CN117447449A

CN117447449A - Parp1抑制剂及其应用

Info

Publication number: CN117447449A
Application number: CN202210823823.9A
Authority: CN
Inventors: 王小伟; 郑国闯; 张笑雨; 李佳妮; 王春萌; 孙韡; 全旭; 张小猛
Original assignee: Nanjing Sanhome Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Nanjing Sanhome Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2022-07-13
Filing date: 2022-07-13
Publication date: 2024-01-26

Abstract

本发明属于医药化学领域，涉及选择性抑制PARP1的化合物及其应用，具体地，本发明提供式(I)所示的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，以及含有其的药物组合物和这些化合物或组合物用于治疗和/或预防抑制PARP1有益的疾病，例如癌症的应用。

Description

PARP1抑制剂及其应用

技术领域

本发明属于医药化学领域，具体涉及抑制聚(ADP-核糖)聚合酶1(Poly(ADP-ribose)polymerase 1,PARP1)的化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、结晶或前药，以及含有其的药物组合物和这些化合物或组合物用于治疗和/或预防抑制PARP1有益的疾病，例如癌症的用途。

背景技术

聚(ADP-核糖)聚合酶(Poly(ADP-ribose)polymerase，PARP)是存在于真核细胞中催化聚ADP核糖化的细胞核酶，它参与的聚ADP核糖化是真核细胞中蛋白质翻译后的重要修饰方式之一。目前已经发现18个PARPs能够以NAD+为底物，催化合成聚(ADP-核糖)(PAR)聚合物。

PARP1是第一个被发现具有催化聚ADP核糖化修饰活性的蛋白，能够以NAD+为底物合成直线状和多枝状的PAR聚合物。PARP1是由1014个氨基酸组成，分为三个主要区域：(1)含有2个锌指基序的DNA结合区域(N端)；(2)由两个核定位信号序列组成且具有capase-3酶切功能的中间区域；以及(3)具有催化功能，以NAD+为底物催化聚腺苷二磷酸核糖合成的区域(C端)。PARP1除了修复DNA损伤之外，还有一系列重要的生理功能，包括在骨髓、血液系统中参与细胞分化。PARP1在细胞核中起到修复单链DNA断裂(SSB)和双链断裂(DSB)的作用，包括同源重组(HR)和非同源末端连接(NHEJ)修复。BRCA1(乳腺癌易感基因1)和BRCA2(乳腺癌易感基因2)是两种关键的抑癌基因，它们在损伤修复、细胞的正常生长方面有重要作用。如果BRCA1/2蛋白中的一种或两种有突变或缺陷，则细胞更加强烈地依赖PARP介导的DNA修复途径。

PARP2与PARP1具有69％的同源性，同样有DNA损伤应激活性，但其DNA绑定结构域和PARP1的不同。研究表明PARP2在红细胞分化和血小板生成中有重要作用(J Farrés etal.PARP-2 sustains erythropoiesis in mice by limiting replicative stress inerythroid progenitors.Cell Death and Differentiation(2015)22,1144–1157.)，以及在小鼠体内PARP2在维持造血干细胞稳定发挥重要作用(Jordi Farrés,et al.Parp-2 isrequired to maintain hematopoiesis following sublethalγ-irradiation inmice.Blood 2013；122(1):44-54.)。PARP2还在脂肪细胞分化、T-cell生成等方面有着一定作用(L Nicolás et al.Loss of poly(ADP-ribose)polymerase-2 leads to rapiddevelopment of spontaneous T-cell lymphomas in p53-deficient mice.Oncogene(2010)29,2877–2883.)。还有研究表明，髓样缺失PARP2会增加骨髓中不成熟髓细胞的数目并增加趋化因子如CCL3的表达，进而增大乳腺癌发生骨转移的几率。此外，对目前已上市的非选择性PARP1/2抑制剂奥拉帕利、尼拉帕利和卢卡帕利的临床不良反应研究表明，它们的副作用有肾毒性、胃肠毒性和血液毒性等，这些可能与对PARP2的抑制剂有关(ChristopherJ LaFargue,et al.Exploring and comparing adverse events between PARPinhibitors.Lancet Oncol.2019；20(1):15–28.)。

结合PARP1/2的生理功能和已上市药物的不良反应，开发新的疗效好、能降低相关不良反应，特别是改善血液毒性的PARP1型选择性抑制剂将具有很好的临床前景。

发明内容

本发明的一个目的是提供式(I)所示的化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、结晶或前药，

本发明的另一个目的是提供包含本发明的通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物或前药和药学可接受的载体的组合物，以及包含本发明的通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物或前药和另一种或多种抗肿瘤药物的组合物。

本发明的还一个目的是提供本发明的通式(I)的化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、结晶、前药或药物组合物在制备治疗和/或预防抑制PAPR1有益的疾病的药物的应用。

针对上述目的，本发明提供以下技术方案：

第一方面，本发明提供式(I)所示的化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、结晶或前药，

其中，

环A选自C_3-10环烷基、C_3-10杂环烷基、C_6-12芳基、C_5-12杂芳基，其任选被一个或多个选自卤素、羟基、C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、羟基C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、卤代C_1-6烷氧基、羟基C_1-6烷氧基、硝基、羧基、氰基、氨基、单C_1-6烷基氨基、C_1-6烷基酰基氨基、C_1-6烷基酰基、双C_1-6烷基氨基、C_3-8环烷基、C_3-8杂环基、C_6-12芳基、C_5-12杂芳基和氧代基团的基团取代；

R₁、R₂、R₄各自独立地选自氢、卤素、羟基、C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、羟基C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、卤代C_1-6烷氧基、羟基C_1-6烷氧基、硝基、羧基、氰基、氨基、C_3-8环烷基、C_3-8杂环基、C_6-12芳基、C_5-12杂芳基；

R₃选自卤素、羟基、C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、羟基C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、卤代C_1-6烷氧基、羟基C_1-6烷氧基、硝基、羧基、氰基、氨基、C_1-6烷基氨基、C_1-6烷基氨基酰基、C_1-6烷基酰基氨基、C_1-6烷基酰基、氨基酰基、C_3-8环烷基氨基酰基、C_3-8环烷基C_1-6烷基氨基酰基、C_1-6烷基磺酰基、氨基磺酰基、C_1-6烷基氨基磺酰基、C_3-8环烷基、C_3-8杂环基、C_6-12芳基和C_5-12杂芳基，其任选被一个或多个选自卤素、羟基、C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、羟基C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、卤代C_1-6烷氧基、羟基C_1-6烷氧基、氨基、单C_1-6烷基氨基、C_1-6烷基酰基氨基、C_1-6烷基酰基、C_1-6烷基磺酰基、氨基酰基、C_1-6烷基氨基酰基、双C_1-6烷基氨基、烯基、炔基、卤代C_1-6烷基酰基、羟基C_1-6烷基酰基、C_3-8环烷基、C_3-8杂环基、C_6-12芳基、C_5-12杂芳基、氧代基团的基团取代；和

n、m各自独立地选自0、1、2、3和4。

在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式(I)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，其中：

环A选自其任选被一个或多个选自卤素、羟基、C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、羟基C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、卤代C_1-6烷氧基、羟基C_1-6烷氧基、氨基、C_1-6烷基氨基、C_1-6烷基酰基氨基、C_1-6烷基酰基、C_1-6烷基磺酰基、氨基酰基、C_1-6烷基氨基酰基、烯基、炔基、卤代C_1-6烷基酰基、羟基C_1-6烷基酰基的基团取代；进一步优选地，其任选被一个或多个选自甲基、乙基、丙基、氟、氯、溴、碘、三氟甲基、甲氧基和乙氧基的基团取代；

进一步优选，环A选自

R₁选自卤素、羟基、C_1-3烷基、卤代C_1-3烷基、羟基C_1-3烷基、C_1-3烷氧基、卤代C_1-3烷氧基、羟基C_1-3烷氧基、硝基、羧基、氰基、氨基、C_3-6环烷基、C_3-6杂环基；

进一步优选地，R₁选自甲基、乙基、丙基、氟、氯、溴、碘、三氟甲基、甲氧基、乙氧基、环丙基、环丁基和环戊基。

R₂选自氢、卤素、羟基、C_1-3烷基、卤代C_1-3烷基、羟基C_1-3烷基、C_1-3烷氧基、卤代C_1-3烷氧基、羟基C_1-3烷氧基、硝基、羧基、氰基、氨基；

进一步优选地，R₂选自氢、甲基、乙基、丙基、氟、氯、溴、碘、三氟甲基、甲氧基、乙氧基；

n选自0、1、2、3和4。

R₃选自卤素、羟基、C_1-3烷基、卤代C_1-3烷基、羟基C_1-3烷基、C_1-3烷氧基、卤代C_1-3烷氧基、羟基C_1-3烷氧基、硝基、羧基、氰基、氨基、C_1-3烷基氨基、C_1-3烷基氨基酰基、C_1-3烷基酰基氨基、C_1-3烷基酰基、氨基酰基、C_3-8环烷基氨基酰基、C_3-8环烷基C_1-3烷基氨基酰基、C_1-3烷基磺酰基、氨基磺酰基、C_1-3烷基氨基磺酰基、C_3-8环烷基、C_3-8杂环基、C_6-12芳基和C_5-12杂芳基，其任选被一个或多个选自卤素、羟基、C_1-3烷基、卤代C_1-3烷基、羟基C_1-3烷基、C_1-3烷氧基、卤代C_1-3烷氧基、羟基C_1-3烷氧基、氨基、单C_1-3烷基氨基、C_1-3烷基酰基氨基、C_1-3烷基酰基、C_1-3烷基磺酰基、氨基酰基、C_1-3烷基氨基酰基、双C_1-3烷基氨基、烯基、炔基、卤代C_1-3烷基酰基、羟基C_1-3烷基酰基、C_3-8环烷基、C_3-8杂环基、C_6-12芳基、C_5-12杂芳基、氧代基团的基团取代；

进一步优选地，R₃选自C_1-3烷基氨基酰基、C_1-3烷氧基、氨基酰基、C_3-6环烷基氨基酰基、C_1-3烷基氨基磺酰基，其任选被一个或多个选自C_1-3烷基、C_3-6环烷基、卤素、卤代C_1-3烷基的基团取代；

m选自0、1、2、3和4。

在一些具体的实施方案中，本发明的化合物为通式(I)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，其中R₃选自 m选自1、2和3。

在一些实施方案中，本发明的化合物为通式(I)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，其中：

R₄选自卤素、羟基、C_1-3烷基、卤代C_1-3烷基、羟基C_1-3烷基、C_1-3烷氧基、卤代C_1-3烷氧基、羟基C_1-3烷氧基、硝基、羧基、氰基、氨基、C_3-6环烷基、C_3-6杂环基；

进一步优选地，R₄选自甲基、乙基、丙基、氟、氯、溴、碘、三氟甲基、甲氧基、乙氧基、环丙基、环丁基和环戊基。

在一些实施方案中，本发明提供式(Ia)所示的化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、结晶或前药，

其中，

R₅选自氢、卤素、羟基、C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、羟基C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、卤代C_1-6烷氧基、羟基C_1-6烷氧基、硝基、羧基、氰基、氨基、C_3-8环烷基、C_3-8环烷基C_1-6烷基、C_3-8杂环基、C_3-8杂环基C_1-6烷基、C_6-12芳基、C_5-12杂芳基；

R₆选自一个或多个氢、卤素、羟基、C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、羟基C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、卤代C_1-6烷氧基、羟基C_1-6烷氧基、硝基、羧基、氰基、氨基、单C_1-6烷基氨基、C_1-6烷基酰基氨基、C_1-6烷基酰基、双C_1-6烷基氨基、C_3-8环烷基、C_3-8杂环基、C_6-12芳基、C_5-12杂芳基和氧代基团；和

R₁、R₂、R₄、n具有以上通式(I)中的定义。

在一些具体的实施方案中，根据本发明的式(Ia)所示的化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、结晶或前药，其中R₅选自氢、卤素、羟基、C_1-3烷基、卤代C_1-3烷基、羟基C_1-3烷基、C_1-3烷氧基、卤代C_1-3烷氧基、羟基C_1-3烷氧基、硝基、羧基、氰基、氨基、C_3-6环烷基、C_3-6环烷基C_1-3烷基、C_3-6杂环基。

在一些具体的实施方案中，根据本发明的式(Ia)所示的化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、结晶或前药，其中R₅选自氢、甲基、乙基、丙基、三氟甲基、环丙基和环丙基甲基。

在一些具体的实施方案中，根据本发明的式(Ia)所示的化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、结晶或前药，其中R₆选自一个或多个氢、卤素、羟基、C_1-3烷基、卤代C_1-3烷基、羟基C_1-3烷基、C_1-3烷氧基、卤代C_1-3烷氧基、羟基C_1-3烷氧基、硝基、羧基、氰基、氨基、单C_1-3烷基氨基、C_1-3烷基酰基氨基、C_1-3烷基酰基、双C_1-3烷基氨基、C_3-6环烷基、C_3-6杂环基、C_6-12芳基、C_5-10杂芳基和氧代基团。

在一些具体的实施方案中，根据本发明的式(Ia)所示的化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、结晶或前药，其中R₆选自氢、氟、氯、溴、碘、甲基、乙基、丙基、二氟甲基、三氟甲基、环丙基和环丙基甲基。

本发明提供以下具体化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药：

另一方面，本发明提供一种药物组合物，其包含本发明的通式(I)或通式(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、结晶或前药和药学上可接受的载体。

在一些实施方案中，本发明提供药物组合物，其包含本发明的化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、结晶或前药，还包含其他一种或多种抗肿瘤化疗药物或抗体。

可以将本发明的化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、结晶或前药与药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂混合制备成药物制剂，以适合于经口或胃肠外给药。给药方法包括，但不限于经口途径，皮内、肌内、腹膜内、静脉内、皮下和鼻内。所述制剂可以通过任何途径施用，例如通过口服，通过输注或推注，通过经上皮或皮肤黏膜(例如口腔黏膜或直肠等)吸收的途径施用。给药可以是全身的或局部的。经口施用制剂的实例包括固体或液体剂型，具体而言，包括片剂、丸剂、粒剂、粉剂、胶囊剂、糖浆、乳剂、混悬剂等。所述制剂可通过本领域已知的方法制备，且包含药物制剂领域常规使用的载体、稀释剂或赋形剂。在一些优选的实施方案中，所述药物制剂是片剂或胶囊剂。

第三方面，本发明提供本发明式(I)或式(Ia)所示的化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、结晶或前药，或包含其的药物组合物在制备治疗和/或预防抑制PARP1有益的疾病的药物中的用途。在一些实施方案中，所述的疾病是癌症。在一些具体的实施方案中，所述癌症是乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、血液肿瘤、胃肠道肿瘤如胃癌和结肠癌，以及肺癌。在另一些具体的实施方案中，所述癌症为肝癌、肾癌、黑色素瘤、甲状腺肿瘤、胆管癌、恶性淋巴肿瘤、膀胱癌和肉瘤。

在一些具体的实施方案中，相对于PARP2，本发明的通式(I)或通式(Ia)化合物化或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、结晶或前药对PARP1具有选择性抑制。相对于PARP2，本发明的通式(I)或通式(Ia)化合物化或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、结晶或前药对PARP1具有大于10倍的选择性抑制，优选具有大于100倍的选择性抑制。

在一些实施方案中，本发明涉及一种治疗癌症的方法，其包括给予所需患者治疗有效量的通式(I)或通式(Ia)所示的化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物或前药，或包含其的药物组合物。在一些具体的实施方案中，所述癌症是乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、血液肿瘤、胃肠道肿瘤如胃癌和结肠癌，以及肺癌。在另一些具体的实施方案中，所述癌症为肝癌、肾癌、黑色素瘤、甲状腺肿瘤、胆管癌、恶性淋巴肿瘤、膀胱癌和肉瘤。

在一些实施方案中，本发明提供本发明式(I)或式(Ia)所示的化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、结晶或前药，或包含其的药物组合物在制备治疗和/或预防同源重组(HR)依赖性DNA双链断裂(DSB)修复活性缺陷的癌症的药物中的用途。

在一些实施方案中，所述癌症对HR修复DNA DSB的能力降低或消除。在一些实施方案中，所述癌症具有BRCA1和/或BRCA2缺陷表型，例如BRCA1和/或BRCA2表达和/或活性降低或消除。优选地，所述癌症选自乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌、血液肿瘤、胃肠道肿瘤如胃癌和结肠癌，以及肺癌。

术语说明

除非有相反陈述，在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述含义。

本发明的化合物中的“氢”、“碳”、“氧”包括其所有同位素。同位素应理解为包括具有相同原子数但具有不同质量数的那些原子。举例来说，氢的同位素包括氕、氚和氘，碳的同位素包括¹³C和¹⁴C，氧的同位素包括¹⁶O和¹⁸O等。

发明的“异构体”是指原子组成及连接方式相同，而其三维空间排列不同的分子，包括但不限于非对映体，对映异构体，顺反异构体，和它们的混合物，如外消旋混合物。很多有机化合物都以光学活性形式存在，即它们有能力旋转平面偏振光的平面。在描述光学活性化合物时，前缀D、L或R、S用来表示分子手性中心的绝对构型。前缀D、L或(+)、(-)用来命名化合物平面偏振光旋转的符号，(-)或L是指化合物是左旋的，前缀(+)或D是指化合物是右旋的。这些立体异构体的化学结构是相同的，但其立体结构不一样。特定的立体异构体可以是对映体，异构体的混合物通常称为对映异构体混合物。50:50的对映体混合物被称为外消旋混合物或外消旋体，这可能导致化学反应过程中没有立体选择性或立体定向性。术语“外消旋混合物”和“外消旋体”是指等摩尔的两个对映异构体的混合物，缺乏光学活性。

依据起始物料和方法的选择，本发明化合物可以以可能的异构体中的一个或它们的混合物，例如外消旋体和非对应异构体混合物(这取决于不对称碳原子的数量)的形式存在。光学活性的(R)-或(S)-异构体可使用手性合成子或手性试剂制备，或使用常规技术拆分。

所得的任何立体异构体的混合物可以依据组分物理化学性质上的差异被分离成纯的或基本纯的几何异构体，对映异构体，非对映异构体，例如，通过色谱法和/或分步结晶法。

本发明的“卤素”是指氟、氯、溴、碘。本发明的“卤代”是指被氟、氯、溴或碘取代。

本发明的“烷基”指直链或支链的饱和脂肪烃基团，优选含1至6个碳原子的直链或支链基团，进一步优选含有1至3个碳原子的直链或支链基团，非限制性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基等。烷基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上。

本发明的-C(O)-是指“羰基”。

本发明的-S(O)₂-是指“磺酰基”。

本发明的“卤代烷基”是指至少被一个卤素取代的烷基。

本发明的“羟基烷基”是指至少被一个羟基取代的烷基。

本发明的“烷氧基”是指-O-烷基。烷氧基的非限制性实例包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基、正丙氧基、异丙氧基、异丁氧基、仲丁氧基等。烷氧基可以是任选取代的或未取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上。

本发明的“环烷基”是指环状的饱和烃基。合适的环烷基可以为取代或未取代的具有3-12个碳原子的单环、二环或三环饱和烃基，例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基。

本发明的“杂环基”是指具有1至4个环杂原子(其中每个杂原子独立地选自氮、氧、硫、硼、磷以及硅)的3-至12-元非芳香族环系统的基团(“3-12元杂环基”)。在包含一个或多个氮原子的杂环基基团中，连接点可以是碳或氮原子，只要化合价许可。杂环基基团或者可以是单环的(“单环杂环基”)或者是融合的、桥联的或螺的环系统(例如二环系统(又称“二环杂环基”))并且可以是饱和的或可以是部分不饱和的。合适的杂环基包括但不限于哌啶基、氮杂环丁烷基、氮杂环丙烷基、四氢吡咯基、哌嗪基、二氢喹唑啉基、氧杂环丙基、氧杂环丁基、四氢呋喃基、四氢吡喃基等。杂环基的每个实例可以是任选取代的或未取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上。

本发明的“芳基”是指可以包含单环或稠合多环的芳香体系，优选包含单环或稠合双环的芳香体系，其含有6个至12个碳原子，优选含有约6至约10个碳原子。合适的芳基包括但不限于苯基、萘基、蒽基、芴基、茚满基。芳基可以是任选取代的或未取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上。

本发明的“杂芳基”或“杂芳环”是指至少有一个碳原子被杂原子替代的芳基，优选由5-12个原子构成(5-12元杂芳基)，进一步优选由5-10个原子组成(5-10元杂芳基)，所述的杂原子为O、S、N。所述杂芳基包括但不限于咪唑基、吡咯基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、噁唑基、噻唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、三唑基、四唑基、吲哚基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、三嗪基、异吲哚基、苯并吡唑基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并吡喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并异噁唑基、苯并异噻唑基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、噌啉基、喹喔啉基、苯并噁嗪基、苯并噻嗪基、咪唑并吡啶基、嘧啶并吡唑基、嘧啶并咪唑基、等。杂芳基可以是任选取代的或未取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上。

本发明的“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的盐，这类盐用于哺乳动物体内时具有安全性和有效性，且具有应有的生物活性。

本发明的“溶剂化物”在常规意义上是指溶质(如活性化合物、活性化合物的盐)和溶剂(如水)组合形成的复合物。溶剂是指本领域的技术人员所知的或容易确定的溶剂。如果是水，则溶剂化物通常被称作水合物，例如半水合物、一水合物、二水合物、三水合物或其替代量等。

具有化学式(I)的化合物的体内作用可以部分地由在给予具有化学式(I)的化合物之后在人体或动物体内形成的一种或多种代谢物来发挥。如上所述，具有化学式(I)的化合物的体内作用也可以经由前体化合物(“前药”)代谢来发挥。本发明的“前药”是指在生物体中的生理条件下，由于与酶、胃酸等反应而转化成本发明化合物的化合物，即通过酶的氧化、还原、水解等转化成本发明化合物的化合物和/或通过胃酸等的水解反应等转化成本发明化合物的化合物等。

本发明的“结晶”是指其内部结构是在三维上规律地重复构成原子(或其集团)而形成的固体，有别于不具有这种规律的内部结构的无定形固体。

本发明的“药物组合物”是指包含任何一种本发明所述的化合物，包括对应的异构体、前药、溶剂化物、药学上可接受的盐或其化学的保护形式，和一种或多种可药用载体和/或另一种或多种药物的混合物。药用组合物的目的是促进化合物对生物体的给药。所述组合物通常用于制备治疗和/或预防由一种或多种激酶介导的疾病的药物。

本发明的“可药用载体”是指对有机体不引起明显刺激性和不干扰所给予化合物的生物活性和性质的载体，包含所有的溶剂、稀释剂或其它赋形剂、分散剂、表面活性剂等渗剂、增稠剂或乳化剂、防腐剂、固体粘合剂、润滑剂等。除非任何常规载体介质与本发明化合物不相容。可以作为药学上可接受的载体的一些实例包括，但不限于糖类，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、以及纤维素和乙酸纤维素；麦芽、明胶等。

本发明的“赋形剂”指加入到药用组合物中以进一步促进给予化合物的惰性物质。赋形剂可以包括碳酸钙、磷酸钙、多种糖类和多种类型的淀粉、纤维素衍生物、明胶、植物油、聚乙二醇。

具体实施方式

下面代表性的实施例是为了更好地说明本发明，而非用于限制本发明的保护范围。以下实施例中使用的材料如无特殊说明均为商购获得。

实施例1：2-氟-1'-((5-氟-2-甲基-3-氧代-3,4-二氢喹啉-6-基)甲基)-N-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺

步骤1：2-(4-溴-3-氟-2-硝基苯胺基)丙氨酸乙酯的制备

将1-溴-2,4-二氟-3-硝基苯(15g,63mmol)加入到单颈烧瓶中，加入N,N-二甲基甲酰胺(150mL)溶解，然后加入2-氨基丙酸乙酯(9.68g,63mmol)和N,N-二异丙基乙胺(24.4g,189mmol)，室温反应18小时。反应结束后，乙酸乙酯萃取，饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，柱层析纯化得标题化合物。ESI-MS m/z:335.0，337.0[M+H]⁺。

步骤2：2-(2-胺基-4-溴-3-氟苯胺基)丙酸乙酯的制备

将2-(4-溴-3-氟-2-硝基苯胺基)丙酸乙酯(10g,31mmol)加入到单颈烧瓶中，加入甲醇(150mL)和水(3.5mL)溶解，加入氯化铵(27g,500mmol)，在0℃搅拌下分批加入锌粉(33g,500mmol)，室温下反应2小时。反应结束后，乙酸乙酯萃取，饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠进行干燥，柱层析纯化得标题化合物。ESI-MS m/z:305.1,307.1[M+H]⁺。

步骤3：7-溴-8-氟-3-甲基-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮的制备

将2-(2-胺基-4-溴-3-氟苯胺基)丙酸乙酯加入到反应瓶中，甲醇(50mL)溶解，滴入4M盐酸溶液(2mL)，室温下反应2小时，反应结束后减压除去有机相，得标题化合物。ESI-MS m/z:259.1,261.1[M+H]⁺。

步骤4：7溴-8-氟-3-甲基喹啉-2(1H)-酮的制备

将7-溴-8-氟-3-甲基-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮(4.5g,17.4mmol)加入到反应瓶中，二氯甲烷(200mL)溶解，然后加入2,3-二氯-5,6-二氰基苯醌(4.7g,20.8mmol)，室温搅拌2小时。反应结束后，减压除去溶剂，然后加入饱和碳酸氢钠溶液(60mL)淬灭，乙酸乙酯萃取，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液浓缩得标题化合物。ESI-MS m/z:257.0,259.0[M+H]⁺。

步骤5：8-氟-7-(羟甲基)-3-甲基喹啉-2(1H)-酮的制备

将7溴-8-氟-3-甲基喹啉-2(1H)-酮(4.4g,16.9mmol)加入到反应瓶中，二氧六环(160mL)溶解，加入(三丁基锡)甲醇(6.5g，20.3mmol)和氯[(4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽)-2-(2-氨基联苯)]钯(II)(0.75g，0.85mmol)，氩气保护，油浴加热80℃下，反应6小时。反应结束后，浓缩，抽滤，滤饼用甲基叔丁基醚洗涤，得标题化合物。ESI-MS m/z:209.1[M+H]⁺。

步骤6：5-氟-2-甲基-3-氧代-3,4-二氢喹啉-6-甲醛的制备

将8-氟-7-(羟甲基)-3-甲基喹啉-2(1H)-酮(1g,4.8mmol)加入到单颈烧瓶中，二氯甲烷(100mL)溶解，分批加入戴斯-马丁氧化剂(3.1g,7.2mmol)，室温反应过夜。反应结束后，浓缩反应液，柱层析纯化得标题化合物。ESI-MS m/z:207.1[M+H]⁺。

步骤7：5-溴-6-氟吡啶甲酸甲酯的制备

将5-溴吡啶甲酸甲酯(5g,23mmol)，氟化银(10.1g,69mmol)加入到单颈烧瓶中，乙腈(60mL)溶解，室温反应24小时。反应完全，反应液过滤，滤液中加入氯化铵饱和溶液，析出固体杂质，过滤除去固体杂质，二氯甲烷萃取，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，柱层析，得标题化合物。ESI-MS m/z:233.9,235.9[M+H]⁺。

步骤8：1'-(叔丁基羰基)-2-氟-3',6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1',6(2'H)-羧酸甲酯的制备

将5-溴-6-氟吡啶甲酸甲酯(2.1g,8.97mmol)，4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯甲酸-2-基)-3,6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(3.08g,9.96mmol)，[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物(0.729g,0.996mmoL)、碳酸钾(4.13g，29.88mmol)加入到三颈烧瓶中，加入二氧六环(60mL)及水(12mL)溶解。油浴90℃下反应2小时。反应结束后，恢复至室温，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得标题化合物。ESI-MS m/z:337.2[M+H]⁺。

步骤9：2-氟-6-(N-甲基甲酰基)-3',6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1'(2'H)-羰基叔丁酯的制备

将1'-(叔丁基羰基)-2-氟-3'，6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1',6(2'H)-羧酸甲酯(0.2g,0.6mmol)溶于甲胺溶液(33％,20mL)中，室温反应4小时，反应完全后减压浓缩，柱层析纯化得标题化合物。ESI-MS m/z:336.2[M+H]⁺。

步骤10：2-氟-N-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺的制备

将2-氟-6-(N-甲基甲酰基)-3',6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1'(2'H)-羰基叔丁酯(0.2g,0.6mmol)加入到单口瓶中，无水二氯甲烷(5mL)溶解，加入三氟乙酸(1mL)，室温反应2小时。反应完全，减压浓缩，得标题化合物。ESI-MS m/z:236.1[M+H]⁺。

步骤11：2-氟-1'-((5-氟-2-甲基-3-氧代-3,4-二氢喹啉-6-基)甲基)-N-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺的制备

将5-氟-2-甲基-3-氧代-3,4-二氢喹啉-6-甲醛(315mg,1.53mmol)和2-氟-N-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺(300mg,1.28mmol)加入到三颈烧瓶中，无水二氯甲烷(10mL)溶解，加入钛酸四异酯(727mg,2.56mmol)，氮气保护下室温反应2小时，然后加入醋酸(153mg,2.56mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(1.1g,4mmol)，室温反应1小时，反应结束后，抽滤，滤液浓缩，柱层析纯化得标题化合物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.43(s,1H),8.63(d,J＝4.3Hz,1H),8.07(t,J＝8.7Hz,1H),7.91(d,J＝7.3Hz,1H),7.52(d,J＝8.2Hz,1H),7.31(t,J＝7.5Hz,1H),6.24(s,1H),3.76(s,2H),3.17(s,2H),2.79(d,J＝4.4Hz,3H),2.70(s,2H),2.50–2.47(m,2H),2.42(s,3H).ESI-MS m/z:426.2[M+H]⁺。

实施例2：N-环丙基-2-氟-1'-((5-氟-2-甲基-3-氧代-3,4-二氢喹啉-6-基)甲基)-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺

按照实施例1的方法，将2-氟-N-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺替换为2-氟-N-环丙基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺进行反应即可得标题化合物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ10.24(s,1H),8.58(d,J＝4.3Hz,1H),8.11–8.01(m,1H),7.90(d,J＝7.3Hz,1H),7.52(d,J＝8.2Hz,1H),7.31(t,J＝7.5Hz,1H),6.23(s,1H),3.75(s,2H),3.17(s,2H),2.88(d,J＝4.9Hz,1H),2.69(s,2H),2.51(s,2H),2.42(s,3H),0.67(s,4H).ESI-MS m/z:452.2[M+H]⁺。

实施例3：N-(环丙基甲基)-1'-((5-氟-2-甲基-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-6-基)甲基)-2-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺

步骤1：1'-(叔丁基)6-甲基2-甲基-3',6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1',6(2'H)-二羧酸酯的制备

将5-溴-6-甲基吡啶甲酸甲酯(3.0g,13mmol)、4-BOC氨基-1-环己烯硼酸频哪醇酯(4.86g,15.72mmol)、[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(0.95g,1.3mmol)和碳酸铯(12.86g,39mmol)加入到1,4-二氧六环(100mL)中，氩气保护，90℃加热搅拌反应3小时。反应完毕后，抽滤，滤液浓缩。柱层析纯化得标题化合物，ESI-MS m/z:333.2[M+H]⁺。

步骤2：6-((环丙基甲基)氨基甲酰基)-2-甲基-3',6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1'(2'H)-羧酸叔丁酯的制备

将1'-(叔丁基)6-甲基2-甲基-3',6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1',6(2'H)-二羧酸酯(2.0g,6.0mmol)称量于密封管中，加入环丙基甲基胺(12mL)后，在氩气保护下，80℃加热搅拌反应4小时。反应完毕后，浓缩，柱层析纯化得标题化合物，ESI-MS m/z:372.3[M+H]⁺。

步骤3：N-(环丙基甲基)-2-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺的制备

将6-((环丙基甲基)氨基甲酰基)-2-甲基-3',6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1'(2'H)-羧酸叔丁酯(1.0g，2.7mmol)溶解于无水二氯甲烷(4mL)中，在冰浴下加入盐酸-二氧六环(4mL)，室温搅拌3小时。反应完毕后，浓缩旋干，得标题化合物，ESI-MS m/z:272.2[M+H]⁺。

步骤4：N-(环丙基甲基)-1'-((5-氟-2-甲基-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-6-基)甲基)-2-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺的制备

将5-氟-2-甲基-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-6-甲醛(0.23g,1.11mmol)溶解于无水二氯甲烷(10mL)中，加入N-(环丙基甲基)-2-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺(200mg,0.74mmol)，乙酸(0.05mL,0.873mmol)，冰浴条件下加入三乙酰氧基硼氢化钠(235.2mg,1.11mmol)，室温搅拌1小时。反应完毕后，加水淬灭，二氯甲烷(10mL)萃取，有机层后用饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥后，减压浓缩，得标题化合物。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.09(s,1H),8.14(s,1H),7.98(d,J＝8.0Hz,1H),7.59(s,1H),7.53(d,J＝8.0Hz,1H),7.40(s,1H),5.64(s,1H),3.84(s,2H),3.33(t,J＝4.0Hz,2H),3.23(s,2H),2.78(s,2H),2.61(s,3H),2.57(s,3H),2.41(s,2H),1.12-1.02(m,1H),0.55(d,J＝4.0Hz,2H),0.30(d,J＝4.0Hz,2H).ESI-MS m/z:462.3[M+H]⁺。

实施例4：1’-(5-氟-2-甲基-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-6-基)甲基)-N,2-二甲基-1’,2’,3’,6’-四氢-[3,4’-联吡啶]-6-甲酰胺

步骤1：(4-溴-3-氟-2-硝基苯基)丙氨酸甲酯的制备

将1-溴-2,4-二氟-3-硝基苯(25g,105mmol)和DL-丙氨酸甲酯盐酸盐(14.6g,105mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(100ml)。室温搅拌下，缓慢加入N,N-二异丙基乙胺(40.7g,315mmol)，滴加完毕后反应过夜。反应结束后，饱和氯化钠洗涤，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，干燥后减压浓缩后柱层析纯化得到标题化合物，ESI-MS m/z:321.0,323.0[M+H]⁺。

步骤2：(2-氨基-4-溴-3-氟苯基)丙氨酸甲酯的制备

将(4-溴-3-氟-2-硝基苯基)丙氨酸甲酯(5g,15.57mmol)，氯化铵(6.7g,124.6mmol)溶于甲醇(60ml)中，冰浴搅拌下分批加入锌粉(8.14g,124.57mmol)，加入完毕后，撤去冰浴，室温下反应搅拌过夜。反应结束后，将反应液减压浓缩，用二氯甲烷/甲醇(4:1)洗涤固体，抽滤，将滤液浓缩得到标题化合物，ESI-MS m/z:291.0,293.0[M+H]⁺。

步骤3：7-溴-8-氟-3-甲基-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮的制备

将(2-氨基-4-溴-3-氟苯基)丙氨酸甲酯(4.5g,15.46mmol)溶于甲醇(15ml)中，室温搅拌下缓慢加入盐酸/1,4-二氧六环(1.16mL,4.6mmol)，加入完毕后室温下反应2小时。反应结束后，将反应液浓缩，柱层析纯化得标题化合物，ESI-MS m/z:259.0,261.0[M+H]⁺。

步骤4：7-溴-8-氟-3-甲基喹喔啉-2(1H)-酮的制备

将7-溴-8-氟-3-甲基-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮(3g,11.58mmol)溶于二氯甲烷(25ml)中，室温搅拌下加入2,3-二氯-5,6-二氰基苯醌(3.15g,12.9mmol)，加入完毕后室温下反应2小时。反应结束后将反应液浓缩，加入饱和碳酸氢钠溶液，抽滤后用水洗涤滤饼，滤饼干燥后得标题化合物，ESI-MS m/z:257.0,259.0[M+H]⁺。

步骤5：8-氟-7-(羟甲基)-3-甲基喹喔啉-2(1H)-酮的制备

将7-溴-8-氟-3-甲基喹喔啉-2(1H)-酮(1.5g,5.835mmol)、氯(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)[2-(2'-氨基-1,1'-联苯)]钯(229.56mg,0.292mmol)和(三丁基锡)甲醇(2.247g,7mmol)溶于1,4-二氧六环(30ml)中，氮气保护体系，80℃反应7小时。反应结束后将反应液浓缩，依次用石油醚和甲基叔丁基醚洗涤，干燥后得标题化合物，ESI-MS m/z:209.1[M+H]⁺。

步骤6：5-氟-2-甲基-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-6-甲醛的制备

将8-氟-7-(羟甲基)-3-甲基喹喔啉-2(1H)-酮(500mg,2.4mmol)和戴斯-马丁氧化剂(1.527g,3.6mmol)溶于二氯甲烷(10ml)中，室温下反应过夜。反应结束后，饱和氯化钠洗涤，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得到得标题化合物，ESI-MS m/z:207.1[M+H]⁺。

步骤7：1’-(叔丁基)6-甲基2-甲基-3’,6’二氢-[3,4’-联吡啶]-1’,6(2’H)-二羧酸酯的制备

将5-溴-6-甲基吡啶甲酸甲酯(1.5g,6.5mmol)、N-叔丁氧羰基-1,2,5,6-四氢吡啶-4-硼酸频哪醇酯(3.0g,9.8mmol)、[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(476mg,0.66mmol)和碳酸钾(2.7g,18.6mmol)加入到二氧六环(30mL)中，氮气保护体系，110℃加热反应过夜。反应结束后，抽滤，浓缩滤液，柱层析得标题化合物，ESI-MS m/z:333.1[M+H]⁺。

步骤8：2-甲基-6-(甲基氨甲酰)-3’,6’-二氢-[3,4’-联吡啶]-1’(2’H)-羧酸叔丁酯的制备

将1’-(叔丁基)6-甲基2-甲基-3’,6’-二氢-[3,4’-联吡啶]-1’,6(2’H)-二羧酸酯(3.2g,10.0mmol)溶于甲醇(35ml)，加入甲胺水溶液(7.8g,100mmol)，室温下反应3小时。反应结束后，将反应液浓缩，加入饱和氯化钠溶液洗涤，二氯甲烷萃取，无水硫酸钠干燥，浓缩后柱层析得到标题化合物，ESI-MS m/z:332.1[M+H]⁺。

步骤9：N,2-二甲基-1’,2’,3’,6’-四氢-[3,4’-联吡啶]-6-甲酰胺的制备

将2-甲基-6-(甲基氨甲酰)-3’,6’-二氢-[3,4’-联吡啶]-1’(2’H)-羧酸叔丁酯(280mg,0.88mmol)溶于盐酸/1,4-二氧六环(4ml)，室温下搅拌反应。反应结束后浓缩得到标题化合物，ESI-MS m/z:232.2[M+H]⁺。

步骤10：1’-(5-氟-2-甲基-3-氧代-3,4-二氢喹啉-6-基)甲基)-N,2-二甲基-1’,2’,3’,6’-四氢-[3,4’-联吡啶]-6-甲酰胺的制备

将5-氟-2-甲基-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-6-甲醛(196mg,0.95mmol)、N,2-二甲基-1’,2’,3’,6’-四氢-[3,4’-联吡啶]-6-甲酰胺(200mg,0.87mmol)和醋酸(90mg,1.64mmol)溶于二氯甲烷(4ml)，冰浴下加入三乙酰氧基硼氢化钠(183mg,0.87mmol)，加入完毕后撤去冰浴，室温下反应2小时。反应结束后将反应液倒入水中淬灭，二氯甲烷萃取，无水硫酸钠干燥后浓缩柱层析得到目标产物。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.49(s,1H),8.04(s,1H),7.97(d,J＝7.7Hz,1H),7.59(d,J＝8.4Hz,1H),7.52(d,J＝7.8Hz,1H),7.39(t,J＝7.8Hz,1H),5.64(s,1H),3.84(s,2H),3.23(s,2H),3.03(d,J＝5.0Hz,3H),2.78(t,J＝5.3Hz,2H),2.61(s,3H),2.53(s,3H),2.41(s,2H).ESI-MS m/z:422.2[M+H]⁺。

实施例5：N-环丙基-1’-(5-氟-2-甲基-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-6-基)甲基)-2-二甲基-1’,2’,3’,6’-四氢-[3,4’-联吡啶]-6-甲酰胺

步骤1：(4-溴-3-氟-2-硝基苯基)丙氨酸甲酯的制备

将1-溴-2,4-二氟-3-硝基苯(25g,105mmol)和DL-丙氨酸甲酯盐酸盐(14.6g,105mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(100ml)。室温搅拌下，缓慢加入N,N-二异丙基乙胺(40.7g,315mmol)，滴加完毕后反应过夜。反应结束后，饱和氯化钠洗涤，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，干燥后浓缩后柱层析纯化得到标题化合物，ESI-MS m/z:321.0,323.0[M+H]⁺。

步骤2：(2-氨基-4-溴-3-氟苯基)丙氨酸甲酯的制备

将(4-溴-3-氟-2-硝基苯基)丙氨酸甲酯(5g,15.6mmol)，氯化铵(6.7g,124.6mmol)溶于甲醇(60ml)中，冰浴搅拌下分批加入锌粉(8.14g,124.6mmol)，加入完毕后，撤去冰浴，室温下反应搅拌过夜。反应结束后，将反应液减压浓缩，用二氯甲烷/甲醇(4:1)洗涤固体，抽滤，将滤液浓缩得到标题化合物，ESI-MS m/z:291.0,293.0[M+H]⁺。

步骤3：7-溴-8-氟-3-甲基-3,4-二氢喹喔啉-2(1H)-酮的制备

步骤4：7-溴-8-氟-3-甲基喹喔啉-2(1H)-酮的制备

步骤5：8-氟-7-(羟甲基)-3-甲基喹喔啉-2(1H)-酮的制备

将7-溴-8-氟-3-甲基喹喔啉-2(1H)-酮(1.5g,5.835mmol)、氯(2-二环己基膦基-2’,4’,6’-三异丙基-1,1’-联苯基)[2-(2’-氨基-1,1’-联苯)]钯(229.56mg,0.292mmol)和(三丁基锡)甲醇(2.247g,7mmol)溶于1,4-二氧六环(30ml)中，氮气保护体系，80℃反应7小时。反应结束后将反应液浓缩，依次用石油醚和甲基叔丁基醚洗涤，干燥后得标题化合物，ESI-MS m/z:209.1[M+H]⁺。

步骤6：5-氟-2-甲基-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-6-甲醛的制备

将8-氟-7-(羟甲基)-3-甲基喹喔啉-2(1H)-酮(500mg,2.4mmol)和戴斯-马丁氧化剂(1.527g,3.6mmol)溶于二氯甲烷(10ml)中，室温下反应过夜。反应结束后饱和氯化钠洗涤，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得标题化合物，ESI-MS m/z:207.1[M+H]⁺。

将5-溴-6-甲基吡啶甲酸甲酯(1.5g,6.5mmol)、N-叔丁氧羰基-1,2,5,6-四氢吡啶-4-硼酸频哪醇酯(3.0g,9.8mmol)、[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(476mg,0.66mmol)和碳酸钾(2.7g,18.6mmol)加入到1,4-二氧六环(30mL)中，氮气保护体系，110℃反应过夜。反应结束后，抽滤，浓缩滤液，柱层析得标题化合物，ESI-MS m/z:333.1[M+H]⁺。

步骤8：2-甲基-6-(环丙基氨甲酰基)-3’,6’-二氢-[3,4’联吡啶]-1’(2’H)-羧酸叔丁酯的制备

将1’-(叔丁基)6-甲基2-甲基-3’,6’-二氢-[3,4’-联吡啶]-1’,6(2’H)-二羧酸酯(2.3g,6.90mmol)溶于环丙胺(3ml,43.4mmol)，置于封管内，60℃搅拌过夜。反应结束后将反应液浓缩柱层析得到标题化合物，ESI-MS m/z:358.2[M+H]⁺。

步骤9：N-环丙基-2-甲基-1’,2’,3’,6’-四氢-[3,4’-联吡啶]-6-甲酰胺的制备

将2-甲基-6-(环丙基氨甲酰基)-3’,6’-二氢-[3,4’联吡啶]-1’(2’H)-羧酸叔丁酯(900mg,2.5mmol)溶于二氯甲烷(5ml)，室温下加入盐酸/1,4-二氧六环(2.5ml,10mmol)，加入完毕后室温下搅拌6小时。反应结束后，将反应液浓缩得到标题化合物，ESI-MS m/z:258.2[M+H]⁺。

步骤10：N-环丙基-1’-(5-氟-2-甲基-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-6-基)甲基)-2-二甲基-1’,2’,3’,6’-四氢-[3,4’-联吡啶]-6-甲酰胺的制备

将5-氟-2-甲基-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-6-甲醛(170mg,0.83mmol)、N-环丙基-2-甲基-1’,2’,3’,6’-四氢-[3,4’-联吡啶]-6-甲酰胺(193mg,0.75mmol)和醋酸(10mg,0.16mmol)溶于二氯甲烷(5ml)，冰浴下加入三乙酰氧基硼氢化钠(175mg,0.83mmol)，加入完毕后撤去冰浴，室温下反应2小时。反应结束后将反应液倒入水中淬灭，二氯甲烷萃取，无水硫酸钠干燥后浓缩柱层析得到目标产物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.45(s,1H),8.45(d,J＝3.7Hz,1H),7.78(d,J＝7.8Hz,1H),7.64(d,J＝7.8Hz,1H),7.52(d,J＝8.1Hz,1H),7.32(t,J＝7.4Hz,1H),5.69(s,1H),3.77(s,2H),3.13(s,2H),2.87(d,J＝3.3Hz,1H),2.71(s,2H),2.53(s,3H),2.42(s,3H),2.34(s,2H),1.24(s,2H),0.66(s,2H).ESI-MS m/z:448.2[M+H]⁺。

实施例6：1'-((2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹啉-6-基)甲基)-2-氟-N-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺

步骤1：2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹啉-6-甲醛的制备

将原料2-氨基丙酸乙酯替换为2-氨基丁酸甲酯，按照实施例1步骤1-6进行合成，可得标题化合物。ESI-MS m/z:221.1[M+H]⁺。

步骤2：1'-((2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹啉-6-基)甲基)-2-氟-N-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺的制备

以2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹啉-6-甲醛、2-氟-N-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺(实施例1，步骤10产物)为原料，按照实施例1步骤11进行合成，可得标题化合物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.22(s,1H),8.62(s,1H),8.13–8.04(m,1H),7.91(d,J＝6.6Hz,1H),7.55(d,J＝7.6Hz,1H),7.31(s,1H),6.24(s,1H),3.76(s,2H),3.17(s,2H),2.81(d,J＝14.7Hz,5H),2.70(s,2H),2.54(s,2H),1.28–1.15(m,3H).ESI-MSm/z:440.2[M+H]⁺。

实施例7：2-(二氟甲基)-1'-(2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹啉-6-基)甲基)-N-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺

步骤1：5-溴-6-甲醛基吡啶甲酸甲酯的制备

将5-甲基-6-溴-甲酸甲酯(2g,8.63mmol)加入到单颈烧瓶中，二氧六环(20mL)溶解，加入二氧化硒(1.5g,13.52mmol)，110℃加热反应16小时。反应完全，将反应液过滤，用二氯甲烷洗涤滤饼，减压浓缩，纯化得标题化合物。ESI-MS m/z:244.1,246.1[M+H]⁺。

步骤2：5-溴-6-(二氟甲基)吡啶甲酸甲酯的制备

将5-溴-6-甲醛基吡啶甲酸甲酯(1.65g,6.76mmol)加入到三颈烧瓶中，二氯甲烷(20mL)溶解，在0℃下滴加二乙胺基三氟化硫(1.8mL)，反应1.5小时，室温再反应4小时。反应完全后，加入饱和碳酸氢钠溶液(20mL)淬灭，二氯甲烷萃取两次，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩得标题化合物。ESI-MS m/z:266.2,268.2[M+H]⁺。

步骤3：1'-(叔丁氧羰基)-2-(二氟甲基)-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-羧酸的制备

将5-溴-6-(二氟甲基)吡啶甲酸甲酯(300mg,1.13mmol)、N-叔丁氧羰基-1,2,5,6-四氢吡啶-4-硼酸频哪醇酯(523mg,1.70mmol)、[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(90mg,0.11mmol)、碳酸钾(500mg,3.62mmol)加入到三颈烧瓶中，二氧六环(10mL)溶解，加水2mL，95℃下反应6小时。反应结束后，将反应液冷却至室温，乙酸乙酯萃取，减压浓缩，柱层析得标题化合物，ESI-MS m/z:355.2[M+H]⁺。

步骤4：2-(二氟甲基)-6-(甲基甲酰氨)-3',6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1'(2'H)-羧酸叔丁酯

将1'-(叔丁氧羰基)-2-(二氟甲基)-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-羧酸(394mg,1.11mmol)、甲胺盐酸盐(300mg,4.44mmol)和1-羟基苯并三唑(150mg,1.11mmol)加入到单口瓶中，无水二氯甲烷(20mL)溶解，再加入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(800mg,4.44mmol)和三氟乙酸(2mL)，30℃下反应9小时。反应结束后，加入40mL水淬灭，二氯甲烷萃取，饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，柱层析得标题化合物。ESI-MS m/z:368.2[M+H]⁺。

步骤5：2-(二氟甲基)-N-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺的制备

将2-氟-N-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺(300mg,0.6mmol)加入到单口瓶中，无水二氯甲烷(4mL)溶解，加入盐酸/二氧六环溶液(2mL)，反应1小时，浓缩，得标题化合物，ESI-MS m/z:268.2[M+H]⁺。

步骤6：2-(二氟甲基)-1'-(2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹啉-6-基)甲基)-N-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺的制备

将称取的实施例6步骤1产物7-(溴甲基)-3-乙基-8-氟喹诺酮-2(1H)-酮(110mg,0.387mmol)和2-(二氟甲基)-N-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺(300mg,0.91mmol)加入到单颈烧瓶中，乙腈(10mL)溶解，加入N,N-二异丙基乙胺(250mg,1.935mmol)，70℃反应1小时，反应完全后，减压浓缩，柱层析得标题化合物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.45(s,1H),8.56(s,1H),8.10(d,J＝7.4Hz,1H),7.99(d,J＝7.1Hz,1H),7.56(d,J＝7.5Hz,1H),7.33(s,1H),7.00(t,1H),5.72(s,1H),3.78(s,2H),3.15(s,2H),2.85(s,5H),2.73(s,2H),2.41(s,2H),1.22–1.15(m,3H).ESI-MS m/z:472.2[M+H]⁺。

实施例8：N-环丙基-1'-((2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹啉-6-基)甲基)-2-氟-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺

以实施例2中的2-氟-N-环丙基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺、实施例6中的2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹啉-6-甲醛为原料，按照实施例1步骤11进行合成，可得标题化合物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.45(s,1H),8.59(d,J＝3.8Hz,1H),8.17–7.99(m,1H),7.90(d,J＝7.5Hz,1H),7.55(d,J＝7.8Hz,1H),7.32(d,J＝6.7Hz,1H),6.23(s,1H),3.76(s,2H),3.17(s,2H),2.87(s,1H),2.82(d,J＝7.3Hz,2H),2.70(s,2H),2.53(s,2H),1.26–1.19(m,3H),0.67(s,4H).ESI-MS m/z:466.2[M+H]⁺。

实施例9：5-(6-((2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹啉-6-基)甲基)-2,6-二氮螺环[3.3]庚烷-2-基)-N,6-二甲基吡啶酰胺

步骤1：2-(4-溴-3-氟-2-硝基苯)氨基)丁酸甲酯的制备

将1-溴-2,4-二氟-3-硝基苯(5g,21mmol)和2-氨基丁酸甲酯(3.26g,21mmol)加入到圆底烧瓶中，用N,N-二甲基甲酰胺(50mL)溶解后，滴加入二异丙基乙基胺(8.13g,63mmol)，于室温下反应过夜。反应结束后，饱和氯化钠洗涤，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，柱层析纯化得标题化合物，ESI-MS m/z:335.1,337.1[M+H]⁺。

步骤2：2-(2-氨基-4-溴-3-氟苯基)氨基)丁酸甲酯的制备

将2-(4-溴-3-氟-2-硝基苯)氨基)丁酸甲酯(4.2g,12.57mmol)、锌粉(8.22g,125.7mmol)和氯化铵(8.07g,150mmol)加入到圆底烧瓶中，溶解于无水甲醇(40mL)，室温下搅拌反应4小时。反应结束后，过滤，洗涤，干燥得标题化合物粗品，ESI-MS m/z:305.1,307.1[M+H]⁺。

步骤3：7-溴-3-乙基-8-氟-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮的制备

将2-(2-氨基-4-溴-3-氟苯基)氨基)丁酸甲酯(4.1g,13.49mmol)溶解于无水甲醇(40mL)中，缓慢滴加盐酸/二氧六环(13.5mL,53.95mmol)，于室温下反应2小时。反应结束后，冰浴下滴加入饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，浓缩得标题化合物粗品，ESI-MS m/z:273.1,275.1[M+H]⁺。

步骤4：7-溴-3-乙基-8-氟喹喔啉-2(1H)-酮的制备

将7-溴-3-乙基-8-氟-3,4-二氢喹啉-(1H)-酮(4g,14.7mmol)和2,3-二氯-5,6-二氰基苯醌(4g,17.64mmol)加入到圆底烧瓶中，溶解于无水二氯甲烷(40mL)中，室温下反应1小时。反应结束后，浓缩反应液，用石油醚洗涤，过滤，干燥滤饼得标题化合物粗品，ESI-MSm/z:271.0,273.0[M+H]⁺。

步骤5：3-乙基-8-氟-7-(羟甲基)喹喔啉-2(1H)-酮的制备

将7-溴-3-乙基-8-氟喹喔啉-2(1H)-酮(3.9g,14.4mmol)、氯(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)[2-(2'-氨基-1,1'-联苯)]钯(II)(565mg,0.72mmol)和(三丁基锡)甲醇(5.546g,17.28mmol)加入到圆底烧瓶中，无水1,4-二氧六环(40mL)溶解，于氮气保护下80℃反应5小时。反应结束后，浓缩反应液，石油醚/二氯甲烷(100/1)洗涤，过滤，干燥得标题化合物粗品，ESI-MS m/z:223.1[M+H]⁺。

步骤6：7-(溴甲基)-3-乙基-8-氟喹喔啉-2(1H)-酮的制备

将3-乙基-8-氟-7-(羟甲基)喹喔啉-2(1H)-酮(300mg,1.32mmol)和三苯基膦(1.06g,4.05mmol)加入到圆底烧瓶中，溶解于无水二氯甲烷(3mL)中，冰水浴下缓慢滴加四溴化碳(1.56g,4.725mmol)，后转移至室温下反应2小时。反应结束后，浓缩柱层析得标题化合物粗品，ESI-MS m/z:285.1,287.1[M+H]⁺。

步骤7：6-(6-(甲氧羰基)-2-甲基吡啶-3-基)-2,6-二氮螺环[3.3]庚烷-2-羧酸叔丁酯的制备

将5-溴-6-甲基吡啶甲酸甲酯(3.0g,13.04mmol)、2,6-二氮螺环[3.3]庚烷-2-羧酸叔丁酯(4.76g,19.56mmol)、甲磺酸(2-二环己基膦基-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯基)(2-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(1.09g,1.304mmol)以及碳酸铯(12.75g,39.12mmol)溶解于无水1,4-二氧六环(250mL)中，氮气保护反应体系，110℃加热回流反应过夜。反应结束后，过滤，滤液浓缩，柱层析得标题化合物，ESI-MS m/z:348.2[M+H]⁺。

步骤8：6-(2-甲基-6-(甲基氨甲酰)吡啶-3-基)-2,6-二氮螺环[3.3]庚烷-2-羧酸叔丁酯的制备

将6-(6-(甲氧羰基)-2-甲基吡啶-3-基)-2,6-二氮螺环[3.3]庚烷-2-羧酸叔丁酯(2g,5.76mmol)溶解于无水甲醇(15mL)中，滴加入甲胺(40％)水溶液(13.36mL,115.13mmol)，40℃加热反应5小时。反应结束后，浓缩反应液，得标题化合物粗品，ESI-MSm/z:347.2[M+H]⁺。

步骤9：N,6-二甲基-5-(2,6-二氮螺环[3.3]庚烷-2-基)吡啶酰胺的制备

将6-(2-甲基-6-(甲基氨甲酰)吡啶-3-基)-2,6-二氮螺环[3.3]庚烷-2-羧酸叔丁(0.1g,0.29mmol)溶解于无水二氯甲烷(2mL)中，冰浴下滴加入三氟乙酸(0.33g,2.9mmol)，滴毕，转移至室温搅拌反应1小时。反应结束后，浓缩反应液，得标题化合物粗品，ESI-MS m/z:247.2[M+H]⁺。

步骤10：5-(6-((2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹啉-6-基)甲基)-2,6-二氮螺环[3.3]庚烷-2-基)-N,6-二甲基吡啶酰胺的制备

将N,6-二甲基-5-(2,6-二氮螺环[3.3]庚烷-2-基)吡啶酰胺(181mg,0.737mmol)加入到圆底烧瓶中，溶解于无水乙腈(3mL)。冰浴下滴加N,N-二异丙基乙基胺(259.3mg,2.01mmol)，搅拌10分钟。接着加入7-(溴甲基)-3-乙基-8-氟喹喔啉-2(1H)-酮(190mg,0.67mmol)，并转移至50℃下反应2小时。反应结束后，浓缩，柱层析得标题化合物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.42(s,1H),8.26(d,J＝4.5Hz,1H),7.68(d,J＝8.2Hz,1H),7.53(d,J＝8.3Hz,1H),7.26-7.22(m,1H),6.80(d,J＝8.3Hz,1H),4.09(s,4H),3.68(s,2H),3.37(s,4H),2.87-2.81(m,2H),2.78(d,J＝4.5Hz,3H),2.41(s,3H),1.22(t,J＝7.3Hz,3H)。ESI-MSm/z:451.2[M+H]⁺。

实施例10：1'-((2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-6-基)甲基)-N-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺

步骤1：2-(4-溴-3-氟-2-硝基苯)氨基)丁酸甲酯的制备

步骤2：2-(2-氨基-4-溴-3-氟苯基)氨基)丁酸甲酯的制备

步骤3：7-溴-3-乙基-8-氟-3,4-二氢喹啉-2(1H)-酮的制备

步骤4：7-溴-3-乙基-8-氟喹喔啉-2(1H)-酮的制备

步骤5：3-乙基-8-氟-7-(羟甲基)喹喔啉-2(1H)-酮的制备

将7-溴-3-乙基-8-氟喹喔啉-2(1H)-酮(3.9g,14.4mmol)、氯(2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯基)[2-(2'-氨基-1,1'-联苯)]钯(II)(565mg,0.72mmol)和(三丁基锡)甲醇(5.546g,17.28mmol)加入到圆底烧瓶中，无水1,4-二氧六环(40mL)溶解，氮气保护下80℃反应5小时。反应结束后，浓缩反应液，石油醚/二氯甲烷(100:1＝v:v)洗涤，过滤，干燥得标题化合物粗品，ESI-MS m/z:223.1[M+H]⁺。

步骤6：7-(溴甲基)-3-乙基-8-氟喹喔啉-2(1H)-酮的制备

步骤7：1'-(叔丁基)6-甲基3',6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1',6(2'H)-二羧酸酯的制备

将5-溴吡啶-2-羧酸甲酯(1.73g,8mmol)、N-叔丁氧羰基-1,2,5,6-四氢吡啶-4-硼酸频哪醇酯(3.7g,12mmol)、四三苯基膦钯(277mg,0.24mmol)和碳酸钾(3.31g,24mmol)加入到无水二氧六环(17mL)中，氮气保护，110℃加热反应过夜。反应结束后，抽滤，滤液浓缩，柱层析得标题化合物，ESI-MS m/z:319.2[M+H]⁺。

步骤8：6-(甲基氨基甲酰基)-3',6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1'(2'H)-羧酸叔丁酯的制备

将1'-(叔丁基)6-甲基3',6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1',6(2'H)-二羧酸酯(1.05g,3.3mmol)加入反应瓶中，加入甲胺-乙醇溶液(30％,13mL)，于70℃反应过夜。反应结束后，浓缩反应液，得标题化合物粗品，ESI-MS m/z:318.2[M+H]⁺。

步骤9：N-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺的制备

将6-(甲基氨基甲酰基)-3',6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1'(2'H)-羧酸叔丁酯(0.76g,3.3mmol)溶解于无水二氯甲烷(5mL)中，加入三氟乙酸(2mL)，室温搅拌2小时。反应结束后，浓缩反应液，得标题化合物粗品，ESI-MS m/z:218.2[M+H]⁺。

步骤10：1'-((2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-6-基)甲基)-N-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺的制备

将N-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺(160mg,0.73mmol)加入圆底烧瓶中，溶解于无水乙腈(2mL)中，冰水浴下缓慢滴加N,N-二异丙基乙基胺(259mg,2.01mmol)，搅拌10分钟后，加入7-(溴甲基)-3-乙基-8-氟喹喔啉-2(1H)-酮(190mg,0.67mmol)，转移至50℃下反应2.5小时。反应结束后，过滤，水、甲醇洗涤滤饼，干燥得标题化合物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.04(s,1H),8.74-8.68(m,2H),7.97-7.91(m,2H),7.55(d,J＝8.2Hz,1H),7.33-7.29(m,1H),6.41(s,1H),3.76(s,2H),3.19-3.14(m,2H),2.89-2.85(m,2H),2.82-2.76(m,3H),2.75-2.68(m,2H),2.60-2.51(m,2H),1.22(t,J＝7.2Hz,3H).ESI-MS m/z:422.2[M+H]⁺。

实施例11：N-环丙基-1'-((2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-6-基)甲基)-2-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺

将5-溴-6-甲基吡啶甲酸甲酯(3g,13mmol)、4-BOC氨基-1-环己烯硼酸频哪醇酯(4.86g,15.72mmol)、[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(0.95g,1.3mmol)和碳酸铯(12.86g,39mmol)加入到二氧六环(100mL)中，氩气保护，90℃加热搅拌反应3小时。反应完毕后，抽滤，滤液浓缩。柱层析纯化得标题化合物，ESI-MS m/z:333.2[M+H]⁺。

步骤2：6-(环丙基氨基甲酰基)-2-甲基-3',6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1'(2'H)-羧酸叔丁酯的制备

将1'-(叔丁基)6-甲基2-甲基-3',6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1',6(2'H)-二羧酸酯(2.30g,6.92mmol)溶于环丙胺，置于封管，60℃中搅拌过夜。反应完全后，旋干溶剂，制砂，柱层析纯化得标题化合物，ESI-MS m/z:358.2[M+H]⁺。

步骤3：N-环丙基-2-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺的制备

将6-(环丙基氨基甲酰基)-2-甲基-3',6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1'(2'H)-羧酸叔丁酯(900mg,2.52mmol)溶于二氯甲烷，加入盐酸-二氧六环，室温搅拌6小时。反应完全后，旋干溶剂，柱层析纯化得标题化合物，ESI-MS m/z:258.2[M+H]⁺。

步骤4：N-环丙基-1'-((2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-6-基)甲基)-2-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺的制备

将N-环丙基-2-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺(59mg,0.23mmol)和2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-6-甲醛(50mg,0.19mmol)溶于二氯甲烷，冰浴条件下加入三乙酰氧基硼氢化钠(84mg,0.39mmol)，室温搅拌3小时。反应完全后，减压抽滤，柱层析纯化得标题化合物。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.06(s,1H),7.97(d,J＝8.0Hz,1H),7.62(d,J＝8.0Hz,1H),7.51(d,J＝8.0Hz,1H),7.38(t,J＝8.0Hz,1H),5.63(s,1H),3.85(s,2H),3.22(s,2H),2.98-2.88(m,3H),2.78(s,2H),2.51(s,3H),2.40(s,2H),1.34(t,J＝8.0Hz,3H),0.87(d,J＝4.0Hz,2H),0.66(s,2H)。ESI-MS m/z:462.3[M+H]⁺。

实施例12：1'-((2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-6-基)甲基)-N,2-二甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺

将5-溴-6-甲基吡啶甲酸甲酯(4.50g,20.83mmol)、4-BOC氨基-1-环己烯硼酸频哪醇酯(7.72g,24.99mmol)、[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(1.52g,2.08mmol)和碳酸铯(20.31g,62.49mmol)加入到1,4-二氧六环(60mL)中，氩气保护，100℃加热搅拌反应3小时。反应完毕后，抽滤，滤液浓缩。柱层析纯化得标题化合物，ESI-MS m/z:333.2[M+H]⁺。

步骤2：2-甲基-6-(甲基氨基甲酰基)-3',6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1'(2'H)-羧酸叔丁酯的制备

将1'-(叔丁基)6-甲基2-甲基-3',6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1',6(2'H)-二羧酸酯(3.19g,10.0mmol)溶于甲醇(35mL)，加入甲胺水溶液(7.76g,40％,100.0mmol)，室温反应，反应结束后，浓缩，加入水和二氯甲烷，萃取，浓缩，柱层析纯化得标题化合物，ESI-MS m/z:332.2[M+H]⁺。

步骤3：N,2-二甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺的制备

将2-甲基-6-(甲基氨基甲酰基)-3',6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1'(2'H)-羧酸叔丁酯(280mg,0.88mmol)加入单口瓶，直接加入氯化氢-二氧六环(10mL,4M)，室温下搅拌，反应结束后，浓缩，得到标题化合物粗品，ESI-MS m/z:232.2[M+H]⁺。

步骤4：1'-((2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-6-基)甲基)-N,2-二甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺的制备

将N,2-二甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺(232mg,1.0mmol)溶于无水二氯甲烷(7.5mL)，加入三乙胺调节pH至8左右，加入2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-6-甲醛(260mg,1.2mmol)，一滴乙酸，室温搅拌半小时，冰浴下加入三乙酰基硼氢化钠(254mg,1.2mmol)，转移至室温，浓缩，柱层析纯化得标题化合物。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ8.05(d,J＝4.0Hz,1H),7.97(d,J＝8.0Hz,1H),7.65(d,J＝8.0Hz,1H),7.52(d,J＝8.0Hz,1H),7.45(t,J＝8.0Hz,1H),5.63(s,1H),3.96(s,2H),3.32(s,2H),3.06–2.94(m,5H),2.89(s,2H),2.53(s,3H),2.47(s,2H),1.35(t,J＝8.0Hz,3H).ESI-MS m/z:436.2[M+H]⁺。

实施例13：N-(环丙基甲基)-1'-((2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-6-基)甲基)-2-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺

将1'-(叔丁基)6-甲基2-甲基-3',6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1',6(2'H)-二羧酸酯(2.0g,6.0mmol)于密封管中，加入环丙基甲基胺(12mL)中，氩气保护，80℃加热搅拌反应4小时。反应完毕后，浓缩。柱层析纯化得标题化合物，ESI-MS m/z:372.3[M+H]⁺。

取6-((环丙基甲基)氨基甲酰基)-2-甲基-3',6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1'(2'H)-羧酸叔丁酯(1.0g，2.7mmol)溶解于无水二氯甲烷(4mL)中，在冰浴下加入盐酸-二氧六环(4mL)，室温搅拌3小时。反应完毕后，直接浓缩旋干，得标题化合物，ESI-MS m/z:272.0[M+H]⁺。

步骤4：N-(环丙基甲基)-1'-((2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-6-基)甲基)-2-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺的制备

取2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-6-甲醛(0.2g，0.91mmol)溶解于无水二氯甲烷(4mL)中，加入N-(环丙基甲基)-2-甲基-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺(166mg，0.61mmol)，一滴乙酸，冰浴条件下加入三乙酰氧基硼氢化钠(192.9mg，0.91mmol)，室温搅拌1小时。反应完毕后，加水淬灭，二氯甲烷(10mL)萃取，有机层后用饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥后，减压浓缩，柱层析纯化得标题化合物。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ9.22(s,1H),8.15(s,1H),7.98(d,J＝8.0Hz,1H),7.63(d,J＝8.0Hz,1H),7.53(d,J＝8.0Hz,1H),7.40(s,1H),5.64(s,1H),3.85(s,2H),3.33(t,J＝4.0Hz,2H),3.24(s,2H),2.99(q,J＝8.0Hz,2H),2.79(s,2H),2.56(s,3H),2.41(s,2H),1.35(t,J＝8.0Hz,3H),1.15-1.01(m,1H),0.55(d,J＝8.0Hz,2H),0.30(d,J＝4.0Hz,2H).ESI-MS m/z:476.3[M+H]⁺。

实施例14：1'-((2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-6-基)甲基)-2-氟-N-(甲基-d3)-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺

步骤1：7-(溴甲基)-3-乙基-8-氟喹诺酮-2(1H)-酮的制备

将化合物3-乙基-8-氟-7-(羟甲基)萘-2(1H)-酮(200mg,0.90mmol)加入到二氯甲烷(20mL)中，加入三苯基膦(708mg,2.7mmol)，氩气置换。在0℃下滴加四溴化碳(1.04g,3.15mmol)，滴毕，室温搅拌1小时。反应结束后，将反应液浓缩，柱层析纯化得标题化合物，ESI-MS m/z:285.2,287.2[M+H]⁺。

步骤2：2-氟-6-((甲基-d3)氨基甲酰基)-3',6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1'(2'H)-羧酸叔丁酯的制备

将氘代甲胺盐酸盐加入到四氢呋喃(10mL)和水(2mL)中，加入氢氧化锂(72mg,2.98mmol)。室温搅拌1小时。加入化合物7-(溴甲基)-3-乙基-8-氟喹诺酮-2(1H)-酮(203mg,0.6mmol)，室温搅拌过夜，反应结束后，浓缩反应液，柱层析纯化得标题化合物，ESI-MS m/z:339.2[M+H]⁺。

步骤3：2-氟-N-(甲基-d3)-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺的制备

将2-氟-6-((甲基-d3)氨基甲酰基)-3',6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1'(2'H)-羧酸叔丁酯(200mg,0.59mmol)加入到二氯甲烷(10mL)中，加入三氟乙酸(337mg,2.96mmol)，室温搅拌过夜，反应结束后，将反应液浓缩，得到标题化合物粗品，ESI-MS m/z:239.2[M+H]⁺。

步骤4：1'-((2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹啉-6-基)甲基)-2-氟-N-(甲基-d3)-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺的制备

将7-(溴甲基)-3-乙基-8-氟喹诺酮-2(1H)-酮(143mg,0.50mmol)、2-氟-N-(甲基-d3)-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺(120mg,0.50mmol)和N,N-二异丙基乙胺(645mg,5.0mmol)加入到乙腈(10mL)中。50℃加热搅拌反应4小时，反应结束后，加入饱和碳酸钾水溶液，二氯甲烷萃取三次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，柱层析纯化得标题化合物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.44(s,1H),8.59(s,1H),8.11-8.03(m,1H),7.91(d,J＝7.5Hz,1H),7.55(d,J＝8.2Hz,1H),7.35-7.28(m,1H),6.24(s,1H),3.76(s,2H),3.31-3.26(m,2H),3.20-3.14(m,2H),2.85-2.79(m,2H),2.72-2.68(m,2H),1.22(t,J＝7.3Hz,3H).ESI-MS m/z:443.2[M+H]⁺。

实施例15：5-(1-((2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹啉-6-基)甲基)哌啶-4-基)-6-氟-N-甲基吡啶酰胺

步骤1：5-(1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-基)-6-氟吡啶甲酸甲酯的制备

将1'-(叔丁基)-6-甲基-2-氟-3',6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1',6(2'H)-二羧酸盐(200mg,0.90mmol)加入到乙醇(100mL)中，加入钯碳(60mg)，氢气置换。室温搅拌过夜反应。反应结束后，硅藻土助滤，滤液浓缩，得到标题化合物粗品，ESI-MS m/z:339.2[M+H]⁺。

步骤2：4-(2-氟-6-(甲基氨甲酰)吡啶-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯的制备

将5-(1-(叔丁氧羰基)哌啶-4-基)-6-氟吡啶甲酸甲酯(200mg)加入到甲胺的乙醇溶液(3mL)中。室温搅拌4小时，反应结束后，反应液浓缩，得到标题化合物粗品，ESI-MS m/z:338.2[M+H]⁺。

步骤3：6-氟-N-甲基-5-(哌啶-4-基)吡啶酰胺的制备

将4-(2-氟-6-(甲基氨甲酰)吡啶-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(200mg,0.59mmol)加入到二氯甲烷(10mL)中，加入三氟乙酸(337mg,2.96mmol)，室温搅拌过夜，反应结束后，反应液浓缩，得到标题化合物粗品，ESI-MS m/z:238.1[M+H]⁺。

步骤4：5-(1-((2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹啉-6-基)甲基)哌啶-4-基)-6-氟-N-甲基吡啶酰胺的制备

将6-氟-N-甲基-5-(哌啶-4-基)吡啶酰胺(140mg,0.59mmol)、7-(溴甲基)-3-乙基-8-氟喹诺酮-2(1H)-酮(338mg,1.19mmol)和N,N-二异丙基乙胺(761mg,5.9mmol)加入到乙腈(10mL)中。50℃加热搅拌反应2小时。反应结束后，加入饱和碳酸钾水溶液，二氯甲烷萃取三次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，柱层析纯化得到标题化合物。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.42(s,1H),8.59(d,J＝4.5Hz,1H),8.06(t,J＝8.5Hz,1H),7.89(d,J＝7.4Hz,1H),7.55(d,J＝8.2Hz,1H),7.29(t,J＝7.4Hz,1H),3.66(s,2H),2.96(d,J＝9.5Hz,2H),2.85-2.75(m,6H),2.16(t,J＝9.9Hz,2H),1.81-1.66(m,4H),1.22(t,J＝7.3Hz,3H).ESI-MS m/z:442.5[M+H]⁺。

实施例16：1'-((2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹啉-6-基)甲基)-2-氟-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺

步骤1：1'-(叔丁氧羰基)-2-氟-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-羧酸的制备

将1'-(叔丁基)-6-甲基-2-氟-3',6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1',6(2'H)-二羧酸盐(400mg,1.18mmol)加入到四氢呋喃(6mL)和水(6mL)的混合溶液中，加入氢氧化锂(114mg，4.76mmol)，室温搅拌过夜。反应结束后，反应液浓缩，加水稀释，乙酸乙酯萃取，水相调pH至3-4，减压浓缩，柱层析纯化得标题化合物，ESI-MS m/z:323.2[M+H]⁺。

步骤2：6-氨基甲酰基-2-氟-3',6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1'(2'H)-羧酸叔丁酯的制备

将1'-(叔丁氧羰基)-2-氟-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-羧酸(226mg,0.7mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3mL)，氩气置换，冷至0℃，依次加入N,N-二异丙基乙胺(180.9mg,1.4mmol)、氯化铵(56mg,1.05mmol)和2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(400mg,1.05mmol)，室温搅拌反应过夜。反应结束后，加水，有固体析出，抽滤，滤饼烘干，得到标题化合物粗品，ESI-MS m/z:322.2[M+H]⁺。

步骤3：2-氟-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺的制备

将6-氨基甲酰基-2-氟-3',6'-二氢-[3,4'-联吡啶]-1'(2'H)-羧酸叔丁酯(200mg,0.623mmol)加入反应瓶中溶于二氯甲烷(5mL)，加入三氟乙酸(1mL)，室温搅拌2小时，反应结束后，减压浓缩，得到标题化合物粗品，ESI-MS m/z:222.1[M+H]⁺。

步骤4：7-(溴甲基)-3-乙基-8-氟喹喔啉-2(1H)-酮的制备

向3-乙基-8-氟-7-(羟甲基)喹喔啉-2(1H)-酮(600mg,2.70mmol)中加入溴化氢(48wt％)水溶液，80℃加热反应4小时。反应结束后，减压浓缩，再加入二氯甲烷洗涤，再次减压浓缩，得到标题化合物粗品，ESI-MS m/z:285.2,287.2[M+H]⁺。

步骤5：1'-((2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-6-基)甲基)-2-氟-1',2',3',6'-四氢-[3,4'-联吡啶]-6-甲酰胺的制备

将7-(溴甲基)-3-乙基-8-氟喹喔啉-2(1H)-酮(342mg,1.2mmol)、2-氟-1’,2’,3’,6’-四氢-[3,4’-联吡啶]-6-甲酰胺(133mg,0.60mmol)和N,N-二异丙基乙胺(776mg,6.0mmol)加入到乙腈(5mL)中，氩气置换，80℃加热反应2小时，反应结束后，柱层析纯化得到粗品，加入碳酸钾水溶液和二氯甲烷搅拌半小时，抽滤，得到滤饼，烘干得到标题化合物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.44(s,1H),8.07(t,J＝8.6Hz,1H),7.98(s,1H),7.92(d,J＝7.3Hz,1H),7.68(s,1H),7.55(d,J＝8.2Hz,1H),7.31(t,J＝7.4Hz,1H),6.24(s,1H),3.76(s,2H),3.18(s,2H),2.83(dd,J＝14.3,7.1Hz,2H),2.76-2.62(m,2H),2.49-2.30(m,2H),1.22(t,J＝7.2Hz,3H).ESI-MS m/z:426.2[M+H]⁺。

实施例17：(S)-5-((1-((2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-6-基)甲基)吡咯烷-3-基)氨基)-6-氟-N-甲基吡啶酰胺

步骤1、(S)-5-((1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)氨基)-6-氟吡啶甲酸甲酯的制备

将5-溴-6-氟吡啶甲酸甲酯(500mg,2.16mmol)加入到1,4-二氧六环(30mL)中，加入(S)-3-氨基吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(442mg,2.37mmol)、甲磺酸(2-二环己基膦基-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯基)(2-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(180mg,0.22mmol)和碳酸铯(1.75g,5.39mmol)，氩气置换，105℃加热搅拌过夜，反应结束后，过滤，滤液减压浓缩，柱层析纯化得标题化合物，ESI-MS m/z:340.3[M+H]⁺。

步骤2、(S)-3-((2-氟-6-(甲基氨基甲酰基)吡啶-3-基)氨基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯的制备

将(S)-5-((1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)氨基)-6-氟吡啶甲酸甲酯(579mg,1.71mmol)溶于甲胺-乙醇溶液(10mL)，室温搅拌3小时，反应结束后，减压浓缩，得到标题化合物粗品，ESI-MS m/z:283.2[M+H-56]⁺。

步骤3：(S)-6-氟-N-甲基-5-(吡咯烷-3-氨基)吡啶酰胺的制备

将(S)-3-((2-氟-6-(甲基氨基甲酰基)吡啶-3-基)氨基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(578mg,1.71mmol)溶于二氯甲烷(10mL)，加入三氟乙酸(0.9mL)，室温搅拌反应4小时。反应结束后，减压浓缩，柱层析纯化得到标题化合物，ESI-MS m/z:239.2[M+H]⁺。

步骤4：(S)-5-((1-((2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹喔啉-6-基)甲基)吡咯烷-3-基)氨基)-6-氟-N-甲基吡啶酰胺的制备

将(S)-6-氟-N-甲基-5-(吡咯烷-3-氨基)吡啶酰胺(91mg,0.38mmol)溶于乙腈(10mL)，加入7-(溴甲基)-3-乙基-8-氟喹喔啉-2(1H)-酮(90mg,0.32mmol)和N,N-二异丙基乙胺(0.55mL,3.17mmol)，50℃加热反应过夜。反应完毕后，减压浓缩，柱层析纯化得到标题化合物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.42(s,1H),8.14(d,J＝4.3Hz,1H),7.71(d,J＝7.9Hz,1H),7.53(d,J＝8.2Hz,1H),7.33-7.25(m,1H),7.20-7.11(m,1H),6.40(d,J＝5.3Hz,1H),4.01(s,1H),3.76(s,2H),2.94-2.90(m,1H),2.81(dd,J＝14.6,7.3Hz,2H),2.74(d,J＝4.6Hz,3H),2.69-2.65(m,1H),2.36-2.31(m,1H),2.28-2.17(m,2H),1.81-1.72(m,1H),1.21(t,J＝7.3Hz,3H).ESI-MS m/z:443.2[M+H]⁺。

实施例18：(R)-5-((1-((2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹啉-6-基)甲基)吡咯烷-3-基)氨基)-6-氟-N-甲基吡啶酰胺

步骤1：7-(溴甲基)-3-乙基-8-氟喹啉-2(1H)-酮的制备

将3-乙基-8-氟-7-(羟甲基)喹啉-2(1H)-酮(300mg，1.35mmol)加入到二氯甲烷(20mL)中，加入三苯基膦(1.6g，4.05mmol)，氩气置换。在0℃下加入四溴化碳(1.56g，4.72mmol)，室温搅拌2小时，反应结束后，反应液浓缩，柱层析纯化得标题化合物，ESI-MSm/z:285.2,287.2[M+H]⁺。

步骤2：5-溴-6-氟吡啶甲酸甲酯的制备

将5-溴吡啶甲酸甲酯(5g，23.14mmol)加入到乙腈(20mL)中，加入氟化银(1.1g，69.43mmol)，氩气置换。室温，避光反应36小时，反应结束后，反应液抽滤，滤液浓缩，柱层析纯化得标题化合物，ESI-MS m/z:235.1,237.1[M+H]⁺。

步骤3：甲基(R)-5-(1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-3-基)氨基)-6-氟吡啶甲酸酯的制备

将5-溴-6-氟吡啶甲酸甲酯(500mg，2.13mmol)、叔丁基(R)-3-氨基吡咯烷-1-羧酸酯(437mg，2.35mmol)、甲磺酸(2-二环己基膦基-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯基)(2-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(107mg，0.06mmol)和碳酸铯(1.74mg，5.34mmol)加入到1,4-二氧六环(30mL)中，氩气置换，100℃加热反应过夜，反应结束后，柱层析纯化得到标题化合物，ESI-MS m/z:340.1[M+H]⁺。

步骤4：叔丁基(R)-3-(2-氟-6-(甲基氨甲酰)吡啶-3-基)氨基)吡咯烷-1-羧酸酯的制备

将甲基(R)-5-(1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-3-基)氨基)-6-氟吡啶甲酸酯(397mg,1.17mmol)加入到甲胺-乙醇(33％)溶液(10mL)中，室温搅拌2小时，反应结束后，反应液浓缩，得到标题化合物粗品，ESI-MS m/z:339.1[M+H]⁺。

步骤5：(R)-6-氟-N-甲基-5-(吡咯烷-3-基氨基)吡啶酰胺的制备

将叔丁基(R)-3-(2-氟-6-(甲基氨甲酰)吡啶-3-基)氨基)吡咯烷-1-羧酸酯(440mg,1.3mmol)加入到二氯甲烷(20mL)中，加入三氟乙酸(673.9mg,5.9mmol)，室温搅拌过夜，反应结束后，反应液浓缩，得到标题化合物粗品，ESI-MS m/z:239.2[M+H]⁺。

步骤6：(R)-5-((1-((2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹啉-6-基)甲基)吡咯烷-3-基)氨基)-6-氟-N-甲基吡啶酰胺的制备

将7-(溴甲基)-3-乙基-8-氟喹啉-2(1H)-酮(90mg,0.32mmol)、(R)-6-氟-N-甲基-5-(吡咯烷-3-基氨基)吡啶酰胺(91mg,0.38mmol)和N,N-二异丙基乙胺(408mg,3.2mmol)加入到乙腈(10mL)中。50℃加热搅拌过夜反应，反应结束后，滤液浓缩，柱层析纯化得标题化合物。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.42(s,1H),8.14(d,J＝4.4Hz,1H),7.71(d,J＝7.8Hz,1H),7.53(d,J＝8.1Hz,1H),7.28(t,J＝7.4Hz,1H),7.15(t,J＝9.2Hz,1H),6.40(d,J＝5.4Hz,1H),4.01(s,1H),3.76(s,2H),2.95-2.87(m,1H),2.81(dd,J＝14.6,7.3Hz,2H),2.74(d,J＝4.6Hz,3H),2.69-2.64(m,1H),2.26-2.18(m,1H),1.82-1.71(m,1H),1.29-1.17(m,5H).ESI-MS m/z:443.2[M+H]⁺。

实施例19：5-(1-((2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹啉-6-基)甲基)氮杂环丁烷-3-基)氨基)-6-氟-N-甲基吡啶酰胺

步骤1：7-(溴甲基)-3-乙基-8-氟喹啉-2(1H)-酮的制备

将3-乙基-8-氟-7-(羟甲基)喹啉-2(1H)-酮(300mg,1.35mmol)加入到二氯甲烷(20mL)中，加入三苯基膦(1.06g,4.05mmol)，氩气置换。在0℃下加入四溴化碳(1.56g,4.72mmol)，室温搅拌2小时，反应结束后，反应液浓缩，柱层析纯化得标题化合物，ESI-MSm/z:285.2,287.2[M+H]⁺。

步骤2：5-(1-(叔丁氧羰基)氮杂环丁烷-3-基)氨基)-6-氟吡啶甲酸甲酯的制备

将5-溴-6-氟吡啶甲酸甲酯(500mg,2.2mmol)、3-氨基氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(408mg,2.4mmol)、甲磺酸(2-二环己基膦基-2',6'-二异丙氧基-1,1'-联苯基)(2-氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)(184mg,0.22mmol)和碳酸铯(1.79g,5.5mmol)加入至1,4-二氧六环(30mL)中，氩气置换，100℃加热反应过夜，反应结束后，柱层析纯化得标题化合物，ESI-MSm/z:326.4[M+H]⁺。

步骤3：3-(2-氟-6-(甲基氨甲酰)吡啶-3-基)氨基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯的制备

将5-(1-(叔丁氧羰基)氮杂环丁烷-3-基)氨基)-6-氟吡啶甲酸甲酯(440mg,0.59mmol)加入到甲胺-乙醇溶液(33％,10mL)中，室温搅拌2小时，反应结束后，反应液浓缩，得到标题化合物粗品，ESI-MS m/z:325.4[M+H]⁺。

步骤4：5-(氮杂环丁烷-3-基氨基)-6-氟-N-甲基吡啶酰胺的制备

将3-(2-氟-6-(甲基氨甲酰)吡啶-3-基)氨基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(520mg,1.6mmol)加入到二氯甲烷(20mL)中，加入三氟乙酸(915mg,8.0mmol)，室温搅拌过夜，反应结束后，反应液浓缩，得到标题化合物粗品，ESI-MS m/z:225.1[M+H]⁺。

步骤5：5-(1-((2-乙基-5-氟-3-氧代-3,4-二氢喹啉-6-基)甲基)氮杂环丁烷-3-基)氨基)-6-氟-N-甲基吡啶酰胺的制备

将7-(溴甲基)-3-乙基-8-氟喹啉-2(1H)-酮(90mg,0.32mmol)、5-(氮杂环丁烷-3-基氨基)-6-氟-N-甲基吡啶酰胺(79mg,0.35mmol)和N,N-二异丙基乙胺(413mg,3.2mmol)加入到乙腈(10mL)中。50℃加热搅拌过夜反应。反应结束后，加入饱和碳酸钾水溶液，二氯甲烷萃取三次，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液浓缩，柱层析纯化得标题化合物。¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ12.48(s,1H),8.23(d,1H),7.76(d,J＝7.8Hz,1H),7.59(d,J＝8.1Hz,1H),7.30(t,J＝7.0Hz,1H),7.18-7.08(m,1H),6.91(d,1H),4.15(s,1H),3.81(s,2H),3.79-3.70(m,2H),3.22-3.13(m,2H),2.91-2.84(m,2H),2.80(d,J＝4Hz,3H),1.31-1.25(t,J＝8Hz,3H).ESI-MS m/z:429.2[M+H]⁺。

实验例1:PARP1/2酶抑制活性

1.实验材料

化合物准备：使用以上实施例制备的本发明化合物，对于PARP1酶活实验，用DMSO配制成2.5mM后，依次4倍稀释至625μM、156.25μM、39.06μM、9.766μM、2.441μM、0.610μM、0.153μM、0.038μM、0.010μM。对于PARP2酶活实验，本发明式Ia化合物盐酸盐用DMSO配制30mM储备液，依次稀释3倍至10mM、3.3mM、1.1mM、0.367mM、0.122mM、0.041mM、0.0136mM、0.0045mM。

试剂：PARP1，购自于BPS公司，Cat.No.80501；PARP2，购自于BPS公司，Cat.No.80502)，Histone购自于Active Motif公司，Cat.No.811167；Activited DNA，购自于Genscript公司，Cat.No.L05182-01&02&03；anti-rabbit IgG，HRP-linked Antibody购自于CST公司，Cat.No.7074P2；anti-Poly/Mono-ADP Ribose(E6F6A)Rabbit mAb购自于CST，Cat.No.83732S；SuperSignal ELISA Femto Substrate购自于THERMO PIERCE公司，Cat.No.37074；Strep-HRP，购自于Thermo Pierce，Cat.No.21127)。

2.实验方法

2.1.在384孔板中加入组蛋白Histone溶液，每孔25μL，4℃孵育过夜。

2.2.制备PBST缓冲液、封闭液和检测液；

2.3.用PBST缓冲液清洗包被有组蛋白的384孔板3次。加入50μL封闭液，室温封闭1h。然后用PBST缓冲液清洗3次。

2.4.对于PARP1酶活实验，在一个96孔板中制备1000×的化合物，然后转移1μL到新的96孔板中进行稀释。1000rpm，离心1min。之后每孔转移5μL化合物或DMSO到384孔板中。对于PARP2酶活实验，在一个96孔板中制备2000×的化合物，然后转移50nL到新的96孔板中并加入39.95μL检测液。1000rpm，离心1min。之后每孔转移5μL化合物或DMSO到384孔板中。

2.5.提前将PARP1/PARP2和DNA混合后25℃下孵育10min。每孔加入10μLPARP1/PARP2&DNA，PARP1酶活实验最小对照板中加入10μL DNA，PARP2酶活实验最小对照板中加入10μL检测液。室温条件下孵育10min。然后加入2.5×NAD+，每孔10μL，25℃孵育60min。然后用PBST缓冲液清洗3次。

2.7.对PARP1酶活实验，每孔加入20μL anti-Poly/Mono-ADP Ribose RabbitmAb，室温孵育1.5小时，然后用PBST缓冲液清洗3次。加入稀释后的anti-rabbit IgG,HRP-linked Antibody(终止液1:2000进行稀释)，每孔20μL，室温孵育1h后，用PBST缓冲液清洗3次。对PARP2酶活实验，每孔加入25μL Stre-HRP，室温孵育1h后，用PBS缓冲液清洗3次。

2.8.每孔加入25μL Femto-ECLSubstrate A和Femto-ECLSubstrate B(1:1)的混合液之后，检测化学发光信号。利用公式：inh％＝(Max-Signal)/(Max-Min)×100，将数据拟合后得到IC50值，实验结果见表1。

表1

实验例2:PARP1/2 DNA Trapping

1.实验材料

化合物准备：使用以上实施例制备的本发明化合物，对于PARP1 DNA Trapping，用DMSO配制成10μM后，依次4倍稀释至2500nM、625nM、156.25nM、39.06nM、9.766nM、2.441nM、0.610nM、0.153nM、0.038nM。对于PARP2DNA Trapping，本发明式Ia化合物盐酸盐用DMSO配制成100μM后，依次4倍稀释至25μM、6.25μM、1562.5nM、390.625nM、24.414nM、6.104nM、1.526nM、0.381nM、0.095nM。

试剂：PARP1，购自于BPS公司，Cat.No.80501；PARP2，购自于BPS公司，Cat.No.80502；NAD购自于Sigma公司，Cat.No.10127965001；Activited DSB DNA probe-1，购自于Generay公司；PARP2 probe 2，购自于Generay公司；Mab anti GST-Tb cryptate，购自于cisbio公司，Cat.No.61GSTTLA；DMSO购自于Sigma，Cat.No.D8418。

2.实验方法

2.1.制备分析缓冲液：10mM磷酸钾(pH 7.9)、50mM NaCl、1mM EDTA、0.05％Brij-35、1mM DTT；

2.2.用分析缓冲液制备4×的PARP1和Mab anti GST-Tb cryptate混合液以及PARP2和Mab anti GST-Tb cryptate混合液；并将其分别加入到384孔板中，每孔4μL；

2.3.用分析缓冲液制备4×的DSB DNA probe1和PARP2 probe2，并将其分别加入到384孔板中，每孔4μL；

2.4.然后加入制备好的化合物溶液，每孔4μL，室温孵育；

2.5.用分析缓冲液制备4×的NAD溶液，每孔4uL，室温孵育10min；

2.6.检测化学发光信号。利用公式：％inhibition＝(Signal cmpd-Signal Ave_PC)/(Signal Ave_VC-Signal Ave_PC)×100，将数据拟合后得到IC50值，实验结果见表2。

表2

实验例3:对人结直肠癌细胞DLD-1(wt)增殖抑制

1.实验材料

受试化合物：使用以上实施例制备的本发明化合物，用DMSO配制成20mM，然后依次3倍稀释为6666.6μM、2222.2μM、740.74μM、246.9μM、82.3μM、27.43μM、9.14μM、3.05μM。

人结直肠癌细胞DLD-1(wild type,wt)购于武汉普诺赛生命科技有限公司。

试剂：RPMI-1640，购自于美国Invitrogen公司；FBS，购自于美国Invitrogen公司；青链霉素，购自于美国Invitrogen公司；EDTA，购自于美国Invitrogen公司；Luminescent Cell Viability Assay Kit，购自于美国Progema公司；Backseal膜，购自于美国Perkin Elmer公司。

2.实验方法

2.1细胞培养：

细胞复苏：将细胞置于37度水浴中溶解，然后转移到15mL已预热的培养基中，1000rpm离心5分钟，弃去培养基。用15mL新鲜培养基重悬细胞，转移至培养皿中，置37℃，5％CO₂、95％潮湿空气的CO₂培养箱中培养，24小时后细胞更换新鲜培养基。

细胞传代：细胞生长至约80-90％融合，吸弃原有完全培养基，加入1mL的PBS将残余培养基洗净后吸弃，加入1mL胰蛋白酶消化液，镜下观察细胞伪足回缩变圆但细胞还未成片脱落，此时吸弃胰酶并用2mL完全培养基终止消化，轻轻吹打并收集细胞悬液，1000rpm，离心5min。去除上清，取分散均匀的细胞计数，调整合适的细胞浓度接种于培养皿中，置于37℃、5％CO₂、95％潮湿空气的CO₂培养箱中培养。

2.2实验步骤：

DLD-1细胞在培养皿中长至1×10⁵-1×10⁶个细胞/mL后，使用新鲜培养基(RPMI1640+10％FBS+1％青链霉素)重悬，并计数。将重悬的细胞调整细胞浓度至1×10⁴个细胞/mL，每孔加入25μL(250个细胞/well)，并加入完全培养基75μL。每种浓度两复孔。24h后，在原有旧培养基(100μL)基础上，加入100μL稀释有不同浓度(2×)药物的培养基。药物处理7d后吸弃孔内培养基，尽量吸干，加入150μL已加入CTG的完全培养基(CTG:培养基＝1:1)，室温孵育10min后，检测化学发光信号，震荡，Read进样检测条件为500ms。药物处理7d后向待测孔加入100μLLuminescent Cell Viability Assay buffer。轻轻摇匀。10分钟后，在Assay板底部贴上Backseal膜，置于Envison上读取荧光读数，并计算细胞存活率(cell survive(％))，计算公式为cell survive(％)＝(Com-Min)/(Max-Min)，其中Max为溶媒对照组的读数，Min为无细胞对照组的读数，Com为化合物处理组的读数，数据经Graphpad Prism 6处理，拟合得IC₅₀，实验结果见表3。

表3

实验例4:对人结直肠癌细胞DLD-1(BRCA2^-/-)增殖抑制

1.实验材料

受试化合物准备：使用以上实施例制备的本发明化合物，用DMSO配制成10mM储备液后，依次4倍稀释至2500μM、625μM、156.25μM、39.06μM、9.766μM、2.441μM、0.610μM、0.153μM、0.038μM。

人结直肠癌细胞DLD-1(BRCA2-/-)购于ATCC。

试剂：CelltiterGlo assay kit(CTG)，购自Promega，Cat.No.G7573；384孔板，购自PerkinElmer，Cat.No.6007680。

实验步骤：细胞培养传代遵循ATCC的说明。将配好的化合物溶液吸取40nL到384孔板中，同时每孔加入6×10²个细胞(悬液体积为40μL)，孵育7天，7天后每孔加入20μLCelltiterGlo assay kit试剂并读取化学发光值。％inhibition＝(Signal cmpd-SignalAve_PC)/(Signal Ave_VC-Signal Ave_PC)×100，将数据拟合后得到IC50值，实验结果见表4。

表4

尽管以上已经对本发明作了详细描述，但是本领域技术人员理解，在不偏离本发明的精神和范围的前提下可以对本发明进行各种修改和改变。本发明的权利范围并不限于上文所作的详细描述，而应归属于权利要求书。

Claims

1.一种通式(I)所示的化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、

结晶或前药，

其中，

n、m各自独立地选自0、1、2、3和4。

2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、结晶或前药，其中环A选自其任选被一个或多个选自卤素、羟基、C_1-6烷基、卤代C_1-6烷基、羟基C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、卤代C_1-6烷氧基、羟基C_1-6烷氧基、氨基、C_1-6烷基氨基、C_1-6烷基酰基氨基、C_1-6烷基酰基、C_1-6烷基磺酰基、氨基酰基、C_1-6烷基氨基酰基、烯基、炔基、卤代C_1-6烷基酰基、羟基C_1-6烷基酰基的基团取代。

3.根据权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、结晶或前药，其中R₁选自卤素、羟基、C_1-3烷基、卤代C_1-3烷基、羟基C_1-3烷基、C_1-3烷氧基、卤代C_1-3烷氧基、羟基C_1-3烷氧基、硝基、羧基、氰基、氨基、C_3-6环烷基、C_3-6杂环基。

4.根据权利要求1-3之任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、结晶或前药，其中R₂选自氢、卤素、羟基、C_1-3烷基、卤代C_1-3烷基、羟基C_1-3烷基、C_1-3烷氧基、卤代C_1-3烷氧基、羟基C_1-3烷氧基、硝基、羧基、氰基、氨基，n选自0、1、2、3和4。

5.根据权利要求1-4之任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、结晶或前药，其中R₃选自卤素、羟基、C_1-3烷基、卤代C_1-3烷基、羟基C_1-3烷基、C_1-3烷氧基、卤代C_1-3烷氧基、羟基C_1-3烷氧基、硝基、羧基、氰基、氨基、C_1-3烷基氨基、C_1-3烷基氨基酰基、C_1-3烷基酰基氨基、C_1-3烷基酰基、氨基酰基、C_3-8环烷基氨基酰基、C_3-8环烷基C_1-3烷基氨基酰基、C_1-3烷基磺酰基、氨基磺酰基、C_1-3烷基氨基磺酰基、C_3-8环烷基、C_3-8杂环基、C_6-12芳基和C_5-12杂芳基，其任选被一个或多个选自卤素、羟基、C_1-3烷基、卤代C_1-3烷基、羟基C_1-3烷基、C_1-3烷氧基、卤代C_1-3烷氧基、羟基C_1-3烷氧基、氨基、单C_1-3烷基氨基、C_1-3烷基酰基氨基、C_1-3烷基酰基、C_1-3烷基磺酰基、氨基酰基、C_1-3烷基氨基酰基、双C_1-3烷基氨基、烯基、炔基、卤代C_1-3烷基酰基、羟基C_1-3烷基酰基、C_3-8环烷基、C_3-8杂环基、C_6-12芳基、C_5-12杂芳基、氧代基团的基团取代，m选自0、1、2、3和4。

6.根据权利要求1-5之任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、结晶或前药，其中R₄选自卤素、羟基、C_1-3烷基、卤代C_1-3烷基、羟基C_1-3烷基、C_1-3烷氧基、卤代C_1-3烷氧基、羟基C_1-3烷氧基、硝基、羧基、氰基、氨基、C_3-6环烷基、C_3-6杂环基。

7.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、结晶或前药，其中通式(I)具有以下通式(Ia)的结构，

其中，

R₁、R₂、R₄、n具有权利要求1-6中的定义。

8.一种化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、结晶或前药，其中所述化合物为选自以下的化合物：

9.一种药物组合物，其包含权利要求1-8之任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、结晶或前药和可药用载体。

10.根据权利要求1-8之任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、结晶或前药或权利要求9所述的药物组合物在制备治疗和/或预防抑制PAPR1有益的疾病的药物中的应用，优选地所述疾病为癌症。