CN118084714B

CN118084714B - 一种脂质化合物、包含其的脂质纳米颗粒及其应用

Info

Publication number: CN118084714B
Application number: CN202410487810.8A
Authority: CN
Inventors: 张磊; 陈建新
Original assignee: Transsion Biomedicine Suzhou Co ltd
Current assignee: Transsion Biomedicine Suzhou Co ltd
Priority date: 2024-04-23
Filing date: 2024-04-23
Publication date: 2024-08-02
Anticipated expiration: 2044-04-23
Also published as: CN118084714A

Abstract

本发明提供了一种脂质化合物、包含其的脂质纳米颗粒及其在制备药物递送载体中的应用。本发明的脂质纳米颗粒能够将治疗剂或预防剂（尤其是核酸类物质）通过肌肉注射递送至注射部位，并且所述治疗剂或预防剂在注射部位具有高表达，但在内脏中的表达量较低，这使得药物不仅能高效发挥活性还具有较低的内脏毒性，对核酸类治疗剂或预防剂的发展和应用具有重要的意义。

Description

一种脂质化合物、包含其的脂质纳米颗粒及其应用

技术领域

本发明属于分子生物学领域，具体涉及一种脂质化合物、包含其的脂质纳米颗粒及其在制备药物递送载体中的应用以及基于所述脂质纳米颗粒的药物组合物和制剂。

背景技术

治疗或预防性核酸具有彻底改变疫苗接种、基因疗法、蛋白质替代疗法和其他遗传疾病疗法的潜力。自2000年开始对治疗性核酸的首次临床研究以来，核酸分子的设计及其递送方法的研究已经取得了重大进展。然而，核酸药物（包含治疗性药物和预防性药物）仍面临若干挑战，包括大多数脂质体制剂通过肝脏中的生物学过程积累，从而降低了组合物递送进靶部位中的效力。因此，减少肝脏富集，高特异性、高递送载量脂质纳米颗粒递送系统仍然有待开发。

发明内容

发明目的

本申请的目的是提供一种能够递送核酸类治疗剂或预防剂的阳离子脂质化合物、包含其的脂质纳米颗粒及其在制备药物递送载体中的应用以及基于所述脂质纳米颗粒的药物组合物和制剂。

基于本申请阳离子脂质化合物的药物递送载体能够通过肌肉注射将核酸类治疗剂或预防剂高效递送至注射部位，并能够实现核酸在注射部位的高表达，同时核酸在内脏中的表达量较低，从而能够降低毒性。

解决方案

为实现本发明目的，本发明提供了以下技术方案：

第一方面，本发明提供了一种如式（I）所示的化合物或其药学上可接受的盐、前药或立体异构体，

；

其中：

Y₁和Y₂各自独立地为-OC (=O)-或-C (=O)O-；

L₁和L₂各自独立地为键、任选地取代的C₁-C₁₈亚烷基；

R₁和R₂各自独立地为H或C₁-C₈直链或支链烷基；

R₃和R₄各自独立地为任选被羟基取代的C₁-C₈直链或支链烷基；

m为1~10之间的整数；

n为1~10之间的整数。

作为优选，所述L₁和L₂各自独立地为未取代的C₂-C₁₄亚烷基。

作为优选，所述R₁和R₂各自独立地为H或C₁-C₈直链烷基；进一步优选地，所述R₁和R₂各自独立地为H或C₆-C₈直链烷基。

作为优选，所述R₃和R₄各自独立地为任选被羟基取代的C₁-C₄直链或支链烷基；进一步优选地，所述R₃和R₄各自独立地为甲基、乙基、丙基、羟甲基、羟乙基、羟丙基、羟丁基；更进一步优选地，所述R₃和R₄各自独立地为甲基或羟乙基。

作为优选，m为5~7之间的整数；

作为优选，n为5~7之间的整数。

在优选的具体实施方案中，所述化合物选自如以下所示化合物：

；

。

优选地，所述化合物选自如上表所示的化合物1、2、3、4、5、6、7、10，进一步优选为化合物3、4、5、7，更进一步优选为化合物3、5或7，最优选为化合物5或7。

上述方面中，所述“药学上可接受的盐”是指药学上可接受的并且具有期望的药理学活性的本申请化合物的盐。这样的盐包括与以下酸形成的酸加成盐：无机酸诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；或有机酸诸如1 ,2-乙烷二磺酸、2-羟基乙磺酸、2-萘磺酸、3-苯基丙酸、4 ,4’-亚甲基双(3-羟基-2-烯-1-甲酸)、4-甲基二环[2.2.2]辛-2-烯-1-甲酸、乙酸、脂族单和二羧酸、脂族硫酸、芳族硫酸、苯磺酸、苯甲酸、樟脑磺酸、碳酸、肉桂酸、柠檬酸、环戊烷丙酸、乙磺酸、富马酸、葡萄庚糖酸、葡糖酸、谷氨酸、羟乙酸、庚酸、己酸、羟基萘甲酸、乳酸、月桂基硫酸、马来酸、苹果酸、丙二酸、扁桃酸、甲磺酸、粘康酸、邻-(4-羟基苯甲酰基)苯甲酸、草酸、对氯苯磺酸、苯基-取代的链烷酸、丙酸、对甲苯磺酸、丙酮酸、水杨酸、硬脂酸、琥珀酸、酒石酸、叔丁基乙酸、三甲基乙酸等。药学上可接受的盐还包括在存在的酸性质子能够与无机碱或有机碱反应时可以形成的碱加成盐。可接受的无机碱包括但不限于氢氧化钠、碳酸钠、氢氧化钾、氢氧化铝和氢氧化钙。可接受的有机碱包括但不限于乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、氨丁三醇、N-甲基葡糖胺等。应当认识到，形成本申请记载内容的任何盐的一部分的特定阴离子或阳离子不是至关重要的，只要所述盐作为整体是药理学上可接受的即可。

上述方面中，所述“前药”是指一种化合物，如治疗剂，其可在生理条件下或通过溶解转化为生物活性化合物。前药通常在体内快速转化以产生母体化合物，例如通过在血液中水解。前药化合物通常在哺乳动物有机体中具有溶解性、组织相容性或延迟释放的优势。术语“前药”还意指包括任何共价键合载体，当将该前药施用于哺乳动物受试者时，其在体内释放活性化合物。前药包括羟基、氨基或巯基与任何基团结合的化合物，当前药给哺乳动物受试者服用时，这些基团分别裂解形成游离羟基、游离氨基或游离巯基。前药的示例包括但不限于: 醋酸盐、甲酸盐和苯甲酸盐衍生物或胺官能团的酰胺衍生物等。

上述方面中，所述“立体异构体”是这样的给定化合物的异构体：其中，相同的原子键合到相同的其它原子，但其中那些原子的三维构型不同。“对映异构体”是给定化合物的立体异构体，其像左手和右手一样是彼此的镜像。“非对映异构体”是给定化合物的并非对映异构体的立体异构体。手性分子含有手性中心(也被称作立构中心或立体中心)，它是携带多个基团的分子中的任意点(尽管不一定是原子)，使得任意2个基团的互换产生立体异构体。在有机化合物中，手性中心通常是碳、磷或硫原子，尽管其它原子也可能成为有机和无机化合物中的立构中心。分子可以具有多个立构中心，从而产生它的许多立体异构体。在其立体异构现象归因于四面体立体中心(例如，四面体碳)的化合物中，假定可能的立体异构体的总数不会超过2n，其中n是四面体立构中心的数目。具有对称性的分子经常具有比立体异构体的最大可能数目更小的数目。对映异构体的50:50混合物被称作外消旋混合物。可替换地，可以富集对映异构体的混合物，使得一种对映异构体以大于50％的量存在。通常，使用本领域已知的技术，可以拆分或分离对映异构体和/或非对映异构体。预期对于尚未定义其立体化学的任何立构中心或手性轴，该立构中心或手性轴可以以它的R形式、S形式或作为所述R形式和S形式的混合物(包括外消旋混合物和非外消旋混合物)存在。本文中使用的短语“ 基本上不含有其它立体异构体”是指所述组合物含有≤15％、更优选≤10％、甚至更优选≤5％、或最优选≤1％的另外一种或多种立体异构体。

第二方面，本发明提供了一种脂质纳米颗粒，其包含如上述第一方面所述的化合物或其药学上可接受的盐、前药或立体异构体。

进一步地，所述脂质纳米颗粒还可以包含至少一种辅助性脂质，与药物或具有药物活性的分子/制剂混合后实现包封并实现药物的有效递送。

可选地，所述辅助性脂质为磷脂、类固醇、聚合物缀合脂质和可修饰的脂质中的一种或多种。

优选地，所述磷脂为DOPE、DSPC、DPPC、DMPC、DOPC、POPC、SM 中的任意一种或多种的组合，更优选为DOPE或DSPC。在一个优选的具体实施方案中，所述磷脂为DOPE。在另一个优选的具体实施方案中，所述磷脂为DSPC。

优选地，所述类固醇为胆固醇、谷甾醇、豆甾醇和麦角固醇中的任意一种或多种的组合；进一步优选地，所述类固醇为胆固醇和/或谷甾醇。

关于上述聚合物缀合脂质，其中，聚合物是指一个以上小分子重复单元通过共价键结合形成的高分子量化合物；聚合物可以选自聚乙二醇、聚乳酸、聚酰胺、阳离子聚合物、聚肌氨酸（pSar）、聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）、聚氨基酸、多肽、聚类肽等；优选地，所述聚合物缀合脂质为聚乙二醇缀合脂质；进一步优选地，所述聚乙二醇缀合脂质为选自ALC-0159、PEG1000-DMG、PEG5000-DMG、PEG2000-DMG 和PEG2000-DSPE 中的一种或多种。

优选地，所述可修饰的脂质包含可被小分子化合物、维生素、碳水化合物、肽、蛋白质、核酸、脂多糖、无机物分子或颗粒、金属离子或颗粒及上述物质的组合修饰的脂质。

对于上述脂质纳米颗粒，作为优选，其中如上述第一方面所述的化合物或其药学上可接受的盐、前药或立体异构体与所述辅助性脂质的摩尔比为1：（0.5~2），优选为1：（0.6~1.5），更优选为1：（0.8~1.2）。

所述脂质纳米颗粒可通过肌肉注射将治疗剂/预防剂递送至注射部位。

第三方面，本发明提供了如上第一方面所述的化合物或其药学上可接受的盐、前药或立体异构体或者如上第二方面所述的脂质纳米颗粒在制备药物递送载体中的应用。

可行地，所述药物为治疗剂或预防剂。

进一步可行地，所述治疗剂或预防剂为核酸。

所述核酸包括任何和所有形式的核酸分子，包括本领域已知或将来有可能发现/制备的其他形式的核酸分子；在优选的实施方案中，所述核酸选自：单链DNA、双链DNA、单链RNA、双链RNA、短异构体、质粒DNA、互补DNA（cDNA）、反义核酸分子（ASO）、小干扰核酸（siRNA）、小激活核酸（saRNA）、不对称干扰核酸（aiRNA）、微小核酸（miRNA）、miRNA激动剂（agomir）、miRNA拮抗剂（antagomir）、Dicer酶底物核酸、小发夹核酸（shRNA）、转运RNA（tRNA）、信使RNA（mRNA）、环状RNA（circRNA）、自复制mRNA（samRNA）和适配体（aptamer）。

所述核酸分子可以是天然核苷酸、核苷酸模拟物、功能类似物或化学修饰的核苷酸。

功能性核苷酸类似物包括但不限于锁核酸LNA、肽核酸PNA 或吗啉环寡聚核苷酸核酸模拟物或功能类似物中的一种或一种以上的组合。

核苷酸化学修饰可以位于所述核酸分子的骨架键上。所述骨架键可以通过置换一个或多个氧原子而加以修饰。对所述骨架键的修饰可以包括用硫代磷酸酯键置换至少一个磷酸二酯键。

核苷酸化学修饰还可以位于核苷上。核苷上的修饰可以位于所述核苷的糖及碱基上。所述核苷上的糖的修饰可以选自以下一种或多种：2’-氟代核糖、核糖、2’-脱氧核糖、阿拉伯糖、己糖。

所述核苷酸的化学修饰形式可以选自以下一种或多种：5-甲基胞嘧啶、假尿苷、1-甲基假尿苷、吡啶-4-酮核糖核苷、5-氮杂-尿苷、2-硫代-5-氮杂-尿苷、2-硫代尿苷、4-硫代-假尿苷、2-硫代-假尿苷、5-羟基尿苷、3-甲基尿苷、5-羧基甲基-尿苷、1-羧基甲基-假尿苷、5-丙炔基-尿苷、1-丙炔基-假尿苷、5-牛磺酸甲基尿苷、1-牛磺酸甲基-假尿苷、5-牛磺酸甲基-2-硫代-尿苷、1-牛磺酸甲基-4-硫代-尿苷、5-甲基-尿苷、1-甲基-假尿苷、4-硫代-1-甲基-假尿苷、2-硫代-1-甲基-假尿苷、1-甲基-1-脱氮-假尿苷、2-硫代-1-甲基-1-脱氮-假尿苷、二氢尿苷、二氢假尿苷、2-硫代-二氢尿苷、2-硫代-二氢假尿苷、2-甲氧基尿苷、2-甲氧基-4-硫代-尿苷、4-甲氧基-假尿苷、4-甲氧基-2-硫代-假尿苷、5-氮杂-胞苷、假异胞苷、3-甲基-胞苷、N4-乙酰基胞苷、5-甲酰基胞苷、N4-甲基胞苷、5-羟基甲基胞苷、1-甲基-假异胞苷、吡咯并-胞苷、吡咯并-假异胞苷、2-硫代-胞苷、2-硫代-5-甲基-胞苷、4-硫代-假异胞苷、4-硫代-1-甲基-假异胞苷、4-硫代-1-甲基-1-脱氮-假异胞苷、1-甲基-1-脱氮-假异胞苷、扎布拉林(zebularine)、5-氮杂-扎布拉林、5-甲基-扎布拉林、5-氮杂-2-硫代-扎布拉林、2-硫代-扎布拉林、2-甲氧基-胞苷、2-甲氧基-5-甲基-胞苷、4-甲氧基-假异胞苷、4-甲氧基-1-甲基-假异胞苷、2-氨基嘌呤、2,6-二氨基嘌呤、7-脱氮-腺嘌呤、7-脱氮-8-氮杂-腺嘌呤、7-脱氮-2-氨基嘌呤、7-脱氮-8-氮杂-2-氨基嘌呤、7-脱氮-2,6-二氨基嘌呤、7-脱氮-8-氮杂-2,6-二氨基嘌呤、1-甲基腺苷、N6-甲基腺苷、N6-异戊烯基腺苷、N6-(顺-羟基异戊烯基)腺苷、2-甲基硫代-N6-(顺-羟基异戊烯基)腺苷、N6-甘氨酰氨基甲酰腺苷、N6-苏氨酰氨基甲酰腺苷、2-甲基硫代-N6-苏氨酰氨基甲酰腺苷、N6,N6-二甲基腺苷、7-甲基腺嘌呤、2-甲基硫代-腺嘌呤、2-甲氧基-腺嘌呤、肌苷、1-甲基-肌苷、怀俄苷、怀丁苷、7-脱氮-鸟苷、7-脱氮-8-氮杂-鸟苷、6-硫代-鸟苷、6-硫代-7-脱氮-鸟苷、6-硫代-7-脱氮-8-氮杂-鸟苷、7-甲基-鸟苷、6-硫代-7-甲基-鸟苷、7-甲基肌苷、6-甲氧基-鸟苷、1-甲基鸟苷、N2-甲基鸟苷、N2,N2-二甲基鸟苷、8-氧代-鸟苷、7-甲基-8-氧代-鸟苷、1-甲基-6-硫代-鸟苷、N2-甲基-6-硫代-鸟苷和N2,N2-二甲基-6-硫代-鸟苷。这些修饰，可以是随机的，也可以是在特定位点上。

在一种优选的实施方案中，所述核酸为mRNA。

可行地，所述mRNA编码至少一种抗原或其片段或其表位，或编码某种治疗性蛋白。

进一步可行地，所述抗原为致病性抗原，例如为肿瘤相关抗原或病原微生物抗原。

此外，所述mRNA可以是单顺反子mRNA，也可以是多顺反子mRNA。

第四方面，本发明提供了一种药物组合物，其包括如上述第二方面所述的脂质纳米颗粒，以及治疗剂或预防剂。

作为优选，所述治疗剂或预防剂为核酸，所述核酸包封于所述脂质纳米颗粒中。

关于所述核酸的可选类型如上述第三方面中所定义。

此外，作为优选，所述药物组合物中，所述脂质纳米颗粒与所述治疗剂或预防剂的质量比为10：1至100：1，进一步优选为20：1至50：1，更进一步优选为20：1至30：1。

作为优选，所述药物组合物的平均粒径为90nm至600nm，进一步优选为200nm至400nm，更进一步优选为200nm至300nm。

作为优选，所述药物组合物的多分散指数为0.001至0.5，进一步优选为0.001至0.45，更进一步优选为0.001至0.4。

第五方面，本发明提供了如上第四方面所述的药物组合物在制备靶向递送药物中的应用。

可行地，所述药物包括上述组合物以及药学上可接受的辅料。

第六方面，本发明提供了一种制剂，其包含如上第四方面所述的药物组合物和药学上可接受的辅料。

上述“药学上可接受的辅料”是指生产药品和调配处方时使用的赋形剂和附加剂；是除活性成分以外，在安全性方面已进行了合理的评估，且包含在药物制剂中的物质。“药学上可接受的辅料”除了赋形、充当载体、提高稳定性外，还具有增溶、助溶、缓控释等重要功能，是可能会影响到药品的质量、安全性和有效性的重要成分。按照作用和用途，药用辅料可分为溶剂、抛射剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、着色剂、黏合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、润湿剂、渗透压调节剂、稳定剂、助流剂、矫味剂、防腐剂、助悬剂、包衣材料、芳香剂、抗黏合剂、整合剂、渗透促进剂、pH值调节剂、缓冲剂、增塑剂、表面活性剂、发泡剂、消泡剂、增稠剂、包合剂、保湿剂、吸收剂、稀释剂、絮凝剂与反絮凝剂、助滤剂、释放阻滞剂等。

有益效果

本发明提供了一种阳离子脂质化合物、包含其的脂质纳米颗粒及其作为药物递送载体的应用以及基于所述脂质纳米颗粒的药物组合物和制剂。本发明的脂质纳米颗粒能够将治疗剂或预防剂（尤其是核酸类物质）通过肌肉注射递送至注射部位，并且所述治疗剂或预防剂在注射部位具有高表达，但在内脏中的表达量较低，这使得药物不仅能高效发挥活性还具有较低的内脏毒性，对核酸类治疗剂或预防剂的发展和应用具有重要的意义。

附图说明

一个或多个实施例通过与之对应的附图中的图片进行示例性说明，这些示例性说明并不构成对实施例的限定。在这里专用的词“示例性”意为“用作例子、实施例或说明性”。这里作为“示例性”所说明的任何实施例不必解释为优于或好于其它实施例。

图1为化合物1的氢谱图；

图2为化合物2的氢谱图；

图3为化合物3的氢谱图；

图4为化合物4的氢谱图；

图5为化合物5的氢谱图；

图6为化合物6的氢谱图；

图7为化合物7的氢谱图；

图8为化合物8的氢谱图；

图9为化合物9的氢谱图；

图10为化合物10的氢谱图；

图11显示包载荧光素酶Luciferase mRNA的不同脂质纳米颗粒在通过肌肉注射递送后注射部位与内脏的荧光强度比值汇总数据；

图12为包载荧光素酶Luciferase mRNA的脂质纳米颗粒TMF1在肌肉注射给药4h后，小鼠活体的荧光信号图片；其中，Color Scale：彩色标尺；Min：最小值；Max：最大值。

具体实施方式

A. 化学和制剂定义

当在化学基团的上下文中使用时：“氢”是指-H；“氘”是指²H或D；“羟基”是指-OH；“氧代”是指＝O；“羰基”是指-C(＝O)-；“羧基”是指-C(＝O)OH(也写作-COOH或-CO₂H)；“卤代”独立地指-F、-Cl、-Br或-I；“氨基”是指-NH₂；“羟基氨基”是指-NHOH；“硝基”是指-NO₂；亚氨基是指＝NH；“氰基”是指-CN；“异氰酸酯”是指-N＝C＝O；“叠氮基”是指-N₃；在单价上下文中，“磷酸酯”是指-OP(O)(OH)₂或其去质子化形式；在二价上下文中，“磷酸酯”是指-OP(O)(OH)O-或其去质子化形式；“巯基”是指-SH；且“硫代”是指＝S；“磺酰基”是指-S(O)₂-；“羟基磺酰基”是指-S(O)₂OH；“磺酰胺”是指-S(O)₂NH₂；且“亚磺酰基”是指-S(O)-。在化学式的上下文中，符号“-”是指单键，“＝”是指双键，且“≡”是指三键。符号“”代表任选的键，其如果存在的话是单键或双键。当垂直穿过键绘制时，符号“” 指示该基团的连接点。应当指出，通常仅以这种方式为较大的基团标识连接点，以帮助读者明确标识连接点。符号“”是指单键，其中连接至楔的粗端的基团“ 从纸面出来”。符号“”是指单键，其中连接至楔的粗端的基团“ 进入纸面”。符号“” 是指单键，其中在双键周围的几何形状(例如，E或Z)未确定。因此，两种选择以及它们的组合都是预期的。在本申请中显示的结构的原子上的任何未定义化合价暗含地表示与该原子键合的氢原子。在碳原子上的粗体点指示，与该碳相连的氢朝向纸平面之外。

在没有“取代的”修饰词的情况下使用的术语“烷基”表示单价饱和脂族基团，其具有碳原子作为连接点，具有直链或支链无环结构，且没有除碳和氢以外的原子。基团-CH₃(Me)、-CH₂CH₃(Et)、-CH₂CH₂CH₃(n-Pr或丙基)、-CH(CH₃)₂(i-Pr、 iPr或异丙基)、-CH₂CH₂CH₂CH₃(n-Bu)、-CH(CH₃)CH₂CH₃(仲丁基)、 -CH₂CH(CH₃)₂(异丁基)、-C(CH₃)₃(叔丁基、叔丁基、t-Bu或tBu)和-CH₂C(CH₃)₃(新戊基)是烷基的非限制性例子。在没有“取代的”修饰词的情况下使用的术语“烷二基”表示二价饱和脂族基团，其具有1个或2个饱和碳原子作为连接点，具有直链或支链无环结构，没有碳-碳双键或三键，且没有除碳和氢以外的原子。基团-CH₂-(亚甲基)、-CH₂CH₂-、-CH₂C(CH₃)₂CH₂-和-CH₂CH₂CH₂-是烷二基的非限制性例子。“烷烃”表示具有式H-R的化合物类别，其中R是烷基，该术语如上面所定义。当这些术语中的任一个与“取代的”修饰词一起使用时，一个或多个氢原子已经独立地被-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-NH₂、-NO₂、-CO₂H、-CO₂CH₃、-CN、-SH、-OCH₃、-OCH₂CH₃、-C(O)CH₃、-NHCH₃、-NHCH₂CH₃、-N(CH₃)₂、-C(O)NH₂、 -C(O)NHCH₃、-C(O)N(CH₃)₂、-OC(O)CH₃、-NHC(O)CH₃、-S(O)₂OH或-S(O)₂NH₂替换。下述基团是被取代的烷基的非限制性例子：-CH₂OH、-CH₂Cl、-CF₃、 -CH₂CN、-CH₂C(O)OH、-CH₂C(O)OCH₃、-CH₂C(O)NH₂、-CH₂C(O)CH₃、 -CH2OCH₃、-CH₂OC(O)CH₃、-CH₂NH₂、-CH₂N(CH₃)₂和-CH₂CH₂Cl。术语“卤代烷基”是被取代的烷基的子集，其中氢原子替换限于卤代(即-F、-Cl、-Br或-I)，使得不存在除碳、氢和卤素外的其它原子。基团-CH₂Cl是卤代烷基的一个非限制性例子。术语“氟代烷基”是被取代的烷基的子集，其中氢原子替换限于氟代，使得不存在除碳、氢和氟外的其它原子。基团-CH₂F、-CF₃和-CH₂CF₃是氟代烷基的非限制性例子。

在没有“取代的”修饰词的情况下使用的术语“烯基”表示单价不饱和脂族基团，其具有碳原子作为连接点，具有直链或支链无环结构，至少一个非芳族碳-碳双键，没有碳-碳三键，且没有除碳和氢以外的原子。非限制性例子包括:-CH＝CH₂(乙烯基)、-CH＝CHCH₃、-CH＝CHCH₂CH₃、 -CH₂CH＝CH₂(烯丙基)、 -CH₂CH＝CHCH₃和-CH＝CHCH＝CH₂。在没有“ 取代的”修饰词的情况下使用的术语“ 烯烃二基”表示二价不饱和脂族基团，其具有2个碳原子作为连接点，具有直链或支链、直链或支链无环结构，至少一个非芳族碳-碳双键，没有碳-碳三键，且没有除碳和氢以外的原子。基团-CH＝CH-、-CH＝C(CH₃)CH₂-、 -CH＝CHCH₂-和-CH₂CH＝CHCH₂-是烯烃二基基团的非限制性例子。应当指出，尽管烯烃二基基团是脂族的，但一旦在两端连接，就不排除该基团形成芳族结构的一部分。术语“烯烃”和“链烯烃”是同义的，并且表示具有式H-R的化合物类别，其中R是烯基，该术语如上面所定义。类似地，术语“ 末端烯烃”和“ α-烯烃”是同义的且表示具有刚好一个碳-碳双键的烯烃，其中该键是在分子的末端处的乙烯基的部分。当这些术语中的任一个与“ 取代的”修饰词一起使用时，一个或多个氢原子已经独立地被-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-NH₂、-NO₂、-CO₂H、-CO₂CH₃、-CN、-SH、-OCH₃、-OCH₂CH₃、-C(O)CH₃、-NHCH₃、-NHCH₂CH₃、-N(CH₃)₂、-C(O)NH₂、-C(O)NHCH₃、-C(O)N(CH₃)₂、-OC(O)CH₃、-NHC(O)CH₃、-S(O)₂OH或-S(O)₂NH₂替换。基团-CH＝CHF、-CH＝CHCl和-CH＝CHBr是被取代的烯基的非限制性例子。

在没有“取代的”修饰词的情况下使用的术语“炔基”表示单价不饱和脂族基团，其具有碳原子作为连接点，具有直链或支链无环结构，至少一个碳-碳三键，且没有除碳和氢以外的原子。本文中使用的术语炔基不排除一个或多个非芳族碳-碳双键的存在。基团-C≡CH、-C≡CCH₃和-CH₂C≡CCH₃是炔基的非限制性例子。“炔烃”表示具有式H-R的化合物类别，其中R是炔基。当这些术语中的任一个与“取代的”修饰词一起使用时，一个或多个氢原子已经独立地被-OH、-F、-Cl、-Br、-I、-NH₂、-NO₂、-CO₂H、-CO₂CH₃、-CN、-SH、-OCH₃、-OCH₂CH₃、-C(O)CH₃、-NHCH₃、-NHCH₂CH₃、-N(CH₃)₂、-C(O)NH₂、-C(O)NHCH₃、 -C(O)N(CH₃)₂、-OC(O)CH₃、-NHC(O)CH₃、-S(O)₂OH或-S(O)₂NH₂替换。

“预防(prevention)”或“预防(preventing)”包括：(1)抑制受试者或患者的疾病发作，所述受试者或患者可能有患所述疾病的风险和/或易患所述疾病，但尚未经历或表现出所述疾病的任何或所有病状或征状；和/或(2)减慢受试者或患者中的疾病的病状或征状发作，所述受试者或患者可能有患所述疾病的风险和/或易患所述疾病，但尚未经历或表现出所述疾病的任何或所有病状或征状。

“治疗(treatment)”或“治疗(treating)”包括(1)抑制正经历或表现出疾病的病状或征状的受试者或患者中的所述疾病(例如，阻止所述病状和/或征状的进一步发展)，(2)改善正经历或表现出疾病的病状或征状的受试者或患者中的所述疾病(例如，逆转所述病状和/或征状)，和/或(3)实现正经历或表现出疾病的病状或征状的受试者或患者中的所述疾病的任何可测量的减轻。

“蛋白质”、“多肽”或“肽”是指氨基酸残基的聚合物，包括宽范围的蛋白分子诸如细胞因子、趋化因子、白介素、干扰素、生长因子、凝固因子、抗凝剂、血液因子、骨形态形成蛋白、免疫球蛋白和酶。

抗原（antigen，缩写Ag）是指能引起抗体生成的物质，是任何可诱发免疫反应的物质。外来分子可经过B细胞上免疫球蛋白的辨识或经抗原提呈细胞的处理并与主要组织相容性复合体结合成复合物再活化T细胞，引发连续的免疫反应。

抗原表位又称抗原决定簇，它可以是由连续序列（蛋白质一级结构）组成或由不连续的蛋白质三维结构组成，决定抗原性的特殊化学基团。抗原表位大多存在于抗原物质的表面，有些存在于抗原物质的内部，须经酶或其他方式处理后才暴露出来。一个天然抗原物质可有多种和多个决定簇。抗原分子越大，表位的数目越多。

肿瘤相关抗原(tumor-associated antigen, TAA)，是指在肿瘤细胞或正常细胞上存在的抗原分子，包括：胚胎性蛋白、糖蛋白抗原、鳞状细胞抗原等，常用于临床肿瘤的诊断。肿瘤相关抗原并非肿瘤细胞所特有，正常细胞可微量合成，而在肿瘤细胞增殖时高度表达，因此称为“相关抗原”。来源于同一组织类型的肿瘤，在不同个体中具有相同的肿瘤相关抗原。

病原微生物是指可以侵犯人体，引起感染甚至传染病的微生物，或称病原体。病原体中，以细菌和病毒的危害性最大。病原微生物指朊毒体、真菌、细菌、螺旋体、支原体、立克次体、衣原体、病毒。病原微生物抗原是指来源于病原体，并具有引发免疫反应功能的物质。

“脂质包裹或包封”系指提供活性剂或治疗剂（例如核酸（例如，mRNA））的脂质纳米粒子，其具有全包裹、部分包裹或两者中间。在一些实施例中，核酸（例如mRNA）被完全封装在脂质纳米粒子中。

在各种实施方案中，脂质纳米颗粒具有以下的平均直径：约90nm至约600nm、约100nm至约550nm、约150nm至约500nm、约200nm至约400nm、约250nm至约300nm、约200nm至约300nm，并且是基本无毒的。

B. 辅助性脂质

在本公开内容的一些方面，将含有一种或多种辅助性脂质的组合物与本申请公开的阳离子脂质混合以产生脂质纳米颗粒。在一些实施方案中，将所述阳离子脂质与1、2、3、4或5种不同类型的辅助性脂质混合。考虑可以将阳离子脂质与单一类型的多种不同辅助性脂质混合。在一些实施方案中，所述辅助性脂质包含但不限于磷脂、类固醇或类固醇衍生物、聚合物缀合脂质和修饰的脂质中的一种或多种。

“磷脂”包含磷酸酯基团的任何脂质。在一些实施方案中，所述磷脂是含有一个或两个长链C6-C24烷基或烯基、甘油或鞘氨醇、一个或两个磷酸酯基团和任选的小有机分子的结构。在一些实施方案中，所述小有机分子是氨基酸、糖或氨基取代的烷氧基，诸如胆碱或乙醇胺。在一些实施方案中，所述磷脂是磷脂酰胆碱。在一些实施方案中，所述磷脂是DOPE、DSPC、DPPC、DMPC、DOPC、POPC或SM。在一些实施方案中，所述磷脂是DOPE或DSPC。

“类固醇和类固醇衍生物”包含任何类固醇或类固醇衍生物。如本文中使用的，在一些实施方案中，术语“类固醇”是一类具有四环17碳环状结构的化合物，其可以进一步包含一个或多个取代，所述取代包括烷基、烷氧基、羟基、氧代基、酰基，或在两个或更多个碳原子之间的双键。在一个方面，类固醇的环结构包含三个稠合的环己基环和稠合的环戊基环。在一些实施方案中，类固醇衍生物包含具有一个或多个非烷基取代的上述环结构。在一些实施方案中，类固醇或类固醇衍生物是甾醇。在本公开内容的一些实施方案中，所述类固醇或类固醇衍生物是胆甾烷或胆甾烷衍生物。如上所述，胆甾烷衍生物包括一个或多个上述环系统的非烷基取代。在一些实施方案中，所述胆甾烷或胆甾烷衍生物是胆甾烯或胆甾烯衍生物或者甾醇或甾醇衍生物。在其它实施方案中，所述胆甾烷或胆甾烷衍生物是胆甾烯(cholestere)和甾醇或其衍生物。

“聚合物缀合脂质”是指抑制脂质纳米颗粒聚集或提高脂质纳米颗粒稳定性或改变免疫反应或改变在体内的循环时间的脂质。所述聚合物缀合脂质包含，但不限于聚乙二醇缀合脂质、聚乳酸缀合脂质、聚酰胺缀合脂质、阳离子聚合物缀合脂质、聚肌氨酸（pSar）缀合脂质、聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）缀合脂质、聚氨基酸缀合脂质、多肽缀合脂质、聚类肽缀合脂质或其混合物。在一些实施方案中，所述“聚乙二醇缀合脂质”，是指已连接有PEG基团的任何脂质。在一些实施方案中，所述PEG脂质是是甘油二酯，其也包含与甘油基团连接的PEG链。在其它实施方案中，所述PEG脂质是含有用PEG链与接头基团连接的一个或多个C6-C24长链烷基或烯基或C6-C24脂肪酸基团的化合物。PEG脂质的一些非限制性例子包括PEG修饰的磷脂酰乙醇胺和磷脂酸、PEG缀合的神经酰胺、PEG修饰的二烷基胺和PEG修饰的1 ,2-二酰氧基丙烷-3-胺、PEG修饰的二酰基甘油和二烷基甘油。在一些实施方案中，PEG修饰的二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺或PEG修饰的二肉豆蔻酰基-sn-甘油。在一些实施方案中，通过脂质的PEG组分的分子量来测量PEG修饰。在一些实施方案中，所述用于修饰的PEG的分子量是约100至约15 ,000。在一些实施方案中，所述分子量是约200至约500、约400至约5000、约500至约3000、或约1200至约3000。用于修饰的PEG的分子量是约100、200、400、500、600、800、1000、1250、1500、1750、2000、2250、2500、2750、3000、3500、4000、4500、5000、6000、7000、8000、9000、10000、12500至约15000。“修饰的脂质”包含小分子化合物，维生素，碳水化合物，肽，蛋白质，核酸，脂多糖，无机物分子或颗粒，金属离子或颗粒及上述物质的组合修饰的脂质。

另外，除非另有其它明确表示，否则在整个说明书和权利要求书中，术语“包括”或其变换如“包含”或“包括有”等等将被理解为包括所陈述的元件或组成部分，而并未排除其它元件或其它组成部分。

英文缩略词列表

。

为了更加清楚地描述本申请的目的、特征以及优势，以下将结合附图和具体实施例对本申请进行详细描述，但下文详细描述的本申请的实施例，仅仅是为了对本申请的内容进行举例说明，并不对本申请构成任何限定。

本发明中具体实施例中，所使用的原料可通过市售获得。

实施例1：化合物合成

化合物1按如下反应式合成：

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步骤1：化合物1-1的合成

100 mL烧瓶中加入苯甲醛(5.91g，55.66 mmol)，乙醇(17 mL)中，冷却至18℃，向溶液中缓慢滴加氨水(11.97 g，85.39 mmol)，滴加完18℃搅拌2h。再称取环氧氯丙烷(5g，54.04 mmol)，在40-45℃下搅拌16h。反应完全后，浓缩干反应液，加入甲苯(20 mL)，水(20 mL)溶解粗品，称取浓盐酸(8.32 g，82.13 mmol)滴加入反应体系，保温35-40℃搅拌3h。分液，加入水(10 mL)洗涤甲苯相。合并水相，浓缩得6g产品化合物1-1。

步骤2：化合物1-2的合成

100 mL烧瓶中加入化合物1-1 (3 g，20.55mmol)，二碳酸二叔丁酯Boc₂O (4.89g，22.40 mmol), 甲醇(12 mL), 水(7 mL)，称取碳酸氢钾(2.26 g，11.60 mmol)分三批加入反应液中，搅拌3h。TLC (10% MeOH/DCM)检测反应进行程度。反应完全后加入二氯甲烷(15 mL),水(6 mL)萃取分液，浓缩有机相，得到粗产品约5 g。使用Flash柱纯化(20g硅胶，100 mL的正庚烷; 100 mL 1% EtOAc +99%的正庚烷; 100 mL 5% EtOAc +95%的正庚烷;600 mL 10% EtOAc +90%的正庚烷)分离得到纯的产品化合物1-2, 800 mg，收率19 %。¹HNMR (400 MHz, CDCl₃): δ 4.94 (m, 1H), 3.81-3,75 (m, 1H), 3.73-3.69 (m, 1H),3.50-3.46 (m, 1H), 3.25-3.20 (m, 2H), 3.00-2.94 (m, 2H), 2.63-2.56 (m, 2H),2.53-2.48 (m, 1H), 2.37-2.33 (m, 1H), 2.31 (m, 3H), 1.43 (s, 9H)。

步骤3：化合物1-4的合成

25 mL烧瓶中加入化合物1-2 (700 mg，3.34 mmol)，N-甲基-2-（叔丁基二苯基甲硅氧基）乙胺（化合物1-3，CAS：165689-59-8） (1.05 g，3.34 mmol)，碳酸钾 (1.15 g，8.35 mmol)，异丙醇IPA (8 mL)，加热至80℃搅拌16h。TLC(10% MeOH/DCM)检测反应进行程度。反应完全后，过滤，浓缩有机相，得到粗产品约2 g。使用Flash柱纯化(12g硅胶，流动相分别为：100 mL的正庚烷;100 mL 1% EtOAc +99%的正庚烷; 100 mL 2% EtOAc +98%的正庚烷;100 mL 8% EtOAc +92%的正庚烷，100 mL 15% EtOAc +85%的正庚烷，600 mL 30%EtOAc +70%的正庚烷)分离得到纯的产品化合物1-4, 1 g，收率62 %。¹H NMR (400 MHz,CDCl₃): δ 7.68-7.66 (m, 4H), 7.43-7.37 (m, 6H), 4.99 (m, 1H), 3.74-3,70 (m,3H), 3.35-3.31 (m, 1H), 3.03-2.97 (m, 1H), 2.73-2.67 (m, 1H), 2.55-2.52 (m,1H), 2.41-2.38 (m, 2H), 2.30 (m, 3H), 1.44 (s, 9H), 1.06-1.04 (m, 9H)。

步骤4：化合物1-5的合成

25 mL烧瓶中加入化合物1-4(300 mg，0.62 mmol)，乙酸乙酯 (2 mL)，冰浴降温至0-5℃，称取HCl/EtOAc(0.6 mL, 4 M),升至室温搅拌3h。TLC(10% MeOH/DCM)检测反应进行程度。反应完全后，浓缩有机相，得到产品化合物1-5约300 mg。

步骤5：化合物1-7的合成

25 mL烧瓶中加入2-己基癸酸5-羧戊基酯（化合物1-6，CAS:2805989-43-7）(496.14 mg，1.34 mmol)，1,3-二环己基碳二亚胺DCC(276.25 mg，1.34 mmol)，4-二甲氨基吡啶DMAP(122.68 mg，1.0 mmol)，二氯甲烷DCM(5 mL)，室温搅拌30min，然后滴加化合物1-5 (330 mg，0.66 mmol)，室温搅拌16h。TLC(30 % EtOAc /正庚烷)检测反应进行程度。反应完全后，过滤，滤液加入5 mL水及5 mL饱和食盐水洗，无水Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩有机相，得到粗产品约1 g。使用Flash柱纯化(12 g硅胶，流动相分别为：100 mL的正庚烷; 100 mL 1%EtOAc +99%的正庚烷；100 mL 2% EtOAc +98%的正庚烷;100 mL 8% EtOAc +92%的正庚烷；200 mL 20% EtOAc +80%的正庚烷)分离得到纯的产品化合物1-7, 330 mg，收率45 %。¹HNMR (400 MHz, CDCl₃): δ 7.67-7.65 (m, 4H), 7.45-7.36 (m, 6H), 6.26 (m, 1H),4.98 (m, 1H), 4.07-4.02 (m, 4H), 3.75 (m, 2H), 3.49-3.45 (m, 2H), 2.59 (m,4H), 2.34-2.22 (m, 7H), 2.11-2.08 (m, 2H), 1.67-1.53 (m, 14H), 1.46-1.25 (m,60H), 1.05 (s, 9H), 0.89-0.85 (m, 12H)。

步骤6：化合物1的合成

25 mL烧瓶中加入化合物1-7(330 mg，0.31mmol)，四氢呋喃THF(3 mL)，冰浴降温至0-5℃，保温0-5℃滴加四丁基氟化铵TBAF(240.19 mg，0.92 mmol)，保温搅拌3h。TLC(5%MeOH /DCM)检测反应进行程度。反应完全后，用饱和氯化铵水溶液淬灭反应，EtOAc 5mL×2萃取，合并有机相，无水Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩有机相，得到粗产品约500 mg。使用Flash柱纯化(4g硅胶，用100 mL 正庚烷上柱；流动相分别为：100 mL 1%EtOAc+99%的正庚烷; 100mL 2%EtOAc+98%的正庚烷; 100 mL 10%EtOAc+90%的正庚烷;100 mL 30%EtOAc+70%的正庚烷;300 mL 50%EtOAc+50%的正庚烷)分离得到纯的产品化合物1，100 mg，收率39 %。¹H NMR(400 MHz, CDCl₃): δ 6.14-6.11 (m, 1H), 5.06-5.04 (m, 1H), 4.08-4.04 (m, 4H),3.63-3.46 (m, 4H), 2.64-2.60 (m, 4H), 2.35-2.26 (m, 7H), 2.20-2.17 (m, 2H),1.70-1.53 (m, 12H), 1.46-1.35 (m, 8H), 1.33-1.25 (m, 45H), 0.89-0.85 (m,12H)。

化合物2按如下反应式合成：

；

步骤1：化合物2-2的合成

25 mL烧瓶中加入8-氧代-8-（十五烷-7-基氧基）辛酸（化合物2-1，CAS: 2765518-33-8）(840.64 mg，2.19 mmol)，1,3-二环己基碳二亚胺DCC(450.99 mg，2.19 mmol)，4-二甲氨基吡啶DMAP(133.52 mg，1.09 mmol)，二氯甲烷DCM(3 mL)，室温搅拌30min，然后滴加1-4 (500 mg，1.09 mmol)，室温搅拌过夜。TLC(20% EtOAc /正庚烷)检测反应进行程度。反应完全后，过滤，滤液加入5 mL水及5 mL饱和食盐水洗，无水Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩有机相，得到粗产品约1.6 g。使用Flash柱纯化(12 g硅胶，流动相分别为：100 mL的正庚烷; 100mL 1% EtOAc +99%的正庚烷; 100 mL 2% EtOAc +98%的正庚烷;100 mL 8% EtOAc +92%的正庚烷)分离得到纯的产品化合物2-2, 320 mg，收率25 %。

步骤2：化合物2的合成

25 mL烧瓶中加入化合物2-2(320 mg，0.29mmol)，四氢呋喃THF(3 mL)，冰浴降温至0-5℃，保温0-5℃滴加四丁基氟化铵TBAF(224.16 mg，0.86 mmol)，保温搅拌3h。TLC(5%MeOH /DCM)检测反应进行程度。反应完全后，用饱和氯化铵水溶液淬灭反应，EtOAc 5mL×2萃取，合并有机相，无水Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩有机相，得到粗产品约500 mg。使用Flash柱纯化(4 g硅胶，用100 mL 正庚烷上柱；流动相分别为：100 mL 1%EtOAc+99%的正庚烷; 100mL 2%EtOAc+98%的正庚烷; 100 mL 10%EtOAc+90%的正庚烷;100 mL 30%EtOAc+70%的正庚烷;300 mL 50%EtOAc+50%的正庚烷)分离得到纯的产品化合物2，100 mg，收率40 %。¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 6.09 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.05 (q, J = 5.7 Hz, 1H), 4.85(p, J = 6.2 Hz, 2H), 3.66-3.41 (m, 4H), 2.61 (t, J = 5.6 Hz, 4H), 2.39-2.22(m, 9H), 2.20-2.12 (m, 2H), 1.67-1.44 (m, 17H), 1.40-1.16 (m, 53H), 0.87 (t,J = 6.7 Hz, 12H)。

化合物3按如下反应式合成：

；

步骤1：化合物3-1的合成

250 mL烧瓶中加入十六碳二酸 (5.64 g，19.7 mmol)，1,3-二环己基碳二亚胺DCC(4.06 g，19.7 mmol)， 4-二甲氨基吡啶DMAP(802.28 mg，6.57 mmol)，二氯甲烷DCM(30mL)，室温搅拌30min，然后滴加十五烷-7-醇 (1.5 g，6.57 mmol)，室温搅拌过夜。TLC(30 %乙酸乙酯/正庚烷)检测反应进行程度。反应完全后，过滤，滤液加入50 mL水及50 mL饱和食盐水洗，无水Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩有机相，得到粗产品约5 g。使用Flash柱纯化(40 g硅胶，流动相分别为：100 mL的正庚烷; 100 mL 1% EtOAc +99%的正庚烷; 100 mL 2% EtOAc+98%的正庚烷;800 mL 8% EtOAc +92%的正庚烷)分离得到纯的产品化合物3-1，1.4 g，收率31 %。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 4.86 (p, J = 6.3 Hz, 1H), 2.31 (dt, J = 26.9,7.5 Hz, 4H), 1.62 (h, J = 7.1 Hz, 4H), 1.50 (q, J = 6.1 Hz, 4H), 1.40-1.16(m, 42H), 0.87 (t, J = 6.7 Hz, 6H)。

步骤2：化合物3-2的合成

25 mL烧瓶中加入化合物3-1 (706.27 mg，1.42 mmol)，1,3-二环己基碳二亚胺DCC(293.32 mg，1.42 mmol)， 4-二甲氨基吡啶DMAP(86.64 mg，0.72 mmol)，二氯甲烷DCM(30 mL)，室温搅拌30min，然后滴加化合物1-4 （来源于上述化合物1合成中的中间体）(300mg，0.72 mmol)，室温搅拌过夜。TLC(5 % MeOH/DCM)检测反应进行程度。反应完全后，过滤，滤液加入5 mL水及5 mL饱和食盐水洗，无水Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩有机相，得到粗产品约1.2 g。使用Flash柱纯化(4 g硅胶，流动相分别为：100 mL的正庚烷; 100 mL 1% EtOAc +99%的正庚烷; 100 mL 2% EtOAc +98%的正庚烷;100 mL 8% EtOAc +92%的正庚烷; 100mL 20% EtOAc +80%的正庚烷; 400 mL 30% EtOAc +70%的正庚烷)分离得到纯的产品化合物3-2，240 mg，收率25 %。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 7.72-7.61 (m, 5H), 7.48-7.33(m, 8H), 4.98 (s, 1H), 4.87 (p, J = 6.3 Hz, 3H), 3.74 (s, 2H), 3.47 (t, J =5.8 Hz, 3H), 2.73-2.49 (m, 4H), 2.27 (t, J = 7.5 Hz, 12H), 1.70-1.44 (m,23H), 1.26 (td, J = 7.4, 6.3, 3.0 Hz, 124H), 1.05 (s, 9H), 0.91-0.84 (m,12H)。

步骤3：化合物3的合成

25 mL烧瓶中加入化合物3-2 (240 mg，0.18mmol)，四氢呋喃THF(3 mL)，冰浴降温至0-5℃，保温0-5℃滴加四丁基氟化铵TBAF(140.05 mg，0.54 mmol)，保温搅拌3h。TLC(5%MeOH /DCM)检测反应进行程度。反应完全后，用饱和氯化铵水溶液淬灭反应，EtOAc 10 mL×2萃取，合并有机相，无水Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩有机相，得到粗产品约250 mg。使用Flash柱纯化(4 g硅胶，用100 mL 正庚烷上柱；流动相分别为：100 mL 1%EtOAc+99%的正庚烷;100 mL 2%EtOAc+98%的正庚烷; 100 mL 10%EtOAc+90%的正庚烷;100 mL 30%EtOAc+70%的正庚烷;300 mL 50%EtOAc+50%的正庚烷)分离得到纯的产品化合物3，80 mg，收率40 %。¹HNMR (400 MHz, CDCl₃) δ 5.09 (s, 1H), 4.86 (p, J = 6.3 Hz, 2H), 3.64 (t, J =5.2 Hz, 2H), 3.50 (ddd, J = 14.3, 8.9, 5.5 Hz, 2H), 2.67 (s, 3H), 2.44-2.11(m, 12H), 1.61 (p, J = 7.3 Hz, 9H), 1.50 (q, J = 6.1 Hz, 8H), 1.35-1.17 (m,96H), 0.87 (t, J = 6.7 Hz, 12H)。

化合物4按如下反应式合成：

；

步骤1：化合物4-1的合成

250 mL烧瓶中加入丁二酸酐(1.75 g，17.51 mmol)，4-二甲氨基吡啶DMAP(2.14g，17.51 mmol)，十五烷-7-醇 (1.5 g，6.57 mmol)，二氯甲烷DCM(30 mL)，室温搅拌过夜。TLC(30 % 乙酸乙酯/正庚烷)检测反应进行程度。反应完全后，过滤，滤液加入50 mL水及50mL饱和食盐水洗，无水Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩有机相，得到粗产品约5 g。使用Flash柱纯化(40 g硅胶，流动相分别为：100 mL的正庚烷; 100 mL 1% EtOAc +99%的正庚烷; 100 mL2% EtOAc +98%的正庚烷;600 mL 8% EtOAc +92%的正庚烷)分离得到纯的产品化合物4-1，2.4 g，收率42 %。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 4.88 (p, J = 6.3 Hz, 1H), 2.74-2.55(m, 4H), 1.51 (q, J = 6.2 Hz, 4H), 1.26 (d, J = 6.0 Hz, 22H), 0.87 (t, J =6.7 Hz, 6H)。

步骤2：化合物4-2的合成

25 mL烧瓶中加入化合物4-1 (466.98 mg，1.42 mmol)，1,3-二环己基碳二亚胺DCC(293.32 mg，1.42 mmol)， 4-二甲氨基吡啶DMAP(86.64 mg，0.72 mmol)，二氯甲烷DCM(3 mL)，室温搅拌30min，然后滴加化合物1-4 （来源于上述化合物1合成中的中间体）(300mg，0.72 mmol)，室温搅拌过夜。TLC(5 % MeOH/DCM)检测反应进行程度。反应完全后，过滤，滤液加入5 mL水及5 mL饱和食盐水洗，无水Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩有机相，得到粗产品约800 mg。使用Flash柱纯化(4 g硅胶，流动相分别为：100 mL的正庚烷; 100 mL 1% EtOAc+99%的正庚烷; 100 mL 2% EtOAc +98%的正庚烷;800 mL 8% EtOAc +92%的正庚烷; 300mL 20% EtOAc +80%的正庚烷)分离得到纯的产品化合物4-2，240 mg，收率33.5 %。¹H NMR(400 MHz, CDCl₃) δ 7.66 (d, J = 6.9 Hz, 5H), 7.41 (t, J = 8.6 Hz, 7H), 5.03(s, 1H), 4.92-4.76 (m, 3H), 2.74-2.51 (m, 12H), 1.60-1.46 (m, 11H), 1.35-1.17(m, 64H), 1.05 (s, 9H), 0.87 (t, J = 6.6 Hz, 12H)。

步骤3：化合物4的合成

25 mL烧瓶中加入化合物4-2(240 mg，0.24 mmol)，四氢呋喃THF(3 mL)，冰浴降温至0-5℃，保温0-5℃滴加四丁基氟化铵TBAF(186.84 mg，0.72 mmol)，保温搅拌3h。TLC(5%MeOH /DCM)检测反应进行程度。反应完全后，用饱和氯化铵水溶液淬灭反应，EtOAc 10 mL×2萃取，合并有机相，无水Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩有机相，得到粗产品约250 mg。使用Flash柱纯化(4g硅胶，用100 mL 正庚烷上柱；流动相分别为：100 mL 1%EtOAc+99%的正庚烷;100 mL 2%EtOAc+98%的正庚烷; 100 mL 10%EtOAc+90%的正庚烷;300 mL 30%EtOAc+70%的正庚烷)分离得到纯的产品化合物4，80 mg，收率44 %。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 6.56(s, 1H), 5.18-5.07 (m, 1H), 4.85 (dp, J = 12.3, 6.2 Hz, 2H), 3.61 (ddt, J =10.4, 6.2, 3.8 Hz, 3H), 3.43 (dt, J = 14.1, 6.0 Hz, 1H), 2.83 – 2.55 (m,10H), 2.55-2.33 (m, 5H), 1.59-1.42 (m, 8H), 1.26 (d, J = 6.7 Hz, 42H), 0.87(t, J = 6.7 Hz, 12H)。

化合物5按如下反应式合成：

；

步骤1：化合物5的合成

25 mL烧瓶中加入4-二甲氨基吡啶DMAP(65.9 mg，0.54 mmol)，1,3-二环己基碳二亚胺DCC(222.7 mg，1.1 mmol)，二氯甲烷DCM (1.5 mL)，搅拌澄清，加入2-己基癸酸5-羧戊基酯（化合物1-6，CAS:2805989-43-7）(400 mg，1.1 mmol)，室温搅拌30min，然后一次性加入1-氨基-3-（二甲氨基）丙醇(化合物5-1，购自于上海毕得医药科技股份有限公司，63.8mg，0.55 mmol)，室温搅拌过夜。TLC(10%MeOH/DCM))检测反应进行程度。反应完全后，过滤反应液除去固体，滤液加入5 mL水及5 mL饱和食盐水洗，无水Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩有机相，得到粗产品约510 mg。使用Flash柱纯化(20 g硅胶，用100 mL正庚烷上柱；流动相分别为：100 mL 1%EtOAc+99%的正庚烷;100 mL 2%EtOAc+98%的正庚烷;100 mL 3%EtOAc+97%的正庚烷;100 mL 5%EtOAc+95%的正庚烷;100 mL 10%EtOAc+90%的正庚烷;100 mL 20%EtOAc+80%的正庚烷;300 mL 50%EtOAc+50%的正庚烷)分离得到纯的产品化合物5，300 mg，收率67%。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃): δ 6.32-6.29 (m, 1H), 5.03-4.97 (m, 2H), 4.07-4.04(m, 4H), 3.02 (m, 2H), 2.49-2.39 (m, 2H), 2.33-2.26 (m, 11H), 2.18-2.14 (m,2H), 1.69-1.53 (m, 12H), 1.46-1.24 (m, 51H), 0.88-0.85 (m, 12H)。

化合物6按如下反应式合成：

；

步骤1：化合物6-1的合成

25 mL烧瓶中加入2-己基癸酸5-羧戊基酯（化合物1-6，CAS:2805989-43-7）(2.1g，5.67 mmol)，1,3-二环己基碳二亚胺DCC(1.17 g，5.67 mmol)， 4-二甲氨基吡啶DMAP(692.63 mg，5.67 mmol)，二氯甲烷DCM(10 mL)，室温搅拌30min，然后滴加1-氨基-3-(二甲基氨基)丙-2-醇 (670 mg，5.67 mmol)，室温搅拌过夜。TLC(5 % MeOH /DCM)检测反应进行程度。反应完全后，过滤，滤液加入10 mL水及10 mL饱和食盐水洗，无水Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩有机相，得到粗产品约3.5 g。使用Flash柱纯化(40 g硅胶，流动相分别为：100 mL的正庚烷; 100 mL 1% EtOAc +99%的正庚烷; 100 mL 2% EtOAc +98%的正庚烷;100 mL 8%EtOAc +92%的正庚烷; 100 mL 20% EtOAc +80%的正庚烷; 600 mL 50% EtOAc +50%的正庚烷)分离得到纯的产品化合物6-1，1 g，收率37 %。

步骤2：化合物6的合成

25 mL烧瓶中加入8-氧代-8-（十五烷-7-基氧基）辛酸（化合物2-1，CAS: 2765518-33-8）(245.10 mg，0.64 mmol)，1,3-二环己基碳二亚胺DCC(131.50 mg，0.64 mmol)，4-二甲氨基吡啶DMAP(77.86 mg，0.64 mmol)，二氯甲烷DCM(3 mL)，室温搅拌30min，然后滴加6-1 (300 mg，0.64 mmol)，室温搅拌过夜。TLC(5 % MeOH /DCM)检测反应进行程度。反应完全后，过滤，滤液加入5 mL水及5 mL饱和食盐水洗，无水Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩有机相，得到粗产品约700 mg。使用Flash柱纯化(12 g硅胶，流动相分别为：100 mL的正庚烷; 100 mL 1%EtOAc +99%的正庚烷; 100 mL 2% EtOAc +98%的正庚烷;100 mL 8% EtOAc +92%的正庚烷;100 mL 20% EtOAc +80%的正庚烷;700 mL 30% EtOAc +70%的正庚烷)分离得到纯的产品化合物6，240 mg，收率45 %。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 6.34 (d, J = 5.7 Hz, 1H),5.01 (p, J = 5.9 Hz, 1H), 4.85 (p, J = 6.3 Hz, 1H), 4.05 (t, J = 6.7 Hz, 2H),3.56-3.41 (m, 2H), 2.48 (q, J = 12.9, 6.1 Hz, 2H), 2.37-2.24 (m, 11H), 2.17(t, J = 7.7 Hz, 2H), 1.73-1.15 (m, 66H), 0.87 (t, J = 6.7 Hz, 12H)。

化合物7按如下反应式合成：

；

步骤1：化合物7的合成

25 mL烧瓶中加入8-氧代-8-（十五烷-7-基氧基）辛酸（化合物2-1，CAS: 2765518-33-8）(650.87 mg，1.69 mmol)，1,3-二环己基碳二亚胺DCC(349.18 mg，1.69 mmol)，4-二甲氨基吡啶DMAP(103.38 mg，0.85 mmol)，二氯甲烷DCM(5 mL)，室温搅拌30min，然后滴加1-氨基-3-(二甲基氨基)丙-2-醇 (100 mg，0.85 mmol)，室温搅拌过夜。TLC(5 % MeOH /DCM)检测反应进行程度。反应完全后，过滤，滤液加入10 mL水及10 mL饱和食盐水洗，无水Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩有机相，得到粗产品约800 mg。使用Flash柱纯化(12 g硅胶，流动相分别为：100 mL的正庚烷; 100 mL 1% EtOAc +99%的正庚烷; 100 mL 2% EtOAc +98%的正庚烷;100 mL 8% EtOAc +92%的正庚烷; 100 mL 20% EtOAc +80%的正庚烷; 800 mL 30%EtOAc +70%的正庚烷)分离得到纯的产品化合物7，460 mg，收率64 %。¹H NMR (400 MHz,CDCl₃) δ 6.32 (s, 1H), 5.01 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 4.85 (p, J = 6.2 Hz, 2H),3.49 (t, J = 5.1 Hz, 2H), 2.47 (q, J = 12.8, 6.1 Hz, 2H), 2.36-2.23 (m, 12H),2.15 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 1.56 (d, J = 48.7, 6.5, 6.0 Hz, 17H), 1.40-1.16 (m,53H), 0.87 (t, J = 6.7 Hz, 12H)。

化合物8按如下反应式合成：

；

步骤1：化合物8的合成

25 mL烧瓶中加入2-己基癸酸6-羧基己基酯（化合物8-1，CAS:2805989-46-0）(245.10 mg，0.64 mmol)，1,3-二环己基碳二亚胺DCC(131.50 mg，0.64 mmol)，4-二甲氨基吡啶DMAP(77.86 mg，0.64 mmol)，二氯甲烷DCM(3 mL)，室温搅拌30min，然后滴加化合物6-1（来源于上述化合物6合成中的中间体） (300 mg，0.64 mmol)，室温搅拌过夜。TLC(5 %MeOH /DCM)检测反应进行程度。反应完全后，过滤，滤液加入5 mL水及5 mL饱和食盐水洗，无水Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩有机相，得到粗产品约600 mg。使用Flash柱纯化(12 g硅胶，流动相分别为：100 mL的正庚烷; 100 mL 1% EtOAc +99%的正庚烷; 100 mL 2% EtOAc +98%的正庚烷;100 mL 8% EtOAc +92%的正庚烷; 200 mL 20% EtOAc +80%的正庚烷)分离得到纯的产品化合物8，120 mg，收率22 %。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 6.34 (d, J = 5.5 Hz,1H), 5.01 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 4.05 (t, J = 6.7 Hz, 4H), 3.49 (t, J = 5.6 Hz,2H), 2.48 (dd, J = 8.6, 6.2 Hz, 2H), 2.30 (d, J = 11.3 Hz, 10H), 2.17 (t, J =7.7 Hz, 2H), 1.71-1.50 (m, 13H), 1.48-1.14 (m, 57H), 0.87 (t, J = 6.7 Hz,12H)。

化合物9按如下反应式合成：

；

步骤1：化合物9的合成

25 mL烧瓶中加入6-(癸酰氧基)酸化合物（化合物9-1,CAS:2254439-01-3）(201.21 mg，0.70 mmol)，1,3-二环己基碳二亚胺DCC(144.96 mg，0.70 mmol)，4-二甲氨基吡啶DMAP(85.83 mg，0.70 mmol)，二氯甲烷DCM(3 mL)，室温搅拌30min，然后滴加化合物6-1（来源于上述化合物6合成中的中间体）(330 mg，0.70 mmol)，室温搅拌过夜。TLC(5 %MeOH /DCM)检测反应进行程度。反应完全后，过滤，滤液加入5 mL水及5 mL饱和食盐水洗，无水Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩有机相，得到粗产品约700 mg。使用Flash柱纯化(4 g硅胶，流动相分别为：100 mL的正庚烷; 100 mL 1% EtOAc +99%的正庚烷; 100 mL 2% EtOAc +98%的正庚烷;100 mL 8% EtOAc +92%的正庚烷; 100 mL 20% EtOAc +300 mL 80%的正庚烷+30% EtOAc +70%的正庚烷)分离得到纯的产品化合物9，140 mg，收率27 %。¹H NMR (400MHz, CDCl₃) δ 6.33 (s, 1H), 5.02 (p, J = 5.8 Hz, 1H), 4.05 (t, J = 6.7 Hz,4H), 3.57-3.42 (m, 2H), 2.49 (qd, J = 12.9, 6.1 Hz, 2H), 2.38-2.24 (m, 11H),2.17 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 1.72-1.51 (m, 12H), 1.50-1.16 (m, 43H), 0.96-0.78(m, 9H)。

化合物10按如下反应式合成：

；

步骤1：化合物10的合成

25 mL烧瓶中加入2-己基癸酸6-羧基己基酯（化合物8-1，CAS:2805989-46-0）(500 mg，1.3 mmol)，1,3-二环己基碳二亚胺DCC(268.24 mg，1.3 mmol)，4-二甲氨基吡啶DMAP(39.71 mg，0.33 mmol)，二氯甲烷DCM(3 mL)，室温搅拌30min，然后滴加1-氨基-3-(二甲基氨基)丙-2-醇 (76.82 mg，0.65 mmol)，室温搅拌过夜。TLC(5 % MeOH /DCM)检测反应进行程度。反应完全后，过滤，滤液加入5 mL水及5 mL饱和食盐水洗，无水Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩有机相，得到粗产品约700 mg。使用Flash柱纯化(4 g硅胶，流动相分别为：100 mL的正庚烷; 100 mL 1% EtOAc +99%的正庚烷; 100 mL 2% EtOAc +98%的正庚烷;100 mL 8%EtOAc +92%的正庚烷; 100 mL 20% EtOAc + 80%的正庚烷+200 mL 30% EtOAc +70%的正庚烷)分离得到纯的产品化合物10，120 mg，收率22 %。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 6.40(s, 1H), 5.04 (q, J = 6.0 Hz, 1H), 4.05 (td, J = 6.7, 2.6 Hz, 4H), 3.50 (t, J= 5.6 Hz, 2H), 2.68-2.46 (m, 2H), 2.31 (d, J = 12.8, 3.8 Hz, 10H), 2.17 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 1.60 (dt, J = 22.6, 7.8 Hz, 13H), 1.50-1.15 (m, 61H), 0.87 (t,J = 6.7 Hz, 12H)。

实施例2：脂质纳米颗粒TMF的制备

本实施例中，TMF1~17是指使用实施例1制备的化合物作为阳离子脂质与其他组分形成的脂质纳米颗粒，这些脂质纳米颗粒对其包封的mRNA没有限制。

包载荧光素酶（luciferase）mRNA（下文简称Luc-mRNA）的脂质纳米颗粒TMF1的制备（含46.3%的化合物1）：

1）用乙醇溶解化合物1（阳离子脂质）、DOPE（辅助性脂质）、胆固醇（辅助性脂质）及PEG2000-DMG（辅助性脂质），得到摩尔百分比分别为46.3%、9.4%、42.7%、1.6%的油相（乙醇相）储备液；

2）用pH4 柠檬酸缓冲液将Luc-mRNA原液稀释成0.3mg/mL，得到水相；

3）将步骤1）所得含有四种脂质混合物的油相（乙醇相）和步骤2）所得含mRNA的水相以1:3的体积比快速混合，制得总脂质与mRNA重量比为24.5：1的TMF1，然后用截留分子量为100 kd的超滤管浓缩样品，接着用pH7.4 PBS缓冲液洗滤，最后用120mg/mL的蔗糖 PBS缓冲液置换，得到最终样品。

脂质纳米颗粒TMF2~17的制备参考TMF1的制备方法，其中的脂质组成按照表1中列举的脂质进行替换。

表1、脂质纳米颗粒TMF1~17的脂质组成

；

此外，以ALC-0315、DODAP和004作为阳离子脂质对照，其结构如以下所示：

；

实施例3：脂质纳米颗粒的表征检测

使用NanoBrook 90plus PLAS ( Brookhaven Instruments，US)，采用动态光散射技术（Dynamic Light Scattering DLS)，在90°侧向散射角测定脂质纳米颗粒的粒径及多分散指数（PDI），测试结果见以下表2。

表2、代表性阳离子脂质化合物制备的脂质纳米颗粒的表征数据

；

实施例4：递送系统体内分布检测

将实施例2制备的包载Luc-mRNA的脂质纳米颗粒按照静脉注射和肌肉注射两种方式给药。

静脉注射：按0.5mg/kg的给药剂量，对6-8周龄雌性ICR小鼠，通过眼底内眦静脉丛，注射实施例2制备的脂质体。给药4小时后，按150mg/kg的剂量，腹腔注射15 mg/mL的D-萤光素钾盐。荧光素酶底物注射10分钟后，将小鼠置于活体成像系统(IVIS Lumina XRMSSeries III，PerkinElmer)下，观察小鼠体内荧光强度及分布。接着处死小鼠，分离脏器（心脏、肝脏、脾脏、肺和肾脏），进行离体成像，观察不同脏器中的荧光强度及分布。

代表性脂质化合物递送的Luc-mRNA的脏器分布见表3。如表3所示，脂质纳米颗粒TMF5在脾脏中的荧光强度均高于对照组TMF15、TMF16和TMF17。且在脾脏与肝脏中荧光强度的比值（脾/肝）高于对照组TMF16和TMF17，低于TMF15。

肌肉注射：按0.5mg/kg的给药剂量，对6-8周龄雌性ICR小鼠，通过大腿内侧肌肉，注射实施例2制备的脂质体。给药4小时后，按150mg/kg的剂量，腹腔注射15 mg/mL的D-萤光素钾盐。荧光素酶底物注射10分钟后，将小鼠置于活体成像系统(IVIS Lumina XRMSSeries III，PerkinElmer)下，观察小鼠体内荧光强度及分布。

代表性脂质化合物递送的Luc-mRNA的体内分布见表4。此外，图11显示了这些脂质纳米颗粒在注射部位与内脏的荧光强度比值汇总。

如表4和图11所示，脂质纳米颗粒TMF7和TMF3中加入了化合物7和化合物3，在小鼠肌肉注射给药后4小时，在注射部位与内脏中荧光强度的比值均达到30以上，其中TMF3的比值最高，达35.9。而脂质纳米颗粒TMF7、TMF10、TMF12和TMF13在注射部位的荧光强度较高，均在6.5E+09以上，其中TMF7的强度最高，达8.52E+09。对比TMF5和TMF11、TMF7和TMF12、TMF10和TMF13，数据显示，相同的阳离子脂质与不同的磷脂搭配制备的脂质纳米颗粒在注射部位的荧光强度类似，且注射部位与内脏中荧光强度的比值相似。

与采用化合物004的对照脂质纳米颗粒TMF14和TMF15相比，本申请的脂质纳米颗粒TMF1-TMF13不仅在注射部位的选择性高于对照组，且在注射部位的荧光强度高于对照组3个数量级以上；与采用DODAP的对照脂质纳米颗粒TMF16相比，本申请的脂质纳米颗粒TMF1-TMF13不仅在注射部位的选择性高于对照组，且在注射部位的荧光强度高于对照组3个数量级以上；与采用ALC-0315的对照脂质纳米颗粒TMF17相比，本申请的脂质纳米颗粒TMF1-TMF13不仅在注射部位的选择性高于对照组，且在注射部位的荧光强度高于对照组1个数量级以上。

此外，图12还显示了包载Luc-mRNA的脂质纳米颗粒TMF1在肌肉注射给药4h后，小鼠活体的荧光信号情况；如图11所示，在小鼠注射部位中的荧光信号最强，而在内脏中的荧光信号很弱。这进一步说明：TMF1包载的Luc-mRNA在注射部位中的表达显著高于内脏中的表达。

不同部位中的荧光强度代表相应递送系统在不同部位的递送效率，以上数据充分说明，本申请的脂质纳米颗粒能够将核酸分子成功递送至注射部位中并进行高表达，且针对注射部位的递送效率显著高于针对内脏的递送效率，减少潜在的肝脏毒性。

表3、代表性阳离子脂质制备的脂质纳米粒递送的Luc-mRNA的表达强度（IV）

。

表4、代表性阳离子脂质制备的脂质纳米粒递送的Luc-mRNA的表达强度（IM）

。

以上对本申请做了详尽的描述，其目的在于让熟悉此领域技术的人士能够了解本申请的机理、内容并加以实施，并不能以此限制本申请的保护范围，凡根据本申请的精神实质所作的等效变化或修饰，都应涵盖在本申请的保护范围内。

Claims

1.一种如式（I）所示的化合物或其药学上可接受的盐，

；

其中：

Y₁和Y₂各自独立地为-OC (=O)-或-C (=O)O-；

L₁和L₂各自独立地为未取代的C₂-C₁₄亚烷基；

R₁和R₂各自独立地为H或C₁-C₈直链烷基；

R₃和R₄各自独立地为任选被羟基取代的C₁-C₄直链或支链烷基；

m为5~10之间的整数；

n为5~10之间的整数。

2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述R₁和R₂各自独立地为H或C₆-C₈直链烷基；

和/或，所述R₃和R₄各自独立地为甲基、乙基、丙基、羟甲基、羟乙基、羟丙基、羟丁基。

3.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，所述化合物选自如下所示化合物：

；

。

4.一种脂质纳米颗粒，其包含如权利要求1-3任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐。

5.根据权利要求4所述的脂质纳米颗粒，其特征在于，所述脂质纳米颗粒进一步包含辅助性脂质，所述辅助性脂质选自磷脂、类固醇、聚合物缀合脂质和可修饰的脂质中的一种或多种。

6.根据权利要求5所述的脂质纳米颗粒，其特征在于，所述磷脂选自DOPE、DSPC、DPPC、DMPC、DOPC、POPC、SM中的任一种或其组合；

和/或，所述类固醇选自胆固醇、谷甾醇、豆甾醇和麦角固醇中的一种或多种；

和/或，所述聚合物缀合脂质选自聚乙二醇、聚乳酸、聚酰胺、阳离子聚合物、聚肌氨酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚氨基酸、多肽、聚类肽缀合的脂质；

和/或，所述可修饰的脂质选自可被小分子化合物、碳水化合物、肽、蛋白质、核酸、脂多糖、无机物分子、金属离子及上述物质的组合修饰的脂质。

7.根据权利要求6所述的脂质纳米颗粒，其特征在于，所述磷脂为DOPE或DSPC；

和/或，所述类固醇为胆固醇和/或谷甾醇；

和/或，所述聚合物缀合脂质为聚乙二醇缀合脂质，其选自ALC-0159、PEG1000-DMG、PEG5000-DMG、PEG2000-DMG 和PEG2000-DSPE 中的一种或多种。

8.根据权利要求 7 所述的脂质纳米颗粒，其特征在于，所述磷脂为DSPC。

9.根据权利要求5-8任一项所述的脂质纳米颗粒，其特征在于，如权利要求1-3任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐与所述辅助性脂质的摩尔比为1：（0.5~2）。

10.根据权利要求9所述的脂质纳米颗粒，其特征在于，如权利要求1-3任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐与所述辅助性脂质的摩尔比为1：（0.6~1.5）。

11.根据权利要求10所述的脂质纳米颗粒，其特征在于，如权利要求1-3任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐与所述辅助性脂质的摩尔比为1：（0.8~1.2）。

12.如权利要求1-3任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或者如权利要求4-11任一项所述的脂质纳米颗粒在制备药物递送载体中的应用。

13.根据权利要求12所述的应用，其特征在于，所述药物为治疗剂或预防剂。

14.根据权利要求13所述的应用，其特征在于，所述治疗剂或预防剂为核酸。

15.根据权利要求14所述的应用，其特征在于，所述核酸选自：单链DNA、双链DNA、单链RNA、双链RNA、短异构体、质粒DNA、互补DNA、反义核酸分子、小干扰核酸、小激活核酸、不对称干扰核酸、微小核酸、agomir、antagomir、Dicer酶底物核酸、小发夹核酸、转运RNA、信使RNA、环状RNA、自复制mRNA和适配体。

16.根据权利要求15所述的应用，其特征在于，所述核酸为天然核苷酸、核苷酸模拟物或化学修饰的核苷酸。

17.根据权利要求15所述的应用，其特征在于，所述核酸为mRNA。

18.根据权利要求17所述的应用，其特征在于，所述mRNA编码至少一种抗原或其片段或其表位，或编码某种治疗性蛋白。

19.根据权利要求18所述的应用，其特征在于，所述抗原为致病性抗原。

20.根据权利要求19所述的应用，其特征在于，所述抗原为肿瘤相关抗原或病原微生物抗原。

21.一种药物组合物，其包括如权利要求4-11任一项所述的脂质纳米颗粒，以及治疗剂或预防剂。

22.根据权利要求21所述的药物组合物，其特征在于，所述治疗剂或预防剂为核酸，所述核酸包封于所述脂质纳米颗粒中。

23.根据权利要求22所述的药物组合物，其特征在于，所述核酸选自：单链DNA、双链DNA、单链RNA、双链RNA、短异构体、质粒DNA、互补DNA、反义核酸分子、小干扰核酸、小激活核酸、不对称干扰核酸、微小核酸、agomir、antagomir、Dicer酶底物核酸、小发夹核酸、转运RNA、信使RNA、环状RNA、自复制mRNA和适配体。

24.根据权利要求23所述的药物组合物，其特征在于，所述核酸为天然核苷酸、核苷酸模拟物或化学修饰的核苷酸。

25.根据权利要求23所述的药物组合物，其特征在于，所述核酸为mRNA。

26.根据权利要求25所述的药物组合物，其特征在于，所述mRNA编码至少一种抗原或其片段或其表位，或编码某种治疗性蛋白。

27.根据权利要求26所述的药物组合物，其特征在于，所述抗原为致病性抗原。

28.根据权利要求27所述的药物组合物，其特征在于，所述抗原为肿瘤相关抗原或病原微生物抗原。

29.根据权利要求21所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物中，所述脂质纳米颗粒与所述治疗剂或预防剂的质量比为10：1至100：1。

30.根据权利要求29所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物中，所述脂质纳米颗粒与所述治疗剂或预防剂的质量比为20：1至50：1。

31.根据权利要求30所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物中，所述脂质纳米颗粒与所述治疗剂或预防剂的质量比为20：1至30：1。

32.根据权利要求21所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物的平均粒径为90nm至600nm；

和/或，所述药物组合物的多分散指数为0.001至0.5。

33.根据权利要求32所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物的平均粒径为200nm至400nm；

和/或，所述药物组合物的多分散指数为0.001至0.45。

34.根据权利要求33所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物的平均粒径为200nm至300nm；

和/或，所述药物组合物的多分散指数为0.001至0.4。

35.如权利要求21-34任一项所述的药物组合物在制备靶向递送药物中的应用。

36.一种制剂，其包含如权利要求21-34任一项所述的药物组合物和药学上可接受的辅料。