CN115850731A - 一种可注射多功能糖肽水凝胶、制备方法及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种可注射多功能糖肽水凝胶、制备方法及其应用，涉及生物医用材料及相关医疗器械研发技术领域，将制备得到的抗菌肽透明质酸、儿茶酚肽透明质酸、血管新生肽透明质酸与氨基化透明质酸按照摩尔比为(0.1‑1)：(0.1‑1)：(0.1‑1)：(0.3‑5)混合均匀，在室温条件下反应5‑30min，静置得到多功能糖肽水凝胶，通过匹配伤口的修复过程制备多功能水凝胶，不同功能发挥协同作用，从而更好促进伤口愈合与再生，且制备的水凝胶制备工艺简单，可降解、良好的生物相容性，具有很好的商业前景。
Description
技术领域
本发明涉及生物医用材料及相关医疗器械研发技术领域，具体涉及一种可注射多功能糖肽水凝胶、制备方法及其应用。
背景技术
皮肤是身体表面包在肌肉外面的组织，是人体最大的器官，承担着保护身体、排汗、感觉冷热和压力等功能。皮肤受到损伤后容易发生感染，特别是慢性伤口感染，例如糖尿病伤口、烫伤、压疮、痤疮等等；发生感染后会进一步阻碍伤口愈合，并且是临床上面临的重大难题。抗生素的滥用导致细菌产生耐药性给感染的治疗带来了极大困难。随着材料学、生物学和医学的快速发展，许多新型的医用抗菌敷料应运而生，通过物理或化学的方法赋予其一定的抗菌活性，为创伤提供一个无菌环境，从而有利于创伤修复。
水凝胶作为一种新型的伤口敷料，具有三维网络结构和较好的保湿性，以及良好的生物相容性，可完全降解，不需要再次手术，不会对伤口造成二次损伤。在水凝胶中添加抗菌剂可以赋予其抗菌性，例如纳米银、抗生素、季铵盐等，但是细胞毒性大、易产生耐药性、在体内富集，限制了其广泛应用。
透明质酸是人体组织、器官的重要组分，具有良好的生物相容性、可降解性、无免疫原性，在临床上被广泛应用；并且可以调控促炎M1型巨噬细胞极化为抗炎M2型细胞，为组织的修复提供更好的微环境。抗菌肽具有较好的抗菌活性，儿茶酚肽具有还原性，可以清除伤口部位的自由基，降低炎症，促血管新生肽可以促进创伤部位血管新生，为细胞的增殖提供营养和氧气，但是多肽小分子易快速降解，不能长时间发挥作用。目前很多研究是通过调整水凝胶的理化性质来制备不同性质的水凝胶，还有一部分研究是赋予水凝胶单一性质，很少有通过匹配伤口的修复过程制备多功能水凝胶，从而更好促进伤口愈合与再生。
因此，在不使用抗生素、细胞因子或治疗性细胞的情况下，迫切需要开发一种具有良好生物相容性、较好的抗菌活性、清除自由基、降低炎症以及促进血管新生，并且能够促进创面愈合的多功能协同的水凝胶。如何提供一种可注射多功能糖肽水凝胶及其制备方法是本领域技术人员亟需解决的问题。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是一种可注射多功能糖肽水凝胶、制备方法及其应用。目的是通过匹配伤口的修复过程制备多功能水凝胶，不同功能发挥协同作用，从而更好促进伤口愈合与再生，且制备的水凝胶制备工艺简单，可降解、良好的生物相容性，具有很好的商业前景。
本发明为了解决上述技术问题，第一个目是提供一种可注射多功能糖肽水凝胶的制备方法，将制备得到的抗菌肽透明质酸、儿茶酚肽透明质酸、血管新生肽透明质酸与氨基化透明质酸按照摩尔比为(0.1-1)：(0.1-1)：(0.1-1)：(0.3-5)混合均匀，在室温条件下反应5-30min，静置得到多功能糖肽水凝胶，所述抗菌肽透明质酸结构式如式I所示，所述儿茶酚肽透明质酸结构式如式II所示，所述血管新生肽透明质酸结构式如式III所示，所述氨基化透明质酸结构式如式Ⅳ所示；
本发明的有益效果是：本发明将抗菌肽透明质酸、儿茶酚肽透明质酸和血管肽透明质酸，与氨基透明质酸通过动态共价键和氢键形成可注射水凝胶。采用具有较好抗菌活性的抗菌肽、清除氧自由基的儿茶酚肽和促血管新生肽，以及具有调控巨噬细胞极化的透明质酸为原料，制备成多功能糖肽水凝胶；水凝胶作用于细菌，破坏细胞膜的完整性，导致内容物泄露，从而使细菌死亡；与活性氧作用清除自由基，减少对细胞、组织的进一步损伤；并且可以作用于VEGF受体，促进血管新生。另外，透明质酸可以诱导M1型巨噬细胞极化为M2型巨噬细胞，分泌各种抗炎细胞因子，有利于伤口愈合。所以本发明的水凝胶具有良好的生物相容性，可完全降解，最终排出体外。此外，所制备的水凝胶具有微孔结构，可以促进细胞增殖，有利于伤口愈合。因此，本发明的水凝胶可以与伤口的愈合过程相匹配，可以杀灭细菌、清除自由基以及促进血管新生，并且可以调控局部免疫细胞，对于难愈合伤口具有很好的潜力。
在上述技术方案的基础上，本发明还可以做如下改进。
进一步，将制备得到的抗菌肽透明质酸、儿茶酚肽透明质酸、血管新生肽透明质酸与氨基化透明质酸按照摩尔比为(0.5-1)：(0.5-1)：(0.5-1)：(0.3-3)混合均匀，在室温条件下反应5-30min，静置得到摩尔浓度为0.01-10wt％的多功能糖肽水凝胶。
本发明的进一步采用的技术方案的有益效果是：通过调整各种原料的比例，对多功能糖肽水凝胶活性进行优化。
进一步，所述抗菌肽透明质酸的制备方法为在pH＝5.0±0.3缓冲液(例如0.1MMES)中溶解氧化透明质酸，然后按照氧化透明质酸与EDC、NHS的摩尔比值为1：(1～5)：(1：5)加入EDC(1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐EDC·HCL)、NHS(N-羟基琥珀酰亚胺)活化氧化透明质酸的羧基，后按照氧化透明质酸与抗菌肽按摩尔比为1:0.01-1加入抗菌肽，在室温下反应24-48h，得到抗菌肽透明质酸；所述抗菌肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
进一步，所述儿茶酚肽透明质酸的制备方法为将氧化透明质酸与3-马来酰亚胺丙酸按照摩尔比为1:1.2-3，在室温条件下反应24-72h，透析72-120h，冻干24-120h，得到的中间产物，将中间产物溶解在pH＝5.0±0.3缓冲液中(例如0.1M MES)，然后按照中间产物与儿茶酚肽的摩尔比为1:0.05-1加入儿茶酚肽，在室温下反应24-48h，得到儿茶酚肽透明质酸；所述儿茶酚肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
进一步，所述血管新生肽透明质酸的制备方法为将溶解在pH＝5.0±0.3缓冲液(例如0.1M MES)的中间产物，按照中间产物与血管新生肽的摩尔比为1:0.05-1加入血管新生肽，在室温下反应24-48h，得到血管新生肽透明质酸；所述血管新生肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。
进一步，所述氨基化透明质酸的制备方法为将透明质酸与己二酸二酰肼在室温条件下反应24-72h，透明质酸与己二酸二酰肼的摩尔比为1:1-30，透析72-120h，冻干24-120h，得到氨基化透明质酸。
进一步，所述氧化透明质酸的制备方法为按照透明质酸与高碘酸钠的摩尔比为1:0.05-1.2，取透明质酸与高碘酸钠溶解在蒸馏水中，在室温下避光反应1-24h，后加入过量乙二醇终止反应，高碘酸钠与乙二醇的摩尔比为1:2-10，在室温下反应0.5-2h，然后透析48-120h，冻干24-120h，得到氧化透明质酸。
本发明的进一步采用的技术方案的有益效果是：在室温条件下，通过酯化反应、酰胺化反应、迈克尔加成反应和希夫碱反应，得到糖肽水凝胶，反应条件温和，时间短，效率高，后多肽和多糖通过动态化学键和氢键交联形成水凝胶，不需要额外的交联剂。该水凝胶成本低、良好的生物相容性，具有很好的临床应用前景。
进一步，所述透明质酸的分子量为1000-5000k Da。
第二个目是提供一种可注射多功能糖肽水凝胶，由如上述制备得到的多功能糖肽水凝胶。
本发明采用的技术方案的有益效果是：本发明的多功能糖肽水凝胶具有一下优势：(1)材料来源上，均是采用天然生物材料，具有良好的生物相容性，降解产物为氨基酸、糖胺聚糖，均是体内存在的物质，无潜在的安全性问题；(2)制备工艺上，通过加成反应得到糖肽材料，然后通过动态共价键和氢键形成可注射水凝胶；(3)支架功能上，所制备的水凝胶具有多孔结构、有利于细胞增殖和迁移；并且含有大量水分，可以为伤口部位提供一个湿润环境；具有抗菌、抗炎以及促血管新生的作用，有利于伤口的愈合和组织再生。
第三个目是提供一种可注射多功能糖肽水凝胶的应用，将所述多功能糖肽水凝胶应用在治疗感染创伤或/和促进组织修复中。
本发明采用的技术方案的有益效果是：糖肽水凝胶可以在创伤感染部位发挥很好的生物活性，为创伤愈合提供一个无菌环境。
进一步，所述透析的条件为，在室温条件下用截留分子量为3500Da的透析袋在蒸馏水中透析72～120h。
进一步，本发明中涉及到的温条件指的是20-30℃。
附图说明
图1为本发明HA-AMP聚合物的合成路线；
图2为本发明HA-CAP聚合物的合成路线；
图3为本发明HA-SLanc聚合物的合成路线；
图4为本发明HA-AMP聚合物的圆二色谱；
图5为本发明HA-CAP聚合物的圆二色谱；
图6为本发明HA-SLanc聚合物的圆二色谱；
图7为本发明HA-P水凝胶的合成路线；
图8为本发明HA-P水凝胶的图片；
图9为本发明HA-P水凝胶的SEM图；
图10为本发明HA-P水凝胶的抗菌活性；
图11为本发明HA-P水凝胶的细胞相容性；
图12为本发明HA-P水凝胶的成管性；
图13为本发明HA-P水凝胶的促进感染伤口的愈合；
图14为本发明创伤部位的H&E和Masson’s染色图片。
具体实施方式
实施例1
本实施例涉及一种可注射的多功能糖肽水凝胶的制备方法，包括下述步骤(如图1至3和7)：
S1：将透明质酸与高碘酸钠按照5:1的摩尔比进行反应，在避光条件下反应3h，加入过量乙二醇终止反应，高碘酸钠与乙二醇的摩尔比为1:2，反应0.5h，透析72h，冻干72h，得到氧化透明质酸(HA-CHO)，将HA-CHO与抗菌肽(氨基酸序列如SEQ ID NO:1)按照10:1的摩尔比反应，在室温下反应24h，得到抗菌肽透明质酸(HA-AMP)；
S2：将透明质酸与高碘酸钠按照5:1的摩尔比进行反应，在避光条件下反应3h，加入过量乙二醇终止反应，透析72h，冻干72h，得到氧化透明质酸，将HA-CHO与3-马来酰亚胺丙酸反应得到中间体Ⅰ，然后与儿茶酚肽按照10:1的摩尔比进行反应，在室温条件下反应24h，得到儿茶酚肽透明质酸(HA-CAP)；
S3：将透明质酸与高碘酸钠按照5:1的摩尔比进行反应，在避光条件下反应3h，加入过量乙二醇终止反应，透析72h，冻干72h，得到氧化透明质酸，将HA-CHO与3-马来酰亚胺丙酸反应得到中间体Ⅱ，然后与血管新生肽按照10:1的摩尔比进行反应，在室温条件下反应24h，得到血管新生肽肽透明质酸(HA-SLanc)；
S4：将透明质酸与己二酸二酰肼按照摩尔比1:5反应24h，然后透析72h，冻干72h，得到氨基化透明质酸(HA-NH2)。
S5：将HA-AMP、HA-CAP、HA-SLanc与HA-NH2按照摩尔比0.5：0.5：0.5：2混合，在室温条件下反应5min，静置得到1wt％的糖肽水凝胶。
实施例2
本实施例涉及一种可注射的多功能糖肽水凝胶的制备方法，包括下述步骤(如图1至3和7)：
S1，将透明质酸与高碘酸钠按照5:2的摩尔比进行反应，在避光条件下反应4h，加入过量乙二醇终止反应，透析72h，冻干72h，得到氧化透明质酸(HA-CHO)，将HA-CHO与抗菌肽按照10:2的摩尔比反应，在室温下反应24h，得到抗菌肽透明质酸(HA-AMP)；
S2，将透明质酸与高碘酸钠按照5:2的摩尔比进行反应，在避光条件下反应4h，加入过量乙二醇终止反应，透析72h，冻干72h，得到氧化透明质酸，将HA-CHO与3-马来酰亚胺丙酸反应得到中间体Ⅰ，然后与儿茶酚肽按照10:2的摩尔比进行反应，在室温条件下反应24h，得到儿茶酚肽透明质酸(HA-CAP)；
S3，将透明质酸与高碘酸钠按照5:2的摩尔比进行反应，在避光条件下反应4h，加入过量乙二醇终止反应，透析72h，冻干72h，得到氧化透明质酸，将HA-CHO与3-马来酰亚胺丙酸反应得到中间体Ⅱ，然后与血管新生肽按照10:2的摩尔比进行反应，在室温条件下反应24h，得到血管新生肽肽透明质酸(HA-SLanc)；
S4，将透明质酸与己二酸二酰肼按照摩尔比1:6反应24h，然后透析72h，冻干72h，得到氨基化透明质酸(HA-NH2)。
S5，将HA-AMP、HA-CAP、HA-SLanc与HA-NH2按照摩尔比0.6：0.6：0.6：2混合，在室温条件下反应6min，静置得到1wt％的糖肽水凝胶，如图8所示。
实施例3
本实施例涉及一种可注射的多功能糖肽水凝胶的制备方法，包括下述步骤(如图1至3和7)：
S1，将透明质酸与高碘酸钠按照5:3的摩尔比进行反应，在避光条件下反应5h，加入过量乙二醇终止反应，透析72h，冻干72h，得到氧化透明质酸(HA-CHO)，将HA-CHO与抗菌肽按照10:3的摩尔比反应，在室温下反应24h，得到抗菌肽透明质酸(HA-AMP)；
S2，将透明质酸与高碘酸钠按照5:3的摩尔比进行反应，在避光条件下反应5h，加入过量乙二醇终止反应，透析72h，冻干72h，得到氧化透明质酸，将HA-CHO与3-马来酰亚胺丙酸反应得到中间体Ⅰ，然后与儿茶酚肽按照10:3的摩尔比进行反应，在室温条件下反应24h，得到儿茶酚肽透明质酸(HA-CAP)；
S3，将透明质酸与高碘酸钠按照5:3的摩尔比进行反应，在避光条件下反应5h，加入过量乙二醇终止反应，透析72h，冻干72h，得到氧化透明质酸，将HA-CHO与3-马来酰亚胺丙酸反应得到中间体Ⅱ，然后与血管新生肽按照10:3的摩尔比进行反应，在室温条件下反应24h，得到血管新生肽肽透明质酸(HA-SLanc)；
S4，将透明质酸与己二酸二酰肼按照摩尔比1:7反应24h，然后透析72h，冻干72h，得到氨基化透明质酸(HA-NH2)。
S5，将HA-AMP、HA-CAP、HA-SLanc与HA-NH2按照摩尔比0.7：0.7：0.7：3混合，在室温条件下反应7min，静置得到1wt％的糖肽水凝胶。
实施例4
本实施例涉及一种可注射的多功能糖肽水凝胶的制备方法，包括下述步骤(如图1至3和7)：
S1，将透明质酸与高碘酸钠按照5:4的摩尔比进行反应，在避光条件下反应6h，加入过量乙二醇终止反应，透析72h，冻干72h，得到氧化透明质酸(HA-CHO)，将HA-CHO与抗菌肽按照10:4的摩尔比反应，在室温下反应24h，得到抗菌肽透明质酸(HA-AMP)；
S2，将透明质酸与高碘酸钠按照5:4的摩尔比进行反应，在避光条件下反应6h，加入过量乙二醇终止反应，透析72h，冻干72h，得到氧化透明质酸，将HA-CHO与3-马来酰亚胺丙酸反应得到中间体Ⅰ，然后与儿茶酚肽按照10:4的摩尔比进行反应，在室温条件下反应24h，得到儿茶酚肽透明质酸(HA-CAP)；
S3，将透明质酸与高碘酸钠按照5:4的摩尔比进行反应，在避光条件下反应6h，加入过量乙二醇终止反应，透析72h，冻干72h，得到氧化透明质酸，将HA-CHO与3-马来酰亚胺丙酸反应得到中间体Ⅱ，然后与血管新生肽按照10:4的摩尔比进行反应，在室温条件下反应24h，得到血管新生肽肽透明质酸(HA-SLanc)；
S4，将透明质酸与己二酸二酰肼按照摩尔比1:8反应24h，然后透析72h，冻干72h，得到氨基化透明质酸(HA-NH2)。
S5，将HA-AMP、HA-CAP、HA-SLanc与HA-NH2按照摩尔比0.8：0.8：0.8：3混合，在室温条件下反应7min，静置得到1wt％的糖肽水凝胶。
实施例5
本实施例涉及一种可注射的多功能糖肽水凝胶的制备方法，包括下述步骤(如图1至3和7)：
S1，将透明质酸与高碘酸钠按照5:6的摩尔比进行反应，在避光条件下反应7h，加入过量乙二醇终止反应，透析72h，冻干72h，得到氧化透明质酸(HA-CHO)，将HA-CHO与抗菌肽按照1:1的摩尔比反应，在室温下反应24h，得到抗菌肽透明质酸(HA-AMP)；
S2，将透明质酸与高碘酸钠按照5:6的摩尔比进行反应，在避光条件下反应7h，加入过量乙二醇终止反应，透析72h，冻干72h，得到氧化透明质酸，将HA-CHO与3-马来酰亚胺丙酸反应得到中间体Ⅰ，然后与儿茶酚肽按照1:1的摩尔比进行反应，在室温条件下反应24h，得到儿茶酚肽透明质酸(HA-CAP)；
S3，将透明质酸与高碘酸钠按照5:6的摩尔比进行反应，在避光条件下反应7h，加入过量乙二醇终止反应，透析72h，冻干72h，得到氧化透明质酸，将HA-CHO与3-马来酰亚胺丙酸反应得到中间体Ⅱ，然后与血管新生肽按照1:1的摩尔比进行反应，在室温条件下反应24h，得到血管新生肽肽透明质酸(HA-SLanc)；
S4，将透明质酸与己二酸二酰肼按照摩尔比1:10反应24h，然后透析72h，冻干72h，得到氨基化透明质酸(HA-NH2)。
S5，将HA-AMP、HA-CAP、HA-SLanc与HA-NH2按照摩尔比1:1:1:5混合，在室温条件下反应10min，静置得到10wt％的糖肽水凝胶。
实施例6：对实施例1-5制备的HA-AMP、HA-CAP、HA-Slanc进行1H NMR分析
本实施例采用氘代水为溶剂，在核磁共振仪Bruker 400进行测试，结果如下，化学位移3.0-4.5ppm是透明质酸的特征吸收峰；化学位移6.2ppm处是抗菌肽的特征吸收峰。以上分析证明了抗菌肽透明质酸化学结构的正确性。
本实施例采用氘代水为溶剂，在核磁共振仪Bruker 400进行测试，结果如下，化学位移3.0-4.5ppm是透明质酸的特征吸收峰；化学位移6.5ppm处是儿茶酚肽的特征吸收峰。以上分析证明了儿茶酚肽透明质酸化学结构的正确性。
本实施例采用氘代水为溶剂，在核磁共振仪Bruker 400进行测试，结果如下，化学位移3.0-4.5ppm是透明质酸的特征吸收峰；化学位移5.9ppm处是血管新生肽的特征吸收峰。以上分析证明了血管新生肽透明质酸化学结构的正确性。
本实施例采用氘代水为溶剂，在核磁共振仪Bruker 400进行测试，结果如下，化学位移3.0-4.5ppm是透明质酸的特征吸收峰；化学位移1.5-2.5ppm处是己二酸二酰肼的特征吸收峰。以上分析证明了氨基化透明质酸化学结构的正确性。
实施例7：圆二色谱分析
采用圆二色谱仪对多肽及糖肽的二级结构进行分析，如图4-6所示，反应前后，多肽的二级结构没有发生明显变化，说明该方法可行，不会影响多肽的结构，从而保持多肽的生物活性。
以实施例1得到的水凝胶，如图8所示。将水凝胶样品冻干，得到冻干样品，用SEM观察微观结构，如图9所示，水凝胶内部具有高度交联的三维网状结构，孔径大小几微米至几百微米不等。
实施例8：对本实施例1制备的水凝胶的抗菌活性和生物相容性测试实验
1.水凝胶的抗菌活性测试
将实施例1制备得到的水凝胶与细菌(106CFU/mL,MRSA)共培养2h，分别将空白对照组、壳聚糖组(购于奇力康皮肤药业)以及实验组均匀涂布到LB固体培养基上，培养24h后观察，如图10所示，实验组没有明显菌落，而其他组均有明显菌落，说明该水凝胶可以显著抑制细菌的生长，具有较好的抗菌活性。
2.水凝胶对体外细胞毒性评价
本发明采用CCK-8检测水凝胶对成纤维细胞的细胞毒性。将空白对照组、壳聚糖组及实施例1制备得到的水凝胶与细胞共培养，孵育一定时间后，用CCK-8作用4h，在405nm处检测吸光度。如图11所示，细胞存活率在95％以上，说明该水凝胶没有明显细胞毒性。
实验过程具体参考《GB/T 16886.5-2003，医疗器械生物学评价第5部分：体外细胞毒性试验》，由实验结果可知，细胞的存活率大于95％，细胞毒性分级为0级，因此，该材料没有细胞毒性。
3.水凝胶溶血性评价
根据《GB/T 16886.4-2003/ISO 10993-4:2002，医疗器械生物学评价第4部分：与血液相互作用实验选择》中的要求，按照溶血率计算方法，计算水凝胶的溶血性。如表1所示，实验结果显示，水凝胶的溶血率<5％，符合医疗器械使用要求。
表1水凝胶的溶血率
4.水凝胶成管实验
通过成管实验，评价了水凝胶对脐静脉内皮细胞成管的促进作用，如图12所示，水凝胶对脐静脉内皮细胞具有较好的促血管作用，有利于血管的形成。
5.体内细菌感染皮肤创伤修复研究
将SD大鼠进行全身麻醉，背部手术区域备皮后，固定于手术台上，在背部制造直径1cm开放性全层皮肤缺损的创面，并用MRSA细菌感染，制备细菌感染创伤模型。
将细菌感染创伤模型SD大鼠随及分为三组：空白对照组，壳聚糖组，透明质酸肽实验组，每组6只；空白对照组涂抹生理盐水，壳聚糖组采用购于奇力康皮肤药业的壳聚糖进行治疗，透明质酸肽实验组采用本实施例1制备的透明质酸肽，均是隔天进行敷料更换，实时观察伤口愈合情况。如图13所示，经过12天治疗后，实验组伤口基本完全愈合，显著优于对照组。说明该水凝胶能够显著促进伤口愈合。并且进行病理分析，如图14所示，经过治疗后，实验组已经形成了大量的胶原纤维，炎症细胞明显减少，有相对完整的表皮层，真皮组织修复相对完整，并且接近正常组织。说明多功能水凝胶可以快速杀灭细菌、清除自由基、促进血管新生，从而加速伤口的修复与再生。
综上所述，该多功能糖肽水凝胶具有抗菌性、清除ROS、降低炎症、促进血管新生，加速伤口修复。与壳聚糖水凝胶相比，具有更好的生物活性，是一款适合慢性感染伤口治疗的水凝胶。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。
Claims (10)
1.一种可注射多功能糖肽水凝胶的制备方法，其特征在于，将制备得到的抗菌肽透明质酸、儿茶酚肽透明质酸、血管新生肽透明质酸与氨基化透明质酸按照摩尔比为(0.1-1)：(0.1-1)：(0.1-1)：(0.3-5)混合均匀，在室温条件下反应5-30min，静置得到多功能糖肽水凝胶，所述抗菌肽透明质酸结构式如式I所示，所述儿茶酚肽透明质酸结构式如式II所示，所述血管新生肽透明质酸结构式如式III所示，所述氨基化透明质酸结构式如式Ⅳ所示；
2.根据权利要求1所述的一种可注射多功能糖肽水凝胶的制备方法，其特征在于，将制备得到的抗菌肽透明质酸、儿茶酚肽透明质酸、血管新生肽透明质酸与氨基化透明质酸按照摩尔比为(0.5-1)：(0.5-1)：(0.5-1)：(0.3-3)混合均匀，在室温条件下反应5-30min，静置得到摩尔浓度为0.01-10wt％的多功能糖肽水凝胶。
3.根据权利要求1或2所述的一种可注射多功能糖肽水凝胶的制备方法，其特征在于，所述抗菌肽透明质酸的制备方法为在pH＝5.0±0.3缓冲液中溶解氧化透明质酸，然后按照氧化透明质酸与EDC、NHS的摩尔比值为1：(1～5)：(1：5)加入EDC、NHS活化氧化透明质酸的羧基，后按照氧化透明质酸与抗菌肽按摩尔比为1:0.01-1加入抗菌肽，在室温下反应24-48h，得到抗菌肽透明质酸；所述抗菌肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
4.根据权利要求3所述的一种可注射多功能糖肽水凝胶的制备方法，其特征在于，所述儿茶酚肽透明质酸的制备方法为将氧化透明质酸与3-马来酰亚胺丙酸按照摩尔比为1:1.2-3，在室温条件下反应24-72h，透析72-120h，冻干24-120h，得到的中间产物，将中间产物溶解在pH＝5.0±0.3缓冲液中，然后按照中间产物与儿茶酚肽的摩尔比为1:0.05-1加入儿茶酚肽，在室温下反应24-48h，得到儿茶酚肽透明质酸；所述儿茶酚肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
5.根据权利要求4所述的一种可注射多功能糖肽水凝胶的制备方法，其特征在于，所述血管新生肽透明质酸的制备方法为将溶解在pH＝5.0±0.3缓冲液的中间产物，按照中间产物与血管新生肽的摩尔比为1:0.05-1加入血管新生肽，在室温下反应24-48h，得到血管新生肽透明质酸；所述血管新生肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示。
6.根据权利要求1所述的一种可注射多功能糖肽水凝胶的制备方法，其特征在于，所述氨基化透明质酸的制备方法为将透明质酸与己二酸二酰肼在室温条件下反应24-72h，透明质酸与己二酸二酰肼的摩尔比为1:1-30，透析72-120h，冻干24-120h，得到氨基化透明质酸。
7.根据权利要求4所述的一种可注射多功能糖肽水凝胶的制备方法，其特征在于，所述氧化透明质酸的制备方法为按照透明质酸与高碘酸钠的摩尔比为1:0.05-1.2，取透明质酸与高碘酸钠溶解在蒸馏水中，在室温下避光反应1-24h，后加入过量乙二醇终止反应，高碘酸钠与乙二醇的摩尔比为1:2-10，在室温下反应0.5-2h，然后透析48-120h，冻干24-120h，得到氧化透明质酸。
8.根据权利要求6或7所述的一种可注射多功能糖肽水凝胶的制备方法，其特征在于，所述透明质酸的分子量为1000-5000k Da。
9.一种可注射多功能糖肽水凝胶，其特征在于，由如权利要求1-8任一项所述一种可注射多功能糖肽水凝胶的制备方法制备得到的多功能糖肽水凝胶。
10.基于权利要求9所述一种可注射多功能糖肽水凝胶的应用，其特征在于，将所述多功能糖肽水凝胶应用在治疗感染创伤或/和促进组织修复中。
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