CN115073292B - 一种二十碳五烯酸乙酯的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于物质纯化技术领域，具体提供了一种二十碳五烯酸乙酯的制备方法。本发明提供的制备方法，包括以下步骤：(1)将鱼油原料进入双柱模拟移动床依次进行上样、排前杂、第一内循环、排后杂和第二内循环；(2)重复所述分离1～4次后进行洗脱，得到二十碳五烯酸乙酯(EPA‑EE)；所述双柱模拟移动床包括第一色谱柱和第二色谱柱；所述双柱模拟移动床的流动相为醇水溶液。本发明提供的制备方法，能够从鱼油原料中分离出纯度在98％以上的EPA‑EE，且本发明提供的制备方法溶剂用量少、收率高，便于实现自动化、连续化的生产。
Description
技术领域
本发明涉及物质纯化技术领域，尤其涉及一种二十碳五烯酸乙酯的制备方法。
背景技术
鱼油是一种利用价值很高的天然保健食品，其所含的多不饱和脂肪酸EPA(二十碳五烯酸)具有抑制血小板凝聚、抗血栓、舒张血管、调整血脂以及提高生物膜流动性等功能，在治疗和预防心血管疾病、糖尿病、皮炎、大肠溃疡以及抑制肿瘤等方面都有较好的疗效。
目前，分离纯化EPA-EE的方法主要包括以下几种：尿素包合法、低温冷冻法、金属盐沉淀法、真空蒸馏法、超临界萃取法、高效液相色谱法和柱层析法。然而，上述分离纯化得到的EPA-EE的纯度比较低。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种二十碳五烯酸乙酯的制备方法。本发明提供的制备方法得到的EPA-EE的纯度高且收率高。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种二十碳五烯酸乙酯的制备方法，包括以下步骤：
(1)将鱼油原料上样至双柱模拟移动床中进行分离，所述分离包括依次进行排前杂、第一内循环、排后杂和第二内循环；
(2)重复所述分离1～2次后进行洗脱，得到二十碳五烯酸乙酯；
所述双柱模拟移动床包括第一色谱柱和第二色谱柱；
所述双柱模拟移动床的流动相为醇水溶液或腈水溶液；
所述上样和洗脱过程中第一色谱柱和第二色谱柱为串联连接；
所述第一内循环和第二内循环过程中第一色谱柱和第二色谱柱首尾相连形成闭环；
所述排前杂和排后杂过程中第一色谱柱和第二色谱柱呈独立状态；
所述上样的速度为3～6BV/h，上样时间为0.5～5min；
所述排前杂和排后杂的过程中流动相的流速独立地为0.5～8BV/h，所述排前杂的时间为5～10min，所述排后杂的时间为10～30min；
所述第一内循环和第二内循环的流速独立地为4.5～9BV/h，时间独立地为30～60min；
所述洗脱过程中流动相洗脱流速为3～6BV/h，洗脱时间为40～75min。
优选地，所述鱼油原料中二十碳五烯酸乙酯的质量百分含量为60～80％。
优选地，所述醇水溶液中醇为C1～C4醇；所述C1～C4醇包括甲醇、乙醇、异丙醇和正丁醇中的一种或多种。
优选地，所述腈水溶液中的腈包括乙腈。
优选地，所述流动相中水的体积分数为2～10％。
优选地，所述第一色谱柱和第二色谱柱为C8色谱柱、C16色谱柱、C18色谱柱或C30色谱柱。
优选地，所述第一色谱柱和第二色谱柱中填料的粒径为10～50μm。
本发明提供了一种二十碳五烯酸乙酯(EPA-EE)的制备方法，包括以下步骤：(1)将鱼油原料上样至双柱模拟移动床中进行分离，所述分离包括依次进行排前杂、第一内循环、排后杂和第二内循环；(2)重复所述分离1～2次后进行洗脱，得到二十碳五烯酸乙酯；所述双柱模拟移动床包括第一色谱柱和第二色谱柱；所述双柱模拟移动床的流动相为醇水溶液或腈水溶液；所述上样和洗脱过程中第一色谱柱和第二色谱柱为串联连接；所述第一内循环和第二内循环过程中第一色谱柱和第二色谱柱首尾相连形成闭环；所述排前杂和排后杂过程中第一色谱柱和第二色谱柱呈独立状态；所述上样的速度为3～6BV/h，上样时间为0.5～5min；所述排前杂和排后杂的过程中流动相的流速独立地为0.5～8BV/h，所述排前杂的时间为5～10min，所述排后杂的时间为10～30min；所述第一内循环和第二内循环的流速独立地为4.5～9BV/h，时间独立地为30～60min；所述洗脱过程中流动相洗脱流速为3～6BV/h，洗脱时间为40～75min。本发明采用的双柱模拟移动床对EPA-EE有较大的分离度，通过控制制备条件能够从鱼油原料中分离得到纯度在98％以上、单杂＜0.5％的EPA-EE，且EPA-EE的收率在90％以上，EPA-EE的纯度高、收率高，且本发明提供的制备方法溶剂用量少、成本低，便于实现自动化、规模化的生产。
附图说明
图1为双柱模拟移动床的结构示意图；
图2为EPA-EE制备过程中各步骤的第一色谱柱和第二色谱柱的连接示意图；
图3为实施例1所得所得EPA-EE洗脱液的气相色谱图；
图4为实施例2所得所得EPA-EE洗脱液的气相色谱图；
图5为实施例3所得所得EPA-EE洗脱液的气相色谱图；
图6为实施例4所得所得EPA-EE洗脱液的气相色谱图；
图7为实施例5所得所得EPA-EE洗脱液的气相色谱图。
具体实施方式
本发明提供了一种二十碳五烯酸乙酯的制备方法，包括以下步骤：
(1)将鱼油原料上样至双柱模拟移动床中进行分离，所述分离包括依次进行排前杂、第一内循环、排后杂和第二内循环；
(2)重复所述分离1～2次后进行洗脱，得到二十碳五烯酸乙酯；
所述双柱模拟移动床包括第一色谱柱和第二色谱柱；
所述双柱模拟移动床的流动相为醇水溶液或腈水溶液；
所述上样和洗脱过程中第一色谱柱和第二色谱柱为串联连接；
所述第一内循环和第二内循环过程中第一色谱柱和第二色谱柱首尾相连形成闭环；
所述排前杂和排后杂过程中第一色谱柱和第二色谱柱呈独立状态；
所述上样的速度为3～6BV/h，上样时间为0.5～5min；
所述排前杂和排后杂的过程中流动相的流速独立地为0.5～8BV/h，所述排前杂的时间为5～10min，所述排后杂的时间为10～30min；
所述第一内循环和第二内循环的流速独立地为4.5～9BV/h，时间独立地为30～60min；
所述洗脱过程中流动相洗脱流速为3～6BV/h，洗脱时间为40～75min。
在本发明中，如无特殊说明，本发明所用原料均优选为市售产品。
本发明将鱼油原料上样至双柱模拟移动床中进行分离，所述分离包括依次进行排前杂、第一内循环、排后杂和第二内循环。
在本发明中，所述双柱模拟移动床的结构示意图如图1所示。通过控制图1所示的双柱模拟移动床中的阀门或者泵，实现上样、排前杂、第一内循环、排后杂、第二内循环和后续的洗脱。在本发明中，利用双柱模拟移动床制备EPA-EE过程中各步骤的第一色谱柱和第二色谱柱的连接关系示意图如图2所示。
在本发明中，所述鱼油原料中二十碳五烯酸乙酯的质量百分含量优选为60～80％，更优选为65～75％，进一步优选为70％。
在本发明中，所述双柱模拟移动床包括第一色谱柱和第二色谱柱。在本发明中，所述第一色谱柱和第二色谱柱优选为C8色谱柱、C16色谱柱、C18色谱柱或C30色谱柱，进一步优选为C18色谱柱；所述第一色谱柱和第二色谱柱的种类相同。在本发明中，所述第一色谱柱和第二色谱柱中填料的粒径独立地优选为10～50μm，更优选为10～25μm；所述第一色谱柱和第二色谱柱中填料的粒径优选相同。
在本发明中，所述双柱模拟移动床的流动相为醇水溶液或腈水溶液。在本发明中，所述醇水溶液中醇优选为C1～C4醇，所述C1～C4醇优选包括甲醇、乙醇、异丙醇和正丁醇中的一种或多种，进一步优选为甲醇。在本发明中，所述腈水溶液中的腈优选包括乙腈。在本发明中，所述流动相中水的体积分数优选为2～10％，更优选为5～10％。
在本发明中，所述上样过程中第一色谱柱和第二色谱柱为串联连接；所述第一内循环和第二内循环过程中第一色谱柱和第二色谱柱首尾相连形成闭环；所述排前杂和排后杂过程中第一色谱柱和第二色谱柱呈独立状态。在本发明中，所述上样的为3～6BV/h，更优选为4.5BV/h；所述上样的时间为0.5～5min，优选为1～4min，更优选为2～3min。
在本发明的具体实施例中，所述排前杂包括：通过洗脱泵1打入流动相进行展层，根据第二色谱柱的UV检测器的实时监测谱图，将部分前杂排除，当第二色谱柱的末尾出现EPA-EE时停止；双柱模拟移动床系统处于开环状态。在本发明中，所述排前杂过程中流动相的流速为0.5～8BV/h，优选为3～5BV/h；所述排前杂的时间为5～10min，优选为6～9min，更优选为7～8min。
在本发明的具体实施例中，所述第一内循环优选包括：通过循环泵推动EPA-EE组分谱带在第一色谱柱和第二色谱柱内展层，当第一色谱柱的末尾无EPA-EE时停止。在本发明中，所述第一内循环过程中流动相的循环流速为3～6BV/h，优选为4.5BV/h；所述第一内循环的时间为30～60min，优选为40～50min，更优选为45min。
在本发明的具体实施例中，所述排后杂包括：通过洗脱泵2打入流动相进行展层，将第二色谱柱与第一色谱柱串联，于第一色谱柱的后出口排出后杂，当第一色谱柱的末尾出现EPA-EE时停止。在本发明中，所述排后杂过程中流动相的流速为0.5～8BV/h，优选为3～5BV/h；所述排后杂的时间为10～30min，优选为15～25min，更优选为20min。
在本发明的具体实施例中，所述第二内循环优选包括：通过循环泵推动EPA-EE组分谱带在第一色谱柱和第二色谱柱内展层，当第二色谱柱的末尾无EPA-EE时停止。在本发明中，所述第二内循环过程中流动相的循环流速为3～6BV/h更优选为4.5BV/h；所述第二内循环的时间为30～60min，优选为40～50min，更优选为45min。
本发明重复所述分离1～4次后进行洗脱，得到二十碳五烯酸乙酯。在本发明中，在本发明中，所述所述分离的重复次数优选为1～3次，更优选为1～2次。在本发明中，所述洗脱过程中流动相的洗脱流速为3～6BV/h，优选为4.5BV/h；所述洗脱的时间为40～75min，优选为45～70min，更优选为50～65min。在本发明中，所述洗脱过程中第一色谱柱和第二色谱柱为串联连接。完成所述洗脱后，本发明优选还包括将所得EPA-EE洗脱液浓缩至恒重，得到二十碳五烯酸乙酯。本发明对于所述浓缩没有特殊限定，采用本领域技术人员熟知的浓缩方式即可，具体如蒸除流动相。
下面结合实施例对本发明提供的鱼油原料中二十碳五烯酸乙酯的制备方法进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本发明保护范围的限定。
实施例1
采用图1所示的双柱模拟移动床，根据图2进行制备，其中，第一色谱柱和第二色谱柱均为C8色谱柱(250mm×10mm，填料粒径为10μm，两根色谱柱的填料质量相同)，流动相为甲醇体积分数为90％的甲醇水溶液。
(1)上样：将待分离的鱼油原料通过泵打入双柱模拟移动床的第一色谱柱中，第一色谱柱与第二色谱柱串联，鱼油原料中EPA-EE的质量百分含量为80％，鱼油原料的进样量为15％(即鱼油原料中EPA-EE的质量为单根色谱柱填料质量的15％)，上样速度为3BV/h，时间为2min。
(2)排前杂：通过洗脱泵1在第一色谱柱中打入流动相进行展层，第一色谱柱与第二色谱柱串联，根据第二色谱柱的UV检测器的实时监测谱图，将部分前杂排除，当第二色谱柱的末尾出现EPA-EE时停止，其中，流动相的流速为3BV/h，排前杂时间为9min。
(3)第一内循环：通过循环泵推动EPA-EE组分谱带在呈闭环连通的第一色谱柱和第二色谱柱内展层，当第一色谱柱的末尾无EPA-EE时停止，其中，循环流速为9BV/h，第一内循环的时间为30min。
(4)排后杂：通过洗脱泵2打入流动相进行展层，第二色谱柱与第一色谱柱串联，于第一色谱柱的后出口排出后杂，当第一色谱柱的末尾出现EPA-EE时停止，其中，流动相的流速为3BV/h，排后杂时间为20min。
(5)第二内循环：通过循环泵推动EPA-EE组分谱带在呈闭环连通的第一色谱柱和第二色谱柱内展层，当第二色谱柱的末尾无EPA-EE时停止，其中，流动相的循环流速为9BV/h，第二内循环的时间为30min。
(6)步骤(2)～(5)为一个大循环，共连续运行3个大循环后系统达到平衡。
(7)泵入流动相进行洗脱，从第二色谱柱出口收集EPA-EE洗脱液，浓缩至恒重，得到二十碳五烯酸乙酯；其中，洗脱流速为3BV/h；利用气相色谱法测定EPA-EE洗脱液和二十碳五烯酸乙酯的成分，EPA-EE洗脱液分析结果：EPA-EE纯度为98.595％，EPA-EE总回收率为95％；二十碳五烯酸乙酯分析结果：EPA-EE纯度＞98％，单杂＜0.5wt％。
其中，气相色谱法测定条件：仪器Agilent GC8860；色谱柱Agilent DB-WAX 30m×320μm×0.15μm；上样量1uL(2.5mg/mL，正庚烷溶解)；载气流速1mL/min；进样口250℃；分流比30：1；分流流量30mL/min；柱温：初始值170℃，速率3℃/min升至240℃，保持时间5min；FID检测器：270℃，空气流量400mL/min，氢气燃气流量30mL/min；尾吹气流量(氮气)25mL/min；采样频率50Hz/s。
所得EPA-EE洗脱液的气相色谱图如图3所示，具体的色谱信息如表1所示。
表1具体的色谱信息
| 保留时间RT(min) | 峰面积(pA·s) | 峰面积(％) | 开始时间(min) |
| 14.789 | 3.481 | 0.13 | 14.628 |
| 17.11 | 13.794 | 0.515 | 16.945 |
| 18.099 | 7.452 | 0.278 | 17.82 |
| 18.613 | 2641.746 | 98.595 | 18.333 |
| 18.993 | 2.284 | 0.085 | 18.901 |
| 19.21 | 0.462 | 0.017 | 19.106 |
| 19.362 | 1.988 | 0.074 | 19.261 |
| 19.948 | 0.537 | 0.02 | 19.909 |
| 20.301 | 1.739 | 0.065 | 20.207 |
| 20.625 | 2.864 | 0.107 | 20.495 |
| 21.141 | 1.023 | 0.038 | 21.043 |
| 21.373 | 0.829 | 0.031 | 21.264 |
| 22.279 | 1.202 | 0.045 | 22.081 |
实施例2
按照实施例1的方法制备二十碳五烯酸乙酯，与实施例1的区别仅在于：采用C18色谱柱；流动相为甲醇体积分数为92％的甲醇水溶液；鱼油原料的进样量为20％；第一内循环和第二内循环的流速均为6BV/h，循环时间均为45min；排前杂、排后杂和洗脱过程中流动相的流速均为4.5BV/h，排前杂、排后杂和洗脱时间依次为6min、16min和40min；共连续运行2个大循环；
EPA-EE洗脱液分析结果：EPA-EE纯度为99.288％，EPA-EE总回收率为90％；二十碳五烯酸乙酯分析结果：EPA-EE纯度＞98％，单杂＜0.5wt％
所得EPA-EE洗脱液的气相色谱图如图4所示，具体的色谱信息如表2所示。
表2具体的色谱信息
| 保留时间RT(min) | 峰面积(pA·s) | 峰面积(％) | 开始时间(min) |
| 14.843 | 3.251 | 0.085 | 14.74 |
| 17.155 | 1.499 | 0.039 | 17.031 |
| 17.316 | 1.207 | 0.032 | 17.23 |
| 18.673 | 3779.018 | 99.288 | 18.336 |
| 19.004 | 2.843 | 0.075 | 18.906 |
| 19.233 | 2.396 | 0.063 | 19.15 |
| 19.397 | 4.192 | 0.11 | 19.303 |
| 19.997 | 0.708 | 0.019 | 19.908 |
| 20.327 | 2.246 | 0.059 | 20.222 |
| 20.634 | 4.848 | 0.127 | 20.459 |
| 21.166 | 2.621 | 0.069 | 21.033 |
| 21.404 | 1.298 | 0.034 | 21.323 |
实施例3
按照实施例1的方法制备二十碳五烯酸乙酯，与实施例1的区别仅在于：采用C18色谱柱；流动相为甲醇体积分数为92％的甲醇水溶液；鱼油原料的进样量为25％；第一内循环和第二内循环的流速均为4.5BV/h，循环时间均为58min；排前杂、排后杂和洗脱过程中流动相的流速为4.5BV/h，排前杂、排后杂和洗脱时间依次为6min、15min和30min；
EPA-EE洗脱液分析结果：EPA-EE纯度为98.43％，EPA-EE总回收率为91％；二十碳五烯酸乙酯分析结果：EPA-EE纯度＞98％，单杂＜0.5wt％
所得EPA-EE洗脱液的气相色谱图如图5所示，具体的色谱信息如表3所示。
表3具体的色谱信息
实施例4
按照实施例1的方法制备二十碳五烯酸乙酯，与实施例1的区别仅在于：采用C18色谱柱；鱼油原料的进样量为20％；第一内循环和第二内循环的流速均为4.5BV/h，循环时间均为50min；排前杂、排后杂和洗脱过程中流动相的流速为4.5BV/h，排前杂、排后杂和洗脱时间依次为6min、15min和35min；
EPA-EE洗脱液分析结果：EPA-EE纯度为98.124％，EPA-EE总回收率为85％；二十碳五烯酸乙酯分析结果：EPA-EE纯度＞98％，单杂＜0.5wt％
所得EPA-EE洗脱液的气相色谱图如图6所示，具体的色谱信息如表4所示。
表4具体的色谱信息
实施例5
按照实施例1的方法制备二十碳五烯酸乙酯，与实施例1的区别仅在于：采用C18色谱柱；流动相为乙腈体积分数为90％的乙腈水溶液；鱼油原料的进样量为20％；第一内循环和第二内循环的流速均为4.5BV/h，循环时间均为40min；排前杂、排后杂和洗脱过程中流动相的流速为4.5BV/h，排前杂、排后杂依次为5min、15min；
EPA-EE洗脱液分析结果：EPA-EE纯度为98.391％，EPA-EE总回收率为80％；二十碳五烯酸乙酯分析结果：EPA-EE纯度＞98％，单杂＜0.5wt％
所得EPA-EE洗脱液的气相色谱图如图7所示，具体的色谱信息如表5所示。
表5具体的色谱信息
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (7)
1.一种二十碳五烯酸乙酯的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）将鱼油原料上样至双柱模拟移动床中进行分离，所述分离包括依次进行排前杂、第一内循环、排后杂和第二内循环；所述鱼油原料中二十碳五烯酸乙酯的质量百分含量为60~80%；
（2）重复所述分离1~2次后进行洗脱，得到二十碳五烯酸乙酯；
所述双柱模拟移动床包括第一色谱柱和第二色谱柱；所述第一色谱柱和第二色谱柱为C8色谱柱、C16色谱柱、C18色谱柱或C30色谱柱；
所述双柱模拟移动床的流动相为C1~C4醇水溶液或乙腈水溶液；所述流动相中水的体积分数为2~10%；
所述上样和洗脱过程中第一色谱柱和第二色谱柱为串联连接；
所述第一内循环和第二内循环过程中第一色谱柱和第二色谱柱首尾相连形成闭环；
所述上样的速度为3~6BV/h，上样时间为0.5~5min；
所述洗脱过程中流动相洗脱流速为3~6BV/h，洗脱时间为40~75min；
所述排前杂包括：通过洗脱泵1打入流动相进行展层，第一色谱柱与第二色谱柱串联，根据第二色谱柱的UV检测器的实时监测谱图，将部分前杂排除，当第二色谱柱的末尾出现EPA-EE时停止；双柱模拟移动床系统处于开环状态；所述排前杂过程中流动相的流速为0.5~8BV/h，所述排前杂的时间为5~10min；
所述第一内循环包括：通过循环泵推动EPA-EE组分谱带在第一色谱柱和第二色谱柱内展层，当第一色谱柱的末尾无EPA-EE时停止；所述第一内循环过程中流动相的循环流速为3~6BV/h，所述第一内循环的时间为30~60min；
所述排后杂包括：通过洗脱泵2打入流动相进行展层，将第二色谱柱与第一色谱柱串联，于第一色谱柱的后出口排出后杂，当第一色谱柱的末尾出现EPA-EE时停止；所述排后杂过程中流动相的流速为0.5~8BV/h，所述排后杂的时间为10~30min；
所述第二内循环包括：通过循环泵推动EPA-EE组分谱带在第一色谱柱和第二色谱柱内展层，当第二色谱柱的末尾无EPA-EE时停止；所述第二内循环过程中流动相的循环流速为3~6BV/h，所述第二内循环的时间为30~60min。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述C1~C4醇包括甲醇、乙醇、异丙醇和正丁醇中的一种或多种。
3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述第一色谱柱和第二色谱柱中填料的粒径为10~50μm。
4.根据权利要求1~3任一项所述的制备方法，其特征在于，所述排前杂过程中流动相的流速为3~5BV/h；所述排前杂的时间为6~9min。
5.根据权利要求1~3任一项所述的制备方法，其特征在于，所述第一内循环过程中流动相的循环流速为4.5BV/h；所述第一内循环的时间为40~50min。
6.根据权利要求1~3任一项所述的制备方法，其特征在于，所述排后杂过程中流动相的流速为3~5BV/h；所述排后杂的时间为15~25min。
7.根据权利要求1~3任一项所述的制备方法，其特征在于，所述第二内循环过程中流动相的循环流速为4.5BV/h；所述第二内循环的时间为40~50min。
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Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH09157684A (ja) * | 1995-12-08 | 1997-06-17 | Chlorine Eng Corp Ltd | 高度不飽和脂肪酸エステルの精製方法 |
| JPH11209786A (ja) * | 1998-01-21 | 1999-08-03 | Ikeda Shokken Kk | 高純度高度不飽和脂肪酸の低級アルコールエステル精製方法及び精製装置 |
| CN103764242A (zh) * | 2011-07-06 | 2014-04-30 | 巴斯夫制药（卡兰尼什）公司 | Smb方法 |
| CN104974030A (zh) * | 2009-12-30 | 2015-10-14 | 巴斯夫制药（卡兰尼什）公司 | 用于纯化多不饱和脂肪酸的模拟移动床色谱分离方法 |
| CN107311866A (zh) * | 2017-06-15 | 2017-11-03 | 浙江大学宁波理工学院 | 用模拟移动床色谱分离纯化二十碳五烯酸酯和二十二碳六烯酸酯的方法 |
| CN109438220A (zh) * | 2018-10-31 | 2019-03-08 | 苏州赛分科技有限公司 | 一种从鱼油中纯化epa的方法 |
| CN113698984A (zh) * | 2021-08-27 | 2021-11-26 | 常熟纳微生物科技有限公司 | 一种鱼油中二十碳五烯酸的分离纯化方法 |
| CN113831244A (zh) * | 2020-06-24 | 2021-12-24 | 北京创新通恒科技有限公司 | 一种提纯高纯EPA-ee分离设备及工艺方法 |
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Patent Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH09157684A (ja) * | 1995-12-08 | 1997-06-17 | Chlorine Eng Corp Ltd | 高度不飽和脂肪酸エステルの精製方法 |
| JPH11209786A (ja) * | 1998-01-21 | 1999-08-03 | Ikeda Shokken Kk | 高純度高度不飽和脂肪酸の低級アルコールエステル精製方法及び精製装置 |
| CN104974030A (zh) * | 2009-12-30 | 2015-10-14 | 巴斯夫制药（卡兰尼什）公司 | 用于纯化多不饱和脂肪酸的模拟移动床色谱分离方法 |
| CN103764242A (zh) * | 2011-07-06 | 2014-04-30 | 巴斯夫制药（卡兰尼什）公司 | Smb方法 |
| CN107311866A (zh) * | 2017-06-15 | 2017-11-03 | 浙江大学宁波理工学院 | 用模拟移动床色谱分离纯化二十碳五烯酸酯和二十二碳六烯酸酯的方法 |
| CN109438220A (zh) * | 2018-10-31 | 2019-03-08 | 苏州赛分科技有限公司 | 一种从鱼油中纯化epa的方法 |
| CN113831244A (zh) * | 2020-06-24 | 2021-12-24 | 北京创新通恒科技有限公司 | 一种提纯高纯EPA-ee分离设备及工艺方法 |
| CN113698984A (zh) * | 2021-08-27 | 2021-11-26 | 常熟纳微生物科技有限公司 | 一种鱼油中二十碳五烯酸的分离纯化方法 |
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