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CN117362344A - 一类磷酸酯类化合物、其制备方法及应用 - Google Patents

一类磷酸酯类化合物、其制备方法及应用 Download PDF

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CN117362344A
CN117362344A CN202310837206.9A CN202310837206A CN117362344A CN 117362344 A CN117362344 A CN 117362344A CN 202310837206 A CN202310837206 A CN 202310837206A CN 117362344 A CN117362344 A CN 117362344A
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CN
China
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hydrogen
membered ring
unsubstituted
carbon atoms
attached
Prior art date
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Application number
CN202310837206.9A
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English (en)
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孙晓阳
王伟
曾宏
巩晓明
王英
李森林
潘德思
鲁先平
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Chengdu Weixin Pharmaceutical Co ltd
Shenzhen Chipscreen Biosciences Co Ltd
Original Assignee
Chengdu Weixin Pharmaceutical Co ltd
Shenzhen Chipscreen Biosciences Co Ltd
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Filing date
Publication date
Application filed by Chengdu Weixin Pharmaceutical Co ltd, Shenzhen Chipscreen Biosciences Co Ltd filed Critical Chengdu Weixin Pharmaceutical Co ltd
Publication of CN117362344A publication Critical patent/CN117362344A/zh
Pending legal-status Critical Current

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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/645—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07F9/6509—Six-membered rings
    • C07F9/6512—Six-membered rings having the nitrogen atoms in positions 1 and 3
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses

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Abstract

本发明涉及一类磷酸酯类化合物、其制备方法及应用；所述化合物的结构如式(I)所示。本发明还涉及包含所述化合物作为活性成分的药物组合物。所述化合物及药物组合物可用于治疗和/或预防痘病毒感染类疾病，具有重要的应用价值。

Description

一类磷酸酯类化合物、其制备方法及应用
技术领域
本发明属于药物化学领域，具体涉及一类磷酸酯类化合物、其制备方法及应用。
背景技术
正痘病毒是一种双链DNA病毒，其属于痘病毒科、脊椎痘病毒亚科。正痘病毒的病毒粒子很大，呈砖状，长度为220-450nM。正痘病毒主要包括天花病毒、猴痘病毒、牛痘病毒、马痘病毒和骆驼痘病毒等在内的12种病毒，其中多数病毒可以感染人体(Viruses,2020,2(11):1257)。
天花是一种高传染性，高致病性的痘类病毒。在历史上，天花曾多次爆发；据估计，仅在20世纪，其就造成上亿患者死亡，而使更多患者致残或者毁容。天花病毒主要通过雾化飞沫或者接触传播；感染后，其先在淋巴组织中复制，通过淋巴扩散到皮肤，并在真皮小血管中复制，随后感染和溶解邻近的表皮细胞，致使皮肤病变。其中，大天花病毒是最常见的亚型，死亡率为30％；而小天花病毒感染很少导致死亡(Future Virol.2011May；6(5):653–671)。
猴痘也是一种高传染性的痘类病毒。自1959年猴痘首次被发现以来，其在非洲、美国、英国等多个国家均有爆发；2022年5月，猴痘再次在全球爆发，目前已经蔓延至28个国家和地区，累计感染数量超过3000例。猴痘主要通过呼吸道分泌物和接触传播，感染后症状跟天花相似。猴痘病毒有两个稳定遗传的分支：一是西非支猴痘病毒，死亡率为1％；二是中非支猴痘病毒，死亡率为10％(Viruses,2020,2(11):1257)。
接种疫苗是目前预防正痘病毒感染(特别是天花)最有效的手段之一。然而，自从1979年，WHO宣布天花病毒被消灭之后，全世界范围内逐渐开始停止接种天花疫苗。注射天花疫苗后，人体对天花病毒的免疫性可以持续多年；但是，接种10年到15年后，抗体反应显著降低。同时，与疫苗接种相关的不良事件也经常发生(大约占比1：500)，包括牛痘感染、严重的脑炎(大约占比1：30万)等；在免疫功能低下的人群中，发生不良反应的数量更为显著(J Allergy Clin Immunol.2002.110:357-365)。此外，一项研究发现：把表达IL-4的重组鼠痘病毒接种到已经鼠痘疫苗免疫的小鼠体内，会导致其死亡，这表明疫苗接种可能无法预防重组形式的正痘病毒(Journal of Virology,2001,75(3):1205-10)。
西多福韦是一种核苷类似物，其被批准用于治疗艾滋病患者巨细胞病毒性(CMV)视网膜炎。在体外，西多福韦对多种DNA病毒均有抑制作用，包括腺病毒、疱疹病毒、肝病毒、多瘤病毒、乳头瘤病毒和正痘病毒等；同时，西多福韦还可以抑制天花病毒的复制(Adv.Exp.Med.Biol.1990.278:277-83；Antiviral Res.1987 8:261-272；ClinInfect.Dis.2001.33:597-602)。然而，西多福韦因为诸多问题而被限制了使用，例如其生物利用度差而必须静脉注射、有肾毒性并且在多种病毒中都出现了耐药现象(Ann.Intern.Med.1997.126:257-263)。
2021年，FDA批准了Tembexa(Brincidofovir，布林西多福韦)的片剂和口服混悬剂，用于治疗全年龄段的天花。Tembexa是一种西多福韦的脂质结合物，其克服了西多福韦生物利用度差、肾毒性等问题。
当前，中国并没有西多福韦/布林西多福韦的同类药物上市。因此，此类药物具有研究开发的价值，不仅可以满足目前的临床需求，而且有着较大的市场潜力。
发明内容
本发明的目的是提供一种预防和/或治疗正痘病毒(例如天花、猴痘、马痘)引发疾病的药物，此药物不仅具有良好疗效，并且质量可控、安全性良好。
为了解决上述技术问题，第一方面，本发明提供了一种式(I)所示的化合物，或其异构体、晶型、溶剂化物、药学上可接受的盐或代谢物：
其中，R1和R2各自独立地选自氢、氘或卤素；
R3和R4各自独立地选自氢、氘、被任选取代基取代或未被取代的烷基；或所述R3和R4与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代多元环状基团；
R5和R6各自独立地选自氢、氘、被任选取代基取代或未被取代的烷基；或所述R5和R6与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代多元环状基团；
R7、R8、R9和R10各自独立地选自氢、被任选取代基取代或未被取代的烷基；或所述R7和R8与它们所连接的碳原子一起形成多元环状基团；或所述R9和R10与它们所连接的碳原子一起形成多元环状基团；或所述R7和R9与它们所连接的碳原子一起形成多元环状基团；或所述R8和R10与它们所连接的碳原子一起形成多元环状基团；其中，所述多元环状基团可被任选取代基取代或未被取代；
3个R11各自独立地选自氢、氘；
m、n各自独立地选自0-13中的任意值。
在一些实施方案中，式(I)所示化合物不包括如下结构：
在一些实施方案中，R1和R2均为氢；或R1为氘、R2为氢；或R1为卤素、R2为氢；或R1和R2均为氘；或R1为氢、R2为氘；或R1为氢、R2为卤素；或R1和R2为卤素；或R1为卤素、R2为氢；或R1为卤素、R2为氘；或R1为氘、R2为卤素。
在一些实施方案中，R1选自氢、氘或卤素，R2选自氢或卤素。
在一些优选的实施方式中，R1和R2均为氢；或R1为氘、R2为氢；或R1为卤素、R2为氢；或R1为氢、R2为卤素。
在一些更优选的实施方案中，R1为氟、R2为氢；或R1为氢、R2为氟。
在一些更优选的实施方案中，R1和R2均为氢。
在一些更优选的实施方案中，R1为氘、R2为氢。
在一些更优选的实施方案中，R1为氟、R2为氢。
在一些更优选的实施方案中，R1为氢、R2为氟。
其中，所述卤素选自氟、氯、溴、碘。
在一些实施方案中，R3、R4、R5和R6各自独立地选自氢、氘、被任意取代基取代或未被取代的C1-6烷基；所述C1-6烷基包括支链或直链的C1-6烷基；优选地，所述C1-6烷基包括支链或直链的C1-5烷基、C2-5烷基、C2-6烷基、C3-6烷基、C3-5烷基、C4-6烷基；更优选地，所述C1-6烷基选自甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、3-戊基、己基；
或R3和R4与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-7元环；或R5和R6与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-7元环；所述3-7元环包括饱和或部分饱和的3-7元环；优选地，所述3-7元环包括饱和或部分饱和的3-6元环、3-5元环、4-6元环、3-4元环；更优选地，所述3-7元环选自环丙烷、环丁烷、环戊烷、环戊烷、环己烷、环庚烷、环戊烯烷、环庚烯烷和环辛烯烷。
在一些优选的实施方案中，R3、R4均为氢；R5和R6均为氢，或R5和R6与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代3-6元环。
在一些优选的实施方案中，R3、R4均为氢；R5和R6均为氢，或R5和R6与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代3-5元环。
在一些优选的实施方案中，R3、R4均为氢；R5和R6均为氢，或R5和R6与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代3-4元环。
在一些优选的实施方案中，R3、R4均为氢；R5和R6均为氢，或R5和R6与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代环丙烷。
其中，所述C1-6烷基、3-7元环、3-6元环、3-5元环、4-6元环、3-4元环、环丙烷的取代基选自C1-8烷基、卤素、-OH、C1-8烷氧基、-NH2、C3-8环烷基、C1-8卤代烷基。
在一些实施方案中，R7、R8、R9和R10各自独立地选自氢、被任意取代基取代或未被取代的C1-6烷基；其中，所述C1-6烷基包括支链或直链的C1-6烷基；优选地，所述C1-6烷基包括支链或直链的C1-5烷基、C2-5烷基、C2-6烷基、C3-6烷基、C3-5烷基、C4-6烷基；更优选地，所述C1-6烷基选自甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、3-戊基、己基；
或所述R7和R8与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-7元环；或所述R9和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代3-7元环；或R7和R9与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-7元环；或R8和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-7元环；其中，所述3-7元环包括饱和或部分饱和的3-7元环；优选地，所述3-7元环包括饱和或部分饱和的3-6元环、3-5元环、4-6元环、3-4元环；更优选地，所述3-7元环选自环丙烷、环丁烷、环戊烷、环戊烷、环己烷、环庚烷、环戊烯烷、环庚烯烷和环辛烯烷。
在一些优选的实施方案中，R7、R8均为氢，或R7和R8与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-6元环；
R9和R10均为氢，或R9和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代3-6元环。
在一些优选的实施方案中，R7和R9均为氢，或R7和R9与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-6元环；
R8和R10均为氢，或R8和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-6元环。
在一些优选的实施方案中，R7、R8均为氢，或R7和R8与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-6元环；
R9和R10均为氢，或R9和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代3-6元环；
R7和R9均为氢，或R7和R9与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-6元环；
R8和R10均为氢，或R8和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-6元环。
在一些优选的实施方案中，R7、R8均为氢，或R7和R8与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-5元环；
R9和R10均为氢，或R9和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代3-5元环。
在一些优选的实施方案中，R7和R9均为氢，或R7和R9与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-5元环；
R8和R10均为氢，或R8和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-5元环。
在一些优选的实施方案中，R7、R8均为氢，或R7和R8与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-5元环；
R9和R10均为氢，或R9和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代3-5元环；
R7和R9均为氢，或R7和R9与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-5元环；
R8和R10均为氢，或R8和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-5元环。
在一些优选的实施方案中，R7、R8均为氢，或R7和R8与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-4元环；
R9和R10均为氢，或R9和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代3-4元环。
在一些优选的实施方案中，R7和R9均为氢，或R7和R9与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-4元环；
R8和R10均为氢，或R8和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-4元环。
在一些优选的实施方案中，R7、R8均为氢，或R7和R8与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-4元环；
R9和R10均为氢，或R9和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代3-4元环；
R7和R9均为氢，或R7和R9与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-4元环；
R8和R10均为氢，或R8和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-4元环。
在一些优选的实施方案中，R7、R8均为氢，或R7和R8与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的环丙基；
R9和R10均为氢，或R9和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代环丙基。
在一些优选的实施方案中，R7和R9均为氢，或R7和R9与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的环丙基；
R8和R10均为氢，或R8和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的环丙基。
在一些优选的实施方案中，R7、R8均为氢，或R7和R8与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的环丙烷；
R9和R10均为氢，或R9和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代环丙烷；
R7和R9均为氢，或R7和R9与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的环丙烷；
R8和R10均为氢，或R8和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的环丙烷。
在一些优选的实施方案中，R7、R8均为氢，R9和R10均为氢。
在一些优选的实施方案中，R7、R8均为氢，R9和R10与它们所连接的碳原子一起形成环丙基。
在一些优选的实施方案中，R9、R10均为氢，R7和R8与它们所连接的碳原子一起形成环丙基。
其中，所述C1-6烷基、3-7元环、3-6元环、3-5元环、3-4元环、环丙烷的取代基选自C1-8烷基、卤素、-OH、C1-8烷氧基、-NH2、C3-8环烷基、C1-8卤代烷基。
在一些实施方案中，3个R11中，至少有一个为氢；优选地，3个R11中，至少有两个为氢；更优选地，3个R11中均为氢；
或3个R11中，至少有一个为氘；优选地，3个R11中，至少有两个为氘；更优选地，3个R11中均为氘。
在一些实施方案中，m与n之和的范围为10～20；优选地，m与n之和的范围为10～15；更优选地，m与n之和的范围为11～14。
在一些优选的实施方案中，m与n之和为13。
在一些实施方案中，式(I)所示化合物具有式(I-1)、(I-2)、(I-3)或(I-4)所示结构：
其中，R1、R2、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11以及m、n如式(I)所述定义。
在一些实施方案中，式(I)所示化合物具有式(I-1)所示结构：
其中，R1、R2、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11以及m、n如式(I)所述定义。
在一些实施方案中，式(I)所示化合物具有式(I-2)所示结构：
其中，R1、R2、R7、R8、R9、R10、R11以及m、n如式(I)所述定义。
在一些实施方案中，式(I)所示化合物具有式(I-3)所示结构：
其中，R1、R2、R5、R6、R9、R10、R11以及m、n如式(I)所述定义。
在一些实施方案中，式(I)所示化合物具有式(I-4)所示结构：
其中，R1、R2、R5、R6、R7、R8、R11以及m、n如式(I)所述定义。
在一些实施方案中，若R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11是氘，则R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11中的至少一个独立地具有不低于约98％的氘富集；
或R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11中的至少一个独立地具有不低于约90％的氘富集；
或R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11中的至少一个独立地具有不低于约50％的氘富集；
或R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11中的至少一个独立地具有不低于约20％的氘富集；
或R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11中的至少一个独立地具有不低于约10％的氘富集；
或R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11中的至少一个独立地具有不低于约5％的氘富集；
或R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11中的至少一个独立地具有不低于约1％的氘富集。
在一些实施方案中，若R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11是氘，则R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11中的至少一个独立地具有不低于约98％的氘富集。
在一些实施方案中，若R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11是氘，则R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11中的至少一个独立地具有不低于约90％的氘富集。
在一些实施方案中，若R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11是氘，则R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11中的至少一个独立地具有不低于约50％的氘富集。
在一些实施方案中，若R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11是氘，则R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11中的至少一个独立地具有不低于约20％的氘富集。
在一些实施方案中，若R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11是氘，则R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11中的至少一个独立地具有不低于约10％的氘富集。
在一些实施方案中，若R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11是氘，则R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11中的至少一个独立地具有不低于约5％的氘富集。
在一些实施方案中，若R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11是氘，则R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11中的至少一个独立地具有不低于约1％的氘富集。
在一些优选的实施方案中，式(I)所示化合物选自下述具体化合物：
本发明还提供了制备前述通式(I)化合物的方法。本发明通式(I)所述化合物的制备可通过以下实施方式完成，所提供的实施方式进一步阐明并举例说明了本发明所述化合物及其制备方法。应当理解，下述实施方式不以任何方式限制本发明的范围。
前述通式(I)化合物的制备方法一，包括：
1)I-a经羟基保护反应生成I-b，其中，PG1为羟基保护基，如Bn，PMB，Ac，TMS，TBS，TBDPS，TIPS，SEM，MOM，Trt等，优选地，PG1为Trt；
2)I-b与I-c在无机碱碱性条件下发生开环反应生成I-d，其中，无机碱为碳酸钠，碳酸钾，碳酸铯，氢氧化钠，氢氧化钾，氢氧化铯等，优选地，无机碱为碳酸钾；
3)I-e在TMSBr和草酰氯存在下生成磷酰氯中间体后与I-f生成I-g，其中Ra为取代基取代或未被取代的C1-6烷基，优选地，Ra为甲基，乙基；M为H，Na或K，若反应经氢氧化钠或氢氧化钾后处理则为Na或K，若不经氢氧化钠或氢氧化钾后处理则为H；
4)I-d与I-g经亲核取代反应生成I-h；
5)I-h经脱保护反应生成I；
其中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11以及m、n如式(I)所述定义。
前述通式(I)化合物的制备方法二，包括：
1)I-c经氨基保护反应生成I-i，其中，PG2为氨基保护基，如Cbz，Boc，Bn，PMB，Ac，Fmoc，Alloc，Bz等，优选地，PG2为Bz；
2)I-i与I-b在无机碱碱性条件下发生开环反应生成I-j，其中，无机碱为碳酸钠，碳酸钾，碳酸铯，氢氧化钠，氢氧化钾，氢氧化铯等，优选地，无机碱为碳酸钾；
3)I-j与I-g经亲核取代反应生成I-k；
4)I-k经脱保护反应生成I-l；
5)I-l经脱保护反应生成I；
其中，R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11以及m、n如式(I)所述定义。
以上任一方法得到的式(I)所示的磷酸酯类化合物在治疗正痘病毒(如天花、牛痘)引起的疾病中不仅具有良好疗效，并且质量可控、安全性良好。
第二方面，本发明提供了一种药物组合物，其包含前述第一方面所述的化合物，或其异构体、晶型、溶剂化物、药学上可接受的盐或代谢物，以及药学上可接受的辅助性成分。
在一些实施方案中，所述的药物组合物还可以包含一种或多种其他用于治疗和/或预防由正痘病毒感染引发疾病的药物。
制备各种含有一定量的活性成分的药物组合物的方法是已知的，或根据本发明的公开内容对于本领域技术人员是显而易见的。制备所述药物组合物的方法包括掺入适当的药学赋形剂、载体、稀释剂等。
第三方面，本发明提供了前述第一方面所述的化合物，或其异构体、晶型、溶剂化物、药学上可接受的盐或代谢物，或前述第二方面所述的药物组合物在制备预防和/或治疗正痘病毒感染药物中的应用。
再者，本发明也提供了前述第一方面所述的化合物，或其异构体、晶型、溶剂化物、药学上可接受的盐或代谢物，或前述第二方面所述的药物组合物，其用于预防和/或治疗正痘病毒感染引发的疾病。
另外，本发明还提供了一种预防和/或治疗由正痘病毒感染引发疾病的方法，其包括给予有需要的受试者/个体预防和/或治疗有效量的如前述第一方面所述的化合物，或药学上可接受的盐、多晶型物、共晶物、溶剂化物，或者前述第二方面所述的药物组合物。
在一些优选的实施方案中，所述正痘病毒选自猴痘病毒、天花病毒、牛痘病毒、马痘病毒和骆驼痘病毒。
在本发明中，除非文中另有要求，词语“包括”、“含有”、“包含”应被理解为包括一个所述的步骤或组分、或一组步骤或组分，但不排除任何其它的步骤或组分、或一组步骤或组分。
术语“烷基”是指包括具有指定碳原子数的支链和直链饱和脂肪族烃基。例如“C1-6烷基”是指具有1至6个碳原子的烷基；具体地，“C1-6烷基”可选自C1、C2、C3、C4、C5和C6烷基中任一。另外，烷基的实例包括但不限于甲基、乙基、丙基(例如正丙基和异丙基)、丁基(例如，正丁基、异丁基、叔丁基)、戊基(例如正戊基、异戊基、新戊基)等。
术语“环状基团”是指环化的烷基或部分饱和、不饱和的碳环或芳环，包括单环、双环或多环体系。其中，环化的烷基，即为环烷基，例如C3-7环烷基是指包括C3、C4、C5、C6和C7环烷基，其实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基等；部分饱和、不饱和的碳环是指碳环中存在一个或多个双键结构。
术语“被取代”是指指定原子或基团上的任一或多个氢被指定基团的选择替代，替代的个数可以为1个或多个，取代基可以相同也可以不用，一般情况下不超过指定原子的正常价态即可。本文中，所述C1-6烷基、3-7元环、3-6元环、3-5元环、3-4元环、环丙烷的取代基可被一个或多个选自一下基团的取代基取代：卤素、-OH、羧基、-NH2、硝基、氰基、C1-6酰氨基、C1-6酰氧基、C1-8烷氧基、芳氧基、烷硫基、C1-8烷基、C1-6酰基、C6-10芳基、C3-8环烷基、C2-6链烯基、C2-6炔基、杂环基或杂芳基、亚甲基二氧基、脲基、巯基、叠氮基、羰基、烷磺酰基、氨磺酰基、二烷基氨磺酰基和烷基亚磺酰基等；其中取代基本身也可被任选取代。本文中优选的取代基包括但不限于C1-8烷基、卤素、-OH、C1-8烷氧基、-NH2、C3-8环烷基、C1-8卤代烷基。
术语“氘富集”指在分子中的给定的位置上氘掺入代替氢的百分比。例如，给定位置上5％的氘富集指在给定样品中，5％的分子在给定的位置上含有氘。天然存在的氘分布为约0.0156％，所以使用非富集起始原料合成的化合物的任何位置的氘富集为约0.0156。氘富集可使用例如质谱分析和核磁共振波谱法等常规分析方法确定。
术语“治疗”是指对受试者施用或应用一种治疗试剂，或在受试对象上施行一种步骤或模式，其目的为获得一种疾病或健康相关状况的治疗收益，例如本文中可有效改善正痘病毒感染所引起的内在病理情况和临床表现。
术语“预防”意为任意程度地降低或完全抑制以实现预期结果。例如，与正常相比，活性或症状程度可以降低5％、10％、20％、30％、50％、75％、90％、99％或更多，或者此处涵盖的任一范围。
术语“治疗有效量”意为有效产生理想治疗效果的化合物的量。根据化合物、症状及其严重程度、被治疗哺乳动物的年龄，达到“治疗有效”的本发明公开化合物的量也会随之变化，但可由本领域普通技术人员根据其知识结合本发明公开内容惯常地确定用量。
术语“活性成分”指单独给药或与一种或多种药学可接受的载体和/或赋形剂组合给药至对象以治疗和/或预防和/或改善一种或多种症状的化合物。
具体实施方式
除非另外定义，本发明中所有的技术和科学术语与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的含义一致。按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其他多种形式的修改、替换或变更。
实施例1：(1-((十六烷氧基)甲基)环丙基)甲基氢((((S)-1-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-3-羟基丙-2-基)氧基)甲基)膦酸酯
步骤1：将1-十六烷醇1a(20g,82.51mmol)和DIPEA(21.3g,165.02mmol)溶于100mL二氯甲烷中，滴加甲基磺酰氯(11.3g,99.01mmol)后室温搅拌过夜。TLC监测反应完成，加水淬灭后二氯甲烷萃取，有机相经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后减压浓缩，残余物经硅胶柱层析(PE:EA＝5:1)分离纯化得产物1b(21g,65.52mmol,79.4％yield)。
步骤2：将1b(7.5g,23.40mmol)溶于50mL DMF中，冰浴下分批加入NaH(2.34g,58.5mmol)，在此温度下继续搅拌30min，然后加入1,1-环丙烷二甲醇(10.95g,117.01mmol)，缓慢升至室温搅拌过夜。TLC监测反应完成，加水淬灭后乙酸乙酯萃取，有机相经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后减压浓缩，残余物经硅胶柱层析(PE:EA＝5:1)分离纯化得产物1c(3.1g,9.49mmol,40.6％yield)。
步骤3：将(二乙氧基磷酰基)4-甲基苯磺酸甲酯1d(1.2g,3.72mmol)溶于12mL无水乙腈，氮气置换3次，然后加入三甲基溴硅烷(2.0g,13.07mmol)，升温至55℃搅拌3h。TLC监测反应完成，将反应液减压浓缩得产物1e未经分离直接投入下一步反应。
步骤4：将上一步1e(0.99g,3.72mmol)溶于20mL二氯甲烷中，室温条件下加入草酰氯(2.0g，13.02mmol)和DMF(30mg,0.37mmol)，室温搅拌过夜。TLC监测反应完成，将反应液减压浓缩得产物1f未经分离直接投入下一步反应。
步骤5：将上一步1f(1.1g,3.63mmol)和1c(1.1g,3.37mmol)溶于20mL二氯甲烷中，冰浴下缓慢加入无水吡啶(0.8g,9.91mmol)，然后缓慢升至室温搅拌3h。TLC监测反应完成，加入饱和碳酸氢钠溶液直至没有气泡产生，并继续搅拌1h。然后加入6N HCl调节pH至2～3，二氯甲烷萃取，有机相经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后减压浓缩，残余物经硅胶柱层析(DCM:MeOH＝10:1)分离纯化得产物1g(0.6g,1.04mmol,28.8％yield)。
步骤6：将胞嘧啶1h(10.0g,90.01mmol)和三乙胺(4.6g,45mmol)依次加入200mLDMSO中，升温至100℃搅拌1.5h，直至反应液澄清。然后加入苯甲酰氰(16g,122.04mmol)，置于80℃搅拌过夜。次日反应液变浑浊，抽滤，滤饼依次用水和乙醇洗涤，干燥得产物1i(14.7g,68.31mmol,75.9％yield)。
步骤7：将1i(6.0g,24.88mmol)，(S)-2-((三苯甲基氧基)甲基)环氧乙烷1j(9.69g,30.67mmol)和碳酸钾(0.77g,5.58mmol)依次加入60mL DMF中，氮气置换3次，升温至110℃搅拌过夜。TLC监测反应完成，加水淬灭后乙酸乙酯萃取，有机相经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后减压浓缩，残余物经硅胶柱层析(EA:PE＝5:1)分离纯化得产物1k(3.8g,7.15mmol,25.6％yield)。MS Calcd:531.61；MS Found:532.20([M+H]+).
步骤8：将1k(0.43g,0.75mmol)，1g(0.4g,0.77mmol)和叔丁醇镁(0.51,3.0mmol)依次加入5mL DMF中，氮气置换3次，升温至100℃搅拌过夜。TLC监测反应完成，加入0.5NHCl溶液淬灭，乙酸乙酯萃取，有机相经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后减压浓缩，残余物经硅胶柱层析(DCM:MeOH＝10:1)分离纯化得产物1l(0.17g,0.18mmol,24.3％yield)。MSCalcd:933.51；MS Found:932.60([M-H]-).
步骤9：将1l(0.17g,0.18mmol)置于圆底烧瓶中，冰浴下加入3mL盐酸甲醇溶液，继续搅拌3h。TLC监测反应完成，将反应液浓缩得产物1m未经分离直接投入下一步反应。MSCalcd:691.85；MS Found:692.38([M+H]+).
步骤10：将1m(0.12g,0.17mmol)置于圆底烧瓶中，加入4mL氨水，室温下搅拌48h。LCMS监测反应完成，将反应液浓缩后通过高压制备纯化(0.5％碳酸氢铵水溶液：乙腈)得产物(1-((十六烷氧基)甲基)环丙基)甲基氢((((S)-1-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-3-羟基丙-2-基)氧基)甲基)膦酸酯(化合物1)(10mg,0.02mmol,9.8％yield)。MS Calcd:587.74；MS Found:588.41([M+H]+).
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.53(d,J＝7.2Hz,1H),7.17(s,2H),5.64(d,J＝7.2Hz,1H),3.83(t,J＝9.0Hz,1H),3.69–3.51(m,6H),3.48-3.20(m,5H),1.53–1.41(m,2H),1.25(s,28H),0.87(t,J＝6.6Hz,3H),0.45(s,2H),0.37(s,2H).
实施例2：(1-(((十六烷基-16,16,16-d3)氧基)甲基)环丙基)甲基氢((((S)-1-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-3-羟基丙-2-基)氧基)甲基)膦酸酯
步骤1：将十六烷-16,16,16-d3-1-醇2a(1.1g,4.48mmol)，咪唑(0.46g,6.72mmol)和三苯基膦(1.76g,6.72mmol)依次加入20mL二氯甲烷中，冰浴下分批加入碘(1.7g,6.72mmol)，升至室温搅拌过夜。TLC监测反应完成，将反应液浓缩，残余物经硅胶柱层析(纯PE)分离纯化得产物2b(1.3g,3.66mmol,81.6％yield)。
步骤2：将2b(1.3g,3.66mmol)和1,1-环丙烷二甲醇(1.43g,14.01mmol)溶于10mLDMSO和THF(1:1)混合溶液中，加入NaOH(0.75g,18.68mmol)，室温搅拌过夜。TLC监测反应完成，加水淬灭后用2N HCl调至中性，乙酸乙酯萃取，有机相经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后减压浓缩，残余物经硅胶柱层析(PE:EA＝5:1)分离纯化得产物2c(1.0g,3.03mmol,83％yield)。
步骤3：将1f(1.1g,3.63mmol)和2c(1.0g,3.03mmol)溶于20mL二氯甲烷中，冰浴下缓慢加入无水吡啶(0.8g,9.91mmol)，然后缓慢升至室温搅拌3h。TLC监测反应完成，加入饱和碳酸氢钠溶液直至没有气泡产生，并继续搅拌1h。然后加入6N HCl调节pH至2～3，二氯甲烷萃取，有机相经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后减压浓缩，残余物经硅胶柱层析(DCM:MeOH＝10:1)分离纯化得产物2d(1.02g,1.77mmol,83.5％yield)。
步骤4：将1k(0.48g,0.9mmol)，2d(0.52g,0.9mmol)和叔丁醇镁(0.46,3.0mmol)依次加入5mL DMF中，氮气置换3次，升温至100℃搅拌过夜。TLC监测反应完成，加入0.5N HCl溶液淬灭，乙酸乙酯萃取，有机相经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后减压浓缩，残余物经硅胶柱层析(DCM:MeOH＝10:1)分离纯化得产物2e(0.16g,0.17mmol,19％yield)。MSCalcd:936.52；MS Found:935.11([M-H]-).
步骤5：将2e(0.16g,0.17mmol)置于圆底烧瓶中，冰浴下加入3mL盐酸甲醇溶液，继续搅拌3h。TLC监测反应完成，将反应液浓缩得产物2f未经分离直接投入下一步反应(0.12g,0.18mmol,98％yield)。MS Calcd:694.41；MS Found:695.46([M+H]+).
步骤6：将2f(0.12g,0.18mmol)置于圆底烧瓶中，然后加入4mL氨水，室温下搅拌48h。LCMS监测反应完成，将反应液浓缩后通过高压制备纯化(0.5％碳酸氢铵水溶液：乙腈)得产物(1-(((十六烷基-16,16,16-d3)氧基)甲基)环丙基)甲基氢((((S)-1-(4-氨基-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-3-羟基丙-2-基)氧基)甲基)膦酸酯(化合物2)(11mg,0.02mmol,10.3％yield)。MS Calcd:590.39；MS Found:591.48([M+H]+).
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.52(d,J＝6.0Hz,1H),7.44–7.04(m,6H),5.63(d,J＝6.2Hz,1H),3.80(d,13.0Hz,1H),3.59-3.35(m,6H),1.48(s,2H),1.25(broad s,28H),0.44(t,2H),0.36(t,2H).
实施例3：3-(十六烷氧基)丙基氢(((S)-1-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-3-羟基丙烷-2-基)氧基)甲基)膦酸酯
步骤1：将1f(1.52g,5.02mmol)和3a(1.08g,3.61mmol)溶于15mL二氯甲烷中，冰浴下缓慢加入无水吡啶(1.62mL,20.08mmol)，然后缓慢升至室温搅拌2h。TLC监测反应完成，加入饱和碳酸氢钠溶液直至没有气泡产生，并继续搅拌1h。然后加入6N HCl调节pH至2～3，二氯甲烷萃取，有机相经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后减压浓缩，残余物经硅胶柱层析(DCM:MeOH＝10:1)分离纯化得产物3b(1.22g,1.78mmol，39.4％yield)。MS Calcd:548.29；MS Found:549.29([M+H]+)。
步骤2：将5-氟胞嘧啶3c(5g,38.73mmol)溶于100mL DMSO中，加入三乙胺(2.68mL,19.36mmol)，升温至100℃搅拌1h。然后加入苯甲酰腈(6.6g,50.35mmol)，加完后LC-MS监测，原料消失，有部分产物，且有副产物生成，将反应液倒入水中，抽滤，滤液用乙酸乙酯萃取，二氯甲烷萃取，有机相经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后减压浓缩得到产物3d(2.2g,5.66mmol，14.7％yield)。MS Calcd:233.06；MS Found:234.06([M+H]+)。
步骤3：将3d(2g,5.14mmol)，(S)-2-((三苯甲基氧基)甲基)环氧乙烷1j(2.2g,6.86mmol)和碳酸钾(2.1g,15.42mmol)依次加入15mL DMF中，氮气置换3次，升温至110℃搅拌过夜。TLC监测反应完成，加水淬灭后乙酸乙酯萃取，有机相经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后减压浓缩，残余物经硅胶柱层析(PE:EA＝3:1)分离纯化得产物3e(0.9g,1.47mmol,17.2％yield)。MS Calcd:549.21；MS Found:550.16([M+H]+)。
步骤4：将3b(0.30g,0.55mmol)，3e(0.25g,0.45mmol)和叔丁醇镁(0.23g,1.36mmol)依次加入5mL DMF中，氮气置换3次，升温至100℃搅拌过夜。TLC监测反应完成，加入饱和氯化铵溶液淬灭，1N稀盐酸调节pH到4-5，乙酸乙酯萃取，有机相经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后减压浓缩，残余物经硅胶柱层析(DCM:MeOH＝10:1)分离纯化得产物3f(80mg,0.07mmol,15.2％yield)。MS Calcd:925.48；MS Found:924.48([M-H]-)。
步骤5：将3f(80mg,0.07mmol)置于圆底烧瓶中，冰浴下加入3mL盐酸甲醇溶液，继续搅拌2h。TLC监测反应完成，将反应液浓缩得产物3g未经分离直接投入下一步反应。MSCalcd:683.37；MS Found:684.41([M+H]+)。
步骤6：将3g(41mg,0.06mmol)置于圆底烧瓶中，然后加入4mL氨水，室温下搅拌过夜。LCMS监测反应完成，将反应液浓缩后通过高压制备纯化(0.5％碳酸氢铵水溶液：乙腈)得产物3-(十六烷氧基)丙基氢(((S)-1-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-3-羟基丙烷-2-基)氧基)甲基)膦酸酯(化合物3)(5mg,0.01mmol,14.4％yield)。MS Calcd:579.34；MS Found:580.34([M+H]+)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 7.79(d,J＝6.8Hz,1H),7.68–6.90(m,1H),3.91–3.82(m,3H),3.70–3.54(m,4H),3.49–3.20(m,4H,与水峰重叠),1.79–1.69(m,2H),1.52–1.41(m,2H),1.23(broad,s,28H),0.85(t,J＝6.4Hz,3H).
实施例4：(1-((十六烷氧基)甲基)环丙基)甲基氢(((S)-1-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-3-羟基丙烷-2-基)氧)甲基)膦酸酯
步骤1：将3e(250mg,0.45mmol)，1g(313.8mg,0.55mmol)和叔丁醇镁(232.7mg,1.36mmol)依次加入1.5mL DMF中，氮气置换3次，升温至100℃搅拌过夜。LCMS及TLC监测反应完成，加入饱和氯化铵溶液淬灭，1N稀盐酸调节pH到4-5，乙酸乙酯萃取，有机相经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后减压浓缩，残余物经硅胶柱层析(DCM:MeOH＝10:1)分离纯化得产物4a(97mg,0.101mmol,19.4％yield)。MS Calcd:951.50；MS Found:950.50([M-H]-)。
步骤2：将4a(97mg,0.101mmol)置于圆底烧瓶中，冰浴下加入4mL盐酸甲醇溶液，室温继续搅拌2h。LCMS监测反应完成，将反应液浓缩后通过高压制备纯化(0.5％碳酸氢铵水溶液：乙腈)得产物(1-((十六烷氧基)甲基)环丙基)甲基氢(((S)-1-(4-氨基-5-氟-2-氧代嘧啶-1(2H)-基)-3-羟基丙烷-2-基)氧)甲基)膦酸酯(化合物4)(15mg,0.024mmol,23.5％yield)。MS Calcd:605.36；MS Found:606.37([M+H]+)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 7.84–7.74(m,1H),7.67–7.00(m,1H),3.91–3.10(m,11H),1.53–1.40(m,2H),1.23(broad,s,28H),0.85(t,J＝6.2Hz,3H),0.47(s,2H),0.39(s,2H).
实施例5：受试化合物对痘苗病毒(Vaccinia virus)引起的HFF细胞病变效应的抑制活性
一、化合物稀释：
先用DMSO将2000μM化合物母液5倍梯度稀释8个浓度点，得到2000、400、80、16、3.2、0.64、0.128、0.0256μM化合物，然后用培养基将化合物再分别稀释50倍到终浓度为40、8、1.6、0.32、0.064、0.0128、0.00256、0.000512μM。
二、实验步骤：
①细胞病变实验：第一天，将HFF-1细胞(美国菌种保藏中心，ATCC，货号SCRC-1041TM)以每孔6,000个细胞，每孔100μL的密度接种到96孔板中，并于5％CO2、37℃培养箱中培养过夜。第二天，分别加入50μL(1)中稀释后的化合物(双复孔)和每孔50μL VacciniaVirus VP13病毒株(中国典型培养物保藏中心，CCTCC，货号GDV088)，病毒接种量为0.1pfu/个细胞(即MOI＝0.1)。设置细胞对照(细胞，无化合物处理或病毒感染)，病毒对照(细胞感染病毒，无化合物处理)和培养液对照(只有培养液)。每孔中细胞培养液总体积为200μL，培养液中DMSO的终浓度为0.5％。将细胞放于5％CO2、37℃培养箱中继续培养4天检测病毒引起的细胞病变效应。②细胞毒性实验：同步开展的化合物细胞毒性实验不加入病毒感染，其他条件与细胞病变实验相同。第六天，两个实验均使用细胞活力CCK8检测试剂盒(上海李记生物科技有限公司，货号AC11L057)检测细胞活力。
三、数据分析：
受试化合物的抗病毒活性和细胞毒性分别由不同浓度下的病毒对病毒引起的细胞病变效应的抑制率(％)和细胞的活率(％)表示。计算公式如下：细胞病变效应抑制率(％)＝(化合物测试孔读值-病毒对照平均值)/(细胞对照平均值-病毒对照平均值)×100％；
细胞活率(％)＝(测试孔读值-培养液对照平均值)/(细胞对照平均值-培养液对照平均值)×100％；使用GraphPad Prism对样品的抑制率和细胞活率进行非线性拟合分析，计算样品的半数有效浓度(EC50)和半数细胞毒性浓度(CC50)值。抑制曲线拟合方法为log(inhibitor)vs.response--Variable slope。
表1：受试化合物对痘苗病毒(Vaccinia virus)引起的细胞病变效应的抑制活性
根据表1可知，本发明代表化合物1、化合物2和化合物3对正痘病毒属的痘苗病毒具有优异的抗病毒活性，且对细胞无明显毒性。并且，与阳性药物Brincidofovir相比，化合物1和化合物3的抗病毒活性更好。
实施例6：受试化合物对痘苗病毒(Vaccinia virus)引起的HFF细胞病变效应的抑制活性
一、化合物稀释：
先用含40μM HSA的培养基溶解化合物，得到储存浓度为200μM的化合物溶液。然后用培养基将200μM的化合物溶液稀释20倍，得到第一个检测浓度10μM。从10μM开始用含2μMHSA的培养基进行5倍梯度稀释，依次得到2，0.4，0.08，0.016，0.0032，0.001，0.0001μM测试浓度的化合物溶液。
二、实验步骤：
①细胞病变实验：第一天，将HFF-1细胞(美国菌种保藏中心，ATCC，货号SCRC-1041TM)以每孔6,000个细胞，每孔100μL的密度接种到96孔板中，并于5％CO2、37℃培养箱中培养过夜。第二天，分别加入50μL(1)中稀释后的化合物(双复孔)和每孔50μL VacciniaVirus VP13病毒株(中国典型培养物保藏中心，CCTCC，货号GDV088)，病毒接种量为0.1pfu/个细胞(即MOI＝0.1)。设置细胞对照(细胞，无化合物处理或病毒感染)，病毒对照(细胞感染病毒，无化合物处理)和培养液对照(只有培养液)。每孔中细胞培养液总体积为200μL，培养液中HSA的终浓度为2μM。将细胞放于5％CO2、37℃培养箱中继续培养4天检测病毒引起的细胞病变效应。②细胞毒性实验：同步开展的化合物细胞毒性实验不加入病毒感染，其他条件与细胞病变实验相同。第六天，两个实验均使用细胞活力CCK8检测试剂盒(上海李记生物科技有限公司，货号AC11L057)检测细胞活力。
三、数据分析：
受试化合物的抗病毒活性和细胞毒性分别由不同浓度下的化合物对病毒引起的细胞病变效应的抑制率(％)和细胞的活率(％)表示。计算公式如下：细胞病变效应抑制率(％)＝(化合物测试孔读值-病毒对照平均值)/(细胞对照平均值-病毒对照平均值)×100％；
细胞活率(％)＝(测试孔读值-培养液对照平均值)/(细胞对照平均值-培养液对照平均值)×100％；使用GraphPad Prism对样品的抑制率和细胞活率进行非线性拟合分析，计算样品的半数有效浓度(EC50)和半数细胞毒性浓度(CC50)值。抑制曲线拟合方法为log(inhibitor)vs.response--Variable slope。
表2.受试化合物对痘苗病毒(Vaccinia virus)引起的细胞病变效应的抑制活性
根据表2可知，本发明的化合物对正痘病毒属的痘苗病毒具有优异的抗病毒活性，且对细胞无明显毒性。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (11)

1.一种式(I)所示的化合物，或其异构体、晶型、溶剂化物、药学上可接受的盐或代谢物：
其中，R1和R2各自独立地选自氢、氘或卤素；
R3和R4各自独立地选自氢、氘、被任选取代基取代或未被取代的烷基；或所述R3和R4与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代多元环状基团；
R5和R6各自独立地选自氢、氘、被任选取代基取代或未被取代的烷基；或所述R5和R6与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代多元环状基团；
R7、R8、R9和R10各自独立地选自氢、被任选取代基取代或未被取代的烷基；或所述R7和R8与它们所连接的碳原子一起形成多元环状基团；或所述R9和R10与它们所连接的碳原子一起形成多元环状基团；或所述R7和R9与它们所连接的碳原子一起形成多元环状基团；或所述R8和R10与它们所连接的碳原子一起形成多元环状基团；其中，所述多元环状基团可被任选取代基取代或未被取代；
3个R11各自独立地选自氢、氘；
m、n各自独立地选自0-13中的任意值；
优选地，式(I)所示化合物不包括如下结构：
2.根据权利要求1所述的化合物，或其异构体、晶型、溶剂化物、药学上可接受的盐或代谢物，其特征在于：
R1选自氢、氘或卤素，R2选自氢或卤素；
优选地，R1和R2均为氢；或R1为氘、R2为氢；或R1为卤素、R2为氢；或R1为氢、R2为卤素；
更优选地，R1为氟、R2为氢；或R1为氢、R2为氟；
其中，所述卤素选自氟、氯、溴、碘。
3.根据权利要求1所述的化合物，或其异构体、晶型、溶剂化物、药学上可接受的盐或代谢物，其特征在于：
R3、R4、R5和R6各自独立地选自氢、氘、被任意取代基取代或未被取代的C1-6烷基；所述C1-6烷基包括支链或直链的C1-6烷基；优选地，所述C1-6烷基包括支链或直链的C1-5烷基、C2-5烷基、C2-6烷基、C3-6烷基、C3-5烷基、C4-6烷基；更优选地，所述C1-6烷基选自甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、3-戊基、己基；
或R3和R4与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-7元环；或R5和R6与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-7元环；所述3-7元环包括饱和或部分饱和的3-7元环；优选地，所述3-7元环包括饱和或部分饱和的3-6元环、3-5元环、4-6元环、3-4元环；更优选地，所述3-7元环选自环丙烷、环丁烷、环戊烷、环戊烷、环己烷、环庚烷、环戊烯烷、环庚烯烷和环辛烯烷；
优选地，R3、R4均为氢；R5和R6均为氢，或R5和R6与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代3-6元环；
更优选地，R3、R4均为氢；R5和R6均为氢，或R5和R6与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代3-5元环；
还要优选地，R3、R4均为氢；R5和R6均为氢，或R5和R6与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代3-4元环；
最优选地，R3、R4均为氢；R5和R6均为氢，或R5和R6与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代环丙烷；
优选地，所述C1-6烷基、3-7元环、3-6元环、3-5元环、4-6元环、3-4元环、环丙烷的取代基选自C1-8烷基、卤素、-OH、C1-8烷氧基、-NH2、C3-8环烷基、C1-8卤代烷基。
4.根据权利要求1所述的化合物，或其异构体、晶型、溶剂化物、药学上可接受的盐或代谢物，其特征在于：
R7、R8、R9和R10各自独立地选自氢、被任意取代基取代或未被取代的C1-6烷基；其中，所述C1-6烷基包括支链或直链的C1-6烷基；优选地，所述C1-6烷基包括支链或直链的C1-5烷基、C2-5烷基、C2-6烷基、C3-6烷基、C3-5烷基、C4-6烷基；更优选地，所述C1-6烷基选自甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、3-戊基、己基；
或所述R7和R8与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-7元环；或所述R9和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代3-7元环；或R7和R9与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-7元环；或R8和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-7元环；其中，所述3-7元环包括饱和或部分饱和的3-7元环；优选地，所述3-7元环包括饱和或部分饱和的3-6元环、3-5元环、4-6元环、3-4元环；更优选地，所述3-7元环选自环丙烷、环丁烷、环戊烷、环戊烷、环己烷、环庚烷、环戊烯烷、环庚烯烷和环辛烯烷；
优选地，R7、R8均为氢，或R7和R8与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-6元环；
R9和R10均为氢，或R9和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代3-6元环；
R7和R9均为氢，或R7和R9与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-6元环；
R8和R10均为氢，或R8和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-6元环；
更优选地，R7、R8均为氢，或R7和R8与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-5元环；
R9和R10均为氢，或R9和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代3-5元环；
R7和R9均为氢，或R7和R9与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-5元环；
R8和R10均为氢，或R8和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-5元环；
还要优选地，R7、R8均为氢，或R7和R8与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-4元环；
R9和R10均为氢，或R9和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代3-4元环；
R7和R9均为氢，或R7和R9与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-4元环；
R8和R10均为氢，或R8和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的3-4元环；
最优选地，R7、R8均为氢，或R7和R8与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的环丙烷；
R9和R10均为氢，或R9和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代环丙烷；
R7和R9均为氢，或R7和R9与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的环丙烷；
R8和R10均为氢，或R8和R10与它们所连接的碳原子一起形成被任选取代基取代或未被取代的环丙烷；
最优选地，R7、R8均为氢，R9和R10均为氢；
最优选地，R7、R8均为氢，R9和R10与它们所连接的碳原子一起形成环丙基；
最优选地，R9、R10均为氢，R7和R8与它们所连接的碳原子一起形成环丙基；
优选地，所述C1-6烷基、3-7元环、3-6元环、3-5元环、3-4元环、环丙烷的取代基选自C1-8烷基、卤素、-OH、C1-8烷氧基、-NH2、C3-8环烷基、C1-8卤代烷基。
5.根据权利要求1所述的化合物，或其异构体、晶型、溶剂化物、药学上可接受的盐或代谢物，其特征在于：
3个R11中，至少有一个为氢；优选地，3个R11中，至少有两个为氢；更优选地，3个R11中均为氢；
或3个R11中，至少有一个为氘；优选地，3个R11中，至少有两个为氘；更优选地，3个R11中均为氘。
6.根据权利要求1所述的化合物，或其异构体、晶型、溶剂化物、药学上可接受的盐或代谢物，其特征在于：m与n之和的范围为10～20；
优选地，m与n之和的范围为10～15；
更优选地，m与n之和的范围为11～14；
还要优选地，m与n之和为13。
7.如权利要求1-6中任一项所述的化合物，或其异构体、晶型、溶剂化物、药学上可接受的盐或代谢物，其特征在于：式(I)所示化合物具有式(I-1)、(I-2)、(I-3)或(I-4)所示结构：
其中，R1、R2、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11以及m、n如式(I)所述定义。
8.根据权利要求1-7中任一项所述的化合物，或其异构体、晶型、溶剂化物、药学上可接受的盐或代谢物，其特征在于：
若R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11是氘，则R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11中的至少一个独立地具有不低于约98％的氘富集；
或R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11中的至少一个独立地具有不低于约90％的氘富集；
或R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11中的至少一个独立地具有不低于约50％的氘富集；
或R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11中的至少一个独立地具有不低于约20％的氘富集；
或R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11中的至少一个独立地具有不低于约10％的氘富集；
或R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11中的至少一个独立地具有不低于约5％的氘富集；
或R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11中的至少一个独立地具有不低于约1％的氘富集。
9.根据权利要求1-8中任一项所述的化合物，或其异构体、晶型、溶剂化物、药学上可接受的盐或代谢物，其特征在于：式(I)所示化合物选自下述具体化合物：
10.一种药物组合物，其包含如权利要求1-9中任一项所述的化合物，或其异构体、晶型、溶剂化物、药学上可接受的盐或代谢物，以及药学上可接受的辅助性成分。
11.一种如权利要求1-9中任一项所述的化合物，或其异构体、晶型、溶剂化物、药学上可接受的盐或代谢物，或权利要求10所述的药物组合物在制备预防和/或治疗正痘病毒感染药物中的应用；
优选地，所述正痘病毒选自猴痘病毒、天花病毒、牛痘病毒、马痘病毒和骆驼痘病毒。
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