粒度。
可使用本发明治疗的状况可包括肺部疾病，如病毒感染，例如流感、SARS-CoV或SARS-CoV-2，肺动脉高压，移植中涉及的心脏、脑和器官的缺血再灌注损伤、慢性阻塞性肺病(COPD)(特别是肺气肿、慢性支气管炎)、哮喘，包括重症哮喘以及病毒和细菌诱导的哮喘恶化和难治性(不可逆性)哮喘，鼻内或肺部细菌感染，如肺炎、肺结核、非结核性分枝杆菌感染和其它细菌性和病毒性肺部感染，例如在呼吸道病毒感染后的继发性细菌感染。
一氧化氮诱导血管舒张的性质表征了使用本公开的固体粉末组合物或药物组合物和由其析出的NOx气体的一些治疗。
对血管舒张有反应的疾病、障碍和状况的一个特定实例包括但不限于与缺血相关的状况。
与组织缺血相关的状况包括雷诺氏综合征、严重的原发性血管痉挛和组织缺血，例如由手术、脓毒性休克、放射或外周血管疾病(例如糖尿病和其它慢性全身性疾病)引起的组织缺血。
在一些实施方案中，呼吸系统疾病或障碍可能与在待治疗的受试者体内存在一种或多种微生物相关。换言之，呼吸系统疾病或障碍可能与受试者的一种或多种微生物感染相关。由固体粉末组合物或药物组合物在暴露于水性环境时释放的NOx气体可能对潜在的宽范围的微生物具有杀生物或生物抑制作用，以实现许多抗微生物治疗。微生物可以例如是选自细菌细胞、病毒粒子和/或真菌细胞或微寄生物的任何一种或多种，并且可以是个体细胞、生物体或菌落。
当微生物存在于人或其它动物的细菌感染、真菌感染、病毒或微寄生物感染中时，该感染可以例如在疾病如普通感冒、流感、结核病、SARS、COVID-19、肺炎或麻疹的情况下。
细菌可以是致病菌物种。微生物感染可以是由致病菌物种引起的感染，包括革兰氏阳性和革兰氏阴性、需氧和厌氧、抗生素敏感和抗生素耐药细菌。
可以使用本发明靶向的细菌物种的实例包括放线菌属(Actinomyces)、芽孢杆菌属(Bacillus)、巴尔通氏体属(Bartonella)、Bordetalla、疏螺旋体属(Borrelia)、布鲁氏菌属(Brucella)、弯曲杆菌属(Campylobacter)、衣原体属(Chlamydia)、嗜衣原体属(Chlamydophila)、梭菌属(Clostridium)、棒状杆菌属(Corynebacterium)、肠球菌属(Enterococcus)、埃希氏菌属(Escherichia)、弗朗西斯氏菌属(Francisella)、嗜血杆菌属(Haemophilus)、螺杆菌属(Heliobacter)、军团菌属(Legionella)、钩端螺旋体属(Leptospira)、李斯特菌属(Listeria)、分枝杆菌属(Mycobacterium)、支原体属(Mycoplasma)、奈瑟氏菌属(Neisseria)、假单胞菌属(Pseudomonas)、立克次氏体属(Rickettsia)、沙门氏菌属(Salmonella)、志贺氏菌属(Shigella)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、链球菌属(Streptococcus)、密螺旋体属(Treponema)、脲原体属(Ureaplasma)、弧菌属(Vibrio)或耶尔森氏菌属(Yersinia)的物种。本发明也可以靶向其任何组合。
微生物可以是棒状杆菌属(Corynebacterium)、分枝杆菌属(Mycobacterium)、链球菌属(Streptococcus)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、假单胞菌属(Pseudomonas)或其任何组合的致病物种。
要靶向的微生物可选自以色列放线菌(Actinomyces israelii)、炭疽芽孢杆菌(Bacillus anthracis)、脆弱拟杆菌(Bacteroides fragilis)、百日咳杆菌(Bordetellapertussis)、伯氏疏螺旋体(Borrelia burgdorferi)、Borrelia garinii；Borreliaafzelii；回归热疏螺旋体(Borrelia recurrentis)；流产布鲁氏菌(Brucella abortus)；犬布鲁氏菌(Brucella canis)；羊布鲁氏菌(Brucella melitensis)；猪布鲁氏菌(Brucella suis)；空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni)；肺炎衣原体(Chlamydiapneumoniae)；沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis)；鹦鹉热嗜衣原体(Chlamydophilapsittaci)；肉毒梭菌(Clostridium botulinum)；艰难梭菌(Clostridium difficile)；产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)；破伤风梭菌(Clostridium tetani)；白喉棒状杆菌(Corynebacterium diphtheria)；犬埃里希体(Ehrlichia canis)；Ehrlichiachaffeensis；粪肠球菌(Enterococcus faecalis)；屎肠球菌(Enterococcus faecium)；大肠杆菌(Escherichia coli)，如肠产毒性大肠杆菌(Enterotoxigenic E.coli)(ETEC)、肠致病性大肠杆菌(Enteropathogenic E.coli)、肠侵袭性大肠杆菌(EnteroinvasiveE.coli)(EIEC)和肠出血性大肠杆菌(Enterohemorrhagic)(EHEC)，包括大肠杆菌O157:H7；土拉弗朗西丝菌(Francisella tularensis)；流感嗜血杆菌(Haemophilus influenza)；幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)；肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella pneumoniae)；嗜肺军团菌(Legionella pneumophila)；钩端螺旋体属(Leptospira species)；单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)；麻风分枝杆菌(Mycobacterium leprae)；结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)；脓肿分枝杆菌(Mycobacterium abscessus)；溃疡分枝杆菌(Mycobacterium ulcerans)；肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae)；淋病奈瑟氏菌(Neisseria gonorrhoeae)；脑膜炎奈瑟氏菌(Neisseria meningitides)；铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)；星状诺卡氏菌(Nocardia asteroids)；Rickettsiarickettsia；伤寒沙门氏菌(Salmonella typhi)；鼠伤寒沙门氏菌(Salmonellatyphimurium)；宋内志贺氏菌(Shigella sonnei)；痢疾志贺氏菌(Shigelladysenteriae)；金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)；表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)；腐生葡萄球菌(Staphylococcus saprophyticus)；无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)；肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)；酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes)；草绿色链球菌(Streptococcus viridans)；梅毒密螺旋体苍白亚种(Treponema pallidum subspecies pallidum)；霍乱弧菌(Vibrio cholera)；鼠疫耶尔森氏菌(Yersinia pestis)；及其任何组合。
微生物可选自肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae)、炭疽芽孢杆菌(Bacillusanthracis)、白喉棒状杆菌(Corynebacterium diphtheria)、流感嗜血杆菌(Haemophilusinfluenza)、麻风分枝杆菌(Mycobacterium leprae)、结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis)、脓肿分枝杆菌(Mycobacterium abscessus)、溃疡分枝杆菌(Mycobacterium ulcerans)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)或其任何组合。
微生物可以是抗生素耐药性或抗生素敏感性致病菌物种，或细菌物种的抗生素耐药性或抗生素敏感性菌株。一氧化氮用于治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和甲氧西林敏感性金黄色葡萄球菌(MSSA)的用途描述在例如WO 02/20026中，其公开内容经此引用并入本文。因此，可以使用本发明杀灭或治疗的抗生素耐药性或抗生素敏感性致病菌物种的实例是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)或甲氧西林敏感性金黄色葡萄球菌(MSSA)。
微生物可以是致病真菌物种。微生物感染可以是由致病真菌物种(包括致病酵母)引起的感染。
可以使用本发明靶向的真菌物种的实例包括曲霉属(Aspergillus)、芽生菌属(Blastomyces)、念珠菌属(Candida)(例如耳念珠菌(Candida auris))、球孢子菌属(Coccidioides)、隐球菌属(Cryptococcus)(特别是新型隐球菌(Cryptococcusneofromans)或Cryptococcus gattii)、Hisoplamsa、Murcomycetes、肺囊虫属(Pneumocystis)(例如耶氏肺囊虫(Pneumocystis jirovecii))、孢子丝菌属(Sporothrix)、踝节菌属(Talaromyces)的物种或其任何组合。
真菌感染的实例包括曲霉菌病(如过敏性支气管肺曲霉菌病)、足癣(tineapedis)(athlete’s foot)、由念珠菌属的致病物种引起的感染，如阴道酵母菌感染、真菌性脚趾甲感染和尿布疹、股癣(腹股沟癣)和体癣(tinea corporis)(癣(ringworm))。
微生物可以是病毒粒子。感染可以由致病性病毒引起。
可以使用本发明靶向的病毒的实例包括流感病毒、副流感病毒、腺病毒、诺如病毒、轮状病毒、鼻病毒、冠状病毒、呼吸道合胞病毒(RSV)、星状病毒和肝病毒。本发明的组合物可用于治疗或预防由选自H1N1流感病毒、传染性牛鼻气管炎病毒、牛呼吸道合胞病毒、牛副流感-3病毒、SARS-CoV、SARS-CoV-2及其任何组合的一种引起的感染。
本发明可用于治疗由病毒感染引起的疾病或障碍。本发明可以靶向的此类疾病的实例包括呼吸道病毒性疾病、胃肠道病毒性疾病、发疹性病毒性疾病、肝病毒性疾病、皮肤病毒性疾病、出血性病毒性疾病和神经病毒性疾病。
呼吸道病毒感染包括流感、鼻病毒(即普通感冒病毒)、呼吸道合胞病毒、腺病毒、冠状病毒感染(例如COVID-19)和严重急性呼吸综合征(SARS)。胃肠道病毒性疾病包括诺如病毒感染、轮状病毒感染、腺病毒感染和星状病毒感染。发疹性病毒性疾病包括麻疹、风疹、水痘、带状疱疹、玫瑰疹、天花、第五病和基孔肯雅热病毒病。肝病毒性疾病包括甲型肝炎、乙型肝炎、丙型肝炎、丁型肝炎和戊型肝炎。皮肤病毒性疾病包括疣，如生殖器疣、口腔疱疹、生殖器疱疹和传染性软疣。出血性病毒性疾病包括埃博拉、拉沙热、登革热、黄热病、马尔堡出血热(Marbug hemorrhagic fever)和克里米亚-刚果出血热。可以使用本发明靶向的神经病毒性疾病包括脊髓灰质炎、病毒性脑膜炎、病毒性脑炎和狂犬病。
微生物可以是寄生微生物(微寄生物)。感染可以由致病性寄生微生物引起。
可以使用本发明靶向的寄生微生物的实例包括原生动物。
特别地，本发明可以靶向以下原生动物群：肉足总纲(Sarcodina)(例如变形虫，例如内阿米巴属(Entamoeba)，如溶组织内阿米巴(Entamoeba histolytica)或Entamoebadispar)、鞭毛纲(Mastigophora)(例如鞭毛虫，例如贾第鞭毛虫属(Giardia)和利什曼原虫属(Leishmania))、纤毛亚门(Ciliophora)(例如纤毛虫，例如肠袋虫属(Balantidium))、孢子虫纲(Sporozoa)(例如疟原虫(Plasmodium)和隐孢子虫(Cryptosporidium))及其任何组合。
可以使用本发明治疗的寄生虫感染包括疟疾、阿米巴痢疾和利什曼病(例如皮肤利什曼病、粘膜皮肤利什曼病或内脏利什曼病)。
特别地，呼吸系统疾病或障碍可以是结核病。
受试者可以是动物或人类受试者。本文中的术语“动物”通常可包括人类；但是，当术语“动物”出现在短语“动物或人类受试者”等中时，其从上下文理解为特别是指非人类动物，或者提到“人类”仅具体是指动物可以是人类的选项以避免疑问。
受试者可以是人类受试者。人类受试者可以是婴儿或成人受试者。
受试者可以是脊椎动物受试者。脊椎动物可以是无颌纲(Class Agnatha)(无颌鱼)、软骨鱼纲(Class Chondrichthyes)(软骨鱼)、硬骨鱼纲(Class Osteichthyes)(骨鱼)、两栖纲(Class Amphibia)(两栖动物)、爬行纲(Class Reptilia)(爬行动物)、鸟纲(Class Aves)(鸟类)或哺乳纲(Class Mammalia)(哺乳动物)。受试者可以是哺乳纲或鸟纲的动物受试者。
受试者可以是家养动物物种。家养动物物种可以是以下之一：
-适应于人类小生境的共生体(例如狗、猫、豚鼠)
-为食用而寻找或养殖的猎物或农场动物(例如牛、绵羊、猪、山羊)；和
-主要用于负重用途的动物(例如马、骆驼、驴)
家养动物的实例包括但不限于：羊驼、曲角羚羊、野牛、骆驼、金丝雀、水豚、猫、牛(包括Bali cattle)、鸡、collared peccary、鹿(包括黇鹿、梅花鹿、thorold's deer和白尾鹿)、狗、驴、鸽子、鸭、大羚羊(eland)、麋鹿(elk)、鸸鹋、雪貂、大额牛(gayal)、山羊、鹅、珍珠鸡、豚鼠、greater kudu、马、美洲驼(llama)、水貂、驼鹿(moose)、小鼠、骡、麝牛(muskox)、鸵鸟、鹦鹉、猪、鸽子、鹌鹑、兔、大鼠(包括大甘蔗鼠(greater cane rat))、驯鹿、弯角剑羚(scimitar oryx)、绵羊、火鸡、水牛、牦牛和瘤牛(zebu)。
将固体粉末组合物掺入或包封到基材中
本文提供一种材料，其包含基材和本文公开的固体粉末组合物，其中将固体粉末组合物的粒子掺入或包封到基材中。以这种方式，固体粉末组合物可以被基材保持在该材料内，直至暴露于水分或水性环境。
基材可以是合成或天然聚合物物类。基材可以是例如聚己内酯、聚氨酯或聚丙烯腈。基材可以是例如纤维素。
该材料可以是纤维材料，其包含基材的纤维和掺入或包封到纤维材料中的固体粉末组合物的粒子。固体粉末组合物的粒子可以暴露或部分暴露在基材纤维的表面上，或者可以完全包封在纤维网络和纤维横截面中。
在一些实例中，基材是多孔的，并且固体粉末组合物的至少一些粒子在该基材的孔隙中。换言之，基材可以是多孔的并且浸渍有固体粉末组合物的粒子。在一些实例中，通过在基材的表面中包括孔隙而使基材是多孔的。在另一些实例中，基材可以是基材元素(如聚合物纤维)的多孔网，并且粒子在基材元素之间的空隙中。作为一个特定实例，固体粉末组合物的粒子可以浸渍到聚合物纤维网的空隙中。
固体组合物的粒子或粒子附聚物可以是适合分散在胶凝纤维中的粒度。固体组合物的粒子或附聚物可具有大于约10μm的粒度。例如，固体组合物的粒子或附聚物可具有大于约50μm、大于约100μm、大于约250μm、大于约500μm、大于约750μm、大于约1000μm的粒度。
为了实现更大的粒度，粒子或粒子附聚物可以进行造粒。“造粒”是指将微粒物类组合以形成被称为颗粒的较大粒子的工艺。造粒可以例如通过压缩粒子或附聚物来进行，以提供可破碎成颗粒的片剂。粒子或附聚物可以在约1至约10MT(公吨)下压缩，例如，可以在约3至约7MT下压缩。粒子或附聚物可以在约3.8MT下压缩。粒子或附聚物可以在约6.5MT下压缩。可以使用筛子，例如1mm筛子将片剂破碎成颗粒。
为了促进压缩，可以将粘合剂添加到粒子或附聚物中。合适的粘合剂可包括糖、天然粘合剂或合成或半合成聚合物粘合剂。糖物类可包括例如蔗糖或液体葡萄糖。天然粘合剂可包括例如阿拉伯树胶、黄蓍胶、明胶、淀粉糊、预胶化淀粉、海藻酸或纤维素。合成或半合成聚合物粘合剂可包括例如甲基纤维素、乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素(HPMC)、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素钠、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚乙二醇(PEG)、聚乙烯醇、聚甲基丙烯酸酯。粘合剂可以是1-乙烯基-2-吡咯烷酮和乙酸乙烯酯的共聚物(共聚维酮)。粘合剂可以是微晶纤维素。
粘合剂可以以约5％w/w至约30％w/w的％w/w掺入该组合物中。例如，粘合剂可以以约10％w/w至约25％w/w的％w/w掺入该组合物中。
或者，该组合物可以基本不含粘合剂。
可以通过这种方式提高粒度，以确保粒子或附聚粒子保持截留(掺入或包封)在纤维之间。
可以在生产基材时将固体粉末组合物的粒子掺入基材中。本文提供一种将根据第一或第二个方面的固体粉末组合物掺入或包封到基材中的方法，所述方法包括步骤：(i)将本文公开的固体粉末组合物与含有基材或基材前体的非极性液体混合以形成液体-粒子混合物，和(ii)固化所述液体-粒子混合物以形成掺有或包封本文公开的固体粉末组合物的材料。
可以通过将该混合物纺丝成纤维来固化液体-粒子混合物。可以使用本领域技术人员已知用于纤维纺丝的技术。例如，液体-粒子混合物可以通过干法纺丝、湿法纺丝、凝胶纺丝或静电纺丝进行固化。液体-粒子混合物可以通过静电纺丝进行固化。“静电纺丝”是指使用电力将聚合物溶液或聚合物熔体的带电线拉至纤维直径的纤维生产方法。液体-粒子混合物可以通过凝胶纺丝进行固化。“凝胶纺丝”是指依赖温度诱导的物理凝胶化进行固化的纤维生产方法。
或者，可以在基材成型后将固体粉末的粒子掺入基材中。例如，可以将固体粉末的粒子浸渍到多孔基材，如纤维网基材中。在这些实例中，基材已经成型并将固体粉末组合物添加到其中。将固体粉末组合物浸渍到多孔基材中的方法的一个特定实例包括EP2331309中描述的那些(以及可获自Fibroline France的其它技术)。
在一些实例中，如上所述的材料是局部敷料，例如创伤敷料的组分。在替代性实施方案中，该材料可以是生物可植入材料或装置，或构成生物可植入材料或装置的一部分。例如，生物可植入材料或装置可以是血管和其它支架、导管、起搏器、除颤器、心脏辅助装置、人工瓣膜、电极、矫形螺钉和销以及另一种薄的医疗和/或可植入制品。
涂覆的材料或装置
本文公开了一种材料或装置，其中所述材料或装置包括基材和在所述基材的外表面上的喷雾干燥涂层，所述喷雾干燥涂层由含有亚硝酸盐溶液和质子源溶液的混合物的喷雾干燥形成。
本文还公开了一种材料或装置，其中所述材料或装置包括基材和在所述基材的外表面上的涂层，所述涂层是含有亚硝酸盐和质子源的均质固体。
因此，本文公开了一种提供材料或装置的方法，所述方法包括将含有亚硝酸盐溶液和质子源溶液的混合物喷雾干燥到基材的外表面上以提供所述材料或装置的步骤。
该材料或装置可以是局部敷料，例如创伤敷料或绷带。
该材料或装置可以是吸入器(手持式和喷雾器)。
该材料或装置可以是生物可植入材料或装置。例如，该材料或装置可以是血管和其它支架、导管、起搏器、除颤器、心脏辅助装置、人工瓣膜、电极、矫形螺钉和销以及另一种薄的医疗和/或可植入制品。
本文公开了一种将如本文公开的材料或装置植入人体或动物体内的方法。
上文公开的优选或特定特征可以在这些特征和方面相容的情况下应用于本发明的每个方面。
实施例
固体粉末组合物的制备
材料和分析方法
以下材料获自商业来源：来自Honeywell的亚硝酸钠、来自Sigma Aldrich的柠檬酸、来自Merck的柠檬酸三钠、来自Fisher的氢氧化钠、来自Sigma Aldrich的PLGA RG502H、来自Grace的介孔二氧化硅(Syloid 244FP)、来自Avanti的二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)、来自BASF的Kollidon VA64 Fine、来自JRS Pharma的微晶纤维素和来自SigmaAldrich的二氯甲烷(DCM)。使用ELGA水净化系统制备去离子(DI)水(18.2MΩ)。
除非另有说明，使用以下分析方法。
通过Sympatec测得的干粉粒度分布(PSD)
使用配备R3透镜(0.5-175.0μm范围)/R5透镜(0.5-875.0μm范围)和ASPIROS分散单元的Sympatec HELOS粒度分析仪进行喷雾干燥粉末的激光粒度分析。使用压缩空气在3.00巴的压力和60毫巴的减压下实现分散。在湿度降低的环境(<25％RH)中用粉末填充ASPIROS玻璃管，并用石蜡膜(Parafilm)密封直至进行测量。除非另有说明，测量一式三份进行，并报告平均数据。
实施例1:喷雾干燥含有亚硝酸盐溶液和质子源溶液的混合物以形成固体粉末组 合物
通过将所需亚硝酸钠质量溶解在去离子水中而制备1.5M亚硝酸钠的进料溶液(进料溶液1)。通过将所需柠檬酸质量溶解在去离子水中并使用10M氢氧化钠水溶液将pH调节至4而制备调节至pH 4的1M柠檬酸的进料溶液(进料溶液2)。使用Mettler Toledo SevenCompact pH计测量溶液的pH。
使用配有Buchi双流体喷嘴的Buchi B290喷雾干燥器将进料溶液1和2喷雾干燥。使用分开的进料管线(铂固化的有机硅L/S14管材)同时泵送这两种进料溶液，所述进料管线使用Y形件配件和单个Masterflex蠕动泵连接，其在临雾化之前组合进料溶液。安装标准Buchi旋风分离器和收集罐以用于产物收集。
将进料溶液分两批喷雾干燥，条件如下：
实施例 出口温度(℃) 雾化压力(巴) 液体进料速率(g/min)
1A 68-70 5.5 3.06
1B 68-70 1.5 3.05
这两个批次然后都使用设定至25℃的Edwards Super Modulyo冷冻干燥器真空干燥24小时。
然后使用配备R3透镜(0.5-175.0μm范围)和ASPIROS分散单元的Sympatec HELOS粒度分析仪对这两个批次都进行粒度分布测量。使用压缩空气在3.00巴的压力和60毫巴的减压下实现分散。测量一式三份进行。
所得粒度分布测量如下：
VMD＝体积平均直径
实施例2:分开喷雾干燥亚硝酸盐和质子源，然后共混以生产固体组合物
通过将所需亚硝酸钠质量溶解在去离子水中而制备1.5M亚硝酸钠溶液。
通过将所需柠檬酸质量溶解在去离子水中并使用10M氢氧化钠水溶液将pH调节至5.6而制备调节至pH 5.6的1M柠檬酸溶液。使用Mettler Toledo Seven Compact pH计测量溶液的pH。
这些进料溶液分别使用Buchi B290喷雾干燥器在以下条件下喷雾干燥：
所有批次然后使用设定至25℃的Edwards Super Modulyo冷冻干燥器真空干燥24小时。
然后使用配备R3透镜(0.5-175.0μm范围)和ASPIROS分散单元的Sympatec HELOS粒度分析仪对这三个批次进行粒度分布测量。使用压缩空气在3.00巴的压力和60毫巴的减压下实现分散。测量一式三份进行。
喷雾干燥的亚硝酸盐固体(组分2A)和pH 5.6的喷雾干燥的柠檬酸固体(组分2C)然后以9:1w/w柠檬酸盐固体:亚硝酸盐固体的比率使用Turbula T2F混合器在46rpm下共混20分钟，以得到实施例2的粉末组合物。
实施例3:将亚硝酸盐固体与质子源固体一起微粉化以生产固体粉末组合物
亚硫酸钠、柠檬酸和柠檬酸三钠以以下重量比例组合在一起：分别为10.79％、14.74％和74.47％。该混合物使用Turbula T2F混合器在47rpm下共混10分钟。
该共混物使用Atritor M3流体能磨机在8巴的文丘里压力和2巴的研磨压力下微粉化。将共混物以～2g/min的目标进料速率直接供入料斗。在降低的湿度(20％RH)下将产生的粉末(实施例3)收集到单个收集罐中。
然后使用配备R3透镜(0.5-175.0μm范围)和ASPIROS分散单元的Sympatec HELOS粒度分析仪进行粒度分布测量。使用压缩空气在3.00巴的压力和60毫巴的减压下实现分散。测量一式三份进行。
所得粒度分布测量如下：
VMD＝体积平均直径
参比例4:亚硝酸盐和质子源分开微粉化，然后共混以生产固体组合物
亚硫酸钠使用Atritor M3流体能磨机在8巴的文丘里压力和2巴的研磨压力下微粉化。将亚硫酸钠以～2g/min的目标进料速率直接供入料斗。在降低的湿度(20％RH)下将产生的粉末(组分4A)收集到单个收集罐中。
柠檬酸和柠檬酸三钠以以下重量比例组合在一起：分别为16.51％和83.49％。该混合物使用Turbula T2F混合器在47rpm下共混10分钟。
该共混物使用Atritor M3流体能磨机在8巴的文丘里压力和2巴的研磨压力下微粉化。将共混物以～2g/min的目标进料速率直接供入料斗。在降低的湿度(20％RH)下将产生的粉末(组分4B)收集到单个收集罐中。
微粉化的亚硝酸盐固体(组分4A)和微粉化的柠檬酸固体(组分4B)然后以9:1w/w柠檬酸盐固体:亚硝酸盐固体的比率使用Turbula T2F混合器在46rpm下共混20分钟，以得到参比例4的粉末组合物。
NOx析出
将实施例1A、2、3和4加载到APTAR Unidose鼻用喷雾器(https://www.aptar.com/products/pharmaceutical/uds/)中，其支撑在陪替氏培养皿(9.8cm直径)上方30cm的支架(rig)中，所述培养皿含有琼脂糖以及Hanks平衡盐溶液和pH指示剂(酚红)。图1显示由于粒子在其着陆之处造成的局部pH调节而导致的粉末沉积模式。
在施加后立即将板转移到密封室中，并通过Single Ion Flow Tube MassSpectrometry(SIFT-MS)经15分钟测量氮氧化物(NOx)。无论其制备方法如何，所有粉末都析出一氧化氮。但是，在15分钟的过程中在四种粉末之间观察到析出的NOx总量的差异。
应该指出，琼脂糖在中性至弱碱性pH下缓冲，这应该抑制反应，但粒子能够在短时间内克服这种缓冲效应并在局部区域抵消该缓冲。下表和图2显示实施例1A、2、3和4的累积NO生成。每mg亚硝酸盐的累积NO/nmols就粉末中的亚硝酸盐％将实验结果归一化。
实施例 累积NO/nmols 累积NO/nmols.mg亚硝酸盐-1
实施例1A 2410 526
实施例3 1571 322
实施例4 562 120
实施例2 2393 552
涂覆的固体粉末组合物
实施例5:用疏水材料DPPC或介孔二氧化硅涂覆的粒子
实施例1B与介孔二氧化硅以1:1w/w的比率使用Turbula T2F混合器在46rpm下共混20分钟，以得到实施例5A的粉末组合物。
实施例1B与DPPC以1:1w/w的比率使用Turbula T2F混合器在46rpm下共混20分钟，以得到实施例5B的粉末组合物。
实施例3与介孔二氧化硅以1:1w/w的比率使用Turbula T2F混合器在46rpm下共混20分钟，以得到实施例5C的粉末组合物。
实施例3与DPPC以1:1w/w的比率使用Turbula T2F混合器在46rpm下共混20分钟，以得到实施例5D的粉末组合物。
实施例6:用PLGA涂覆的粒子
通过将1.5克PLGA溶解在约30毫升DCM中以形成澄清且无色的溶液来制备PLGA RG502H溶液。将1.5克实施例1B在搅拌下添加到这种溶液中以形成作为视觉均匀的白色悬浮液的1:1w/w比率的进料悬浮液6A。
类似地，通过将1.5克PLGA溶解在约30毫升DCM中以形成澄清且无色的溶液来制备单独的PLGA RG 502H溶液。将1.5克实施例3在搅拌下添加到这种溶液中以形成作为视觉均匀的白色悬浮液的1:1w/w比率的进料溶液6B。
这些进料悬浮液根据上文详述的方法使用Buchi B290喷雾干燥器喷雾干燥。喷雾干燥参数总结如下。
在湿度降低的环境(28％RH)中，将样品小瓶水平放置在单个称重皿中。移除盖子并用带孔(用针刺穿)的箔覆盖开口。将样品转移到设定至25℃的Edwards Super Modulyo冷冻干燥器中并真空干燥24小时(观察到的最大真空压力为～0.1毫巴)。在真空干燥后，将样品转移到低湿度(～24％RH)环境中并用氮气覆盖。然后将小瓶用石蜡膜(Parafilm)密封并密封到具有干燥剂的箔袋中以在2-8℃下储存。
然后使用配备R3透镜(0.5-175.0μm范围)和ASPIROS分散单元的Sympatec HELOS粒度分析仪进行粒度分布测量。使用压缩空气在3.00巴的压力和60毫巴的减压下实现分散。测量一式三份进行。
所得粒度分布测量如下：
VMD＝体积平均直径
实施例7:涂覆粒子的NOx析出
将粉末样品的等分试样(30mg)沉积在60mm陪替氏培养皿中。将纤维素滤纸(50mm直径)置于样品之上，并施加轻微压力。将磷酸钠溶液(10mM，250μl)分配到纤维素滤纸上。将样品立即置于650ml室中，将其密封，然后将潮湿空气以650ml/min抽吸通过该室30分钟。通过Single Ion Flow Tube Mass Spectrometry(SIFT-MS)分析来自出料的空气流。
固体粉末组合物的生物学评估
实施例8:四种制剂对铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)的功效的评估
制备含有营养琼脂(NA，可获自AcuMedia)的陪替氏培养皿并使其凝固。在磷酸盐缓冲盐水(PBS，Sigma-Aldrich)中制备铜绿假单胞菌(ATCC 9027)接种物，并连续稀释至1x105 CFU mL-1的最终浓度。将100mL接种物吸移到NA平板上，铺展，并使其在室温下干燥15分钟。从接种的琼脂平板上移除盖子，并将开放的平板置于Aptar Unidose鼻喷雾器内。
将含有实施例1A、实施例3、参比例4或实施例2粉末的Aptar递送装置连接到Aptar鼻喷雾装置上，并将粉末雾化(约50mg剂量)到琼脂平板上。下表显示用于每种制剂的实施例。
制剂1 实施例1A
制剂2 实施例3
制剂3 参比例4
制剂4 实施例2
在5秒后，更换琼脂平板盖，并将琼脂平板在37℃±2℃下培育16小时。在培育后，将平板拍照。对于所有平板，从琼脂平板中心的2x2 cm区域取三个活检穿孔。用PBS润湿的无菌拭子用于从每个活检中除去细菌，将任何细胞悬浮在10mL PBS中，然后超声处理5分钟，连续稀释并铺板到NA上。
还同时测试未暴露于雾化粉末的阴性对照平板和添加了1mL漂白剂的阳性对照平板。所有测试一式五份进行。
对于每个测试项目，随机选择三个重复试样，并使用DN easy Blood&tissue试剂盒(Qiagen)根据制造商的说明书从每个活检400μL中提取DNA。将样品在AE缓冲液中以100μL的最终体积洗脱。
对于每次提取，使用QuantiNova Pathogen和IC试剂盒(Qiagen)根据制造商的说明书一式三份进行qPCR。各个反应管含有最终浓度16μM的每种引物和5μM标记探针。
循环条件如下：50℃10min、95℃2min、35个95℃5sec的循环、55℃30sec、72℃1min。通过阳性(铜绿假单胞菌)和阴性(不含RNase的水)对照物验证每个测定运行。使用Q-Rex软件(Qiagen)分析数据以由预定阈值获得Cq值。对于每个样品，将平均Cq值与具有1x102至1x108CFU mL-1的确定范围的标准曲线进行比较，以计算以Log10CFUmL-1计的最终样品浓度。
表1:与未处理的阴性对照(N＝5)相比，在用制剂1、2、3、4和漂白剂处理之后，在接种了1x 105CFU mL-1的营养琼脂的中心获取的三个活检穿孔的铜绿假单胞菌的平均回收率和减少
SD＝标准偏差，CFU＝菌落形成单位，N/A＝不适用，*＝p<0.05，**＝p<0.01，***＝p<0.001。
从取自阴性对照平板的活检中观察到7.44±0.17Log10CFU mL-1的平均铜绿假单胞菌回收率。从取自制剂2和3的活检中观察到3.52±3.12和1.36±2.13Log10CFU mL-1的平均铜绿假单胞菌回收率。从取自制剂1和4或阳性对照平板的活检中没有回收活的铜绿假单胞菌。
表2:与未处理的阴性对照相比，在用制剂1、2、3、4和漂白剂处理之后，取自接种了1x 105CFU mL-1的营养琼脂的活检穿孔的铜绿假单胞菌的分子定量
SD＝标准偏差，CFU＝菌落形成单位.#＝定量低于检出限.～＝将阳性对照样品的定量进行至N＝1，因此无法计算标准偏差。N/A＝不适用，**＝p<0.01，***＝p<0.001。
与未处理的阴性对照相比，在用制剂1和制剂4粉末处理之后，从取自接种了1x105CFU mL-1接种物的营养琼脂平板的活检中观察到活铜绿假单胞菌的回收率的显著降低，因为没有回收活的铜绿假单胞菌。分子定量反映了菌落计数的恢复。
实施例9:在基于球状体的细胞血管生成测定中粉末组合物对人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)萌发的影响
通过涡旋和移液在基础培养基(不含补充剂和FCS)中制备实施例1B和6A的10x浓缩储备溶液/悬浮液。随后，在相同培养基中制备半对数稀释系列。
# 实施例1B[mg/mL] 实施例6A[mg/mL]
1 5.000 10.000
2 1.500 3.000
3 0.500 1.000
4 0.150 0.300
5 0.050 0.100
6 0.015 0.030
7 0.005 0.010
内皮细胞
细胞:HUVEC，原代人脐静脉内皮细胞(PromoCell,Heidelberg,Germany)，第3至4代。
形态：贴壁，鹅卵石样生长为单层
培养基：内皮细胞生长和基础培养基(ECGM/ECBM，PromoCell)
传代培养：分裂1:3；每3-5天，以约1x 104个细胞/cm2接种
培育：在37℃，5％CO2下
倍增时间：24-48小时
储存：用70％培养基、20％ FCS、10％ DMSO以约1x 106个细胞/安瓿冷冻
来源：人脐静脉，汇集供体
测试方法
在最初公布的方案(Korff和Augustin:J Cell Sci 112:3249-58,1999)的修改中进行实验。简言之，如所述(Korff和Augustin:J Cell Biol 143:1341-52,1998)通过将400HUVEC以悬滴移液在塑料皿上以允许球状体聚集过夜来制备球状体。然后将50个HUVEC球状体接种在0.9ml胶原凝胶中，并移液到24孔板的各个孔中以允许聚合。在30分钟后通过将100μl的10倍浓缩工作溶液移液到聚合凝胶之上来添加预培育的测试样品(最终测定浓度参见表1)。将平板在37℃下培育24小时，并通过添加4％ PFA(Roth,Karlsruhe,Germany)固定。
定量
通过测定每球状体的累积萌发长度(CSL)的图像分析系统定量用测试样品处理的HUVEC球状体的萌发强度。使用倒置显微镜和数字成像软件NIS-Elements BR 3.0(Nikon)拍摄单个球状体的照片。随后，将球状体照片上传到Wimasis公司的主页以进行图像分析。使用成像分析工具WimSprout测定各球状体的累积萌发长度。10个随机选择的球状体的累积萌发长度的平均值作为单个数据点进行分析。将每个一式三份试验的平均值和SD值转换为基础对照的％。
结果
图3显示实施例1B和6A相对于基础对照的CSL。实施例1B(没有涂层的喷雾干燥粒子)的效果小于基础对照。相反，与基础对照相比，实施例6A的PLGA涂覆粒子表现出显著的剂量依赖效应。这表明尽管在基本中性的环境中，但涂覆粒子提供了能够酸化亚硝酸盐的局部环境。
实施例10:喷雾干燥粉末的SEM/EDX研究
SEM/EDX用于评估各种组分的微结构及其在根据实施例1中的方法制成的粉末的最终制剂中的贡献。
实验
在取样之前将喷雾干燥的粉末储存在冰箱中。对于SEM/EDX研究的初始准备涉及将粉末喷洒到SEM试样短支柱(specimen stubs)上的碳胶粘剂盘上。随后，对于更清晰的元素映射应用，采用类似的方法，但将粉末轻轻压实。
在这两种情况下，使用具有用于元素分析的相关Bruker Quantax 200微量分析系统的FEIQuanta FEG 250environmental SEM在未涂覆的情况下和低真空模式下检查制备的试样。
结果
喷雾干燥的粉末在SEM图像中显示为观察到的离散球体，其直径主要为亚微米至约6或7微米。这些图像显示在图4中。
EDX分析再次显示存在碳、氧、钠和氮。氮的存在指示亚硝酸盐组分，而碳的存在指示柠檬酸盐的存在。EDX分析显示在图5中。
图6中的图像显示喷雾干燥制剂在x2000的显微镜放大倍率下，氮(绿色)相对于背散射电子图像(BSE)和氮相对于碳(蓝色)的EDX图。还包括相关BSE图像以识别微粒特征。在这种提高的放大倍率下，这种喷雾干燥制剂的均质性是明显的，其中单个粒子看起来表现出来自碳和氮两者的贡献。

Claims (16)

1.一种固体粉末组合物，其包含：
(i)一个或多个含有亚硝酸盐和质子源的粒子；或
(ii)粒子附聚物，其中所述粒子附聚物包括一个或多个含有亚硝酸盐的粒子和一个或多个含有质子源的粒子。
2.一种固体粉末组合物，其包含：
(i)通过喷雾干燥含有亚硝酸盐溶液和质子源溶液的混合物而形成的一个或多个粒子；
(ii)一个或多个亚硝酸盐粒子和一个或多个质子源粒子的共混物，其中所述亚硝酸盐粒子通过喷雾干燥亚硝酸盐溶液形成，并且所述质子源粒子通过喷雾干燥质子源溶液形成；或
(iii)通过亚硝酸盐固体与质子源固体一起微粉化而形成的一个或多个粒子。
3.一种固体粉末组合物，其包含涂覆在疏水材料中的粒子，其中所述涂覆粒子是：
(i)含有亚硝酸盐和质子源并用疏水材料涂覆的粒子；和/或
(ii)用疏水材料涂覆的粒子附聚物，并且所述粒子附聚物包括(a)含有亚硝酸盐和质子源的粒子和/或(b)一个或多个含有亚硝酸盐的亚硝酸盐粒子和一个或多个含有质子源的质子源粒子的混合物。
4.一种药物组合物，其包括根据权利要求1至3任一项所述的固体粉末组合物和任选一种或多种赋形剂和/或辅助剂。
5.一种生产固体粉末组合物的方法，所述方法包括喷雾干燥含有亚硝酸盐溶液和质子源溶液的混合物以形成固体粉末的步骤。
6.一种生产固体粉末组合物的方法，所述方法包括步骤：
(i)喷雾干燥亚硝酸盐溶液以形成亚硝酸盐粒子；
(ii)喷雾干燥质子源溶液以形成质子源粒子；和
(iii)将所述亚硝酸盐粒子和所述质子源粒子共混。
7.一种生产固体粉末组合物的方法，所述方法包括将亚硝酸盐固体与质子源固体一起微粉化以生产固体粉末组合物的步骤。
8.一种制备固体粉末组合物的方法，所述固体粉末组合物包含涂覆在疏水材料中的粒子，所述方法包括以下任一步骤：
(i)用疏水材料涂覆含有亚硝酸盐和质子源的粒子；或
(ii)将一个或多个含有亚硝酸盐的亚硝酸盐粒子和一个或多个含有质子源的质子源粒子组合，然后涂覆所述混合物。
9.根据权利要求1至3任一项所述的固体粉末组合物或根据权利要求4所述的药物组合物，其用在治疗或预防呼吸系统疾病或障碍的方法中。
10.一种治疗或预防呼吸系统疾病或障碍的方法，所述方法包括施用治疗有效量的根据权利要求1至3任一项所述的固体粉末组合物或根据权利要求4所述的药物组合物。
11.一种材料，其包含基材和根据权利要求1至3任一项所述的固体粉末组合物，其中将所述固体粉末组合物的粒子掺入或包封到所述基材中。
12.一种将根据第一或第二个方面的固体粉末组合物掺入或包封到基材中的方法，所述方法包括步骤：(i)将根据权利要求1至3任一项所述的固体粉末组合物与含有基材或基材前体的非水性液体混合以形成液体-粒子混合物，和(ii)固化所述液体-粒子混合物以形成掺有或包封根据权利要求1至3任一项所述的固体粉末组合物的材料。
13.一种材料或装置，其中所述材料或装置包括基材和在所述基材的外表面上的喷雾干燥涂层，所述喷雾干燥涂层由含有亚硝酸盐溶液和质子源溶液的混合物的喷雾干燥形成。
14.一种材料或装置，其中所述材料或装置包括基材和在所述基材的外表面上的涂层，所述涂层是含有亚硝酸盐和质子源的均质固体。
15.一种提供材料或装置的方法，所述方法包括将含有亚硝酸盐溶液和质子源溶液的混合物喷雾干燥到基材的外表面上以提供所述材料或装置的步骤。
16.一种将根据权利要求14或权利要求15所述的材料或装置植入人体或动物体内的方法。
CN202280091545.0A 2021-12-22 2022-12-20 粉末组合物 Pending CN118678948A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB2118842.0 2021-12-22
GB202118842 2021-12-22
PCT/GB2022/053305 WO2023118839A1 (en) 2021-12-22 2022-12-20 Powder composition

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN118678948A true CN118678948A (zh) 2024-09-20

Family

ID=80448936

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202280091545.0A Pending CN118678948A (zh) 2021-12-22 2022-12-20 粉末组合物

Country Status (6)

Country Link
US (1) US20240335386A1 (zh)
EP (1) EP4452231A1 (zh)
JP (1) JP2024545308A (zh)
CN (1) CN118678948A (zh)
AU (1) AU2022419439A1 (zh)
WO (1) WO2023118839A1 (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB202215758D0 (en) * 2022-10-25 2022-12-07 Thirty Holdings Ltd Implantable medical devices

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5648101A (en) * 1994-11-14 1997-07-15 Tawashi; Rashad Drug delivery of nitric oxide
GB0022084D0 (en) 2000-09-08 2000-10-25 Univ Aberdeen Treatment of multiply antibiotic-resistant organisms
AU2008345034A1 (en) * 2007-12-27 2009-07-09 Aires Pharmaceuticals, Inc. Aerosolized nitrite and nitric oxide - donating compounds and uses thereof
FR2933327B1 (fr) 2008-07-02 2010-08-20 Fibroline France Installation et procede d'impregnation d'un materiau poreux par de la poudre
US8568793B2 (en) 2009-02-11 2013-10-29 Hope Medical Enterprises, Inc. Sodium nitrite-containing pharmaceutical compositions
CN103622917B (zh) * 2012-08-23 2017-12-29 尼奥克斯(文莱)控股有限公司 基于微囊化亚硝酸盐和酸化水凝胶的延时产生一氧化氮的系统和方法
AU2021259360A1 (en) * 2020-04-23 2022-12-01 Thirty Respiratory Limited Nitric oxide or nitric oxide releasing compositions for use in treating SARS-CoV and SARS-CoV-2

Also Published As

Publication number Publication date
JP2024545308A (ja) 2024-12-05
AU2022419439A1 (en) 2024-07-04
WO2023118839A1 (en) 2023-06-29
US20240335386A1 (en) 2024-10-10
EP4452231A1 (en) 2024-10-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN114126629B (zh) 用于生成一氧化氮的方法和组合物及其用于经由呼吸道输送一氧化氮的用途
JP5259030B2 (ja) 薬物を含有する化合物の制御放出用の無機物−ポリマー複合体
US20240335386A1 (en) Powder composition
CN113908153B (zh) 一种布瓦西坦药物组合物、其制备方法及应用
DE102009015702A1 (de) Tabletten enthaltend Dapoxetin und Trockenverarbeitungsverfahren zu deren Herstellung
WO1999059639A1 (fr) Preparations solides pour administration orale de medicaments relatifs a des genes
SK282427B6 (sk) Pevná farmaceutická kompozícia s riadeným uvoľňovaním
EP3996748A2 (en) Smart temperature-sensitive hydrogels with antifungal property that perform controlled drug release
JPH04230324A (ja) 水分散性ポリエン抗菌性複合体
US20240336482A1 (en) Powder composition
CN117379378A (zh) 一种兽用复方阿莫西林可溶性粉及其制备工艺
DE4139883A1 (de) Verfahren zur herstellung bioadhaesiver arzneimittel
US20220313611A1 (en) Methods to prepare dry powders using suspension based thin film freezing
CN112778369B (zh) 一种三唑类衍生物及其制备方法和用途
Zhou et al. Size-tailored and acid-degradable polyvinyl alcohol microgels for inhalation therapy of bacterial pneumonia
CN116437929A (zh) 抗微生物化合物的吸入制剂
CN108210452A (zh) 一种兽用喹赛多纳米混悬液及其制备方法
CN118403035B (zh) 一种缓释酒石酸阿福特罗的雾化吸入溶液及其制备方法和应用
WO2024170896A1 (en) Wound dressings
CN108210453B (zh) 一种兽用阿奇霉素注射剂
WO2024170892A1 (en) Nitric oxide-generating compositions, kits and combinations for use in the treatment, amelioration or prevention of respiratory diseases or disorders
CN101683323A (zh) 含有万古霉素的结肠靶向微丸及其制备方法
WO2024089410A1 (en) Implantable medical devices
CN106580903B (zh) 罗红霉素缓释药物组合物
CN118717687A (zh) 一种阿奇霉素分散片及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination