[go: up one dir, main page]

CN114831998B - 栓菌酸在肾病治疗中的应用 - Google Patents

栓菌酸在肾病治疗中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN114831998B
CN114831998B CN202210464141.3A CN202210464141A CN114831998B CN 114831998 B CN114831998 B CN 114831998B CN 202210464141 A CN202210464141 A CN 202210464141A CN 114831998 B CN114831998 B CN 114831998B
Authority
CN
China
Prior art keywords
disease
acid
application
subject
treatment
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202210464141.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN114831998A (zh
Inventor
李亚峰
李荣山
段琦
田玲玲
李莉红
冯嘉炳
平鑫博
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shanxi Provincial Peoples Hospital
Original Assignee
Shanxi Provincial Peoples Hospital
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shanxi Provincial Peoples Hospital filed Critical Shanxi Provincial Peoples Hospital
Priority to CN202210464141.3A priority Critical patent/CN114831998B/zh
Publication of CN114831998A publication Critical patent/CN114831998A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN114831998B publication Critical patent/CN114831998B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/575—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of three or more carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, ergosterol, sitosterol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
    • G01N33/5044—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics involving specific cell types

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

本申请涉及疾病治疗领域，具体涉及栓菌酸在肾病治疗中的应用。

Description

栓菌酸在肾病治疗中的应用
技术领域
本申请属于疾病治疗领域，具体涉及一种栓菌酸在肾病(尤其糖尿病肾病)治疗中的应用。
背景技术
糖尿病肾病(Diabetic nephropathy，DN)是由于长时间患糖尿病而导致的蛋白尿以及肾小球滤过率(GFR)进行性降低，是糖尿病的致命并发症，以基底膜增厚、肾小球硬化、肾小管间质纤维化和尿白蛋白为特征。我国DN的发病率呈上升趋势，目前已成为终末期肾病的第二位原因，仅次于各种肾小球肾炎。DN尚无特效治疗。目前治疗DN的方法包括严格控制血糖、降低血压和使用肾血管紧张素-醛固酮系统阻断剂减少蛋白尿，这些方法虽然是有效的，但许多患者口服降糖药物联合血管紧张素转换酶抑制剂或血管紧张素受体阻断剂继续促进进展到终末期肾病，由于疗效有限，且存在一些副作用，患者的生存率也没有明显改善。因此，开发新型药物对DN的治疗具有重要意义。
天然中药及其活性成分因其高效、副作用小、成本低等优点，逐渐成为治疗各种疾病的新策略。栓菌酸(Trametenolic acid，TA)是羊毛烷型四环三萜类化合物的主要成分，具有包括肿瘤细胞的细胞毒活性、酶抑制活性、抗微生物活性、具有降糖作用、抗病毒、抗胃溃疡等作用。此外，TA对氧自由基也有一定的清除作用。目前研究发现，TA在人前列腺癌和乳腺癌中显示出有效的抗癌和抗炎活性，但未见TA在DN中有应用。
有鉴于此，提出本申请。
发明内容
为解决上述技术问题，本申请首次提出了栓菌酸能够用于肾病(尤其糖尿病肾病)的治疗。本申请通过采用一系列实验证实，栓菌酸能够通过抗氧化和抗炎途径对肾病引起的肾损伤起保护作用。
因此，本申请的第一目的是提供栓菌酸在治疗肾病(尤其糖尿病肾病)中的应用及其在制备治疗糖尿病肾病药物中的应用；
本申请的第二目的是提供一种治疗肾病(尤其糖尿病肾病)的药物组合物。
具体的，本申请首先提供一种栓菌酸在制备药物中的用途，所述药物用于预防和/或治疗疾病或病症，或者降低疾病或病症的风险。
进一步的，所述疾病为肾病；
进一步的，所述肾病包括糖尿病肾病；
进一步的，所述预防和/或治疗表现为增强受试者的抗氧化能力；
进一步的，所述预防和/或治疗表现为抑制受试者的炎症反应；
进一步的，所述预防和/或治疗表现为增强受试者的足细胞损伤保护；
进一步的，所述预防和/或治疗表现为抑制受试者的肾纤维化。
本申请还提供一种药物组合物，其包含有效成分栓菌酸。
进一步的，所述药物组合物还包含任选地药学上可接受的赋形剂、载体和/或稀释剂。
进一步的，所述药物组合物用于预防和/或治疗肾病；
进一步的，所述肾病包括糖尿病肾病；
进一步的，所述预防和/或治疗表现为增强受试者的抗氧化能力；
进一步的，所述预防和/或治疗表现为抑制受试者的炎症反应；
进一步的，所述预防和/或治疗表现为增强受试者的足细胞损伤保护；
进一步的，所述预防和/或治疗表现为抑制受试者的肾纤维化。
本申请还提供一种预防或治疗疾病、病症或综合征的方法，所述方法包括向有此需要的受试者施用有效量栓菌酸或上述药物组合物。
进一步的，所述药物或上述药物组合物以皮下方式、静脉内方式、口服、经直肠或腹膜内施加途径向受试者施用。
本申请还提供一种用于细胞、组织或受试者中增强抗氧化能力、抑制炎症反应、增强肾足细胞损伤保护和/或抑制纤维化的方法，其包括向肾细胞、肾组织或肾疾病受试者施用有效量的栓菌酸或上述药物组合物。
进一步的，所述受试者是患有肾病的受试者，优选的是患有糖尿病肾病受试者。
进一步的，所述氧化应激、炎症反应、肾足细胞损伤或纤维化等都是由于肾病引起的。
进一步的，所述细胞是肾细胞，所述组织是肾组织；优选的，所述细胞和组织是离体的。
本申请还提供一种栓菌酸在制备肾病动物模型中的应用，尤其在糖尿病肾病动物模型中的应用。
本申请还提供栓菌酸在制备用于细胞、组织或受试者中增强抗氧化能力、抑制炎症反应、增强肾足细胞损伤保护，和/或抑制纤维化的药物或试剂中的用途。
进一步的，上述受试者包括人或非人动物(包括哺乳动物)，诸如人、非人灵长类动物(猿、长臂猿、大猩猩、黑猩猩、猩猩、猕猴)、家畜(狗和猫)、农场动物(家禽如鸡和鸭、马、牛、山羊、绵羊、猪)和实验动物(小鼠、大鼠、兔、豚鼠)。人受试者包括胎儿、新生儿、婴儿、青少年和成人受试者。进一步的，所述受试者还包括动物疾病模型。
本申请的有益技术效果：
本申请首次提出栓菌酸对肾病(尤其糖尿病肾病)的治疗用途，并阐述了栓菌酸在治疗糖尿病肾病时的潜在机制。
附图说明
为了更清楚地说明本申请具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本申请的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1、右肾重/体重、BUN、Scr和尿白蛋白水平检测结果比较图；数据用均数±标准差表示(n＝10)，*P＜0.05与NC组比较，#P＜0.05与DN组比较；
图2、TA减轻DN的肾脏组织病理学改变图：(A)HE、PAS、Masson染色的代表性显微图，放大倍数:400×。(B)肾小球系膜基质扩张和胶原沉积定量分析；数据用均数±标准差表示(n＝10)，*P＜0.05与NC组比较，#P＜0.05与DN组比较。
图3、TA减轻DN的氧化应激结果比较图：经TA处理后，GSH(A)含量升高，SOD(C)、CAT(D)活性升高，MDA(B)含量降低。数据用均数±标准差表示(n＝10)，*P＜0.05与NC组比较，#P＜0.05与DN组比较。
图4、TA可通过激活Nrf2/HO-1信号通路减轻DN的氧化应激结果图：(A)Nrf2、HO-1和NQO-1蛋白表达的代表性western blot图；(B)Nrf2、HO-1和NQO-1蛋白表达的定量分析。数据用均数±标准差表示(n＝10)，*P＜0.05与NC组比较；#P＜0.05与DN组比较。
图5TA通过抑制NF-κB信号通路减轻DN的炎症反应的结果图：(A)NF-κB、P-NF-κB、TNF-α、IL-1β和IL-6蛋白表达的代表性western blot结果；(B)P-NF-κB/NF-κB、TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白表达的定量分析。数据用均数±标准差表示(n＝10)，*P＜0.05与NC组比较，#P＜0.05与DN组比较。
图6、TA对DN足细胞损伤保护作用结果图：(A)Nephrin和Podocin蛋白表达的代表性western blot结果；(B)Nephrin和Podocin蛋白表达的定量分析。数据用均数±标准差表示(n＝10)，*P＜0.05与NC组比较，#P＜0.05与DN组比较。
图7、TA减少DN肾纤维化结果图：(A)COL-Ⅲ和FN免疫组化染色，放大倍数：400×；(B)COL-Ⅲ和FN表达的半定量分析。数据用均数±标准差表示(n＝10)，*P＜0.05与NC组比较，#P＜0.05与DN组比较。
具体实施方式
下面将结合附图对本申请的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。
部分术语定义
除非在下文中另有定义，本申请具体实施方式中所用的所有技术术语和科学术语的含义意图与本领域技术人员通常所理解的相同。虽然相信以下术语对于本领域技术人员很好理解，但仍然阐述以下定义以更好地解释本申请。
如本申请中所使用，术语“包括”、“包含”、“具有”、“含有”或“涉及”为包含性的(inclusive)或开放式的，且不排除其它未列举的元素或方法步骤。术语“由…组成”被认为是术语“包含”的优选实施方案。如果在下文中某一组被定义为包含至少一定数目的实施方案，这也应被理解为揭示了一个优选地仅由这些实施方案组成的组。
在提及单数形式名词时使用的不定冠词或定冠词例如“一个”或“一种”，“所述”，包括该名词的复数形式。
本申请中的术语“大约”、“大体”表示本领域技术人员能够理解的仍可保证论及特征的技术效果的准确度区间。该术语通常表示偏离指示数值的±10％，优选±5％。
此外，说明书和权利要求书中的术语第一、第二、第三、(a)、(b)、(c)以及诸如此类，是用于区分相似的元素，不是描述顺序或时间次序必须的。应理解，如此应用的术语在适当的环境下可互换，并且本申请描述的实施方案能以不同于本申请描述或举例说明的其它顺序实施。
本申请的栓菌酸在制备药物中的用途，所述药物用于预防和/或治疗疾病或病症，或者降低疾病或病症的风险。
在一些实施方式中，本申请所述的疾病为肾病。
本申请中所述的“栓菌酸(TA)”，英文名:Trametenolic acid，中文别名:3-羟基羊毛甾-8,24-二烯-21-酸，是羊毛烷型四环三萜类化合物的主要成分，具有包括肿瘤细胞的细胞毒活性、酶抑制活性、抗微生物活性、具有降糖作用、抗病毒、抗胃溃疡等作用。
在本申请中，术语“疾病”或“病症”可以互换使用，通常是指受试者与正常状态的任意偏离，例如身体或某些器官的状态的任何变化，妨碍或扰乱了功能的履行，和/或在患病或与其接触的人中引起症状例如不适、机能障碍、痛苦或甚至死亡。疾病或病症还可以称为失调(distemper)、不适(ailing)、小病(ailment)、疾病(malady)、紊乱(disorder)、疾病(sickness)、生病(illness)、身体不适(complaint)、inderdisposion或affectation。
在本申请中，术语“预防和/或治疗”不仅包括预防和/或治疗疾病，还通常包括预防疾病的发作，减缓或逆转疾病的进展，预防或减缓与疾病相关的一种或多种症状的发作，减少和/或减轻与疾病相关的一种或多种症状，降低疾病和/或与其相关的任何症状的严重程度和/或持续时间和/或预防疾病和/或与其相关的任何症状的严重程度的进一步增加，预防、减少或逆转由疾病引起的任何生理损伤，以及通常对正在治疗的患者有益的任何药理学作用。本申请的RNA抑制剂或药物组合物形成可行的治疗剂不需要实现完全治愈或根除疾病的任何症状或表现。如在相关领域中所认识到的，用作治疗剂的药物可降低给定疾病状态的严重程度，但不需要消除疾病的每种表现才能被认为是有用治疗剂。类似地，预防性施用的治疗构成可行的预防剂不需要完全有效地预防病症的发作。简单地在受试者中减少疾病的影响(例如，通过减少其症状的数量或严重程度，或通过提高另一种治疗的有效性，或通过产生另一种有益效果)，或减少疾病发生或恶化的可能性就足够了。
本申请所述的“肾病”是指各种原因造成肾脏结构和功能的损害，可以包括但不限于原发性肾小球疾病，比如急性肾炎、慢性肾炎、隐匿性肾炎、肾病综合征等，继发性肾小球疾病，比如狼疮性肾炎、紫癜性肾炎、乙肝病毒相关性肾炎、糖尿病肾病等，遗传性肾病，比如多囊肾、薄基底膜肾病等，间质性肾炎，比如急性间质性肾炎、慢性间质性肾炎等。
在一些具体实施方式中，本申请所述的肾病尤其包括糖尿病肾病(DN)。
本申请中所述的“糖尿病肾病”是由于长时间患糖尿病而导致的蛋白尿以及肾小球滤过率(GFR)进行性降低，是糖尿病的致命并发症，以基底膜增厚、肾小球硬化、肾小管间质纤维化和尿白蛋白为特征。
在一些实施方式中，本申请所述预防和/或治疗表现为增强受试者的抗氧化能力；
在一些实施方式中，本申请所述预防和/或治疗表现为抑制受试者的炎症反应，尤其是肾病引起的炎症反应；
在一些实施方式中，本申请所述预防和/或治疗表现为增强受试者的足细胞损伤保护，尤其是肾病引起的足细胞损伤；
在一些实施方式中，本申请所述预防和/或治疗表现为抑制受试者的肾纤维化，尤其是肾病引起的肾纤维化。
本申请还记载了一种药物组合物，其包含有效成分栓菌酸，该包含栓菌酸的药物组合物用于预防和/或治疗肾病。
在一些实施方式中，本申请所述肾病尤其包括糖尿病肾病。
在本申请中，术语“受试者”通常是指需要诊断、预后、改善、预防和/或治疗疾病的人或非人动物(包括哺乳动物)，诸如人、非人灵长类动物(猿、长臂猿、大猩猩、黑猩猩、猩猩、猕猴)、家畜(狗和猫)、农场动物(家禽如鸡和鸭、马、牛、山羊、绵羊、猪)和实验动物(小鼠、大鼠、兔、豚鼠)。人受试者包括胎儿、新生儿、婴儿、青少年和成人受试者。受试者包括动物疾病模型。在一些实施方式中，本申请的受试者尤其是肾病受试者，在另一些具体的实施方式中，本申请的受试者尤其是糖尿病肾病受试者。
在一些具体的实施方式中，本申请所述的受试者是人或鼠。
在一些实施方式中，本申请所述药物组合物还进一步包含任选地药学上可接受的赋形剂、载体和/或稀释剂。
在本申请中，术语“药学上可接受的”通常是指不干扰活性成分生物学活性的有效性的一种或多种无毒物质。这类制剂通常可含有盐、赋形剂、缓冲剂、防腐剂、相容性载体和任选的其它治疗剂。这类药学上可接受的制剂通常也可包含适合给予人的相容性固体或液体填料、稀释剂或包囊材料。用于医药时，盐应该是药学上可接受的盐，但可方便地使用非药学上可接受的盐来制备药学上可接受的盐，不能将它们排除在本申请范围以外。这类药理学和药学上可接受的盐包括但不限于由以下酸制备的盐：氢氯酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、马来酸、乙酸、水杨酸、柠檬酸、硼酸、甲酸、丙二酸、琥珀酸等。药学上可接受的盐也可制备成碱金属盐或碱土金属盐，如钠盐、钾盐或钙盐。
术语“可接受的赋形剂、载体和/或稀释剂”是指在药理学和/或生理学上与受试者和活性剂相容的赋形剂、载体和/或稀释剂，其在本领域中是公知的(参见例如，Remington’s Pharmaceutical Sciences.Edited by Gennaro AR，19th ed.Pennsylvania:MackPublishing Company，1995)，并且包括但不限于pH调节剂，表面活性剂，佐剂和离子强度增强剂等。例如，pH调节剂包括但不限于磷酸盐缓冲液；表面活性剂包括但不限于阳离子、阴离子或非离子表面活性剂，例如Tween-80；离子强度增强剂包括但不限于氯化钠。
本申请还提供一种预防或治疗疾病、病症或综合征的方法，所述方法包括向有此需要的受试者施用有效量栓菌酸或上述药物组合物。
本申请中，术语“施用”通常是指通过任意引入或递送途径将本申请药物制剂引入受试者的身体中。可以采用本领域技术人员已知的用于使细胞、器官或组织与所述药物接触的任何方法。所述施用可以包括而不限于静脉内、动脉内、鼻内、腹内、肌内、皮下透皮或口服。每日剂量可以划分成一个、两个或更多个合适形式的剂量以在某个时间段期间的一个、两个或更多个时间施用。在一些实施方式中，本申请所述药物或上述药物组合物以皮下方式、静脉内方式、口服或腹膜内施加途径向受试者施用。
在本申请中，术语“有效量”或“有效剂量”通常是指足以实现或至少部分实现所需效果的量。药物或治疗剂的“治疗有效量”或“治疗有效剂量”通常是当单独使用或与另一种治疗剂组合使用时促进疾病消退(这通过疾病症状严重程度的降低、疾病无症状期的频度和持续时间的增加、或者由于罹患疾病而引起的损害或残疾的预防来证明)的任何药物量。药物的“预防有效量”或“预防有效剂量”通常是指当单独或与另一种治疗剂组合给有疾病发展或疾病复发的风险的受试者施用时抑制疾病的发展或复发的药物量。可以使用本领域技术人员已知的多种方法对治疗剂或预防剂促进疾病消退或抑制疾病发展或复发的能力进行评估，比如在处于临床试验期间的人类受试者中、在动物模型系统中预测对人类的功效、或者通过在体外测定中测定药剂的活性。在某些实施方式中，“有效量”是指产生预期药理学、治疗性或预防性结果的栓菌酸的量。
本申请还提供一种用于细胞、组织或受试者中增强抗氧化能力、抑制炎症反应、增强肾足细胞损伤保护和/或抑制纤维化的方法，其包括向肾细胞、肾组织或肾疾病受试者施用有效量的栓菌酸或上述药物组合物。可以理解针对细胞或组织，该操作可以是在体内或体外进行。
在一些实施方式中，本申请所述细胞是肾细胞，所述组织是肾组织；在一些优选的实施方式中，所述肾细胞或肾组织是离体状态的。
在一些实施方式中，本申请所述受试者是患有肾病的受试者，优选的是患有糖尿病肾病受试者。
本申请还提供一种栓菌酸在制备肾病动物模型中的应用，尤其在糖尿病肾病动物模型中的应用。可以理解，在确定了栓菌酸可用于治疗肾病基础上，本领域技术人员能够据此制备或辅助制备肾病动物模型。
本申请还提供了栓菌酸在制备用于细胞、组织或受试者中增强抗氧化能力、抑制炎症反应、增强肾足细胞损伤保护，和/或抑制纤维化的药物或试剂中的用途。
实施例
本申请通过附图和如下实施例进一步描述，所述的附图和实施例只是为了例证本申请的特定实施方案，不应理解为以任何方式限制本申请范围之意。
实验材料及分组处理
实验材料：SPF级8周龄雄性C57BLKS/db(db/db)小鼠20只和C57BL/6小鼠10只，购置于广东金致和生物科技有限公司；栓菌酸(TA)从桦褐孔菌中提取所得，纯度为99％以上。
实验共分三组：：
组1:同周龄C57BL/6小鼠作为正常对照组(n＝10)；
组2:糖尿病肾病DN组(n＝10)；
组3:糖尿病肾病DN+栓菌酸组(n＝10)；
其中，组2和3由db/db小鼠随机分成两组，组3由DN+栓菌酸组小鼠腹腔注射栓菌酸(10mg/kg/d)，连续注射4周；正常对照组和DN组小鼠腹腔注射生理盐水，连续注射4周。
实施例1、TA给药后小鼠肾重/体重测定和生化指标检测
考虑到小鼠右肾重/体重、BUN、Scr和尿白蛋白水平能够反应小鼠肾功能，本实施例代谢笼收集小鼠处死前24h尿液，按照商业化试剂盒说明书操作，检测24h小鼠尿白蛋白量；每只小鼠称量体重和右侧肾脏重量，计算右肾重/体重；收集血清标本，按照试剂盒说明书操作，检测小鼠血清中BUN、Scr和尿白蛋白水平。
结果如图1所示，DN组小鼠右肾重/体重、BUN、Scr和尿白蛋白水平都显著增加(P＜0.05)。而TA组右肾重/体重、BUN、Scr和尿白蛋白含量均显著降低(P＜0.05)。上述数据表明，经TA给药能显著改善DN小鼠的肾功能。
实施例2、TA给药后小鼠组织学研究
本实施例通过对组织学改变、氧化应激、炎症反应、足细胞保护和肾纤维化等多个方面进一步证明TA在肾病治疗中的作用。
本实施例将小鼠处死，分离肾组织，4％多聚甲醛固定，石蜡包埋，切成3μm厚肾组织切片。切片进行苏木精-伊红染色(HE)、过碘酸希夫染色(PAS)和Masson染色。随机选取20个视野，观察肾脏病理变化并拍摄肾脏组织图像，使用Image-Pro Plus 6.0软件对图像进行分析来评估肾小球硬化和小管间质损伤程度。
蛋白提取和Western印记：取小鼠1/3肾脏，加入200μL的RIPA裂解液提取小鼠肾脏总蛋白。等量的蛋白用SDS-PAGE分离，湿转转模，5％脱脂牛奶封闭1h，分别用Nrf2(1:1000)，HO-1(1:1000)，NQO-1(1:1000)，NF-κB(1:1000)，P-NF-κB(1:1000),，Nephrin(1:1000)，Podocin(1:1000)，TNF-α(1:1000)，IL-1β(1:1000)，IL-6(1:1000)和GAPDH(1:1000)抗体进行孵育，4℃过夜，TBST洗膜(3次，每次5min)，二抗室温下孵育1h，TBST洗膜(3次，每次5min)，电化学发光液进行显色，最后用全自动凝胶成像系统进行拍照后，Image J软件进行灰度值分析。
免疫组化研究：肾组织切片分别进Ⅲ型胶原(COL-Ⅲ)和纤连蛋白(FN)免疫组化染色。随机选取20个视野，用Image-Pro Plus 6.0软件测量COL-Ⅲ和FN蛋白相对表达量。
统计学分析：采用SPSS 19.0软件进行数据的统计学处理和分析。符合正态分布的计量资料以均数±标准差形式表示，多组间比较采用单因素方差分析。P＜0.05为差异有统计学意义。
具体实验结果如下：
①TA给药可减轻DN小鼠肾脏的组织学改变
由图2可见，(A)HE、PAS、Masson染色的代表性显微图；(B)肾小球系膜基质扩张和胶原沉积定量分析DN组小鼠肾小球系膜基质扩张和胶原沉积明显增强(P＜0.05)。经TA给药后，小鼠肾小球系膜基质扩张和胶原沉积明显减少(P＜0.05)。上述结果表明TA给药可减轻DN小鼠的肾脏组织学改变。
②TA给药可改善DN小鼠氧化应激
氧化应激是参与糖尿病肾病发病机制的主要危险因素之一。为了探讨TA对DN氧化应激的影响，本实施例检测了GSH、MDA含量以及SOD、CAT活性。与NC组相比，DN小鼠SOD活性显著降低，MDA含量显著升高(P＜0.05)，说明DN小鼠脂质过氧化物水平升高导致氧化损伤；而GSH含量和CAT活性则显著降低(P＜0.05)。经TA给药后，GSH水平，SOD和CAT活性显著升高，MDA含量显著降低(P＜0.05)。这些数据指标提示TA给药显著降低了小鼠体内脂质过氧化水平，增强小鼠抗氧化能力(具体参见图3)。
③TA可通过激活Nrf2/HO-1信号通路减轻DN的氧化应激
为进一步研究TA给药缓解DN氧化应激的机制，本申请采用western blot法检测Nrf2/HO-1通路关键蛋白的表达。结果如图4所示，与NC组相比，DN组Nrf2、HO-1、NQO-1蛋白表达显著降低(P＜0.05)。相比之下，TA给药后显著提高了Nrf2、HO-1、NQO-1蛋白的表达(P＜0.05)。上述结果提示了TA通过激活DN中Nrf2/HO-1信号通路，减轻了氧化应激。
④TA通过抑制NF-κB信号通路减轻DN的炎症反应
为探讨TA对DN炎症反应的影响及其机制，本实施例采用western blot法检测NF-κB、P-NF-κB及下游促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6的蛋白表达(P＜0.05)。如图5所示，TA给药显著降低了P-NF-κB/NF-κB、促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6的蛋白表达(P＜0.05)。这些结果表明，TA能够减轻DN的炎症反应，并且TA是通过抑制NF-κB信号通路降低促炎因子的表达从而减轻DN的炎症反应。
⑤TA给药对DN足细胞损伤有保护作用
①足细胞是肾病中肾小球滤过屏障的重要组成部分，Nephrin和Podocin共同维持足细胞的正常形态和功能，从而维持肾小球正常的滤过屏障功能。本实施例通过评价Nephrin和Podocin蛋白水平来评价TA给药对DN足细胞损伤的作用。由图6可见，与NC组相比，DN组Nephrin和Podocin蛋白表达水平显著下调(P＜0.05)；而经给药TA治疗后的小鼠组织中Nephrin和Podocin表达水平显著升高(P＜0.05)。上述数据显示，TA给药治疗对DN足细胞损伤有明显的保护作用。
②TA给药可减少DN肾纤维化
胶原蛋白-Ⅲ(COL-Ⅲ)是肾组织细胞外基质(ECM)的主要成分之一，在肾组织纤维化进展过程中，ECM的聚积主要由异常表达的Ⅲ型胶原和Ⅳ型胶原构成；纤连蛋白(fibronectin,FN)是非胶原性的大分子糖蛋白，FN表达的改变与大量的病理发生密切相关，包括纤维化。为探讨TA对肾纤维化的影响，本申请采用免疫组化方法检测COL-Ⅲ和FN的表达水平。图7结果表明，DN组COL-Ⅲ、FN水平明显高于NC组(P＜0.05)；而TA给药后COL-Ⅲ、FN表达水平明显降低(P＜0.05)，表明了TA给药能够有效抑制COL-Ⅲ和FN的表达，进而对DN小鼠有抗纤维化作用。
综上试验结果，TA给药能够对糖尿病肾病起到有效的治疗作用。
前述对本申请的具体示例性实施方案的描述是为了说明和例证的目的。这些描述并非想将本申请限定为所公开的精确形式，并且很显然，根据上述教导，可以进行很多改变和变化。对示例性实施例进行选择和描述的目的在于解释本申请的特定原理及其实际应用，从而使得本领域的技术人员能够实现并利用本申请的各种不同的示例性实施方案以及各种不同的选择和改变。本申请的范围意在由权利要求书及其等同形式所限定。

Claims (3)

1.一种栓菌酸在制备药物中的用途，其特征在于，所述药物用于预防和/或治疗疾病，或者降低疾病风险；所述疾病为糖尿病肾病。
2.权利要求1所述的用途，其特征在于，所述预防和/或治疗表现为增强受试者的抗氧化能力，抑制受试者的炎症反应，增强受试者的足细胞损伤保护，和/或抑制受试者的肾纤维化。
3.权利要求1-2任一所述的用途，其特征在于，所述受试者为人或非人动物。
CN202210464141.3A 2022-04-28 2022-04-28 栓菌酸在肾病治疗中的应用 Active CN114831998B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210464141.3A CN114831998B (zh) 2022-04-28 2022-04-28 栓菌酸在肾病治疗中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202210464141.3A CN114831998B (zh) 2022-04-28 2022-04-28 栓菌酸在肾病治疗中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN114831998A CN114831998A (zh) 2022-08-02
CN114831998B true CN114831998B (zh) 2023-09-22

Family

ID=82567340

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202210464141.3A Active CN114831998B (zh) 2022-04-28 2022-04-28 栓菌酸在肾病治疗中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN114831998B (zh)

Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108261429A (zh) * 2017-01-03 2018-07-10 杏辉天力（杭州）药业有限公司 茯苓萃取物及其活性成分于调节、预防及／或治疗肺部损伤的用途
CN109481424A (zh) * 2018-11-08 2019-03-19 温州医科大学附属第医院 异甘草素、药物组合物及其在治疗糖尿病肾病中的应用
CN109771453A (zh) * 2019-03-26 2019-05-21 广东省微生物研究所（广东省微生物分析检测中心） 桦树茸提取物在制备治疗和/或预防肠道菌群失调症及相关疾病的制剂中的用途
CN109985050A (zh) * 2017-12-29 2019-07-09 上海蓝木化工有限公司 栓菌酸的新用途
CN111760030A (zh) * 2020-07-09 2020-10-13 熊重祥 一种治疗尿酸性肾病的药物
CN111840559A (zh) * 2020-07-09 2020-10-30 熊重祥 Src抑制剂在制备预防或治疗尿酸性肾病药物中的用途
CN112795637A (zh) * 2021-01-08 2021-05-14 孙洪臣 靶向il-17c的抑制剂在治疗炎症相关慢性肾脏疾病中的用途
CN113384591A (zh) * 2021-06-28 2021-09-14 三峡大学 栓菌酸与索拉非尼联用药物及在制备抗肿瘤药物中的应用
CN113966218A (zh) * 2019-03-21 2022-01-21 阿尔维特Lcs制药有限公司 用于预防和治疗癌症、炎症性或免疫介导的炎症性疾病的大麻素和药用蘑菇的固定剂量组合
CN114032211A (zh) * 2021-11-26 2022-02-11 周桂英 乙酰栓菌酸用于cik细胞体外扩增的用途

Patent Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108261429A (zh) * 2017-01-03 2018-07-10 杏辉天力（杭州）药业有限公司 茯苓萃取物及其活性成分于调节、预防及／或治疗肺部损伤的用途
CN109985050A (zh) * 2017-12-29 2019-07-09 上海蓝木化工有限公司 栓菌酸的新用途
CN109481424A (zh) * 2018-11-08 2019-03-19 温州医科大学附属第医院 异甘草素、药物组合物及其在治疗糖尿病肾病中的应用
CN113966218A (zh) * 2019-03-21 2022-01-21 阿尔维特Lcs制药有限公司 用于预防和治疗癌症、炎症性或免疫介导的炎症性疾病的大麻素和药用蘑菇的固定剂量组合
CN109771453A (zh) * 2019-03-26 2019-05-21 广东省微生物研究所（广东省微生物分析检测中心） 桦树茸提取物在制备治疗和/或预防肠道菌群失调症及相关疾病的制剂中的用途
CN111760030A (zh) * 2020-07-09 2020-10-13 熊重祥 一种治疗尿酸性肾病的药物
CN111840559A (zh) * 2020-07-09 2020-10-30 熊重祥 Src抑制剂在制备预防或治疗尿酸性肾病药物中的用途
CN112795637A (zh) * 2021-01-08 2021-05-14 孙洪臣 靶向il-17c的抑制剂在治疗炎症相关慢性肾脏疾病中的用途
CN113384591A (zh) * 2021-06-28 2021-09-14 三峡大学 栓菌酸与索拉非尼联用药物及在制备抗肿瘤药物中的应用
CN114032211A (zh) * 2021-11-26 2022-02-11 周桂英 乙酰栓菌酸用于cik细胞体外扩增的用途

Also Published As

Publication number Publication date
CN114831998A (zh) 2022-08-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Ni et al. Mitochondrial calpain-1 disrupts ATP synthase and induces superoxide generation in type 1 diabetic hearts: a novel mechanism contributing to diabetic cardiomyopathy
Nauck Update on developments with SGLT2 inhibitors in the management of type 2 diabetes
Park et al. Renoprotective effects of paricalcitol on gentamicin-induced kidney injury in rats
US20210322407A1 (en) Use of Trimetazidine in Preparation of Drugs for Preventing and Treating Liver Diseases
Liu et al. Discovery of a novel rice-derived peptide with significant anti-gout potency
JP2015537009A (ja) 痛風の治療におけるブシラミンの使用
CN111358789A (zh) Nsc228155在制备防治慢性肾纤维化药物中的用途
WO2021073249A1 (zh) β-NMN在制备脓毒症器官损伤的治疗、预防药物中的应用
Shin et al. Effects of topical amphotericin B on expression of cytokines in nasal polyps
Reverte et al. SGLT2 inhibition potentiates the cardiovascular, renal, and metabolic effects of sGC stimulation in hypertensive rats with prolonged exposure to high-fat diet
CN114831998B (zh) 栓菌酸在肾病治疗中的应用
KR20240073926A (ko) 간 용적을 감소시키기 위한 레스메티롬
Katz Isotretinoin treatment of recalcitrant warts in an immunosuppressed man
Herat et al. An evaluation of empagliflozin and it’s applicability to hypertension as a therapeutic option
US20080279958A1 (en) Snake venom compositions and methods of use
WO1999016432A1 (fr) Medicament pour le traitement de la nephropathie diabetique
JP2016513968A (ja) Ｏ−結合ｎ−アセチルグルコサミントランスフェラーゼを標的する組成物及び方法並びに創傷治癒を促進する組成物及び方法
CN112190708B (zh) 趋化因子受体ccr6抑制剂在预防银屑病复发中的新应用
CN113332435B (zh) 鞘氨醇-1-磷酸4受体激动剂及其与真武汤联合在制备治疗慢性肾小球肾炎药物中的应用
US20060067913A1 (en) HCV therapy
JP4201771B2 (ja) 頻尿改善剤およびそれを含む医薬組成物および食品
Fife et al. Lymphoedema in bariatric patients
Reddy Unilateral Renal Agenesis in Type 2 Diabetes Mellitus: A Case Report and Possible Clinical Implications
ES2205247T3 (es) Metodo para tratar de prevenir trastornos neurodegenerativos administrando una tiazolidinona.
Jin et al. HSP90 Inhibitor 17-DMAG Downregulated METTL3 and Attenuates Renal Fibrosis in AKI to CKD Model: FR-PO1056

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant