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CN114762694B - 寡糖转移酶抑制剂在预防和/或治疗新型冠状病毒感染中的应用 - Google Patents

寡糖转移酶抑制剂在预防和/或治疗新型冠状病毒感染中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及化学药物领域，公开了寡糖转移酶抑制剂在预防和/或治疗新型冠状病毒感染中的应用。通过使用寡糖转移酶抑制剂，本发明能够有效预防和/或治疗新型冠状病毒的感染，抑制病毒基因组的复制，具有明确的抗病毒作用。

Description

寡糖转移酶抑制剂在预防和/或治疗新型冠状病毒感染中的 应用
技术领域
本发明涉及化学药物领域，具体涉及寡糖转移酶抑制剂在预防和/或治疗新型冠状病毒感染中的应用。
背景技术
冠状病毒(Coronavirus)是有包膜的不分节段的单股正链RNA病毒，具有广泛的动物宿主。来源于动物的SARS冠状病毒和MERS冠状病毒可引起人类的死亡。新型冠状病毒患者的临床表现为：90％以上的患者表现为发热，80％的患者表现为干咳，20％的患者表现为呼吸急促，15％的患者表现为呼吸困难，而最重要的表现是白细胞和淋巴细胞的减少。前期的研究发现，瑞德西韦(remdesivir)和磷酸氯喹(chloroquine)等药物可以很好的抑制病毒的复制，同时也已经在临床上开展了相关研究，而相关的疫苗也加紧进行研制，但是目前还没有一种药物或疫苗获得批准广泛应用。
NGI-1(N-连接糖基化抑制剂-1)是一种氨基苯甲酰胺-磺胺类药物，属于寡糖转移酶(Oligosaccharyltransferase，OST)抑制剂，被报道可以通过靶向寡糖转移酶而发挥抗寨卡病毒(ZIKV)、登革病毒(DENV)等黄病毒的作用，同时不影响细胞活力。 NGI-1可以很好抑制黄病毒RNA复制，且其抑制功能不依赖于OST对N- 糖基化的功能。此外，文献报道NGI-1可以通过抑制病毒糖蛋白(GP)的 STT3B-依赖N-糖基化，进而抑制拉沙病毒(LASV)的增殖。同时，NGI-1对蚊媒传播的甲病毒属基肯孔尼亚病毒(CHIKV)、委内瑞拉马脑炎病毒(VEEV)和小核糖核酸病毒脊髓灰质炎病毒(PV)等没有抑制效果。但是，并没有文献报道寡糖转移酶抑制剂能抑制其他病毒的复制，也尚未有任何报道显示寡糖转移酶抑制剂对新型冠状病毒有任何抑制作用。
发明内容
本发明的目的是为了克服现有技术存在的问题，提供一种寡糖转移酶抑制剂在预防和/或治疗新型冠状病毒感染中的应用。
本发明的发明人在研究中意外发现，寡糖转移酶抑制剂能够有效抑制新型冠状病毒，因此，为了实现上述目的，本发明第一方面提供了寡糖转移酶抑制剂在制备用于预防和/或治疗新型冠状病毒感染的药物中的应用。
本发明第二方面提供了一种在体外抑制新型冠状病毒复制的方法，该方法包括：使寡糖转移酶抑制剂与新型冠状病毒接触。
本发明第三方面提供了一种用于预防和/或治疗新型冠状病毒感染的药物组合物，该药物组合物含有寡糖转移酶抑制剂和药学上可接受的辅料。
本发明第四方面提供了用于预防和/或治疗新型冠状病毒的寡糖转移酶抑制剂。
本发明第五方面提供了一种预防和/或治疗新型冠状病毒感染的方法，该方法包括：将有效量的寡糖转移酶抑制剂或有效量的上述药物组合物给药至受试者。
通过使用寡糖转移酶抑制剂，本发明能够有效预防和/或治疗新型冠状病毒的感染，抑制病毒基因组的复制，具有明确的抗病毒作用，可用于治疗新型冠状病毒感染的潜在临床用药。此外，寡糖转移酶抑制剂在抑制新型冠状病毒复制的同时并不影响细胞活力。
附图说明
图1为实施例中不同浓度的NGI-1抑制新型冠状病毒在人结肠腺癌细胞系Caco2细胞上的复制的结果；
图2为NGI-1对Caco2细胞的细胞毒性试验结果。
具体实施方式
在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。
一方面，本发明提供了寡糖转移酶抑制剂在制备用于预防和/或治疗新型冠状病毒感染的药物中的应用。
上述寡糖转移酶抑制剂能够有效(在体外)抑制新型冠状病毒的复制，因此，换个角度而言，本发明还涉及寡糖转移酶抑制剂在(在体外)抑制新型冠状病毒复制中的应用，特别是寡糖转移酶抑制剂于体外在人结肠腺癌细胞系Caco2细胞上抑制新型冠状病毒复制中的应用。
另一方面，本发明还提供了一种用于预防和/或治疗新型冠状病毒感染的药物组合物，其特征在于，该药物组合物含有寡糖转移酶抑制剂和药学上可接受的辅料。所述的药物组合物中寡糖转移酶抑制剂的含量可以为常规的选择，例如，可以为5-60重量％。
术语“药学上可接受的”指的是并非为生物学上或并非其他方面不适宜的。术语“辅料”指的是存在于药物制剂中的并非活性成分的任何物质，包括稀释剂、粘合剂、润滑剂、崩解剂、着色剂、乳化剂、pH缓冲剂和防腐剂等。本发明中使用的辅料可以为各种常规用于制药的辅料。
根据本发明的优选实施方式，所述药物组合物进一步含有有利于预防和 /或治疗所述新型冠状病毒感染的辅助药剂。所述辅助药剂可以为化药，如乙酰氨基酚等，也可以为其他具有上述疗效的药剂。
再一方面，本发明提供了用于预防和/或治疗新型冠状病毒感染的寡糖转移酶抑制剂。
此外，本发明提供了一种预防和/或治疗新型冠状病毒感染的方法，其特征在于，该方法包括：将有效量的寡糖转移酶抑制剂或有效量的如前所述的药物组合物给药至受试者。所述受试者可以为常见的哺乳动物，特别是灵长类动物(如人或猴)或啮齿类动物(如鼠)。
本发明中，寡糖转移酶抑制剂或药物组合物可以以任意常规的方式进行给药，如局部给药。本领域技术人员可以根据给药的具体方式将寡糖转移酶抑制剂或含有寡糖转移酶抑制剂的药物组合物制备成不同的剂型。
给药的剂量可以为本领域常规的剂量(有效量)，可以根据各种参数、尤其根据受试者的年龄、体重、性别和健康状况来确定。例如，对于成人，寡糖转移酶抑制剂(特别是NGI-1及其类似物)的口服剂量可以为200-400 mg/次。
上述寡糖转移酶抑制剂可以为各种常见的抑制寡糖转移酶的物质。优选地，所述寡糖转移酶抑制剂为NGI-1及其类似物中的至少一种。本发明中， NGI-1也即N-连接糖基化抑制剂-1(5-[(二甲氨基)磺酰基]-N-(5-甲基-2- 噻唑基)-2-(1-吡咯烷基)-苯甲酰胺，5-[(Dimethylamino)sulfonyl]-N-(5-methyl-2-thiazolyl)-2-(1-pyrrolidinyl)benzamide)，结构如下所示：
Figure BDA0002896520090000051
NGI-1的类似物可以为与NGI-1具有相似结构和/或具有相似抗新型冠状病毒性能的化合物，例如，可以选自以下化合物：
化合物1：
Figure BDA0002896520090000052
化合物2：/>
Figure BDA0002896520090000053
化合物3：
Figure BDA0002896520090000061
化合物4：/>
Figure BDA0002896520090000062
化合物5：
Figure BDA0002896520090000063
化合物6：/>
Figure BDA0002896520090000064
化合物7：
Figure BDA0002896520090000065
化合物8：/>
Figure BDA0002896520090000066
化合物9：
Figure BDA0002896520090000067
化合物10：/>
Figure BDA0002896520090000068
化合物11：
Figure BDA0002896520090000069
化合物12：/>
Figure BDA00028965200900000610
化合物13：
Figure BDA0002896520090000071
化合物14：/>
Figure BDA0002896520090000072
化合物15：
Figure BDA0002896520090000073
化合物16：/>
Figure BDA0002896520090000074
化合物17：
Figure BDA0002896520090000075
化合物18：/>
Figure BDA0002896520090000076
化合物19：
Figure BDA0002896520090000077
。
以下将通过实施例对本发明进行详细描述。
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可以从商业途径得到。
实施例1
本实施例用来说明本发明使用的NGI-1对新型冠状病毒在人结肠腺癌细胞系Caco2细胞上的复制具有抑制作用。
将人结肠腺癌细胞系Caco2细胞(购自北纳生物，货号BNCC350769) 种于24孔板中，细胞浓度为1×105个/孔，37℃孵箱培养过夜。用NGI-1(购自MCE，编号为HY-117383)对所述细胞进行处理，处理体系中NGI-1的浓度分别为0μM、1μM、5μM，每个浓度进行3个平行实验。1小时后感染新型冠状病毒(Beijing/IME-BJ01/2020株，GenBank登录号为MT291831.1)， MOI＝0.01。病毒37℃孵育1小时后，换上新鲜2％(FBS)培养基(购自 ThermoFisher Scientific，货号10099141C)，继续培养72小时。取细胞培养上清，提取RNA(使用的试剂盒购自Thermo Fisher Scientific，编号为 12183018A)，进行荧光定量PCR(引物合成于生工生物，序列参见表1)检测病毒RNA拷贝数。以NGI-1加入量为0μM处理的人结肠腺癌细胞系 Caco2细胞作为空白对照。
结果见图1。从图1可以看出，加药组新型冠状病毒的复制得到有效抑制，且随着NGI-1浓度增大其抑制作用增强。
表1
Figure BDA0002896520090000081
实施例2
本实施例用来说明本发明使用的NGI-1剂量不影响Caco2细胞的活力。
将人结肠腺癌细胞系Caco2细胞种于96孔板中，细胞浓度为1×104个/ 孔，37℃孵箱培养过夜。用NGI-1对所述细胞进行处理，处理体系中NGI-1 的浓度分别为0μM、0.01μM、0.1μM、1μM、10μM、50μM、100μM、 500μM，每个浓度进行4个平行实验。继续培养72小时。使用细胞增殖检测试剂盒CellTiter
Figure BDA0002896520090000091
AQueous One Solution Assay(购自Promega，货号C3580)进行细胞活力检测，每孔加入20μl检测试剂，37℃孵箱反应1小时，使用酶联仪(购于BioTek，型号Synergy HTX)读取490nm吸光度值。以 NGI-1加入量为0μM处理的人结肠腺癌细胞系Caco2细胞作为空白对照。
结果见图2。从图2可以看出，本发明所使用的NGI-1浓度能够有效抑制新型冠状病毒而不影响细胞活力。
通过上述结果可以看出，本发明通过采用寡糖转移酶抑制剂(特别是 NGI-1)能够有效预防和/或治疗新型冠状病毒感染，同时不影响细胞活力。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于此。在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，包括各个技术特征以任何其它的合适方式进行组合，这些简单变型和组合同样应当视为本发明所公开的内容，均属于本发明的保护范围。
SEQUENCE LISTING
<110> 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
<120> 寡糖转移酶抑制剂在预防和/或治疗新型冠状病毒感染中的应用
<130> YXI66889JSY
<160> 3
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 22
<212> DNA
<213> 新型冠状病毒-F
<400> 1
tcctggtgat tcttcttcag gt 22
<210> 2
<211> 20
<212> DNA
<213> 新型冠状病毒-R
<400> 2
tctgagagag ggtcaagtgc 20
<210> 3
<211> 21
<212> DNA
<213> 新型冠状病毒-探针
<400> 3
agctgcagca ccagctgtcc a 21

Claims (1)

1.寡糖转移酶抑制剂在制备用于抑制新型冠状病毒的药物中的应用；其中，所述寡糖转移酶抑制剂为NGI-1；
所述NGI-1结构如下所示：
Figure FDA0004282577260000011
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