CN117860605A - 用于保湿的组合物及其用途、化妆品 - Google Patents

Abstract

本申请公开了一种用于保湿的组合物及其用途、化妆品。用于保湿的组合物包括选自乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素中的至少一种天然来源的保湿剂，以及分散载剂。本申请实施例用于保湿的组合物的原料组分为天然来源的保湿剂组分，对皮肤HaCaT细胞没有毒性，并且对干燥损伤的皮肤HaCaT细胞具有保护作用，能够提高皮肤HaCaT细胞保湿相关基因的表达，具有明确地保湿作用。

Description

用于保湿的组合物及其用途、化妆品

技术领域

本申请涉及化妆品技术领域，尤其涉及一种用于保湿的组合物及其用途、化妆品。

背景技术

皮肤缺水会产生一系列的皮肤问题，皮肤的水分充足对于保持皮肤的健康至关重要。皮肤由表皮、真皮和皮下组织组成^[1]，皮肤保湿的机理主要由以下两大作用形成：一是天然保湿因子的水合作用；二是真皮层的储水作用。

现有的皮肤保湿产品多是由透明质酸、人参皂苷、槲皮素等组合形成的产品。

发明内容

本申请的实施例提供一种新的用于保湿的组合物，能够对干燥损伤的皮肤HaCaT细胞具有明确的保湿作用。

第一方面，本申请的实施例提供一种用于保湿的组合物，包括选自乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素中的至少一种天然来源的保湿剂，以及分散载剂。

第一方面一些可选的实施例中，选自乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素中的至少一种天然来源的保湿剂的总浓度为0.5μmol/L～0.1mol/L。

第一方面一些可选的实施例中，天然来源的保湿剂包括苍术素、山茶苷A，苍术素、山茶苷A的总浓度0.5μmol/L～0.1mol/L。

第一方面一些可选的实施例中，天然来源的保湿剂包括摩尔比为(0.2～1):1的苍术素、山茶苷A。

第一方面一些可选的实施例中，天然来源的保湿剂包括乙酰哈巴苷、山茶苷A，乙酰哈巴苷、山茶苷A的总浓度为0.5μmol/L～0.1mol/L。

第一方面一些可选的实施例中，天然来源的保湿剂包括摩尔比为(0.3～3):1的乙酰哈巴苷、山茶苷A。

第一方面一些可选的实施例中，天然来源的保湿剂包括乙酰哈巴苷、苍术素，乙酰哈巴苷、苍术素的总浓度为0.5μmol/L～0.1mol/L。

第一方面一些可选的实施例中，天然来源的保湿剂包括摩尔比为(0.3～3):1的乙酰哈巴苷和苍术素。

第一方面一些可选的实施例中，天然来源的保湿剂包括乙酰哈巴苷、苍术素、山茶苷A，乙酰哈巴苷、苍术素、山茶苷A的总浓度为0.5μmol/L～0.1mol/L。

第一方面一些可选的实施例中，天然来源的保湿剂包括摩尔比为(0.3～3):1:(0.2～1)的乙酰哈巴苷、山茶苷A和苍术素。

第二方面，本申请的实施例提供一种乙酰哈巴苷、苍术素、山茶苷A或上述的组合物用于制备皮肤保湿的化妆品的用途。

第三方面，本申请的实施例将乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素应用于保湿化妆品中，提供了一种具有保湿效果的化妆品，包括乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素中的至少一种天然来源的保湿剂。

根据本申请第三方面的一些实施例，除了上述各种组分以外，在不影响本申请的保湿技术效果的前提下，本申请的化妆品中还可以包括其他任选的组分，这些任选的组分包括：载剂、润湿剂、第二保湿剂、粉体、醇类溶剂、水溶性高分子、油溶性高分子、成膜剂、紫外线吸收剂、增稠剂、乳化剂、润肤剂、表面活性剂、香料、盐类、抗氧化剂、稳定剂、抗菌剂、防腐剂、pH调节剂、螯合剂、清凉剂、抗炎剂、美肌用成分中的至少一种助剂。

根据本申请第三方面的一些实施例，选自乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素中的至少一种天然来源的保湿剂或其组合在化妆品中的总浓度为0.5μmol/L～0.1mol/L。

在第三方面一些可选的实施例中，润湿剂选自木糖醇、山梨醇、丙二醇、甘油、乙基己基甘油或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，第二保湿剂选自透明质酸、透明质酸钠、人参皂苷、槲皮素、聚乙二醇、低聚果糖或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，粉体选自气相二氧化硅、碳酸钙、碳酸镁、钛白粉、膨润土、锌白粉、硅藻土、微晶纤维素、甘露醇或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，醇类溶剂选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、仲丁醇、异丁醇、丁二醇、正戊醇、仲戊醇、3-戊醇、异戊醇、1,2-戊二醇、正己醇或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，水溶性高分子选自纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、羟乙基纤维素、瓜尔胶、琼胶、海藻胶、黄原胶、卡波姆或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，油溶性高分子选自白油、甲基葡萄糖苷倍半硬脂酸酯、聚氧乙烯(20)甲基葡萄糖苷倍半硬脂酸酯、维生素E醋酸酯、羊毛醇聚氧乙烯醚、十六烷醇和椰油基葡萄糖苷或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，成膜剂选自聚乙酸乙烯酯、聚丙烯酸酯、聚甘油-2异硬脂酸酯、聚甘油-3异硬脂酸酯、棕榈酸、棕榈酸乙基己酯、三硬脂酸甘油酯、辛癸酸甘油三酯、丙二醇单月桂酸酯、月桂酰聚氧甘油酯、亚油酰聚氧甘油酯、油酰聚氧甘油酯或硬脂酰聚氧甘油酯、聚二甲基硅氧烷、聚乙烯基吡咯烷酮/十六碳烯共聚物(V-216)、丙烯酸树脂与二甲基硅氧烷共聚物(KP545)、丙烯酸盐/辛基丙烯酸胺共聚物(DC-79)或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，紫外线吸收剂选自2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮、二乙氨基羟苯甲酰基苯甲酸己酯、对氨基苯甲酸、乙氧基化-4-氨基苯甲酸乙酯或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，增稠剂选自环糊精、明胶、阿拉伯树胶、纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、羟乙基纤维素、纤维素丙酸酯、纤维素醋酸丙酸酯、纤维素醋酸丁酸酯、玉米淀粉、土豆淀粉、羟甲基纤维素、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素、海藻酸钠、羟基磷灰石或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，乳化剂选自硬脂酸镁、硬脂酸、硬脂酸钙、单硬脂酸甘油酯或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，润肤剂选自椰子油、橄榄油、山茶油、肉豆蔻酸酯、辛酸辛酯、油醇油酸酯、月桂酸己酯、月桂醇、油醇、辛基十二醇、己基癸醇、二辛基环己烷、棕榈酸异丙酯、椰油醇-辛酸酯/癸酸酯、PEG-6辛酸/癸酸甘油三酯、PEG-60玉米油甘油混合酯、PEG-7橄榄油酸酯、PEG-7甘油椰油酸酯或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，表面活性剂选自十八烷基硫酸钠、硬脂醇聚醚-2、硬脂酸钠、椰油酰两性基乙酸钠、聚二甲基硅氧烷350CS、Olivem 1000、甘油硬脂酸酯或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，香料选自正壬醇、霍霍巴油、薰衣草精油、茉莉花精油、罗勒精油、丁香精油、香茅精油、葡萄柚精油、柠檬精油、天竺葵精油、尤加利精油、薄荷精油、洋甘菊精油、菊花精油、槐花精油、矢车菊精油、梅花精油、松香或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，盐类选自氯化羟铝、氯化钠或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，抗氧化剂选自丁基羟基茴香醚(BHA)、叔丁基羟基甲苯(BHT)、五倍子酸丙酯、生育酚(维生素E)、磷脂或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，稳定剂选自维生素C、维生素E、茶多酚、聚丙烯酸钠、月桂酸二乙醇酰胺或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，抗菌剂选自丙酸、苯氧乙醇、对羟基苯甲酸酯、茶树精油或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，pH调节剂选自柠檬酸、柠檬酸钠、苹果酸、草酸、山梨酸钾、氨甲基丙醇或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，螯合剂选自EDTA-2Na、乙二胺四乙酸、乙二胺二琥珀酸三钠或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，清凉剂选自天然冰片、左旋薄荷酮、异薄荷酮、胡薄荷酮、乙酸薄荷酯、右旋樟脑或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，抗炎剂选自鼠李糖、甘草酸二钾、马齿苋提取物、黄瓜籽提取物或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，美肌成分选自胆固醇衍生物、白藜芦醇、角鲨烷、月见草油、小麦胚芽油、ACP植物肌素或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，防腐剂选自对羟基苯乙酮、1,2-己二醇、苯甲醇、苯氧乙醇、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸乙酯、羟基苯甲酸丙酯或其组合。

根据本申请第三方面的一些实施例，化妆品可以被制备为包括但不限于膏、霜、乳、精华液、贴剂、面膜、酊剂外用化妆品剂型。

在本申请一些可选的实施例中，上述化妆品中，选自乙酰哈巴苷、山茶苷、苍术素中的至少一种天然保湿剂或其组合的总浓度为0.5μmol/L～0.1mol/L。

本申请实施例的用于保湿的组合物，采用天然来源的保湿剂，对皮肤HaCaT细胞没有毒性，并且对干燥损伤的皮肤HaCaT细胞具有保护作用，能够提高皮肤HaCaT细胞保湿相关基因的表达，具有明确地保湿作用。

附图说明

为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案，下面将对本申请实施例中所需要使用的附图作简单的介绍，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1是本申请实施例1中乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素及其组合物对干燥损伤的HaCaT细胞的存活率的影响图；

图2是本申请实施例1中人生皂苷、槲皮素、透明质酸、乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素、乙酰哈巴苷+苍术素、乙酰哈巴苷+山茶苷A对HaCaT细胞的干燥损伤修复效果图；

图3是本申请实施例1中乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素对HaCaT细胞的细胞毒性图；

图4是本申请实施例2中乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素对干燥损伤的HaCaT细胞的FLG、AQP3、TJP1、CLDN1 mRNA表达水平的影响图。

附图内容说明：

图中，####代表与对照组比p<0.0001；*代表与模型组比p<0.05；**代表与模型组比p<0.01，***代表与模型组比p<0.001，****代表与模型组比p<0.0001；根据统计学，表明两组之间在统计学上具有显著性差异，p值越小，两组之间差异越大，显著性越强。

具体实施方式

下面将详细描述本申请的各个方面的特征和示例性实施例，为了使本申请的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及具体实施例，对本申请进行进一步详细描述。应理解，此处所描述的具体实施例仅意在解释本申请，而不是限定本申请。对于本领域技术人员来说，本申请可以在不需要这些具体细节中的一些细节的情况下实施。下面对实施例的描述仅仅是为了通过示出本申请的示例来提供对本申请更好的理解。

需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素。

角质层是指皮肤表皮最外层的区域，虽然角质层的含水量只有15％左右，但在皮肤屏障以及保湿功能中起着关键作用，角质层对于调节皮肤水分流失主要取决于角质层的复杂性质。角质层中水分的保留取决于两个主要组成部分：

(1)角质细胞内天然吸湿剂的存在(统称为天然保湿因子)：天然保湿因子指在角质层内能通过渗透压进行水合的小分子化合物的总称。天然保湿因子具有很强的吸湿性，能够吸收水分对皮肤起到保湿剂的作用；

(2)角质细胞间脂质有序排列以形成屏障，降低经皮失水。角质层通透性屏障功能(即防止水和电解质过度流失的能力)由角质细胞间脂质介导。这些脂质与水一起组织成相，通常被描述为一系列平行的层状膜，为经皮失水提供了一个紧密而有效的屏障^[2]。

人角质形成细胞(HaCaT)的特点是原代、永生化，是一种广泛使用的人类角质形成细胞系，源自自发永生化的人类角质形成细胞。虽然并非完全“正常”，但HaCaT细胞能表现出基础细胞特性，因而常用于角质形成细胞的替代研究^[3]。

本申请的发明人在对现有的保湿产品和技术研究的过程中发现：

AQP3蛋白，即水通道压型蛋白(aquaporin 3，AQP3)，是一种保湿活性的关键蛋白，主要表达于角质形成细胞和皮肤成纤维细胞，其对皮肤的作用主要是两方面：一方面是AQP3的表达有空间层次，在基底层上表达最明显，到角质层消失，与水含量高低趋势一致。另一方面，由于角质层中的甘油含量直接或间接影响着皮肤保湿功能，其来源的供应显得极其重要。AQP3不仅能将循环中的内源性甘油、皮脂腺中的甘油三脂带入表皮，还进一步参与表皮细胞的甘油代谢。

紧密连接蛋白(claudin，GLDN)是一个蛋白质家族，它们在结构上属于跨细胞膜蛋白，参与组成正常组织细胞之间的紧密连接结构，在不同组织细胞中有不同的表达。

丝聚蛋白(Filaggrin，FLG)是维持表皮屏障功能完整的重要蛋白，定位于人1q21位点上FLG基因编码，是正常表皮末端分化及维持皮肤水合度的关键蛋白。

TJP1蛋白(ZO-1tight junction蛋白)是一种支架蛋白，可以将紧密连接(Tightjunction,，TJ)跨膜蛋白连接到肌动蛋白细胞骨架。紧密连接的作用是限制物质通过细胞旁间隙的移动，并作为上皮细胞和内皮细胞组成不同的顶端和基底外侧质膜区域之间的边界。

许多植物提取物对皮肤有明显的水合和保湿作用。在植物中，水溶性成分如多糖和苷类的结构中都存在羟基，通过氢键作用具有很好的水合吸收水分和保持水分特性；而黄酮和多酚中的酚羟基结构也通过氢键结合水分，使得其也具有吸收和保持水分的能力。例如，具备保湿活性的天然产物主要有：

(1)透明质酸：透明质酸又称玻尿酸，属于多糖类化合物。透明质酸是一种没有固定形状的物质，无臭无味，可以溶解在水中、但不能溶解在有机溶剂中，具有非常强的吸湿作用。透明质酸在真皮和表皮中都有存在，但是真皮层较厚，所以含有较多的透明质酸，有研究表明结缔组织中透明质酸的实际保水能力约为1g能保水80mL左右。当溶液中透明质酸的浓度较高时，其长的分子链可以通过相互交织形成网状结构，同时加上与水的氢键相结合的作用力，能达到很强的保水功能。研究表明其保水功能与其浓度及其相对分子质量都表现为正相关的关系，而对水的通透性则表现为负相关^[4]。

(2)人参皂苷：增加透明质酸的合成是一种改善皮肤水合作用的良好策略。而透明质酸通常由三种透明质酸合酶(HAS)合成，分别是HAS1、HAS2和HAS3。研究表明在人类皮肤的表皮和真皮中导致皮肤老化的本质原因是HAS2的表达降低。人参皂苷可以通过提高人角质形成细胞中HAS2的表达来诱导透明质酸含量增加^[5]。

(3)槲皮素：黄酮通常存在多个酚羟基结构，而且许多植物中的黄酮与糖基结合形成黄酮苷。植物的黄酮类成分不仅具有一定的吸湿性，而且还具有多种多样的生物活性。在化妆品中添加黄酮类成分有助于恢复干燥松弛皮肤的弹性和光泽。含有槲皮素的洋甘菊提取物能增加皮肤的保湿效果、修复皮肤干裂缺水，研究表明槲皮素以剂量依赖型方式促进紧密连接蛋白的表达，从而增强细胞连接的紧密能力，保持皮肤屏障完整并调节水的动态平衡，防止皮肤脱水，降低皮肤的敏感性^[6]。

乙酰哈巴苷是一种来自于唇形科筋骨草属植物筋骨草Ajuga decumbens Thunb.的全草中的化学物质，又名8-O-乙酰哈巴苷。中国专利200510085017.2公开了含有乙酰哈巴苷的筋骨草提取物在治疗子宫肌瘤或乳腺增生方面的用途；未见乙酰哈巴苷用于保湿方面的报道。

山茶苷A是来自于石崖茶，亮叶杨桐(Adinandra nitida Merr.ex Li)，属山茶科。中国专利202010283110.9申请了山茶苷A在制备治疗胃溃疡药物中的用途；未见山茶苷A用于保湿方面的报道。

苍术素是中药苍术的成分之一。中国专利202010371791.4申请了苍术素在制备痤疮丙酸杆菌抑制剂中的应用；未见苍术素用于保湿方面的报道。

本申请的发明人发现乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素具有强效对抗皮肤HaCaT细胞干燥损伤的作用，与以往文献报道的其来源相关植物提取物相比，具有更加明显的药理活性。以往报道的提取物是粗提取物，具体的活性成分不清楚。而本申请的成分明确，具有明显的技术进步。

目前为止尚未发现本申请所述的高纯度的具有保湿活性的天然产物的任何先前公开或使用。

参考文献：

[1]Hwa C,Bauer E A,Cohen D E.Skin biology[J].Dermatol Ther,2011,24(5):464-470.

[2]Verdier-Sévrain S,BontéF.Skin hydration:a review on its molecularmechanisms[J].J Cosmet Dermatol,2007,6(2):75-82.

[3]Wilson V G.Growth and differentiation of HaCaT keratinocytes[J].Methods Mol Biol,2014,1195:33-41.

[4]袁海恋.林蛙皮透明质酸的提取纯化及其化妆水的制备[D].延边大学,2017.

[5]Lim T G,Jeon A J,Yoon J H,Song D,Kim J E,Kwon J Y,Kim J R,Kang NJ,Park J S,Yeom M H,Oh DK,Lim Y,Lee CC,Lee CY,Lee KW.20-O-β-D-glucopyranosyl-20(S)-protopanaxadiol,a metabolite of ginsenoside Rb1,enhances the productionof hyaluronic acid through the activation of ERK and Akt mediated by Srctyrosin kinase in human keratinocytes[J].Int J Mol Med,2015,35(5):1388-1394.

[6]Kim J,Cho N,Kim E M,Park K S,Kang Y W.Cudrania tricuspidata leafextracts and its components,chlorogenic acid,kaempferol,and quercetin,increase claudin 1expression in human keratinocytes,enhancing intercellulartight junction capacity[J].Appl Bio Chem,2020,63(8):399-402.

为了解决皮肤保湿的技术问题，本申请实施例提供了一种用于保湿的组合物。下面首先对本申请实施例所提供的用于保湿的组合物进行介绍。

第一方面，本申请的实施例提供一种用于保湿的组合物，包括选自乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素中的至少一种天然来源的保湿剂，以及分散载剂。分散载剂用于将乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素分散均匀，以涂覆在待涂敷的皮肤上。

在本申请实施例用于保湿的组合物的中，选自乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素的天然来源的保湿剂能够以一种、两种或三种的组合使用，以对干燥损伤的HaCaT细胞起到保护、保湿的作用，改善皮肤HaCaT细胞干燥损伤的情况。

在第一方面一些可选的实施例中，选自乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素中的至少一种天然来源的保湿剂总浓度为0.5μmol/L～0.1mol/L。

在第一方面一些可选的实施例中，选自乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素中的至少一种天然来源的保湿剂的纯度达到90％以上。在上述纯度范围内的任一种天然来源的保湿剂，可以安全有效地进行应用。

在第一方面一些可选的实施例中，天然来源的保湿剂包括苍术素、山茶苷A，苍术素、山茶苷A的总浓度为0.5μmol/L～0.1mol/L。即天然来源的保湿剂苍术素和山茶苷A以任意比混合，其在载剂中的总浓度可为0.5、0.8、0.9、1、2、3.5、5、6、8、10、13、15、18、20、22、25、28、30、35、36、40、50、60、80、100、110、135、140、180、200、300、400、500、600、750、800、850、900、950、1000μmol/L，以及2、3、5、8、10、20、25、30、45、50、60、75、80、90、100mmol，以及上述任意两个值范围内的点值。

在第一方面一些可选的实施例中，可选地，天然来源的保湿剂包括摩尔比为(0.2～1):1的苍术素、山茶苷A。

在第一方面一些可选的实施例中，天然来源的保湿剂包括乙酰哈巴苷、山茶苷A，乙酰哈巴苷、山茶苷A的总浓度为0.5μmol/L～0.1mol/L。乙酰哈巴苷、山茶苷A的总浓度也可选取上述在载剂中的浓度值。

在第一方面一些可选的实施例中，天然来源的保湿剂包括摩尔比为(0.3～3):1的乙酰哈巴苷、山茶苷A。

在第一方面一些可选的实施例中，天然来源的保湿剂包括乙酰哈巴苷、苍术素，乙酰哈巴苷、苍术素的总浓度为0.5μmol/L～1mmol/L。乙酰哈巴苷、苍术素的总浓度也可选取上述苍术素、山茶苷A在载剂中的总浓度的浓度值。

在第一方面一些可选的实施例中，天然来源的保湿剂包括摩尔比为(0.3～3):1的乙酰哈巴苷和苍术素。

在第一方面一些可选的实施例中，天然来源的保湿剂包括乙酰哈巴苷、苍术素、山茶苷A，乙酰哈巴苷、苍术素、山茶苷A的总浓度为0.5μmol/L～0.1mol/L。乙酰哈巴苷、苍术素、山茶苷A的总浓度也可选取上述苍术素、山茶苷A在载剂中总浓度的浓度值。需要指出的是组合中选自乙酰哈巴苷、苍术素、山茶苷A中的两种以上组分的总浓度是指以载剂的体积计算得到的浓度。

在第一方面一些可选的实施例中，天然来源的保湿剂包括摩尔比为(0.3～3):1:(0.2～1)的乙酰哈巴苷、山茶苷A和苍术素。

本申请实施例的用于保湿的组合物，选用的天然来源的保湿剂对皮肤细胞没有毒性，并且对干燥损伤的皮肤HaCaT细胞具有保护作用，能够提高皮肤HaCaT细胞保湿相关基因的表达，具有明确地保湿作用，改善皮肤HaCaT细胞干燥损伤情况，使皮肤处于一种正常的状态。

本申请实施例的用于保湿的组合物，其原料组分苍术素、乙酰哈巴苷、山茶苷A，均来自可以大量获得的天然原料，具有原料价廉易得、保湿性强、安全性高的优点。从天然物中提取的方法也没有特别限制，通过使用适当的溶剂进行提取并浓缩，可以得到上述化合物苍术素、乙酰哈巴苷、山茶苷A。

第二方面，本申请的实施例提供一种乙酰哈巴苷、苍术素、山茶苷A或上述用于保湿的组合物的用于制备皮肤保湿的化妆品的用途。

第三方面，本申请的实施例将乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素应用于保湿化妆品中，提供了一种具有保湿效果的化妆品，包括选自乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素中的至少一种天然来源的保湿剂。

在一些可选的实施例中，化妆品中可仅包括选自乙酰哈巴苷、山茶苷、苍术素或其组合的组分和载剂，其中选自乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素或其组合的天然来源的保湿剂的总浓度为0.5μmol/L～0.1mol/L。即乙酰哈巴苷、山茶苷、苍术素可以单独或者两种及三种混合的方式分散于载剂中制备得到化妆品。

示例性地，选自苍术素、山茶苷A、乙酰哈巴苷中的一种天然来源的保湿剂，或者两种以上的天然来源的保湿剂能够以任意比混合，其在化妆品中的总浓度可为0.5、0.6、0.8、0.9、1、2、2.5、3.5、5、6、8、10、13、15、18、20、22、25、28、30、35、36、40、50、60、80、100、110、135、140、180、200、300、400、500、600、750、800、850、900、950、1000μmol/L，以及1.5、2、3、4、5、8、10、15、20、25、30、40、45、50、60、70、75、80、90、100mmol，以及上述任意两个值范围内的点值。

在本申请一些可选的实施例中，乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素单独作为保湿的成分时，其在用于保湿的组合物和化妆品中的浓度独立地为0.5μmol/L～0.1mol/L。

在本申请一些可选的实施例中，山茶苷A在化妆品中的浓度为1μmol/L～40μmol/L，可选地为10μmol/L～25μmol/L。山茶苷A在组合物中的浓度也可以是1μmol/L～40μmol/L，可选地为10μmol/L～25μmol/L。

在本申请一些可选的实施例中，苍术素在化妆品中的浓度为0.5μmol/L～40μmol/L。苍术素在用于保湿的组合物中的浓度也可以是1μmol/L～40μmol/L，可选地为10μmol/L～25μmol/L。

在本申请一些可选的实施例中，乙酰哈巴苷在化妆品中的浓度为0.5μmol/L～40μmol/L。乙酰哈巴苷在用于保湿的组合物中的浓度也可以是1μmol/L～40μmol/L，可选地为10μmol/L～25μmol/L。

示例性地，乙酰哈巴苷在化妆品中的浓度为0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.5、1.7、1.8、1.9、2.1、2.2、2.4、2.5、2.7、3.0、3.2、3.3、3.4、3.6、3.7、3.9、4.0、4.2、4.3、4.5、4.7、4.8、4.88、4.9、5.0、5.2、5.3、5.5、5.7、6、8、9、10、11、12、14、16、17、20、22、25、26、29、30、32、33、35、36、37、39、40μmol/L。可以理解的是，山茶苷A、苍术素独立地在化妆品中的浓度分别可以为上述的浓度值。

在本申请第三方面一些可选的实施例中，化妆品可以被制备为包括但不限于膏、霜、乳、水、精华液、贴剂、面膜、酊剂外用化妆品剂型。

示例性地，作为本申请实施方式的化妆品，没有特别限制，优选为要求具保湿效果的化妆品，例如可举出香水、粉底霜、口红、润唇膏、唇彩、化妆水、化妆用乳液、化妆用乳霜、化妆用凝胶、美容液、面膜等化妆品类；防晒制品、阻晒制品等防晒化妆品类；

根据本申请第三方面的一些实施例，除了上述各种选自乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素或其组合物组成的组分以外，在不影响本申请的保湿技术效果的前提下，本申请的化妆品中还可以包括其他任选的组分，这些任选的组分包括：载剂、润湿剂、第二保湿剂、粉体、醇类溶剂、水溶性高分子、油溶性高分子、成膜剂、紫外线吸收剂、增稠剂、乳化剂、润肤剂、表面活性剂、香料、盐类、抗氧化剂、稳定剂、抗菌剂、防腐剂、pH调节剂、螯合剂、清凉剂、抗炎剂、美肌用成分等中的至少一种助剂。以形成具有保湿和不同形态、粘度、功效的化妆品。其中，可根据要制备的化妆品的形态。粘度、功效要求添加相应含量、种类的助剂。

在本申请的实施例中，用于保湿的组合物所使用的载剂与化妆品所使用的载剂相同，均可独立的选自去离子水、纯化水、乙醇或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，润湿剂选自木糖醇、山梨醇、丙二醇、甘油、乙基己基甘油或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，第二保湿剂选自透明质酸、透明质酸钠、人参皂苷、槲皮素、聚乙二醇、低聚果糖或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，粉体选自气相二氧化硅、碳酸钙、碳酸镁、钛白粉、膨润土、锌白粉、硅藻土、微晶纤维素、甘露醇或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，醇类溶剂选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁二醇、丁醇、仲丁醇、异丁醇、正戊醇、仲戊醇、3-戊醇、异戊醇、1,2-戊二醇、正己醇或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，水溶性高分子选自纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、羟乙基纤维素、瓜尔胶、琼胶、海藻胶、黄原胶、卡波姆或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，油溶性高分子选自白油、甲基葡萄糖苷倍半硬脂酸酯、聚氧乙烯(20)甲基葡萄糖苷倍半硬脂酸酯、维生素E醋酸酯、羊毛醇聚氧乙烯醚、十六烷醇和椰油基葡萄糖苷或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，成膜剂选自聚乙酸乙烯酯、聚丙烯酸酯、聚甘油-2异硬脂酸酯、聚甘油-3异硬脂酸酯、棕榈酸、棕榈酸乙基己酯、三硬脂酸甘油酯、辛癸酸甘油三酯、丙二醇单月桂酸酯、月桂酰聚氧甘油酯、亚油酰聚氧甘油酯、油酰聚氧甘油酯或硬脂酰聚氧甘油酯、聚二甲基硅氧烷、聚乙烯基吡咯烷酮/十六碳烯共聚物(V-216)、丙烯酸树脂与二甲基硅氧烷共聚物(KP545)、丙烯酸盐/辛基丙烯酸胺共聚物(DC-79)或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，紫外线吸收剂选自2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮、二乙氨基羟苯甲酰基苯甲酸己酯、对氨基苯甲酸、乙氧基化-4-氨基苯甲酸乙酯或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，增稠剂选自环糊精、明胶、阿拉伯树胶、纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、羟乙基纤维素、纤维素丙酸酯、纤维素醋酸丙酸酯、纤维素醋酸丁酸酯、玉米淀粉、土豆淀粉、羟甲基纤维素、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素、海藻酸钠、羟基磷灰石或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，乳化剂选自硬脂酸镁、硬脂酸、硬脂酸钙、单硬脂酸甘油酯或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，润肤剂选自椰子油、橄榄油、山茶油、肉豆蔻酸酯、辛酸辛酯、油醇油酸酯、月桂酸己酯、月桂醇、油醇、辛基十二醇、己基癸醇、二辛基环己烷、棕榈酸异丙酯、椰油醇-辛酸酯/癸酸酯、PEG-6辛酸/癸酸甘油三酯、PEG-60玉米油甘油混合酯、PEG-7橄榄油酸酯、PEG-7甘油椰油酸酯或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，表面活性剂选自十八烷基硫酸钠、硬脂醇聚醚-2、硬脂酸钠、椰油酰两性基乙酸钠、聚二甲基硅氧烷350CS、Olivem 1000、甘油硬脂酸酯或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，香料选自正壬醇、霍霍巴油、薰衣草精油、茉莉花精油、罗勒精油、丁香精油、香茅精油、葡萄柚精油、柠檬精油、天竺葵精油、尤加利精油、薄荷精油、洋甘菊精油、菊花精油、槐花精油、矢车菊精油、梅花精油、松香或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，盐类选自氯化羟铝、氯化钠或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，抗氧化剂选自丁基羟基茴香醚、叔丁基羟基甲苯、五倍子酸丙酯、生育酚、磷脂或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，稳定剂选自维生素C、维生素E、茶多酚、聚丙烯酸钠、月桂酸二乙醇酰胺或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，抗菌剂选自丙酸、苯氧乙醇、对羟基苯甲酸酯、茶树精油或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，pH调节剂选自柠檬酸、柠檬酸钠、苹果酸、草酸、山梨酸钾、氨甲基丙醇或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，螯合剂选自EDTA-2Na、乙二胺四乙酸、乙二胺二琥珀酸三钠或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，清凉剂剂选自天然冰片、左旋薄荷酮、异薄荷酮、胡薄荷酮、乙酸薄荷酯、右旋樟脑或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，抗炎剂选自鼠李糖、甘草酸二钾、马齿苋提取物、黄瓜籽提取物或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，美肌成分选自胆固醇衍生物、白藜芦醇、角鲨烷、月见草油、小麦胚芽油、ACP植物肌素或其组合。

在第三方面一些可选的实施例中，防腐剂选自对羟基苯乙酮、1,2-己二醇、苯甲醇、苯氧乙醇、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸乙酯、羟基苯甲酸丙酯或其组合。

本申请实施例的组合物，在其中一种单体化合物或组合物制成任何一种剂型时，均具有保湿作用。

三种单体化合物及其组合物制备的保湿化妆品中的新用途，对皮肤HaCaT细胞均具有明显的保湿效果。上述三种化合物及其组合物添加于化妆品，能够对它们赋予使人角质形成细胞(即HaCaT细胞)保湿的效果。需要说明的是，化妆品中所含的上述化合物可以为单独1种，也可以混合任意2种或以上。

本申请的涉及使用化妆品保湿的方法，其包括将本文描述的保湿化妆品组合物施用到需要保湿的部位皮肤上，包括但不限于喷雾喷涂、涂抹、刷涂、面膜递送等方式。

在另一方面，本申请公开了使皮肤保湿的方法，其包括向皮肤局部施用本文所公开的组合物中的任何一种。

在一个实例中，公开了使皮肤保湿的方法，其包括向皮肤局部施用本文所公开的组合物中的任何一种，将组合物向皮肤局部施用保湿化妆品或保湿用的药物制剂。组合物可以被施用到干燥皮肤、成片状的皮肤、皲裂皮肤、开裂皮肤等。

含有本申请的化合物或组合物的这种化妆品可以通过在化妆品中添加三种化合物中的任一种或组合物并进行搅拌来制造，可使用本领域技术人员公知的方法来制造。

为了使本申请的化合物或组合物以适当的浓度、且均匀地进行分散，本申请的化妆品可以在不损害所期望的保湿效果的限度内含有其它添加剂。

根据本申请第四方面一些可选的实施例，提供一种具有保湿效果的面霜，包括乙酰哈巴苷、硬脂酸、单硬脂酸甘油酯、橄榄油、丙二酰二甲基牛磺酸铵/乙烯基吡咯烷酮共聚物、三乙醇胺、甘油。

由于本申请首次公开了苍术素、乙酰哈巴苷、山茶苷A在保湿方面的用途，因此，将它们单独或与其它活性组份或辅料配合制成化妆品或药剂，只要是该药剂用于保湿等相关的领域，均属于本发明的保护范围。

实验部分

以下是实施例部分使用到的部分试剂、原料、耗材、设备的要求或其可获得的来源，对于未指明的实际或原料，其均可以经市购获得。

表1主要仪器与设备

表2部分试剂及其厂家

试剂名称	生产厂家
		乙酰哈巴苷，牌号：6926-14-3	上海诗丹德生物技术有限公司
山茶苷A，牌号：135095-52-2	上海诗丹德生物技术有限公司
		苍术素，牌号：55290-63-6	上海诗丹德生物技术有限公司
DMEM培养基	Gibco
		胎牛血清(FBS)	Bi
P/S双抗	Gibco
		磷酸盐缓冲液(PBS)	Gibco
二甲基亚砜(DMSO)	Sigma
		四甲基偶氮唑盐(MTT)	麦克林
0.25％胰蛋白酶	Gibco
		DEPC水	Biosharp
逆转录试剂盒	天根生物-
		实时荧光定量PCR试剂盒	Solarbio

表2中，DEPC水是用DEPC(diethyl pyrocarbonate，焦碳酸二乙酯)处理过并经高温高压灭菌的超纯水(一级水)，无色液体。经检测不含杂质RNA、DNA和蛋白质。

VP，丙烯酰二甲基牛磺酸铵/乙烯基吡咯烷酮共聚物，购自公司；

MTT，噻唑蓝(Thiazolyl Blue Tetrazolium Bromide；MTT)；

DMEM细胞完全培养基(+1％的双抗和10％FBS)；

DMEM细胞基础培养基(+1％的双抗，不含胎牛血清(FBS))。

本申请所述的乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素三种化合物及其组合物均具有显著的保湿活性，能显著改善干燥损伤的HaCaT细胞的存活率。

实施例1

本实施例测试了乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素三种单体化合物及其组合物抗HaCaT细胞干燥损伤的活性，具体测试方法如下：

(1)建立HaCaT细胞干燥损伤模型

将处于对数期生长的HaCaT细胞重悬于DMEM细胞完全培养基中，然后将HaCaT细胞以1×10⁴个/孔的接种量接种于96孔板中，在37℃，5％CO₂的条件下在培养箱中培养48h后进行干燥处理：即将96孔板置于超净工作台内，保持室温，依次移去孔中所有的培养液，在洁净工作台内分别放置5、10、15、20、25、30min进行干燥处理；实验中以含有经过干燥处理的细胞的孔作为检测组，以不含细胞、不做干燥处理、且仅含有DMEM细胞完全培养基的孔作为空白对照组，以细胞不进行干燥处理、含有DMEM细胞完全培养基正常培养孔的正常组。

干燥处理结束后，继续加入新鲜的DMEM细胞基础培养基，培养24小时，弃掉96孔板里的旧培养基，每孔加入含10μL5mg/ml的MTT与90μl的DMEM细胞基础培养基混合。再在37℃，5％ CO₂的条件下于培养箱中孵育4小时，弃去含MTT的旧培养基，每孔加入100μL的DMSO，37℃孵育10min后用酶标仪在570nm波长下测定每孔的吸光度。实验重复操作3次，从而确定干燥损伤的最佳干燥处理时间。按以下公式计算细胞干燥死亡率(％)：

细胞干燥死亡率(％)＝[1-(检测组OD值-空白对照组OD值)/(正常组OD值-空白对照组OD值)]*100％。

经过试验可知，如图1所示，随着干燥时间的增加，HaCaT细胞的存活率呈干燥时间依赖性地降低。干燥20min时，HaCaT的存活率仅为60％，说明干燥20min导致将近一半的HaCaT细胞死亡，干燥损伤20min为比较适宜的造模条件。因此选择干燥损伤HaCaT细胞20min作为最佳干燥损伤时间。

(2)测试药物对干燥损伤模型的HaCaT细胞保护作用

按照建立干燥损伤模型同样的方法培养细胞，将HaCaT细胞以1×10⁴个/孔的接种量接种到96孔板中，在37℃，5％ CO₂的条件下的培养箱中培养24小时，分别使用DMEM细胞基础培养基配制：

阴性对照组(正常组)：加入相同用量的DMEM细胞基础培养基，不加药物；

阳性对照组：分别加入人参皂苷(浓度为0.5μmol/L)、槲皮素(浓度为1μmol/L)、透明质酸药物(浓度为10μmol/L)；

药物实验组：分别加入山茶苷A(浓度为5μmol/L)、苍术素(浓度为5μmol/L)、乙酰哈巴苷(浓度为5μmol/L)、乙酰哈巴苷+山茶苷A(摩尔比为1:1，浓度为5μmol/L)、乙酰哈巴苷+苍术素(摩尔比为1:1，浓度为5μmol/L)；

空白对照组，仅加入相同用量的DMEM细胞基础培养基，不加药物和细胞；

每个浓度设置5个重复孔，在37℃、5％CO₂培养箱中培养24小时，然后进行20min干燥处理。干燥处理结束后，继续加入DMEM细胞基础培养基，在37℃，5％ CO₂的条件下于培养箱中培养24小时，每孔加入10μL含5mg/ml的MTT与90μL的DMEM细胞基础培养基混合。接着在培养箱中孵育4小时，最后每孔加入100μL的DMSO，在37℃孵育10min后用酶标仪在570nm波长下测定吸光度。按以下公式计算细胞存活率(％)：

细胞存活率(％)＝(药物实验组OD值-空白对照组OD值)/(正常组OD值-空白对照组OD值)×100％。

将HaCaT细胞存活率的计算结果制成图2，由图2可以看出：

损伤组细胞(即经过20min干燥处理的HaCaT细胞)的存活率相对于正常组极显著的下降(p<0.0001)；

阳性对照组中，阳性对照组相对于损伤组，均有不同程度的增强HaCaT细胞对抗干燥损伤的作用；

药物实验组中，乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素均表现出极显著地改善HaCaT细胞对抗干燥损伤的作用，与阳性药物槲皮素、透明质酸作用相当；乙酰哈巴苷与山茶苷A的组合物、乙酰哈巴苷与苍术素的组合物，分别表现出优异的HaCaT细胞对抗干燥损伤的作用；

上述试验结果表明化合物乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素及其组合物均具有明确地HaCaT细胞对抗干燥损伤作用，具有应用于保湿效果的药物组合物和化妆品的科学意义与产业应用价值。

本申请以皮肤HaCaT细胞干燥损伤为模型，评价了乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素及其组合物的保湿活性。结果表明，这些化合物或组合物在5μmol/L安全浓度下能够显著地增强HaCaT细胞对抗皮肤干燥损伤，证明化合物具有显著的保湿活性，其效果相当或由于阳性药物人参皂苷、槲皮素或透明质酸的保湿效果。组合物1(乙酰哈巴苷和山茶苷A的摩尔比为1:1，共5μmol/L)、组合物2(乙酰哈巴苷和苍术素的摩尔比为1:1，共5μmol/L)也能够极显著地提高细胞存活率(****代表与模型组比p<0.0001)，也具有显著的保湿活性。

(3)HaCaT细胞增殖实验

按照建立干燥损伤模型同样的方法培养细胞，将HaCaT细胞以5000个/孔的接种量接种到96孔板中，在37℃，5％ CO₂的条件下于培养箱中培养24小时，分别使用DMEM细胞基础培养基配制：

药物实验组：1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L的乙酰哈巴苷、苍术素、山茶苷A；

阳性对照组(正常组)：加入10μmol/L的透明质酸；

阴性对照组：仅加入DMEM细胞基础培养基；

空白对照组：仅加入相同用量的DMEM细胞基础培养基，不加药物和HaCaT细胞；

每组或每个浓度的药物设置5个重复孔，于37℃、5％CO₂培养箱中培养48小时后，加入10μL5mg/ml的MTT与90μL的DMEM细胞基础培养基混合。接着在37℃，5％ CO₂的条件下的培养箱中孵育4小时后，每孔加入100μL的DMSO，37℃孵育10min后用酶标仪在570nm波长下测定吸光度。按照以下公式计算细胞存活率(％)：

细胞存活率(％)＝(药物实验组OD值-空白对照组OD值)/(正常组OD值-空白对照组OD值)×100％。

将上述各组的细胞存活率的计算结果制成图3，由图3可以看出，相较于正常组的HaCaT细胞的存活率，药物实验组的苍术素、乙酰哈巴苷、山茶苷A在1μmol/L～40μmol/L浓度下均未表现出明显的细胞毒性，且低浓度的苍术素(1μmol/L)具有明显的促进HaCaT细胞增殖的作用；乙酰哈巴苷的浓度相对越低(1μmol/L)，促进HaCaT细胞增殖的作用也就越明显；低至高浓度的山茶苷A(1μmol/L～40μmol/L)均具有明显的促进HaCaT细胞增殖的作用；由此亦可说明在40μmol/L的浓度下，苍术素、乙酰哈巴苷、山茶苷A均对HaCaT细胞无毒性作用，1μmol/L～40μmol/L均为安全剂量。

本申请通过MTT法评价了三种单独的化合物及其中两种的组合物对HaCaT细胞的细胞毒性，苍术素、乙酰哈巴苷、山茶苷A在1μMol/L～40μMol/L浓度下均未表现出明显的细胞毒性，且山茶苷A具有显著的促进HaCaT细胞增殖的作用。

实施例2保湿相关蛋白基因表达

将HaCaT细胞，即永生化人角质形成细胞以1.0×10⁶个/孔的接种量接种至6孔板，然后以DMEM+10％FBS+1％双抗的完全培养基在37℃、5％CO₂培养箱中培养24h后，待细胞完全贴壁，分别更换含5μmol/L的透明质酸和10μmol/L的苍术素、乙酰哈巴苷、山茶苷A的DMEM细胞基础培养基(DMEM+1％的双抗培养液)，继续培养24h后，舍弃旧培养基，使用PBS润洗3次，根据Trizol法提取细胞中的RNA。即在洗净的细胞培养板中加入1mL的Trizol试剂裂解细胞，剩余步骤参考Trizol法提取细胞中的RNA，样品重复数为3个。

逆转录PCR(RT-PCR)与实时荧光定量PCR(RT-qPCR)：根据Trizol Universal试剂操作手册提取细胞总RNA。DEPC水溶解提取的RNA，将RNA浓度调整为100ng/μL(纳克/微升)，然后根据《Fastking gDNA Dispelling RT Super Mxi》(天根生物-目录号：KR118)试剂盒操作手册，将RNA逆转录为cDNA。根据NCBI人基因组数据库设计AQP3基因，TJP1基因，GLDN1基因、FLG基因的Real-time PCR引物。使用索莱宝的荧光定量试剂盒进行实时荧光定量PCR。基因相对表达量以2(-ΔΔCt)法计算，GAPDH作为内参基因。

基因上下游：

1.AQP3基因：

2.FLG基因:

forward:5’-CTCATCACAGCCACACCACATCC-3’,

reverse:5’-GCCGTCTCCTGATTGTTCATCGT TA-3’；

3.TJP1(也叫ZO-1)基因:

forward:5′-CCCTCAAGGAGCCATTC-3′；

reverse:5′-GAGTTTGCTCCAACGAGA-3′；

4.Claudin-1(CLDN1)基因:

forward:5′-TTCTGGGAGGTGCCCTACTT-3′；

reverse:5′-TGGATAGGGCCTTGGTGTTG-3′；

将上述4种基因的相对表达量的计算结果分别制成图4，由附图4可以看出：

本申请通过RT-PCR实验技术，评价了AQP3、TJP1、GLDN1、FLG四种保湿相关基因的mRNA表达水平，相对于未经干燥损伤的HaCaT细胞，即正常组的HaCaT细胞，经过干燥损伤处理的HaCaT细胞，即模型组的HaCaT细胞的AQP3基因、TJP1基因、GLDN1基因、FLG基因mRNA的表达水平均显著降低(p＜0.05)；而阳性药透明质酸以及测试的药物苍术素、乙酰哈巴苷、山茶苷A均表现出显著提升干燥损伤后的HaCaT细胞内这四种基因表达水平的效果，其中乙酰哈巴苷促进干燥损伤后的HaCaT细胞内TJP1基因、GLDN1基因、FLG基因mRNA表达量要明显优于其他药物，而山茶苷A对于促进干燥损伤后的HaCaT细胞内AQP3基因mRNA表达量要明显优于其他药物；HaCaT细胞内TJP1基因、GLDN1基因、FLG基因mRNA表达量增加也进一步说明本申请实施例的组合物能够有效的促进HaCaT细胞的保湿效果。

实施例3乙酰哈巴苷保湿面霜的制备

将乙酰哈巴苷1wt.％、硬脂酸8wt.％、单硬脂酸甘油酯3wt.％、橄榄油3wt.％、丙烯酰二甲基牛磺酸铵/乙烯基吡咯烷酮共聚物6wt.％、三乙醇胺12wt.％、甘油18wt.％加纯化水进行乳化，最后加纯化水至100wt.％。确定乳化时间为20min，最终得到外观均匀、细腻、有光泽，稠度与涂布性、物理稳定性良好的面霜成品。

实施例4乙酰哈巴苷+山茶苷A保湿面膜的制备

根据以下配方制备面膜液：CMC-Na 0.8wt.％、甘油16wt.％、丁二醇9wt.％、芦荟提取液1.09wt.％、摩尔比为1:1的乙酰哈巴苷+山茶苷A0.01wt.％、苯氧乙醇1.2wt.％、去离子水71.9wt.％。经pH值检测，该面膜的pH值为5.6，呈弱酸性，能有效起到保湿的效果；应用时浸泡无纺布面贴膜，每片浸含保湿面膜液20g，对产品进行的感官测试表明，含有乙酰哈巴苷+山茶苷A的保湿面膜对皮肤无刺激性，符合面膜的质量标准。其中，感官测试的方法及结果如下：

【感官测试】召集12名志愿者，年龄20-35岁，男女各半，连续三天，每天敷一次本面膜，每次20min，三天之后填写以下感官测试问卷：

1.您对面膜香味的喜欢程度是：

3分，非常喜欢

2分，比较喜欢

1分，一般

0分，不喜欢

2.每次敷完20min后，您觉得皮肤保湿的程度是：

3分，非常明显

2分，比较明显

1分，一般

0分，没有改善

3.请对这款面膜的使用体验感进行整体满意度评分：

3分，非常满意

2分，比较满意

1分，一般

0分，不满意

4.请对这款面膜的使用效果进行整体满意度评分：

3分，非常满意

2分，比较满意

1分，一般

0分，不满意

5.面膜使用中及使用后，有无以下不良反应

有皮肤刺痛感

有刺激眼部

有过敏表现

以上感觉都没有

如有其它感觉，请在此说明：__________________________________。

统计结果如下表3：

表3实施例5的面膜感官测试结果表

对比项	3分人数	2分人数	1分人数	0分人数
					问题1	6	4	1	1
问题2	8	3	1	0
					问题3	7	4	1	0
问题4	6	6	0	0

注：不良反应报告人数0，本实施例的面膜没有不良反应。

本申请对3种高纯度天然来源的保湿化合物，以活性筛选和毒性评价为基础，在安全剂量下评价了皮肤HaCaT细胞抗干燥损伤的活性，研究过程具有严谨、可靠性强的特点。并对其部分组合物的活性也进行了测定，证明用于保湿的组合物同样有保湿效果。

以上所述，仅为本申请的具体实施方式，所属领域的技术人员可以清楚地了解到，为了描述的方便和简洁，上述描述的具体工作过程，可以参考前述方法实施例中的对应过程，在此不再赘述。应理解，本申请的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本申请揭露的技术范围内，可轻易想到各种等效的修改或替换，这些修改或替换都应涵盖在本申请的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种用于保湿的组合物，其特征在于，包括：

选自乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素中的至少一种的天然来源的保湿剂，以及

分散载剂。

2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，选自所述乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素中的至少一种天然来源的保湿剂的总浓度为0.5μmol/L～0.1mol/L。

3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述天然来源的保湿剂包括苍术素、山茶苷A，所述苍术素、山茶苷A的总浓度为0.5μmol/L～0.1mol/L；和/或

所述天然来源的保湿剂包括摩尔比为(0.2～1):1的苍术素、山茶苷A；或

所述天然来源的保湿剂包括乙酰哈巴苷、山茶苷A，所述乙酰哈巴苷、山茶苷A的总浓度为0.5μmol/L～0.1mol/L；和/或

所述天然来源的保湿剂包括摩尔比为(0.3～3):1的乙酰哈巴苷、山茶苷A；或

所述天然来源的保湿剂包括乙酰哈巴苷、苍术素，所述乙酰哈巴苷、苍术素的总浓度为0.5μmol/L～0.1mol/L；和/或

所述天然来源的保湿剂包括摩尔比为(0.3～3):1的乙酰哈巴苷和苍术素。

4.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，所述天然来源的保湿剂包括乙酰哈巴苷、苍术素、山茶苷A，所述乙酰哈巴苷、苍术素、山茶苷A的总浓度为0.5μmol/L～0.1mol/L；和/或

所述天然来源的保湿剂包括摩尔比为(0.3～3):1:(0.2～1)的乙酰哈巴苷、苍术素和山茶苷A。

5.一种乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素或如权利要求1-4任一项所述的组合物用于制备皮肤保湿的化妆品的用途。

6.一种化妆品，其特征在于，包括选自乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素中的至少一种天然来源的保湿剂。

7.根据权利要求6所述的化妆品，其特征在于，所述化妆品还包括载剂、润湿剂、第二保湿剂、粉体、醇类溶剂、水溶性高分子、油溶性高分子、成膜剂、紫外线吸收剂、增稠剂、乳化剂、润肤剂、表面活性剂、香料、盐类、抗氧化剂、稳定剂、抗菌剂、防腐剂、pH调节剂、螯合剂、清凉剂、抗炎剂、美肌用成分中的至少一种助剂。

8.根据权利要求7所述的化妆品，其特征在于，所述载剂选自去离子水、纯化水、乙醇或其组合；和/或

所述乙酰哈巴苷、山茶苷A、苍术素或其组合在化妆品中的总浓度为0.5μmol/L～0.1mol/L。

9.根据权利要求7所述的化妆品，其特征在于，所述润湿剂选自木糖醇、山梨醇、丙二醇、甘油、乙基己基甘油或其组合；和/或

所述第二保湿剂选自透明质酸、透明质酸钠、人参皂苷、槲皮素、聚乙二醇、低聚果糖或其组合；和/或

所述粉体选自气相二氧化硅、碳酸钙、碳酸镁、钛白粉、膨润土、锌白粉、硅藻土、微晶纤维素、甘露醇或其组合；和/或

所述醇类溶剂选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丁醇、仲丁醇、异丁醇、丁二醇、正戊醇、仲戊醇、3-戊醇、异戊醇、1,2-戊二醇、正己醇或其组合；和/或

所述水溶性高分子选自纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、羟乙基纤维素、瓜尔胶、琼胶、海藻胶、黄原胶、卡波姆或其组合；和/或

所述油溶性高分子选自白油、甲基葡萄糖苷倍半硬脂酸酯、聚氧乙烯(20)甲基葡萄糖苷倍半硬脂酸酯、维生素E醋酸酯、羊毛醇聚氧乙烯醚、十六烷醇和椰油基葡萄糖苷或其组合；和/或

所述膜成型剂选自聚乙酸乙烯酯、聚丙烯酸酯、聚甘油-2异硬脂酸酯、聚甘油-3异硬脂酸酯、棕榈酸、棕榈酸乙基己酯、三硬脂酸甘油酯、辛癸酸甘油三酯、丙二醇单月桂酸酯、月桂酰聚氧甘油酯、亚油酰聚氧甘油酯、油酰聚氧甘油酯或硬脂酰聚氧甘油酯、聚二甲基硅氧烷、聚乙烯基吡咯烷酮/十六碳烯共聚物、丙烯酸树脂与二甲基硅氧烷共聚物、丙烯酸盐/辛基丙烯酸胺共聚物或其组合；和/或

所述紫外线吸收剂选自2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮、二乙氨基羟苯甲酰基苯甲酸己酯、对氨基苯甲酸、乙氧基化-4-氨基苯甲酸乙酯或其组合；和/或

所述增稠剂选自环糊精、明胶、阿拉伯树胶、纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、羟乙基纤维素、纤维素丙酸酯、纤维素醋酸丙酸酯、纤维素醋酸丁酸酯、玉米淀粉、土豆淀粉、羟甲基纤维素、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素、海藻酸钠、羟基磷灰石或其组合；和/或

所述乳化剂选自硬脂酸镁、硬脂酸、硬脂酸钙、单硬脂酸甘油酯或其组合；和/或

所述润肤剂选自椰子油、橄榄油、山茶油、肉豆蔻酸酯、辛酸辛酯、油醇油酸酯、月桂酸己酯、月桂醇、油醇、辛基十二醇、己基癸醇、二辛基环己烷、棕榈酸异丙酯、椰油醇-辛酸酯/癸酸酯、PEG-6辛酸/癸酸甘油三酯、PEG-60玉米油甘油混合酯、PEG-7橄榄油酸酯、PEG-7甘油椰油酸酯或其组合；和/或

所述表面活性剂选自十八烷基硫酸钠、硬脂醇聚醚-2、硬脂酸钠、椰油酰两性基乙酸钠、聚二甲基硅氧烷350CS、Olivem 1000、甘油硬脂酸酯或其组合；和/或

所述香料选自正壬醇、霍霍巴油、薰衣草精油、茉莉花精油、罗勒精油、丁香精油、香茅精油、葡萄柚精油、柠檬精油、天竺葵精油、尤加利精油、薄荷精油、洋甘菊精油、菊花精油、槐花精油、矢车菊精油、梅花精油、松香或其组合；和/或

所述盐类选自氯化羟铝、氯化钠或其组合；和/或

所述抗氧化剂选自丁基羟基茴香醚、叔丁基羟基甲苯、五倍子酸丙酯、生育酚、磷脂或其组合；和/或

所述稳定剂选自维生素C、维生素E、茶多酚、聚丙烯酸钠、月桂酸二乙醇酰胺或其组合；和/或

所述抗菌剂选自丙酸、苯氧乙醇、对羟基苯甲酸酯、茶树精油或其组合；和/或

所述pH调节剂选自柠檬酸、柠檬酸钠、苹果酸、草酸、山梨酸钾、氨甲基丙醇或其组合；和/或

所述螯合剂选自EDTA-2Na、乙二胺四乙酸、乙二胺二琥珀酸三钠或其组合；和/或

所述清凉剂剂选自天然冰片、左旋薄荷酮、异薄荷酮、胡薄荷酮、乙酸薄荷酯、右旋樟脑或其组合；和/或

所述抗炎剂选自鼠李糖、甘草酸二钾、马齿苋提取物、黄瓜籽提取物或其组合；和/或

所述美肌成分选自胆固醇衍生物、白藜芦醇、角鲨烷、月见草油、小麦胚芽油、ACP植物肌素或其组合；和/或

所述防腐剂选自对羟基苯乙酮、1,2-己二醇、苯甲醇、苯氧乙醇、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸乙酯、羟基苯甲酸丙酯或其组合。

10.根据权利要求6-9任一项所述的化妆品，其特征在于，可以被制备为膏、霜、乳、精华液、贴剂、面膜、酊剂外用化妆品剂型。