[go: up one dir, main page]

CN116747221A - 一种抗菌组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

一种抗菌组合物及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN116747221A
CN116747221A CN202310979741.8A CN202310979741A CN116747221A CN 116747221 A CN116747221 A CN 116747221A CN 202310979741 A CN202310979741 A CN 202310979741A CN 116747221 A CN116747221 A CN 116747221A
Authority
CN
China
Prior art keywords
shikimic acid
antibiotics
drug
antibacterial composition
antibacterial
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202310979741.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN116747221B (zh
Inventor
郑晓峰
张卓慧
李丕顺
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hunan Agricultural University
Original Assignee
Hunan Agricultural University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hunan Agricultural University filed Critical Hunan Agricultural University
Priority to CN202310979741.8A priority Critical patent/CN116747221B/zh
Publication of CN116747221A publication Critical patent/CN116747221A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN116747221B publication Critical patent/CN116747221B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/429—Thiazoles condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/43—Compounds containing 4-thia-1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula, e.g. penicillins, penems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
    • A61K31/542—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/545—Compounds containing 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. cephalosporins, cefaclor, or cephalexine
    • A61K31/546—Compounds containing 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. cephalosporins, cefaclor, or cephalexine containing further heterocyclic rings, e.g. cephalothin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明属于抗菌技术领域，具体涉及一种抗菌组合物及其制备方法和应用。本发明的抗菌组合物包括以下重量份的组分：抗生素8～32份和莽草酸312～625份。本发明提供的抗菌组合物以天然的中药提取物莽草酸联合抗生素抑制或杀灭耐药菌，可以显著降低抗生素的用量，减少不良反应和副作用，提高用药的安全性，而且莽草酸与抗生素可产生明显的协同作用，对金黄色葡萄球菌或大肠杆菌等耐药菌有显著的抑制作用。且实施例表明，本发明筛选出了对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌体外抑菌作用较强的中药提取物‑莽草酸，当采用莽草酸和头孢噻呋钠联合用药时，最快可在2小时内杀灭耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，效果显著优于莽草酸和头孢噻呋钠各自单独用药。

Description

一种抗菌组合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于抗菌技术领域，具体涉及一种抗菌组合物及其制备方法和应用。
背景技术
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是引起心内膜炎、菌血症、肺炎以及皮肤和软组织感染等一系列疾病的细菌，目前主要以青霉素、头孢菌素、红霉素、林可霉素、克林霉素等抗生素治疗杀灭。但随着抗生素的过度使用，细菌在巨大的选择压力下出现了各种不同的耐药机制，这些耐药机制最终导致了超级细菌的出现。
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)是金黄色葡萄球菌中常见的多重耐药且高毒性致病菌。自从1961年在英国首次发现以来，MRSA已经蔓延到世界各地，并已成为导致社区获得性和医疗保健相关感染的最重要病原体之一。耐药菌的传播不仅使得人们的死亡率急剧上升，还威胁到了经济动物，如牛、羊、猪和鸡，给农业生产带来了巨大的经济损失。在后抗生素时代，抗菌药物的研发速度远远低于细菌耐药性的产生及传播速度。对此，人们提出了联合用药来对抗耐药菌。
中药作为一类天然药物，其中存在着大量的潜在抗菌佐剂，这些化合物具有广泛的分布、新颖的结构以及良好的生物安全性，但直接杀菌活性较弱，很少对细菌产生生存压力，因此可以在一定程度上控制细菌种群中耐药基因的频率。中药提取物与抗生素联合使用可以有效对抗耐药菌，但还是以抗生素起主要杀灭作用，进而会导致一些不良反应和副作用，安全性不高。
因此，目前亟需一种可减少抗生素用量或降低抗生素带来的不良反应和副作用的抗菌组合物。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种抗菌组合物，以药食同源的中药提取物莽草酸联合抗生素抑制或杀灭耐药菌，可以显著降低抗生素的用量，减少不良反应和副作用，提高用药的安全性，而且莽草酸与抗生素可产生明显的协同作用，对金黄色葡萄球菌或大肠杆菌等耐药菌有显著的抑制作用。
为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
本发明提供了一种抗菌组合物，包括以下重量份的组分：抗生素8～32份和莽草酸312～625份。
优选的，所述抗生素包括β-内酰胺类抗生素。
优选的，所述β-内酰胺类抗生素包括青霉素、氨苄西林、阿莫西林或头孢噻呋。
优选的，所述头孢噻呋包括头孢噻呋钠。
本发明提供了上述技术方案所述抗菌组合物的制备方法包括：将抗生素和莽草酸混合，得到所述抗菌组合物。
本发明还提供了上述技术方案所述抗菌组合物在制备抗菌药物中的应用。
优选的，所述菌包括耐药菌。
优选的，所述耐药菌包括金黄色葡萄球菌和/或大肠杆菌。
优选的，所述金黄色葡萄球菌包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。
本发明还提供了一种抗菌药物，所述抗菌药物的有效成分包括上述技术方案所述抗菌组合物。
有益效果：
本发明提供了一种抗菌组合物，包括抗生素和莽草酸，莽草酸作为一种天然的中药提取物，与抗生素联合用药可以产生显著的协同作用，减少抗生素的用量，减少不良反应和副作用，提高用药的安全性，而且对金黄色葡萄球菌或大肠杆菌等耐药菌可产生显著的抑制作用。根据实施例的记载可知，本发明从药食同源中药提取物入手，通过制备生长曲线和肉汤微量稀释棋盘法试验，筛选出了对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌体外抑菌作用较强的中药提取物单体-莽草酸，当采用该提取物和头孢噻呋钠联合用药时，最快在2小时内杀灭耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)，效果显著优于莽草酸和头孢噻呋钠各自单独用药。
本发明提供的抗菌组合物可用于制备具有抗菌作用的药物中，有望对头孢噻呋钠治疗重症感染疾病研制新的辅助药提供参考，提高其治疗效益，并为解决头孢噻呋钠日趋严重的耐药问题提供了新的研究思路和研发方向。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。
图1为实施例1中1/4MIC的头孢噻呋钠和不同浓度SA联用的杀菌曲线图；
图2为实施例1中1/8MIC的头孢噻呋钠和不同浓度SA联用的杀菌曲线图；
图3为实施例2中不同浓度SA对细胞存活率的影响图；
图4为实施例3中不同处理对感染MRSA小鼠模型存活率的影响图；
图5为实施例4中不同处理后的感染MRSA小鼠模型肝组织载菌量在24h、48h和72h时的结果图；
图6为实施例4中不同处理后的感染MRSA小鼠模型脾组织载菌量在24h、48h和72h时结果图；
图7为实施例4中不同处理后的感染MRSA小鼠模型肾组织载菌量在24h、48h和72h时结果图；
图8为实施例5中分别施用150、100和75mg/kg小鼠体重剂量的SA后小鼠存活情况图；
图9为实施例6中不同处理后感染MRSA小鼠模型肝组织切片图，对照组(左上)，注射MRSA组(右上)，注射CF组(左下)，注射CF+SA组(右下)；
图10为实施例7中不同处理后感染MRSA小鼠模型脾组织切片图，对照组(左上)，注射MRSA组(右上)，注射CF组(左下)，注射CF+SA组(右下)；
图11为实施例8中不同处理后感染MRSA小鼠模型肾组织切片图，对照组(左上)，注射MRSA组(右上)，注射CF组(左下)，注射CF+SA组(右下)。
具体实施方式
本发明提供了一种抗菌组合物，包括以下重量份的组分：抗生素8～32份和莽草酸312～625份。
以重量份数计，本发明所述抗菌组合物包括抗生素8～32份，优选为8～16份，进一步优选为8份。本发明所述抗生素优选包括β-内酰胺类抗生素；所述β-内酰胺类抗生素优选包括青霉素、氨苄西林、阿莫西林或头孢噻呋，进一步优选为头孢噻呋，更优选为头孢噻呋钠。本发明对所述抗生素的来源并没有特殊限定，采用常规市售产品即可。
以所述抗生素的重量份为基准，本发明所述抗菌组合物包括莽草酸312～625份，优选为400～625份，进一步优选为500～625份，更优选为625份。本发明所述莽草酸优选为八角茴香提取物莽草酸。本发明所述莽草酸提高β内酰胺类抗生素的抗菌效力起到增效作用。本发明对所述八角茴香提取物莽草酸的来源并没有特殊限定，采用常规市售商品或自行制备均可。如在本发明具体的实施例中，所述莽草酸购自于四川恒瑞通达生物科技有限公司，产品编号为04020149。
本发明提供的抗菌组合物以莽草酸联合抗生素用药，可产生显著的协同作用，减少抗生素的用量，减少不良反应和副作用，提高用药的安全性，而且对金黄色葡萄球菌或大肠杆菌等耐药菌可产生显著的抑制作用。
本发明提供了上述技术方案所述抗菌组合物的制备方法，包括：将所述抗生素和莽草酸混合，得到所述抗菌组合物。本发明对所述混合的方式没有特殊限定，采用本领域常规混合方法混合均匀即可。
本发明还提供了上述技术方案所述抗菌组合物在制备抗菌药物中的应用。在本发明中，所述菌优选包括耐药菌；本发明所述耐药菌优选包括金黄色葡萄球菌和/或大肠杆菌，进一步优选为金黄色葡萄球菌，更优选为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。本发明所述耐甲氧西林金黄色葡萄球菌优选为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌标准菌ATCC33591。
本发明还提供了一种抗菌药物，所述抗菌药物的有效成分包括上述技术方案所述抗菌组合物。
本发明提供的抗菌组合物可用于制备具有抗菌作用的药物，有望对头孢噻呋钠治疗重症感染疾病研制新的辅助药提供参考，提高其治疗效益，并为解决头孢噻呋钠日趋严重的耐药问题提供了新的研究思路和研发方向。
为了进一步说明本发明，下面结合附图和实施例对本发明提供的抗菌组合物进行详细地描述，但不能将它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
莽草酸SA和β-内酰胺类抗生素对MRSA标准菌株ATCC33591的抗菌作用
单药最小抑菌浓度(MIC)的测定
以MRSA标准菌株ATCC33591为研究对象，采用美国临床实验室标准化委员会(CLSI)推荐的微量肉汤稀释法测定各单药的MIC值。
菌悬液的制备：将已复苏好的ATCC33591划线接种于脑心浸液琼脂上，37℃恒温培养24h后，挑取单克隆菌落于MH肉汤中，37℃振荡培养8h。用空白MH稀释培养菌液使其浊度达0.5麦氏比浊度(菌液浓度约108CFU/mL)，再将该菌液稀释1000倍，作为测试菌液，终浓度为105CFU/mL。
微量肉汤稀释法检测：将测试药物(莽草酸SA、青霉素、氨苄西林、阿莫西林和头孢噻呋钠)的储备液稀释至一定的高浓度，倍比稀释成5mg/mL、2.5mg/mL、1.25mg/mL、0.625mg/mL、0.3125mg/mL以此类推的10个浓度(第1孔至第10孔)每孔100μL，并将上述菌悬液加入1-10孔中(为防止高浓度药物污染低浓度，加样顺序为低浓度加至高浓度)。每次实验设两组对照：第11孔为测试菌液对照即阳性对照，第12孔为肉汤空白对照即阴性对照。置于恒温37℃下培养24h后，观察结果。
结果判定：以无肉眼观察到细菌生长的最小浓度为该药的MIC，并且此时阳性对照有菌生长，而阴性对照则仍为澄清才可判定结果有效，否则无效须重做。每种药做两排平行，且重复两次。莽草酸(SA)、青霉素(Penicillin)、氨苄西林(Ampicillin)、阿莫西林(Amoxicillin)和头孢噻呋钠(Ceftiofur，简称CF)的MIC检测结果可见表1。
联合用药实验
联合药敏试验采用棋盘法进行，以莽草酸SA和各β-内酰胺类抗生素单药的MIC试验结果为依据，肉汤稀释棋盘法设计两药2倍、1倍、1/2倍、1/4倍、1/8倍和1/16倍MIC进行6×6联合，将莽草酸和各抗生素用MH肉汤稀释至特定的药物浓度加至96孔板各孔中。此外同时做两单药的单独MIC、阴性(仅加肉汤)和阳性孔(仅加肉汤和MRSA标准菌株ATCC33591菌液)做对照。菌悬液按照前面菌悬液的制备方法制备菌液，加入至96孔板的各孔中，并静置于37℃恒温培养箱中，24h小时后观察并记录结果，得到莽草酸SA和各β-内酰胺类抗生素共同作用下时的各自的联用MIC，再根据公式FICI＝(A药联用MIC/A药单用MIC)+(B药联用MIC/B药单用MIC)进行计算FICI。每次试验以金黄色葡萄球菌ATCC29213作为质控菌株。结果见表1。
表1SA与β内酰胺类抗生素联合抗MRSA作用
注：FICI≤0.5，为协同；0.5＜FICI＜1，为相加；1＜FICI＜2，为无关作用；FICI＞2，为拮抗。
由表1可见，经过测定，莽草酸SA对MRSA标准菌株ATCC33591的最小抑菌浓度为5mg/mL。此外，SA还表现出与其他β-内酰胺抗生素的协同作用。
SA与头孢噻呋钠联合作用下的细菌生长曲线
抗菌药物的配制：以MRSA标准菌株ATCC33591为研究对象，依据单药最小抑菌浓度(MIC)试验结果，将头孢噻呋钠和莽草酸储备液用MH肉汤释稀以下几个浓度：头孢噻呋钠1/4MIC，头孢噻呋钠1/8MIC，莽草酸1/8MIC，莽草酸1/16MIC，头孢噻呋钠1/4MIC+莽草酸1/8MIC，头孢噻呋钠1/4MIC+莽草酸1/16MIC，头孢噻呋钠莽草酸1/8MIC+莽草酸1/8MIC，头孢噻呋钠1/8MIC+莽草酸1/16MIC。
菌悬液的制备：用无菌棒挑取单个MRSA标准菌株ATCC33591菌落，接种至含无菌PBS的麦氏比浊管中，用麦氏比浊仪调到0.5麦氏比浊度，此时细菌浓度大约为108CFU/mL；再将该菌液稀释1000倍，作为测试菌液，终浓度为105CFU/mL。
生长曲线绘制：将上述抗菌药物组合每组设立三个平行，分别加入无菌96孔板中，96孔板中每组体积为100μL。最后每孔中加入上述菌悬液100μL，盖好96孔板盖，放置于恒温37℃的酶标仪中培养。在0-24h内，每隔一小时(24个时间点)在酶标仪600nm波长处测定菌液OD值。将所获得的的OD600值与对应的时间绘制出细菌的生长曲线图。结果见图1和图2。
由图1结果显示，单独使用1/8MIC的SA几乎没有抑菌效果；1/4MIC的头孢噻呋钠与1/16MIC的SA联合使用，在前12小时内金葡菌数量大幅度降低，并在18小时后持续作用；而1/4MIC的头孢噻呋钠与1/8MIC的SA处理后，在2小时内就可以完全杀死金葡菌ATCC33591。
由图2结果显示，单独使用1/8MIC的SA几乎没有抑菌效果；1/8MIC的头孢噻呋钠与1/16MIC的SA联合使用，在前8小时内金葡菌数量大幅度降低，并在10小时后持续作用；而1/8MIC的SA与1/8MIC的头孢噻呋钠处理后，在2小时内就可以完全杀死金葡菌ATCC33591。
实施例2
SA单独用药对牛乳腺上皮细胞(BMECs)的毒性实验
实验目的：验证SA对BMECs的毒性，确定药物的体内安全性。
实验方法：
(1)将BMECs按100000个/mL的密度接种到96孔板中，100μL/孔，5％CO2培养箱37℃培养24h。
(2)细胞长至约80％时，将96孔分为8组，分别加入添加了2.5mg/mL、1.875mg/mL、1.25mg/mL、0.625mg/mL、0.313mg/mL、0.156mg/mL、0.078mg/mL、0mg/mL SA的培养液(培养液成分：89％的1640，10％的胎牛血清，1％的青链霉素溶液)，100μL/孔，培养24h。
(3)每孔加入10μL的CCK-8试剂，培养1～4h。450nm检测波长，600nm参比波长。
(4)每组6个重复孔，设置空白对照组(无细胞，仅药物和CCK-8)
细胞存活率的计算公式如下：
细胞存活率(％)＝(ODDrug-ODBlank)/(ODControl-ODBlank)×100％。
ODDrug：药物(SA)组，ODBlank：空白对照组(加SA和CCK-8)，ODControl：不加药物(SA)组；结果见表2和图3。
表2不同浓度SA下细胞存活率结果
由表2和图3可见，经过各浓度的SA处理组与未加药对照组相比，SA≤0.625mg/mL显示对细胞活力无显著影响。
实施例3
MRSA高浓度致死模型
小鼠在适应性喂养一周后，50只6-8周BALB/c雌性小鼠以10只每组的数量被随机分成5组。1组为空白对照组，其他4组每只小鼠腹腔注射0.5mL的MRSA菌悬液(终浓度为7×108CFUs/只)。细菌感染2h后，空白对照组小鼠注射300μL的PBS缓冲液(pH值为7.4)，其他4组小鼠分别于腹腔注射300μL的PBS缓冲液(pH值为7.4)，记为MRSA组；300μL的SA(按小鼠体重注射50mg/kg)，记为SA组；300μL的头孢噻呋钠(按小鼠体重注射5mg/kg)，记为CF组；300μL的SA+头孢噻呋钠(按小鼠体重注射50mg/kg+5mg/kg)，记为SA+CF组。在给予抗菌药物治疗后，计算96h内每组小鼠的存活率。结果见表2和图4。
表2不同处理后感染MRSA小鼠模型存活率(％)
由表2和图4可见，在感染后48小时内，小鼠死亡率极高，MRSA组(未加药)，SA组，头孢噻呋钠组各组的死亡率达到了20％～50％，而联合组则有100％的存活率，明显高于其他组，表明SA与头孢噻呋钠联合可以明显提高菌血症感染小鼠的生存率。
实施例4
MRSA低浓度菌血症模型
小鼠在适应性喂养一周后，42只6～8周BALB/c雌性小鼠以7只每组的数量被随机分成6组。每只小鼠腹腔注射0.5mL的MRSA菌悬液(终浓度为1×108CFUs/只)建立MRSA低浓度菌血症模型。细菌感染2h后，6组小鼠分别于腹腔注射300μL的PBS缓冲液(pH值为7.4)，记为MRAS组；300μL的SA(按小鼠体重注射50mg/kg)，记为SA组；300μL的头孢噻呋钠(按小鼠体重注射5mg/kg)，记为CF组；300μL的SA+头孢噻呋钠(按小鼠体重注射50mg/kg+5mg/kg)，记为CF+SA1组；300μL的SA+头孢噻呋钠(按小鼠体重注射75mg/kg+5mg/kg)，记为CF+SA2组；300μL的SA+头孢噻呋钠(按小鼠体重注射100mg/kg+5mg/kg)，记为CF+SA3组。在24h，48h，72h时间点取各组小鼠肝、脾、肾组织采用平板菌落技术法进行菌落计数，具体步骤为：在24h，48h，72h时间点处死各组存活的小鼠，取其肝、脾、肾组织器官，称重，匀浆，然后用PBS将其进行10倍稀释成系列浓度：10-1，10-2，10-3等，选取合适的稀释浓度下的PBS液100μL，以无菌棒将其均匀涂布于MH琼脂平板上，37℃培养24h后观察结果，选择生长30～300个菌落的平皿进行菌落计数，结果见表3～表5和图5～图7。
表3肝组织在24h，48h，72h时间点的菌落计数结果(CFU)
表4脾组织在24h，48h，72h时间点的菌落计数结果(CFU)
MRSA CF SA CF+SA1 CF+SA2 CF+SA3
24h 1.2×107 9.1×105 7.5×105 6.0×105 6.9×105 4.4×104
48h 2.2×106 2.9×105 2.5×104 2.8×104 1.5×104 4.6×103
72h 4.0×105 5.7×104 7.0×104 2.1×104 8.4×103 6.7×103
表5脾组织在24h，48h，72h时间点的菌落计数结果(CFU)
MRSA CF SA CF+SA1 CF+SA2 CF+SA3
24h 1.6×107 6.6×105 3.6×106 1.0×105 8.3×104 2.0×104
48h 3.0×107 1.2×106 2.9×106 1.5×105 2.2×104 2.2×104
72h 4.3×105 6.7×104 7.0×104 1.0×104 1.7×104 1.0×104
由表2～表4和图5～图7可见，联合组相比于MRSA组，可大幅度降低肝脾肾组织载菌量，有着良好的治疗效果且呈剂量依赖性。联合组总体都优于SA组与头孢噻呋钠组，推断这可能是两者联合机制杀伤的效果。
实施例5
急性毒性实验
小鼠急性毒性试验参照《中国化学药物急性毒性研究指导原则》(H-GPT1-1)和欧洲化学品生态毒理学和毒理学中心进行。每组6只雌性BALB/c小鼠(6-8周龄，体重18-20g)腹腔注射莽草酸SA，剂量按小鼠体重分别注射150mg/kg、100mg/kg和75mg/kg。小鼠注射PBS作为对照组(Control)。观察各组小鼠72h的中毒症状、异常行为及存活情况。结果见图8。
由图8可见，各组小鼠在72h内均未出现中毒症状、异常行为，无死亡现象，表明150mg/kg对小鼠无影响，莽草酸具有较好的安全性。
实施例6
病理组织学检查
小鼠在适应性喂养一周后，28只6-8周BALB/c雌性小鼠以7只每组的数量被随机分成4组。一组为空白对照组，其他3组每只小鼠腹腔注射0.5mL的MRSA菌悬液(终浓度为1×108CFUs/只)。细菌感染2h后，3组小鼠分别于腹腔注射300μL的PBS缓冲液(pH值为7.4)，记为MRSA组；300μL的头孢噻呋钠(按小鼠体重注射5mg/kg)，记为CF组；300μL的SA+头孢噻呋钠(按小鼠体重注射75mg/kg+5mg/kg)，记为SA+CF组。给药量和给药方式与致死率实验相同，12h后再次给药。24h后，颈椎脱臼处死小鼠，无菌取出小鼠的肝脾肾，置于4％甲醛中固定。将肝脾肾组织依次进行脱水、石蜡包埋、切片、HE染色等程序，在光学显微镜下拍照并记录图片。结果见图9-11。
由图9可见，感染组出现肝脏病理变化如肝细胞高度水肿，呈气球样变，胞浆内出现大量小的空泡；治疗组得到了一些缓解；图10表明，感染组脾脏出现巨核细胞和中性粒细胞增多的病理变化，治疗组病变都得到了有效缓解；图11表明，感染组肾脏组织出现管腔内有大量均质红染液体的病理变化，治疗组病变都得到了有效缓解，尤其是联合治疗组的效果较为明显。
由以上实施例可知，本发明提供的抗菌组合物以天然的中药提取物莽草酸联合抗生素对耐药菌进行治疗杀灭，显著减少了抗生素的使用量，在杀灭耐药菌的同时，对肝脾肾等器官组织并没有明显的影响，副作用少，安全性高，且在适宜的浓度下联合用药，可在短时间内对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)产生显著的抑制杀灭作用。
尽管上述实施例对本发明做出了详尽的描述，但它仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部实施例，人们还可以根据本实施例在不经创造性前提下获得其他实施例，这些实施例都属于本发明保护范围。

Claims (10)

1.一种抗菌组合物，其特征在于，包括以下重量份的组分：抗生素8～32份和莽草酸312～625份。
2.根据权利要求1所述的抗菌组合物，其特征在于，所述抗生素包括β-内酰胺类抗生素。
3.根据权利要求2所述的抗菌组合物，其特征在于，所述β-内酰胺类抗生素包括青霉素、氨苄西林、阿莫西林或头孢噻呋。
4.根据权利要求3所述的抗菌组合物，其特征在于，所述头孢噻呋包括头孢噻呋钠。
5.权利要求1～4任一项所述的抗菌组合物的制备方法，其特征在于，包括：将抗生素和莽草酸混合，得到所述抗菌组合物。
6.权利要求1～4任一项所述的抗菌组合物或权利要求5所述的制备方法得到的抗菌组合物在制备抗菌药物中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述菌包括耐药菌。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述耐药菌包括金黄色葡萄球菌和/或大肠杆菌。
9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述金黄色葡萄球菌包括耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。
10.一种抗菌药物，其特征在于，所述抗菌药物的有效成分包括权利要求1～4任一项所述的抗菌组合物或权利要求5所述的制备方法得到的抗菌组合物。
CN202310979741.8A 2023-08-07 2023-08-07 一种抗菌组合物及其制备方法和应用 Active CN116747221B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202310979741.8A CN116747221B (zh) 2023-08-07 2023-08-07 一种抗菌组合物及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202310979741.8A CN116747221B (zh) 2023-08-07 2023-08-07 一种抗菌组合物及其制备方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN116747221A true CN116747221A (zh) 2023-09-15
CN116747221B CN116747221B (zh) 2024-01-26

Family

ID=87955421

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202310979741.8A Active CN116747221B (zh) 2023-08-07 2023-08-07 一种抗菌组合物及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN116747221B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN118542393A (zh) * 2024-05-31 2024-08-27 中国农业科学院饲料研究所 一种用于动物饲料的棉籽蛋白基抗菌复合物及其制备方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102633629A (zh) * 2012-04-01 2012-08-15 浙江师范大学 一种莽草酸的合成方法
US20150141357A1 (en) * 2013-11-20 2015-05-21 National Tsing Hua University Shikimate pathway inhibitors and the use thereof
CN105132387A (zh) * 2008-12-22 2015-12-09 绿光生物科学公司 用于制造化合物的组合物和方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105132387A (zh) * 2008-12-22 2015-12-09 绿光生物科学公司 用于制造化合物的组合物和方法
CN102633629A (zh) * 2012-04-01 2012-08-15 浙江师范大学 一种莽草酸的合成方法
US20150141357A1 (en) * 2013-11-20 2015-05-21 National Tsing Hua University Shikimate pathway inhibitors and the use thereof

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JINRONG BAI: "A Comparative Study on the Effects of Quinic Acid and Shikimic Acid on Cellular Functions of Staphylococcus aureus", J FOOD PROT, vol. 81, no. 7, pages 1187 - 1192 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN118542393A (zh) * 2024-05-31 2024-08-27 中国农业科学院饲料研究所 一种用于动物饲料的棉籽蛋白基抗菌复合物及其制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN116747221B (zh) 2024-01-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
IT202000003233A1 (it) Ceppo batterico e suoi usi medici
CN116236479A (zh) Su3327在制备增强多黏菌素抗细菌感染效力的药物中的用途
CN116747221B (zh) 一种抗菌组合物及其制备方法和应用
CN111840516A (zh) 一种用于妇科的抗菌凝胶及其制备方法
RU2327453C2 (ru) Состав для терапии и профилактики инфекционных заболеваний животных
RU2367433C1 (ru) Препарат для лечения мастита у коров в период лактации
CN101543506A (zh) 预防或治疗猪链球菌病的复方抗生素组合物
CN115192593B (zh) 柔红霉素在治疗多重耐药菌感染疾病中的应用
CN112107676B (zh) 一种脂肽及其在抗菌中的应用
WO2019178954A1 (zh) 琥珀酸在提高细菌对抗生素敏感性方面的应用
CN115350197A (zh) 泽泻醇A-24-醋酸酯在提高MRSA对β-内酰胺类抗生素敏感性方面的应用
CN108670951A (zh) 一种兽用硫酸庆大霉素-盐酸林可霉素复方缓释注射液及其制备方法
KR102203849B1 (ko) 동물용 복합 항생제 조성물
US11534438B2 (en) Composition containing piperacillin, pharmaceutical formulation thereof and use thereof
CN114272246A (zh) 尿嘧啶在制备抗感染药物中的应用
CN104971342A (zh) 一种抗甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌的药物组合物
CN105456281B (zh) 一种兽用药物组合物及其制备方法和用途
CN108186618A (zh) 柠檬醛及其衍生物在制备mrsa感染性疾病药物中的新用途
CN116509826B (zh) 厚朴酚或其与egcg的组合物在抑制鸡毒支原体、鸡滑液囊支原体中的应用
CN118217412A (zh) 含迷迭香酸提取物的抗菌组合物及其制备方法和应用
CN118986949A (zh) 莽草酸作为万古霉素治疗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染性心内膜炎的体内增效剂中的应用
CN106673989A (zh) 一种药物组合物及其制备方法和应用
CN118452325A (zh) 一种组合物及其在抑菌和防治奶牛乳房炎中的应用
CN118924712A (zh) 黄腐酚类化合物在制备水产动物链球菌病防治药物中的应用
CN104784182B (zh) 一种治疗畜禽腹泻的组合物及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant