CN118160919A - 一种生物酶解制备羊胎素冻干粉的方法 - Google Patents
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Abstract
本申请属于羊胎素冻干粉制备技术领域，提供了一种生物酶解制备羊胎素冻干粉的方法，包括：羊胎盘预处理、酶解蒸煮、灭酶、过滤、浓缩、铺盘、速冻、减压干燥等，其中，酶解蒸煮罐中加入的酶为：碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、脂肪酶、中性蛋白酶、糜蛋白酶中的一种或几种；所述酶解温度为37℃～62℃，所述酶的用量为羊胎肉糜质量的0.5％，所述酶解pH为6～8.5；所述酸性pH调节剂为维生素C水溶液、碱性pH调节剂为碳酸氢钠水溶液，本申请利用维生素C调节酶解反应的pH值，相较于利用醋酸等无机化合物作为pH调节剂，更加安全、无毒。
Description
技术领域
本申请涉及羊胎素冻干粉制备技术领域，更具体地说，涉及一种生物酶解制备羊胎素冻干粉的方法。
背景技术
羊胎盘素冻干粉富含多种氨基酸、矿物质、维生素等营养成分和活性物质，这些成分对人体有多种益处，如增强免疫功能、调节内分泌失调、增强体力与耐力、促进造血功能等。此外，它还具有美容、延缓衰老的功效，适量食用可以提高人体的抗病能力。
羊胎盘素冻干粉是以羊胎盘为原料，经过洗净、粉碎、酶解、冻结、干燥等步骤，最终得到含水量较低的冻干粉。
羊胎盘素冻干粉制备中的核心步骤是酶解过程，然而，现有酶解过程中，在酸性pH调节剂通常使用酸性无机化合物，会对羊胎盘素的产品品质造成一定影响。
此外，现有酶解方法通常是一次将多种酶放入酶解蒸煮釜中进行蒸煮，不仅导致酶解过程耗时长，而且还导致羊胎盘肉糜分解率不高，造成原料浪费。
发明内容
本发明的目的在于解决背景技术现有酶解过程中，在酸性pH调节剂通常使用酸性无机化合物，会对羊胎盘素的产品品质造成一定影响的问题。
为了实现上述目的，本发明提供的一种生物酶解制备羊胎素冻干粉的方法，具体包括：
羊胎盘预处理：对羊胎盘进行清洗、粉碎处理成羊胎肉糜；
酶解蒸煮：将预处理后的羊胎肉糜放入酶解蒸煮罐中，加入酶进行酶解；
灭酶：将酶解后得到的产物放入灭酶罐灭酶后降至常温，其中灭酶温度为90℃，灭酶时间为10分钟。
过滤：将酶酶后的产物通入双联过滤，过滤后得到羊胎素溶液；
浓缩：通过浓缩的去除羊胎素溶液中的溶液，得到高浓度羊胎素；
铺盘：将浓缩后的羊胎素进行铺盘；
速冻：将铺盘的羊胎素在-35℃进行速冻。
减压干燥：通过减压干燥方式使羊胎素在低温下完成干燥。
其中，所述酶解蒸煮罐中加入的酶为：碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、脂肪酶、中性蛋白酶、糜蛋白酶中的一种或几种；
所述酶解温度为37℃～62℃，所述酶的用量为羊胎肉糜质量的0.5％，所述酶解pH为6～8.5；
所述酸性pH调节剂为维生素C水溶液、碱性pH调节剂为碳酸氢钠水溶液。
作为上述酶解蒸煮过程的一种改进，所述酶解蒸煮过程具体包括：
S201、将脂肪酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为38℃±2℃，利用碳酸氢钠调节pH至8.5开始进行酶解反应，直至酶解蒸煮中的pH值降低至7.3；
S202、将碱性蛋白酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为38℃±2℃，利用碳酸氢钠调节pH至8.5开始进行酶解反应，直至酶解蒸煮中的pH值降低至7.3；
S203、将糜蛋白酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为38℃±2℃，利用乳酸钠调节pH至7.6开始进行酶解反应，直至酶解蒸煮中的pH值降低至7.2；
S204、将中性蛋白酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为45℃±2℃，利用柠檬酸钠使维持在pH至6.8～7.2开始进行酶解反应，直至酶解蒸煮中的pH值至7.2；
S205、将木瓜蛋白酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为60℃±2℃，利用维生素C溶液调节pH至6.2开始进行酶解反应，直至酶解蒸煮中的pH值至7.2；
较佳地，所述羊胎肉糜与所述脂肪酶的质量比为1000:1；所述羊胎肉糜与所述碱性蛋白酶的质量比为1000:1；所述羊胎肉糜与所述糜蛋白酶的质量比为1000:1；所述羊胎肉糜与所述木瓜蛋白酶的质量比为1000:1。
进一步地，所述步骤S201的反应时间不少于4分钟；所述步骤S203的反应时间不少于6分钟；所述步骤S204的反应时间不少于6分钟；所述步骤S205的反应时间不少于6分钟。
进一步地，在所述酶解蒸煮步骤中，在所述步骤S201前，将羊胎肉糜在39℃±2℃的温度下蒸煮4分钟。
本申请的有益效果在于：
本申请利用维生素C调节酶解反应的pH值，相较于利用醋酸等无机化合物作为pH调节剂，更加安全、无毒，在酶解反应中使用维生素C作为pH调节剂可以减少对反应体系的潜在危害。维生素C溶于水后呈弱酸性，能够温和地调节蛋白酶解反应的pH值，这种温和的调节方式有助于保持酶的稳定性和活性。由于维生素C不会与氨基酸、小分子蛋白质等发生反应，因此维生素C作为pH调节剂不会对酶解产物造成影响，另一方面还可在产物中添加维生素C，无需在冻干粉产物上额外复配维生素C。
本申请对不同的酶分步进行酶解反应，提高了酶解反应效率。
具体实施方式
下面将对本申请技术方案的实施例进行详细地描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本申请的技术方案，因此只作为示例，而不能以此来限制本申请的保护范围。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。
实施例1一种生物酶解制备羊胎素冻干粉的方法，具体包括：
羊胎盘预处理：对羊胎盘进行清洗、粉碎处理成羊胎肉糜；
酶解蒸煮：将预处理后的50kg羊胎肉糜放入盛放50kg水的酶解蒸煮罐中，调节蒸煮温度为42℃±2℃，加入酶进行酶解，其中加的酶为0.05kg碱性蛋白酶、0.05kg木瓜蛋白酶、0.05kg脂肪酶、0.05kg中性蛋白酶、0.05kg糜蛋白酶；利用碳酸氢钠将蒸煮液pH调至8，反应30分钟至pH降低至7.3后，利用维生素C将pH调至6后，反应35分钟至pH至7.3后，停止反应；
灭酶：将酶解后得到的产物放入灭酶罐灭酶后降至常温，其中灭酶温度为90℃，灭酶时间为10分钟。
过滤：将酶酶后的产物通入双联过滤，过滤后得到羊胎素溶液；
浓缩：通过浓缩的去除羊胎素溶液中的溶液，得到高浓度羊胎素；
铺盘：将浓缩后的羊胎素进行铺盘；
速冻：将铺盘的羊胎素在-35℃进行速冻。
减压干燥：通过减压干燥方式使羊胎素在低温下完成干燥，得到9.15kg冻干粉。
实施例2
羊胎盘预处理：对羊胎盘进行清洗、粉碎处理成羊胎肉糜；
酶解蒸煮：将预处理后的50kg羊胎肉糜放入盛放50kg水的酶解蒸煮罐中，调节蒸煮温度为38℃±2℃，加入酶进行酶解，具体为：
S201、将0.05kg脂肪酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为38℃±2℃，利用碳酸氢钠调节pH至8.5开始进行酶解反应4分钟，直至酶解蒸煮中的pH值降低至7.3；
S202、将0.05kg碱性蛋白酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为38℃±2℃，利用碳酸氢钠调节pH至8.5开始进行酶解反应6分钟，直至酶解蒸煮中的pH值降低至7.3；
S203、将0.05kg糜蛋白酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为38℃±2℃，利用乳酸钠调节pH至7.6开始进行酶解反应6分钟，直至酶解蒸煮中的pH值降低至7.2；
S204、将0.05kg中性蛋白酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为45℃±2℃，利用柠檬酸钠使维持在pH至6.8～7.2开始进行酶解反应6分钟，直至酶解蒸煮中的pH值至7.2；
S205、将0.05kg木瓜蛋白酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为60℃±2℃，利用维生素C溶液调节pH至6.2开始进行酶解反应6分钟，直至酶解蒸煮中的pH值至7.2；
灭酶：将酶解后得到的产物放入灭酶罐灭酶后降至常温，其中灭酶温度为90℃，灭酶时间为10分钟。
过滤：将酶酶后的产物通入双联过滤，过滤后得到羊胎素溶液；
浓缩：通过浓缩的去除羊胎素溶液中的溶液，得到高浓度羊胎素；
铺盘：将浓缩后的羊胎素进行铺盘；
速冻：将铺盘的羊胎素在-35℃进行速冻。
减压干燥：通过减压干燥方式使羊胎素在低温下完成干燥得到11.32kg羊胎素冻干粉。
实施例3
羊胎盘预处理：对羊胎盘进行清洗、粉碎处理成羊胎肉糜；
酶解蒸煮：将预处理后的50kg羊胎肉糜放入盛放50kg水的酶解蒸煮罐中，调节蒸煮温度为38℃±2℃，加入酶进行酶解，具体为：
将羊胎肉糜在38℃±2℃的温度下蒸煮4分钟；
S201、将0.05kg脂肪酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为38℃±2℃，利用碳酸氢钠调节pH至8.5开始进行酶解反应4分钟，直至酶解蒸煮中的pH值降低至7.3；
S202、将0.05kg碱性蛋白酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为38℃±2℃，利用碳酸氢钠调节pH至8.5开始进行酶解反应6分钟，直至酶解蒸煮中的pH值降低至7.3；
S203、将0.05kg糜蛋白酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为38℃±2℃，利用乳酸钠调节pH至7.6开始进行酶解反应6分钟，直至酶解蒸煮中的pH值降低至7.2；
S204、将0.05kg中性蛋白酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为45℃±2℃，利用柠檬酸钠使维持在pH至6.8～7.2开始进行酶解反应6分钟，直至酶解蒸煮中的pH值至7.2；
S205、将0.05kg木瓜蛋白酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为60℃±2℃，利用维生素C溶液调节pH至6.2开始进行酶解反应6分钟，直至酶解蒸煮中的pH值至7.2；
灭酶：将酶解后得到的产物放入灭酶罐灭酶后降至常温，其中灭酶温度为90℃，灭酶时间为10分钟。
过滤：将酶酶后的产物通入双联过滤，过滤后得到羊胎素溶液；
浓缩：通过浓缩的去除羊胎素溶液中的溶液，得到高浓度羊胎素；
铺盘：将浓缩后的羊胎素进行铺盘；
速冻：将铺盘的羊胎素在-35℃进行速冻。
减压干燥：通过减压干燥方式使羊胎素在低温下完成干燥得到11.63kg羊胎素冻干粉。
实施例4
羊胎盘预处理：对羊胎盘进行清洗、粉碎处理成羊胎肉糜；
酶解蒸煮：将预处理后的50kg羊胎肉糜放入盛放50kg水的酶解蒸煮罐中，调节蒸煮温度为38℃±2℃，加入酶进行酶解，具体为：
将羊胎肉糜在38℃±2℃的温度下蒸煮5分钟；
S201、将0.05kg脂肪酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为38℃±2℃，利用碳酸氢钠调节pH至8.5开始进行酶解反应5分钟，直至酶解蒸煮中的pH值降低至7.3；
S202、将0.05kg碱性蛋白酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为38℃±2℃，利用碳酸氢钠调节pH至8.5开始进行酶解反应7分钟，直至酶解蒸煮中的pH值降低至7.3；
S203、将0.05kg糜蛋白酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为38℃±2℃，利用乳酸钠调节pH至7.6开始进行酶解反应7分钟，直至酶解蒸煮中的pH值降低至7.2；
S204、将0.05kg中性蛋白酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为45℃±2℃，利用柠檬酸钠使维持在pH至6.8～7.2开始进行酶解反应7分钟，直至酶解蒸煮中的pH值至7.2；
S205、将0.05kg木瓜蛋白酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为60℃±2℃，利用维生素C溶液调节pH至6.2开始进行酶解反应7分钟，直至酶解蒸煮中的pH值至7.2；
灭酶：将酶解后得到的产物放入灭酶罐灭酶后降至常温，其中灭酶温度为90℃，灭酶时间为10分钟。
过滤：将酶酶后的产物通入双联过滤，过滤后得到羊胎素溶液；
浓缩：通过浓缩的去除羊胎素溶液中的溶液，得到高浓度羊胎素；
铺盘：将浓缩后的羊胎素进行铺盘；
速冻：将铺盘的羊胎素在-35℃进行速冻。
减压干燥：通过减压干燥方式使羊胎素在低温下完成干燥得到12.04kg羊胎素冻干粉。
对比例1
羊胎盘预处理：对羊胎盘进行清洗、粉碎处理成羊胎肉糜；
酶解蒸煮：将预处理后的50kg羊胎肉糜放入盛放50kg水的酶解蒸煮罐中，调节蒸煮温度为42℃±2℃，加入酶进行酶解，其中加的酶为0.05kg碱性蛋白酶、0.05kg木瓜蛋白酶、0.05kg脂肪酶、0.05kg中性蛋白酶、0.05kg糜蛋白酶；利用碳酸氢钠将蒸煮液pH调至8，反应30分钟至pH降低至7.3后，利用醋酸将pH至调至6后，反应35分钟至pH至7.3后，停止反应；
灭酶：将酶解后得到的产物放入灭酶罐灭酶后降至常温，其中灭酶温度为90℃，灭酶时间为10分钟。
过滤：将酶酶后的产物通入双联过滤，过滤后得到羊胎素溶液；
浓缩：通过浓缩的去除羊胎素溶液中的溶液，得到高浓度羊胎素；
铺盘：将浓缩后的羊胎素进行铺盘；
速冻：将铺盘的羊胎素在-35℃进行速冻。
减压干燥：通过减压干燥方式使羊胎素在低温下完成干燥9.03kg羊胎素冻干粉。
对比例2
羊胎盘预处理：对羊胎盘进行清洗、粉碎处理成羊胎肉糜；
酶解蒸煮：将预处理后的50kg羊胎肉糜放入盛放50kg水的酶解蒸煮罐中，调节蒸煮温度为38℃±2℃，加入酶进行酶解，具体为：
将羊胎肉糜在38℃±2℃的温度下蒸煮4分钟；
S201、将0.05kg糜蛋白酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为38℃±2℃，利用乳酸钠调节pH至7.6开始进行酶解反应6分钟，直至酶解蒸煮中的pH值降低至7.2；
S202、将0.05kg碱性蛋白酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为38℃±2℃，利用碳酸氢钠调节pH至8.5开始进行酶解反应6分钟，直至酶解蒸煮中的pH值降低至7.3；
S203、将0.05kg脂肪酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为38℃±2℃，利用碳酸氢钠调节pH至8.5开始进行酶解反应4分钟，直至酶解蒸煮中的pH值降低至7.3；
S204、将0.05kg中性蛋白酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为45℃±2℃，利用柠檬酸钠使维持在pH至6.8～7.2开始进行酶解反应6分钟，直至酶解蒸煮中的pH值至7.2；
S205、将0.05kg木瓜蛋白酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为60℃±2℃，利用维生素C溶液调节pH至6.2开始进行酶解反应6分钟，直至酶解蒸煮中的pH值至7.2；
灭酶：将酶解后得到的产物放入灭酶罐灭酶后降至常温，其中灭酶温度为90℃，灭酶时间为10分钟。
过滤：将酶酶后的产物通入双联过滤，过滤后得到羊胎素溶液；
浓缩：通过浓缩的去除羊胎素溶液中的溶液，得到高浓度羊胎素；
铺盘：将浓缩后的羊胎素进行铺盘；
速冻：将铺盘的羊胎素在-35℃进行速冻。
减压干燥：通过减压干燥方式使羊胎素在低温下完成干燥得到10.83kg羊胎素冻干粉。
分析检测：
上述实施例中，采用GB/T18246-2000中氨基酸的测定方法,用日立L-8900氨基酸分析仪测定氨基酸组成，详见表1。
表1各实施例、对比例得到的冻干粉检测情况表
通过实施例1和对比例1可以看到，实施例1采用维生素C作为酸性pH调节剂，对产品品质影响较小.对比例1采用醋酸，羊胎素冻干粉产率率小于实施例1，对比例1的冻干粉中氨基酸含量占比较实施例1少。
通过实施例1和实施例2可以看到，不同的酶解反应单独进行有利于提高酶解反应效率，缩减酶解反应时间。
通过实施例2和实施例3可以看到，实施例3在酶解前进行了蒸煮，有利于提高酶解效率。
通过实施例3和实施例4可以看到，酶解时间提升有利于提高酶解程度。
通过实施例3和对比例2可以看到，变更酶解顺序，对酶解程度造成影响。
最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明实施例技术方案的范围。
Claims (5)
1.一种生物酶解制备羊胎素冻干粉的方法，其特征在于，包括：
羊胎盘预处理：对羊胎盘进行清洗、粉碎处理成羊胎肉糜；
酶解蒸煮：将预处理后的羊胎肉糜放入酶解蒸煮罐中，加入酶进行酶解；
灭酶：将酶解后得到的产物放入灭酶罐灭酶后降至常温，其中灭酶温度为90℃，灭酶时间为10分钟。
过滤：将酶酶后的产物通入双联过滤，过滤后得到羊胎素溶液；
浓缩：通过浓缩的去除羊胎素溶液中的溶液，得到高浓度羊胎素；
铺盘：将浓缩后的羊胎素进行铺盘；
速冻：将铺盘的羊胎素在-35℃进行速冻。
减压干燥：通过减压干燥方式使羊胎素在低温下完成干燥。
其中，所述酶解蒸煮罐中加入的酶为：碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、脂肪酶、中性蛋白酶、糜蛋白酶中的一种或几种；
所述酶解温度为37℃～62℃，所述酶的用量为羊胎肉糜质量的0.5％，所述酶解pH为6～8.5；
所述酸性pH调节剂为维生素C水溶液、碱性pH调节剂为碳酸氢钠水溶液。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述酶解蒸煮过程具体包括：
S201、将脂肪酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为38℃±2℃，利用碳酸氢钠调节pH至8.5开始进行酶解反应，直至酶解蒸煮中的pH值降低至7.3；
S202、将碱性蛋白酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为38℃±2℃，利用碳酸氢钠调节pH至8.5开始进行酶解反应，直至酶解蒸煮中的pH值降低至7.3；
S203、将糜蛋白酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为38℃±2℃，利用乳酸钠调节pH至7.6开始进行酶解反应，直至酶解蒸煮中的pH值降低至7.2；
S204、将中性蛋白酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为45℃±2℃，利用柠檬酸钠使维持在pH至6.8～7.2开始进行酶解反应，直至酶解蒸煮中的pH值至7.2；
S205、将木瓜蛋白酶加入到酶解蒸煮中，设置温度为60℃±2℃，利用维生素C溶液调节pH至6.2开始进行酶解反应，直至酶解蒸煮中的pH值至7.2。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述羊胎肉糜与所述脂肪酶的质量比为1000:1；所述羊胎肉糜与所述碱性蛋白酶的质量比为1000:1；所述羊胎肉糜与所述糜蛋白酶的质量比为1000:1；所述羊胎肉糜与所述木瓜蛋白酶的质量比为1000:1。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述步骤S201的反应时间不少于4分钟；所述步骤S203的反应时间不少于6分钟；所述步骤S204的反应时间不少于6分钟；所述步骤S205的反应时间不少于6分钟。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，在所述酶解蒸煮步骤中，在所述步骤S201前，将羊胎肉糜在39℃±2℃的温度下蒸煮4分钟。
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