CN116171114A - 含有乳酸菌的具有毛发再生或毛发生长效果的食品或饮品、化妆品、准药品或药品 - Google Patents
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Abstract
本发明的目的在于通过使用相关乳酸菌制备食品或饮品、化妆品、准药品或药品来开发通过人实际口服摄入食品或饮品、准药品或药品而确认有助于毛发生长等的食品或饮品、化妆品、准药品或药品。本发明人已经筛选了多种乳酸菌,首先,利用毛囊真皮毛乳头细胞的活化对于获得毛发再生、毛发生长或刺激生发效果是绝对必要的这一事实,以毛囊真皮毛乳头细胞活化为指标筛选多种乳酸菌,选择了乳酸菌(植物乳杆菌物种)。本发明人进一步通过使用所述乳酸菌制备食品或饮品、并进行人(受试者)实际摄入的临床试验确认其有效性,完成了具有高毛发生长效果的食品或饮品、化妆品等。
Description
技术领域
本发明涉及对人体具有毛发再生或毛发生长效果的食品或饮品、化妆品、准药品或药品,其中,所述食品或饮品、化妆品、准药品或药品包含植物乳杆菌物种的乳酸菌,或其培养液或发酵产物。
背景技术
毛发有助于保护头部免受外力和光线(例如紫外线或可见光)的影响。此外,从时尚或美容的角度来看,毛发是一个在很大程度上影响头部外观的因素。
毛发有一个毛发周期,其中生长和脱落以给定的周期重复进行。毛发周期也可分为毛发生长初期、毛发生长中期和毛发生长终期。
同时,由于诸如老化的问题,取决于每个个体的素质可能容易发生脱发。包括药品、准药品和化妆品(例如毛发生长产品)的应对策略被用作处理这种头部脱发或毛发稀疏的方法。
各种较早提交的专利申请公开了此类脱发或毛发稀疏的应对策略。通常,经常使用化合物,例如米诺地尔或非那雄胺。
近年来,作为使用这样的化合物以外的方法,正在积极进行以维持健康为目的的乳酸菌的研究。还公开了旨在使用乳酸菌进行毛发生长、毛发再生或脱发抑制的方法。
引文列表
专利文献
专利文献1:日本专利特开2015-187171
专利文献1涉及一种使用特定乳球菌属(Lactococcus)的特定乳酸菌菌株的方法。然而,其中公开的实验结果是使用毛囊真皮毛乳头细胞通过测量从毛囊真皮毛乳头细胞分泌的生长因子FGF-7或VEGF的量而获得的。需要指出的是,该结果并非通过对人实际施用等获得的结果。
发明概要
技术问题
因此,本发明人着眼于新型乳酸菌。本发明的一个目的是开发一种使用乳酸菌获得对人体的毛发生长效果等的方法。
特别地,本发明的目的是通过使用乳酸菌制备食品或饮品、准药品或药品来开发通过人实际口服摄入食品或饮品、准药品或药品而确认有助于毛发生长等的食品或饮品、准药品或药品。
本发明的另一个目的是通过使用乳酸菌制备化妆品、准药品或药品来开发通过人将洗剂等形式的化妆品、准药品或药品实际涂抹在头皮上而确认有助于毛发生长等的化妆品、准药品或药品。
问题的解决方案
本发明人已经筛选了多种乳酸菌,首先,通用利用毛囊真皮毛乳头细胞的活化对于获得毛发再生、毛发生长或刺激生发效果是绝对必要的这一事实,以毛囊真皮毛乳头细胞活化为指标筛选多种乳酸菌,选择了乳酸菌(植物乳杆菌物种)。
本发明人进一步通过使用乳酸菌制备食品或饮品,并进行人(受试者)实际摄入的临床试验确认其有效性,完成了具有高毛发生长效果的食品或饮品。
具体地,本申请的发明的第一方面提供
“包含具有在人体内毛发再生或毛发生长效果的乳酸菌或其培养液或发酵产物的食品或饮品、化妆品、准药品或药品”。
其次,包含乳酸菌的食品或饮品可以具有选自由清凉糕点、含乳酸菌食品、乳酸菌饮料和软饮料的名称组成的组的名称。
具体地,本申请的发明的第二方面提供
“根据权利要求1所述的包含乳酸菌或其培养液或发酵产物的食品或饮品、化妆品、准药品或药品,其中,食品或饮品是选自由名称为清凉糕点、含乳酸菌食品、乳酸菌饮料和软饮料的产品组成的组中的任何一种”。
其次,作为一个实例,包含本发明的乳酸菌的食品或饮品可以是固体片剂的形状。
具体地,本申请的发明的第三方面提供
“根据权利要求1或2所述的包含乳酸菌或其培养液或发酵产物的食品或饮品、化妆品、准药品或药品,其中,所述食品或饮品、准药品或者药品是片剂”。
其次,乳酸菌优选是属于植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)物种的乳酸菌。
具体地,本申请的发明的第四方面提供
“根据权利要求1至3中任一项所述的食品或饮品、化妆品、准药品或药品,其中,所述乳酸菌或其培养液或发酵产物属于植物乳杆菌物种”。
其次,乳酸菌优选为植物乳杆菌N793菌株(NITE BP-03233)。
具体地,本申请的发明的第五方面提供
“根据权利要求1至4中任一项所述的食品或饮品、化妆品、准药品或药品,其中,所述乳酸菌或其培养液或发酵产物是植物乳杆菌N793菌株(NITE BP-03233)的乳酸菌,或其培养液或发酵产物”。
其次,本发明人通过使用乳酸菌制备洗剂(搽剂),并进行涉及人(受试者)实际涂抹在头皮上的临床试验以确认其有效性,进一步完成了具有高毛发生长效果的化妆品、准药品或药品。
含有本发明的乳酸菌的化妆品、准药品或药品优选为搽剂。
具体地,本申请的发明的第六方面提供
“根据权利要求1所述的包含乳酸菌或其培养液或发酵产物的食品或饮品、化妆品、准药品或药品,其中,所述化妆品、准药品或药品是搽剂”。
接着,本发明的包含乳酸菌的化妆品、准药品或药品在搽剂中优选为软膏剂、霜剂或洗剂。
具体地,本申请的发明的第七方面提供
“根据权利要求6所述的食品或饮品、化妆品、准药品或药品,其中,所述化妆品、准药品或药品为软膏剂、霜剂或洗剂”。
其次,乳酸菌优选是属于植物乳杆菌物种的乳酸菌。
具体地,本申请的发明的第八方面提供
“根据权利要求6或7所述的食品或饮品、化妆品、准药品或药品,其中,所述乳酸菌或其培养液或发酵产物属于植物乳杆菌物种”。
其次,乳酸菌优选是属于植物乳杆菌物种的植物乳杆菌N793菌株(NITE BP-03233)。
具体地,本申请的发明的第九方面提供
“根据权利要求6至8中任一项所述的食品或饮品、化妆品、准药品或药品,其中,所述乳酸菌或其培养液或发酵产物是植物乳杆菌N793菌株(NITE BP-03233)的乳酸菌,或其培养液或发酵产物”。
发明的有益效果
使用根据本发明的包含乳酸菌或其培养液或发酵产物的食品或饮品、准药品或药品,通过口服施用能够轻松地抑制人体的脱发或毛发稀疏。
使用根据本发明的包含乳酸菌或其培养液或发酵产物的化妆品、准药品或药品通过涂抹等能够轻松地抑制人体的脱发或毛发稀疏。
附图说明
[图1]图1是显示实施例中毛囊真皮毛乳头细胞活化能力评估结果的图。
[图2]图2是显示关于临床试验(片剂)中毛发总数的毛发分析结果的图。
[图3]图3是显示关于临床试验(片剂)中的毛发粗细的毛发分析结果的图。
[图4]图4是显示关于临床试验(片剂)中非柔软毛发数量的毛发分析结果的图。
[图5]图5是显示关于临床试验(片剂)中非柔软毛发比率的毛发分析结果的图。
[图6]图6是显示关于临床试验(片剂)中的柔软毛发数量的毛发分析结果的图。
[图7]图7是显示关于临床试验(片剂)中的柔软毛发比率的毛发分析结果的图。
[图8]图8是显示关于临床试验(片剂)中脱发的毛发分析结果的图。
[图9]图9是显示关于VAS问卷调查(片剂)中关于洗头时的脱发的感觉的结果的图。
[图10]图10是显示关于VAS问卷调查(片剂)中头发造型时脱发的感觉的结果的图。
[图11]图11是显示关于VAS问卷调查(片剂)中毛发硬度或弹性不足的感觉的结果的图。
[图12]图12是显示关于VAS问卷调查(片剂)中毛发稀疏的感觉的结果的图。
[图13]图13是显示关于VAS问卷调查(片剂)中毛发强度不足的感觉的结果的图。
[图14]图14是显示关于VAS问卷调查(片剂)中的毛发量不足的感觉的结果的图。
[图15]图15是显示关于VAS问卷调查(片剂)中头部皮肤(头皮)处明显的毛发稀疏的感觉的结果的图表。
[图16]图16是显示关于VAS问卷调查(片剂)中头顶、发际线或分型处明显的毛发稀疏的的感觉的结果的图。
[图17]图17是显示关于VAS问卷调查(片剂)中脱发程度的实感的结果的图。
[图18]图18是显示关于临床试验(洗剂)中毛发总数的毛发分析结果的图。
[图19]图19是显示关于临床试验(洗剂)中的毛发粗细的毛发分析结果的图。
[图20]图20是显示关于临床试验(洗剂)中非柔软毛发数量的毛发分析结果的图。
[图21]图21是表示关于临床试验(洗剂)中的脱发的毛发分析结果的图。
[图22]图22是显示关于VAS问卷调查(洗剂)中洗发时脱发的感觉的结果的图。
[图23]图23是显示关于VAS问卷调查(洗剂)中的毛发硬度或弹性不足的结果的图。
[图24]图24是显示关于VAS问卷调查(洗剂)中的毛发稀疏的感觉的结果的图。
[图25]图25是显示关于VAS问卷调查(洗剂)中毛发强度不足的感觉的结果的图。
[图26]图26是显示关于VAS问卷调查(洗剂)中的毛发量不足的感觉的结果的图。
[图27]图27是显示关于VAS问卷调查(洗剂)中头部皮肤(头皮)处明显的毛发稀疏的感觉的结果的图。
[图28]图28是显示关于VAS问卷调查(洗剂)中头顶、发际线或分型处明显的毛发稀疏的感觉的结果的图。
[图29]图29是显示关于VAS问卷调查(洗剂)中脱发减少程度的实感的结果的图。
具体实施方式
在下文中,将参考实施例描述本发明的内容。然而,本发明不限于以下给出的实施例。
本申请的发明的第一方面提供“包含具有在人体内毛发再生或毛发生长效果的乳酸菌的食品或饮品、准药品或药品”。
毛发再生或毛发生长效果
在本发明中描述的毛发再生或毛发生长效果是指增加毛发数量或增加毛发粗细的效果、减少脱发的效果等,并且是这些效果中的任何一种或多种。
乳酸菌
以下,对本发明的实施例进行说明。本发明不受以下给出的实施例的限制。
乳酸菌的制备
用于本发明的乳酸菌的一个实例优选是乳杆菌属的乳酸菌。更具体地,优选植物乳杆菌物种的乳酸菌。
在本发明中,植物乳杆菌物种的任何乳酸菌都是可能的。在这样的植物乳杆菌物种的乳酸菌中,特别优选使用以下菌株。
1.植物乳杆菌N793菌株(NITE BP-03233)
本发明的乳酸菌为植物乳杆菌。属于植物乳杆菌的乳酸菌特别是植物乳杆菌N793菌株(NITE BP-03233)。本发明所述的符号N793是日清食品株式会社(Nissin FoodsHoldings Co.,Ltd.)自行赋予该菌株的编号。该植物乳杆菌N793菌株为本发明人首次发现。
更具体地,该植物乳杆菌N793菌株已被鉴定为属于植物乳杆菌植物亚种(Lactobacillus plantarum subsp.plantarum)的乳酸菌。
本发明的植物乳杆菌N793菌株于2020年6月18日以NITE BP-03233保藏于国家技术评估学会,专利微生物保藏中心。本发明的植物乳杆菌N793菌株的菌学特性是如表1和表2所示。这些菌学特性基于Bergey系统细菌学手册第2卷(1986)中描述的方法。表1显示了细菌菌株的形状等。表2显示了使用Api 50CH和Api CHL(由bioMerieux Japan Ltd.制造)测试糖同化的结果。表2中,“+”代表阳性,“-”代表阴性。
[表1]
+:阳性,-:阴性
[表2]
糖底物 | 结果 | 糖底物 | 结果 | ||
0 | 对照 | - | 25 | 七叶苷柠檬酸铁 | + |
1 | 甘油 | - | 26 | 水杨苷 | + |
2 | 赤藓糖醇 | - | 27 | D-纤维二糖 | + |
3 | D-阿拉伯糖 | - | 28 | D-麦芽糖 | + |
4 | L-阿拉伯糖 | + | 29 | D-乳糖 | + |
5 | D-核糖 | + | 30 | D-蜜二糖 | + |
6 | D-木糖 | - | 31 | D-蔗糖 | + |
7 | L-木糖 | - | 32 | D-海藻糖 | + |
8 | D-侧金盏花醇(D-Adonitol) | - | 33 | 菊粉 | - |
9 | 甲基B-D-吡喃木糖苷 | - | 34 | D-松三糖 | + |
10 | D-半乳糖 | + | 35 | D-棉子糖 | + |
11 | D-葡萄糖 | + | 36 | 淀粉 | - |
12 | D-果糖 | + | 37 | 糖原 | - |
13 | D-甘露糖 | + | 38 | 木糖醇 | - |
14 | L-山梨糖 | - | 39 | 龙胆二糖 | + |
15 | L-鼠李糖 | - | 40 | D-松二糖 | + |
16 | 半乳糖醇 | - | 41 | D-来苏糖 | - |
17 | 肌醇 | - | 42 | D-塔格糖 | - |
18 | D-甘露醇 | + | 43 | D-岩藻糖 | - |
19 | D-山梨糖醇 | + | 44 | L-岩藻糖 | - |
20 | 甲基α-D-吡喃甘露糖苷 | + | 45 | D-阿糖醇 | - |
21 | 甲基α-D-吡喃葡萄糖苷 | - | 46 | L-阿糖醇 | - |
22 | N-乙酰氨基葡萄糖 | + | 47 | 葡糖酸盐 | + |
23 | 苦杏仁苷 | + | 48 | 2-酮基葡萄糖酸盐 | - |
24 | 熊果苷 | + | 49 | 5-酮基葡萄糖酸盐 | - |
乳酸菌粉末或其培养液或发酵产物
本发明的乳酸菌可以以各种形式使用。例如,冷冻干燥型的细菌细胞或通过酶处理和冷冻干燥获得的细菌细胞的产物可用作乳酸菌粉末。
除了乳酸菌粉末以外,也可以使用本发明的乳酸菌培养液。具体地,可以使用任何含有细菌细胞、培养上清液等的培养液。上述细菌细胞等根据需要当然可以进行离心分离或蛋白酶、脂肪酶等的酶处理。
除了乳酸菌粉末或其培养液之外,可以使用使用乳酸菌获得的发酵产物。即,也可以使用通过纯化在发酵过程中从乳酸菌产生的化合物、肽等获得的发酵产物。其具体实例包括牛尿酚和GABA。
食品或饮品
本发明的乳酸菌粉末或其培养液或发酵产物可以包含在食品或饮品中使用。
首先,本发明的食品或饮品可以是根据需要添加适当的载体和添加剂的乳酸菌粉末或其培养液或发酵产物的制剂的形式。具体而言,可以是粉末、颗粒、胶囊、片剂、粉剂、包衣片剂、液体、糖浆、果汁等各种形式。
包含本发明的乳酸菌粉末或其培养液或发酵产物的食品或饮品可以含有本发明的细菌细胞或其培养液或发酵产物作为有效成分,并且当然,还可以包含附加成分。
其具体实例包括糖类(淀粉、糊精、多糖、单糖、双糖等)、蛋白质、各种氨基酸、脂质、水分、维生素、矿物质、香料和各种食品添加剂。
包含本发明的乳酸菌的饮料也是可能的。其实例包括含有乳酸菌的发酵乳和含有乳酸菌的乳酸菌饮料。现有的关于乳及乳制品的成分标准等部令虽然没有特别规定乳酸菌数作为成分标准,但发酵乳(含有脱脂乳固体含量8.0%或以上)或乳酸菌饮料(含有脱脂乳固体含量3.0%或以上)的细菌数优选为1.0×107cfu/ml或以上,对于乳酸菌饮料(含有脱脂乳固体含量小于3.0%)为1.0×106cfu/ml或以上。上述细菌计数可以通过在发酵液体如牛奶中生长或以最终产品的形式生长来实现。本发明的乳酸菌除了用于含有乳酸菌的发酵乳和含有乳酸菌的乳酸菌饮料以外,还可以用于黄油等乳制品、蛋黄酱等加工蛋制品、奶油蛋糕等甜烘焙食品等。此外,本发明的乳酸菌也可以适用于方便面、饼干等加工食品。
除了一般的食品或饮料之外,本发明的乳酸菌或其培养液或发酵产物可以包含在特定健康用途的食品、营养补充剂、具有功能要求的食品等中,这也是有用的。
根据本发明的食品或饮品的名称的实例包括但不特别限于清凉糕点、含乳酸菌的食品、乳酸菌饮料和软饮料。然而,该名称当然不限于此。
准药品、药品(口服摄入型)
除了食品之外,本发明的乳酸菌粉末或其培养液或发酵产物还可以包含在用于口服摄入的准药品或药品中使用。其具体实例包括允许经口服摄入的形式,例如饮用制剂和片剂制剂。
即,本发明的乳酸菌或其培养液或发酵产物通过浓缩、分离等制备成提取物或粉末,然后可以用作含有组分作为活性成分的准药品或药品。例如,可以将提取物装入瓶子等中,或者将发酵液的干燥粉末用赋形剂等造粒或胶囊化,压片,以片剂的形式提供。
准药品或药品可以包含本发明的乳酸菌粉末或其培养液或发酵产物作为活性成分并且可以进一步包含其他组分(例如,糖类、蛋白质、氨基酸、脂类、水分、维生素和矿物质),当然还有活性成分。
化妆品、准药品或药品(搽剂等)
本发明的乳酸菌粉末或其培养液或发酵产物可以包含在化妆品、准药品或药品中使用。具体地,可以使用具有生发产品、毛发生长产品、毛发再生产品等商品名的搽剂。其具体实例包括诸如软膏、乳膏、洗发水、生发剂、洗发水和冲洗剂的形式。
具体地,将本发明的乳酸菌粉末或其培养液或发酵产物通过浓缩、分离等方法制成提取物或粉末。然后,将该提取物或粉末用例如预定的溶液稀释或悬浮,并且可以用作含有该组分作为活性成分的化妆品、准药品或药品。
在本文中,例如,可以通过将脂肪和油基与乳酸菌粉末或其悬浮液混合来制备软膏。此外,可以通过将水包油(O/W)或油包水(W/O)液体物质与其混合来制备乳膏。此外,洗剂包括乳液形式的洗剂或悬浮剂形式的洗剂。乳液形式是乳化产品,悬浮形式是以酒精或水为主要试剂的洗剂。
当然除了活性成分以外,化妆品、准药品或药品可以包含本发明的细菌细胞或其培养液或发酵产物作为活性成分并且可以进一步包含其他组分(例如,糖类、蛋白质、氨基酸、脂类、水分、维生素和矿物质)。
实施例
1.乳酸菌的筛选
如下筛选含有本发明的乳酸菌粉末或其培养液或发酵产物的食品或饮品、准药品或药品中使用的乳酸菌。
毛发周期是指毛发重复三个阶段的周期:毛发生长初期、毛发生长中期和毛发生长终期。毛发周期中最长的时期是毛发生长初期,通常在3年到6年的量级。
毛发生长初期由生长因子维持,例如角化细胞生长因子、胰岛素样生长因子1和血管内皮生长因子。这些生长因子由位于毛根深处的毛囊真皮毛乳头细胞产生。毛囊真皮毛乳头细胞分泌的角质形成细胞生长因子被认为是对毛发具有最直接作用的生长因子,因为已知该生长因子直接作用于产生毛发的毛母质细胞,以促进毛母质细胞的生长和分裂。由于这些原因,毛囊真皮毛乳头细胞是毛发再生所必需的细胞。如果可以活化毛囊真皮毛乳头细胞,这可能会导致毛发再生。因此,评估了各种乳酸菌活化毛囊真皮毛乳头细胞的能力。
被测乳酸菌的菌种为植物乳杆菌(3种)、干酪乳杆菌/副干酪乳杆菌(Lactobacillus casei/paracasei)(3种)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)(3种)、发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)(3种)、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillusreuteri)(3种)和乳酸乳杆菌(Lactobacillus lactis)(3种)。
2.毛囊真皮毛乳头细胞活化试验
<试验样品的制备(乳酸菌粉末悬浮液)>
将各乳酸菌在表3所示的MRS培养基(Becton,Dickinson and Company制造)中于37℃培养24小时。随后,使用离心机收集生长的细菌细胞。收获的细菌细胞用无菌水洗涤并用离心机收获。洗涤和收获重复进行3次。在95℃加热灭菌15分钟后,用离心机再次收集细菌细胞。使用冷冻干燥机将收获的细菌细胞冷冻干燥以获得乳酸菌粉末。将乳酸菌粉末以1mg/mL悬浮于PBS(PBS(-),pH 7.4,Gibco/Thermo Fisher Scientific Inc.制造)中,制成乳酸菌粉末悬浮液。
[表3]
3号蛋白胨 | 10.00克 |
牛肉提取物 | 10.00克 |
酵母提取物 | 5.00克 |
D-葡萄糖 | 20.00克 |
聚山梨酯80 | 1.00克 |
柠檬酸铵 | 2.00克 |
乙酸钠 | 5.00克 |
硫酸锰 | 0.10克 |
硫酸镁 | 0.05克 |
磷酸二钾 | 2.00克 |
蒸馏水 | 1000毫升 |
<活化毛囊真皮毛乳头细胞能力的评估>
对由此获得的每个测试样品(乳酸菌粉末悬浮液)的毛囊真皮毛乳头细胞活化效果进行评估。具体地,将人毛囊真皮毛乳头细胞以1.2×104细胞/孔的密度接种到96孔板中并在CO2培养箱(5%CO2,37℃)中培养6小时。此后,将含有每个测试样品(最终浓度:1%)的100μL D-MEM培养基(含有4%FBS)添加到每个孔中。将如此补充的平板在CO2培养箱(5%CO2,37℃)中培养72小时。然后,通过吸收光度法测量培养液中毛囊真皮毛乳头细胞的数量。测定中使用Cell Counting Kit-8(由Dojindo Laboratories Co.,Ltd.制造)。使用的对照是PBS(PBS(-),pH 7.4,由Gibco/Thermo Fisher Scientific Inc.制造)。以毛囊真皮毛乳头细胞活化与定义为1的对照活化的比率为基础评估毛囊真皮毛乳头细胞活化能力。测量结果如表4所示。如表4所示,发现植物乳杆菌具有很高的活化毛囊真皮毛乳头细胞的能力。
测试结果如表4所示。结果的图表如图1所示。
-测试结果-
[表4]
结果,发现植物乳杆菌(3种)具有高活化毛囊真皮毛乳头细胞的能力。
3.临床试验中的摄入测试
上述毛囊真皮毛乳头细胞活化测试表明,植物乳杆菌具有较高的活性。在使用含乳酸菌的食品的临床试验中,验证了在所测试的3种中具有最高活性的N793菌株(NITE BP-03233)的有效性。
乳酸菌的培养
将乳酸菌在表3所示的MRS培养基(Becton,Dickinson and Company制造)中于37℃培养24小时。随后,使用离心机收集生长的细菌细胞。收获的细菌细胞用无菌水洗涤并用离心机收获。洗涤和收获重复进行3次。在95℃加热灭菌15分钟后,用离心机再次收集细菌细胞。使用冷冻干燥机将收获的细菌细胞冷冻干燥以获得乳酸菌粉末。
实施例的测试食品(含乳酸菌食品)的生产
通过将乳酸菌粉末和赋形剂混合来生产含乳酸菌的食品。赋形剂含有氢化麦芽糖淀粉糖浆、粉末纤维素、硬脂酸钙和二氧化硅细粉。使用摇动混合器混合原料并充分搅拌。压片步骤包括通过筛网筛选并在压片机中压片。制备的含乳酸菌食品具有表5所示的组分组成。
[表5]
含乳酸菌食品的营养成分(每片)如表6所示。
[表6]
营养成分 | 测试食品 |
热量 | 0.76千卡 |
水分 | 0.00克 |
蛋白质 | 0.01克 |
脂质 | 0.004克 |
糖类 | 0.17克 |
含乳酸菌食品(片剂)的生产完成。使用片剂作为测试食品进行了临床试验。
受试者
根据以下标准1)至4)选择受试者。
1)获得同意时年龄在20岁或以上且59岁或以下的日本男性和女性。
2意识到毛发稀疏的人。
3)能够同意在测试期间没有改变之前进行的修剪方式(头发长度、发型、烫发等)、染发方式(染发剂)和洗发方式(洗发水)的人。
4)能够同意由专家进行局部剪发(使用电动理发器进行处理,从头部中线与连接左右耳轮最上部的线(横向线)之间的交点开始,在横向线上右侧约3cm处的约1cm×1cm的范围内留下约0.5mm的长度)的人。
实际测试受试人数为13人。其中男性6例,女性7例。平均年龄50.23±1.95岁。
食用方法
上述测试食品的食用方法如表7所示。
[表7]
受试者头部毛发的观察时间表
每个受试者的头部毛发的观察按照以下时间表进行。
观察次数为6次。观察时间为使用前、开始使用后2天、开始使用后12周、开始使用后12周+2天、开始使用后24周使用,以及开始使用后24周+2天。在家中摄入测试食品的持续时间为168天。
测试结果
用于观察每个受试者的头部毛发(毛发分析),使用数码显微镜(HIROX Co.,Ltd.,KH-2000)检查上述局部剪发区域(1cm×1cm)中的毛发。
作为检查项目,对毛发总数、毛发根数、毛发粗细、非柔软毛发数、脱发进行了毛发分析等检查。通过Dunnett检验对摄入12周后与摄入前以及摄入24周后与摄入前,进行统计分析(+:P<0.1,*:P<0.05,**:P<0.01,***:P<0.001)。+:P<0.1确定了显著趋势,P<0.05确定了显著差异。关于每个项目的结果将在下面显示。
毛发分析/毛发总数
毛发总数在摄入前为163.7±10.4根,摄入12周后为169.1±10.6根,摄入24周后为175.8±11.3根。毛发总数与摄入前相比,摄入12周后增加5.4根,摄入24周后增加12.1根,证实摄入24周后的显著差异(P=0.006)。结果如表8所示。
[表8]
平均值±标准差,Dunnett(与摄入前相比)**:P<0.01
其图表如图2所示。
毛发分析/毛发粗细
毛发粗细在摄入前为58.9±3.3μm,摄入12周后为61.0±3.4μm,摄入24周后为62.7±3.1μm。与摄入前相比,毛发粗细在摄入12周后增加了2.1μm,在摄入24周后增加了3.8μm,证实了摄入12周后的显著趋势(P<0.1),也证实了摄入24周后的显著差异(P=0.001)。结果如表9所示。
[表9]
其图表如图3所示。
毛发分析/非柔软毛发的数量(结实的硬毛,毛发直径:40μm或以上)
毛发中直径40μm或以上的结实的硬毛的数量结果是,摄入前为121.2±12.3根,摄入12周后为131.8±13.2根,摄入24周后为141.0±12.3根。与摄入前相比,结实的硬毛的数量在摄入12周后显著增加了10.6根(P=0.025),在摄入24周后增加了19.8根(P<0.001)。结果示于表10。
[表10]
平均值±标准差,Dunnett(与摄入前相比)*:P<0.05***:P<0.001
其图表如图4所示。
毛发分析/非柔软毛发比率
毛发中毛发直径为40μm或以上的结实的硬毛的非柔软毛发比率(%)被计算为非柔软毛发的数量/局部切割区域中的毛发的总数。非柔软毛发比率在摄入前为74.8±5.9%,摄入12周后为78.3±6.2%,摄入24周后为80.8±5.4%。与摄入前相比,非柔软毛发比率在摄入12周后增加了3.5%,在摄入24周后增加了6.0%,证实了摄入12周后的显著趋势(P<0.1),也证实了摄入24周后的显著差异(P=0.002)。结果如表11所示。
[表11]
其图表如图5所示。
毛发分析/柔软毛发的数量
毛发中直径小于40μm的柔软毛发的数量结果为:摄入前为42.5±11.6根,摄入12周后为37.2±11.3根,摄入24周后为34.8±根10.4根。柔软毛发的数量与摄入前相比,摄入12周后减少5.3根,摄入24周后减少7.7根,证实摄入24周后的显著差异(P=0.021)。结果示于表12。
[表12]
平均值±标准差,Dunnett(与摄入前相比)*:P<0.05
其图表如图6所示。
毛发分析/柔软毛发的比率
毛发中毛发直径小于40μm的柔软毛发的柔软毛发的比率(%)被计算为柔软毛发的数量/局部切割区域的毛发总数。摄入前的柔软毛发的比率为25.2±5.9%,摄入12周后为21.7±6.2%,摄入24周后为19.2±5.4%。柔软毛发的比率与摄入前相比,摄入12周后下降3.5%,摄入24周后下降6.0%,证实摄入12周后的显著趋势(P<0.1),也证实摄入24周后的显著差异(P=0.002)。结果示于表13。
[表13]
其图表如图7所示。
毛发分析/脱发
由美容师洗完头发并吹干后收集掉落的毛发,并测量毛发的数量。摄入前掉落的毛发数量为109.5±15.4根,摄入12周后为78.6±12.8根,摄入24周后为75.9±9.6根。与摄入前相比,掉落的毛发数量在摄入12周后下降了30.9根(P<0.1),在摄入24周后下降了33.6根(P<0.1)。结果示于表14。
[表14]
其图表如图8所示。
VAS问卷调查
对洗头时的脱发的感觉、头发造型时的脱发的感觉、脱发的实感、毛发稀疏和毛发强度进行以视觉模拟量表法为基础的问卷调查(VAS问卷调查)。
以视觉模拟量表法为基础的问卷调查(VAS问卷调查)包括设置两端的极端条件,允许受试者自己以100mm长的书写线段上的一条垂直线的形式表达其录入时的主观感受,并测量从末端到垂直线的长度作为VAS评分。该方法涉及对受试者主观感受的评价。
在该评价中,例如,在“洗头时的脱发的感觉”的评价中,将左端设定为“在洗头时无脱发感时的感觉(排水口的毛发、毛巾擦掉后附着在毛巾上的毛发等)”(得分0),右端设置为“在洗头时脱发感时的最差的感觉(排水口的毛发,附着毛巾擦掉后附着在毛巾上的毛发等)”(得分100)。每个受试者在100mm线段上作答。因此,较小的数字意味着更好的评价。
1)洗头时脱发的感觉(排水口的毛发、毛巾擦掉后附着在毛巾上的毛发等)
脱发的感觉在摄入前为71.5±5.8,摄入12周后为60.2±8.3,摄入24周后为47.8±7.0。脱发的感觉与摄入前相比,摄入12周后下降11.3,摄入24周后下降23.7,证实摄入24周后的显著差异(P=0.001)。结果示于表15。
[表15]
平均值±标准差,Dunnett(与摄入前相比)**:P<0.01
其图表如图9所示。
2)头发造型时脱发的感觉(头发吹干、头发梳理、用手梳理等)
脱发的感觉在摄入前为65.5±6.1,摄入12周后为53.5±7.9,摄入24周后为46.9±7.4。脱发的感觉与摄入前相比,摄入12周后下降12.0,摄入24周后下降18.6,证实摄入12周后的显著趋势(P<0.1),也证实摄入24周的显著差异(P=0.007)。结果示于表16。
[表16]
其图表如图10所示。
3)毛发硬度或弹性不足的感觉
毛发硬度或弹性不足的感觉在摄入前为70.8±4.9,摄入12周后为61.3±4.8,摄入24周后为53.4±4.3。与摄入前相比,毛发硬度或弹性不足的感觉在摄入12周后下降了9.5,在摄入24周后下降了17.4,证实了摄入24周后的显著差异(P=0.029)。结果示于表17。
[表17]
平均值±标准差,Dunnett(与摄入前相比)*:P<0.05
其图表如图11所示。
4)毛发稀疏的感觉
毛发稀疏的感觉在摄入前为76.4±4.8,摄入12周后为67.5±6.2,摄入24周后为57.2±4.8。与摄入前相比,毛发稀疏的感觉在摄入12周后下降了8.9,在摄入24周后下降了19.2,证实了摄入24周后的显著差异(P=0.024)。结果示于表18。
[表18]
平均值±标准差,Dunnett(与摄入前相比)*:P<0.05
其图表如图12所示。
5)毛发强度不足的感觉
毛发强度不足的感觉在摄入前为65.0±6.5,摄入12周后为60.6±6.7,摄入24周后为46.5±6.9。与摄入前相比,毛发强度不足的感觉在摄入12周后下降了4.4,在摄入24周后下降了18.5,证实了摄入24周后的显著差异(P=0.044)。结果示于表19。
[表19]
平均值±标准差,Dunnett(与摄入前相比)*:P<0.05
其图表如图13所示。
6)毛发量不足的感觉
毛发量不足的感觉在摄入前为77.8±5.6,摄入12周后为76.7±5.0,摄入24周后为59.3±6.3。与摄入前相比,毛发量不足的感觉在摄入12周后减少了1.1,在摄入24周后减少了18.5,证实了摄入24周后的显著差异(P=0.022)。结果示于表20。
[表20]
平均值±标准差,Dunnett(与摄入前相比)*:P<0.05
其图表如图14所示。
7)头部皮肤(头皮)处明显的毛发稀疏的感觉
毛发明显稀疏的感觉在摄入前为78.0±6.3,摄入12周后为77.8±4.5,摄入24周后为63.4±4.9。与摄入前相比,毛发明显稀疏的感觉在摄入12周后减少了0.2,在摄入24周后减少了14.6,证实了摄入24周后的显著趋势(P<0.1)。结果示于表21。
[表21]
其图表如图15所示。
8)在头顶、发际线或分型处明显的毛发稀疏的感觉
明显的毛发稀疏的感觉在摄入前为80.8±5.0,摄入12周后为80.5±4.5,摄入24周后为63.5±4.3。与摄入前相比,明显的毛发稀疏的感觉在摄入12周后减少了0.3,在摄入24周后减少了17.3,证实了摄入24周后的显著差异(P=0.013)。结果示于表22。
[表22]
平均值±标准差,Dunnett(与摄入前相比)*:P<0.05
其图表如图16所示。
9)脱发程度的实感
脱发程度的实感在摄入前为67.3±8.5,摄入12周后为60.5±4.8,摄入24周后为44.4±4.8。与摄入前相比,脱发程度的实感在摄入12周后减少了6.8,在摄入24周后减少了22.9,证实了摄入24周后的显著差异(P=0.011)。结果如表23所示。
[表23]
平均值±标准差,Dunnett(与摄入前相比)*:P<0.05
其图表如图17所示。
4.临床试验中的涂抹试验
上述毛囊真皮毛乳头细胞活化试验表明,植物乳杆菌具有较高的活性。使用含乳酸菌的洗发剂在临床试验中,验证了在测试的3种中具有最高活性的N793菌株(NITE BP-03233)的有效性。
乳酸菌的培养
将乳酸菌在表3所示的MRS培养基(Becton,Dickinson and Company制造)中于37℃培养24小时。随后,使用离心机收集生长的细菌细胞。收获的细菌细胞用无菌水洗涤并用离心机收获。洗涤和收获重复进行3次。在95℃加热灭菌15分钟后,用离心机再次收集细菌细胞。使用冷冻干燥机将收获的细菌细胞冷冻干燥以获得乳酸菌粉末。
实施例中洗剂的生产
含乳酸菌的洗发剂(以水或酒精为主要试剂的类型)作为化妆品和混合乳酸菌粉末和其他组分的准药品生产。乳酸菌粉末以外的组分是水、乙醇、DPG(二丙二醇)、卡波姆(羧乙烯基聚合物)、氢氧化钙、PEG-氢化蓖麻油。
具体而言,将脂溶性原料和水溶性原料各自加热溶解后,使用真空乳化装置搅拌(乳化),生产洗剂。乳酸菌粉末以20mg/3mL混合。
至此,含乳酸菌洗发剂的产生完成。使用洗发剂进行了以下临床试验。
受试者
根据以下标准1)至4)选择受试者。
1)获得同意时年龄在20岁或以上且59岁或以下的日本男性和女性。
2意识到毛发稀疏的人。
3)能够同意在测试期间没有改变之前进行的修剪方式(头发长度、发型、烫发等)、染发方式(染发剂)和洗发方式(洗发水)的人。
4)能够同意由专家进行局部剪发(使用电动理发器进行处理,从头部中线与连接左右耳轮最上部的线(横向线)之间的交点开始,在横向线上右侧约3cm处的约1cm×1cm的范围内留下约0.5mm的长度)的人。
实际测试受试人数为12人。其中男性7例,女性5例。平均年龄48.83±1.91岁。
使用方法
将上述测试产品用于头皮的方法如表24所示进行。
[表24]
受试者头部毛发的观察时间表
每个受试者的头部毛发的观察按照以下时间表进行。
观察次数为6次。观察时间为使用前、开始使用后2天、开始使用后12周、开始使用后12周+2天、开始使用后24周,以及开始使用后24周+2天。在家使用含乳酸菌的洗发剂的持续时间为168天。
测试结果
用于观察每个受试者的头部毛发(毛发分析)使用数码显微镜(HIROX Co.,Ltd.,KH-2000)检查上述局部剪发区域(1cm×1cm)的毛发。
作为检查项目,对毛发总数、毛发根数、毛发粗细、非柔软毛发数、脱发进行了毛发分析等检查。通过Dunnett检验对使用12周后与使用前以及使用24周后与使用前进行统计分析(+:P<0.1,*:P<0.05,**:P<0.01,***:P<0.001)。+:P<0.1确定了显著趋势,P<0.05确定了显著差异。关于每个项目的结果将在下面显示。
毛发分析/毛发总数
毛发总数使用前为179.2±6.9根,使用12周后为182.6±7.8根,使用24周后为193.3±7.2根。毛发总数与使用前相比,使用12周后为+3.4,使用24周后为+14.1,证实使用24周后的显著差异(P=0.002)。结果示于表25。
[表25]
平均值±标准差,Dunnett(与使用前相比)**:P<0.01
其图表如图18所示。
毛发分析/毛发粗细
使用前毛发粗细为60.4±3.1μm,使用12周后为60.6±3.1μm,使用24周后为62.9±3.4μm。毛发粗细与使用前相比,使用12周后为+0.2,使用24周后为+2.5,证实使用24周后的显著趋势(P=0.051)。结果示于表26。
[表26]
其图表如图19所示。
毛发分析/非柔软毛发的数量(结实的硬毛,毛发直径:40μm或以上)
毛发中,毛发直径40μm或以上的结实的硬毛的数量,使用前为145.8±8.8根,使用12周后为146.9±8.6根,使用24周后为162.1±9.5根。与使用前相比,结实的硬毛的数量在使用12周后为+1.1,在使用24周后为+16.3,证实在使用24周后的显著差异(P<0.001)。结果示于表27。
[表27]
平均值±标准差,Dunnett(与使用前相比)***:P<0.001
其图表如图20中所示。
毛发分析/脱发
由美容师洗完头发并吹干后收集掉落的毛发,并测量毛发的数量。使用前掉落的毛发数量为152.3±31.5根,使用12周后为95.1±20.4根,使用24周后为84.5±24.3根。与使用前相比,掉落的毛发的数量在使用12周后为-57.2,在使用24周后为-67.8,证实使用12周后(P=0.002)和使用24周后(P<0.001)的显著差异。结果示于表28。
[表28]
平均值±标准差,Dunnett(与使用前相比)**:P<0.01***:P<0.001
其图表如图21所示。
VAS问卷调查(洗剂)
对洗发时脱发的感觉、毛发硬度或弹性不足、毛发稀疏、毛发强度(毛发强度不足)、毛发量不足,头部皮肤(头皮)处明显的毛发稀疏,头顶、发际线或分型处的明显的毛发稀疏,实感脱发程度减少进行以视觉模拟量表法为基础的问卷调查(VAS问卷调查)。
以视觉模拟量表法为基础的问卷调查(VAS问卷调查)包括设置两端的极端条件,允许受试者自己以100mm长的书写线段上的一条垂直线的形式表达其录入时的主观感受,并测量从末端到垂直线的长度作为VAS评分。该方法涉及对受试者主观感受的评价。
在该评价中,例如,在“洗头时的脱发的感觉”的评价中,将左端设定为“在洗头时无脱发感时的感觉(排水口的毛发、毛巾擦掉后附着在毛巾上的毛发等)”(得分0),右端设置为“在洗头时脱发感时的最差的感觉(排水口的毛发,附着毛巾擦掉后附着在毛巾上的毛发等)”(得分100)。每个受试者在100mm线段上作答。因此,较小的数字意味着更好的评价。
1)在洗发时脱发的感觉(排水口的毛发、毛巾擦掉后附着在毛巾上的毛发等)
脱发的感觉使用前为65.8±7.8,使用12周后为55.0±7.1,使用24周后为50.7±4.6。与使用前相比,脱发的感觉在使用12周后为-10.8,在使用24周后为-15.1,证实使用24周后的显著趋势(P<0.10)。结果如表29所示。
[表29]
其图表如图22所示。
2)毛发硬度或弹性不足的感觉
毛发硬度或弹性不足的感觉在使用前为78.5±4.0,使用12周后为63.4±4.5,使用24周后为58.8±6.2。与使用前相比,毛发硬度或弹性不足的感觉在使用12周后为-15.1,在使用24周后为-19.7,证实使用12周后(P=0.015)和使用24周后(P=0.002)的显著差异。结果示于表30。
[表30]
平均值±标准差,Dunnett(与使用前相比)*:P<0.05**:P<0.01
其图表如图23所示。
3)毛发稀疏的感觉
使用前毛发稀疏的感觉为78.0±3.8,使用12周后为66.0±5.3,使用24周后为61.3±5.8。与使用前相比,毛发稀疏的感觉在使用12周后为-12.0,在使用24周后为-16.7,证实使用12周后(P=0.026)和使用24周后(P=0.002)的显著差异。结果如表31所示。
[表31]
平均值±标准差,Dunnett(与使用前相比)*:P<0.05**:P<0.01
其图表如图24所示。
4)毛发强度不足的感觉
毛发强度不足的感觉在使用前为77.1±3.7,使用12周后为62.4±4.6,使用24周后为56.3±5.5。与使用前相比,毛发强度不足的感觉在使用12周后为-14.7,在使用24周后为-20.8,证实使用12周后(P=0.008)和使用24周后的显著差异(P<0.001)。结果示于表32。
[表32]
平均值±标准差,Dunnett(与使用前相比)**:P<0.01***:P<0.001
其图表如图25所示。
5)毛发量不足的感觉
毛发量不足的感觉在使用前为83.3±3.5,使用12周后为72.6±6.5,使用24周后为66.3±4.9。与使用前相比,毛发量不足的感觉在使用12周后为-10.7,在使用24周后为-17.0,证实在使用24周后的显著差异(P=0.006)。结果示于表33。
[表33]
平均值±标准差,Dunnett(与使用前相比)**:P<0.01
其图表如图26所示。
6)头部皮肤(头皮)处明显的毛发稀疏的感觉
明显的毛发稀疏的感觉在使用前为84.6±4.0,使用12周后为68.3±8.0,使用24周后为64.5±5.3。与使用前相比,明显的毛发稀疏在使用12周后为-16.3,在使用24周后为-20.1,证实使用12周后(P=0.024)和使用24周后(P=0.006)的显著差异。结果示于表34。
[表34]
平均值±标准差,Dunnett(与使用前相比)*:P<0.05**:P<0.01
其图表如图27所示。
7)头顶、发际线或分型处明显的毛发稀疏的感觉
明显的毛发稀疏的感觉在使用前为82.8±4.2,使用12周后为69.3±8.3,使用24周后为65.8±5.2。与使用前相比,明显的毛发稀疏的感觉在使用12周后为-13.5,在使用24周后为-17.0,证实在使用24周后的显著差异(P=0.030)。结果示于表35。
[表35]
平均值±标准差,Dunnett(与使用前相比)*:P<0.05
其图表如图28所示。
8)脱发减少程度的实感
脱发减少程度的实感在使用前为83.1±5.7,使用12周后为61.9±6.7,使用24周后为44.7±5.3。与使用前相比,脱发减少程度的实感在使用12周后为-21.2,在使用24周后为-38.4,证实使用12周后(P=0.028)和使用24周后(P<0.001)的显著差异。结果示于表36。
[表36]
平均值±标准差,Dunnett(与使用前相比)*:P<0.05***:P<0.001
其图表如图29所示。
本申请基于2020年10月21日提交的日本专利申请号2020-176970和2021年10月20日提交的日本专利申请号2021-171280和2021-171281,其内容通过整体引用并入本文。
Claims (9)
1.食品或饮品、化妆品、准药品或药品,其包含具有在人体内毛发再生或毛发生长效果的乳酸菌或其培养液或发酵产物。
2.根据权利要求1所述的包含乳酸菌或其培养液或发酵产物的食品或饮品、化妆品、准药品或药品,其中,所述食品或饮品是选自由名称为清凉糕点、含乳酸菌食品、乳酸菌饮料和软饮料的产品组成的组中的任何一种。
3.根据权利要求1或2所述的包含乳酸菌或其培养液或发酵产物的食品或饮品、化妆品、准药品或药品,其中,所述食品或饮品、化妆品、准药品或药品是片剂。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的食品或饮品、化妆品、准药品或药品,其中,所述乳酸菌或其培养液或发酵产物属于植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)物种。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的食品或饮品、化妆品、准药品或药品,其中,所述乳酸菌或其培养液或发酵产物是植物乳杆菌N793菌株(NITE BP-03233)的乳酸菌或其培养液或发酵产物。
6.根据权利要求1所述的包含乳酸菌或其培养液或发酵产物的食品或饮品、化妆品、准药品或药品,其中,所述化妆品、准药品或药品是搽剂。
7.根据权利要求6所述的食品或饮品、化妆品、准药品或药品,其中,所述化妆品、准药品或药品为软膏剂、霜剂或洗剂。
8.根据权利要求6或7所述的食品或饮品、化妆品、准药品或药品,其中,所述乳酸菌或其培养液或发酵产物属于植物乳杆菌物种。
9.根据权利要求6至8中任一项所述的食品或饮品、化妆品、准药品或药品,其中,所述乳酸菌或其培养液或发酵产物是植物乳杆菌N793菌株(NITE BP-03233)的乳酸菌或其培养液或发酵产物。
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