CN118542450A - 一种灵芝黄芪党参菌质及其压片糖果的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发公开了一种灵芝黄芪党参菌质及其压片糖果的制备方法，灵芝黄芪党参菌质的制备方法包括菌种活化、发酵基质配制、发酵基质灭菌、接种发酵、低温烘干和粉碎过筛；压片糖果的制备方法包括原辅料混合、制粒、低温烘干和压片。本发明的菌质压片糖果，是以黄芪和党参为固态发酵基质，用灵芝发酵的菌质为主体制作的功能性混合菌质糖果，在食用时既获得菌丝体的高营养价值，又获得黄芪和党参提供的多酚物质和抗氧化能力，黄芪和党参经过灵芝发酵后，菌质整体的多酚含量和总抗氧化能力均有增加，显然改变了未发酵之前党参和黄芪的活性成分含量，为压片糖果的开发奠定了物质基础。

Description

一种灵芝黄芪党参菌质及其压片糖果的制备方法

技术领域

本发明属于食药用菌技术领域，具体涉及一种灵芝黄芪党参菌质及其压片糖果的制备方法。

背景技术

灵芝别名赤芝、红芝，为层菌纲、真菌门、灵芝菌科、多孔菌目、灵芝属真菌，灵芝中的活性物质可以调节免疫系统，延缓衰老，清除体内的氧自由基，活血化瘀，降低胆固醇和血脂，调节血糖，以及保护肝脏等重要功能。党参是桔梗科植物党参的干燥根，黄芪为多年生草本植物豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根，两者经常配伍使用。目前，灵芝、党参、黄芪都被纳入药食同源物质目录，在我国，这三者作为食疗物质使用历史悠久。本发明利用灵芝固态发酵党参和黄芪的混合物，达到提高发酵产物菌质的活性物质含量和抗氧化能力，并利用菌质生产压片糖果，满足药食同源物产品的多元化发展需求。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种灵芝黄芪党参菌质的制备方法；

本发明的目的之二是提供一种使用灵芝黄芪党参菌质制备压片糖果的方法。

为了达到上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种灵芝黄芪党参菌质的制备方法，包括如下步骤：

S1、菌种活化：

将灵芝母种接种于综合马铃薯培养基中，在25℃-28℃的黑暗环境下培养至菌丝长满斜面培养基，即得活化菌种；

S2、发酵基质配制：

发酵基质由黄芪和党参组成，黄芪的重量占总重量的25%-50%，党参的重量占总重量的50%-75%，加水调至基质的含水量达到65%，焖料8-12h；

S3、发酵基质灭菌：

将S2得到的发酵基质填装入菌种瓶，将接种棒插入菌种瓶中间，拧紧透气盖子，121℃高压灭菌90min -120min；

S4、接种发酵：

将S1得到的活化菌种转接于S3得到的发酵基质中，在25℃-28℃恒温下避光培养至白色菌丝完全吃透发酵基质；

S5、低温烘干：

将S4得到的发酵基质，置于50℃-55℃的温度条件下烘干；

S6、粉碎过筛：

将S5得到的烘干后的发酵基质粉碎，过筛，得到粉末状物质即得灵芝发酵黄芪党参菌质。

为了进一步实现本发明，S6中所述过筛采用40目筛。

一种使用灵芝黄芪党参菌质制备压片糖果的方法，包括如下步骤：

S1、原辅料混合：

原料为灵芝黄芪党参菌质，辅料包括粘结剂和甜味剂，原料的重量占总重量的25％-35％，粘结剂的重量占总重量的59％-69％，甜味剂的重量占总重量的6％，将原料和辅料混合均匀得到原辅料混合物，向原辅料混合物中加入占原辅料混合物总重量40%的食用级乙醇，搅拌均匀，制得软材；

S2、制粒：

将S1得到的软材通过40目筛挤压制成颗粒；

S3、低温烘干：

将S2得到的颗粒置于50℃-55℃下烘干；

S4、压片：

将S3得到的烘干颗粒经压片机压制成灵芝黄芪党参菌质压片糖果。

为了进一步实现本发明，S1中所述粘结剂为玉米淀粉，甜味剂为甘露醇。

本发明相较于现有技术的有益效果为：

本发明的菌质压片糖果，是以黄芪和党参为固态发酵基质，用灵芝发酵的菌质为主体，添加玉米淀粉、甘露醇、食用级乙醇等多种辅料经制粒压片成型的混合菌质糖果。

本发明的目的是用食药用菌制作一款功能性糖果，该糖果能够让人民群众便利地获得食用灵芝发酵黄芪和党参的菌质，既获得菌丝体的高营养价值，又获得黄芪和党参提供的多酚物质和抗氧化能力。菌质压片糖果的主体为灵芝发酵黄芪和党参基质一定时间后，将菌丝和发酵基质一起低温烘干、粉粹、过筛，即得菌质。经过前期菌质的生物活性、复配、压片工艺等的研究，最终发明此功能性压片糖果。

本发明发现当黄芪和党参经过灵芝发酵后，菌质整体的多酚含量和总抗氧化能力均有增加，显然改变了未发酵之前党参和黄芪的活性成分含量，为压片糖果的开发奠定了物质基础。

附图说明

图1为葡萄糖标准曲线；

图2为没食子酸标准曲线；

图3为不同比例配方培养基菌丝生长长势，其中a图表示生长第5d，b图表示生长第10d，c图表示生长第14d，d图表示生长第19d；

图4为原材料和发酵后（14d、19d）多糖含量比较，其中A图为配方三，B为配方二；

图5为原材料和发酵后（14d、19d）总酚含量比较，其中A图为配方三，B为配方二；

图6为原材料和发酵后（14d、19d）总抗氧化能力的比较，其中A图为配方三，B为配方二。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步说明。

一种灵芝黄芪党参菌质的制备方法，包括如下步骤：

S1、菌种活化：

将灵芝母种接种于综合马铃薯培养基中，在25℃-28℃的黑暗环境下培养至菌丝长满斜面培养基，即得活化菌种；

其中使用的综合马铃薯培养基包括马铃薯200g、葡萄糖20g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、维生素B₁0.01g、琼脂20g和水1000mL，pH 6.0；

S2、发酵基质配制：

发酵基质由黄芪和党参组成，黄芪的重量占总重量的25%-50%，党参的重量占总重量的50%-75%，加水调至基质的含水量达到65%，焖料8-12h；

S3、发酵基质灭菌：

将S2得到的发酵基质填装入菌种瓶，将接种棒插入菌种瓶中间，拧紧透气盖子，121℃高压灭菌90min -120min；

S4、接种发酵：

将S1得到的活化菌种转接于S3得到的发酵基质中，在25℃-28℃恒温下避光培养至白色菌丝完全吃透发酵基质；

S5、低温烘干：

将S4得到的发酵基质，置于50℃-55℃的温度条件下烘干；

S6、粉碎过筛：

将S5得到的烘干后的发酵基质粉碎，过40目筛，得到粉末状物质即得灵芝发酵黄芪党参菌质。

实施例1：

S1、菌种活化：

将灵芝母种接种于综合马铃薯培养基中，在25℃的黑暗环境下培养至菌丝长满斜面培养基，即得活化菌种；

S2、发酵基质配制：

发酵基质由黄芪和党参组成，黄芪的重量占总重量的25%，党参的重量占总重量的75%，加水调至基质的含水量达到65%，焖料8h；

S3、发酵基质灭菌：

将S2得到的发酵基质填装入菌种瓶，将接种棒插入菌种瓶中间，拧紧透气盖子，121℃高压灭菌90min；

S4、接种发酵：

将S1得到的活化菌种转接于S3得到的发酵基质中，在25℃恒温下避光培养至白色菌丝完全吃透发酵基质；

S5、低温烘干：

将S4得到的发酵基质，置于50℃的温度条件下烘干；

S6、粉碎过筛：

将S5得到的烘干后的发酵基质粉碎，过40目筛，得到粉末状物质即得灵芝发酵黄芪党参菌质。

实施例2：

S1、菌种活化：

将灵芝母种接种于综合马铃薯培养基中，在28℃的黑暗环境下培养至菌丝长满斜面培养基，即得活化菌种；

S2、发酵基质配制：

发酵基质由黄芪和党参组成，黄芪的重量占总重量的50%，党参的重量占总重量的50%，加水调至基质的含水量达到65%，焖料12h；

S3、发酵基质灭菌：

将S2得到的发酵基质填装入菌种瓶，将接种棒插入菌种瓶中间，拧紧透气盖子，121℃高压灭菌120min；

S4、接种发酵：

将S1得到的活化菌种转接于S3得到的发酵基质中，在28℃恒温下避光培养至白色菌丝完全吃透发酵基质；

S5、低温烘干：

将S4得到的发酵基质，置于55℃的温度条件下烘干；

S6、粉碎过筛：

将S5得到的烘干后的发酵基质粉碎，过40目筛，得到粉末状物质即得灵芝发酵黄芪党参菌质。

实验例：

一、实验方法：

（一）配方培养基选择

表1 培养基配方

按照上述表1分别配制培养基配方，加水调至发酵基质的含水量达到65%，浸泡后搅拌备用。将配制的不同比例配方均匀装入90cm培养皿，填满至培养皿底部平整覆盖，每个培养皿装量约31g，灭菌。

如表2所示，通过单因素方差分析得出，不同比例配方培养基对灵芝（F=3.333，P＞0.05）的菌丝生长速率显著无明显差异，不同比例配方培养基在不同时间生长，菌丝生长速度各不相同，配方三菌丝生长快，配方二和配方一的菌丝生长较快，从总评分看出，配方三的发酵菌质最好。

表2 不同比例配方培养基菌丝生长14d比较

注：密度指数有“+，1、++，2、+++，3、++++，4、+++++，5”；

均匀度指数有“不均匀，0、较均匀，1、均匀，2”；

菌丝生长速率表示为mean±SE，（n=3），单因素方差分析结合Duncan多重比较，小写字母表示统计学差异（P＜0.05）。

如表3所示，通过单因素方差分析得出，不同比例配方培养基对灵芝（F=8.997，P＜0.05）的菌丝生长速率有显著影响。配方二和配方三显著高于配方一，且两者差异不明显。配方二和配方三的密度指数和均匀度指数都好于配方一，不同比例配方培养基中，配方二和配方三的生长速率和生长指数都显著高于配方一，由此，可确定最适宜生长配方为配方二和配方三。

表3 不同比例配方培养基菌丝生长19d比较

注：密度指数有“+，1、++，2、+++，3、++++，4、+++++，5”；

均匀度指数有“不均匀，0、较均匀，1、均匀，2”；

菌丝生长速率表示为mean±SE，（n=3），单因素方差分析结合Duncan多重比较，小写字母表示统计学差异（P＜0.05）。

由图3可见，配方二和配方三菌丝生长较快并且菌丝茂密，菌丝颜色为正常白色，因此最适宜生长的配方是二和三。

（二）菌种活化、转接及样品前处理

用综合马铃薯培养基活化灵芝，待菌丝生长至茂密，挑取斜面保存灵芝菌种转接于不同比例培养基质配方，28℃恒温避光生长。待菌丝长至茂密，分别将14d、19d不同比例培养基质烘干后粉碎，保存备用。

（三）生长指标

1.菌丝生长速率测定

式中：GR，菌丝日平均生长速率，cm·d^-1；R，菌落平均直径，cm；t，菌丝生长时间d。

2.菌丝生长指数

式中：MGI，菌丝生长指数；DI，密度指数；EI，均匀度指数；GR，菌丝生长速率，cm·d^-1。

3.菌丝生长总评分

式中：TS，菌丝生长总评分；MGI，菌丝生长指数；CV，菌丝生长速率变异系数。

（四）样品制备

精密称取发酵前后粉碎粉末2.0g置于具塞三角瓶中，加入配制好的75%的乙醇，于55℃超声波提取45min，冷却，过滤至50mL容量瓶中，75%乙醇定容至刻度线，保存备用。

（五）多糖含量测定

采用苯酚-浓硫酸法测定。精确称取5.1mg无水葡萄糖，放至50mL容量瓶中，加蒸馏水定容，混匀得到浓度为0.1mg/mL的葡萄糖对照品。准确吸取配制好的葡萄糖对照品0.00mL、0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL移入25mL试管中，添加蒸馏水至2mL，然后加5%苯酚1mL和浓硫酸5mL，混匀，81℃条件下在水浴锅中加热16min，冷却。以蒸馏水为对照，在490nm波长处测量吸光度值，平行测定3次。以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线，得回归方程：y=7.73x+0.0423，R²=0.9904，如图1所示。

吸取1 mL发酵前后样品制备液，加入1 mL 5%苯酚，5mL浓硫酸，混匀，于96℃保温16min，冷却，以蒸馏水为参照，于490nm测定吸光度值。

研究原材料和发酵14d、19d菌质多糖含量，可见不同比例配方培养基对菌质（F=6.888，P＜0.05）的多糖含量有显著影响。从图4A中看出，配方三的原材料多糖含量与发酵后14d的配方菌质的多糖含量异不显著，配方三发酵后19d的菌质多糖含量与原材料多糖含量存在显著差异。从图4B中看出，配方二的原材料多糖含量显著高于发酵后14d、19d的配方菌质的多糖含量。结合两个配方来看，原材料14d、19d的多糖含量趋势逐渐下降。

（六）总酚含量测定

采用斐林试剂法测定多酚。精密称取20mg没食子酸，加水至100mL，配制成（0.2mg/mL）浓度的标准溶液，取12.5mL于25mL容量瓶，配成(0.1mg/mL)浓度的标准品溶液，用移液管分别移取0.25mL、0.50mL、0.75mL、1.00mL、1.25mL的没食子酸溶液置25mL容量瓶中，加0.5mL斐林试剂、1mL 15% Na2CO3置50℃水浴5min，冷却。在723nm处测定吸光度，得出标准曲线：y=6.1589x+0.0259，R2=9964，如图2所示。

精密移取发酵前后样品制备液0.3mL于25mL具塞试管，加入0.5mL斐林试剂、1mL15% Na₂CO₃置50℃水浴5min，冷却。在723nm处测定吸光度。

研究原材料和发酵后14d、19d菌质总酚含量的变化。分析出不同比例配方培养基对菌质（F=4.848，P＜0.05）的多糖含量有显著影响。从图5A中看出，配方三发酵19d的菌质总酚含量显著高于原材料和发酵14d的菌质总酚含量。从图5B中看出，配方二发酵19d的菌质总酚含量高于原材料，但是两者无显著性差异。

（七）总抗氧化能力测定

采用钼酸铵方法测定总抗氧化能力。钼酸铵反应体系的制备：将1g四水合钼酸铵、2. 14g磷酸钠，加入200mL纯化水溶解，混匀，再加入6.8mL浓硫酸，混匀。移取发酵前后样品制备液0.3mL和3mL的钼酸铵反应体系于25mL具塞试管，混匀，于96℃水浴加热90min ，放置冷却，在695nm处测定吸光度。以蒸馏水为对照，吸光度越大，说明其还原能力越强，总抗氧化能力越强。

研究原材料和发酵后14d、19d的菌质总抗氧化力，分析得出不同比例配方培养基对菌质（F=13.531，P＜0.05）的总抗氧化能力有显著影响。从图6A中看出，配方三原材料总抗氧化能力显著低于发酵14d和19d。从图6B中看出，配方二发酵19d的抗氧化能力显著高于原料和发酵14d。

综合分析菌丝生长指标、多糖含量、总酚含量和总抗氧化能力，得出配方三和配方二发酵19d的菌质适用于产品开发原料。

一种使用灵芝黄芪党参菌质制备压片糖果的方法，包括如下步骤：

S1、原辅料混合：

原料为灵芝黄芪党参菌质，辅料包括粘结剂和甜味剂，原料的重量占总重量的25％-35％，玉米淀粉的重量占总重量的59％-69％，甘露醇的重量占总重量的6％，将原料和辅料混合均匀得到原辅料混合物，向原辅料混合物中加入占原辅料混合物总重量40%的食用级乙醇，搅拌均匀，制得软材；

S2、制粒：

将S1得到的软材通过40目筛挤压制成颗粒；

S3、低温烘干：

将S2得到的颗粒置于50℃-55℃下烘干；

S4、压片：

将S3得到的烘干颗粒经压片机压制成灵芝黄芪党参菌质压片糖果。

实施例3：

S1、原辅料混合：

原料为灵芝黄芪党参菌质，辅料包括粘结剂和甜味剂，原料的重量占总重量的25％，玉米淀粉的重量占总重量的69％，甘露醇的重量占总重量的6％，将原料和辅料混合均匀得到原辅料混合物，向原辅料混合物中加入占原辅料混合物总重量40%的食用级乙醇，搅拌均匀，制得软材；

S2、制粒：

将S1得到的软材通过40目筛挤压制成颗粒；

S3、低温烘干：

将S2得到的颗粒置于50℃下烘干；

S4、压片：

将S3得到的烘干颗粒经压片机压制成灵芝黄芪党参菌质压片糖果。

实施例4：

S1、原辅料混合：

原料为灵芝黄芪党参菌质，辅料包括粘结剂和甜味剂，原料的重量占总重量的35％，玉米淀粉的重量占总重量的59％，甘露醇的重量占总重量的6％，将原料和辅料混合均匀得到原辅料混合物，向原辅料混合物中加入占原辅料混合物总重量40%的食用级乙醇，搅拌均匀，制得软材；

S2、制粒：

将S1得到的软材通过40目筛挤压制成颗粒；

S3、低温烘干：

将S2得到的颗粒置于55℃下烘干；

S4、压片：

将S3得到的烘干颗粒经压片机压制成灵芝黄芪党参菌质压片糖果。

Claims (4)

1.一种灵芝黄芪党参菌质的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

S1、菌种活化：

将灵芝母种接种于综合马铃薯培养基中，在25℃-28℃的黑暗环境下培养至菌丝长满斜面培养基，即得活化菌种；

S2、发酵基质配制：

发酵基质由黄芪和党参组成，黄芪的重量占总重量的25%-50%，党参的重量占总重量的50%-75%，加水调至基质的含水量达到65%，焖料8-12h；

S3、发酵基质灭菌：

将S2得到的发酵基质填装入菌种瓶，将接种棒插入菌种瓶中间，拧紧透气盖子，121℃高压灭菌90min -120min；

S4、接种发酵：

将S1得到的活化菌种转接于S3得到的发酵基质中，在25℃-28℃恒温下避光培养至白色菌丝完全吃透发酵基质；

S5、低温烘干：

将S4得到的发酵基质，置于50℃-55℃的温度条件下烘干；

S6、粉碎过筛：

将S5得到的烘干后的发酵基质粉碎，过筛，得到粉末状物质即得灵芝发酵黄芪党参菌质。

2.如权利要求1所述的灵芝黄芪党参菌质的制备方法，其特征在于：S6中所述过筛采用40目筛。

3.一种使用权利要求1-2中任一项制备的灵芝黄芪党参菌质制备压片糖果的方法，其特征在于包括如下步骤：

S1、原辅料混合：

原料为灵芝黄芪党参菌质，辅料包括粘结剂和甜味剂，原料的重量占总重量的25％-35％，粘结剂的重量占总重量的59％-69％，甜味剂的重量占总重量的6％，将原料和辅料混合均匀得到原辅料混合物，向原辅料混合物中加入占原辅料混合物总重量40%的食用级乙醇，搅拌均匀，制得软材；

S2、制粒：

将S1得到的软材通过40目筛挤压制成颗粒；

S3、低温烘干：

将S2得到的颗粒置于50℃-55℃下烘干；

S4、压片：

将S3得到的烘干颗粒经压片机压制成灵芝黄芪党参菌质压片糖果。

4.如权利要求3所述的使用灵芝黄芪党参菌质制备压片糖果的方法，其特征在于：S1中所述粘结剂为玉米淀粉，甜味剂为甘露醇。