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CN114848786B - 一种抗癌、增加免疫力的复方三参汤 - Google Patents

一种抗癌、增加免疫力的复方三参汤 Download PDF

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CN114848786B CN202210474046.1A CN202210474046A CN114848786B CN 114848786 B CN114848786 B CN 114848786B CN 202210474046 A CN202210474046 A CN 202210474046A CN 114848786 B CN114848786 B CN 114848786B
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Abstract

本发明公开了一种抗癌、增加免疫力的复方三参汤，按重量份计，包含以下原料：人参2～5份、海参提取物4～7份、地参8～10份、灰树花8～10份、枸杞10～12份、白花蛇舌草16～20份、五味子10～14份、茯苓16～20份、黄精8～10份、薏苡仁28～32份、陈皮5～7份、生姜8～10份、白术4～7份、当归5～8份、甘草5～8份。本发明通过体外抗肿瘤实验、对裸鼠体内肿瘤细胞的抑制作用实验和对免疫调节作用的实验发现：以人参、海参、地参为君药，以灰树花、枸杞、白花蛇舌草、五味子为臣药，以茯苓、黄精、薏苡仁、陈皮、生姜、白术、当归为佐药，以甘草为使药，配制成的中药组合物具有显著的抗肿瘤、提高免疫力的作用。

Description

一种抗癌、增加免疫力的复方三参汤
技术领域
本发明涉及中医药物领域，特别是一种抗癌、增加免疫力的复方三参汤。
背景技术
随着生态环境恶化和社会压力等各种外部环境的影响，恶性肿瘤每年呈快速增长趋势。临床上目前治疗肿瘤多采用化疗或放射性疗法，但其在杀死肿瘤细胞的同时也无选择性的杀死白细胞、淋巴细胞等人体自身免疫细胞，导致病人常常由于因自身免疫能力低下并发感染，患者使用不良反应大，且疗程长，费用高，在临床使用中有较大的局限性。
中医药在治疗肿瘤方面具有独特的优势，以中药为代表的天然类药物具有毒副作用小、作用靶点多样、耐受性好等特点，在治疗肿瘤方面愈来愈受到重视。基于此，本发明研究开发一种抗肿瘤效果好，还能增加免疫力的中药配方，具有重要意义。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种抗癌、增加免疫力的复方三参汤，以解决上述技术背景中提出的问题。
为实现上述目的，本发明通过以下技术方案来实现：
一种抗癌、增加免疫力的复方三参汤，按重量份计，包含以下原料：人参2～5份、海参提取物4～7份、地参8～10份、灰树花8～10份、枸杞10～12份、白花蛇舌草16～20份、五味子10～14份、茯苓16～20份、黄精8～10份、薏苡仁28～32份、陈皮5～7份、生姜8～10份、白术4～7份、当归5～8份、甘草5～8份。
优选的，一种抗癌、增加免疫力的复方三参汤，按重量份计，包含以下原料：人参3份、海参提取物6份、地参9份、灰树花9份、枸杞12份、白花蛇舌草18份、五味子12份、茯苓18份、黄精9份、薏苡仁30份、陈皮6份、生姜9份、白术6份、当归6份、甘草6份。
一种抗癌、增加免疫力的复方三参汤的制备方法，包括以下步骤：
S1、取人参、地参，加醇提取，收集渗滤液；
S2、取灰树花、枸杞、白花蛇舌草、五味子、甘草，加水提取，得水相滤液；
S3、在所述醇提取液中加入所述水相滤液，混合均匀，水浴蒸煮后备用；
S4、取茯苓、黄精、薏苡仁、陈皮、生姜、白术、当归，加水煎煮后，过滤，向滤液中加入步骤S3得到的药物和海参提取物中，混合搅匀后，根据需要浓缩得到抗癌、增加免疫力的复方三参汤。
优选的，步骤S1中，以醇溶液浸泡人参、地参，使其充分溶胀24h后渗滤收集渗滤液；其中，醇溶液为无水乙醇或95％的乙醇水溶液，醇溶液的质量为人参、地参的质量之和的6～10倍。
优选的，步骤S1中，加入水的质量为灰树花、枸杞、白花蛇舌草、五味子、甘草的质量之和的10～12倍，加水处理时间为3～5h。
优选的，步骤S4中，煎煮加入的水的质量为茯苓、黄精、薏苡仁、陈皮、生姜、白术、当归的质量之和的10～12倍，煎煮时间为3～5h。
一种抗癌、增加免疫力的复方制剂，包括如权利要求1所述的复方三参汤和可药用载体或助剂。
优选的，其剂型为颗粒剂、片剂、胶囊、丸剂、冲剂或口服液。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
1、本发明通过体外抗肿瘤实验、对裸鼠体内肿瘤细胞的抑制作用实验和对免疫调节作用的实验发现：以人参、海参、地参为君药，以灰树花、枸杞、白花蛇舌草、五味子为臣药，以茯苓、黄精、薏苡仁、陈皮、生姜、白术、当归为佐药，以甘草为使药，配制成的中药组合物具有显著的抗肿瘤、提高免疫力的作用。
2、本发明提供的抗癌、增加免疫力的复方三参汤对肿瘤细胞具有明显的抑制作用。通过本发明提供的工艺，制备的复方三参汤及制剂，其治疗效果明显优于通过传统方法煎煮得到中药制剂。
附图说明
图1为试验例1中各组胃癌细胞MGC-803不同周期细胞所占比例柱形图。
具体实施方式
以下通过特定的具体实例说明本发明的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点与功效。本发明还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本发明的精神下进行各种修饰或改变。需说明的是，在不冲突的情况下，以下实施例及实施例中的特征可以相互组合。
本发明实施例中，各原料中药都是常用中药，在《中国药典》以及《中华本草》等中均有详细的记载，并且都可以通过商业途径容易地获得。本发明对这些中药材的产地来源等并无特别限制，只要符合相关国家标准或规定即可。如海参提取物，纯度：20:1，购于威海淼川生物科技有限公司。
本发明提供了一种抗癌、增加免疫力的复方三参汤，按重量份计，包含以下原料：人参2～5份、海参提取物4～7份、地参8～10份、灰树花8～10份、枸杞10～12份、白花蛇舌草16～20份、五味子10～14份、茯苓16～20份、黄精8～10份、薏苡仁28～32份、陈皮5～7份、生姜8～10份、白术4～7份、当归5～8份、甘草5～8份。
本发明中的术语“份”，仅指重量份，具体可将任意重量作为1份，如0.001g、0.01g、0.05g、0.1g、0.5g、1g、10g、100g、1000g、5000g、10000g等。
本发明中，人参，主补五脏，安精神，定魂魄，止惊悸，除邪气，明目，开心益智。
海参，补肾益精；养血润燥；止血；
地参，又叫地蚕、虫草参，益肾润肺，补血消疳。
灰树花，益气健脾、补虚扶正。
枸杞，补肝阴、养肝血、益精明目；
白花蛇舌草，功效：有消热解毒，消痈散疖，消肿，抗肿瘤，抗炎的作用。
五味子：益气生津，补肾宁心；
茯苓，渗湿利水、益脾和胃、宁心安神；
黄精，补气养阴、健脾润肺、益肾；
薏苡仁，健脾除湿、清热排脓及利水消肿；
陈皮，具理气降逆、调中开胃、燥湿化痰之功效。
生姜，发汗解表、温中止呕、温肺止咳、解毒；
白术：味甘，性温，健脾益气；
当归，活血化疲,补血调经；
甘草，补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药；
本发明君药为人参、海参、地参，扶正固本，补肾益气，增强机体免疫功能；臣药为灰树花、枸杞、白花蛇舌草、五味子，助人参、海参、地参扶正补虚，疏导化瘀，攻毒排毒，达到抗癌的功效；以茯苓、黄精、薏苡仁、陈皮、生姜、白术、当归为佐药提高免疫力，养血滋阴、补精益髓、补中益气，同时消除君药、臣药的毒性或烈性；以甘草使药补脾益气、调和诸药。
本发明中，所述抗癌、增加免疫力的复方三参汤的制备方法，包括以下步骤：
S1、取人参、地参，加醇提取，收集渗滤液；
S2、取灰树花、枸杞、白花蛇舌草、五味子、甘草，加水提取，得水相滤液；
S3、在所述醇提取液中加入所述水相滤液，混合均匀，水浴蒸煮后备用；
S4、取茯苓、黄精、薏苡仁、陈皮、生姜、白术、当归，加水煎煮后，过滤，向滤液中加入步骤S3得到的药物和海参提取物中，混合搅匀后，根据需要浓缩得到抗癌、增加免疫力的复方三参汤。
作为本实施例的进一步实施方式，步骤S1中，以醇溶液浸泡人参、地参，使其充分溶胀24h后渗滤收集渗滤液；其中，醇溶液为无水乙醇或95％的乙醇水溶液，醇溶液的质量为人参、地参的质量之和的6～10倍。
作为本实施例的进一步实施方式，步骤S1中，加入水的质量为灰树花、枸杞、白花蛇舌草、五味子、甘草的质量之和的10～12倍，加水处理时间为3～5h。
作为本实施例的进一步实施方式，步骤S4中，煎煮加入的水的质量为茯苓、黄精、薏苡仁、陈皮、生姜、白术、当归的质量之和的10～12倍，煎煮时间为3～5h。
抗癌、增加免疫力的复方三参汤制备所选用的原料的实施例和对比例如表1，其中实施例的制备原料记为A，制备工艺记为B。
表1
试验例1体外抗肿瘤实验
1、检测复方三参汤对肿瘤细胞生细胞生长周期的影响
本试验例以流式细胞仪检测了实施例1-3、对比例1-6的中药配方对胃癌细胞MGC-803、肝癌细胞HepG2、肺癌细胞A549生长周期的变化。
1.1药剂准备：根据实施例1-3、对比例1-6的中药配方及工艺制得的汤剂均喷雾干燥并压制成颗粒；每种配方均取0.8g，加入到40ml无血清RPMI-1640培养基中，充分震荡到完全溶解后，离心取上清液，并经0.22um过滤器过滤后，制得20mg/ml的母液备用。
1.2实验方法
复苏胃癌细胞MGC-803、肝癌细胞HepG2、肺癌细胞A549等肿瘤细胞。体外传代培养，用无血清的RPMI-1640培养液，置于37℃、5％CO2孵育箱中培养48-72h。每24h换培养液1次。待培养瓶底铺满肿瘤细胞后，弃去培养液，用0.25％胰蛋白酶消化肿瘤细胞。用无血清的RPMI-1640培养液调整细胞浓度为1x106个/ml后分别接种到各个实验组别所对应的培养基中。实验组别设空白对照组、实施例1-3、对比例1-6的中药配方实验处理组共10组。①空白对照组予常规培养液；②实验处理组均为含2mg/ml对应中药药剂+常规培养液。共同培养两代后，分别用0.25％胰蛋白酶消化，制备单细胞悬液，PBS洗涤后用-20℃预冷的乙醇固定，碘化吡啶(PI)染色后用流式细胞仪检测细胞周期的变化。统计检测结果，各组胃癌细胞MGC-803不同周期细胞所占比例见表2和图1；各组肝癌细胞HepG2不同周期细胞所占比例见表3；各组肺癌细胞A549不同周期细胞所占比例见表4。
表2各组胃癌细胞MGC-803不同周期细胞所占比例
表中，a表示与对照组相比，p<0.05；b表示与对比例2-6任一项比较，p<0.05。
通过流式细胞技术检测细胞周期，结果显示与对照组比较，不同中药配方对MG-803胃癌细胞周期起到阻滞作用，主要表现为将细胞阻滞于GO/G1期，使之不进入或延迟进入S期，干扰了DNA的合成，胃癌细胞因而丧失了进行有丝分裂的基础，增殖生长受到抑制。分别统计各组细胞的G0/G1期细胞所占比例，如表2和图1所示，结果显示实施例1-3、对比例1-6组G0/G1期细胞较对照组明显增加，差异有统计学意义。而更为重要的是实施例1-3组将胃癌细胞MGC-803阻滞于GO/G1期的能力较对比例1-6更为明显，差异具有统计学意义，揭示本发明复方三参汤的配伍合理，特别是灰树花、枸杞、白花蛇舌草、五味子一起协助人参、海参、地参，对抑制肿瘤细胞的增殖生长起到了协同增效的作用；同时实施例1-3相较于对比例1将胃癌细胞MGC-803阻滞于GO/G1期的能力更为明显，说明本发明提供的制备工艺有助于提高抑制肿瘤细胞的增殖生长的能力。
表3各组肝癌细胞HepG2不同周期细胞所占比例
细胞周期 S期 G2/M期
对照组 24.68±1.27 9.45±2.43
实施例1 40.16±2.64ab 14.85±1.33
实施例2 41.87±3.01ab 15.54±1.58
实施例3 42.51±3.46ab 16.07±1.32
对比例1 38.42±2.84a 13.16±2.71
对比例2 33.48±1.54a 11.97±1.96
对比例3 34.81±1.17a 12.58±2.07
对比例4 34.06±2.46a 12.09±1.46
对比例5 35.17±2.08a 12.94±1.55
对比例6 32.57±2.43a 11.56±2.24
表中，a表示与对照组相比，p<0.05；b表示与对比例2-6任一项比较，p<0.05。
由表3可知，与对照组比较，不同中药配方对HepG2细胞周期起到阻滞作用，主要表现为将细胞阻滞于S及G2期。分别统计各组细胞的S期细胞所占比例，结果显示实施例1-3、对比例1-6组S期细胞较对照组明显增加，差异有统计学意义；比较各组G2期细胞的比例，结果发现实施例1-3组G2期细胞比例较对照组明显增加，差异均具有统计学意义。而更为重要的是实施例1-3组将HepG2细胞阻滞于S和G2期的能力较对比例1-6更为明显，揭示本发明提供的复方三参汤有助于提高抑制肿瘤细胞的增殖生长的能力。
表4各组肺癌细胞A549不同周期细胞所占比例
表中，a表示与对照组相比，p<0.05；b表示与对比例2-6任一项比较，p<0.05。
由表4可知，与对照组比较，不同中药配方对A549肺癌细胞周期起到阻滞作用，主要表现为将细胞阻滞于GO/G1期。分别统计各组细胞的G0/G1期细胞所占比例，结果显示实施例1-3、对比例1-6组S期细胞较对照组明显增加，差异有统计学意义。而更为重要的是实施例1-3组将HepG2细胞阻滞于GO/G1期的能力较对比例1-6更为明显，差异具有统计学意义，揭示本发明提供的复方三参汤有助于提高抑制肿瘤细胞的增殖生长的能力。。
试验例2对裸鼠体内肿瘤细胞的抑制作用
本试验例以实施例1-3、对比例1-6的中药配方对A549肺癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响。
1.1药剂准备：根据实施例1-3、对比例1-6的中药配方及工艺制得的汤剂均喷雾干燥并压制成颗粒；每种配方均取0.8g，加入到40ml生理盐水中，充分震荡到完全溶解后，离心取上清液，并经0.22um过滤器过滤后，制得20mg/ml的母液备用。
1.2实验方法
取对数生长期的A549细胞，调整至细胞浓度为5×107个/mL，在小鼠背部皮下接种A549细胞0.1ml，待皮下移植瘤体积达70mm3左右时，将其随机分为10组，每组6只。对照组：生理盐水；实施例1-3、对比例1-6组：均按1.5g/(kg·BW)进行灌胃(即换算成灌胃20mg/ml的母液)；
接种48h后，将上述组别分别采用腹腔注射的方式，每日给药1次，连续3周，末次给药48h后脱臼处死小鼠，切除移植瘤，称取瘤重并计算抑瘤率，如表4所示。抑瘤率(％)＝(1-实验组瘤重均值/对照组瘤重均值)×100％。
表5各组对A549细胞裸鼠瘤生长的影响
表中，a表示与对照组相比，p<0.05；b表示与对比例2-6任一项比较，p<0.05。
从表5可知，与对照组相比，相较于对照组，实施例1-3、对比例1-6组对A549细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用均具有显著性差异，而与对比例2-6组相比，实施例1-3组、对比例1对A549细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用均具有显著性差异。通过对比，可以发现：本发明复方三参汤的配伍合理，特别是灰树花、枸杞、白花蛇舌草、五味子一起协助人参、海参、地参，对肿瘤抑制效果起到了协同增效的作用，缺少人参、地参、灰树花、白花蛇舌草、五味子任一个成分，其肿瘤抑制效果显著性降低；同时实施例1-3相较于对比例1肿瘤抑制效果更为明显，说明本发明提供的制备工艺有助于增强肿瘤抑制效果。
试验例3复方三参汤对免疫调节作用的实验
实验方法：取小鼠66只，随机分为11组，分别为正常对照组，荷瘤对照组和实施例1-3、对比例1-6药剂处理组；正常对照组为常规喂养小鼠，荷瘤对照组和处理组均为接种A549肺癌细胞的小鼠，且荷瘤对照组不给药；采用常规接种A549肺癌细胞，接种后48小时，处理组分别灌服实施例1-3、对比例1-6药剂，按1.5g/(kg·BW)进行灌胃，2周后小鼠眼球采血。测定IgA、IgG、IgM含量，具体实验结果见表5。
表6各组对小鼠IgA、IgG、IgM的影响
组别 IgA IgG IgM
正常对照组 88±3.1 867±16.4 79±5.4
荷瘤对照组 59±4.5 512±17.3 48±3.9
实施例1 81±5.6 806±16.4 70±6.5
实施例2 82±4.3 812±13.9 71±5.1
实施例3 84±6.7 817±15.8 73±4.2
对比例1 78±5.4 789±16.5 68±3.7
对比例2 68±4.8 631±15.3 57±4.5
对比例3 72±5.7 662±14.6 61±5.8
对比例4 70±3.2 646±13.7 59±6.1
对比例5 73±3.7 673±15.8 62±6.3
对比例6 65±4.9 625±16.7 55±5.9
由表6可知：接种A549肺癌细胞的小鼠，免疫球蛋白IgA、IgG、IgM含量明显低于正常对照小鼠；本发明的复方三参汤可以提高小鼠已经低下的IgA、IgG、IgM含量，表明其具有免疫促进作用，可以提高肿瘤患者自身的免疫功能，从而有利于改善肿瘤患者生活质量和促进自身抗肿瘤作用。
与对照组相比，相较于对照组，实施例1-3、对比例1-6组免疫促进作用均具有显著性差异，而与对比例2-6组相比，实施例1-3组、对比例1免疫促进作用均具有显著性差异。
综上所述，本发明通过体外抗肿瘤实验、对裸鼠体内肿瘤细胞的抑制作用实验和对免疫调节作用的实验发现：以人参、海参、地参为君药，以灰树花、枸杞、白花蛇舌草、五味子为臣药，以茯苓、黄精、薏苡仁、陈皮、生姜、白术、当归为佐药，以甘草为使药，配制成的中药组合物具有显著的抗肿瘤、提高免疫力的作用。
以上所述实施例仅表达了本发明的具体实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明保护范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。

Claims (7)

1.一种抗癌、增加免疫力的复方三参汤，其特征在于，按重量份计，由以下原料组成：人参2~5份、海参提取物4~7份、地参8~10份、灰树花8~10份、枸杞10~12份、白花蛇舌草16~20份、五味子10~14份、茯苓16~20份、黄精8~10份、薏苡仁28~32份、陈皮5~7份、生姜8~10份、白术4~7份、当归5~8份、甘草5~8份，其中，海参提取物的纯度为20:1；
所述复方三参汤的制备方法，包括以下步骤：
S1、取人参、地参，加醇提取，收集渗滤液；其中，醇溶液为无水乙醇或95%的乙醇水溶液；
S2、取灰树花、枸杞、白花蛇舌草、五味子、甘草，加水提取，得水相滤液；
S3、在所述醇提取液中加入所述水相滤液，混合均匀，水浴蒸煮后备用；
S4、取茯苓、黄精、薏苡仁、陈皮、生姜、白术、当归，加水煎煮后，过滤，向滤液中加入步骤S3得到的药物和海参提取物中，混合搅匀后，根据需要浓缩得到抗癌、增加免疫力的复方三参汤。
2.根据权利要求1所述的一种抗癌、增加免疫力的复方三参汤，其特征在于，按重量份计，由以下原料组成：人参3份、海参提取物6份、地参9份、灰树花9份、枸杞12份、白花蛇舌草18份、五味子12份、茯苓18份、黄精9份、薏苡仁30份、陈皮6份、生姜9份、白术6份、当归6份、甘草6份。
3.根据权利要求1所述的复方三参汤，其特征在于，步骤S1中，以醇溶液浸泡人参、地参，使其充分溶胀24h后渗滤收集渗滤液；其中，醇溶液的质量为人参、地参的质量之和的6~10倍。
4.根据权利要求1所述的复方三参汤，其特征在于，步骤S1中，加入水的质量为灰树花、枸杞、白花蛇舌草、五味子、甘草的质量之和的10~12倍，加水处理时间为3~5h。
5.根据权利要求1所述的复方三参汤，其特征在于，步骤S4中，煎煮加入的水的质量为茯苓、黄精、薏苡仁、陈皮、生姜、白术、当归的质量之和的10~12倍，煎煮时间为3~5h。
6.一种抗癌、增加免疫力的复方制剂，其特征在于，包括如权利要求1所述的复方三参汤和可药用载体或助剂。
7.根据权利要求6所述的复方制剂，其特征在于，其剂型为颗粒剂、片剂、胶囊、丸剂、冲剂或口服液。
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