[go: up one dir, main page]

CN115058367A - 一株戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)068-1及其应用 - Google Patents

一株戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)068-1及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN115058367A
CN115058367A CN202210799704.4A CN202210799704A CN115058367A CN 115058367 A CN115058367 A CN 115058367A CN 202210799704 A CN202210799704 A CN 202210799704A CN 115058367 A CN115058367 A CN 115058367A
Authority
CN
China
Prior art keywords
lactobacillus pentosus
rutin
strain
lactobacillus
pentosus
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202210799704.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN115058367B (zh
Inventor
薛文娇
刘晨
刘瑶
丁浩
安超
马赛箭
张琪雯
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Microbiology Institute Of Shaanxi
Original Assignee
Microbiology Institute Of Shaanxi
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Microbiology Institute Of Shaanxi filed Critical Microbiology Institute Of Shaanxi
Priority to CN202210799704.4A priority Critical patent/CN115058367B/zh
Publication of CN115058367A publication Critical patent/CN115058367A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN115058367B publication Critical patent/CN115058367B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A61K35/741—Probiotics
    • A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
    • A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11—Lactobacillus
    • A23V2400/167—Pentosus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/225—Lactobacillus
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A40/00—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production
    • Y02A40/90—Adaptation technologies in agriculture, forestry, livestock or agroalimentary production in food processing or handling, e.g. food conservation

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明公开了一株戊糖乳杆菌(Lactobacilluspentosus)068‑1，保藏编号为CGMCCNo.24424，可以全细胞转化芦丁生成槲皮素，提高芦丁的生物利用度。并具有良好的益生性能，其胃肠液耐受性、自聚合能力、Caco‑2黏附能力、抑菌性能均优于商品菌株鼠李糖乳杆菌GG(LactobacillusrhamnosusGG)。本发明菌株可被用做新型膳食补充剂调节肠道菌群，并可提高个体对芦丁的生物利用度。本发明菌株也可用于含芦丁食药用植物或果蔬发酵，用于体外提高发酵产品中槲皮素含量，从而提升产品活性和生物利用度。

Description

一株戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)068-1及其应用
技术领域
本发明涉及微生物技术领域，更具体的说是涉及一株戊糖乳杆菌(Lactobacilluspentosus)068-1及其应用。
背景技术
芦丁是一种黄酮类化合物，广泛存在于食用或药用植物的根、茎、叶、花、果实、种子中。一些常用中药，如槐米、芸香、养麦、沙棘、银杏、枸杞、益母草、柴胡、夏枯草、芦荟、桉树叶和烟叶等多种植物中都含有芦丁。作为安全低毒的天然活性成分，芦丁具有抗氧化、降血脂、抗癌、抗炎等多种功效，在肥胖、糖尿病、癌症等多种代谢性疾病的改善和防治中起着很重要的作用。然而，大量人体研究表明，芦丁的吸收利用个体差异较大。
芦丁在体内不能被小肠中的β-葡萄糖苷酶水解而吸收，因而几乎全部在大肠中积累。在大肠中，芦丁须先经过肠道微生物代谢的α-L-鼠李糖苷酶(水解芦丁为异槲皮素)和β-葡萄糖苷酶(水解异槲皮素为槲皮素)或芦丁酶(直接水解芦丁为槲皮素)水解去掉糖苷，苷元再被进一步水解吸收利用。多项研究证明，肠道菌群存在明显的个体化差异，因此对芦丁的转化效率差异较大为了提高芦丁的转化效率，改善其利用的个体化差异现象，提供芦丁转化效能高、肠道定殖能力强的菌株是本领域技术人员亟需解决的问题。
发明内容
有鉴于此，本发明提供了一株戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)068-1及其应用。乳酸杆菌由于其安全性是一类被广泛使用的益生菌，其中Lactobacillus是一类最近被重新描述的、具有极大益生潜力的乳酸杆菌。Lactobacillus一般来源于植物，是发酵植物性食品的主要发酵剂，具有全细胞转化芦丁能力的Lactobacillus不仅安全且益生潜力好，和芦丁同时使用还兼具益生菌和黄酮类天然产物生物学功效，在发酵食品和新型膳食补充剂等功能性食品中应用前景好。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一株戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)068-1，保藏编号为CGMCC No.24424。于2022年02月23日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，分类命名为戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)068-1。
该菌株可以全细胞转化芦丁生成槲皮素，该菌株具有良好的益生性能，其胃肠液耐受性、自聚合能力、Caco-2黏附能力、抑菌性能均优于商品菌株鼠李糖乳杆菌GG(Lactobacillus rhamnosus GG)。
一种戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)068-1的培养方法，包括将戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)068-1在MRS培养基中37℃培养24～48h。
一种菌剂，包括上述戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)068-1。
一种食品，包括上述戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)068-1。
一种保健品，包括上述戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)068-1。
一种药物，包括上述戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)068-1。
一种戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)068-1在利用含芦丁类植物源制备产品中的应用。
一种戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)068-1在和含芦丁天然产物协同制备产品中的应用。
优选的，所述产品为食品、保健品或药物。
一种提高芦丁生物利用度的方法，利用上述戊糖乳杆菌(Lactobacilluspentosus)068-1处理芦丁或含芦丁类植物源。
有益效果：本发明公开提供了一株戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)068-1，该菌株可全细胞转化芦丁生成槲皮素，从而提升产品活性和提高个体对芦丁的生物利用度。且该菌株具有良好的益生性能，其胃肠液耐受性、自聚合能力、Caco-2黏附能力、抑菌性能优良。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据提供的附图获得其他的附图。
图1为菌株068-1的菌落形态图；
图2为菌株068-1的革兰氏染色镜检图；
图3为菌株068-1的系统发育树；说明：基于全基因测序结果，戊糖乳杆菌分类学地位发生改变，拉丁文名称原始词根Lactobacillus更改为Lactiplantibacillus；
图4为菌株068-1转化芦丁生成槲皮素的HPLC图；
图5为菌株068-1耐受模拟胃液性能；
图6为菌株068-1耐受模拟肠液性能；
图7为菌株068-1自聚合能力；
图8为菌株068-1对Caco-2细胞粘附率；
图9为菌株068-1溶血试验结果，其中a为菌株068-1，b为LGG，c为S.aureus。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本发明实施例公开了一株戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)068-1，实施例所涉及的试剂均为常规采购可得，对其来源不做限定，所涉及的方法未提及的细节均为常规操作，不再一一赘述。
实施例1
菌株068-1的分离与鉴定
(1)菌株分离纯化：取陕西西安地区传统发酵食品浆水0.5g，用无菌剪刀将样品剪成0.3×0.3cm小块，加入10ml无菌生理盐水涡旋振荡3min梯度稀释至10-7，分别吸取10-4～10-7稀释液100μL涂布于加有2％碳酸钙的MRS固体培养基上，37℃静置培养48h；挑取有溶钙圈的菌落，在MRS固体培养基上划线纯化革兰氏染色并在显微镜下观察；选取革兰氏染色阳性的菌株(编号068-1)，于25％甘油，-80℃冷冻保存备用(068-1菌落培养参见附图1，革兰氏染色参见附图2)。
(2)菌株鉴定：采用Illumina NovaSeq和Oxford Nanopore ONT平台(上海派诺森公司)对菌株068-1进行全基因组测序，并采用TYGS(https://tygs.dsmz.de)基于全基因组序列构建系统发育树(参见附图3)，结果表明该菌株为戊糖乳杆菌(Lactobacilluspentosus)，于2022年02月23日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.24424，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，分类学命名为：戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)。
实施例2
芦丁的转化及检测
按照10％接种量将转接两代后的068-1菌液接种到添加1mM芦丁的无糖MRS培养基中。培养物在37℃孵育72小时后,发酵液在4℃条件下8000rpm离心5min，收集上清液，取1ml上清液用三倍体积的水饱和正丁醇萃取，充分混合后静置等待分层，小心吸取上层有机相，于通风橱内室温挥干，用1ml甲醇重溶。经0.22μm有机相滤器过滤后加入HPLC专用瓶，使用高效液相色谱仪检测。
色谱条件：C18(4.6mm×250mm，5μm)色谱柱；流动相为甲醇/0.4％磷酸(60/40，v/v)，流速为1.0mL/min，柱温30℃，检测波长为256nm。
结果表明(参见附图4)，菌株068-1可以全细胞转化芦丁生成槲皮素。
实施例3
菌株068-1的益生性能
1、菌株068-1胃肠液耐受性
-80℃冷冻保藏的菌株068-1连续活化两代，以1％(v/v)接种量接种于MRS液体培养基中，37℃静置培养18h，离心收集菌体(8000×g，4℃，10min)，PBS重悬，将菌体浓度调整至109cfu/ml。分别取1ml上述菌悬液加入9mL人工胃液(3g/L胃蛋白酶,pH 3.0)或人工肠液(1g/L胰蛋白酶,0.3％牛胆盐,pH 8.0)，37℃静置培养3h，过程中取样，离心弃上清，用0.85％灭菌生理盐水连续稀释后MRS平板涂布计数，未经胃肠模拟液处理的初始活菌数记为N0，处理后活菌数计做Nt，每组三个平行[以商业化菌株鼠李糖乳杆菌GG(Lactobacillusrhamnosus GG strain CGMCC 1.3724)为对照]，存活率计算公式如下：
存活率％＝(log cfu/ml Nt)/(log cfu/ml N0)×100
结果表明(参见附图5和附图6)，在模拟胃液中3h时068-1菌存活率在96％以上，且活菌数在108cfu/ml以上；在模拟肠液中，3h时068-1存活率为66％，活菌数在105cfu/ml左右。菌株068-1的对模拟胃肠液的耐受性均优于LGG。
2、自聚合能力
-80℃冷冻保藏的菌株068-1连续活化两代，以1％(v/v)接种量接种于MRS液体培养基中，离心收集菌体(8000g，4℃，10min)；PBS(pH7.4)洗涤2次后于PBS中重悬，调整菌液浓度至108cfu/mL，取50ul的菌悬液，加入到150ul的PBS中混匀，测定600nm下的吸光值，记做A0；4mL等量的细胞菌悬液装入5mL的离心管中，混匀后37℃静置28h，过程中不同时间取50ul的上部菌悬液，加入到150ul的PBS中混匀，测定600nm下的吸光值，记做At[以商业化菌株鼠李糖乳杆菌GG(Lactobacillus rhamnosus GG)为对照]。
凝集率(A％)计算公式：A％＝(A0-At)/A0×100％
结果表明(参见附图7)，静置20h时，068-1的自聚率达到80.79％，静置28h时，068-1的自聚率为81.09％，约为LGG自聚率(41.77％)的两倍。结果表明菌株068-1具有极强的自聚能力，在肠道内黏附、定植以及对病原菌的抑制具有良好潜力。
3、小肠细胞Caco-2粘附性能
在高糖DMEM培养基(HyClone,USA)中额外添加10％的胎牛血清，1％的非必需氨基酸(N1250,索莱宝)，1％的青-链霉素(10000IU/ml，10000ug/ml)配制成DMEM完全培养基。
将自液氮罐中取出的Caco-2细胞冻存管，立即放入37℃水槽中快速解冻，解冻后的细胞悬液缓缓加入细胞培养皿，再向培养皿中加入10mLDMEM完全培养基，混合均匀，放入37℃，5％CO2的恒温培养箱中培养。2～3天后，待细胞覆盖培养皿的80％～90％，胰蛋白酶消化传代。传代三次后，将细胞转接到24孔培养板上，每孔接种量达到105个，37℃，5％CO2的恒温培养箱中培养21天每两天更换培养液，得到分化的单层Caco-2细胞。粘附实验4小时前将培养液替换成无双抗DMEM培养液(高糖DMEM添加10％的胎牛血清，1％的非必需氨基酸)，每孔加入1ml重悬于无双抗的DMEM培养液的068-1菌悬液((1×108CFU/ml))37℃，5％CO2条件下培养1h，之后用预热的DPBS(pH 7.2，无Ca+和Mg+)；Procell)冲洗两遍，洗去未吸附的细菌细胞。再用含1％(v/v)Triton X-100的DPBS溶解吸附的细胞10min。收集菌体，平板计数法计算068-1对Caco-2细胞的黏附率。
黏附率％＝黏附的活菌数/加入的活菌数×100％
结果表明(参见附图8)，菌株068-1对Caco-2细胞的黏附率为9.79％，比商品化菌株LGG的黏附率(4.19％)高1.3倍，显示出优良的肠道粘附定殖潜力。
4、菌株068-1拮抗性能
(1)细菌抑制试验
指示菌的培养条件均为37℃、180rpm摇床培养，活化两代后用于抑菌试验；将菌株068-1和LGG(对照)活化两代后，以8000rpm、4℃、5min条件离心，取上清液。取50μl指示菌悬液加入200ml MRS琼脂中，充分混合并倒入培养皿。用打孔器在平板上打出直径为8mm的孔，每孔加入80μl供试菌株的上清液，将平板置于37℃下孵育过夜。观察抑菌圈并用电子游标卡尺测量其的直径(mm)，见表1。
表1
Figure BDA0003733533760000071
注：“-”为无抑制；“+”表示抑菌圈在0～3mm；“++”表示抑菌圈在3～6mm；“+++”表示抑菌圈大于6mm。孔的直径(8mm)已扣除。
(2)真菌抑制试验
使用PDA琼脂平板于28℃倒置培养真菌7d。挑取适量C.Albicans菌体于无菌水中，混匀得到菌悬液；用无菌水分别冲洗其余四种指示菌的平板，获得其孢子悬液。将菌株068-1和LGG(对照)活化两代后，蘸取菌液在MRS琼脂平板上划出约2cm的短线，将平板置于37℃下倒置培养48h。孢子悬液或菌悬液入PDA琼脂中，混匀后铺在培养好供试菌株的MRS平板上，待其凝固后于28℃倒置培养48h，观察抑菌圈大小并记录，见表2。
表2
Figure BDA0003733533760000072
Figure BDA0003733533760000081
结果表明(表1&表2)，菌株068-1对包括真菌和细菌的所有指示菌均表现出良好的拮抗活性。其中，068-1对E.coli、S.paratyphiB、S.flexneri、S.aureus、F.oxysporum的抑菌活性最高，LGG只对其中八种指示菌表现抑菌活性，且只对S.aureus表现最高抑菌活性。
5、抗生素抗性特征
实验于96孔板上进行，分别对抗生素进行梯度稀释，使稀释后的抗生素浓度为1024μg/ml、512μg/ml、256μg/ml、128μg/ml、64μg/ml、32μg/ml、16μg/ml、8μg/ml、4μg/ml、2μg/ml。分别向孔内加入梯度稀释后的抗生素溶液40μl、MRS液体培养基158μl、活化两代后的068-1菌液2μl；实验设置阴性对照(无菌水替代菌液)与阳性对照(无菌水替代抗生素)。37℃恒温培养24h后使用酶标仪检测其OD600吸光值，见表3。
表3
Figure BDA0003733533760000082
注：耐药性参照断点值(Bories G2008；EFSA2012)。R，耐药；S，敏感。
结果表明，本发明菌株068-1对万古霉素、卡那霉素、羧苄青霉素钠和庆大霉素具有耐药性，表明该菌株可以和以上抗生素共同使用；对四环素、红霉素、克林霉素、氯霉素敏感。
6、溶血试验
将菌株068-1活化两代后，用接种环划线于血平板上，37℃倒置培养48h后进行观察有无溶血圈出现，无透明圈为不具β-溶血活性，即对溶血无作用或不溶血。以商业菌株LGG为阴性对照，以具有β-溶血活性的菌株S.aureus作为阳性对照。
结果表明(参见附图9)，S.aureus在血平板上产生透明圈，具有β-溶血活性；068-1和LGG菌体周围无透明圈,因此不具β-溶血活性。
综上，本发明提供的戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)068-1，可以全细胞转化芦丁，耐受胃肠极端环境，具有良好的表面黏附特性，在肠道中定殖能力强，抑菌性能好，抗生素抗性特征明确，无溶血活性，多项性能优于商品菌株鼠李糖乳杆菌GG(Lactobacillus rhamnosus GG)，可被用做新型膳食补充剂调节肠道菌群，并可提高个体对芦丁的生物利用度。本发明菌株也可用于含芦丁食药用植物或果蔬发酵，用于体外提高发酵产品中槲皮素含量，从而提升产品活性和生物利用度。
本说明书中各个实施例采用递进的方式描述，每个实施例重点说明的都是与其他实施例的不同之处，各个实施例之间相同相似部分互相参见即可。
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

Claims (10)

1.一株戊糖乳杆菌(Lactobacilluspentosus)068-1，其特征在于，保藏编号为CGMCCNo.24424。
2.如权利要求1所述戊糖乳杆菌(Lactobacilluspentosus)068-1的培养方法，其特征在于，包括将戊糖乳杆菌(Lactobacilluspentosus)068-1在MRS培养基中37℃培养24～48h。
3.一种菌剂，其特征在于，包括权利要求1所述戊糖乳杆菌(Lactobacilluspentosus)068-1。
4.一种食品，其特征在于，包括权利要求1所述戊糖乳杆菌(Lactobacilluspentosus)068-1。
5.一种保健品，其特征在于，包括权利要求1所述戊糖乳杆菌(Lactobacilluspentosus)068-1。
6.一种药物，其特征在于，包括权利要求1所述戊糖乳杆菌(Lactobacilluspentosus)068-1。
7.如权利要求1所述戊糖乳杆菌(Lactobacilluspentosus)068-1在利用含芦丁类植物源制备产品中的应用。
8.如权利要求1所述戊糖乳杆菌(Lactobacilluspentosus)068-1在和含芦丁天然产物协同制备产品中的应用。
9.如权利要求7或8所述的应用，其特征在于，所述产品为食品、保健品或药物。
10.一种提高芦丁生物利用度的方法，其特征在于，利用权利要求1所述戊糖乳杆菌(Lactobacilluspentosus)068-1处理芦丁或含芦丁类植物源。
CN202210799704.4A 2022-07-06 2022-07-06 一株戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)068-1及其应用 Active CN115058367B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210799704.4A CN115058367B (zh) 2022-07-06 2022-07-06 一株戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)068-1及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210799704.4A CN115058367B (zh) 2022-07-06 2022-07-06 一株戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)068-1及其应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN115058367A true CN115058367A (zh) 2022-09-16
CN115058367B CN115058367B (zh) 2023-06-16

Family

ID=83204132

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210799704.4A Active CN115058367B (zh) 2022-07-06 2022-07-06 一株戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)068-1及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN115058367B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117987312A (zh) * 2024-02-02 2024-05-07 陕西省微生物研究所 一株高产胞外多糖的融合魏斯氏菌92-2及其应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1568365A (zh) * 2001-10-12 2005-01-19 雷丁大学 包含戊糖乳杆菌菌株的组合物及其用途
CN113151084A (zh) * 2021-04-22 2021-07-23 南京农业大学 水果内生源乳杆菌及其在发酵蓝莓汁中的应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1568365A (zh) * 2001-10-12 2005-01-19 雷丁大学 包含戊糖乳杆菌菌株的组合物及其用途
CN113151084A (zh) * 2021-04-22 2021-07-23 南京农业大学 水果内生源乳杆菌及其在发酵蓝莓汁中的应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ALICE T.M. 等: "Biotransformation of rutin to quercetin by human gut bacteria and its effect on rutin bioavailability" *
PARK C.M.等: "Biotransformation of flavonoids by newly isolated and characterized Lactobacillus pentosus NGI01 strain from Kimchi", MICROORGANISMS *
冯亚莉 等: "槲皮素研究进展", 中国中药杂志 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN117987312A (zh) * 2024-02-02 2024-05-07 陕西省微生物研究所 一株高产胞外多糖的融合魏斯氏菌92-2及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN115058367B (zh) 2023-06-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101812414B (zh) 植物乳杆菌及其所产的可抑制革兰氏阴性菌的细菌素
CN113337430B (zh) 一株副干酪乳杆菌nsl0201及其应用
CN116200306B (zh) 一种鼠李糖乳酪杆菌LRa16及其在制备治疗生殖道感染的药物方面的用途和产品
CN112430553A (zh) 一株具有抑制幽门螺杆菌功能的罗伊氏乳杆菌sf-l-25及其应用
CN114774315B (zh) 鼠李糖乳杆菌菌株LRa05在制备增强免疫力制品和/或缓解湿疹制品方面的用途
CN108004155A (zh) 植物乳杆菌pc-26菌株及其应用
CN114642686B (zh) 一种复合益生菌及其延缓衰老和抗氧化的作用
CN114468306B (zh) 凝结芽孢杆菌bc99在制备缓解结肠炎制品或免疫调节制品方面的用途
CN112725219A (zh) 一种青春双歧杆菌菌株及其应用
CN112175872B (zh) 一种鼠李糖乳杆菌及其制剂、应用
CN114085791A (zh) 一种戊糖片球菌He10-a-1及其用途
Rahman et al. Control of coliform bacteria detected from diarrhea associated patients by extracts of Moringa oleifera
CN115058367A (zh) 一株戊糖乳杆菌(Lactobacillus pentosus)068-1及其应用
CN108486002B (zh) 一株产胞外多糖的罗汉果内生菌菌株及其生产胞外多糖的方法和胞外多糖的应用
CN116731913B (zh) 植物乳植杆菌在制备抗幽门螺杆菌产品中的应用
CN116948858B (zh) 一株具有抗肿瘤作用的罗伊氏乳杆菌a21099及其应用
CN111567807A (zh) 抑制发炎反应和抗阴道炎的含鼠李糖乳杆菌组合物及应用
CN116376770B (zh) 一种鼠李糖乳酪杆菌rh0121在制备降血糖制品中的应用
CN117487717A (zh) 一株植物乳杆菌pc715及其所产胞外多糖在调节肠道菌群中的应用
CN115704002B (zh) 一种丁酸梭菌cc02001及其应用
CN116286528A (zh) 罗伊氏乳杆菌ckcc11157菌株及其在制备抗高尿酸血症和痛风的产品中的应用
CN105238727A (zh) 一种拮抗空肠弯曲杆菌及抑制其flaA基因表达的植物乳杆菌
CN113373084B (zh) 一种抗菌且产胞外多糖的弯曲乳杆菌及其应用
CN115851499B (zh) 一株枯草芽孢杆菌及其应用和产品
CN119215074B (zh) 嗜黏蛋白阿克曼氏菌Akk09制备元素吸收促进剂的应用及其产品

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant