CN115554187B

CN115554187B - 一种可湿热灭菌的贻贝粘蛋白皮肤修护乳液及其制备方法

Info

Publication number: CN115554187B
Application number: CN202211552905.0A
Authority: CN
Inventors: 徐林; 金玉; 徐念沁; 曹晶晶; 徐松泉; 居丽娜; 姜豪; 刘谋治; 黎文清
Original assignee: Nanjing Tzong Blotechnology Co ltd
Current assignee: Nanjing Tzong Blotechnology Co ltd
Priority date: 2022-12-06
Filing date: 2022-12-06
Publication date: 2023-04-07
Anticipated expiration: 2042-12-06
Also published as: CN115554187A

Abstract

本发明公开一种可湿热灭菌的贻贝粘蛋白皮肤修护乳液及其制备方法，按重量份计，该贻贝粘蛋白皮肤修护乳液组分包括：贻贝粘蛋白0.1～0.2份，海藻糖3～15份，保湿剂2～20份，润肤剂1.5～2份，增溶剂0.01～0.03份，增稠剂0.2～1份，pH调节剂0.1～0.5份，纯化水80～95份。本发明采用海藻糖作为保护剂，使得贻贝粘蛋白在湿热灭菌后保持良好的生物活性，同时其使乳液体系稳定，并与其他组分协同作用加强贻贝粘蛋白的抗炎功效。本发明乳液成膜性和抗炎效果俱佳，具有良好的工业生产价值及经济价值。

Description

一种可湿热灭菌的贻贝粘蛋白皮肤修护乳液及其制备方法

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及贻贝粘蛋白制剂，具体涉及一种可湿热灭菌的贻贝粘蛋白皮肤修护乳液及其制备方法。

背景技术

贻贝粘蛋白（mussel adhesive protein，MAP）提取自紫贻贝（blue mussel，Mytilus edulis）的足丝腺，是一种多酚类单一蛋白生物材料。贻贝粘蛋白分子由70～90个重复的多肽片段组成，其中含有20%的赖氨酸和10%的多巴基团（3,4-二羟基苯丙氨酸）。赖氨酸带正电荷，其通过静电作用吸引人体带负电荷的表皮细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞、神经细胞贴壁和爬行替代；多巴基团的自氧化交联体现在多巴基团可以与空气中的氧结合，形成多巴醌，多巴醌和未氧化的多巴可交联形成高聚物，从而促进创面的愈合。因此，贻贝粘蛋白是创面修复敷料的优良选择。例如，中国专利文献CN114569515A公开的一种医美术后皮肤屏障受损修复的水凝胶及其制备方法，采用类贻贝粘蛋白结合青桔提取物、香茅精油、缬草精油等，科学配比，制得的水凝胶对医美术后皮肤屏障修复具有良好的效果。

贻贝粘蛋白对温湿度比较敏感，变性温度较低，高温会导致其结构解离、生物活性丧失，因而现有贻贝粘蛋白敷料类无菌产品均采用辐照灭菌。例如，中国专利文献CN114917403A公开的一种类贻贝粘蛋白凝胶及其制备方法和应用，将凝胶剂冻干成粉末或者海绵和辅助溶剂分开，类贻贝粘蛋白存在于冻干粉或者海绵中，采用低剂量辐照灭菌，产品保存可采用常温保存下。

海藻糖，又称为漏芦糖、蕈糖，是由两个葡萄糖分子组成的一个非还原性双糖。据研究，海藻糖是天然双糖中最稳定的一类。由于不具有还原性，对热和酸碱都具有非常好的稳定性。在与氨基酸、蛋白质共存时，即使加热也不会发生美拉德反应。因此海藻糖作为蛋白保护剂的研究一直备受关注，例如：中国专利文献CN101007840A公开的一种常温保持活性蛋白活性的方法，使用两种化学物质构成复合成份，用于提高活性蛋白的稳定性，从而达到常温保存和运输活性蛋白的目的，这两种成份分别是:十二烷基聚乙二醇醚（即Brij-35）和α-D-吡喃葡萄糖基-α-D-吡喃葡萄糖苷（海藻糖，trehalose）。

然而，检索发现，目前加入海藻糖的蛋白保护剂，多是用于药品或制剂的冻干粉剂的保护，即便用于蛋白的高温保护，其耐受的温度也不超过42℃。例如：中国专利文献CN113694189A公布一种蛋白酶K的冷冻干燥保护剂及制备方法，将Ca²⁺及蔗糖、海藻糖、麦芽糖、甘氨酸、L-丝氨酸、α-丙氨酸中的一种或多种作为冻干保护剂成分，可有效提高蛋白酶K在真空冷冻干燥过程中的冻干存活率，并提高蛋白酶K冻干粉的储存稳定性。中国专利文献CN113717272A公开的提高重组人源胶原蛋白稳定性的冻干保护剂，所述的保护剂按重量份数计，以重组人源胶原蛋白为100份，由海藻糖500～2000份、聚乙烯吡咯烷酮（PVP-K30）100～500份和甘露醇100～200份组成；在重组人源胶原蛋白冻干过程中，添加冻干保护剂能够明显提高重组人源胶原蛋冻干粉在常温下的稳定性，防止其纯度和活性下降，制得的冻干粉可在常温下长期放置。

对于皮肤修护乳液等医美产品而言，其组分多含有高分子材料，辐照灭菌常用的60Co-γ射线对高分子材料有一定的破坏性，同时对产品的包装材料也会造成一定程度的损伤。因此，如何实现含有贻贝粘蛋白的医美产品可湿热灭菌，同时保证产品中贻贝粘蛋的生物活性，是亟待解决的问题。

发明内容

针对如何实现含有贻贝粘蛋白的医美产品可湿热灭菌，同时保证产品中贻贝粘蛋的生物活性的问题，本发明提供一种可湿热灭菌的贻贝粘蛋白皮肤修护乳液及其制备方法，通过选择海藻糖作为贻贝粘蛋白的蛋白保护剂，结合合适的保湿剂、润肤剂，以及特定的制备工艺，实现制备的皮肤修护乳液在高温湿热灭菌工艺下贻贝粘蛋仍具有良好的生物活性，并提高产品的抗炎效果。具体技术方案如下：

首先，本发明提供一种可湿热灭菌的贻贝粘蛋白皮肤修护乳液，按重量份计，其组分包括：贻贝粘蛋白0.1～0.2份，海藻糖3～15份，保湿剂2～20份，润肤剂1.5～2份，增溶剂0.01～0.03份，增稠剂0.2～1份，pH调节剂0.1～0.5份，纯化水80～95份。

优选的，所述海藻糖和贻贝粘蛋白的质量比为15:1～150:1。

进一步优选的，所述海藻糖和贻贝粘蛋白的质量比为50:1～150:1。

前述的可湿热灭菌的贻贝粘蛋白皮肤修护乳液，所述保湿剂为甘油、丙二醇、丁二醇、戊二醇、山梨醇、聚乙二醇、甜菜碱、透明质酸钠、尿囊素、尿素中的一种或多种；所述润肤剂为可可脂、凡士林、水溶性硅蜡、液体石蜡、羊毛脂、硬脂酸酯、卵磷脂、角鲨烷、聚二甲基硅氧烷、鲸蜡硬脂醇中的一种或多种；所述增溶剂为氢化蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油、脂肪醇聚氧乙烯醚、聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯、聚甘油脂肪酸酯中的一种或几种；所述增稠剂为卡波姆、聚丙烯酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、可溶性淀粉、黄原胶、明胶中的一种或几种；所述pH调节剂为三乙醇胺、氨甲基丙醇、氢氧化钠、氢氧化钾中的一种。

优选的，所述保湿剂为甘油、丙二醇、丁二醇、甜菜碱、透明质酸钠、尿囊素中的一种或多种；所述润肤剂为可可脂、卵磷脂、角鲨烷、聚二甲基硅氧烷中的一种或几种；所述增溶剂为氢化蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油、脂肪醇聚氧乙烯醚中的一种或几种；所述增稠剂为卡波姆、聚丙烯酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素的一种或几种；所述pH调节剂为三乙醇胺、氨甲基丙醇中的一种。

前述的可湿热灭菌的贻贝粘蛋白皮肤修护乳液，海藻糖和甘油、丙二醇、丁二醇、甜菜碱、尿囊素的质量比均为1～30:1，优选为2～10:1；海藻糖和卵磷脂、角鲨烷、聚二甲基硅氧烷的质量比均为1～100:1，优选为3～20:1。

其次，本发明提供一种前述的可湿热灭菌的贻贝粘蛋白皮肤修护乳液的制备方法，包括以下步骤：

S1：在纯化水中投入海藻糖、增稠剂、保湿剂，以200～300rpm的速度搅拌并加热至40～85℃，使固体全部溶解，继续搅拌30～60分钟；

S2：向S1步骤得到的物料中加入贻贝粘蛋白，继续以200～300rpm的速度搅拌30～60分钟；

S3：将S2步骤得到的物料升温至80～85℃，加入增溶剂、润肤剂，再以200～300rpm的速度搅拌使物料充分混合，再以2000～4000rpm搅拌速度下均质5～10分钟，得到均相物料；

S4：将步骤S3得到的均相物料降温至40～45℃，加入pH调节剂对其进行中和，使该料体的pH值在5.0～7.0之间，然后再以200～300rpm的速度继续搅拌，直至分散均匀；

S5：然后多次抽真空，直至气泡彻底消除，之后将待料体温度降至38℃以下，灌装进包材中并进行湿热灭菌，即得贻贝粘蛋白皮肤修护乳液。

前述的可湿热灭菌的贻贝粘蛋白皮肤修护乳液的制备方法，步骤S2中，在加入贻贝粘蛋白前，将物料温度降至40～50℃。

前述的可湿热灭菌的贻贝粘蛋白皮肤修护乳液的制备方法，步骤S6中，所述湿热灭菌的条件为：灭菌温度105～121℃，灭菌时间15～60分钟。

本发明的有益效果：

1）本发明以海藻糖作为贻贝粘蛋白的保护剂主体，结合合适的保湿剂、润肤剂，抑制贻贝粘蛋白在高温下（80℃以上）变性，使制备的贻贝粘蛋白皮肤修护乳液可以进行湿热灭菌，杜绝了辐照灭菌对高分子材料和包材的破坏性以及对人和环境的潜在污染，降低了生产成本；并且在湿热灭菌后产品中的贻贝粘蛋白仍保持良好的生物活性，具有良好的抗炎效果。

2）本发明贻贝粘蛋白与其余各组分形成非共价相互作用，增强了静电作用和促进了自身多巴自氧化交联，因此使得自身的抗炎功效得以提升。其中，海藻糖、甜菜碱和尿囊素组合促进了赖氨酸正电荷的形成，并可稳定贻贝粘蛋白的静电相互作用；海藻糖与甘油、丙二醇、丁二醇、戊二醇组合可以和多巴的邻苯二酚结构通过氢键形成非共价相互作用，进而催化多巴氧化为多巴醌，促进多巴的自氧化交联作用；同时，本发明公布的组分卵磷脂、角鲨烷、聚二甲基硅氧烷等润肤剂的油相成分可以和贻贝粘蛋白的疏水基团通过疏水效应形成非共价相互作用，进而提高贻贝粘蛋白的疏水相互作用；通过组分间这三种作用，从而使本发明贻贝粘蛋白皮肤修护乳液表现出了远超各组分单一添加时的抗炎效果。

3）本发明制备方法，首先将各添加成分在高温下混合溶解，降低温度后加入贻贝粘蛋白，搅拌下使贻贝粘蛋白和各组分充分混合。在此过程中，贻贝粘蛋白与水分子结合，对海藻糖发生溶剂化排阻作用，海藻糖分子由此分布于贻贝粘蛋白分子周边起到保护作用，在后续升温过程中抑制贻贝粘蛋白的变性。

4）本发明通过调整海藻糖和贻贝粘蛋白的特定配比以及贻贝粘蛋白的添加量，使得贻贝粘蛋白皮肤修护乳液达到了最佳的成膜性和抗炎性，进而加速皮肤创面愈合，具有良好的工业生产价值及经济价值。

附图说明

图1为本发明不同配方贻贝粘蛋白皮肤修护乳液的成膜性考察结果。

具体实施方式

为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合实施例，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述。

实施例1

本实施例是一种可湿热灭菌的贻贝粘蛋白皮肤修护乳液及其制备方法，该贻贝粘蛋白皮肤修护乳液，按重量份计，其组分包括：贻贝粘蛋白0.1～0.2份，海藻糖3～15份，保湿剂2～20份，润肤剂1.5～2份，增溶剂0.01～0.03份，增稠剂0.2～1份，pH调节剂0.1～0.5份，纯化水80～95份。所述海藻糖和贻贝粘蛋白的质量比为15:1～150:1，优选为50:1～150:1。

本实施例所述的可湿热灭菌的贻贝粘蛋白皮肤修护乳液，所述保湿剂为甘油、丙二醇、丁二醇、戊二醇、山梨醇、聚乙二醇、甜菜碱、透明质酸钠、尿囊素、尿素中的一种或多种；优选为甘油、丙二醇、丁二醇、甜菜碱、透明质酸钠、尿囊素中的一种或多种。所述润肤剂为可可脂、凡士林、水溶性硅蜡、液体石蜡、羊毛脂、硬脂酸酯、卵磷脂、角鲨烷、聚二甲基硅氧烷、鲸蜡硬脂醇中的一种或多种；优选为可可脂、卵磷脂、角鲨烷、聚二甲基硅氧烷中的一种或几种。所述增溶剂为氢化蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油、脂肪醇聚氧乙烯醚、聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯、聚甘油脂肪酸酯中的一种或几种；优选为氢化蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油、脂肪醇聚氧乙烯醚中的一种或几种。所述增稠剂为卡波姆、聚丙烯酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、可溶性淀粉、黄原胶、明胶中的一种或几种；优选为卡波姆、聚丙烯酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素的一种或几种。所述pH调节剂为三乙醇胺、氨甲基丙醇、氢氧化钠、氢氧化钾中的一种；优选为三乙醇胺或氨甲基丙醇中的一种。其中，海藻糖和甘油、丙二醇、丁二醇、甜菜碱、尿囊素的质量比均为1～30:1，优选为2～10:1；海藻糖和卵磷脂、角鲨烷、聚二甲基硅氧烷的质量比均为1～100:1，优选为3～20:1。

本实施例所述的可湿热灭菌的贻贝粘蛋白皮肤修护乳液的制备方法，包括以下步骤：

S2：向S1步骤得到的物料中加入贻贝粘蛋白，继续以200～300rpm的速度搅拌30～60分钟；为了使海藻糖更好地保护贻贝粘蛋白，在加入贻贝粘蛋白前可将物料先降温降至40～50℃再加入。

S5：然后多次抽真空，直至气泡彻底消除，之后将待料体温度降至38℃以下，灌装进包材中并进行湿热灭菌，即得贻贝粘蛋白皮肤修护乳液。湿热灭菌的条件为：灭菌温度105～121℃，灭菌时间15～60分钟。

实施例2

本实施例为考察实施例1所述的贻贝粘蛋白皮肤修护乳液在湿热灭菌后的稳定性和贻贝粘蛋白的生物活性。本实施例用于考察的贻贝粘蛋白皮肤修护乳液的配方如表1所示，制备方法按实施例1所述的方法制备。将制备的贻贝粘蛋白皮肤修护乳液依次置于-15℃，5℃，25℃，40℃和55℃条件下，分别测试30天、60天及90天，观察湿热灭菌后乳液的分相情况，测试结果如表2所示。

表1：

表2：

表2的测试结果显示，本实施例制备的乳液1～3，分别在25℃、40℃、55℃、5℃、-15℃的条件下存储20～90天均未发生分相；而未添加海藻糖的乳液4在各考察温度下均发生了分相，这表明海藻糖的添加起到了稳定乳液的作用，在湿热灭菌的条件下使所制备的贻贝粘蛋白皮肤修护乳液也能保持优良的稳定性。

进一步考察本实施例所述制备的乳液1～3的抗炎性。肿瘤坏死因子（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）是炎症反应过程中最常见、最重要的炎性介质，会引发红肿热痛等炎症症状。通过降低这些因子的含量，可以控制炎症反应的程度。试验使用脂多糖（LPS）干预巨噬细胞建立炎症细胞模型，通过测定其中TNF-α和IL-6的含量评估贻贝粘蛋白皮肤修护乳液的抗炎效果。测试组中分别加入乳液1～3和LPS（1μg/ml）的培养基，阴性对照组加入含有LPS（1μg/ml）的细胞培养基，用ELISA检测试剂盒检测TNF-α和IL-6的含量，试验结果见表3。

表3：

表3的试验结果显示，本实施例制备的乳液1～3具有明显的抗炎效果，即表明了贻贝粘蛋白的抗炎功效在湿热灭菌后没有丧失生物活性。

实施例3

本实施例是进一步考察湿热灭菌对贻贝粘蛋白抗炎效果的影响，同时考察各组分间的协同作用。本实施例用于考察抗炎效果的乳液5～10配方如表4所示，其制备方法同样按实施例1所述的方法制备，其中乳液5、7、9无湿热灭菌这一步骤，乳液6、8、10进行湿热灭菌。

考察抗炎效果的方法与实施例2中的方法一样，通过测定肿瘤坏死因子（TNF-α）和白细胞介素-6（IL-6）的含量评估贻贝粘蛋白皮肤修护乳液的抗炎效果。试验结果如5所示。

表4：

表5：

由表5的抗炎试验结果可知，未经湿热灭菌的乳液5有明显的抗炎效果，而与乳液5配方一致经过灭菌的乳液6几乎没有抗炎效果，这表明了贻贝粘蛋白的抗炎功效在湿热灭菌后丧失。

加入海藻糖的乳液7的相较乳液5，抗炎效果有一定程度的增加，这表明海藻糖对贻贝粘蛋白的抗炎功效有明显的增强作用；乳液8的配方与乳液7一致，且经过湿热灭菌，其抗炎效果和乳液7相当，这表明海藻糖在湿热灭菌时起到了保护贻贝粘蛋白的作用，使贻贝粘蛋白的抗炎功效得以保持。乳液9和乳液10的相较于乳液7和乳液8，其抗炎效果均有很明显的提高，这证明了本发明贻贝粘蛋白皮肤修护乳液各组分间的协同配合作用，使得贻贝粘蛋白的抗炎功效得到了进一步的增强。

实施例4

本实施例为进一步考察海藻糖的用量对贻贝粘蛋白的保护效果。本实施例用于考察的乳液11～15配方如表6所示，其制备方法同样按实施例1所述的方法制备。各乳液的贻贝粘蛋白添加量不变，海藻糖的用量不同，通过制备的各乳液的抗炎效果来探寻海藻糖的添加最优解。各乳液的抗炎效果检测结果如表7所示。

表6：

表7：

由表7的抗炎试验结果可知，乳液11没有抗炎效果，进一步证明了海藻糖对于贻贝粘蛋白的高温保护作用。而从乳液12～15的抗炎效果可知，随着海藻糖用量的增加，贻贝粘蛋白皮肤修护乳液的抗炎效果相应增强。当海藻糖添加量从7.5%增加至10.0%时，抗炎效果保持不变。由此可知，海藻糖和贻贝粘蛋白质量比大于等于50:1时，海藻糖对贻贝粘蛋白的保护作用发挥到最强，贻贝粘蛋白皮肤修护乳液的抗炎效果最佳，但考虑到海藻糖加入过多会导致乳液肤感黏腻，故将海藻糖和贻贝粘蛋白质量比限定为50:1～150:1。

实施例5

本实施例为考察贻贝粘蛋白用量对贻贝粘蛋白皮肤修护乳液成膜性的影响，以及海藻糖对贻贝粘蛋白的成膜性能的影响。

本实施例用于考察的乳液16～19配方如表8所示，其制备方法同样按实施例1所述的方法制备。各乳液的海藻糖添加量不变，贻贝粘蛋白的用量不同，乳液19作为对照，不添加海藻糖。分别取制备的乳液16～19 1.0g，涂抹在干燥的平板玻璃上，涂布均匀。将涂布完成的平板玻璃置于37℃±1℃下自然干燥，8小时后观察形成的薄膜。各乳液形成的薄膜结果如图1所示。

表8：

由图1的成膜试验结果可以看出，乳液17成膜完整性最好，厚度适中，通透性最佳。贻贝粘蛋白添加量过低或过高的乳液16和乳液18的成膜性均不如乳液17；未添加海藻糖的乳液19的成膜明显差于乳液17，这表明没有了海藻糖的保护，贻贝粘蛋白乳液在灭菌后成膜性较差。

实施例6

本实施例是考察制备过程中的加料顺序以及制备工艺参数对抗炎效果的影响。重点考察的是贻贝粘蛋白和海藻糖的加料顺序，和加入贻贝粘蛋白时的温度控制，对抗炎效果的影响情况。本实施例以实施例4中乳液14的配方作为基础，通过不同配制实验方法制备成乳液，具体实验设计如下：

实验1：以实施例1所述的方法制备成乳液，即乳液14。

实验2：制备方法实施例1所述的方法相比，区别在于：加入贻贝粘蛋白前物料温度为80～85℃，加入贻贝粘蛋白时，未将温度降低至40～50℃，制得乳液20；其他步骤方法均与乳液14一致。

实验3：制备方法实施例1所述的方法相比，区别在于：贻贝粘蛋白和海藻糖的添加顺序改变。具体制备方法如下：在纯化水中投入增稠剂、保湿剂，200～300rpm搅拌并加热至40～50℃，使固体全部溶解，继续搅拌30～60分钟；加入贻贝粘蛋白，继续搅拌30～60分钟；加入海藻糖，搅拌至全部溶解。料液升温至80～85℃，加入增溶剂、润肤剂，搅拌使物料充分混合，再2000～4000rpm下均质5～10分钟。料液降温至40～45℃，加入pH调节剂调节pH值在5.0～7.0之间，200～300rpm继续搅拌10分钟，然后多次抽真空至气泡彻底消除；待温度降至38℃以下，将料液灌装进包材中，115℃下灭菌30分钟，得乳液21。

将制备的乳液14、乳液20、乳液21进行抗炎实验，结果如表9所示。

表9：

由表9的抗炎试验结果可知，升高了制备温度的乳液20的抗炎效果明显差于乳液14，主要原因可能在于80～85℃下加入贻贝粘蛋白的过程中，海藻糖对贻贝粘蛋白的保护效果还未能充分发挥，贻贝粘蛋白就开始发生高温变性，最终导致了贻贝粘蛋白抗炎功效的减弱。调整了海藻糖添加顺序的乳液21的抗炎效果也较乳液14有所下降，可能由于其他组分和贻贝粘蛋白的非共价相互作用影响了贻贝粘蛋白对海藻糖的优先排阻作用，导致海藻糖对贻贝粘蛋白的保护效果有所减弱，最终使得贻贝粘蛋白湿热灭菌后抗炎功效有所下降。由此可见，制备过程中贻贝粘蛋白和海藻糖的加料顺序，加入贻贝粘蛋白时的温度控制，对产品的抗炎效果均有影响。

实施例7

本实施例为考察本发明贻贝粘蛋白皮肤修护乳液的刺激性。具体考察方法如下：

分别采用健康、初成年白化兔，各3只，雌性，体重不低于2kg。试验前4h～24h将动物背部脊柱两侧被毛除去（约10cm×15cm区域），取受试物（实验组分别为实施例4中制备的乳液13、乳液14、乳液15，对照组为生理盐水）0.5ml涂于兔背部两侧，用2.5cm×2.5cm的吸收性纱布块覆盖接触部位，然后用绷带固定敷贴片4h。接触期结束后取下敷贴片，用持久性墨水对接触部位进行标记，并用温水清洗除去残留试验材料并拭干。按照GB/T 16886.10-2005医疗器械生物学评价第10部分：刺激与迟发型超敏反应试验中动物皮肤刺激试验给出的记分系统描述每一接触部位在每一规定时间内皮肤红斑和水肿反应情况并评分。皮肤刺激试验结果如表10所示。

表10：

由表10动物皮肤刺激试验结果可知，乳液13～15对白化兔的皮肤刺激试验，均未见刺激性反应。本发明公开的可湿热灭菌的皮肤修护乳液具有良好的安全性。

实施例8

本实施例为考察本发明贻贝粘蛋白皮肤修护乳液的保湿性。

选取实施例4制备的乳液14进行皮肤保湿测试。5名志愿者在实验前统一清洁双手前臂内侧后，标记2个标记3cm×3cm的测量区域，每个区域之间间隔至少1cm。测量各区域的初始值后，测试样品按（5.0±0.1）mg/cm²的用量进行单次涂布，于0.5h、1h、2h、3h四个时间节点测定志愿者测试区域皮肤水分含量。试验结果见表11，其中一个测量区域涂布乳液1，另一个测量区域不涂抹任何样品，作为空白对照。

表11：

由表11的皮肤水分测试试验结果可知，志愿者涂抹贻贝粘蛋白皮肤修护乳液的区域皮肤水分含量较空白有显著性提高，表明本发明公开的贻贝粘蛋白皮肤修护乳液可以提高皮肤含水量，具有良好的保湿性。

本发明贻贝粘蛋白皮肤修护乳液选择海藻糖作为保护剂，使得贻贝粘蛋白在湿热灭菌后保持良好的成膜和抗炎功效。同时，海藻糖因其自身独特结构和生物活性作用，起得稳定乳化体系的效果。因此，本发明公开的可湿热灭菌的贻贝粘蛋白皮肤修护乳液具备良好的稳定性和抗炎功效。且海藻糖和其他组分通过加强贻贝粘蛋白的静电相互作用、疏水相互作用和多巴的自氧化交联作用，协同配合，增强了贻贝粘蛋白的抗炎功效，使得贻贝粘蛋白皮肤修护乳液表现出了远超各组分单一添加时的抗炎效果。

本发明制备方法，通过贻贝粘蛋白、海藻糖以及其余各组分特定的添加顺序和添加温度，使海藻糖发挥对贻贝粘蛋白的保护作用。同时，贻贝粘蛋白和各组分形成非共价相互作用而提升了抗炎功效。在此基础上，通过调整海藻糖和贻贝粘蛋白的配比，以及贻贝粘蛋白的添加量，使得贻贝粘蛋白皮肤修护乳液达到最佳成膜和抗炎效果，进而加速皮肤创面愈合，具有良好的工业生产价值及经济价值。

对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的。此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非只包含一个的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims

1.一种可湿热灭菌的贻贝粘蛋白皮肤修护乳液，其特征在于：按重量份计，该贻贝粘蛋白皮肤修护乳液组分包括：

贻贝粘蛋白0.1～0.2份，

海藻糖3～15份，

保湿剂2～20份，

润肤剂1.5～2份，

增溶剂0.01～0.03份，

增稠剂0.2～1份，

pH调节剂0.1～0.5份，

纯化水80～95份；

所述海藻糖和贻贝粘蛋白的质量比为50:1～150:1；

所述保湿剂为甘油、丙二醇、丁二醇、戊二醇、山梨醇、聚乙二醇、甜菜碱、透明质酸钠、尿囊素、尿素中的一种或多种；

所述润肤剂为可可脂、凡士林、水溶性硅蜡、液体石蜡、羊毛脂、硬脂酸酯、卵磷脂、角鲨烷、聚二甲基硅氧烷、鲸蜡硬脂醇中的一种或多种；

海藻糖和甘油、丙二醇、丁二醇、甜菜碱、尿囊素的质量比均为1～30:1；

海藻糖和卵磷脂、角鲨烷、聚二甲基硅氧烷的质量比均为1～100:1；

该可湿热灭菌的贻贝粘蛋白皮肤修护乳液的制备方法，包括如下步骤：

S2：将物料温度降至40～50℃，向S1步骤得到的物料中加入贻贝粘蛋白，继续以200～300rpm的速度搅拌30～60分钟；

S3：将S2步骤得到的物料升温至80～85℃，加入增溶剂、润肤剂，再以200～300rpm的速度搅拌使物料充分混合，再以2000～4000rpm的搅拌速度均质5～10分钟，得到均相物料；

S4：将步骤S3得到的均相物料降温至40～45℃，加入pH调节剂对其进行中和，使其pH值在5.0～7.0之间，然后再以200～300rpm的速度继续搅拌，直至分散均匀；

S5：然后多次抽真空，直至气泡彻底消除，之后待料体温度降至38℃以下，灌装进包材中并进行湿热灭菌，即得贻贝粘蛋白皮肤修护乳液；所述湿热灭菌的条件为：灭菌温度105～121℃，灭菌时间15～60分钟。

2.根据权利要求1所述的可湿热灭菌的贻贝粘蛋白皮肤修护乳液，其特征在于：

所述增溶剂为氢化蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油、脂肪醇聚氧乙烯醚、聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯、聚甘油脂肪酸酯中的一种或几种；

所述增稠剂为卡波姆、聚丙烯酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、可溶性淀粉、黄原胶、明胶中的一种或几种；

所述pH调节剂为三乙醇胺、氨甲基丙醇、氢氧化钠、氢氧化钾中的一种。

3.根据权利要求2所述的可湿热灭菌的贻贝粘蛋白皮肤修护乳液，其特征在于：

所述保湿剂为甘油、丙二醇、丁二醇、甜菜碱、透明质酸钠、尿囊素中的一种或多种；

所述润肤剂为可可脂、卵磷脂、角鲨烷、聚二甲基硅氧烷中的一种或几种；

所述增溶剂为氢化蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油、脂肪醇聚氧乙烯醚中的一种或几种；

所述增稠剂为卡波姆、聚丙烯酸钠、甲基纤维素、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素中的一种或几种；

所述pH调节剂为三乙醇胺、氨甲基丙醇中的一种。

4.根据权利要求1所述的可湿热灭菌的贻贝粘蛋白皮肤修护乳液，其特征在于：

海藻糖和甘油、丙二醇、丁二醇、甜菜碱、尿囊素的质量比均为2～10:1；

海藻糖和卵磷脂、角鲨烷、聚二甲基硅氧烷的质量比均为3～20:1。