CN114630841A

CN114630841A - 抗体以及阻断vista及其结合配偶体的相互作用

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Publication number: CN114630841A
Application number: CN202080075485.4A
Authority: CN
Inventors: 孙东旭; C·A·戈登; Y·柴; M·Z·博纳科西; S·A·F·威廉姆斯; D·R·罗斯纳; K·希克斯
Original assignee: Zhenhe Pharmaceutical Co ltd
Current assignee: Zhenhe Pharmaceutical Co ltd
Priority date: 2019-08-29
Filing date: 2020-08-27
Publication date: 2022-06-14
Also published as: EP4021942A4; US20220281973A1; EP4021942A1; WO2021041704A1

Abstract

本文公开了与LRIG1特异性结合的抗体及其使用方法。在一些实施方案中，本文还描述了用与LRIG1特异性结合的抗体调节免疫系统活性或促进免疫细胞增殖的方法。

Description

抗体以及阻断VISTA及其结合配偶体的相互作用

相关申请的交叉引用

本申请要求于2019年8月29日提交的美国临时专利申请号62/893,482的优先权的权益，其全部内容特此通过引用并入本文。

生物样品保藏声明

在一些实施方案中，与LRIG1结合并阻断VISTA结合的抗体，其于____以编号____根据《布达佩斯条约》保藏在美国类型培养物保藏中心(ATCC)。这些抗体的名称为：802.4H6.2D11、802.3D4.2D4、802.2F4.2A3和802.3G8.2A3。

这些保藏是根据《国际承认用于专利程序的微生物保存布达佩斯条约及其相关法规》(《布达佩斯条约》)的规定进行的。这确保了自保藏之日起30年的保藏维持期。ATCC将根据《布达佩斯条约》的条款，并根据申请人与ATCC之间的协议提供保藏，该协议确保在相关美国专利发布时或向公众开放任何美国或外国专利申请时(以先发生者为准)，向公众永久且无限制地提供保藏，并确保根据《美国法典》第35编第122节和其依据的《专利局长规则》(包括《联邦判例汇编》第37卷)向美国专利和商标专员确定有权获得保藏。保藏的生物材料的可用性不应被解释为违反任何政府根据其专利法授予的权利而许可实施本发明。

序列表的参考

本申请与电子格式的序列表一起提交。序列表以题目为SeqListingIMMUT014WO.TXT的文件提供，该文件创建并且最后修改于2020年8月27日，大小为129,585字节。电子序列表的信息的全部内容通过引用并入本文。

技术领域

本公开的方面涉及与LRIG1特异性结合的抗体及其使用方法。在一些实施方案中，本文还描述了用与LRIG1特异性结合的抗体来调节免疫系统活性或促进免疫细胞增殖的方法。

背景技术

LRIG1(富含亮氨酸的重复序列和免疫球蛋白样结构域蛋白1)是一种具有肿瘤抑制功能的跨膜蛋白，也与正常细胞的增殖和静止有关。VISTA(T细胞激活的V-结构域Ig抑制因子)是跨膜免疫检查点蛋白，其在广泛的白血细胞中表达，是一种结合。VISTA活性与许多免疫相关疾病有关，包括自体免疫性障碍和炎性障碍以及癌症。

发明内容

对免疫疾病和癌症(包括由LRIG1和/或VISTA调控的那些免疫疾病和癌症)的治疗干预存在持久的需求。

在一些实施方案中，本文公开了抗LRIG1抗体和使用其调节免疫功能(例如诱导或抑制免疫激活)的方法。在一些实施方案中，本文进一步公开了使用抗LRIG1抗体促进免疫细胞(例如树突细胞、B细胞、细胞毒性T细胞、调节性T细胞和/或天然杀伤细胞)增殖的方法。在一些实施方案中，本文公开的抗LRIG1抗体对免疫功能的调节包括激活或抑制免疫功能。在一些实施方案中，免疫功能的激活包括上调免疫细胞(诸如B细胞和/或细胞毒性T细胞)的活性。在一些实施方案中，免疫功能的抑制包括下调免疫细胞的活性，或上调免疫抑制细胞(诸如调节性T细胞)的增殖和/或功能。

在一些实施方案中，本文公开了一种抗原结合多肽，其中所述多肽表现出与LRIG1蛋白(SEQ ID NO:2)的特异性结合，并且其中所述多肽与存在于选自由下述组成的组的LRIG1的一个或多个区域上的表位结合：从LRIG1蛋白的N末端到C末端的位置1-564或位置655-1093的氨基酸残基的任何氨基酸序列。在一些实施方案中，所述多肽与存在于从LRIG1蛋白的N末端到C末端的位置674-714的氨基酸残基的氨基酸序列内的表位结合。在一些实施方案中，所述多肽与存在于从LRIG1蛋白的N末端到C末端的位置704-744的氨基酸残基的氨基酸序列内的表位结合。在一些实施方案中，所述多肽与从N末端到C末端的在位置1-564或位置655-1093之间的LRIG1的未确定表位结合。在一些实施方案中，所述抗体包括全长抗体或其片段。在一些实施方案中，所述抗体包括双特异性抗体或其结合片段。在一些实施方案中，所述抗体包括单价Fab’、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。在一些实施方案中，所述多肽包括选自SEQ ID NO:84-145、149-187或242-254的至少一个互补决定区(CDR)。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:84、87、90、93、96、99、102、105、108、111、114、117、120、123、126、129、134、138、143和242的至少一个重链CDR1。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:85、88、91、94、97、100、103、106、109、112、115、118、121、124、127、130、132、136、139、141、142、144和243的至少一个重链CDR2。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:86、89、92、95、98、101、104、107、110、113、116、119、122、125、128、131、133、135、137、140、145和244的至少一个重链CDR3。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:149、152、154、157、163、166、168、171、172、173、175、178、181、183、187、246、251和253的至少一个轻链CDR1。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:150、155、158、160、164、169、176、179、185、247和249的至少一个轻链CDR2。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:151、153、156、159、161、162、165、167、170、174、177、180、182、184、186、248、250和252的至少一个轻链CDR3。在一些实施方案中，所述抗体或多肽包括至少一个选自SEQ ID NO:84-145或242-245的重链CDR。在一些实施方案中，所述抗体或多肽包括选自SEQ ID NO:147-187或246-254的至少一个轻链CDR。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括根据图9的3个重链CDR和3个轻链CDR。在一些实施方案中，所述抗体包括IgG框架。在一些实施方案中，所述抗体包括IgG1框架、IgG2框架或IgG4框架。在一些实施方案中，所述抗体包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、20nM、25nM或30nM的k_D。在一些实施方案中，所述抗体包括人源化抗体。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括VH结构域，所述VH结构域具有与SEQ ID NO:192-216至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括VL结构域，所述VL结构域具有与SEQ ID NO:217-241至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括根据表5的VH和VL。在一些实施方案中，所述抗体是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8。

在一些实施方案中，本文公开了一种抗原结合多肽，其中所述多肽破坏LRIG1-VISTA相互作用，并且其中所述多肽与SEQ ID NO:69至75的区域中的LRIG1的表位结合。在一些实施方案中，所述多肽结合由肽65(SEQ ID NO.69)定义的LRIG1区域内存在的表位。在一些实施方案中，所述多肽与由肽66(SEQ ID NO.70)定义的LRIG1区域内存在的表位结合。在一些实施方案中，所述多肽与由肽67(SEQ ID NO.71)定义的LRIG1区域内存在的表位结合。在一些实施方案中，所述多肽与由肽68(SEQ ID NO.72)定义的LRIG1区域内存在的表位结合。在一些实施方案中，所述多肽与由肽69(SEQ ID NO.73)定义的LRIG1区域内存在的表位结合。在一些实施方案中，所述多肽与由肽70(SEQ ID NO.74)定义的LRIG1区域内存在的表位结合。在一些实施方案中，所述多肽与由肽71(SEQ ID NO.75)定义的LRIG1区域内存在的表位结合。在一些实施方案中，所述抗体包括全长抗体或其片段。在一些实施方案中，所述抗体包括双特异性抗体或其结合片段。在一些实施方案中，所述抗体包括单价Fab’、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。在一些实施方案中，所述多肽包括选自SEQ ID NO:84-145、149-187或242-254的至少一个互补决定区。在一些实施方案中，所述抗体或多肽包括选自SEQ ID NO:84-145或242-245的至少一个重链CDR。在一些实施方案中，所述抗体或多肽包括选自SEQ IDNO:147-187或246-254的至少一个轻链CDR。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自84、87、90、93、96、99、102、105、108、111、114、117、120、123、126、129、134、138、143和242的至少一个重链CDR1。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ IDNO:85、88、91、94、97、100、103、106、109、112、115、118、121、124、127、130、132、136、139、141、142、144和243的至少一个重链CDR2。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:86、89、92、95、98、101、104、107、110、113、116、119、122、125、128、131、133、135、137、140、145和244的至少一个重链CDR3。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:149、152、154、157、163、166、168、171、172、173、175、178、181、183、187、246、251和253的至少一个轻链CDR1。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:150、155、158、160、164、169、176、179、185、247和249的至少一个轻链CDR2。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:151、153、156、159、161、162、165、167、170、174、177、180、182、184、186、248、250和252的至少一个轻链CDR3。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括根据图9的3个重链CDR和3个轻链CDR。在一些实施方案中，所述抗体包括IgG框架。在一些实施方案中，所述抗体包括IgG1框架、IgG2框架或IgG4框架。在一些实施方案中，所述抗体包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、20nM、25nM或30nM的k_D。在一些实施方案中，所述抗体包括人源化抗体。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括VH结构域，所述VH结构域具有与SEQ IDNO:192-216至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括VL结构域，所述VL结构域具有与SEQ ID NO:217-241至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括根据表5的VH和VL。在一些实施方案中，所述抗体是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8。

在一些实施方案中，本文公开了一种抗原结合多肽，其中所述多肽表现出与LRIG1蛋白的特异性结合，其中所述多肽与LRIG1的结合将LRIG1-VISTA之间的相互作用减弱至不含所述抗原结合多肽的LRIG1-VISTA之间的相互作用的小于21％。在一些实施方案中，所述多肽与LRIG1的结合将LRIG1-VISTA之间的相互作用减弱至不含抗原结合多肽的LRIG1-VISTA之间的相互作用的小于20％、小于15％、小于10％、小于5％或小于1％。在一些实施方案中，所述多肽与在SEQ ID NO:69至75的区域中的LRIG1的表位结合。在一些实施方案中，所述抗体包括全长抗体或其片段。在一些实施方案中，所述抗体包括双特异性抗体或其结合片段。在一些实施方案中，所述抗体包括单价Fab’、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。在一些实施方案中，所述多肽包括选自SEQ ID NO:84-145、149-187或242-254的至少一个互补决定区。在一些实施方案中，所述抗体或多肽包括选自SEQ ID NO:84-145或242-245的至少一个重链CDR。在一些实施方案中，所述抗体或多肽包括选自SEQ ID NO:147-187或246-254的至少一个轻链CDR。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:84、87、90、93、96、99、102、105、108、111、114、117、120、123、126、129、134、138、143和242的至少一个重链CDR1。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:85、88、91、94、97、100、103、106、109、112、115、118、121、124、127、130、132、136、139、141、142、144和243的至少一个重链CDR2。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:86、89、92、95、98、101、104、107、110、113、116、119、122、125、128、131、133、135、137、140、145和244的至少一个重链CDR3。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ IDNO:149、152、154、157、163、166、168、171、172、173、175、178、181、183、187、246、251和253的至少一个轻链CDR1。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:150、155、158、160、164、169、176、179、185、247和249的至少一个轻链CDR2。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:151、153、156、159、161、162、165、167、170、174、177、180、182、184、186、248、250和252的至少一个轻链CDR3。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括根据图9的3个重链CDR和3个轻链CDR。在一些实施方案中，所述抗体包括IgG框架。在一些实施方案中，所述抗体包括IgG1框架、IgG2框架或IgG4框架。在一些实施方案中，所述抗体包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、20nM、25nM或30nM的k_D。在一些实施方案中，所述抗体包括人源化抗体。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括VH结构域，所述VH结构域具有与SEQ ID NO:192-216至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括VL结构域，所述VL结构域具有与SEQ ID NO:217-241至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括根据表5的VH和VL。在一些实施方案中，所述抗体是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8。

在一些实施方案中，本文公开了一种抗原结合多肽，其中所述多肽包括选自SEQID NO:84-145、149-187或242-254的至少一个互补决定区，并且其中所述多肽能够结合存在于LRIG1蛋白的一个或多个区域中的表位。在一些实施方案中，所述抗体包括全长抗体或其片段。在一些实施方案中，所述抗体包括双特异性抗体或其结合片段。在一些实施方案中，所述抗体包括单价Fab’、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。在一些实施方案中，所述多肽包括选自SEQID NO:84-145、149-187或242-254的一个以上的互补决定区。在一些实施方案中，所述抗体或多肽包括选自SEQ ID NO:84-145或242-245的至少一个重链CDR。在一些实施方案中，所述抗体或多肽包括选自SEQ ID NO:147-187或246-254的至少一个轻链CDR。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:84、87、90、93、96、99、102、105、108、111、114、117、120、123、126、129、134、138、143和242的至少一个重链CDR1。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:85、88、91、94、97、100、103、106、109、112、115、118、121、124、127、130、132、136、139、141、142、144和243的至少一个重链CDR2。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:86、89、92、95、98、101、104、107、110、113、116、119、122、125、128、131、133、135、137、140、145和244的至少一个重链CDR3。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:149、152、154、157、163、166、168、171、172、173、175、178、181、183、187、246、251和253的至少一个轻链CDR1。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:150、155、158、160、164、169、176、179、185、247和249的至少一个轻链CDR2。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:151、153、156、159、161、162、165、167、170、174、177、180、182、184、186、248、250和252的至少一个轻链CDR3。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括根据图9的3个重链CDR和3个轻链CDR。在一些实施方案中，所述抗体包括IgG框架。在一些实施方案中，所述抗体包括IgG1框架、IgG2框架或IgG4框架。在一些实施方案中，所述抗体包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、20nM、25nM或30nM的k_D。在一些实施方案中，所述抗体包括人源化抗体。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括VH结构域，所述VH结构域具有与SEQ ID NO:192-216至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括VL结构域，所述VL结构域具有与SEQ ID NO:217-241至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括根据表5的VH和VL。在一些实施方案中，所述抗体是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8。

在一些实施方案中，本文公开了一种抗原结合多肽，其中所述多肽表现出与LRIG1蛋白的特异性结合，使得在结合时所述多肽将LRIG1-VISTA之间的相互作用(i)减少至少79％，其中所述抗体不是IMT300，或(ii)与IMT300相比减少程度更大。

在一些实施方案中，本文公开了一种复合物，所述复合物包括任何上述多肽，其中所述复合物包括与LRIG1蛋白结合的多肽。

在一些实施方案中，本文公开了一种破坏VISTA与LRIG1之间的相互作用(以例如调节VISTA生物学)的方法，所述方法包括使包括LRIG1表达细胞、VISTA表达细胞或其组合的多种细胞与任何上述抗原结合多肽接触。在一些实施方案中，LRIG1-VISTA相互作用减弱至小于21％、小于20％、小于19％、小于17％、小于10％、小于5％或小于1％。在一些实施方案中，相互作用发生在选自区域245-260的LRIG1的一个或多个残基处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:2的位置245-260。在一些实施方案中，相互作用发生在选自区域78-90或68-92的VISTA的一个或多个残基处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置78-90或68-92。在一些实施方案中，所述抗体与SEQ ID NO.69至75的任何肽中的至少一个氨基酸残基结合。在一些实施方案中，所述抗体包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、20nM、25nM或30nM的k_D。在一些实施方案中，所述抗体包括人源化抗体。在一些实施方案中，所述抗体包括全长抗体或其结合片段。在一些实施方案中，所述抗体包括双特异性抗体或其结合片段。在一些实施方案中，所述抗体包括单价Fab’、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。在一些实施方案中，所述抗体是包括来自SEQ ID NO:84-145、149-187或242-254的至少一个互补性决定区域(CDR)的人源化抗体。在一些实施方案中，所述人源化抗体包括重链可变区(VH)，所述重链可变区(VH)包括选自SEQ ID NO:84至145或242-245的一个、两个或三个CDR序列。在一些实施方案中，所述人源化抗体包括轻链可变区(VL)，所述轻链可变区(VL)包括选自SEQ IDNO:149至187或246-254的一个、两个或三个CDR序列。在一些实施方案中，所述抗体或多肽包括至少一个选自SEQ ID NO:84-145或242-245的重链CDR。在一些实施方案中，抗体或多肽包括选自SEQ ID NO:147-187或246-254的至少一个轻链CDR。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:84、87、90、93、96、99、102、105、108、111、114、117、120、123、126、129、134、138、143和242的至少一个重链CDR1。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:85、88、91、94、97、100、103、106、109、112、115、118、121、124、127、130、132、136、139、141、142、144和243的至少一个重链CDR2。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:86、89、92、95、98、101、104、107、110、113、116、119、122、125、128、131、133、135、137、140、145和244的至少一个重链CDR3。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:149、152、154、157、163、166、168、171、172、173、175、178、181、183、187、246、251和253的至少一个轻链CDR1。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:150、155、158、160、164、169、176、179、185、247和249的至少一个轻链CDR2。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:151、153、156、159、161、162、165、167、170、174、177、180、182、184、186、248、250和252的至少一个轻链CDR3。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括根据图9的3个重链CDR和3个轻链CDR。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括VH结构域，所述VH结构域具有与SEQ ID NO:192-216至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括VL结构域，所述VL结构域具有与SEQ ID NO:217-241至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列。在一些实施方案中，所述抗体或抗原结合多肽包括根据表5的VH和VL。在一些实施方案中，所述抗体是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8。在一些实施方案中，所述抗体包括IgG框架。在一些实施方案中，所述抗体包括IgG1框架、IgG2框架或IgG4框架。

在一些实施方案中，构建体可以用于治疗自体免疫性疾病。

本文提供的本发明的实施方案通过以下编号的可选方案来描述：

1.一种抗原结合多肽，其中所述多肽表现出与LRIG1蛋白(SEQ ID NO:2)的特异性结合，并且其中所述多肽与选自由以下组成的组的LRIG1的一个或多个区域上存在的表位结合：来自LRIG1蛋白的N末端到C末端的位置1至564或位置655至1093的氨基酸残基的任何氨基酸序列。

2.根据可选方案1所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于从LRIG1蛋白的N末端至C末端的位置674至714的氨基酸残基的氨基酸序列内的表位结合。

3.根据可选方案1或2所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于从LRIG1蛋白的N末端至C末端的位置704至744的氨基酸残基的氨基酸序列内的表位结合。

4.根据可选方案1-3中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与LRIG1在从N末端到C末端的位置1至564或位置655至1093之间的未确定表位结合。

5.根据可选方案1-4中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括全长抗体或其片段。

6.根据可选方案1-5中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括双特异性抗体或其结合片段。

7.根据可选方案1-6中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括单价Fab’、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。

8.根据可选方案1-7中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽包括选自SEQID NO:84-145、149-187或242-254的至少一个互补决定区。

9.根据可选方案1-8中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括IgG框架。

10.根据可选方案1-9中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括IgG1框架、IgG2框架或IgG4框架。

11.根据可选方案1-10中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、20nM、25nM或30nM的k_D。

12.根据可选方案1-11中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括人源化抗体。

13.根据可选方案1-12中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8。

14.一种抗原结合多肽，其中所述多肽破坏LRIG1-VISTA相互作用，并且其中所述多肽与SEQ ID NO:69至75的区域中的LRIG1的表位结合。

15.根据可选方案14所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于由肽65(SEQ IDNO:69)定义的LRIG1的区域内的表位结合。

16.根据可选方案14或15所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于由肽66(SEQ ID NO:70)定义的LRIG1的区域内的表位结合。

17.根据可选方案14-16中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于由肽67(SEQ ID NO:71)定义的LRIG1的区域内的表位结合。

18.根据可选方案14-17中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于由肽68(SEQ ID NO:72)定义的LRIG1的区域内的表位结合。

19.根据可选方案14-18中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于由肽69(SEQ ID NO:73)定义的LRIG1的区域内的表位结合。

20.根据可选方案14-19中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于由肽70(SEQ ID NO:74)定义的LRIG1的区域内的表位结合。

21.根据可选方案14-20中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于由肽71(SEQ ID NO:75)定义的LRIG1的区域内的表位结合。

22.根据可选方案14-21中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括全长抗体或其片段。

23.根据可选方案14-22中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括双特异性抗体或其结合片段。

24.根据可选方案14-23中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括单价Fab’、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。

25.根据可选方案14-24中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽包括选自SEQ ID NO:84-145、149-187或242-254的至少一个互补决定区。

26.根据可选方案14-25中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括IgG框架。

27.根据可选方案14-26中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括IgG1框架、IgG2框架或IgG4框架。

28.根据可选方案14-27中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、20nM、25nM或30nM的k_D。

29.根据可选方案14-28中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括人源化抗体。

30.根据可选方案14-29中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8。

31.一种抗原结合多肽，其中所述多肽表现出与LRIG1蛋白的特异性结合，其中所述多肽与LRIG1的结合将LRIG1-VISTA之间的相互作用减弱至不含所述抗原结合多肽的LRIG1-VISTA之间的相互作用的小于21％。

32.根据可选方案31所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与LRIG1的结合将LRIG1-VISTA之间的相互作用减弱至不含所述抗原结合多肽的LRIG1-VISTA之间的相互作用的小于20％、小于15％、小于10％、小于5％或小于1％。

33.根据可选方案31或32所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与SEQ ID NO:69至75的区域中的LRIG1的表位结合。

34.根据可选方案31-33中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括全长抗体或其片段。

35.根据可选方案31-34中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括双特异性抗体或其结合片段。

36.根据可选方案31-35中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括单价Fab’、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。

37.根据可选方案31-36中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽包括选自SEQ ID NO:84-145、149-187或242-254的至少一个互补决定区。

38.根据可选方案31-37中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括IgG框架。

39.根据可选方案31-38中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括IgG1框架、IgG2框架或IgG4框架。

40.根据可选方案31-39中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、20nM、25nM或30nM的k_D。

41.根据可选方案31-40中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括人源化抗体。

42.根据可选方案31-41中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8。

43.一种抗原结合多肽，其中所述多肽包括选自SEQ ID NO:84-145、149-187或242-254的至少一个互补决定区，并且其中所述多肽能够结合存在于LRIG1蛋白的一个或多个区域中的表位。

44.根据可选方案43所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括全长抗体或其片段。

45.根据可选方案43或44所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括双特异性抗体或其结合片段。

46.根据可选方案43-45中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括单价Fab’、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。

47.根据可选方案43-46中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽包括选自SEQ ID NO:84-145、149-187或242-254的一个以上的互补决定区。

48.根据可选方案43-47中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括IgG框架。

49.根据可选方案43-48中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括IgG1框架、IgG2框架或IgG4框架。

50.根据可选方案43-49中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、20nM、25nM或30nM的k_D。

51.根据可选方案43-50中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括人源化抗体。

52.根据可选方案43-51中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8。

53.一种抗原结合多肽，其中所述多肽表现出与LRIG1蛋白的特异性结合，使得在结合时所述多肽将LRIG1-VISTA之间的相互作用(i)减少至少79％，其中所述抗体不是IMT300，或(ii)与IMT300相比减少程度更大。

54.一种复合物，所述复合物包括可选方案1-53中任一项的抗原结合多肽，其中所述复合物包括与LRIG1蛋白结合的多肽。

55.一种阻断VISTA与LRIG1之间相互作用的方法，所述方法包括：

使包括LRIG1表达细胞、VISTA表达细胞或其组合的多种细胞与根据可选方案1-54中任一项所述的抗原结合多肽接触。

56.根据可选方案55所述的方法，其中所述LRIG1-VISTA相互作用减弱至小于21％、小于20％、小于19％、小于17％、小于10％、小于5％或小于1％。

57.根据可选方案55或56所述的方法，其中所述相互作用发生在选自区域245-260的LRIG1的一个或多个残基处，其中所述残基位置对应于SEQ ID NO:2的位置245-260。

58.根据可选方案55-57中任一项所述的方法，其中所述相互作用发生在选自区域78-90或68-92的VISTA的一个或多个残基处，其中所述残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置78-90或68-92。

59.根据可选方案55-58中任一项所述的方法，其中所述抗原结合多肽与SEQ IDNO.69至75的任何肽内的至少一个氨基酸残基结合。

60.根据可选方案55-59中任一项所述的方法，其中所述抗原结合多肽包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、20nM、25nM或30nM的k_D。

61.根据可选方案55-60中任一项所述的方法，其中所述抗原结合多肽包括人源化抗体。

62.根据可选方案55-61中任一项所述的方法，其中所述抗原结合多肽包括全长抗体或其结合片段。

63.根据可选方案55-62中任一项所述的方法，其中所述抗原结合多肽包括双特异性抗体或其结合片段。

64.根据可选方案55-63中任一项所述的方法，其中所述抗原结合多肽包括单价Fab’、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。

65.根据可选方案55-64中任一项所述的方法，其中所述抗原结合多肽是人源化抗体，所述人源化抗体包括来自SEQ ID NO:84-145、149-187或242-254的至少一个互补性决定区域(CDR)。

66.根据可选方案55-65中任一项所述的方法，其中所述人源化抗体包括重链可变区(VH)，所述重链可变区(VH)包括SEQ ID NO:84至145或242-245中的任意三个序列。

67.根据可选方案55-66中任一项所述的方法，其中所述人源化抗体包括轻链可变区(VL)，所述轻链可变区(VL)包括SEQ ID NO:149至187或246-254中的任意三个序列。

68.根据可选方案55-67中任一项所述的方法，其中所述抗原结合多肽是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8。

69.根据可选方案55-68中任一项所述的方法，其中所述抗原结合多肽包括IgG框架。

70.根据可选方案59-69中任一项所述的方法，其中所述抗原结合多肽包括IgG1框架、IgG2框架或IgG4框架。

71.一种调节受试者免疫应答的方法，所述方法包括：向受试者施用与LRIG1蛋白(SEQ ID NO:2)特异性结合的抗原结合多肽。

72.根据可选方案71所述的方法，其中抗原结合肽破坏LRIG1与VISTA之间的相互作用。

73.根据可选方案71或72所述的方法，其中调节所述免疫应答包括增强所述受试者中T细胞介导的免疫应答和/或B细胞介导的免疫应答的水平。

74.根据可选方案71-73中任一项所述的方法，其中调节所述免疫应答包括降低T细胞介导的免疫应答和/或B细胞介导的免疫应答的水平，或增加所示受试者中调节性T细胞的免疫抑制功能。

75.根据可选方案71-74中任一项所述的方法，其中所述受试者包括癌症，并且调节所述免疫应答改善、治疗或减轻所述癌症的症状。

76.根据可选方案71-75中任一项所述的方法，其中所述癌症是乳腺癌、结肠直肠癌、肾癌、肝癌、肺癌、脑癌、胰腺癌、膀胱癌或胃癌、血液恶性肿瘤或其任何组合。

77.根据可选方案71-76中任一项所述的方法，其中所述受试者包括免疫相关障碍，并且调节所述免疫应答改善、治疗或减轻所述免疫相关障碍的症状。

78.根据可选方案71-77中任一项所述的方法，其中所述免疫相关障碍是自体免疫性疾病、炎性疾病、伤口愈合、纤维化、肝纤维化、肾纤维化、心脏纤维化、肺纤维化、非酒精性脂肪性肝病、非酒精性脂肪性肝炎、脓毒症、特应性皮炎、银屑病、系统性红斑狼疮、炎性肠综合征、关节炎或其任何组合。

79.根据可选方案71-78中任一项所述的方法，所述方法进一步包括向所述受试者施用另外治疗剂。

80.根据可选方案71-79中任一项所述的方法，其中所述另外治疗剂包括免疫治疗剂、免疫检查点调节剂、化疗剂、靶向治疗剂、激素治疗剂或基于干细胞的治疗剂。

81.根据可选方案71-80中任一项所述的方法，其中所述抗原结合多肽经胃肠外施用。

82.可选方案71-81中任一项的方法，其中所述抗原结合多肽是根据可选方案1-53中任一项所述的抗原结合多肽。

83.根据可选方案71-82中任一项所述的方法，其中所述抗原结合多肽是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8。

84.根据可选方案71-83中任一项所述的方法，其中所述受试者是哺乳动物。

85.根据可选方案71-84中任一项所述的方法，其中所述受试者是人。

86.根据可选方案1-53中任一项所述的抗原结合多肽，其在治疗有需要的受试者的癌症中使用。

87.根据可选方案86所述使用的抗原结合多肽，其中所述癌症是乳腺癌、结肠直肠癌、肾癌、肝癌、肺癌、脑癌、胰腺癌、膀胱癌或胃癌或血液恶性肿瘤或其任何组合。

88.根据可选方案1-53中任一项所述的抗原结合多肽，用于治疗免疫相关障碍。

89.根据可选方案88所述使用的抗原结合多肽，其中所述免疫相关障碍是自体免疫性疾病、炎性疾病、伤口愈合、纤维化、肝纤维化、肾纤维化、心脏纤维化、肺纤维化、非酒精性脂肪性肝病、非酒精性脂肪性肝炎、脓毒症、特应性皮炎、银屑病或其任何组合。

90.根据可选方案86-89中任一项所述使用的抗原结合多肽，其中所述受试者是哺乳动物。

91.根据可选方案86-90中任一项所述使用的抗原结合多肽，其中所述受试者是人。

92.一种药物组合物，所述药物组合物包括根据可选方案1-53中任一项所述的抗原结合多肽和至少一种药学上可接受的载体、赋形剂、稀释剂或佐剂。

93.根据可选方案1-53或86-92中任一项所述的抗原结合多肽、根据可选方案54所述的复合物、根据可选方案55-85中任一项所述的方法或根据可选方案92所述的药物组合物，其中所述抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:84、87、90、93、96、99、102、105、108、111、114、117、120、123、126、129、134、138、143和242的至少一个重链CDR1。

94.根据可选方案93所述的抗原结合多肽、复合物、方法或药物组合物，其中所述抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:85、88、91、94、97、100、103、106、109、112、115、118、121、124、127、130、132、136、139、141、142、144和243的至少一个重链CDR2。

95.根据可选方案93或94所述的抗原结合多肽、复合物、方法或药物组合物，其中所述抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:86、89、92、95、98、101、104、107、110、113、116、119、122、125、128、131、133、135、137、140、145和244的至少一个重链CDR3。

96.根据可选方案93-95中任一项所述的抗原结合多肽、复合物、方法或药物组合物，其中所述抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:149、152、154、157、163、166、168、171、172、173、175、178、181、183、187、246、251和253的至少一个轻链CDR1。

97.根据可选方案93-96中任一项所述的抗原结合多肽、复合物、方法或药物组合物，其中所述抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:150、155、158、160、164、169、176、179、185、247和249的至少一个轻链CDR2。

98.根据可选方案93-97中任一项所述的抗原结合多肽、复合物、方法或药物组合物，其中所述抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:151、153、156、159、161、162、165、167、170、174、177、180、182、184、186、248、250和252的至少一个轻链CDR3。

99.根据可选方案93-98中任一项所述的抗原结合多肽、复合物、方法或药物组合物，其中所述抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:81-145和242-245的3个重链CDR和选自SEQID NO:146-187和246-254的3个轻链CDR。

100.根据可选方案93-99中任一项所述的抗原结合多肽、复合物、方法或药物组合物，其中所述抗原结合多肽包括根据图9的3个重链CDR和3个轻链CDR。

101.根据可选方案93-100中任一项所述的抗原结合多肽、复合物、方法或药物组合物，其中所述抗原结合多肽包括VH结构域，所述VH结构域具有与SEQ ID NO:192-216至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列。

102.根据可选方案93-101中任一项所述的抗原结合多肽、复合物、方法或药物组合物，其中所述抗原结合多肽包括VL结构域，所述VL结构域具有与SEQ ID NO:217-241至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列。

103.根据可选方案93-102中任一项所述的抗原结合多肽、复合物、方法或药物组合物，其中所述抗原结合多肽包括根据表5的VH和VL。

104.一种调节免疫系统活性的方法，所述方法包括：

附图说明

在所附权利要求中具体阐述了本公开的各个方面。通过参考以下详细描述和附图，将获得对本公开的特征和优点的更好理解，所述详细描述阐述了其中利用了本公开的原理的说明性实施方案。

图1描绘了在存在抗LRIG1抗体的情况下LRIG1蛋白与VISTA蛋白相互作用的阻断数据。

图2描绘了基于抗LRIG1蛋白结合的表位区域LRIG1蛋白和VISTA蛋白之间相互作用的阻断程度。

图3描绘了来自抗LRIG1蛋白的竞争性结合测定的结果。

图4描绘了抗LRIG1抗体的LRIG1-VISTA阻断数据和互补性决定区域(CDR)数据。

图5A-5C描绘了介导LRIG1与VISTA之间相互作用的LRIG1和VISTA区域的MALDI-MS鉴定。图5A和图5C示出了相互作用位点和位点内的残基。图5B示出了LRIG1晶体结构的描绘，其突出了介导相互作用的区域。

图6描绘了LRIG1和VISTA的核酸和蛋白质序列。

图7描绘了用于产生抗体的LRIG1的肽序列。

图8描绘了本文公开的抗LRIG1抗体的互补性决定区域(CDR)。

图9描绘了本文公开的抗LRIG1抗体的重CDR序列和轻CDR序列。

图10描绘了示例性重链可变(VH)结构域和轻链可变(VL)结构域。

图11描绘了另外的抗LRIG1抗体实施方案的VH和VL组合。

图12描绘了另外的示例性重链可变(VH)结构域。“x”表示未定义的残基。在一些实施方案中，抗体可以是在该位置具有任何氨基酸的抗体。在一些实施方案中，抗体可以是包括图中剩余的非x序列的全部或至少90％的抗体(例如，明确定义的残基的91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)

图13描绘了另外的示例性轻链可变(VL)结构域。“x”表示未定义的残基。在一些实施方案中，抗体可以是在该位置具有任何氨基酸的抗体。在一些实施方案中，抗体可以是包括图中剩余的非x序列的全部或至少90％的抗体(例如，明确定义的残基的91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)。

具体实施方案

本文提供了涉及抗LRIG1抗原结合多肽(例如抗体)及其在用于破坏LRIG1与相互作用蛋白(诸如VISTA)之间的相互作用的方法中的用途的实施方案。在一些实施方案中，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用发生在表达LRIG1的细胞与表达相互作用蛋白的细胞之间。在一些实施方案中，表达LRIG1的细胞和/或表达VISTA的细胞是免疫细胞。在一些实施方案中，表达LRIG1的细胞是非免疫细胞，并且表达相互作用蛋白的细胞是免疫细胞。在一些实施方案中，破坏LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用调节免疫细胞(例如，表达相互作用蛋白的细胞)的免疫功能。本文还公开了用于调节受试者中免疫应答的方法。在一些实施方案中，方法包括施用抗LRIG抗原结合多肽以破坏LRIG1与相互作用蛋白(诸如VISTA)之间的相互作用。在一些实施方案中，用抗LRIG抗原结合多肽调节受试者的免疫应答可以用于改善、治疗或减轻癌症或免疫相关障碍的症状。

作为富含巨噬细胞的反应性基质的一部分，肿瘤通常与免疫浸润相关联。肿瘤相关巨噬细胞(TAM)通过促进新生血管形成和基质降解，在促进肿瘤生长中发挥重要作用。当与肿瘤相关时，巨噬细胞向两种表型不同的巨噬细胞亚群(M1巨噬细胞或M2巨噬细胞)之一表现出功能极化。已知M1巨噬细胞产生促炎细胞因子并在细胞破坏中发挥积极作用，而M2巨噬细胞主要清除碎片并促进血管生成和伤口修复。因此，具有高数量的TAM的许多肿瘤具有增加的肿瘤生长速度、局部增殖和远处转移。M2巨噬细胞群在表型上与促进肿瘤生长和发展的TAM群相似。除表达VISTA外，在一些情况下，M2巨噬细胞还表达一种或多种细胞表面标志物，所述细胞表面标志物选自CD206、IL-4r、IL-1ra、诱饵IL-1rll、IL-10r、CD23、巨噬细胞清除受体A和B、Ym-1、Ym-2、低密度受体相关蛋白1(LRP1)、IL-6r、CXCR1/2、CD136、CD14、CD1a、CD1b、CD93、CD226、(FcyR)和PD-L1。

VISTA(T细胞激活的V结构域Ig抑制因子)在髓系细胞中高水平表达，髓系细胞包括未成熟髓系细胞、单核细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞、红细胞、树突状细胞、巨核细胞和血小板。肿瘤微环境中的VISTA水平升高。此外，如免疫调节性TAM和其他免疫细胞(其仅是表达这种蛋白的细胞的一个亚群)参与肿瘤微环境所表明，VISTA还参与其他免疫相关障碍，其他免疫相关障碍包括但不限于自体免疫性疾病、炎性疾病、银屑病、系统性红斑狼疮、炎性肠综合征、关节炎或伤口愈合。因此，在一些实施方案中，本文提供的组合物(抗体等)也可以用于对付这些障碍。

LRIG1(富含亮氨酸的重复序列和免疫球蛋白样结构域蛋白1)是一种已证明与EGFR家族、MET和RET的受体酪氨酸激酶相互作用的跨膜蛋白。在一些情况下，已发现LRIG1为肿瘤抑制因子和受体酪氨酸激酶的负调控因子。LRIG1功能异常与癌症发展的许多方面有关，这些方面包括恶性细胞的增殖、上皮-间充质转化、侵袭和转移扩散。

在一些实施方案中，本文公开了抗LRIG1抗体，其例如干扰VISTA与LRIG1之间的相互作用并调节免疫应答。在一些情况下，这些抗LRIG1抗体用于治疗受益于受试者中免疫应答的调节(即激活或抑制)的疾病(例如癌症或免疫相关疾病，诸如自体免疫性疾病、炎性疾病或伤口愈合)。在一些实施方案中，在PCT公开WO 2019/165233中描述了其他抗LRIG1抗体及使用方法，该文献的全部内容在此通过引用并入本文。

在一些实施方案中，本文公开了一种抗原结合多肽。在一些实施方案中，抗原结合多肽是抗体。在一些实施方案中，多肽或抗体表现出与LRIG1蛋白(SEQ ID NO:2)的特异性结合。在一些实施方案中，抗体或多肽结合选自由下述组成的组的LRIG1的一个或多个区域上存在的表位：从LRIG1蛋白的N末端至C末端的位置1至564或位置655至1093的氨基酸残基的任何氨基酸序列。在一些实施方案中，抗体或多肽与存在于从LRIG1蛋白的N末端到C末端的位置674-714的氨基酸残基的氨基酸序列内的表位结合。在一些实施方案中，抗体或多肽与存在于从LRIG1蛋白的N末端到C末端的位置704-744的氨基酸残基的氨基酸序列内的表位结合。在一些实施方案中，抗体或多肽与LRIG1在从N末端到C末端的位置1-564或位置655-1093之间的未确定表位结合。在一些实施方案中，抗体或多肽包括全长抗体或其片段。在一些实施方案中，抗体或多肽包括双特异性抗体或其结合片段。在一些实施方案中，抗体或多肽包括单价Fab′、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。在一些实施方案中，抗体或多肽包括选自SEQID NO:84-145、149-187或242-254的至少一个互补决定区。在一些实施方案中，抗体或多肽包括选自SEQ ID NO:84-145或242-245的至少一个重链CDR。在一些实施方案中，抗体或多肽包括选自SEQ ID NO:147-187或246-254的至少一个轻链CDR。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:84、87、90、93、96、99、102、105、108、111、114、117、120、123、126、129、134、138、143和242的至少一个重链CDR1。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:85、88、91、94、97、100、103、106、109、112、115、118、121、124、127、130、132、136、139、141、142、144和243的至少一个重链CDR2。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:86、89、92、95、98、101、104、107、110、113、116、119、122、125、128、131、133、135、137、140、145和244的至少一个重链CDR3。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:149、152、154、157、163、166、168、171、172、173、175、178、181、183、187、246、251和253的至少一个轻链CDR1。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:150、155、158、160、164、169、176、179、185、247和249的至少一个轻链CDR2。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:151、153、156、159、161、162、165、167、170、174、177、180、182、184、186、248、250和252的至少一个轻链CDR3。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括根据图9的3个重链CDR和3个轻链CDR。在一些实施方案中，抗体或多肽包括IgA框架、IgD框架、IgE框架、IgG框架或IgM框架。在一些实施方案中，抗体或多肽包括IgG框架。在一些实施方案中，抗体或多肽包括IgG1框架、IgG2框架或IgG4框架。在一些实施方案中，抗体或多肽包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、20nM、25nM或30nM的k_D，或上述k_D中任两个所定义范围内的对LRIG1的任何k_D。在一些实施方案中，抗体或多肽包括人源化抗体。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括VH结构域，所述VH结构域具有与SEQ ID NO:192-216至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括VL结构域，所述VL结构域具有与SEQ ID NO:217-241至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列。在一些实施方案中，抗原结合多肽包括根据表5的VH和VL。在一些实施方案中，抗体或多肽是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3e 6.2h22.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8，或其任何组合。在一些实施方案中，抗体或多肽不是IMT300、mab4、mab5或mab6。在一些实施方案中，抗体或多肽不包括具有SEQ ID NO:188或SEQ ID NO:189的序列的VH。在一些实施方案中，抗体或多肽不包括具有SEQ ID NO:190或SEQ ID NO:191的序列的VL。

在一些实施方案中，本文公开了一种抗原结合多肽，其中多肽破坏LRIG1-VISTA相互作用。在一些实施方案中，抗原结合多肽是抗体。在一些实施方案中，抗体或多肽是本文公开的抗体或多肽中的任何一者。在一些实施方案中，抗体或多肽与SEQ ID NO:69至75的区域中的LRIG1的表位结合。在一些实施方案中，抗体或多肽与存在于由肽65(SEQ IDNO.69)定义的LRIG1区域内的表位结合。在一些实施方案中，抗体或多肽与存在于由肽66(SEQ ID NO.70)定义的LRIG1区域内的表位结合。在一些实施方案中，抗体或多肽与由肽67(SEQ ID NO.71)定义的LRIG1区域内存在的表位结合。在一些实施方案中，抗体或多肽与存在于由肽68(SEQ ID NO.72)定义的LRIG1区域内的表位结合。在一些实施方案中，抗体或多肽与存在于由肽69(SEQ ID NO.73)定义的LRIG1区域内的表位结合。在一些实施方案中，抗体或多肽与存在于由肽70(SEQ ID NO.74)定义的LRIG1区域内的表位结合。在一些实施方案中，抗体或多肽与存在于肽71(SEQ ID NO.75)定义的LRIG1区域内的表位结合。在一些实施方案中，抗体或多肽包括全长抗体或其片段。在一些实施方案中，抗体或多肽包括双特异性抗体或其结合片段。在一些实施方案中，抗体或多肽包括单价Fab′、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。在一些实施方案中，抗体或多肽包括选自SEQ ID NO:84-145、149-187或242-254的至少一个互补决定区。在一些实施方案中，抗体或多肽包括选自SEQ ID NO:84-145或242-245的至少一个重链CDR。在一些实施方案中，抗体或多肽包括选自SEQ ID NO:147-187或246-254的至少一个轻链CDR。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自84、87、90、93、96、99、102、105、108、111、114、117、120、123、126、129、134、138、143和242的至少一个重链CDR1。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:85、88、91、94、97、100、103、106、109、112、115、118、121、124、127、130、132、136、139、141、142、144和243的至少一个重链CDR2。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:86、89、92、95、98、101、104、107、110、113、116、119、122、125、128、131、133、135、137、140、145和244的至少一个重链CDR3。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:149、152、154、157、163、166、168、171、172、173、175、178、181、183、187、246、251和253的至少一个轻链CDR1。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:150、155、158、160、164、169、176、179、185、247和249的至少一个轻链CDR2。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:151、153、156、159、161、162、165、167、170、174、177、180、182、184、186、248、250和252的至少一个轻链CDR3。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括根据图9的3个重链CDR和3个轻链CDR。在一些实施方案中，抗体或多肽包括IgA框架、IgD框架、IgE框架、IgG框架或IgM框架。在一些实施方案中，抗体或多肽包括IgG框架。在一些实施方案中，抗体或多肽包括IgG1框架、IgG2框架或IgG4框架。在一些实施方案中，抗体或多肽包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、20nM、25nM或30nM的k_D，或上述k_D中任两个所定义范围内的对LRIG1的任何k_D。在一些实施方案中，抗体或多肽包括人源化抗体。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括VH结构域，所述VH结构域具有与SEQ ID NO:192-216至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括VL结构域，所述VL结构域具有与SEQ ID NO:217-241至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括根据表5的VH和VL。在一些实施方案中，抗体或多肽是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8，或其任何组合。在一些实施方案中，抗体或多肽不是IMT300、mab4、mab5或mab6。在一些实施方案中，抗体或多肽不包括具有SEQ ID NO:188或SEQ ID NO:189的序列的VH。在一些实施方案中，抗体或多肽不包括具有SEQ ID NO:190或SEQ ID NO:191的序列的VL。

在一些实施方案中，本文公开了一种抗原结合多肽，其中多肽表现出与LRIG1蛋白的特异性结合。在一些实施方案中，抗原结合多肽是抗体。在一些实施方案中，抗体或多肽是本文公开的抗体或多肽中的任何一者。在一些实施方案中，抗体或多肽与LRIG1的结合将LRIG1-VISTA之间的相互作用减弱至不含抗体或抗原结合多肽的LRIG1-VISTA之间的相互作用的小于21％。在一些实施方案中，抗体或多肽与LRIG1的结合将LRIG1-VISTA之间的相互作用减弱至不含抗体或抗原结合多肽的LRIG1-VISTA之间的相互作用的小于20％、小于15％、小于10％、小于5％或小于1％，或在由上述百分比中的任两个定义的范围内的任何减少。在一些实施方案中，抗体或多肽与SEQ ID NO:69至75的区域中的LRIG1的表位结合。在一些实施方案中，抗体或多肽包括全长抗体或其片段。在一些实施方案中，抗体或多肽包括双特异性抗体或其结合片段。在一些实施方案中，抗体或多肽包括单价Fab′、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。在一些实施方案中，抗体或多肽包括选自SEQ ID NO:84-145、149-187或242-254的至少一个互补决定区。在一些实施方案中，抗体或多肽包括选自SEQ ID NO:84-145或242-245的至少一个重链CDR。在一些实施方案中，抗体或多肽包括选自SEQ ID NO:147-187或246-254的至少一个轻链CDR。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自84、87、90、93、96、99、102、105、108、111、114、117、120、123、126、129、134、138、143和242的至少一个重链CDR1。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:85、88、91、94、97、100、103、106、109、112、115、118、121、124、127、130、132、136、139、141、142、144和243的至少一个重链CDR2。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:86、89、92、95、98、101、104、107、110、113、116、119、122、125、128、131、133、135、137、140、145和244的至少一个重链CDR3。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:149、152、154、157、163、166、168、171、172、173、175、178、181、183、187、246、251和253的至少一个轻链CDR1。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:150、155、158、160、164、169、176、179、185、247和249的至少一个轻链CDR2。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:151、153、156、159、161、162、165、167、170、174、177、180、182、184、186、248、250和252的至少一个轻链CDR3。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括根据图9的3个重链CDR和3个轻链CDR。在一些实施方案中，抗体或多肽包括IgA框架、IgD框架、IgE框架、IgG框架或IgM框架。在一些实施方案中，抗体或多肽包括IgG框架。在一些实施方案中，抗体或多肽包括IgG1框架、IgG2框架或IgG4框架。在一些实施方案中，抗体或多肽包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、20nM、25nM或30nM的k_D，或上述k_D中任两个所定义范围内的对LRIG1的任何k_D。在一些实施方案中，抗体或多肽包括人源化抗体。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括VH结构域，所述VH结构域具有与SEQ IDNO:192-216至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括VL结构域，所述VL结构域具有与SEQ ID NO:217-241至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括根据表5的VH和VL。在一些实施方案中，抗体或多肽是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8，或其任何组合。在一些实施方案中，抗体或多肽不是IMT300、mab4、mab5或mab6。在一些实施方案中，抗体或多肽不包括具有SEQ ID NO:188或SEQ ID NO:189的序列的VH。在一些实施方案中，抗体或多肽不包括具有SEQ ID NO:190或SEQ ID NO:191的序列的VL。

在一些实施方案中，本文公开了一种抗原结合多肽，其中多肽包括选自SEQ IDNO:84-145、149-187或242-254的至少一个互补决定区，并且其中多肽能够与存在于LRIG1蛋白的一个或多个区域中的表位结合。在一些实施方案中，抗原结合多肽是抗体。在一些实施方案中，抗体或多肽是本文公开的抗体或多肽中的任何一者。在一些实施方案中，抗体或多肽包括全长抗体或其片段。在一些实施方案中，抗体或多肽包括双特异性抗体或其结合片段。在一些实施方案中，抗体或多肽包括单价Fab′、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。在一些实施方案中，抗体或多肽包括选自SEQ ID NO:84-145、149-187或242-254的一个以上的互补决定区。在一些实施方案中，抗体或多肽包括选自SEQ ID NO:84-145或242-245的至少一个重链CDR。在一些实施方案中，抗体或多肽包括选自SEQ ID NO:147-187或246-254的至少一个轻链CDR。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自84、87、90、93、96、99、102、105、108、111、114、117、120、123、126、129、134、138、143和242的至少一个重链CDR1。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:85、88、91、94、97、100、103、106、109、112、115、118、121、124、127、130、132、136、139、141、142、144和243的至少一个重链CDR2。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:86、89、92、95、98、101、104、107、110、113、116、119、122、125、128、131、133、135、137、140、145和244的至少一个重链CDR3。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:149、152、154、157、163、166、168、171、172、173、175、178、181、183、187、246、251和253的至少一个轻链CDR1。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:150、155、158、160、164、169、176、179、185、247和249的至少一个轻链CDR2。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:151、153、156、159、161、162、165、167、170、174、177、180、182、184、186、248、250和252的至少一个轻链CDR3。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括根据图9的3个重链CDR和3个轻链CDR。在一些实施方案中，抗体或多肽包括IgA框架、IgD框架、IgE框架、IgG框架或IgM框架。在一些实施方案中，抗体或多肽包括IgG框架。在一些实施方案中，抗体或多肽包括IgG1框架、IgG2框架或IgG4框架。在一些实施方案中，抗体或多肽包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、20nM、25nM或30nM的k_D，或上述k_D中任两个所定义范围内的对LRIG1的任何k_D。在一些实施方案中，抗体或多肽包括人源化抗体。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括VH结构域，所述VH结构域具有与SEQ ID NO:192-216至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括VL结构域，所述VL结构域具有与SEQ ID NO:217-241至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括根据表5的VH和VL。在一些实施方案中，抗体或多肽是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8，或其任何组合。在一些实施方案中，抗体或多肽不是IMT300、mab4、mab5或mab6。在一些实施方案中，抗体或多肽不包括具有SEQ ID NO:188或SEQ ID NO:189的序列的VH。在一些实施方案中，抗体或多肽不包括具有SEQ ID NO:190或SEQ ID NO:191的序列的VL。

在一些实施方案中，本文公开了一种抗体或抗原结合多肽，其中抗体或多肽表现出与LRIG1蛋白的特异性结合，使得在结合时所述抗体或多肽将LRIG1-VISTA之间的相互作用(i)减少至少60％、65％、70％、75％、79％、80％、85％、90％、95％或99％，或在由上述百分比中的任两个定义的范围内的任何减少，其中所述抗体或多肽不是IMT300、mab4、mab5或mab5，和/或不包括具有SEQ ID NO:188或SEQ ID NO:189的序列的VH。在一些实施方案中，抗体或多肽不包括具有SEQ ID NO:190或SEQ ID NO:191的序列的VL，或(ii)与IMT300、mab4、mab5或mab5相比具有更大程度，或者具备具有SEQ ID NO:188或SEQ ID NO:189的序列的VH和/或具有SEQ ID NO:190或SEQ ID NO:191的序列的VL的抗体或多肽。在其他实施方案中，本文公开了一种抗体或抗原结合多肽，其中抗体或多肽表现出与LRIG1蛋白的特异性结合，使得在结合时所述抗体或多肽将LRIG1-VISTA之间的相互作用(i)减少至少60％、65％、70％、75％、79％、80％、85％、90％、95％或99％，或在由上述百分比中的任两个定义的范围内的任何减少，其中抗体或多肽不是IMT300，或(ii)与IMT300相比减少程度更大。

在一些实施方案中，本文公开了一种复合物，该复合物包括任何上述抗体或多肽或本文公开的任何抗体或多肽，其中该复合物包括与LRIG1蛋白结合的抗体或多肽。

在一些实施方案中，本文公开了一种破坏LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用的方法。在一些实施方案中，该方法包括使包括表达LRIG1的细胞、表达相互作用蛋白的细胞或其组合的多种细胞与任何上述抗体或抗原结合多肽、或本文公开的抗体或抗原结合多肽中的任何一者接触。在一些实施方案中，表达LRIG1的细胞和/或表达相互作用蛋白的细胞是非免疫细胞。在一些实施方案中，表达LRIG1的细胞和/或表达相互作用蛋白的细胞是免疫细胞。在一些实施方案中，破坏LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用调节免疫细胞(例如，表达相互作用蛋白的细胞)的免疫功能。在一些实施方案中，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用减弱至小于30％、小于21％、小于20％、小于19％、小于17％、小于10％、小于5％或小于1％，或在由上述百分比中的任何两者定义的范围内的任何减少。在一些实施方案中，相互作用发生在选自区域245-260的LRIG1的一个或多个残基处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:2的位置245-260。在一些实施方案中，相互作用蛋白是VISTA。在一些实施方案中，相互作用发生在选自区域78-90或68-92的VISTA的一个或多个残基处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置78-90或68-92。在一些实施方案中，抗体或多肽与来自SEQ IDNO.69至75的任何肽中的至少一个氨基酸残基结合。在一些实施方案中，抗体或多肽包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、20nM、25nM或30nM的k_D，或上述k_D中任两个所定义范围内的对LRIG1的任何k_D。在一些实施方案中，抗体或多肽包括人源化抗体。在一些实施方案中，抗体或多肽包括全长抗体或其结合片段。在一些实施方案中，抗体或多肽包括双特异性抗体或其结合片段。在一些实施方案中，抗体或多肽包括单价Fab′、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。在一些实施方案中，抗体或多肽是包括来自SEQ ID NO:84-145、149-187或242-254的至少一个互补性决定区域(CDR)的人源化抗体。在一些实施方案中，人源化抗体包括重链可变区(VH)，所述重链可变区(VH)包括选自SEQ ID NO:84至145或242-245的一个、两个或三个CDR序列。在一些实施方案中，人源化抗体包括轻链可变区(VL)，所述轻链可变区(VL)包括选自SEQ ID NO:149至187或246-254的一个、两个或三个CDR序列。在一些实施方案中，抗体或多肽包括选自SEQ ID NO:84-145或242-245的至少一个重链CDR。在一些实施方案中，抗体或多肽包括选自SEQ ID NO:147-187或246-254的至少一个轻链CDR。在一些实施方案中，抗体或多肽包括选自SEQ ID NO:84-145或242-245的至少一个重链CDR。在一些实施方案中，抗体或多肽包括选自SEQ ID NO:147-187或246-254的至少一个轻链CDR。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:84、87、90、93、96、99、102、105、108、111、114、117、120、123、126、129、134、138、143和242的至少一个重链CDR1。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:85、88、91、94、97、100、103、106、109、112、115、118、121、124、127、130、132、136、139、141、142、144和243的至少一个重链CDR2。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:86、89、92、95、98、101、104、107、110、113、116、119、122、125、128、131、133、135、137、140、145和244的至少一个重链CDR3。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:149、152、154、157、163、166、168、171、172、173、175、178、181、183、187、246、251和253的至少一个轻链CDR1。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:150、155、158、160、164、169、176、179、185、247和249的至少一个轻链CDR2。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ IDNO:151、153、156、159、161、162、165、167、170、174、177、180、182、184、186、248、250和252的至少一个轻链CDR3。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括根据图9的3个重链CDR和3个轻链CDR。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括VH结构域，所述VH结构域具有与SEQ ID NO:192-216至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括VL结构域，所述VL结构域具有与SEQ IDNO:217-241至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括根据表5的VH和VL。在一些实施方案中，抗体是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8，或其任何组合。在一些实施方案中，抗体或多肽不是IMT300、mab4、mab5或mab6。在一些实施方案中，抗体或多肽不包括具有SEQ ID NO:188或SEQ ID NO:189的序列的VH。在一些实施方案中，抗体或多肽不包括具有SEQ ID NO:190或SEQ ID NO:191的序列的VL。在一些实施方案中，抗体或多肽包括IgA框架、IgD框架、IgE框架、IgG框架或IgM框架。在一些实施方案中，抗体或多肽包括IgG框架。在一些实施方案中，抗体或多肽包括IgG1框架、IgG2框架或IgG4框架。

在一些实施方案中，本文公开了一种阻断VISTA与LRIG1之间相互作用的方法。在一些实施方案中，该方法包括使包括LRIG1表达细胞、VISTA表达细胞或其组合的多种细胞与任何上述抗体或抗原结合多肽或本文公开的抗体或抗原结合多肽中的任何一者接触。在一些实施方案中，LRIG1表达细胞和/或VISTA表达细胞是非免疫细胞。在一些实施方案中，表达LRIG1的细胞和/或表达VISTA的细胞是免疫细胞。在一些实施方案中，破坏VISTA与LRIG1之间的相互作用调节免疫细胞(例如VISTA表达细胞)的免疫功能。在一些实施方案中，LRIG1-VISTA相互作用减弱至小于30％、小于21％、小于20％、小于19％、小于17％、小于10％、小于5％或小于1％，或在由上述百分比中的任何两者定义的范围内的任何减少。在一些实施方案中，相互作用发生在选自区域245-260的LRIG1的一个或多个残基除，其中残基位置对应于SEQ ID NO:2的位置245-260。在一些实施方案中，相互作用发生在选自区域78-90或68-92的VISTA的一个或多个残基处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置78-90或68-92。在一些实施方案中，抗体或多肽与SEQ ID NO.69至75的任何肽中的至少一个氨基酸残基结合。在一些实施方案中，抗体或多肽包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、20nM、25nM或30nM的k_D，或上述k_D中的任两个所定义范围内的对LRIG1的任何k_D。在一些实施方案中，抗体或多肽包括人源化抗体。在一些实施方案中，抗体或多肽包括全长抗体或其结合片段。在一些实施方案中，抗体或多肽包括双特异性抗体或其结合片段。在一些实施方案中，抗体或多肽包括单价Fab′、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。在一些实施方案中，抗体或多肽是包括来自SEQ ID NO:84-145、149-187或242-254的至少一个互补性决定区域(CDR)的人源化抗体。在一些实施方案中，人源化抗体包括重链可变区(VH)，所述重链可变区(VH)包括选自SEQ ID NO:84至145或242-245的一个、两个或三个CDR序列。在一些实施方案中，人源化抗体包括轻链可变区(VL)，所述轻链可变区(VL)包括选自SEQ ID NO:149至187或246-254的一个、两个或三个CDR序列。在一些实施方案中，抗体或多肽包括选自SEQ ID NO:84-145或242-245的至少一个重链CDR。在一些实施方案中，抗体或多肽包括选自SEQ ID NO:147-187或246-254的至少一个轻链CDR。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自84、87、90、93、96、99、102、105、108、111、114、117、120、123、126、129、134、138、143和242的至少一个重链CDR1。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:85、88、91、94、97、100、103、106、109、112、115、118、121、124、127、130、132、136、139、141、142、144和243的至少一个重链CDR2。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:86、89、92、95、98、101、104、107、110、113、116、119、122、125、128、131、133、135、137、140、145和244的至少一个重链CDR3。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ IDNO:149、152、154、157、163、166、168、171、172、173、175、178、181、183、187、246、251和253的至少一个轻链CDR1。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:150、155、158、160、164、169、176、179、185、247和249的至少一个轻链CDR2。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:151、153、156、159、161、162、165、167、170、174、177、180、182、184、186、248、250和252的至少一个轻链CDR3。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括根据图9的3个重链CDR和3个轻链CDR。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括VH结构域，所述VH结构域具有与SEQ ID NO:192-216至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括VL结构域，所述VL结构域具有与SEQ ID NO:217-241至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括根据表5的VH和VL。在一些实施方案中，抗体或多肽是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8，或其任何组合。在一些实施方案中，抗体或多肽不是IMT300、mab4、mab5或mab6。在一些实施方案中，抗体或多肽不包括具有SEQ ID NO:188或SEQ ID NO:189的序列的VH。在一些实施方案中，抗体或多肽不包括具有SEQ ID NO:190或SEQ ID NO:191的序列的VL。在一些实施方案中，抗体或多肽包括IgA框架、IgD框架、IgE框架、IgG框架或IgM框架。在一些实施方案中，抗体或多肽包括IgG框架。在一些实施方案中，抗体或多肽包括IgG1框架、IgG2框架或IgG4框架。

在一些实施方案中，本文还公开了调节免疫应答的方法。在一些实施方案中，在受试者中进行调节。在一些实施方案中，受试者是哺乳动物。在一些实施方案中，受试者是人。所述方法包括向受试者施用特异性结合LRIG1蛋白(其具有SEQ ID NO:2的序列)的抗体或抗原结合多肽。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽是本文公开的抗体或抗原结合多肽中的任何一者。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽破坏LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用。在一些实施方案中，根据本文公开的任何一种破坏方法破坏LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用。在一些实施方案中，相互作用蛋白是VISTA。在一些实施方案中，调节免疫应答包括增强受试者中T细胞介导的免疫应答和/或B细胞介导的免疫应答的水平。在一些实施方案中，调节免疫应答包括降低受试者中T细胞介导的免疫应答和/或B细胞介导的免疫应答的水平，或增加受试者中调节性T细胞的免疫抑制功能，或两者兼而有之。在一些实施方案中，受试者包括癌症。在一些实施方案中，调节免疫应答改善、治疗或减少癌症的症状。在一些实施方案中，癌症是本文公开的任何一种癌症。在一些实施方案中，癌症是乳腺癌、结肠直肠癌、肾癌、肝癌、肺癌、脑癌、胰腺癌、膀胱癌或胃癌，或血液恶性肿瘤，或其任何组合。在一些实施方案中，受试者包括免疫相关障碍。在一些实施方案中，调节免疫应答改善、治疗或减少免疫相关障碍或病症的症状。在一些实施方案中，免疫相关障碍或病症包括自体免疫性疾病、炎性疾病或伤口愈合。在一些实施方案中，免疫相关障碍是纤维化、肝纤维化、肾纤维化、心脏纤维化、肺纤维化、非酒精性脂肪性肝病、非酒精性脂肪性肝炎、脓毒症、特应性皮炎、银屑病或其任何组合。在一些实施方案中，该方法还包括向受试者施用另外治疗剂。在一些实施方案中，另外治疗剂包括免疫治疗剂、免疫检查点调节剂、化疗剂、靶向治疗剂、激素治疗剂或基于干细胞的治疗剂。在一些实施方案中，另外治疗剂是本文公开的或本领域已知的治疗剂中的任何一者。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽是肠胃外施用的。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8，或其任何组合。在一些实施方案中，抗体或多肽不是IMT300、mab4、mab5或mab6。在一些实施方案中，抗体或多肽不包括具有SEQ ID NO:188或SEQ ID NO:189的序列的VH。在一些实施方案中，抗体或多肽不包括具有SEQ ID NO:190或SEQ ID NO:191的序列的VL。

在一些实施方案中，本文还公开了用于治疗有需要的受试者的癌症的抗体或抗原结合多肽。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽是本文公开的任何抗体或抗原结合多肽。在一些实施方案中，癌症是乳腺癌、结肠直肠癌、肾癌、肝癌、肺癌、脑癌、胰腺癌、膀胱癌或胃癌，或血液恶性肿瘤，或其任何组合。

在一些实施方案中，本文还公开了用于治疗有需要的受试者的免疫相关障碍的抗体或抗原结合多肽。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽是本文公开的任何抗体或抗原结合多肽。在一些实施方案中，免疫相关障碍是纤维化、肝纤维化、肾纤维化、心脏纤维化、肺纤维化、非酒精性脂肪性肝病、非酒精性脂肪性肝炎、脓毒症、特应性皮炎、银屑病或其任何组合。在一些实施方案中，受试者是哺乳动物。在一些实施方案中，受试者是人。

在一些实施方案中，本文还公开了药物组合物。在一些实施方案中，药物组合物包括本文公开的抗体或抗原结合多肽中的任何一者和至少一种药学上可接受的载体、赋形剂、稀释剂或佐剂。在一些实施方案中，所述至少一种药学上可接受的载体、赋形剂、稀释剂或佐剂是本文公开的或本领域已知的药学上可接受的载体、赋形剂、稀释剂或佐剂中的任何一者。

定义

除非另有定义，本文使用的所有技术和科学术语具有与所要求保护的主题所属领域的技术人员通常理解的相同的含义。应当理解，前面的一般描述和下面的详细描述仅仅是示例性和解释性的，并不限制任何要求保护的主题。

在本申请中，除非另有具体地叙述，否则单数的使用包括复数。必须注意的是，如说明书和所附权利要求书中使用的，单数形式“一个/一种(a)”、“一个/一种(an)”和“所述”包括复数对象，除非上下文另外清楚地指出。在本申请中，除非另有说明，否则“或”的使用意味着“和/或”。此外，术语“包括(including)”以及其他形式诸如“包括(include)”、“包括(includes)”和“包括(included)”的使用不是限制性的。

如本文使用的，范围和量可以表示为“约”特定值或范围。约还包括精确的量。因此“约5μL”意味着“约5μL”并且也意味着“5μL”。通常，术语“约”包括预期在实验误差内(例如，在15％、10％或5％内)的量。

本文使用的章节标题仅用于组织目的，而不应被解释为限制描述的主题。

在整个本说明书中，除非上下文另有要求，否则词语“包括”、“包含”和“含有”将被理解为暗示包括所陈述的步骤或元素或步骤或元素的组，但不排除任何其他步骤或元素或步骤或元素的组。“由……组成”意味着包括并限于跟随短语“由……组成”的任何内容。因此，短语“由……组成”指示列出的元素是必需的或强制性的，并且可不存在其他元素。“基本上由……组成”意味着包括伴随短语列出的任何元素，并且限于不干扰或有助于列出的元素的公开中指定的活性或动作的其他元素。因此，短语“基本上由……组成”指示列出的元素是必需的或强制性的，但其他要素是任选的，并且取决于它们是否实质性影响列出的元素的活性或动作可能存在或不存在。

如本文使用的，术语“个体”、“受试者”和“患者”意味着任何哺乳动物。在一些实施方案中，哺乳动物是人。在一些实施方案中，哺乳动物是非人。没有术语要求或限于特征在于医护人员(例如，医生、注册护士、护士从业者、医生助理、护理员或临终关怀的工作者)的监督(例如，持续监督或间歇监督)的情况。

本文互换使用的术语“多肽”、“肽”和“蛋白质”指的是任何长度的氨基酸的聚合物。聚合物可为直链的、环状的或支链的，其可包括修饰的氨基酸并且其可被非氨基酸中断。术语也涵盖已经被修饰的氨基酸聚合物，例如经硫酸盐化、糖基化、脂质化、乙酰化、磷酸化、碘化、甲基化、氧化、蛋白水解的加工、磷酸化、异戊二烯化、外消旋、亚硒化、转移-RNA介导的氨基酸添加至蛋白质，诸如精氨化、泛素化或任何其他操作，诸如与标签组分缀合。

如本文使用的，术语“氨基酸”指的是天然氨基酸和/或非天然氨基酸或合成氨基酸，其包括甘氨酸和D光学异构体或L光学异构体两者以及氨基酸类似物和肽模拟物。

“源自”指定的蛋白质的多肽或氨基酸序列指的是多肽的起源。优选地，多肽具有与序列中编码的多肽或其部分基本上相同的氨基酸序列，其中该部分由至少10-20个氨基酸或至少20-30个氨基酸或30-50个氨基酸组成或其为通过序列编码的多肽在免疫学上可鉴定的。该术语也包括由指定的核酸序列表达的多肽。

如本文使用的，术语“抗体”表示本领域技术人员赋予它的含义，并且旨在包括具有适合并且识别表位的特定形状的任何含多肽链的分子结构，其中一种或多种非共价结合相互作用稳定分子结构与表位之间的复合。本发明中利用的抗体可以是多克隆抗体，尽管单克隆抗体是优选的，因为单克隆抗体可以通过细胞培养或重组来复制并且可以被修饰以降低它们的抗原性。

除了完整的免疫球蛋白(或其重组对应物)，包括表位结合位点的免疫球蛋白片段或“结合片段”(例如，Fab’、F(ab’)2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单域抗体(sdAb)或其他片段)可用作本发明中的抗体部分。这样的抗体片段可通过蓖麻蛋白、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶或其他蛋白酶裂解从整个免疫球蛋白产生。可以利用重组免疫球蛋白技术设计最小免疫球蛋白。例如，用于本发明的“Fv”免疫球蛋白可以通过经肽连接体(例如，聚甘氨酸或不形成α螺旋或β片状基序的另一序列)将可变轻链区连接至可变重链区来产生。纳米抗体或单域抗体还可以源自可替选的生物体，诸如单峰驼、骆驼、美洲驼、羊驼或鲨鱼。在一些实施方案中，抗体可以是缀合物，例如聚乙二醇化抗体、药物、放射性同位素或毒素缀合物。针对特定表位或表位组合的单克隆抗体将允许靶向和/或耗尽表达标志物的细胞群体。可以利用各种技术使用单克隆抗体来筛选表达标志物的细胞群体，并且各种技术包括使用抗体包被的磁珠进行磁分离、使用附着在固体基质(即，板)上的抗体“淘选”和流式细胞术(例如第5,985,660号美国专利，其全部内容特此通过引用明确并入)。

适用于非人(例如啮齿动物或灵长类动物)抗体的术语“人源化”是杂合免疫球蛋白、免疫球蛋白链或其片段，其含有源自非人免疫球蛋白的最少序列。

如本文使用的，术语“治疗”(并且如本领域所熟知的)意味着用于在受试者的病症中获得有益或期望的结果(包括临床结果)的方法。有益的或期望的临床结果可包括但不限于减轻或改善一种或多种症状或病症、减轻疾病的程度、稳定(即，不恶化)疾病状态、预防疾病的传递或传播、延迟或减慢疾病进展、改善或减轻疾病状态、减轻疾病复发和缓解，无论是部分的还是全部的，无论是可检测的还是不可检测的。如本文使用的“治疗”还包括预防性治疗。治疗方法包括向受试者施用治疗有效量的活性剂。施用步骤可以由单次施用组成或可以包括一系列施用。将组合物以足以治疗患者的量和持续时间施用至受试者。治疗周期的长度取决于多种因素，诸如病症的严重程度、患者的年龄和遗传特征、活性剂的浓度、治疗中使用的组合物的活性或其组合。还应当理解，用于治疗或预防的试剂的有效剂量可以在特定治疗或预防方案的过程中增加或减少。剂量的变化可以通过本领域已知的标准诊断测定来产生并且变得显而易见。在一些实施方案中，可能需要长期施用。

本文所用的术语“有效量”或“有效剂量”具有根据说明书所理解的简单且普通的含义，并且是指引起可观察到的指定效果的所述组合物或化合物的量。可以改变本公开主题的活性组合物中活性成分的实际剂量水平，以便施用有效实现特定受试者和/或应用的指定应答的活性组合物或化合物的量。所选剂量水平可以基于多种因素而变化，多种因素包括但不限于组合物的活性、配方(formulation)、施用途径、与其他药物或治疗的组合、正被治疗的病症的严重程度以及正被治疗受试者的身体状况和既往病史。在一些实施方案中，施用最小剂量，并且在没有剂量限制毒性的情况下将剂量升高至最低有效量。本文考虑了有效剂量的确定以及调整，以及何时并且如何进行此类调整的评估。

术语“施用”包括口服施用、局部接触、作为栓剂施用、静脉内、腹膜内、肌内、病灶内、鞘内、鼻内或皮下施用，或植入缓释装置(例如微型渗透泵)至受试者。通过任何途径，包括肠胃外和经粘膜(例如，颊、舌下、腭、牙龈、鼻、阴道、直肠或经皮)施用。肠胃外施用包括例如，静脉内、肌内、小动脉内、皮内、皮下、腹膜内、心室内和颅内。其他递送方式包括但不限于使用脂质体制剂、静脉内输注、透皮贴剂等。通过“共同施用”意思是在施用本文所述的第二化合物同时，刚好在其之前或刚好在其之后施用本文所述的第一化合物。

如本文使用的，术语“治疗性靶”指在调节其活性后可以提供疾病表型(例如，纤维化或癌症)的调节(例如，通过调节表达、生物活性等)的基因或基因产物。如通篇所使用的，“调节”意思是指所指现象的增加或减少(例如，生物活性的调节指生物活性的增加或生物活性的减少)。

术语“免疫细胞”是指参与抗原特异性识别的造血来源的细胞。免疫细胞包括抗原呈递细胞(APC)，诸如树突状细胞或巨噬细胞、B细胞、T细胞、辅助T细胞、CD4+T细胞、细胞毒性T细胞、CD8+T细胞、调节性T细胞(Treg)、天然杀伤细胞、未成熟骨髓细胞和骨髓细胞，诸如单核细胞、巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞、嗜碱性粒细胞和粒细胞。

术语“免疫应答”指例如T细胞介导的免疫应答、NK细胞介导的免疫应答、巨噬细胞介导的免疫应答和/或B细胞介导的免疫应答。示例性免疫应答包括B细胞应答(例如，抗体产生)、NK细胞应答或T细胞应答(例如，细胞因子产生和细胞毒性)和细胞因子反应性细胞，例如巨噬细胞的激活。术语“激活免疫应答”指使用本领域技术人员已知的方法增强T细胞介导的和/或B细胞介导的免疫应答的水平。在一些实施方案中，增强水平是至少20-50％、可替选地至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少100％、至少120％、至少150％或至少200％。抑制免疫应答是指使用本文公开的或本领域技术人员已知的方法降低T细胞介导的和/或B细胞介导的免疫应答的水平，或增加调节性T细胞的免疫抑制功能。在一个实施方案中，调节性T细胞功能的免疫应答降低或增加的水平为至少20-50％、可替选地至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少100％、至少120％、至少150％或至少200％。

如本文所用，术语“护理标准”、“最佳实践”和“标准疗法”是指被医疗从业者接受为对某种疾病是适当、恰当、有效和/或广泛使用的治疗。某一疾病的护理标准取决于许多不同的因素，这些因素包括治疗的生物效应、体内区域或位置、患者状况(如年龄、体重、性别、遗传风险、其他残疾、继发性病症)、毒性、代谢、生物累积、治疗指数、剂量和本领域已知的其他因素。确定疾病的护理标准还取决于在临床试验中建立由监管机构标准化的安全性和有效性，所述监管机构诸如美国食品药品监督管理局、国际协调理事会、加拿大卫生部、欧洲药品署、治疗药物管理局、中央药物标准控制组织、国家医疗产品管理局、药品和医疗器械管理局、食品和药物安全部和世界卫生组织。疾病的护理标准可包括但不限于手术、放疗(radiation)、化疗、靶向治疗或免疫治疗。

术语“％w/w”或“％wt/wt”意味着根据成分或试剂的重量占组合物总重乘以100表达的百分比。

使用方法

在一些实施方案中，本文公开了调节免疫应答的方法。在一些实施方案中，所述方法包括使抗LRIG1抗体或抗原结合多肽与多种细胞接触，所述多种细胞包括表达LRIG1的细胞、表达相互作用蛋白的细胞或其组合的多种细胞接触。在一些实施方案中，相互作用蛋白是VISTA。在一些实施方案中，表达LRIG1的细胞是表达LRIG的细胞。在一些实施方案中，表达相互作用蛋白的细胞是VISTA表达细胞。在一些实施方案中，抗LRIG1抗体或抗原结合多肽是本文公开的抗体或多肽中的任何一者。在一些实施方案中，接触抗LRIG1抗体或抗原结合多肽诱导表达LRIG1的细胞、表达相互作用蛋白的细胞或两者的免疫激活。在一些实施方案中，接触抗LRIG1抗体或抗原结合多肽抑制表达LRIG1的细胞、表达相互作用蛋白的细胞或两者的免疫激活。在一些实施方案中，对受试者执行所述方法。在一些实施方案中，所述方法包括向受试者施用抗LRIG1抗体或抗原结合多肽。在一些实施方案中，受试者是哺乳动物。在一些实施方案中，受试者是人。在一些实施方案中，对受试者施用抗LRIG1抗体或抗原结合多肽诱导受试者的免疫激活。在一些实施方案中，受试者中的免疫激活包括免疫细胞(例如B细胞和/或细胞毒性T细胞)活性的上调。在一些实施方案中，对受试者施用抗LRIG1抗体或抗原结合多肽抑制受试者的免疫激活。在一些实施方案中，抑制受试者中的免疫激活包括下调受试者中免疫细胞的活性，或上调受试者中免疫抑制细胞(例如调节性T细胞)的增殖和/或功能。

在一些情况下，LRIG1表达细胞在与抗LRIG1抗体或多肽结合时表达诱导免疫激活和/或调节免疫功能的细胞因子。在一些实施方案中，免疫功能的调节包括本文公开的免疫功能调节(例如免疫激活或免疫功能抑制)的实施方案中的任何一者。在一些实施方案中，细胞因子是趋化因子、干扰素、白介素、淋巴因子、单核因子、肿瘤坏死因子、CCL1、CCl2、CCL3、CCL4、CCL5、CCL6、CCL7、CCL8、CCL9、CCL11、CCL12、CCL13、CCL14、CCL15、CCL16、CCL17、CCL18、CCL19、CCL20、CCL21、CCL22、CCL23、CCL24、CCL25、CCL26、CCL27、CCL28、CXCL1、CXCL2、CXCL3、CXCL4、CXCL5、CXCL6、CXCL7、CXCL8、CXCL9、CXCL10、CXCL11、CXCL12、CXCL13、CXCL14、CXCL15、CXCL16、CXCL17、CX3CL1、XCL1、XCL2、INFα、INFβ、INFγ、IL-1、IL-1a、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12、IL-13、IL-14、IL-15、IL-16、IL-17、IL-17A-F、IL-18、IL-19、IL-20、IL-21、IL-22、IL-23、IL-24、IL-25、IL-26、IL-27、IL-28、IL-29、IL-30、IL-31、IL-32、IL-33、IL-34、IL-35、IL-36、IL-37、IL-38、阿地白介素(adesleukin)、GM-CSF、TNFα、TNFβ、TNFγ、TGF-I-3TNFSF4、TNFSF5、TNFSF6、TNFSF7、TNFSF8、TNFSF9、TNFSF10、TNFSF11、TNFSF12、TNFSF13、TNFSF13B、TNFSF14、TNFSF15、TNFSF18、或TNFSF19、白血病抑制剂因子(LIF)、睫状神经营养因子(CNTF)、CNTF样细胞因子(CLC)、心肌营养因子(CT)、试剂盒配体(KL)或其任何组合。在一些情况下，细胞因子是干扰素。在一些情况下，干扰素为IFNγ。在一些情况下，细胞因子是白细胞介素。在一些情况下，白细胞介素是IL-2。在一些情况下，细胞因子产量(production)是同种型抗体的细胞因子产量的110％、120％、130％、140％、150％、160％、170％、180％、190％、200％、300％、400％、500％、600％或更多，或在由上述百分比中的任何两者定义的范围内的任何增加。在一些情况下，细胞因子产量是同种型抗体的细胞因子产量的150％。在一些情况下，细胞因子产量是同种型抗体的细胞因子产量的160％。在一些情况下，细胞因子产量是同种型抗体的细胞因子产量的170％。在一些情况下，细胞因子产量是同种型抗体的细胞因子产量的180％。在一些情况下，细胞因子产量是同种型抗体的细胞因子产量的190％。在一些情况下，细胞因子产量是同种型抗体的细胞因子产量的200％。在一些情况下，细胞因子产量超过同种型抗体的细胞因子产量的200％。在一些情况下，细胞因子产量超过同种型抗体的细胞因子产量的300％。在一些情况下，细胞因子产量超过同种型抗体的细胞因子产量的400％。在一些情况下，细胞因子产量超过同种型抗体的细胞因子产量的500％。

在一些情况下，免疫功能的调节包括CD3+T淋巴细胞、CD4+T辅助细胞、CD8+细胞毒性T细胞、B细胞、自然杀伤(NK)细胞、Tregs或其任何组合的增殖。在一些情况下，免疫功能的调节包括CD3+T淋巴细胞的增殖。在一些情况下，免疫功能的调节包括CD4+T辅助细胞的增殖。在一些情况下，免疫功能的调节包括CD8+细胞毒性T细胞的增殖。在一些情况下，免疫功能的调节(在一些情况下，包括免疫激活)包括B细胞的增殖。在一些情况下，免疫功能的调节(在一些情况下，可以包括免疫激活和免疫活性的其他调节)包括NK细胞的增殖。在一些情况下，免疫功能的调节(诸如，在一些情况下，免疫激活)包括B细胞和NK细胞和/或Tregs的增殖。在一些实施方案中，细胞的增殖在本文公开的多种细胞中的任何一者内，或在本文公开的受试者中的任何一者内。

在一些实施方案中，免疫功能的调节包括CD3+T淋巴细胞、CD4+T辅助细胞、CD8+细胞毒性T细胞、B细胞、NK细胞或其任何组合的减少。在一些实施方案中，免疫功能的调节包括CD3+T淋巴细胞的减少。在一些实施方案中，免疫功能的调节包括CD4+T辅助细胞的减少。在一些实施方案中，免疫功能的调节包括CD8+细胞毒性T细胞的减少。在一些实施方案中，免疫功能的调节包括B细胞的减少。在一些实施方案中，免疫功能的调节包括NK细胞的减少。在一些实施方案中，免疫功能的调节包括B细胞和NK细胞的减少。在一些实施方案中，细胞的减少在本文公开的多种细胞中的任一者内，或在本文公开的受试者中的任一者内。

在一些情况下，免疫功能的调节包括本文公开的多种细胞或多个受试者中任一者内的M1巨噬细胞群的增加。在一些实施方案中，免疫功能的调节包括本文公开的多种细胞或多个受试者中任一者内的M1巨噬细胞群的减少。在一些情况下，免疫功能的调节包括本文公开的多种细胞或多个受试者中任一者内的M2巨噬细胞群的减少。在一些实施方案中，免疫功能的调节包括本文公开的多种细胞或多个受试者中任一者内的M2巨噬细胞群的增加。在一些情况下，免疫功能的调节包括本文公开的多种细胞或多个受试者中任一者内的M1巨噬细胞群的增加和M2巨噬细胞群的减少。在一些实施方案中，免疫功能的调节包括本文公开的多种细胞或多个受试者中任一者内的M1巨噬细胞群的减少和M2巨噬细胞群的增加。

图6示出了序列LRIG1和VISTA。

在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽与LRIG1结合，并破坏LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用。在一些实施方案中，抗LRIG1抗体或多肽是本文公开的抗体或多肽中的任何一者。在一些情况下，LRIG1与相互作用蛋白之间相互作用的破坏包括LRIG1与相互作用蛋白之间相互作用的部分抑制。在一些情况下，LRIG1与相互作用蛋白之间相互作用的破坏包括LRIG1与相互作用蛋白之间相互作用的完全抑制。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽与LRIG1结合，并减少LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用。在一些情况下，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用减弱至小于80％、小于78％、小于70％、小于72％、小于66％、小于60％、小于56％、小于54％、小于52％、小于50％、小于44％、小于43％、小于40％、小于30％、小于29％、小于27％、小于20％、小于19％、小于17％、小于10％、小于5％或小于1％，或在上述百分比的任何两个定义的范围内的任何减少。在一些情况下，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用减弱至小于70％。在一些情况下，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用减弱至小于60％。在一些情况下，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用减弱至小于59％。在一些情况下，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用减弱至小于50％。在一些情况下，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用减弱至小于44％。在一些情况下，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用减弱至小于43％。在一些情况下，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用减弱至小于40％。在一些情况下，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用减弱至小于34％。在一些情况下，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用减弱至小于30％。在一些情况下，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用减弱至小于21％。在一些情况下，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用减弱至小于20％。在一些情况下，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用减弱至小于14％。在一些情况下，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用减弱至小于10％。在一些情况下，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用减弱至小于7％。在一些情况下，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用减弱至小于5％。在一些情况下，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用减弱至小于4％。在一些情况下，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用减弱至小于1％。

在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽与LRIG1结合，并增强LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用。在一些情况下，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用增强了至少80％、至少78％、至少72％、至少70％、至少66％、至少60％、至少56％、至少54％、至少52％、至少50％、至少44％、至少43％、至少40％、至少30％、至少29％、至少27％、至少21％、至少20％、至少19％、至少17％、至少10％、至少5％或至少1％，或由上述百分比中的任何两者定义的范围内的任何增强。在一些实施方案中，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用增强了至少70％。在一些实施方案中，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用增强了至少60％。在一些实施方案中，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用增强了至少59％。在一些实施方案中，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用增强至少50％。在一些实施方案中，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用增强了至少44％。在一些实施方案中，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用增强了至少43％。在一些实施方案中，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用增强了至少40％。在一些实施方案中，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用增强了至少34％。在一些实施方案中，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用增强了至少30％。在一些实施方案中，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用增强了至少21％。在一些实施方案中，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用增强至少20％。在一些实施方案中，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用增强了至少14％。在一些实施方案中，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用增强至少10％。在一些实施方案中，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用增强了至少7％。在一些实施方案中，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用增强至少5％。在一些实施方案中，LRIG1与相互作用蛋白之间的相互作用增强至少1％。

在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽与LRIG1结合，并且破坏VISTA与LRIG1之间的相互作用。在一些实施方案中，抗LRIG1抗体或多肽是本文公开的抗体或多肽中的任何一者。在一些情况下，破坏VISTA与LRIG1之间的相互作用包括部分抑制VISTA与LRIG1之间的相互作用。在一些情况下，破坏VISTA与LRIG1之间的相互作用包括完全抑制VISTA与LRIG1之间的相互作用。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽与LRIG1结合，并且减少VISTA与LRIG1之间的相互作用。在一些情况下，VISTA-LRIG1相互作用减弱至小于80％、小于78％、小于70％、小于72％、小于66％、小于60％、小于56％、小于54％、小于52％、小于50％、小于44％、小于43％、小于40％、小于30％、小于29％、小于27％、小于21％、小于20％、小于19％、小于17％、小于10％、小于5％或小于1％，或在由上述百分比中的任何两者定义的范围内的任何减少。在一些情况下，LRIG1-VISTA相互作用减弱至小于70％。在一些情况下，VISTA-LRIG1相互作用减弱至小于60％。在一些情况下，VISTA-LRIG1相互作用减弱至小于59％。在一些情况下，VISTA-LRIG1相互作用减弱至小于50％。在一些情况下，VISTA-LRIG1相互作用减弱至小于44％。在一些情况下，VISTA-LRIG1相互作用减弱至小于43％。在一些情况下，VISTA-LRIG1相互作用减弱至小于40％。在一些情况下，VISTA-LRIG1相互作用减弱至小于34％。在一些情况下，VISTA-LRIG1相互作用减弱至小于30％。在一些情况下，VISTA-LRIG1相互作用减弱至小于21％。在一些情况下，VISTA-LRIG1相互作用减弱至小于20％。在一些情况下，VISTA-LRIG1相互作用减弱至小于14％。在一些情况下，VISTA-LRIG1相互作用减弱至小于10％。在一些情况下，VISTA-LRIG1相互作用减弱至小于7％。在一些情况下，VISTA-LRIG1相互作用减弱至小于5％。在一些情况下，VISTA-LRIG1相互作用减弱至小于4％。在一些情况下，VISTA-LRIG1相互作用减弱至小于1％。

在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽与LRIG1结合，并且增强VISTA与LRIG1之间的相互作用。在一些情况下，VISTA-LRIG1相互作用增强了至少80％、至少78％、至少72％、至少70％、至少66％、至少60％、至少56％、至少54％、至少52％、至少50％、至少44％、至少43％、至少40％、至少30％、至少29％、至少27％、至少21％、至少20％、至少19％、至少17％、至少10％、至少5％或至少1％，或在由上述百分比中的任何两者定义的范围内的任何增强。在一些实施方案中，LRIG1-VISTA相互作用增强了至少70％。在一些实施方案中，LRIG1-VISTA相互作用增强了至少60％。在一些实施方案中，LRIG1-VISTA相互作用增强了至少59％。在一些实施方案中，LRIG1-VISTA相互作用增强了至少50％。在一些实施方案中，LRIG1-VISTA相互作用增强了至少44％。在一些实施方案中，LRIG1-VISTA相互作用增强了至少43％。在一些实施方案中，LRIG1-VISTA相互作用增强了至少40％。在一些实施方案中，LRIG1-VISTA相互作用增强了至少34％。在一些实施方案中，LRIG1-VISTA相互作用增强了至少30％。在一些实施方案中，LRIG1-VISTA相互作用增强了至少21％。在一些实施方案中，LRIG1-VISTA相互作用增强了至少20％。在一些实施方案中，LRIG1-VISTA相互作用增强了至少14％。在一些实施方案中，LRIG1-VISTA相互作用增强了至少10％。在一些实施方案中，LRIG1-VISTA相互作用增强了至少7％。在一些实施方案中，LRIG1-VISTA相互作用增强了至少5％。在一些实施方案中，LRIG1-VISTA相互作用增强了至少1％。在一些情况下，VISTA与LRIG1之间的相互作用发生在选自位置245-260的LRIG1的一个或多个残基处，其中残基位置对应于从N-末端到C-末端所读取的SEQ ID NO:2的氨基酸残基245-260。在一些情况下，VISTA与LRIG1之间的相互作用发生在残基245处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:2的位置245。在一些情况下，VISTA与LRIG1之间的相互作用发生在残基246处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:2的位置246。在一些情况下，VISTA与LRIG1之间的相互作用发生在残基247处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:2的位置247。在一些情况下，VISTA与LRIG1之间的相互作用发生在残基248处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:2的位置248。在一些情况下，VISTA与LRIG1之间的相互作用发生在残基249处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:2的位置249。在一些情况下，VISTA与LRIG1之间的相互作用发生在残基250处，其中残基位置对应于SEQ IDNO:2的位置250。在一些情况下，VISTA与LRIG1之间的相互作用发生在残基251处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:2的位置251。在一些情况下，VISTA与LRIG1之间的相互作用发生在残基252处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:2的位置252。在一些情况下，VISTA与LRIG1之间的相互作用发生在残基253处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:2的位置253。在一些情况下，VISTA与LRIG1之间的相互作用发生在残基254处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:2的位置254。在一些情况下，VISTA与LRIG1之间的相互作用发生在残基255处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:2的位置255。在一些情况下，VISTA与LRIG1之间的相互作用发生在残基256处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:2的位置256。在一些情况下，VISTA与LRIG1之间的相互作用发生在残基257处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:2的位置257。在一些情况下，VISTA与LRIG1之间的相互作用发生在残基258处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:2的位置258。在一些情况下，VISTA与LRIG1之间的相互作用发生在残基259处，其中残基位置对应于SEQID NO:2的位置259。在一些情况下，VISTA与LRIG1之间的相互作用发生在残基260处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:2的位置260。在一些情况下，LRIG1是人LRIG1。

在一些情况下，LRIG1与VISTA之间的相互作用发生在选自区域78-90或68-92的VISTA的一个或多个残基处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置78-90或68-92。在一些情况下，LRIG1与VISTA之间的相互作用发生在区域78-90的VISTA的一个或多个残基处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置78-90。在一些情况下，LRIG1与VISTA之间的相互作用发生在区域68-92的VISTA的一个或多个残基处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置68-92。在一些情况下，LRIG1与VISTA之间的相互作用发生在残基68处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置68。在一些情况下，LRIG1与VISTA之间的相互作用发生在残基69处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置69。在一些情况下，LRIG1与VISTA之间的相互作用发生在残基70处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置70。在一些情况下，LRIG1与VISTA之间的相互作用发生在残基71处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置71。在一些情况下，LRIG1与VISTA之间的相互作用发生在残基72处，其中残基位置对应于SEQ IDNO:4的位置72。在一些情况下，LRIG1与VISTA之间的相互作用发生在残基73处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置73。在一些情况下，LRIG1与VISTA之间的相互作用发生在残基74处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置74。在一些情况下，LRIG1与VISTA之间的相互作用发生在残基75处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置75。在一些情况下，LRIG1与VISTA之间的相互作用发生在残基76处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置76。在一些情况下，LRIG1与VISTA之间的相互作用发生在残基77处，其中残基位置对应于SEQ IDNO:4的位置77。在一些情况下，LRIG1与VISTA之间的相互作用发生在残基78处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置78。在一些情况下，LRIG1与VISTA之间的相互作用发生在残基79处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置79。在一些情况下，LRIG1与VISTA之间的相互作用发生在残基80处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置80。在一些情况下，LRIG1与VISTA之间的相互作用发生在残基81处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置81。在一些情况下，LRIG1与VISTA之间的相互作用发生在残基82处，其中残基位置对应于SEQ IDNO:4的位置82。在一些情况下，LRIG1与VISTA之间的相互作用发生在残基83处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置83。在一些情况下，LRIG1与VISTA之间的相互作用发生在残基84处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置84。在一些情况下，LRIG1与VISTA之间的相互作用发生在残基85处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置85。在一些情况下，LRIG1与VISTA之间的相互作用发生在残基86处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置86。在一些情况下，LRIG1与VISTA之间的相互作用发生在残基87处，其中残基位置对应于SEQ IDNO:4的位置87。在一些情况下，LRIG1与VISTA之间的相互作用发生在残基88处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置88。在一些情况下，LRIG1与VISTA之间的相互作用发生在残基89处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置89。在一些情况下，LRIG1与VISTA之间的相互作用发生在残基90处，其中残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置90。在一些情况下，VISTA是人VISTA。

在其他实施方案中，本文公开了促进或抑制B细胞或天然杀伤(NK)细胞增殖的方法，所述方法包括使包括B细胞、NK细胞、VISTA表达细胞和LRIG1表达细胞的多种细胞与抗LRIG1抗体或多肽接触足以促进所述多种细胞中的B细胞或NK细胞增殖或抑制的时间。在一些实施方案中，本文公开了促进或抑制B细胞和自然杀伤(NK)细胞增殖的方法，所述方法包括使包括B细胞、NK细胞、LRIG1表达细胞和VISTA表达细胞的多种细胞与抗LRIG1抗体或多肽接触足以促进所述多种细胞中的B细胞和NK细胞增殖或抑制的时间。在一些实施方案中，本文公开了促进或抑制B细胞或天然杀伤(NK)细胞增殖的方法，所述方法包括使包括选自B细胞、NK细胞、LRIG1表达细胞和VISTA表达细胞的一种或多种细胞的多种细胞与抗LRIG1抗体或多肽接触足以促进所述多种细胞中B细胞或NK细胞增殖或抑制的时间。在一些实施方案中，本文公开了促进或抑制B细胞和天然杀伤(NK)细胞增殖的方法，所述方法包括使包括选自B细胞、NK细胞、LRIG1表达细胞和VISTA表达细胞的一种或多种细胞的多种细胞与抗LRIG1抗体或多肽接触足以促进所述多种细胞中B细胞和NK细胞增殖或抑制的时间。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽与LRIG1结合并破坏LRIG1与VISTA之间的相互作用。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽与LRIG1结合并抑制LRIG1与VISTA之间的相互作用。在一些实施方案中，抗LRIG1抗体或多肽与LIRG1结合并增强LRIG1与VISTA之间的相互作用。在一些实施方案中，抗LRIG1抗体或多肽是本文公开的抗LRIG1抗体或多肽中的任何一者。在一些实施方案中，所述细胞是Treg细胞。

在一些情况下，本文公开的LRIG1表达细胞是肿瘤细胞或免疫细胞，或两者。在一些情况下，免疫细胞包括未成熟的骨髓细胞、巨噬细胞、树突细胞和产生IFNγ的Th1细胞。在一些情况下，LRIG1在位于肿瘤微环境(TME)内的多种细胞中表达。在一些情况下，抗LRIG1抗体或抗原结合多肽诱导TME内肿瘤细胞减少。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽诱导肿瘤细胞减少至少或约5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、60％、70％、80％或90％，或在由上述百分比中的任何两者定义的范围内的任何减少。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽诱导肿瘤细胞减少约5％至约95％、约10％至约90％、约15％至约80％、约20％至约70％、或约30％至约60％的范围，或在由上述百分比中的任何两者定义的范围内的任何减少。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽诱导肿瘤细胞减少至少30％。

在一些情况下，本文公开的多种细胞中的任何一者进一步包括肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)。在一些情况下，所述多种细胞进一步包括CD3+T淋巴细胞、CD4+T辅助细胞、CD8+细胞毒性T细胞或其组合。在一些情况下，所述多种细胞进一步包括CD3+T淋巴细胞。在一些情况下，所述多种细胞进一步包括CD4+T辅助细胞。在一些情况下，所述多种细胞进一步包括CD8+细胞毒性T细胞。在一些情况下，所述多种细胞进一步包括CD3+T淋巴细胞和CD4+T辅助细胞。在一些情况下，所述多种细胞进一步包括CD3+T淋巴细胞和CD8+细胞毒性T细胞。在一些情况下，所述多种细胞进一步包括CD4+T辅助细胞、CD8+细胞毒性T细胞。在一些情况下，所述多种细胞进一步包括CD3+T淋巴细胞、CD4+T辅助细胞和CD8+细胞毒性T细胞。

在一些情况下，本文公开的方法中的任何一者的接触步骤进一步诱导TIL增殖或抑制增殖。在一些情况下，接触进一步诱导或抑制CD3+T淋巴细胞、CD4+T辅助细胞、CD8+细胞毒性T细胞或其组合的增殖。在一些情况下，接触进一步诱导或抑制CD3+T淋巴细胞增殖。在一些情况下，接触进一步诱导或抑制CD4+T辅助细胞的增殖。在一些情况下，接触进一步诱导或抑制CD8+细胞毒性T细胞的增殖。在一些情况下，接触进一步诱导或抑制CD3+T淋巴细胞和CD4+T辅助细胞的增殖。在一些情况下，接触会进一步诱导或抑制CD3+T淋巴细胞和CD8+细胞毒性T细胞的增殖。在一些情况下，接触进一步诱导或抑制CD4+T辅助细胞和CD8+细胞毒性T细胞的增殖。在一些情况下，接触进一步诱导或抑制CD3+T淋巴细胞、CD4+T辅助细胞和CD8+细胞毒性T细胞的增殖。

在一些情况下，本文公开的方法中的任何一者的接触步骤进一步包括增加或减少M1巨噬细胞的增殖。在一些情况下，所述接触进一步包括TME内M2巨噬细胞群的增加或减少。在一些情况下，所述接触进一步包括M1巨噬细胞增殖的增加或减少以及TME内M2巨噬细胞群的增加或减少。

在一些情况下，抗LRIG1抗体或抗原结合多肽与对应于SEQ ID NO:2的残基245-260的LRIG1区域内的至少一个氨基酸残基结合。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽与对应于SEQ ID NO:2的残基245的LRIG1区域内的至少一个氨基酸残基结合。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽与对应于SEQ ID NO:2的残基246的LRIG1区域内的至少一个氨基酸残基结合。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽与对应于SEQ ID NO:2的残基247的LRIG1区域内的至少一个氨基酸残基结合。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽与对应于SEQ ID NO:2的残基248的LRIG1区域内的至少一个氨基酸残基结合。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽与对应于SEQ ID NO:2的残基249的LRIG1区域内的至少一个氨基酸残基结合。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽与对应于SEQ ID NO:2的残基250的LRIG1区域内的至少一个氨基酸残基结合。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽与对应于SEQ ID NO:2的残基251的LRIG1区域内的至少一个氨基酸残基结合。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽与对应于SEQ ID NO:2的残基252的LRIG1区域内的至少一个氨基酸残基结合。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽与对应于SEQ ID NO:2的残基253的LRIG1区域内的至少一个氨基酸残基结合。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽与对应于SEQ ID NO:2的残基254的LRIG1区域内的至少一个氨基酸残基结合。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽与对应于SEQ ID NO:2的残基255的LRIG1区域内的至少一个氨基酸残基结合。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽与对应于SEQ ID NO:2的残基256的LRIG1区域内的至少一个氨基酸残基结合。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽与对应于SEQ ID NO:2的残基257的LRIG1区域内的至少一个氨基酸残基结合。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽与对应于SEQ ID NO:2的残基258的LRIG1区域内的至少一个氨基酸残基结合。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽与对应于SEQ ID NO:2的残基259的LRIG1区域内的至少一个氨基酸残基结合。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽与对应于SEQ IDNO:2的残基260的LRIG1区域内的至少一个氨基酸残基结合。在一些实施方案中，抗LRIG1抗体或多肽是本文公开的抗LRIG1抗体或多肽中的任何一者。

LRIG1区域的肽序列在图7中列出。

在一些情况下，本文任何地方公开的抗LRIG1抗体或抗原结合多肽与肽1、肽2、肽3、肽4、肽5、肽6、肽7、肽8、肽9、肽10、肽11、肽12、肽13、肽14、肽15、肽16、肽17、肽18、肽19、肽20、肽21、肽22、肽23、肽24、肽25、肽26、肽27、肽28、肽29、肽30、肽31、肽32、肽33、肽34、肽35、肽36、肽37、肽38、肽39、肽40、肽41、肽42、肽43、肽44、肽45、肽46、肽47、肽48、肽49、肽50、肽51、肽52、肽53、肽55、肽56、肽57、肽58、肽59、肽60、肽62、肽63、肽64、肽65、肽66、肽67、肽68、肽69、肽70、肽71、肽72、肽73、肽74、肽75或肽76中的至少一个氨基酸残基结合。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽与肽54中的至少一个氨基酸残基结合。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽与肽61中的至少一个氨基酸残基结合。

在一些情况下，本文任何地方公开的抗LRIG1抗体或抗原结合多肽与肽内的至少一个氨基酸残基结合，其中所述肽具有如SEQ ID NO:5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、55、56、57、58、59、60、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79或80中所示的序列。

在一些情况下，本文任何地方公开的抗LRIG1抗体或抗原结合多肽包括小于1nM、小于1.2nM、小于2nM、小于5nM、小于10nM、小于13.5nM、小于15nM、小于20nM、小于25nM或小于30nM的对LRIG1的结合亲和力(例如k_D)。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽包括小于1nM的k_D。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽包括小于1.2nM的k_D。在一些情况下，抗LRIG1抗体包括小于2nM的k_D。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽包括小于5nM的k_D。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽包括小于10nM的k_D。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽包括小于13.5nM的k_D。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽包括小于15nM的k_D。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽包括小于20nM的k_D。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽包括小于25nM的k_D。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽包括小于30nM的k_D。

在一些情况下，本文任何地方公开的抗LRIG1抗体或抗原结合多肽包括人源化抗体。在其他情况下，抗LRIG1抗体或多肽包括嵌合抗体。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽包括全长抗体或多肽或其结合片段。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽包括双特异性抗体或其结合片段。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽包括单价Fab’、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。

在一些情况下，本文任何地方公开的抗LRIG1抗体或抗原结合多肽是双特异性抗体或其结合片段。示例性的双特异性抗体形式包括但不限于：杵-臼(Knobs-into-Holes(KiH))、不对称再造技术-免疫球蛋白(ART-Ig)、Triomab quadroma、双特异性单克隆抗体(BiMAb、bsMab、BsAb、BsmAb、BS-Mab或Bi-MAb)、Azymetric、基于T细胞受体的抗体的双特异性接合(BEAT)、双特异性T细胞接合子(BiTE)、Biclonics、Fab-scFv-Fc、二合一/双作用Fab(DAF)、FinomAb、scFv-Fc-(Fab)-融合、Dock-aNd-Lock(DNL)、Adaptir(以前的SCORPION)、串联双特异抗体(TandAb)、双亲和-重靶向(DART)、纳米抗体、三重体(triplebody)、TandemscFv(taFv)、三重头(triple heads)、串联dAb/VHH、三重dAb/VHH或四价dAb/VHH。在一些情况下，抗VISTA抗体、抗LRIG1抗体或其组合是双特异性抗体或其结合片段，其包括Brinkmann和Kontermann,“The making of bispecific antibodies”，MABS 9(2):182-212(2017)的图2中所示的双特异性抗体形式。

在一些实施方案中，本文任何地方公开的抗LRIG1抗体或抗原结合多肽是包括图8所示互补性决定区域(CDR)的人源化抗体。

在一些情况下，人源化抗LRIG1抗体包括重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)。在一些情况下，人源化抗LRIG1抗体的VH或VL区可以包括至少一个、至少两个或三个CDR。在一些实施方案中，抗体包括选自SEQ ID NO:84、87、90、93、96、99、102、105、108、111、114、117、120、123、126、129、134、138、143和242的至少一个重链CDR1。在一些实施方案中，抗体包括选自SEQ ID NO:85、88、91、94、97、100、103、106、109、112、115、118、121、124、127、130、132、136、139、141、142、144和243的至少一个重链CDR2。在一些实施方案中，抗体包括选自SEQID NO:86、89、92、95、98、101、104、107、110、113、116、119、122、125、128、131、133、135、137、140、145和244的至少一个重链CDR3。在一些实施方案中，所述抗体包括至少一个选自SEQID NO:149、152、154、157、163、166、168、171、172、173、175、178、181、183、187、246、251和253的至少一个轻链CDR1。在一些实施方案中，抗体包括选自SEQ ID NO:150、155、158、160、164、169、176、179、185、247和249的至少一个轻链CDR2。在一些实施方案中，抗体包括至少一各选自SEQ ID NO:151、153、156、159、161、162、165、167、170、174、177、180、182、184、186、248、250和252的至少一个轻链CDR3。在一些实施方案中，抗体包括选自SEQ ID NO:84-145或242-245的至少一个重链CDR。在一些实施方案中，所述抗体包括选自SEQ ID NO:147-187或246-254的至少一个轻链CDR。在一些情况下，人源化抗LRIG1抗体包括如图9所示的VH和VL序列内的CDR。在一些实施方案中，抗体包括根据图9的3个重链CDR和3个轻链CDR。

在一些情况下，人源化抗LRIG1抗体包括重链可变区(VH)和/或轻链可变区(VL)。在一些情况下，人源化抗LRIG1抗体包括如图12所示的VH序列。在一些情况下，人源化抗LRIG1抗体包括图13所示的VL序列。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括VH结构域，所述VH结构域具有与SEQ ID NO:192-216至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列。在一些实施方案中，抗体或抗原结合多肽包括VL结构域，所述VL结构域具有与SEQ ID NO:217-241至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列。在一些实施方案中，人源化抗LRIG1抗体包括表5中公开的VH序列和VL序列。

表5：抗体及相关的VH和VL序列

在一些情况下，人源化抗LRIG1抗体为802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8，或其任何组合。

在一些实施方案中，抗LRIG1抗体或抗原结合多肽包括选自IgM、IgG(例如IgG1、IgG2、IgG3或IgG4)、IgA、IgD或IgE的框架区域。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽包括IgM框架。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽包括IgG(例如IgG1、IgG2、IgG3或IgG4)框架。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽包括IgG1框架。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽包括IgG2框架。在一些情况下，抗LRIG1抗体或多肽包括IgG4框架。

在一些实施方案中，抗LRIG1抗体或多肽包括框架区中的一个或多个突变，例如CH1结构域、CH2结构域、CH3结构域、铰链区或其组合中的一个或多个突变。在一些情况下，一个或多个突变调节Fc受体相互作用，例如增加Fc效应子功能，诸如ADCC效应子和/或补体依赖性细胞毒性(CDC)。在一些情况下，一个或多个突变稳定抗体或多肽和/或增加抗体或多肽的半衰期。在其他情况下，一个或多个突变调节糖基化。

治疗方法

在一些实施方案中，本文还公开了一种向有需要的受试者施用上述抗LRIG1抗体或抗原结合多肽的方法。在一些实施方案中，有需要的受试者患有疾病、先前患有疾病或处于感染疾病的风险中。在一些实施方案中，疾病是癌症。在一些实施方案中，疾病是免疫相关障碍或病症。在一些实施方案中，免疫相关障碍或病症是自体免疫性疾病或炎性疾病。

在一些情况下，受试者被诊断为癌症。在一些情况下，癌症是实体瘤。在其他情况下，癌症是血液恶性肿瘤。在其他情况下，癌症是转移性癌症、复发性癌症或难治性癌症。

在一些情况下，癌症是实体瘤。在一些情况下，癌症是乳腺癌、结肠直肠癌、肾癌、肝癌、肺癌、脑癌、胰腺癌、膀胱癌或胃癌，或其任何组合。在一些情况下，肺癌包括非小细胞肺癌(NSCLC)，诸如肺腺癌、鳞状细胞癌或大细胞癌；或小细胞肺癌(SCLC)。

在一些情况下，癌症为血液恶性肿瘤，例如转移性血液恶性肿瘤、复发性血液恶性肿瘤或难治性血液恶性肿瘤。

在一些实施方案中，受试者具有免疫相关障碍或病症。在一些实施方案中，免疫相关障碍或病症包括自体免疫性疾病、炎性疾病或伤口愈合。在一些实施方案中，免疫相关障碍包括但不限于纤维化、肝纤维化、肾纤维化、心脏纤维化、肺纤维化、非酒精性脂肪性肝病、非酒精性脂肪性肝炎、脓毒症、特应性皮炎、银屑病、系统性红斑狼疮、炎性肠综合征、关节炎或其任何组合。

在一些情况下，将抗LRIG1抗体或抗原结合多肽配制为全身施用。在一些情况下，将抗LRIG1抗体或抗原结合多肽配制为肠胃外施用。

在一些实施方案中，将抗LRIG1抗体或抗原结合多肽与另外治疗剂联合向受试者施用。在一些情况下，另外治疗剂包括免疫治疗剂。在一些情况下，另外治疗剂包括免疫检查点调节剂。在一些情况下，另外治疗剂包括化疗剂、靶向治疗剂、激素治疗剂或基于干细胞的治疗剂。

在一些情况下，另外治疗剂包括免疫治疗剂。在一些实施方案中，免疫治疗剂用于免疫疗法。在一些实施方案中，免疫疗法是过继性细胞疗法。示例性过继性细胞疗法包括来自Adaptimmune的AFP TCR、MAGE-A10TCR或NY-ESO-TCR；来自Unum Therapeutics的ACTR087/利妥昔单抗；来自Juno Therapeutics的抗BCMA CAR-T细胞疗法、抗CD19“武装的(armored)”CAR-T细胞疗法、JCAR014、JCAR018、JCAR020、JCAR023、JCAR024或JTCR016；来自Celgene/Juno Therapeutics的JCAR017；来自Intrexon的抗CD19 CAR-T细胞疗法；来自Kite Pharma的抗CD19 CAR-T细胞疗法、axicabtagene ciloleucel、KITE-718、KITE-439或NY-ESO-1T-细胞受体疗法；来自Sorrento Therapeutics的抗CEA CAR-T疗法；来自TNKTherapeutics/Sorrento Therapeutics的抗PSMA CAR-T细胞疗法；来自AtaraBiotherapeutics的ATA520；来自Aurora BioPharma的AU101和AU105；来自Cell Medica的baltaleucel-T(CMD-003)；来自bluebird bio的bb2121；来自Bellicum Pharmaceuticals的BPX-501、BPX-601或BPX-701；来自Kiromic的BSK01；来自Immunocore的IMCgp100；来自Jounce Therapeutics的JTX-2011；来自Lion Biotechnologies的LN-144或LN-145；来自Mustang Bio的MB-101或MB-102；来自Celyad的NKR-2；来自Celgene的PNK-007；来自Novartis Pharmaceuticals的tisagenlecleucel-T或来自Tessa Therapeutics的TT12。

在一些情况下，免疫疗法是基于树突细胞的疗法。

在一些情况下，免疫疗法包括基于细胞因子的疗法，包括例如，白细胞介素(IL)诸如IL-2、IL-15或IL-21；干扰素(IFN)-α或粒细胞巨噬细胞集落-刺激因子(GM-CSF)。

在一些情况下，免疫疗法包括免疫检查点调节剂。示例性免疫检查点调节剂包括PD-1调节剂诸如来自Bristol-Myers Squibb的尼伏鲁单抗(Opdivo)、来自Merck的培布利珠单抗(Keytruda)、来自Agenus的AGEN2034、来自BeiGene的BGB-A317、来自Boehringer-Ingelheim Pharmaceuticals的Bl-754091、来自CBT Pharmaceuticals的CBT-501(杰诺单抗(genolimzumab))、来自Incyte的INCSHR1210、来自Janssen Research&Development的JNJ-63723283、来自MedImmune的MEDI0680、来自MacroGenics的MGA 012、来自NovartisPharmaceuticals的PDR001、来自Pfizer的PF-06801591、来自RegeneronPharmaceuticals/Sanofi的REGN2810(SAR439684)或来自TESARO的TSR-042；CTLA-4调节剂诸如伊匹单抗(Yervoy)或来自Agenus的AGEN 1884；PD-L1调节剂诸如来自AstraZeneca的德瓦鲁单抗(durvalumab)(Imfinzi)、来自Genentech的阿特珠单抗(atezolizumab)(MPDL3280A)、来自EMD Serono/Pfizer的阿维单抗(avelumab)、来自CytomX Therapeutics的CX-072、来自Novartis Pharmaceuticals的FAZ053、来自3D Medicine/Alphamab的KN035、来自Eli Lilly的LY3300054或来自EMD Serono的M7824(抗PD-L1/TGFβ捕获)；LAG3调节剂诸如来自Bristol-Myers Squibb的BMS-986016、来自Novartis Pharmaceuticals的IMP701、来自Novartis Pharmaceuticals的LAG525或来自Regeneron Pharmaceuticals的REGN3767；OX40调节剂诸如来自Bristol-Myers Squibb的BMS-986178、来自GlaxoSmithKline的GSK3174998、来自Agenus/Incyte的INCAGN1949、来自MedImmune的MEDI0562、来自Pfizer的PF-04518600或来自Genentechp的RG7888；GITR调节剂诸如来自Novartis Pharmaceuticals的GWN323、来自Agenus/Incyte的INCAGN1876、来自MedImmune的MEDI1873、来自Merck的MK-4166或来自Leap Therapeutics的TRX518；KIR调节剂诸如来自Bristol-Myers Squibb的利瑞鲁单抗；或TIM调节剂诸如来自NovartisPharmaceuticals的MBG453或来自Tesaro的TSR-022。

在一些情况下，另外治疗剂包括化疗剂。示例性化疗剂包括但不限于烷化剂诸如环磷酰胺、二氯甲基二乙胺、苯丁酸氮芥、左旋溶肉瘤素、达卡巴嗪或亚硝基脲；蒽环类诸如柔红霉素、多柔比星、表柔比星、伊达比星、米托蒽醌或戊柔比星；细胞骨架破坏剂诸如紫杉醇、多西他赛、白蛋白结合型紫杉醇或泰素帝；埃坡霉素；组蛋白脱乙酰酶抑制剂诸如伏立诺他或罗米地新；拓扑异构酶I抑制剂诸如依立替康或拓扑替康；拓扑异构酶II抑制剂诸如足叶乙甙、替尼泊苷或他氟泊苷；激酶抑制剂诸如硼替佐米、厄洛替尼、吉非替尼、伊马替尼、威罗菲尼或维莫德吉；核苷酸类似物和前体类似物诸如阿扎胞苷、咪唑硫嘌呤、卡培他滨、阿糖胞苷、脱氧氟尿苷、氟尿嘧啶、吉西他滨、羟基脲、巯基嘌呤、甲氨蝶呤或硫鸟嘌呤；基于铂的试剂诸如卡铂、顺铂或奥沙利铂；类视黄醇诸如维生素A酸、阿利维A酸或贝沙罗汀；或长春花生物碱和衍生物诸如长春花碱、长春新碱、长春地辛或长春瑞滨。

在一些情况下，另外治疗剂包括基于激素的治疗剂。示例性基于激素的治疗剂包括但不限于芳香酶抑制剂诸如来曲唑、阿那曲唑、依西美坦或氨鲁米特；促性腺素-释放激素(GnRH)类似物诸如亮丙瑞林或戈舍瑞林；选择性雌激素受体调节剂(SERM)诸如它莫西芬、雷洛昔芬、托瑞米芬或氟维司群；抗雄激素诸如氟他胺或比卡鲁胺；孕激素诸如乙酸甲地孕酮或乙酸甲羟孕酮；雄激素诸如氟羟甲基睾丸酮；雌激素诸如雌激素二乙基己烯雌酚(estrogen diethylstilbestrol)(DES)、雌二醇(Estrac)或磷酸聚雌醇；或生长激素抑制素类似物诸如奥曲肽。

在一些情况下，另外治疗剂是一线治疗剂。

在一些实施方案中，抗LRIG1抗体或抗原结合多肽和另外治疗剂同时施用。在一些实施方案中，抗LRIG1抗体或抗原结合多肽和另外治疗剂依次施用。在一些实施方案中，抗LRIG1抗体或抗原结合多肽在施用另外治疗剂之前向受试者施用。在一些实施方案中，抗LRIG1抗体或抗原结合多肽在施用另外治疗剂之后向受试者施用。

在一些情况下，另外治疗剂和抗LRIG1抗体或抗原结合多肽被配制为单独的剂量。

在一些情况下，受试者已经经历外科手术。在一些情况下，抗LRIG1抗体或抗原结合多肽和任选地另外治疗剂在外科手术之前向受试者施用。在一些实施方案中，抗LRIG1抗体或抗原结合多肽和任选地另外治疗剂在外科手术之后向受试者施用。

在一些情况下，受试者已经经历辐射。在一些情况下，抗LRIG1抗体或抗原结合多肽和任选地另外治疗剂在辐射治疗期间或之后向受试者施用。在一些情况下，抗LRIG1抗体或抗原结合多肽和任选地另外治疗剂在经历辐射之前向受试者施用。

在一些实施方案中，受试者是哺乳动物。在一些情况下，受试者是人。

抗体产生

在一些实施方案中，抗LRIG1抗体通过标准方案通过用抗原组合物注射生产动物来产生。参见，例如，Harlow和Lane，Antibodies:A Laboratory Manual，Cold SpringHarbor Laboratory(冷泉港实验室)，1988。当利用整个蛋白质或蛋白质的较大部分时，抗体可以通过用蛋白质和合适的佐剂(例如，弗氏佐剂、弗氏完全佐剂、水包油乳液等)免疫生产动物来产生。当利用较小的肽时，将肽与较大的分子缀合以制备免疫刺激缀合物是有利的。商业上可获得的用于这种用途的常用缀合蛋白包括牛血清白蛋白(BSA)和匙孔血蓝蛋白(KLH)。为了产生针对特定表位的抗体，可以利用源自完整序列的肽。可替选地，为了产生针对蛋白质靶的相对短的肽部分的抗体，如果将多肽连接至载体蛋白，诸如卵白蛋白、BSA或KLH，则可以引起优异的免疫应答。

多克隆或单克隆抗LRIG1抗体可以从已经基因改变以产生人免疫球蛋白的动物产生。转基因动物可以通过最初产生不产生动物的天然抗体的“敲除”动物，并且用人抗体基因座稳定转化动物(例如，通过使用人类人工染色体)来产生。在这种情况下，然后通过动物仅制造人抗体。用于产生这种动物并且从其中衍生抗体的技术在美国专利号6,162,963和6,150,584中描述，所述文献通过引用完全并入本文。这种抗体可称为人异种抗体。

可替选地，抗LRIG1抗体可以从含有人可变区的噬菌体文库产生。参见美国专利号6,174,708，该文献通过引用完全并入本文。

在本文公开的任何实施方案的一些方面中，抗LRIG1抗体由杂交瘤产生。

对于单克隆抗LRIG1抗体，可以通过分离刺激的免疫细胞，诸如来自接种动物的脾的那些来形成杂交瘤。然后这些细胞可以融合至永生细胞，诸如骨髓瘤细胞或转化细胞，其能够在细胞培养物中无限地复制，从而产生永生化的分泌免疫球蛋白的细胞系。利用的永生细胞系可以被选择为缺乏利用某些营养素所必需的酶。许多这种细胞系(诸如骨髓瘤)是本领域技术人员已知的，并且包括，例如：胸苷激酶(TK)或次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(thymidine kinase(TK)or hypoxanthine-guanine phosphoriboxyl transferase)(HGPRT)。这些缺陷允许根据它们在例如次黄嘌呤氨基蝶呤胸苷培养基(HAT)上的生长能力来选择融合细胞。

另外，抗LRIG1抗体可以通过基因工程化产生。

本文公开的抗LRIG1抗体可具有降低的诱导人中非期望的免疫应答的倾向，例如，过敏性休克，并且还可展示出引发将防止用抗体治疗剂或显像剂重复剂量的免疫应答(例如，人-抗-鼠-抗体“HAMA”应答)的降低的倾向。这样的抗LRIG1抗体包括但不限于人源化、嵌合或异种人抗LRIG1抗体。

嵌合抗LRIG1抗体可以，例如，通过将从鼠(或其他动物来源的)杂交瘤克隆获得的鼠可变轻链和重链区(VK和VH)与人恒定轻链和重链区组合以便产生主要地具有人结构域的抗体的重组方式制备。这种嵌合抗体的产生是本领域熟知的，并且可以通过标准方式实现(如，例如在美国专利号5,624,659中描述的，该文献通过引用完全并入本文)。

适用于非人(例如啮齿动物或灵长类动物)抗体的术语“人源化”是杂合免疫球蛋白、免疫球蛋白链或其片段，其含有源自非人免疫球蛋白的最少序列。在大多数情况下，人源化抗体是人免疫球蛋白(受体抗体)，其中来自受体的互补性决定区域(CDR)的残基被来自具有所需特异性、亲和力和能力的非人类物种(供体抗体)诸如小鼠、大鼠、兔子或灵长类动物的CDR的残基取代。在一些实施方案中，人免疫球蛋白的Fv框架区(FR)残基被相应的非人残基取代。此外，人源化抗体可包括既不在受体抗体中也不在输入的CDR或框架序列中发现的残基。进行这些修饰以进一步改进和优化抗体性能并且最小化当引入人体时的免疫原性。在一些示例中，人源化抗体将包括基本上所有的至少一个，并且通常两个可变结构域，其中所有或基本上所有的CDR区对应于非人免疫球蛋白的那些并且所有或基本上所有的FR区是人免疫球蛋白序列的那些。人源化抗体还可包括免疫球蛋白恒定区(Fc)的至少一部分，通常是人免疫球蛋白的那些。

可以工程化人源化抗体以含有人样免疫球蛋白结构域，并且仅并入动物源性抗体的互补性决定区域。这可以通过仔细检查单克隆抗原结合单位或单克隆抗体的可变区的高变环的序列，并且将它们与人抗原结合单位或人抗体链的结构相匹配来完成。参见，例如，美国专利号6,187,287，该文献通过引用完全并入本文。

用于人源化非人抗体的方法是本领域熟知的。“人源化”抗体是其中至少部分序列已经从其初始形式改变以使其更像人免疫球蛋白的抗体。在一些版本中，重(H)链和轻(L)链恒定(C)区用人序列取代。这可以是包括可变(V)区和异源免疫球蛋白C区的融合多肽。在一些版本中，互补性决定区域(CDR)包括非人抗体序列，而V框架区也已转化为人序列。参见，例如，EP 0329400。在一些版本中，V区通过设计人和小鼠V区的共有序列并且转换共有序列之间不同的CDR之外的残基来人源化。

原则上，来自人源化抗体的框架序列可用作CDR移植的模板；然而，已经表明直接将CDR取代入这种框架中会导致对抗原的结合亲和力的显著丧失。Glaser等(1992)J.Immunol.149:2606；Tempest等(1992)Biotechnology 9:266和Shalaby等(1992)J.Exp.Med.17:217。人抗体(HuAb)与原始鼠抗体(muAb)的同源性越高，人框架将更不可能将畸变(distortions)引入鼠CDR，这可降低亲和力。基于针对抗体序列数据库的序列同源性搜索，HuAb IC4为muM4TS.22提供了良好的框架同源性，尽管其他高度同源的HuAb也将适用，尤其是来自人亚组I的κL链或来自人亚组III的H链。Kabat等(1987)。各种计算机程序诸如ENCAD(Levitt等(1983)J.Mol.Biol.168:595)可以用来预测V区的理想序列。本发明因此涵盖具有不同可变(V)区的HuAb。确定合适的V区序列并且优化这些序列在本领域技术人员的技能内。获得具有降低的免疫原性的抗体的方法也在美国专利号5,270,202和EP 699,755中描述。

人源化抗体可以通过使用亲本和人源化序列的三维模型分析亲本序列和各种概念性人源化产物的过程来制备。三维免疫球蛋白模型是本领域技术人员熟悉的。可获得的计算机程序阐释和显示选定的候选免疫球蛋白序列的可能的三维构象结构。检查这些显示允许分析残基在候选免疫球蛋白序列的功能中的可能作用，即，分析残基影响候选免疫球蛋白结合其抗原的能力。这样，可以从共有序列和输入序列中选择和组合FR残基，从而实现期望的抗体特征，诸如增加的对靶抗原的亲和力。

用于人源化受试者抗原结合单元的过程可以如下。基于用于移植的人抗体种系的同源性、规范结构和物理性质选择最适合的种系受体重链和轻链可变区。进行mVH/VL与移植的hVH/VL的计算机建模，并且生成原型人源化抗体序列。如果建模指示需要框架回复突变，则生成具有指示的FW改变的第二变体。合成编码选定种系框架和鼠CDR的DNA片段。合成的DNA片段被亚克隆至IgG表达载体中，并且通过DNA测序确认序列。人源化抗体在细胞，诸如293F中表达，并且测试蛋白质，例如在MDM吞噬测定和抗原结合测定中。将人源化抗原结合单位与亲本抗原结合单位的抗原结合亲和力比较，例如，通过对表达靶抗原的细胞进行FACS。如果亲和力比亲本抗原结合单位低2倍以上，则可以如上所述生成和测试第二轮人源化变体。

如上所述，抗LRIG1抗体可以是“单价”或“多价”。前者每个抗原结合单位具有一个结合位点，而后者含有能够结合不止一种相同或不同种类的抗原的多个结合位点。取决于结合位点的数量，抗原结合单元可以是二价的(具有两个抗原结合位点)、三价的(具有三个抗原结合位点)、四价的(具有四个抗原结合位点)等。

多价抗LRIG1抗体可基于它们结合特异性进一步分类。“单特异性”抗LRIG1抗体是能够结合至相同种类的一种或多种抗原的分子。“多特异性”抗LRIG1抗体是对至少两种不同抗原具有结合特异性的分子。虽然这种分子通常仅将结合两种不同的抗原(即双特异性抗-LRIG1抗体)，但在本文中使用时，具有另外特异性的抗体诸如三特异性抗体也被该表达涵盖。本公开进一步提供了多特异性抗LRIG1抗体。多特异性抗LRIG1抗体是能够结合至少两种不同抗原的多价分子，例如，分别展示出对两种和三种不同抗原的结合特异性的双特异性和三特异性分子。

多核苷酸和载体

在一些实施方案中，本公开提供了编码本文公开的任何抗LRIG1抗体的分离的核酸。在另一实施方案中，本公开提供了包括编码本文公开的任何抗LRIG1抗体和抗原结合多肽的核酸序列的载体。在一些实施方案中，本发明提供了编码本文公开的抗LRIG1抗体的轻链CDR和重链CDR的分离的核酸。

本主题的抗LRIG1抗体或抗原结合多肽可以通过重组DNA技术、合成化学技术或其组合来制备。例如，使用本领域已知的标准分子技术，通常将编码抗LRIG1抗体的所需组分，包括轻链CDR和重链CDR的序列组装克隆至表达载体中。这些序列可以从编码所需蛋白质序列的其他载体、从使用各自的模板核酸的PCR生成的片段或通过编码所需序列的合成寡核苷酸的组装来组装。表达系统可以通过用包括感兴趣的抗LRIG1抗体的表达载体转染合适的细胞来创建。

使用常规技术，包括但不限于杂交、PCR和DNA测序，可以容易地获得并测序对应于现有抗体的轻链或重链的各种区域的核苷酸序列。产生单克隆抗体的杂交瘤细胞用作抗体核苷酸序列的优选的来源。产生一系列单克隆抗体的大量杂交瘤细胞可以从公共或私人储存库中获得。最大的保藏机构是美国模式培养物保存所(atcc.org)，其提供了多样化的特征明确的杂交瘤细胞系的收集。可替选地，抗体核苷酸可以从免疫或未免疫的啮齿动物或人获得，并且形成器官诸如脾和外周血液淋巴细胞。适用于提取和合成抗体核苷酸的具体技术在Orlandi等(1989)Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A86:3833-3837；Larrick等(1989)Biochem.Biophys.Res.Commun.160:1250-1255；Sastry等(1989)Proc.Natl.Acad.Sci.,U.S.A.86:5728-5732和美国专利号5,969,108中描述。

也可以修饰编码抗LRIG1抗体的多核苷酸，例如，通过人重链和轻链恒定区的编码序列代替同源非人序列。在这种方式中，制备了保留原始抗LRIG1抗体的结合特异性的嵌合抗体。

宿主细胞

在一些实施方案中，本公开提供了表达本文公开的任何一种抗LRIG1抗体的宿主细胞。所述宿主细胞通常包括编码本文公开的任何一种抗LRIG1抗体的核酸。

本发明提供了用以上所述的多核苷酸、载体或载体文库转染的宿主细胞。可以通过许多适当的方式的任何一种，包括电穿孔、微弹轰击；脂质转染，感染(其中载体与致病原偶联)，采用氯化钙、氯化铷、磷酸钙、DEAE-葡聚糖或其他物质的转染，将载体引入合适的原核或真核细胞。引入载体的方法的选择通常将取决于宿主细胞的特征。

对于大多数动物细胞，任何以上提到的方法都适合于载体递送。优选的动物细胞是脊椎动物细胞，优选地哺乳动物细胞，其能够大量，例如，以毫克水平表达外源引入的基因产物。优选的细胞的非限制性示例是NIH3T3细胞、COS、HeLa和CHO细胞。

一旦引入至合适的宿主细胞，抗LRIG1抗体的表达可以使用本领域已知的任何核酸或蛋白质测定来确定。例如，轻链CDR或重链CDR或抗LRIG1抗体的转录mRNA的存在可以通过常规杂交测定(例如Northern印迹分析)、扩增程序(例如RT-PCR)、SAGE(美国专利号5,695,937)和基于阵列的技术(参见例如美国专利号5,405,783、5,412,087和5,445,934)，使用与编码抗LRIG1抗体的多核苷酸的任何区域互补的探针来检测和/或量化。

载体的表达还可以通过检查表达的抗LRIG1抗体来确定。本领域可获得用于蛋白质分析的各种技术。它们包括但不限于放射免疫测定、ELISA(酶联免疫放射测定)、“夹心”免疫测定、免疫放射测定、原位免疫测定(使用例如，胶体金、酶或放射性同位素标记)、蛋白质印迹分析、免疫沉淀测定、免疫荧光测定和SDS-PAGE。

有效载荷(payload)

在一些实施方案中，抗LRIG1抗体进一步包括有效载荷。在一些情况下，有效载荷包括小分子、蛋白质或其功能片段、肽或核酸聚合物。

在一些情况下，与抗LRIG1抗体缀合的有效载荷的数量(例如，药物与抗体比例或DAR)是约1:1，一种有效载荷对一种抗LRIG1抗体。在一些情况下，有效载荷与抗LRIG1抗体的比例是约2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1、11:1、12:1、13:1、14:1、15:1、16:1、17:1、18:1、19:1或20:1。在一些情况下，有效载荷与抗LRIG1抗体的比例是约2:1。在一些情况下，有效载荷与抗LRIG1抗体的比例是约3:1。在一些情况下，有效载荷与抗LRIG1抗体的比例是约4:1。在一些情况下，有效载荷与抗LRIG1抗体的比例是约6:1。在一些情况下，有效载荷与抗LRIG1抗体的比例是约8:1。在一些情况下，有效载荷与抗LRIG1抗体的比例是约12:1。

在一些实施方案中，有效载荷是小分子。在一些实施方案中，小分子是细胞毒素有效载荷。示例性细胞毒素有效载荷包括但不限于微管破坏剂、DNA修饰剂或Akt抑制剂。

在一些实施方案中，有效载荷包括微管破坏剂。示例性微管破坏剂包括但不限于2-甲氧基雌二醇、澳瑞他汀(auristatin)、查尔酮、秋水仙碱、考布他汀、念珠藻素(cryptophycin)、dictyostatin、盘皮海绵内酯、dolastain、软珊瑚醇、埃博霉素、软海绵素、莱利霉素(laulimalide)、美登素、noscapaxin、紫杉醇、peloruside、拟茎点霉毒素(phomopsin)、鬼臼毒素、根霉素、海绵抑制素(spongistatin)、紫杉烷、tubulysin、长春花生物碱、长春瑞滨或其衍生物或类似物。

在一些实施方案中，美登素是美登木素生物碱。在一些实施方案中，美登木素生物碱是DM1、DM4或安丝菌素。在一些实施方案中，美登木素生物碱是DM1。在一些实施方案中，美登木素生物碱是DM4。在一些实施方案中，美登木素生物碱是安丝菌素。在一些实施方案中，美登木素生物碱是美登木素生物碱衍生物或类似物，诸如在美国专利号5208020、5416064、7276497和6716821或美国公开号2013029900和US20130323268中所描述的。

在一些实施方案中，有效载荷是海兔毒素，或其衍生物或类似物。在一些实施方案中，海兔毒素是海兔毒素10或海兔毒素15，其或衍生物或类似物。在一些实施方案中，海兔毒素10类似物是澳瑞他汀、索利多丁、symplostatin 1或symplostatin 3。在一些实施方案中，海兔毒素15类似物是西马多丁或他西多丁。

在一些实施方案中，海兔毒素10类似物是澳瑞他汀或澳瑞他汀衍生物。在一些实施方案中，澳瑞他汀或澳瑞他汀衍生物是澳瑞他汀E(AE)、澳瑞他汀F(AF)、澳瑞他汀E5-苯甲酰基戊酸酯(AEVB)、一甲基澳瑞他汀E(MMAE)、一甲基澳瑞他汀F(MMAF)或一甲基澳瑞他汀D(MMAD)、澳瑞他汀PE或澳瑞他汀PYE。在一些实施方案中，澳瑞他汀衍生物是一甲基澳瑞他汀E(MMAE)。在一些实施方案中，澳瑞他汀衍生物是一甲基澳瑞他汀F(MMAF)。在一些实施方案中，澳瑞他汀是澳瑞他汀衍生物或类似物，诸如在美国专利号6884869、7659241、7498298、7964566、7750116、8288352、8703714和8871720中描述的。

在一些实施方案中，有效载荷包括DNA修饰剂。在一些实施方案中，DNA修饰剂包括DNA切割剂、DNA嵌入剂、DNA转录抑制剂或DNA交联剂。在一些实施方案中，DNA切割剂包括博来霉素A2、加利车霉素或其衍生物或类似物。在一些实施方案中，DNA嵌入剂包括多柔比星、表柔比星、PNU-159682、倍癌霉素(duocarmycin)、吡咯并苯二氮卓、寡霉素C、柔红霉素、戊柔比星、拓扑替康或其衍生物或类似物。在一些实施方案中，DNA转录抑制剂包括更生霉素。在一些实施方案中，DNA交联剂包括丝裂霉素C。

在一些实施方案中，DNA修饰剂包括安吖啶、蒽环霉素、喜树碱、多柔比星、倍癌霉素、烯二炔、依托泊苷、吲哚啉苯二氮卓、纺锤菌素、替尼泊苷或其衍生物或类似物。

在一些实施方案中，蒽环霉素是多柔比星、柔红霉素、表柔比星、伊达比星、丝裂霉素-C、更生霉素、光辉霉素、奈莫柔比星、匹蒽醌、沙巴比星或戊柔比星。

在一些实施方案中，喜树碱的类似物是拓扑替康、依立替康、西拉替康、科西替康、依沙替康、勒托替康、吉马替康、贝洛替康、鲁比替康或SN-38。

在一些实施方案中，倍癌霉素是倍癌霉素A、倍癌霉素B1、倍癌霉素B2、倍癌霉素C1、倍癌霉素C2、倍癌霉素D、倍癌霉素SA或CC-1065。在一些实施方案中，烯二炔是加利车霉素、埃斯帕霉素或达内霉素A。

在一些实施方案中，吡咯并苯二氮卓是蒽霉素、赤霉素、契卡霉素、DC-81、甲基氨茴霉素(mazethramycin)、新茴霉素(neothramycins)A、新茴霉素B、porothramycin、prothracarcin、sibanomicin(DC-102)、西伯霉素或茅屋霉素。在一些实施方案中，吡咯并苯二氮卓是茅屋霉素衍生物，诸如在美国专利号8404678和8163736中描述的。在一些实施方案中，吡咯并苯二氮卓是诸如在美国专利号8426402、8802667、8809320、6562806、6608192、7704924、7067511、US7612062、7244724、7528126、7049311、8633185、8501934和8697688和美国公开号US20140294868中描述的。

在一些实施方案中，吡咯并苯二氮卓是吡咯并苯二氮卓二聚体。在一些实施方案中，PBD二聚体是对称的二聚体。对称的PBD二聚体的示例包括但不限于SJG-136(SG-2000)、ZC-423(SG2285)、SJG-720、SJG-738、ZC-207(SG2202)和DSB-120。在一些实施方案中，PBD二聚体是非对称的二聚体。非对称的PBD二聚体的示例包括但不限于SJG-136衍生物，诸如在美国专利号8697688和9242013和美国公开号20140286970中描述的。

在一些实施方案中，有效载荷包括Akt抑制剂。在一些情况下，Akt抑制剂包括ipatasertib(GDC-0068)或其衍生物。

在一些实施方案中，有效载荷包括聚合酶抑制剂，包括但不限于聚合酶II抑制剂诸如a-鹅膏菌素和聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)抑制剂。示例性PARP抑制剂包括但不限于Iniparib(BSI 201)、他拉唑帕尼(BMN-673)、奥拉帕尼(AZD-2281)、奥拉帕尼、鲁卡帕尼(AG014699、PF-01367338)、维利帕尼(ABT-888)、CEP 9722、MK 4827、BGB-290或3-氨基苯甲酰胺。

在一些实施方案中，有效载荷包括可检测的部分。示例性可检测的部分包括荧光染料；酶；基底；化学发光部分；特异性结合部分诸如链霉抗生物素、抗生物素蛋白或生物素；或放射性同位素。

在一些实施方案中，有效载荷包括免疫调节剂。有用的免疫调节剂包括阻断激素对肿瘤作用的抗激素和抑制细胞因子产生、下调自体抗原表达或掩盖MHC抗原的免疫抑制剂。代表性的抗激素包括抗雌激素，包括例如它莫西芬、雷洛昔芬、抑制4(5)-咪唑的芳香酶、4-羟基它莫昔芬、曲沃昔芬、keoxifene、LY 117018、奥那司酮(onapnstone)和托瑞米芬；和抗雄激素诸如氟他胺、尼鲁米特、比卡鲁胺、亮丙瑞林和戈舍瑞林；和抗肾上腺剂。阐释性免疫抑制剂包括但不限于2-氨基-6-芳基-5-取代的嘧啶、硫唑嘌呤、环磷酰胺、溴隐亭、达那唑、氨苯砜、戊二醛、针对MHC抗原和MHC片段的抗独特型抗体、环孢菌素A、类固醇诸如糖皮质激素、链激酶或雷帕霉素。

在一些实施方案中，有效载荷包括免疫调节剂。示例性免疫调节剂包括但不限于gancyclovier、依那西普、他克莫司、西罗莫司、伏环孢素、环孢菌素、雷帕霉素、环磷酰胺、咪唑硫嘌呤、吗替麦考酚酯(mycophenolgate mofetil)、甲氨蝶呤、糖皮质激素及其类似物、黄嘌呤、干细胞生长因子、淋巴毒素、造血因子、肿瘤坏死因子(TNF)(例如TNFα)、白细胞介素(例如，白细胞介素-1(IL-1)、IL-2、IL-3、IL-6、IL-10、IL-12、IL-18和IL-21)、集落刺激因子(例如，粒细胞集落刺激因子(G-CSF)和粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF))、干扰素(例如干扰素-α、干扰素-β、干扰素-γ)、被称为“S1因子”的干细胞生长因子、促红细胞生成素和血小板生成素或其组合。

在一些实施方案中，有效载荷包括免疫毒素。免疫毒素包括但不限于蓖麻毒蛋白、放射性核素、商陆抗病毒蛋白、假单胞菌外毒素A、白喉毒素、蓖麻毒蛋白A链、真菌毒素诸如局限曲菌素和磷脂酶。一般而言，参见“Chimeric Toxins”，Olsnes和Pihl，Pharmac.Ther.15:355-381(1981)和“Monoclonal Antibodies for Cancer Detectionand Therapy,”eds.Baldwin和Byers，第159-179、224-266页，Academic Press(1985)。

在一些情况中，有效载荷包括核酸聚合物。在一些实施方案中，核酸聚合物包括短干扰核酸(siNA)、短干扰RNA(siRNA)、双链RNA(dsRNA)、微RNA(miRNA)、短发夹RNA(shRNA)、反义寡核苷酸。在其他情况中，核酸聚合物包括编码，例如细胞毒素蛋白或肽或细胞凋亡触发蛋白或肽的mRNA。示例性细胞毒素蛋白或肽包括细菌细胞毒素诸如α-孔形成毒素(例如，来自大肠杆菌的溶细胞素A)、β-孔形成毒素(例如，α-溶血素、PVL-潘顿瓦伦丁杀白细胞毒素、气溶素、梭菌ε-毒素、产气荚膜梭菌肠毒素)、二元毒素(炭疽热毒素、水肿毒素、肉毒梭菌C2毒素、螺状梭菌毒素(C spirofome toxin)、产气荚膜梭菌(C.perfringens)iota毒素、艰难梭菌细胞致死毒素(A和B))、朊病毒、巴拉波任(parasporin)、胆固醇依赖性溶细胞素(例如，肺炎球菌溶血素)、小孔形成毒素(例如，短杆菌肽A)、蓝藻毒素(例如，微囊藻毒素、节球藻素)、血毒素、神经毒素(例如，肉毒杆菌神经毒素)、细胞毒素、霍乱毒素、白喉毒素、假单胞菌外毒素A、破伤风毒素或免疫毒素(伊达比星、蓖麻毒蛋白A、CRM9、商陆抗病毒蛋白、DT)。示例性凋亡触发蛋白或肽包括凋亡蛋白酶激活因子-1(Apaf-1)、细胞色素-c、半胱天冬酶起始蛋白(CASP2、CASP8、CASP9、CASP10)、凋亡诱导因子(AIF)、p53、p73、p63、Bcl-2、Bax、颗粒酶B、聚ADP核糖聚合酶(PARP)和P 21-激活激酶2(PAK2)。在一些情况中，核酸聚合物包括核酸诱饵。在一些情况中，核酸诱饵是蛋白质结合核酸的模拟物，诸如基于RNA的蛋白质结合模拟物。示例性核酸诱饵包括反式激活区(TAR)诱饵和Rev响应元件(RRE)诱饵。

在一些情况下，有效载荷是适配体。适配体是结合至特定靶分子的小寡核苷酸或肽分子。示例性核酸适配体包括DNA适配体、RNA适配体或XNA适配体，其是包括一种或多种非天然核苷酸的RNA和/或DNA适配体。示例性核酸适配体包括ARC19499(Archemix Corp.)、REG1(Regado Biosciences)和ARC1905(Ophthotech)。

按照本文所述的实施方案的核酸任选地包括天然存在的核酸，或一种或多种核苷酸类似物或具有与天然存在的核酸不同的结构。例如，2’-修饰包括卤基(halo)、烷氧基和烯丙氧基基团。在一些实施方案中，2’-OH基团被选自H、OR、R、卤基、SH、SR、NH₂、NHR、NR₂或CN的基团取代，其中R是C₁-C₆烷基、烯基或炔基，并且卤基是F、Cl、Br或I。修饰的连接的示例包括硫代磷酸酯和5’-N-亚磷酰胺连接。

按照本文所述的实施方案利用具有各种不同核苷酸类似物、修饰的骨架或非天然存在的核苷间(internucleoside)连接的核酸。在一些情况下，核酸包括天然核苷(即腺苷、胸苷、鸟苷、胞苷、尿苷、脱氧腺苷、脱氧胸苷、脱氧鸟苷和脱氧胞苷)或修饰的核苷。修饰的核苷酸的示例包括碱基修饰的核苷(例如，阿糖胞苷、肌苷、异鸟嘌呤核苷、水粉蕈素、假尿苷、2,6-二氨基嘌呤、2-氨基嘌呤、2-硫胸苷、3-脱氮-5-氮杂胞苷、2’-脱氧尿苷、3-硝基吡咯、4-甲基吲哚、4-硫尿苷、4-硫胸苷、2-氨基腺苷、2-硫胸苷、2-硫尿苷、5-溴胞苷、5-碘尿苷、肌苷、6-氮杂尿苷、6-氯嘌呤、7-脱氮杂腺苷、7-脱氮鸟苷、8-氮杂腺苷、8-叠氮腺苷、苯并咪唑、M1-甲基腺苷、吡咯并嘧啶、2-氨基-6-氯嘌呤、3-甲基腺苷、5-丙炔基胞苷、5-丙炔基尿苷、5-溴尿苷、5-氟尿苷、5-甲基胞苷、7-脱氮腺苷、7-脱氮鸟苷、8-氧代腺苷、8-氧代鸟苷、O(6)-甲基鸟嘌呤和2-硫胞苷)、化学或生物修饰的碱基(例如，甲基化碱基)、修饰的糖(例如，2’-氟核糖、2’-氨基核糖、2’-叠氮核糖、2’-O-甲基核糖、L-对映体核苷阿拉伯糖和己糖)、修饰的磷酸根基团(例如，硫代磷酸酯和5’-N-亚磷酰胺连接)及其组合。用于核酸化学合成的天然和修饰的核苷酸单体容易获得。在一些情况下，包含这种修饰的核酸相对于仅由天然存在的核苷酸组成的核酸显示出改善的性质。在一些实施方案中，利用本文所述的核酸修饰以减少和/或防止核酸酶(例如核酸外切酶、核酸内切酶等)的消化。例如，可以通过在一条或两条链的3’端处包括核苷酸类似物以减少消化来稳定核酸的结构。

不同的核苷酸修饰和/或骨架结构可能存在于核酸的不同位置。这样的修饰包括吗啉、肽核酸(PNA)、甲基膦酸核苷酸、硫醇膦酸核苷酸、2’-氟N3 P5’-亚磷酰胺、1’,5’-脱水己糖醇核酸(HNA)或其组合。

缀合化学

在一些情况下，有效载荷通过天然连接缀合至本文所述的抗LRIG1抗体。在一些情况下，缀合是如在以下中描述的：Dawson等“Synthesis of proteins by native chemicalligation,”Science 1994,266,776 779；Dawson等“Modulation of Reactivity inNative Chemical Ligation through the Use of Thiol Additives,”J.Am.Chem.Soc.1997,119,4325-4329；Hackeng等“Protein synthesis by nativechemical ligation:Expanded scope by using straightforward methodology.,”Proc.Natl.Acad.Sci.USA 1999,96,10068-10073；或Wu等“Building complexglycopeptides:Development of a cysteine-free native chemical ligationprotocol,”Angew.Chem.Int.Ed.2006,45,4116-4125。在一些情况下，缀合是如美国专利号8,936,910中描述的。

在一些情况下，通过利用“无痕”偶联技术(Philochem)的定向位点方法将有效载荷缀合至本文所述的抗LRIG1抗体。在一些情况下，“无痕”偶联技术利用结合部分上的N-端1,2-氨基硫醇基团，然后将其与含有醛基的聚核酸分子缀合。(参见Casi等，“Site-specific traceless coupling of potent cytotoxic drugs to recombinantantibodies for pharmacodelivery,”JACS134(13):5887-5892(2012))。

在一些情况下，通过利用并入结合部分的非天然氨基酸的定向位点方法将有效载荷缀合至本文所述的抗LRIG1抗体。在一些情况下，非天然氨基酸包括对乙酰苯基丙氨酸(pAcPhe)。在一些情况下，pAcPhe的酮基选择性地偶联至烷氧基-胺衍生的缀合部分以形成肟键。(参见Axup等，“Synthesis of site-specific antibody-drug conjugates usingunnatural amino acids,”PNAS 109(40):16101-16106(2012))。

在一些情况下，通过利用酶催化过程的定向位点方法将有效载荷缀合至本文所述的抗LRIG1抗体。在一些情况下，定向位点方法利用SMARTag^TM技术(Redwood)。在一些情况下，SMARTag^TM技术包括在醛标签存在下通过甲酰甘氨酸生成酶(FGE)通过氧化过程从半胱氨酸生成甲酰甘氨酸(FGly)残基，随后将FGly经肼基-Pictet-Spengler(HIPS)连接缀合至alkylhydrain官能化的聚核酸分子。(参见Wu等，“Site-specific chemical modificationof recombinant proteins produced in mammalian cells by using the geneticallyencoded aldehyde tag,”PNAS 106(9):3000-3005(2009)；Agarwal等，“A Pictet-Spengler ligation for protein chemical modification,”PNAS 110(1):46-51(2013))。

在一些情况下，酶催化的工艺包括微生物转谷氨酰胺酶(mTG)。在一些情况下，利用微生物转谷氨酰胺酶催化的工艺将有效载荷缀合至抗LRIG1抗体。在一些情况下，mTG催化识别序列内谷氨酰胺的酰胺侧链与官能化聚核酸分子的伯胺之间形成的共价键的形成。在一些情况下，mTG是从莫巴链霉菌(Streptomyces mobarensis)产生的。(参见Strop等，“Location matters:site of conjugation modulates stability andpharmacokinetics of antibody drug conjugates,”Chemistry and Biology 20(2)161-167(2013))。

在一些情况下，有效载荷通过如PCT公开号WO2014/140317中描述的方法缀合至抗LRIG1抗体，该方法利用序列特异性转肽酶并通过引用以其整体借此清楚地并入。

在一些情况中，有效载荷通过如美国专利公开号2015/0105539和2015/0105540中描述的方法缀合至本文所述的抗LRIG1抗体。

连接体

在一些情况下，以上描述的连接体包括天然或合成的聚合物，其由支链或非支链单体的长链和/或二维或三维的单体交联网络组成。在一些情况中，连接体包括多糖、木质素、橡胶或聚环氧烷(polyalkylene oxide)(例如，聚乙二醇)。

在一些情况下，连接体包括但不限于α-二羟基聚乙二醇、ω-二羟基聚乙二醇、可生物降解的内酯基聚合物，例如聚丙烯酸、聚乳酸(PLA)、聚(乙醇酸)(PGA)、聚丙烯、聚苯乙烯、聚烯烃、聚酰胺、聚腈基丙烯酸酯、聚酰亚胺、聚乙烯对苯二甲酸酯(polyethylenterephthalat)(PET、PETG)、聚对苯二甲酸乙二醇酯(polyethyleneterephthalate)(PETE)、聚四亚甲基二醇(PTG)或聚氨酯以及其混合物。如本文使用的，混合物指在相同化合物中使用不同聚合物以及指嵌段共聚物。在一些情况下，嵌段共聚物是这样的聚合物，其中聚合物的至少一个部分由另一聚合物的单体构成。在一些情况中，连接体包括聚环氧烷。在一些情况中，连接体包括PEG。在一些情况中，连接体包括聚乙烯酰亚胺(PEI)或羟乙基淀粉(HES)。

在一些情况下，聚环氧烷(例如，PEG)是多分散或单分散化合物。在一些情况下，多分散材料包括不同分子量的材料的分散分布，其特征在于平均重量(重均)大小和分散度。在一些情况中，单分散PEG包括一种大小的分子。在一些实施方案中，连接体是多分散或单分散聚环氧烷(例如，PEG)并且指示的分子量代表聚环氧烷，例如，PEG分子的分子量的平均。

在一些实施方案中，连接体包含聚环氧烷(例如，PEG)并且聚环氧烷(例如，PEG)的分子量是约200、300、400、500、600、700、800、900、1000、1100、1200、1300、1400、1450、1500、1600、1700、1800、1900、2000、2100、2200、2300、2400、2500、2600、2700、2800、2900、3000、3250、3350、3500、3750、4000、4250、4500、4600、4750、5000、5500、6000、6500、7000、7500、8000、10,000、12,000、20,000、35,000、40,000、50,000、60,000或100,000Da。

在一些实施方案中，聚环氧烷(例如，PEG)是离散的PEG，其中离散的PEG是包括不只一个重复环氧乙烷单元的聚合的PEG。在一些情况中，离散的PEG(dPEG)包括2至60、2至50或2至48个重复环氧乙烷单元。在一些情况中，dPEG包括约2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、22、24、26、28、30、35、40、42、48、50或更多个重复环氧乙烷单元。在一些情况中，dPEG包括约2或更多个重复环氧乙烷单元。在一些情况下，dPEG是由纯的(例如，约95％、98％、99％或99.5％)起始材料以逐步方式合成为单分子量化合物。在一些情况下，dPEG具有特定的分子量，而不是平均分子量。在一些情况下，本文所述的dPEG是来自Quanta Biodesign,LMD的dPEG。

在一些情况中，连接体是离散的PEG，任选地包括2至60、2至50或2至48个重复环氧乙烷单元。在一些情况下，连接体包括包含约2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、22、24、26、28、30、35、40、42、48、50或更多个重复环氧乙烷单元的dPEG。在一些情况下，连接体是来自Quanta Biodesign,LMD的dPEG。

在一些实施方案中，连接体是多肽连接体。在一些情况下，多肽连接体包括至少2、3、4、5、6、7、8、10、15、20、25、30、35、40、45、50、60、70、80、90、100或更多个氨基酸残基。在一些情况下，多肽连接体包括至少2、3、4、5、6、7、8或更多个氨基酸残基。在一些情况下，多肽连接体包括至多2、3、4、5、6、7、8或更少个氨基酸残基。在一些情况下，多肽连接体是可切割的多肽连接体(例如，酶促地或化学地)。在一些情况下，多肽连接体是非可切割的多肽连接体。在一些情况中，多肽连接体包括Val-Cit(缬氨酸-瓜氨酸)、Gly-Gly-Phe-Gly、Phe-Lys、Val-Lys、Gly-Phe-Lys、Phe-Phe-Lys、Ala-Lys、Val-Arg、Phe-Cit、Phe-Arg、Leu-Cit、Ile-Cit、Trp-Cit、Phe-Ala、Ala-Leu-Ala-Leu或Gly-Phe-Leu-Gly。在一些实施方案中，多肽连接体包括肽诸如：Val-Cit(缬氨酸-瓜氨酸)、Gly-Gly-Phe-Gly、Phe-Lys、Val-Lys、Gly-Phe-Lys、Phe-Phe-Lys、Ala-Lys、Val-Arg、Phe-Cit、Phe-Arg、Leu-Cit、Ile-Cit、Trp-Cit、Phe-Ala、Ala-Leu-Ala-Leu或Gly-Phe-Leu-Gly。在一些情况下，多肽连接体包括L-氨基酸、D-氨基酸或L-和D-氨基酸二者的混合物。

在一些情况中，连接体包括同型双功能(homobifuctional)连接体。示例性同型双功能连接体包括但不限于Lomant试剂二硫代双(琥珀酰亚胺基丙酸酯)DSP、3’3’-二硫代双(磺基琥珀酰亚胺基丙酸酯(DTSSP)、双琥珀酰亚胺基辛二酸酯(DSS)、双(磺基琥珀酰亚胺基)辛二酸酯(BS)、双琥珀酰亚胺基酒石酸酯(DST)、双磺基琥珀酰亚胺基酒石酸酯(磺基DST)、乙二醇双(琥珀酰亚胺基琥珀酸酯)(EGS)、双琥珀酰亚胺基戊二酸酯(DSG)、N,N’-双琥珀酰亚胺基碳酸酯(DSC)、己二酰亚胺二甲酯(DMA)、庚二亚氨酸二甲酯(DMP)、二甲基辛二亚酰胺化物(DMS)、二甲基-3,3’-二硫代双丙酰亚胺酯(DTBP)、1,4-二-3’-(2’-吡啶基二硫基)丙酰胺基)丁烷(DPDPB)、双马来酰亚胺己烷(BMH)、含芳基卤化物的化合物(DFDNB)(诸如例如1,5-二氟-2,4-二硝基苯或1,3-二氟-4,6-二硝基苯、4,4’-二氟-3,3’-二硝基苯砜(DFDNPS))、双-[β-(4-叠氮基水杨酰胺)乙基]二硫化物(BASED)、甲醛、戊二醛、1,4-丁二醇缩水甘油醚、己二酸二酰肼、碳酰肼、邻甲苯胺、3,3’-二甲基联苯胺、联苯胺、α,α’-对二氨基二苯、二碘-对二甲苯磺酸、N,N’-亚乙基-双(碘乙酰胺)或N,N’-六亚甲基-双(碘乙酰胺)。

在一些实施方案中，连接体包括异型双功能连接体。示例性异型双功能连接体包括但不限于胺反应性和巯基交联剂，诸如N-琥珀酰亚胺基3-(2-吡啶基二硫)丙酸酯(sPDP)、长链N-琥珀酰亚胺基3-(2-吡啶基二硫)丙酸酯(LC-sPDP)、水溶性长链N-琥珀酰亚胺基3-(2-吡啶基二硫)丙酸酯(磺基-LC-sPDP)、琥珀酰亚胺基氧羰基-α-甲基-α-(2-吡啶基二硫)甲苯(sMPT)、磺基琥珀酰亚胺基-6-[α-甲基-α-(2-吡啶基二硫)甲苯胺]己酸酯(磺基-LC-sMPT)、琥珀酰亚胺基-4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸酯(sMCC)、磺基琥珀酰亚胺基-4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧酸酯(磺基-sMCC)、间马来酰亚胺苯甲酰基-N-羟基琥珀酰亚胺酯(MBs)、间马来酰亚胺苯甲酰基-N-羟基磺基琥珀酰亚胺酯(磺基-MBs)、N-琥珀酰亚胺基(4-碘乙酰基)氨基苯甲酸酯(sIAB)、磺基琥珀酰亚胺基(4-碘乙酰基)氨基苯甲酸酯(磺基-sIAB)、琥珀酰亚胺基-4-(对马来酰亚胺苯基)丁酸酯(sMPB)、磺基琥珀酰亚胺基-4-(对马来酰亚胺苯基)丁酸酯(磺基-sMPB)、N-(γ-马来酰亚胺丁酰氧基)琥珀酸酰亚胺酯(GMB)、N-(γ-马来酰亚胺丁氧基)磺基琥珀酰亚胺酯(磺基-GMB)、琥珀酰亚胺基6-((碘乙酰基)氨基)己酸酯(sIAX)、琥珀酰亚胺基6-[6-(((碘乙酰基)氨基)己酰基)氨基]己酸酯(sIAXX)、琥珀酰亚胺基4-(((碘乙酰)氨基)甲基)环己烷-1-羧酸酯(sIAC)、琥珀酰亚胺基6-(((((4-碘乙酰)氨基)甲基)环己烷-1-羰基)氨基)己酸酯(sIACX)、对硝基苯基碘乙酸酯(NPIA)、羰基反应性和巯基反应性交联剂(诸如4-(4-N-马来酰亚胺苯基)丁酸酰肼(MPBH)、4-(N-马来酰亚胺甲基)环己烷-1-羧基-酰肼-8(M₂C₂H)、3-(2-吡啶基二硫)丙酰基酰肼(PDPH))、胺反应性和光反应性交联剂(诸如N-羟基琥珀酰亚胺基-4-叠氮基水杨酸(NHs-AsA)、N-羟基磺基琥珀酰亚胺基-4-叠氮基水杨酸(磺基-NHs-AsA)、磺基琥珀酰亚胺基-(4-叠氮基水杨酰胺基)己酸酯(磺基-NHs-LC-AsA)、磺基琥珀酰亚胺基-2-(对-叠氮基水杨酰胺基)乙基-1,3’-二硫代丙酸酯(sAsD)、N-羟基琥珀酰亚胺基-4-叠氮苯甲酸酯(HsAB)、N-羟基磺基琥珀酰亚胺基-4-叠氮基苯甲酸酯(磺基-HsAB)、N-琥珀酰亚胺基-6-(4’-叠氮基-2’-硝基苯氨基)己酸酯(sANPAH)、磺基琥珀酰亚胺基-6-(4’-叠氮基-2’-硝基苯氨基)己酸酯(磺基-sANPAH)、N-5-叠氮基-2-硝基苯甲酰氧基琥珀酰亚胺(ANB-NOs)、磺基琥珀酰亚胺基-2-(间叠氮基-邻硝基苯甲酰胺)-乙基-1,3’-二硫丙酸酯(sAND)、N-琥珀酰亚胺基-4(4-叠氮苯基)1,3’-二硫丙酸酯(sADP)、N-磺基琥珀酰亚胺基(4-叠氮苯基)-1,3’-二硫丙酸酯(磺基-sADP)、磺基琥珀酰亚胺基4-(对叠氮苯基)丁酸酯(磺基-sAPB)、磺基琥珀酰亚胺基2-(7-叠氮基-4-甲基香豆素-3-乙酰胺)乙基-1,3’-二硫丙酸酯(sAED)、磺基琥珀酰亚胺基7-叠氮基-4-甲基香豆素-3-乙酸酯(磺基-sAMCA)、对硝基苯基重氮丙酮酸酯(ρNPDP)、对硝基苯基-2-重氮-3,3,3-三氟丙酸酯(PNP-DTP))、巯基反应性和光反应性交联剂(诸如1-(对叠氮水杨酰胺)-4-(碘乙酰胺)丁烷(AsIB)、N-[4-(对叠氮水杨酰胺)丁基]-3’-(2’-吡啶基二硫)丙酰胺(APDP)、二苯酮-4-碘乙酰胺)、二苯酮-4-马来酰亚胺羰基反应性和光反应性交联剂(诸如对叠氮苯甲酰肼(ABH))、羧酸酯反应性和光反应性交联剂(诸如4-(对叠氮基水杨酰胺)丁胺(AsBA))和精氨酸-反应性和光反应性交联剂(诸如对叠氮苯基乙二醛(APG))。

在一些实施方案中，连接体包括苯甲酸基团或其衍生物。在一些情况下，苯甲酸基团或其衍生物包括对氨基苯甲酸(PABA)。在一些情况下，苯甲酸基团或其衍生物包括γ-氨基丁酸(GABA)。

在一些实施方案中，连接体包括以任何组合的马来酰亚胺基团、肽部分和/或苯甲酸基团中的一种或多种。在一些实施方案中，连接体包括马来酰亚胺基团、肽部分和/或苯甲酸基团的组合。在一些情况下，马来酰亚胺基团是马来酰亚胺己酰基(mc)。在一些情况下，肽基团是val-cit。在一些情况下，苯甲酸基团是PABA。在一些情况下，连接体包括mc-val-cit基团。在一些情况下，连接体包括val-cit-PABA基团。在其他情况下，连接体包括mc-val-cit-PABA基团。

在一些实施方案中，连接体是自毁连接体(self-immolative linker)或自消除连接体。在一些情况下，连接体是自毁连接体。在其他情况下，连接体是自消除连接体(例如，环化自消除连接体)。在一些情况下，连接体包括在美国专利号9,089,614或PCT公开号WO2015038426中描述的连接体。

在一些实施方案中，连接体为树突型连接体。在一些情况下，树突型连接体包括分支的，多功能连接体部分。在一些情况下，树突型连接体包括PAMAM树枝状聚合物。

在一些实施方案中，连接体是无痕连接体或其中切割后不留下与抗体或载荷的连接体部分(例如，原子或连接体基团)的连接体。示例性无痕连接体包括但不限于锗连接体、硅连接体、硫连接体、硒连接体、氮连接体、磷连接体、硼连接体、铬连接体或苯酰肼连接体。在一些情况下，连接体是如Hejesen等，“A traceless aryl-triazene linker for DNA-directed chemistry,”Org Biomol Chem 11(15):2493-2497(2013)中描述的无痕芳基-三氮烯连接体。在一些实施方案中，连接体是Blaney等，“Traceless solid-phase organicsynthesis,”Chem.Rev.102:2607-2024(2002)中描述的无痕连接体。在一些实施方案中，连接体是如美国专利号6,821,783中描述的无痕连接体。

药物组合物

在一些实施方案中，本文公开的抗LRIG1抗体进一步配制成药物组合物。在一些情况下，药物组合物被配制用于通过多种施用途径向受试者施用，施用途径包括但不限于肠胃外(例如，静脉内、皮下、肌内、动脉内、皮内、腹膜内、玻璃体内、脑内或脑室内)、口服、鼻内、口腔、直肠或经皮施用途径。在一些情况下，本文所述的药物组合物被配制用于肠胃外(例如，静脉内、皮下、肌内、动脉内、皮内、腹膜内、玻璃体内、脑内或脑室内)施用。在一些情况下，本文所述的药物组合物被配制用于口服施用。在其他情况下，本文所述的药物组合物被配制用于鼻内施用。

如本文所用，“药学上可接受的”具有根据本说明书所理解的其简单且普通的含义，并且是指这样的载体、赋形剂和/或稳定剂，其对于以所采用的剂量和浓度暴露于其中的细胞或哺乳动物是无毒的或具有可接受的毒性水平。本文所用的“药学上可接受的”“稀释剂”“赋形剂”和/或“载体”具有根据说明书所理解的它们的简单且普通的含义，并旨在包括与对人、猫、狗或其他脊椎动物宿主施用相容的任何和所有溶剂、分散介质、包衣、抗细菌和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等。典型地，药学上可接受的稀释剂、赋形剂和/或载体是由联邦、州政府的监管机构或其他监管机构批准的，或在美国药典或其他公认的药典中列出的用于动物(包括人)和非人哺乳动物(诸如猫和狗)的稀释剂、赋形剂和/或载体。术语稀释剂、赋形剂和/或“载体”可以指与药物组合物一起施用的稀释剂、佐剂、赋形剂或媒介(vehicle)。这样的药物稀释剂、赋形剂和/或载体可以是无菌液体，诸如水和油，包括石油、动物、植物或合成来源的那些无菌液体。水、盐水溶液以及含水右旋糖和甘油溶液可以用作液体稀释剂、赋形剂和/或载体，特别是对于可注射溶液。合适的药物稀释剂和/或赋形剂包括淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽、米、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、滑石粉、氯化钠、脱脂奶粉、甘油、丙烯、乙二醇、水、乙醇等。生理上可接受的载体的非限制性实例是pH缓冲水溶液。生理上可接受的载体还可以包括下列中的一者或多者：抗氧化剂(诸如抗坏血酸)、低分子量(小于约10个残基)多肽、蛋白质(诸如血清白蛋白)、明胶、免疫球蛋白、亲水聚合物(诸如聚乙烯吡咯烷酮)、氨基酸、碳水化合物(诸如葡萄糖、甘露糖或糊精)、螯合剂(诸如EDTA)、糖醇(诸如甘露醇或山梨醇)、成盐抗衡离子(诸如钠)以及非离子表面活性剂(诸如

聚乙二醇(PEG)和

)。如果需要，组合物还可以含有少量的润湿剂、填充剂、乳化剂或pH缓冲液。这些组合物可以采取溶液、悬液、乳液、缓释制剂等形式。制剂应适合施用方式。

具有所需性质的另外赋形剂包括但不限于防腐剂、佐剂、稳定剂、溶剂、缓冲液、稀释剂、增溶剂、去污剂、表面活性剂、螯合剂、抗氧化剂、醇、酮、醛、乙二胺四乙酸(EDTA)、柠檬酸、盐、氯化钠、碳酸氢钠、磷酸钠、硼酸钠、柠檬酸钠、氯化钾、磷酸钾、硫酸镁糖、右旋糖、果糖、甘露糖、乳糖、半乳糖、蔗糖、山梨醇、纤维素、血清、氨基酸、聚山梨酯20、聚山梨酯80、脱氧胆酸钠、牛磺脱氧胆酸钠、硬脂酸镁、辛基苯酚乙氧基化物、苄索氯铵、硫柳汞、明胶、酯、醚、2-苯氧乙醇、尿素或维生素，或它们的任何组合。一些赋形剂可以是生产过程中的残余量或污染物，其包括但不限于血清、白蛋白、卵清蛋白、抗生素、灭活剂、甲醛、戊二醛、β-丙内酯、明胶、细胞碎片、核酸、肽、氨基酸或生长培养基组分或其任何组合。赋形剂的量可以在组合物中以如下百分比存在，即，约、至少、至少约、不超过或不超过约0％、0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、95％、100％w/w或由上述数字中的任何两个定义的范围内的任何重量百分比。

术语“药学上可接受的盐”具有根据说明书理解的其简单且普通的含义，并且包括组合物或赋形剂的相对无毒的无机和有机酸或碱加成盐，其包括但不限于止痛剂、治疗剂、其他材料等。药学上可接受的盐的实例包括衍生自无机酸(诸如盐酸和硫酸)的那些药学上可接受的盐，和衍生自有机酸(诸如乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸等)的那些药学上可接受的盐。用于形成盐的合适无机碱的实例包括氨、钠、锂、钾、钙、镁、铝、锌等的氢氧化物、碳酸盐和碳酸氢盐。盐也可以与合适的有机碱形成，有机碱包括无毒且足够强以形成这样的盐的有机碱。例如，这样的有机碱的类别可以包括但不限于单烷基胺、二烷基胺和三烷基胺(包括甲胺、二甲胺和三乙胺)；单羟基烷基胺、二羟基烷基胺或三羟基烷基胺(包括单乙醇胺、二乙醇胺和三乙醇胺)；氨基酸(包括甘氨酸、精氨酸和赖氨酸)；胍；N-甲基氨基葡萄糖；N-甲基葡糖胺；L-谷氨酰胺；n-甲基哌嗪；吗啉；乙二胺；N-苄基苯乙胺；三羟甲基氨基乙烷。

适当的制剂取决于所选择的施用途径。配制以及施用本文所述化合物的技术是本领域技术人员已知的。本领域存在多种施用化合物的技术，这些技术包括但不限于肠内、口服、直肠、局部、舌下、颊、耳内、硬膜外、表皮、气雾、胃肠外递送，包括肌内、皮下、动脉内、静脉内、门静脉内(intraportal)、关节内、皮内、腹膜内、髓内注射、鞘内、直接心室内、腹膜内、鼻内或眼内注射。药物组合物通常会根据特定的预期施用途径进行定制。

如本文所用，“载体”具有根据说明书所理解的其简单且普通的含义，并且是指促进化合物通过、递送和/或并入细胞、组织和/或身体器官的化合物、颗粒、固体、半固体、液体或稀释剂。

如本文所用，“稀释剂”具有根据说明书所理解的其简单且普通的含义，并且是指药物组合物中没有药理活性但可能是药物必需或期望的成分。例如，稀释剂可以用于增加质量太小而无法制造和/或施用的强效药物的体积。它也可以是用于溶解通过注射、摄入或吸入施用的药物的液体。本领域中稀释剂的常见形式是缓冲水溶液，诸如但不限于模拟人血液组成的磷酸盐缓冲盐水。

在一些实施方案中，药物制剂包括但不限于水性液体分散体、自乳化分散体、固体溶液、脂质体分散体、气雾剂、固体剂型、粉剂、速释制剂、控释制剂、快速熔融制剂、片剂、胶囊、丸剂、延迟释放制剂、延长释放制剂、脉冲释放制剂、多颗粒制剂(例如，纳米颗粒制剂)以及混合速释和控释制剂。

在一些情况下，药物组合物进一步包括pH调节剂或缓冲剂，其包括酸(诸如乙酸、硼酸、柠檬酸、乳酸、磷酸和盐酸)；碱(诸如氢氧化钠、磷酸钠、硼酸钠、柠檬酸钠、乙酸钠、乳酸钠和三羟甲基氨基甲烷)；和缓冲剂(诸如柠檬酸盐/右旋糖、碳酸氢钠和氯化铵)。这样的酸、碱和缓冲剂以将组合物的pH维持在可接受范围内所需的量包括在内。

在一些情况下，药物组合物包括一种或多种盐，其量为使组合物的渗透压达到可接受范围所需的量。这样的盐包括具有钠、钾或铵阳离子和氯根、柠檬酸根、抗坏血酸根、硼酸根、磷酸根、碳酸氢根、硫酸根、硫代硫酸根或亚硫酸氢根阴离子的盐；合适的盐包括氯化钠、氯化钾、硫代硫酸钠、亚硫酸氢钠和硫酸铵。

在一些情况下，药物组合物进一步包括稀释剂，其用于稳定化合物，因为它们可以提供更稳定的环境。溶解在缓冲溶液中的盐(也可提供pH控制或维持)在本领域中用作稀释剂，其包括但不限于磷酸盐缓冲盐水溶液。在一些情况下，稀释剂增加组合物的体积(bulk)，以促进压缩(compression)或为胶囊填充的均匀混合产生足够的体积。这样的化合物可以包括，例如，乳糖、淀粉、甘露醇、山梨醇、右旋糖、微晶纤维素(诸如

)；磷酸氢钙，二水合磷酸二钙；磷酸三钙、磷酸钙；无水乳糖、喷雾干燥乳糖；预胶化淀粉、可压缩糖(诸如

(Amstar))；甘露醇、羟丙基甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素乙酸酯硬脂酸酯、蔗糖基稀释剂、制造糖果的糖；一元硫酸钙一水合物(monobasic calcium sulfatemonohydrate)、硫酸钙二水合物；乳酸钙三水合物、葡萄糖结合剂；水解谷物固体、直链淀粉；粉状纤维素、碳酸钙；甘氨酸、高岭土；甘露醇、氯化钠；肌醇、膨润土等。

治疗性方案

在一些实施方案中，本文公开的抗LRIG1抗体被施用用于治疗性应用。在一些实施方案中，抗LRIG1抗体每天一次、每天两次、每天三次或更多次施用。抗LRIG1抗体日常、每天、每隔一天、每周五天、每周一次、每隔一周、每月两周、每月三周、每月一次、每月两次、每月三次或更长施用。抗LRIG1抗体施用至少1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月、18个月、2年、3年或更长。

在患者状态确实改善的情况下，根据医生的判断，继续给予抗LRIG1抗体的施用；可替选地，正在施用的抗LRIG1抗体的剂量被暂时减少或暂时暂停一段时间长度(即“休药期”)。在一些实施方案中，休药期的长度在2天和1年之间变化，包括仅作为示例，2天、3天、4天、5天、6天、7天、10天、12天、15天、20天、28天、35天、50天、70天、100天、120天、150天、180天、200天、250天、280天、300天、320天、350天或365天。在休药期期间的剂量减少为10％-100％，包括，仅作为示例，10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或100％。

一旦患者的病症出现改善，必要时施用维持剂量。随后，由于症状的作用，将施用的剂量或频率或两者降低至维持改善的疾病、障碍或病症的水平。

在一些实施方案中，对应于这种量的给定试剂的量取决于诸如具体化合物、疾病的严重程度、需要治疗的受试者或宿主的特征(例如，体重)的因素，但是然而，根据围绕病例的具体情况以本领域已知的方式常规地确定，包括例如正施用的特定药剂、施用途径和正被治疗的受试者或宿主。在一些实施方案中，所需剂量方便地以单一剂量或作为同时(或在短时间内)或以适当间隔，例如作为每天两个、三个、四个或更多个子剂量(sub-dose)施用的分开剂量提供。

前述范围仅是建议性的，因为关于个体治疗方案的变量数量很大，并且与这些推荐值的相当大的偏移并不少见。这种剂量取决于许多变量而改变，不限于使用的化合物的活性、待治疗的疾病或病症、施用方式、个体受试者的要求、正治疗的疾病或病症的严重性，以及从业者的判断。

在一些实施方案中，这种治疗方案的毒性和治疗功效通过细胞培养或实验动物中的标准药物程序确定，包括但不限于LD50(对50％群体致死的剂量)和ED50(在50％的群体中治疗有效的剂量)的确定。毒性作用与治疗作用之间的剂量比是治疗指数，并且用LD50和ED50之间的比表达。优选展示出高治疗指数的化合物。从细胞培养试验和动物研究中获得的数据用于制定一系列用于人的剂量。这种化合物的剂量优选地位于以最小毒性包括ED50的循环浓度范围内。剂量在该范围内变化，这取决于所采用的剂型和所利用的施用途径。

试剂盒/制品

在某些实施方案中，本文公开了与本文所述的一种或多种组合物和方法使用的试剂盒和制品。这种试剂盒包括载体、包装或容器，其被隔开以容纳一个或多个容器，例如小瓶、管等，每个容器包括用于本文所述的方法的独立元件之一。合适的容器包括，例如瓶子、小瓶、注射器和试管。在一些实施方案中，容器由各种材料诸如玻璃或塑料形成。

本文提供的制品含有包装材料。药物包装材料的示例包括但不限于泡罩包装、瓶子、管、袋、容器、瓶子和任何适用于选定制剂和预期施用和治疗方式的包装材料。

例如，容器包括本文公开的抗LRIG1抗体、用于产生本文所述的一种或多种抗体的宿主细胞和/或包括编码本文所述抗体的核酸分子的载体。这种试剂盒任选地包括与其在本文所述的方法中的使用相关的识别说明或标签或指令。

试剂盒典型地包括列出内容和/或使用说明的标签，以及具有使用说明的包装插页。通常还将包括一组说明。

在一个实施方案中，标签在容器上或与容器相关。在一个实施方案中，当形成标签的字母、数字或其他字符被附着、模制或蚀刻到容器本身中时，标签位于容器上；当标签存在于也容纳容器的贮器或载体中时，标签与容器相关，例如作为包装插页。在一个实施方案中，标签用于指示内容物将用于特定治疗应用。标签还指示诸如在本文所述的方法中使用内容物的指导。

在某些实施方案中，药物组合物存在于包含一种或多种含有本文提供的化合物的单位剂型的包装或分配器装置中。例如，包装含有金属或塑料箔，诸如泡罩包装。在一个实施方案中，包装或分配器装置附有施用说明。在一个实施方案中，包装或分配器还附有与容器相关联的通知，该通知以管理药品的制造、使用或销售的政府机构规定的形式，该通知反映了该机构对用于人或兽医施用的药物形式的批准。例如，这种通知是美国食品和药物管理局批准的用于处方药物标签或批准的产品插页。在一个实施方案中，还制备含有在相容的药物载体中配制的本文提供的化合物的组合物，将其置于合适的容器中，并且标记用于治疗指定病症。

实施例

提供这些实施例仅仅是为了说明的目的，而不是为了限制本文提供的权利要求的范围。

实施例1.鉴定具有和不具有LRIG1-VISTA阻断活性的LRIG1-结合抗体

为了鉴定具有阻断LRIG1和VISTA组装能力的LRIG1结合抗体，在小鼠中开展了免疫活动。每隔7天给Balb/C、FVB和CD-1F小鼠接种50ug与连接体间隔的6-组氨酸标签LRIG1-ECD-His(R&D系统，目录#8504-LR)融合的分离的LRIG1-胞外结构域蛋白，并与TLR激动剂佐剂混合物(50μg MPL、20μg CpG、10μg Poly(I:C)和10μg R848)组合，重复3次，然后将用单独50ug LRIG1-ECD-His的接种皮下施用至腹股沟、颈后部和尾部部位底(base)以及飞节和腹膜内部位。按照IACUC方案处死动物，并取脾、股骨和淋巴结(腋窝、副腋窝、纵隔、腹股沟浅层、髂、骶骨和腘)。使用2个无菌磨砂玻璃片在具有15mL DMEM的组织培养培养皿中获得免疫化的淋巴结(LN)、脾和骨髓细胞的单细胞悬液。使用配有18号针头的5mL注射器通过端盖冲洗(end-cap flushing)从股骨中提取骨髓。以1200RPM离心5分钟，将来自3只动物的细胞制成颗粒沉淀，重新悬浮于10mL DMEM(GIBCO 10564-011)中，并通过血细胞计数器计数来计数有核细胞。以1200RPM将细胞制成颗粒沉淀，并将其重新悬浮在SC-缓冲液(PBS、2％FBS和1mM EDTA)中，并使用EasySepTM小鼠CD138阳性选择试剂盒(StemCellTechnologies)按照制造商推荐的方案分离浆细胞。以1200RPM离心5分钟，将富集的CD138阳性细胞制成颗粒沉淀，将其重新悬浮在50mL电融合缓冲液(Eppendorf 940-00-220-6)中，并计数。另外，以1200RPM离心5分钟，将SP2/0-mIL6骨髓瘤细胞(ATCC CRL2016)制成颗粒沉淀，将其重新悬浮在50mL电融合缓冲液中，并计数。骨髓瘤细胞和CD138阳性浆细胞以1:1的比例合并，用电融合缓冲液将体积扩大至50mL，以1200RPM离心5分钟使细胞制成颗粒沉淀，然后弃去上清液。在电融合缓冲液中洗涤并制成颗粒沉淀的重复步骤之后，将细胞重新悬浮在电融合缓冲液中至10x10⁶细胞/ml的浓度，将至多9mL的细胞悬液加入到BTX电融合室中，并用800V电融合方案融合细胞。将融合细胞静置5分钟，转移到含有40mL培养基MM(DMEM、15％FBS、1％戊二醛和1％Pen/Strep)的组织培养皿中，在37C、8％CO₂下孵育1小时，用移液管重新悬浮，以1200RPM离心5分钟制成颗粒沉淀，重新悬浮在ClonaCell HY液体HAT选择培养基(StemCell Technologies)中，并置于96孔组织培养平底板中。10天后，对上清液取样，并通过ELISA法评估其与分离的LRIG1 ECD肽的结合。将50μl在PBS中稀释的5ug/ml链霉亲和素加入到96孔板(Nunc-Immuno MaxiSorp 439454)的每个孔中，在2-8℃下孵育过夜，弃去上清液，并将50μl重新悬浮在稀释剂(含0.5％BSA的PBS)中的0.45ug/mL生物素-LRIG1 ECD(R&D系统Cat 8504，内部(in house)生物素化)加入到每个孔中进行45分钟，弃去上清液，并用具有0.05％Tween20的磷酸盐缓冲盐水洗涤板。向每个孔中加入50μl的1:5稀释的杂交瘤上清液进行1小时，然后用PBS/0.05％Tween20连续5次300μl洗涤，之后将在50μl稀释剂中1:3000稀释的与辣根过氧化物酶(Novex A16090)缀合的山羊抗小鼠Fc特异性抗体添加到每个孔中，持续1小时，然后用PBS/0.05％Tween20连续5次300μl洗涤。洗涤后，向每个孔中加入50μl ABTS(Novex#00-202-4)进行20-30分钟，然后在405nm吸光度下用分光光度计(分子器件)读取。

评估了阳性评分的孔阻断LRIG1和VISTA缔合的能力。为了鉴定具有阻断LRIG1和VISTA相互作用能力的LRIG1靶向抗体，在存在上述LRIG1-免疫杂交瘤上清液或不存在抗体的情况下孵育纯化的LRIG1和VISTA蛋白，并通过ELISA评估蛋白相互作用。将与HIS标签(R&D Systems)融合的纯化的人LRIG1胞外结构域在磷酸盐缓冲盐水(PBS)(Corning)中稀释至3μg/ml的浓度，并向96孔ELISA板(Thermo Fisher，44-2404-21)的每个孔中加入100μl。在将板在4℃孵育过夜后，用300μl每孔0.05％TWEEN(VWR)的PBS(PBST)洗涤板三次。然后在室温下每孔用200μl的2％牛血清白蛋白(BSA)(Sigma)的PBST将板封闭一小时，同时轻轻摇动。然后，去除2％BSA的PBST，并向孔中加入稀释至3.3ug/mL的50μl杂交瘤上清液。将板在室温下孵育10分钟，同时轻轻摇动。然后，每孔加入100ul的50nM寡聚VISTA的100ul PBS缓冲液。VISTA寡聚化是通过Klickmer形成进行的。简言之，将5nM Klickmer(Immudex)与200nM hVISTA-Fc-Avi-生物素的PBS孵育，并孵育1小时。将板在室温下孵育1小时，同时轻轻摇动。此后，每孔用300μl PBST洗涤板三次，然后向每孔中加入100μl的抗生物素蛋白-HRP(1:1000)(Jackson ImmunoResearch)，并在室温下孵育板30分钟，同时轻轻摇动。此后，每孔用300μl PBST洗涤板三次。然后，向每个孔中加入100μl TMB基底(FisherScientific，34029)。用每孔50μl的1M HCl(VWR)终止反应。使用分光光度计(MolecularDevices)在450nm的吸光度下读取板。LRIG1-VISTA相互作用的阻断百分比计算为无抗体样品的每个实验样品中获得的信号减去背景信号的分数(fraction)。

鉴定了在1.1ug/mL的浓度下具有阻断LRIG1与VISTA结合的能力的几种hLRIG1结合抗体，如图1所示，它们包括802.3H4.2G3，其99％抑制LRIG1-VISTA结合。同样，鉴定了具有90％-99％抑制LRIG1-VISTA结合的能力的单克隆抗体802.4H12.2D2、802.4H12.2C3、802.2F4.2C7、802.1H3.2A4、802.4B6.2E11和802.4H12.2A9。此外，鉴定了具有80％-90％抑制LRIG1-VISTA结合的能力的单克隆抗体，鉴定了802.3D4.2D4、802.4C12.3C5、802.2F11.2B6、802.2B7.2D9和802.2B7.2F9，其中IMT300也以这个范围阻断LRIG1-VISTA相互作用。此外，鉴定了具有50-80％抑制LRIG1-VISTA结合的能力的单克隆抗体：802.5G6.2B11、802.3D5.2G4、802.4B6.2F6、802.5G6.2B8、802.3E6.2F9、802.3H4.2D11、802.3E6.2H9、802.4H6.2D11和802.3B10.2C10。最后，鉴定了具有20％或更小抑制LRIG1-VISTA结合的能力的单克隆抗体，其包括802.3G8.2F7和802.2F4.2A3。

实施例2.具有和不具有VISTA-LRIG1阻断活性的LRIG1靶向抗体与LRIG1的不同表位结合

为了鉴定具有和不具有VISTA-LRIG1阻断活性的LRIG1抗体结合的表位，构建了代表LRIG1各部分的20个氨基酸肽的库，并通过ELISA评估了结合LRIG1抗体的能力。向96孔ELISA板(Thermo Fisher，44-2404-21)的孔中加入至少2ug/ml hLRIG1肽的50μl PBS或0.1ug/ml全长人LRIG1蛋白(R&D系统公司)的100μl PBS。在将板在4℃孵育过夜后，用每孔300μl PBST洗涤板三次。然后在室温下用每孔200μl的2％BSA的PBST将板封闭一小时，同时轻轻摇动。之后，取出2％BSA的PBST，并向孔中加入100μl的0.1ug/ml抗体的2％BSA的PBST。将板在室温下孵育1小时，同时轻轻摇动，然后用每孔300μl PBST洗涤3次。其后，向孔中加入100μl的抗小鼠IgG-HRP(1:4000)(Jackson ImmunoResearch公司)或抗大鼠IgG HRP(1:4000)(Jackson ImmunoResearch公司)。将板在室温下孵育30分钟，同时轻轻摇动，然后用每孔300μl PBST洗涤3次。然后向每个孔中加入100μl的TMB基底(Fisher Scientific，34029)。每孔用50μl的1M HCl(VWR)终止反应。使用板读取器(Molecular Devices)在450nm吸光度下读取板，并且大于0.25OD的信号被视为肽结合的证据。

在多个位置观察到LRIG1结合抗体与肽阵列的结合，其中大部分结合在肽65-71中观察到(见图2和图4)。许多具有最强LRIG1-VISTA阻断活性的抗体未能显著结合任何肽，后者的观察结果表明这些抗体可能结合非线性表位。观察到抗体802.2H4.2G3结合肽52(对应于LRIG1 545-654)，该抗体在0.37ug/ml时99.8％阻断LRIG1-VISTA缔合。因此，与这个肽序列的结合可以用于鉴定具有破坏LRIG1和VISTA相互作用能力的抗体。具有与C-末端肽70和/或71结合的稍弱但仍强的LRG1-VISTA阻断活性的抗体(802.4H12.2A9、802.3D4.2D4、802.2B7.2F9和IMT300)，其指示与肽70和71结合的抗体，有助于预测单克隆抗体破坏LRIG1-VISTA相互作用的能力。此外，观察到更适度(modest)至差的阻断LRIG1-VISTA结合能力的抗体结合65、66、67、68和/或69、(802.5G6.2B11、802.3D5.2G4、802.5G6.2B8、802.3E6.2F9、802.3H4.2D11、802.3E6.2H9、802.4H6.2D11、802.3E6.2H9、802.4H6.2D11、802.3G8.2A3和802.4H6.2G12)，这可能表明这个区域与LRIG1的对LRIG1-VISTA结合是重要的区域相邻，并表明这些肽用于鉴定在阻断LRIG1和VISTA组装方面活性有所降低的抗体。最后，观察到具有差的LRIG1-VISTA阻断活性的抗体802.3G8.2F7与N-末端肽6结合。总之，这些数据支持LRIG1的C-末端肽(尤其是肽70和71)前瞻性鉴定具有阻断LRIG1-VISTA结合能力的抗体的能力。

实施例3.具有阻断活性的LRIG1-VISTA抗体竞争与LRIG1的结合

为了确定具有LRIG1-VISTA阻断活性的LRIG1结合抗体是否与LRIG1分子的相同或重叠区域结合，进行了抗体结合binning测定，以评估抗体同时结合LRIG1的能力。将胺反应性探针加载到Gator生物传感器(Probe Life，Palo Alto，CA)上，在dH20中平衡60秒，浸入100μl EDC0.2M/NHS 0.05M活化缓冲液中30秒，然后浸入20ug/ul人LRIG1-His的10mMNaOAc缓冲液(pH 5)的溶液中，直至结合饱和，并在pH 8.5的1M乙醇胺中猝灭300秒。LRIG1-His加载后，将顶端(tip)浸入20ug/mL饱和抗体中，然后依次浸入5ug/mL竞争抗体中。

如图3所示，在竞争研究中，hLRIG1-His顶端与任何单个抗体的饱和阻止了与同一抗体的结合。不同抗体对之间的竞争揭示了几种不与任何其他抗体竞争结合的抗体IMT300、802.3E6.2F9、802.2F4.2A3、802.2B7.2D9、802.1H3.2A4、802.3H4.2G3、802.4H12.2D2和802.486.2F8，其分别包括bin1、2、3、4、5、6、7和11。重要的是，具有最强阻断LRIG1-VISTA组装能力的抗体802.3H4.2G3定义了bin6，而第二强阻断抗体802.4H12.2D2定义了bin7。因此，bin6和bin7均可以用于鉴定具有阻断LRIG1和VISTA结合能力的其他抗体。在确实表现出竞争结合特征的抗体中，802.3D4.2D4、802.4H12.2A9、802.5G6.2B8和802.2B7.2F9相互竞争结合LRIG1，定义了bin8。这些抗体中的每一者还与肽70和肽71结合，表明包括这些序列的共有氨基酸序列对于这个bin的定义是必需的。此外，这些抗体均表现出中等程度的阻断LRIG1和VISTA组装的能力，表明用bin8中的抗体，抗体与LRIG1的竞争结合将有助于鉴定具有中等程度阻断LRIG1和VISTA结合能力的抗体。同样，抗体802.5G6.2B11和802.3G8.2A3表现出相互竞争结合LRIG1，定义为bin9。这些抗体结合肽69，表明包括这个序列的氨基酸序列对于这个bin的定义是必需的。此外，这些抗体均表现出中等程度的阻断LRIG1和VISTA组装的能力，表明用bin9中的抗体，抗体与LRIG1的竞争结合将有助于鉴定具有中等程度阻断LRIG1和VISTA结合能力的抗体。此外，抗体802.4B6.2E11和802.4C12.3C5表现出相互竞争结合LRIG1，定义为bin10。这些抗体均未显著结合任何LRIG1肽，表明这个bin的结合表位是非线性的。bin 10中的抗体表现出中等程度的阻断LRIG1和VISTA组装的能力，表明用bin 10中的抗体，抗体与LRIG1的竞争结合将有助于鉴定具有中等程度阻断LRIG1和VISTA结合的能力的抗体。最后，一些抗体未能以这种形式与LRIG1结合，表明这种形式的特殊性不利于抗体结合，这些抗体包括802.2F4.2C7、802.2F11.2B6、802.4H6.2G12和802.3G8.2F7。

实施例4.LRIG1表达测定

流式细胞术用于检测人外周血单核细胞(PBMC)上的LRIG1表达。将人PBMC接种在涂有hCD3和hCD28(Biolegend)的板上5天以进行激活。用200μg/ml hIgG在冰上将激活或新鲜的PBMC阻断10分钟，然后与绵羊抗hLRIG1多克隆抗体(R&D Systems)或同种型对照抗体在冰上孵育20分钟，然后与抗绵羊IgG APC抗体(JacksonImmuno Research)在冰上孵育20分钟。洗涤后，使用MACSquant分析仪10(Miltenyi Biosci)分析染色的细胞。

实施例5.LRIG1功能-混合淋巴细胞反应(MLR)

将来自一个供体的人M2巨噬细胞与来自另一个供体的人CD4 T细胞混合，并用10ug/ml对照IgG、hPD1阻断抗体EH12(BD bioscience)、hLRIG1 mAb IMT300(mab4)或hPD1与LRIG1抗体的组合治疗8天。使用eBioscience的ELISA试剂盒检测分泌型IFNγ。

实施例6.VISTA-LRIG1结合表面的鉴定

为了鉴定介导LRIG1与VISTA之间相互作用的残基，使用了交联质谱方法。将5μl纯化的3.2μM LRIG1和5μl纯化的0.6μM VISTA混合并提供以使用K200 MALDI MS分析试剂盒(CovalX)进行交联。将9μl的混合物与1μl的K200稳定剂试剂(2mg/ml)混合，并在室温下孵育。孵育时间(180分钟)过后，如对照实验一样，制备样品用于MALDI分析。结晶后立即通过高质量MALDI分析对样品进行分析。分析时采用了以下参数：质谱仪：线性正模式，离子源1：20kV，离子源2：17kV，透镜：12kV，脉冲离子提取：400ns HM4，增益电压：3.14kV，加速电压:20kV。鉴定出交联的LRIG1-VISTA产品，其中MH+＝207.154kDa。用胰蛋白酶、糜蛋白酶、ASPN-N、弹性蛋白酶或嗜热菌蛋白酶消化样品，并测定了具有LRIG1和VISTA氨基酸序列的交联的肽。

如图5A-5C所示，发现LRIG1氨基酸245-260附近的残基与VISTA氨基酸68-92附近的残基交联。这些氨基酸位于每个分子的暴露区域，表明这些区域参与LRIG1和VISTA的蛋白-蛋白相互作用。值得注意的是，由MALDI-MS确定的氨基酸246-260处的LRIG1结合界面不同于由LRIG1-VISTA阻断抗体802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11和802.5G6.2B8结合的表位。这些抗体的结合可能会引起构象转变，从而导致结构重排，从而影响结合。由LRIG1氨基酸245-260介导的独特结合界面的鉴定表明，结合除了肽52定义的区域的抗体也可破坏LRIG1和VISTA的相互作用。

实施例7.LRIG1-VISTA阻断降低了人源化小鼠肿瘤模型中的肿瘤生长

为了评估LRIG1-VISTA阻断在癌症环境中的效用，采用植入人免疫系统并带有人SCLC肿瘤的小鼠。所有动物研究均按照美国农业部的动物福利法(9CFR第1、2和3部分)(如适用)进行，并由IACUC批准的动物协议涵盖。简而言之，NOD.Cg-Prkdc^scid Il2rg^tm1Sug Tg(SV40/HTLV-IL3,CSF2)10-7Jic/JicTac小鼠，也称为NOG-EXL小鼠(Taconic公司)，被植入人CD34+造血干细胞，并用装配有26G 7/8(0.5mm X 22mm)针头的冷冻1ml Luer-lok注射器将与100μl总体积的等体积Cultrex ECM(Trevigen)混合的50,000人小细胞肺癌(SCLC)患者来源的异种移植(PDX)模型LU5173肿瘤细胞皮下注射到后肋。每周监测动物的明显肿瘤或者外观或行为的任何变化，每天监测显示任何发病或死亡迹象的小鼠。使用以下公式计算肿瘤体积：(最长直径*最短直径²)/2。当平均肿瘤体积达到60-100mm³时，将12只小鼠随机分配到各自的治疗组，治疗组接受以下中任一项：A)HuIgG 4对照抗体，BIW x 3周，10mg/kg；b)抗PD1 OPDIVO抗体，BIW x 3周，10mg/kg或；c)抗LRIG1抗体BIW x 3周，10mg/kg。

虽然本文已经示出并描述了本发明的优选实施方式，但是对于本领域技术人员来说，显然这样的实施方案仅仅是作为示例提供的。在不脱离本发明的情况下，本领域技术人员现在可以想到许多变化、改变和替换。应当理解，在实践本发明时可以采用本文描述的本发明实施方式的各种可选方案。旨在所附权利要求书限定本发明的范围，并由此涵盖这些权利要求书范围内的方法和结构及其等同物。

序列表

<110> 真和制药有限公司

<120> 抗体以及阻断VISTA及其结合配偶体的相互作用

<130> IMMUT.014WO

<150> US 62/893,482

<151> 2019-08-29

<160> 254

<170> PatentIn 版本3.5

<210> 1

<211> 4812

<212> DNA

<213> 智人

<220>

<221> 起始密码子

<222> (15)..(17)

<220>

<221> 终止密码子

<222> (3294)..(3296)

<400> 1

gcgctccaga caagatggcg cggccggtcc ggggagggct cggggccccg cgccgctcgc 60

cttgccttct ccttctctgg ctgcttttgc ttcggctgga gccggtgacc gccgcggccg 120

gcccgcgggc gccctgcgcg gccgcctgca cttgcgctgg ggactcgctg gactgcggtg 180

ggcgcgggct ggctgcgttg cccggggacc tgccctcctg gacgcggagc ctaaacctga 240

gttacaacaa actctctgag attgaccctg ctggttttga ggacttgccg aacctacagg 300

aagtgtacct caataataat gagttgacag cggtaccatc cctgggcgct gcttcatcac 360

atgtcgtctc tctctttctg cagcacaaca agattcgcag cgtggagggg agccagctga 420

aggcctacct ttccttagaa gtgttagatc tgagtttgaa caacatcacg gaagtgcgga 480

acacctgctt tccacacgga ccgcctataa aggagctcaa cctggcaggc aatcggattg 540

gcaccctgga gttgggagca tttgatggtc tgtcacggtc gctgctaact cttcgcctga 600

gcaaaaacag gatcacccag cttcctgtaa gagcattcaa gctacccagg ctgacacaac 660

tggacctcaa tcggaacagg attcggctga tagagggcct caccttccag gggctcaaca 720

gcttggaggt gctgaagctt cagcgaaaca acatcagcaa actgacagat ggggccttct 780

ggggactgtc caagatgcat gtgctgcacc tggagtacaa cagcctggta gaagtgaaca 840

gcggctcgct ctacggcctc acggccctgc atcagctcca cctcagcaac aattccatcg 900

ctcgcattca ccgcaagggc tggagcttct gccagaagct gcatgagttg gtcctgtcct 960

tcaacaacct gacacggctg gacgaggaga gcctggccga gctgagcagc ctgagtgtcc 1020

tgcgtctcag ccacaattcc atcagccaca ttgcggaggg tgccttcaag ggactcagga 1080

gcctgcgagt cttggatctg gaccataacg agatttcggg cacaatagag gacacgagcg 1140

gcgccttctc agggctcgac agcctcagca agctgactct gtttggaaac aagatcaagt 1200

ctgtggctaa gagagcattc tcggggctgg aaggcctgga gcacctgaac cttggaggga 1260

atgcgatcag atctgtccag tttgatgcct ttgtgaagat gaagaatctt aaagagctcc 1320

atatcagcag cgacagcttc ctgtgtgact gccagctgaa gtggctgccc ccgtggctaa 1380

ttggcaggat gctgcaggcc tttgtgacag ccacctgtgc ccacccagaa tcactgaagg 1440

gtcagagcat tttctctgtg ccaccagaga gtttcgtgtg cgatgacttc ctgaagccac 1500

agatcatcac ccagccagaa accaccatgg ctatggtggg caaggacatc cggtttacat 1560

gctcagcagc cagcagcagc agctccccca tgacctttgc ctggaagaaa gacaatgaag 1620

tcctgaccaa tgcagacatg gagaactttg tccacgtcca cgcgcaggac ggggaagtga 1680

tggagtacac caccatcctg cacctccgtc aggtcacttt cgggcacgag ggccgctacc 1740

aatgtgtcat caccaaccac tttggctcca cctattcaca taaggccagg ctcaccgtga 1800

atgtgttgcc atcattcacc aaaacgcccc acgacataac catccggacc accaccatgg 1860

cccgcctcga atgtgctgcc acaggtcacc caaaccctca gattgcctgg cagaaggatg 1920

gaggcacgga tttccccgct gcccgtgagc gacgcatgca tgtcatgccg gatgacgacg 1980

tgtttttcat cactgatgtg aaaatagatg acgcaggggt ttacagctgt actgctcaga 2040

actcagccgg ttctatttca gctaatgcca ccctgactgt cctagagacc ccatccttgg 2100

tggtcccctt ggaagaccgt gtggtatctg tgggagaaac agtggccctc caatgcaaag 2160

ccacggggaa ccctccgccc cgcatcacct ggttcaaggg ggaccgcccg ctgagcctca 2220

ctgagcggca ccacttgacc cctgacaacc agctcctggt ggttcagaac gtggtggcag 2280

aggatgcggg ccgatatacc tgtgagatgt ccaacaccct gggcacggag cgagctcaca 2340

gccagctgag cgtcctgccc gcagcaggct gcaggaagga tgggaccacg gtaggcatct 2400

tcaccattgc tgtcgtgagc agcatcgtcc tgacgtcact ggtctgggtg tgcatcatct 2460

accagaccag gaagaagagt gaagagtaca gtgtcaccaa cacagatgaa accgtcgtgc 2520

caccagatgt tccaagctac ctctcttctc aggggaccct ttctgaccga caagaaaccg 2580

tggtcaggac cgagggtggc cctcaggcca atgggcacat tgagagcaat ggtgtgtgtc 2640

caagagatgc aagccacttt ccagagcccg acactcacag cgttgcctgc aggcagccaa 2700

agctctgtgc tgggtctgcg tatcacaaag agccgtggaa agcgatggag aaagctgaag 2760

ggacacctgg gccacataag atggaacacg gtggccgggt cgtatgcagt gactgcaaca 2820

ccgaagtgga ctgttactcc aggggacaag ccttccaccc ccagcctgtg tccagagaca 2880

gcgcacagcc aagtgcgcca aatggcccgg agccgggtgg gagtgaccaa gagcattctc 2940

cacatcacca gtgcagcagg actgccgctg ggtcctgccc cgagtgccaa gggtcgctct 3000

accccagtaa ccacgataga atgctgacgg ctgtgaagaa aaagccaatg gcatctctag 3060

atgggaaagg ggattcttcc tggactttag caaggttgta tcacccggac tccacagagc 3120

tacagcctgc atcttcatta acttcaggca gtccagagcg cgcggaagcc cagtacttgc 3180

ttgtttccaa tggccacctc cccaaagcat gtgacgccag tcccgagtcc acgccactga 3240

caggacagct ccccgggaaa cagagggtgc cactgctgtt ggcaccaaaa agctaggttt 3300

tgtctacctc agttcttgtc ataccaatct ctacgggaaa gagaggtagg agaggctgcg 3360

aggaagcttg ggttcaagcg tcactcatct gtacatagtt gtaactccca tgtggagtat 3420

cagtcgctca caggacttgg atctgaagca cagtaaacgc aagaggggat ttgtgtacaa 3480

aaggcaaaaa aagtatttga tatcattgta cataagagtt ttcagagatt tcatatatat 3540

cttttacaga ggctatttta atctttagtg catggttaac agaaaaaaat tatacaattt 3600

tgacaatatt atttttcgta tcaggttgct gtttaatttt ggagggggtg gggaaatagt 3660

tctggtgcct taacgcatgg ctggaattta tagaggctac aaccacattt gttcacagga 3720

gtttttggtg cggggtggga aggatggaag gccttggatt tatattgcac ttcatagacc 3780

cctaggctgc tgtgcggtgg gactccacat gcgccggaag gagcttcagg tgagcactgc 3840

tcatgtgtgg atgcccctgc aacaggcttc cctgtctgta gagccagggg tgcaagtgcc 3900

atccacactt gcagtgaatg gcttttcctt ttaggtttaa gtcctgtctg tctgtaaggc 3960

gtagaatctg tccgtctgta aggcgtagaa tgagggttgt taatccatca caagcaaaag 4020

gtcagaacag ttaaacactg cctttcctcc tcctcttatt ttatgataaa agcaaatgtg 4080

gccttctcag tatcattcga ttgctatttg agacttttaa attaaggtaa aggctgctgg 4140

tgttggtacc tgtggatttt tctatactga tgttttcgtt ttgccaatat aatgagtatt 4200

acattggcct tgggggacag aaaggaggaa gttctgactt ttcagggcta ccttatttct 4260

actaaggacc cagagcaggc ctgtccatgc cattccttcg cacagatgaa actgagctgg 4320

gactggaaag gacagccctt gacctgggtt ctgggtataa tttgcacttt tgagactggt 4380

agctaaccat cttatgagtg ccaatgtgtc atttagtaaa acttaaatag aaacaaggtc 4440

cttcaaatgt tcctttggcc aaaagctgaa gggagttact gagaaaatag ttaacaatta 4500

ctgtcaggtg tcatcactgt tcaaaaggta agcacattta gaattttgtt cttgacagtt 4560

aactgactaa tcttacttcc acaaaatatg tgaatttgct gcttctgaga ggcaatgtga 4620

aagagggagt attactttta tgtacaaagt tatttattta tagaaatttt ggtacagtgt 4680

acattgaaaa ccatgtaaaa tattgaagtg tctaacaaat ggcattgaag tgtctttaat 4740

aaaggttcat ttataaatgt caaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa 4800

aaaaaaaaaa aa 4812

<210> 2

<211> 1093

<212> PRT

<213> 智人

<400> 2

Met Ala Arg Pro Val Arg Gly Gly Leu Gly Ala Pro Arg Arg Ser Pro

1 5 10 15

Cys Leu Leu Leu Leu Trp Leu Leu Leu Leu Arg Leu Glu Pro Val Thr

20 25 30

Ala Ala Ala Gly Pro Arg Ala Pro Cys Ala Ala Ala Cys Thr Cys Ala

35 40 45

Gly Asp Ser Leu Asp Cys Gly Gly Arg Gly Leu Ala Ala Leu Pro Gly

50 55 60

Asp Leu Pro Ser Trp Thr Arg Ser Leu Asn Leu Ser Tyr Asn Lys Leu

65 70 75 80

Ser Glu Ile Asp Pro Ala Gly Phe Glu Asp Leu Pro Asn Leu Gln Glu

85 90 95

Val Tyr Leu Asn Asn Asn Glu Leu Thr Ala Val Pro Ser Leu Gly Ala

100 105 110

Ala Ser Ser His Val Val Ser Leu Phe Leu Gln His Asn Lys Ile Arg

115 120 125

Ser Val Glu Gly Ser Gln Leu Lys Ala Tyr Leu Ser Leu Glu Val Leu

130 135 140

Asp Leu Ser Leu Asn Asn Ile Thr Glu Val Arg Asn Thr Cys Phe Pro

145 150 155 160

His Gly Pro Pro Ile Lys Glu Leu Asn Leu Ala Gly Asn Arg Ile Gly

165 170 175

Thr Leu Glu Leu Gly Ala Phe Asp Gly Leu Ser Arg Ser Leu Leu Thr

180 185 190

Leu Arg Leu Ser Lys Asn Arg Ile Thr Gln Leu Pro Val Arg Ala Phe

195 200 205

Lys Leu Pro Arg Leu Thr Gln Leu Asp Leu Asn Arg Asn Arg Ile Arg

210 215 220

Leu Ile Glu Gly Leu Thr Phe Gln Gly Leu Asn Ser Leu Glu Val Leu

225 230 235 240

Lys Leu Gln Arg Asn Asn Ile Ser Lys Leu Thr Asp Gly Ala Phe Trp

245 250 255

Gly Leu Ser Lys Met His Val Leu His Leu Glu Tyr Asn Ser Leu Val

260 265 270

Glu Val Asn Ser Gly Ser Leu Tyr Gly Leu Thr Ala Leu His Gln Leu

275 280 285

His Leu Ser Asn Asn Ser Ile Ala Arg Ile His Arg Lys Gly Trp Ser

290 295 300

Phe Cys Gln Lys Leu His Glu Leu Val Leu Ser Phe Asn Asn Leu Thr

305 310 315 320

Arg Leu Asp Glu Glu Ser Leu Ala Glu Leu Ser Ser Leu Ser Val Leu

325 330 335

Arg Leu Ser His Asn Ser Ile Ser His Ile Ala Glu Gly Ala Phe Lys

340 345 350

Gly Leu Arg Ser Leu Arg Val Leu Asp Leu Asp His Asn Glu Ile Ser

355 360 365

Gly Thr Ile Glu Asp Thr Ser Gly Ala Phe Ser Gly Leu Asp Ser Leu

370 375 380

Ser Lys Leu Thr Leu Phe Gly Asn Lys Ile Lys Ser Val Ala Lys Arg

385 390 395 400

Ala Phe Ser Gly Leu Glu Gly Leu Glu His Leu Asn Leu Gly Gly Asn

405 410 415

Ala Ile Arg Ser Val Gln Phe Asp Ala Phe Val Lys Met Lys Asn Leu

420 425 430

Lys Glu Leu His Ile Ser Ser Asp Ser Phe Leu Cys Asp Cys Gln Leu

435 440 445

Lys Trp Leu Pro Pro Trp Leu Ile Gly Arg Met Leu Gln Ala Phe Val

450 455 460

Thr Ala Thr Cys Ala His Pro Glu Ser Leu Lys Gly Gln Ser Ile Phe

465 470 475 480

Ser Val Pro Pro Glu Ser Phe Val Cys Asp Asp Phe Leu Lys Pro Gln

485 490 495

Ile Ile Thr Gln Pro Glu Thr Thr Met Ala Met Val Gly Lys Asp Ile

500 505 510

Arg Phe Thr Cys Ser Ala Ala Ser Ser Ser Ser Ser Pro Met Thr Phe

515 520 525

Ala Trp Lys Lys Asp Asn Glu Val Leu Thr Asn Ala Asp Met Glu Asn

530 535 540

Phe Val His Val His Ala Gln Asp Gly Glu Val Met Glu Tyr Thr Thr

545 550 555 560

Ile Leu His Leu Arg Gln Val Thr Phe Gly His Glu Gly Arg Tyr Gln

565 570 575

Cys Val Ile Thr Asn His Phe Gly Ser Thr Tyr Ser His Lys Ala Arg

580 585 590

Leu Thr Val Asn Val Leu Pro Ser Phe Thr Lys Thr Pro His Asp Ile

595 600 605

Thr Ile Arg Thr Thr Thr Met Ala Arg Leu Glu Cys Ala Ala Thr Gly

610 615 620

His Pro Asn Pro Gln Ile Ala Trp Gln Lys Asp Gly Gly Thr Asp Phe

625 630 635 640

Pro Ala Ala Arg Glu Arg Arg Met His Val Met Pro Asp Asp Asp Val

645 650 655

Phe Phe Ile Thr Asp Val Lys Ile Asp Asp Ala Gly Val Tyr Ser Cys

660 665 670

Thr Ala Gln Asn Ser Ala Gly Ser Ile Ser Ala Asn Ala Thr Leu Thr

675 680 685

Val Leu Glu Thr Pro Ser Leu Val Val Pro Leu Glu Asp Arg Val Val

690 695 700

Ser Val Gly Glu Thr Val Ala Leu Gln Cys Lys Ala Thr Gly Asn Pro

705 710 715 720

Pro Pro Arg Ile Thr Trp Phe Lys Gly Asp Arg Pro Leu Ser Leu Thr

725 730 735

Glu Arg His His Leu Thr Pro Asp Asn Gln Leu Leu Val Val Gln Asn

740 745 750

Val Val Ala Glu Asp Ala Gly Arg Tyr Thr Cys Glu Met Ser Asn Thr

755 760 765

Leu Gly Thr Glu Arg Ala His Ser Gln Leu Ser Val Leu Pro Ala Ala

770 775 780

Gly Cys Arg Lys Asp Gly Thr Thr Val Gly Ile Phe Thr Ile Ala Val

785 790 795 800

Val Ser Ser Ile Val Leu Thr Ser Leu Val Trp Val Cys Ile Ile Tyr

805 810 815

Gln Thr Arg Lys Lys Ser Glu Glu Tyr Ser Val Thr Asn Thr Asp Glu

820 825 830

Thr Val Val Pro Pro Asp Val Pro Ser Tyr Leu Ser Ser Gln Gly Thr

835 840 845

Leu Ser Asp Arg Gln Glu Thr Val Val Arg Thr Glu Gly Gly Pro Gln

850 855 860

Ala Asn Gly His Ile Glu Ser Asn Gly Val Cys Pro Arg Asp Ala Ser

865 870 875 880

His Phe Pro Glu Pro Asp Thr His Ser Val Ala Cys Arg Gln Pro Lys

885 890 895

Leu Cys Ala Gly Ser Ala Tyr His Lys Glu Pro Trp Lys Ala Met Glu

900 905 910

Lys Ala Glu Gly Thr Pro Gly Pro His Lys Met Glu His Gly Gly Arg

915 920 925

Val Val Cys Ser Asp Cys Asn Thr Glu Val Asp Cys Tyr Ser Arg Gly

930 935 940

Gln Ala Phe His Pro Gln Pro Val Ser Arg Asp Ser Ala Gln Pro Ser

945 950 955 960

Ala Pro Asn Gly Pro Glu Pro Gly Gly Ser Asp Gln Glu His Ser Pro

965 970 975

His His Gln Cys Ser Arg Thr Ala Ala Gly Ser Cys Pro Glu Cys Gln

980 985 990

Gly Ser Leu Tyr Pro Ser Asn His Asp Arg Met Leu Thr Ala Val Lys

995 1000 1005

Lys Lys Pro Met Ala Ser Leu Asp Gly Lys Gly Asp Ser Ser Trp

1010 1015 1020

Thr Leu Ala Arg Leu Tyr His Pro Asp Ser Thr Glu Leu Gln Pro

1025 1030 1035

Ala Ser Ser Leu Thr Ser Gly Ser Pro Glu Arg Ala Glu Ala Gln

1040 1045 1050

Tyr Leu Leu Val Ser Asn Gly His Leu Pro Lys Ala Cys Asp Ala

1055 1060 1065

Ser Pro Glu Ser Thr Pro Leu Thr Gly Gln Leu Pro Gly Lys Gln

1070 1075 1080

Arg Val Pro Leu Leu Leu Ala Pro Lys Ser

1085 1090

<210> 3

<211> 4774

<212> DNA

<213> 智人

<220>

<221> 起始密码子

<222> (142)..(144)

<220>

<221> 终止密码子

<222> (1075)..(1077)

<400> 3

gggggcgggt gcctggagca cggcgctggg gccgcccgca gcgctcactc gctcgcactc 60

agtcgcggga ggcttccccg cgccggccgc gtcccgcccg ctccccggca ccagaagttc 120

ctctgcgcgt ccgacggcga catgggcgtc cccacggccc tggaggccgg cagctggcgc 180

tggggatccc tgctcttcgc tctcttcctg gctgcgtccc taggtccggt ggcagccttc 240

aaggtcgcca cgccgtattc cctgtatgtc tgtcccgagg ggcagaacgt caccctcacc 300

tgcaggctct tgggccctgt ggacaaaggg cacgatgtga ccttctacaa gacgtggtac 360

cgcagctcga ggggcgaggt gcagacctgc tcagagcgcc ggcccatccg caacctcacg 420

ttccaggacc ttcacctgca ccatggaggc caccaggctg ccaacaccag ccacgacctg 480

gctcagcgcc acgggctgga gtcggcctcc gaccaccatg gcaacttctc catcaccatg 540

cgcaacctga ccctgctgga tagcggcctc tactgctgcc tggtggtgga gatcaggcac 600

caccactcgg agcacagggt ccatggtgcc atggagctgc aggtgcagac aggcaaagat 660

gcaccatcca actgtgtggt gtacccatcc tcctcccagg atagtgaaaa catcacggct 720

gcagccctgg ctacgggtgc ctgcatcgta ggaatcctct gcctccccct catcctgctc 780

ctggtctaca agcaaaggca ggcagcctcc aaccgccgtg cccaggagct ggtgcggatg 840

gacagcaaca ttcaagggat tgaaaacccc ggctttgaag cctcaccacc tgcccagggg 900

atacccgagg ccaaagtcag gcaccccctg tcctatgtgg cccagcggca gccttctgag 960

tctgggcggc atctgctttc ggagcccagc acccccctgt ctcctccagg ccccggagac 1020

gtcttcttcc catccctgga ccctgtccct gactctccaa actttgaggt catctagccc 1080

agctggggga cagtgggctg ttgtggctgg gtctggggca ggtgcatttg agccagggct 1140

ggctctgtga gtggcctcct tggcctcggc cctggttccc tccctcctgc tctgggctca 1200

gatactgtga catcccagaa gcccagcccc tcaacccctc tggatgctac atggggatgc 1260

tggacggctc agcccctgtt ccaaggattt tggggtgctg agattctccc ctagagacct 1320

gaaattcacc agctacagat gccaaatgac ttacatctta agaagtctca gaacgtccag 1380

cccttcagca gctctcgttc tgagacatga gccttgggat gtggcagcat cagtgggaca 1440

agatggacac tgggccaccc tcccaggcac cagacacagg gcacggtgga gagacttctc 1500

ccccgtggcc gccttggctc ccccgttttg cccgaggctg ctcttctgtc agacttcctc 1560

tttgtaccac agtggctctg gggccaggcc tgcctgccca ctggccatcg ccaccttccc 1620

cagctgcctc ctaccagcag tttctctgaa gatctgtcaa caggttaagt caatctgggg 1680

cttccactgc ctgcattcca gtccccagag cttggtggtc ccgaaacggg aagtacatat 1740

tggggcatgg tggcctccgt gagcaaatgg tgtcttgggc aatctgaggc caggacagat 1800

gttgccccac ccactggaga tggtgctgag ggaggtgggt ggggccttct gggaaggtga 1860

gtggagaggg gcacctgccc cccgccctcc ccatccccta ctcccactgc tcagcgcggg 1920

ccattgcaag ggtgccacac aatgtcttgt ccaccctggg acacttctga gtatgaagcg 1980

ggatgctatt aaaaactaca tggggaaaca ggtgcaaacc ctggagatgg attgtaagag 2040

ccagtttaaa tctgcactct gctgctcctc ccccaccccc accttccact ccatacaatc 2100

tgggcctggt ggagtcttcg cttcagagcc attcggccag gtgcgggtga tgttcccatc 2160

tcctgcttgt gggcatgccc tggctttgtt tttatacaca taggcaaggt gagtcctctg 2220

tggaattgtg attgaaggat tttaaagcag gggaggagag tagggggcat ctctgtacac 2280

tctgggggta aaacagggaa ggcagtgcct gagcatgggg acaggtgagg tggggctggg 2340

cagaccccct gtagcgttta gcaggatggg ggccccaggt actgtggaga gcatagtcca 2400

gcctgggcat ttgtctccta gcagcctaca ctggctctgc tgagctgggc ctgggtgctg 2460

aaagccagga tttggggcta ggcgggaaga tgttcgccca attgcttggg gggttggggg 2520

gatggaaaag gggagcacct ctaggctgcc tggcagcagt gagccctggg cctgtggcta 2580

cagccaggga accccacctg gacacatggc cctgcttcta agccccccag ttaggcccaa 2640

aggaatggtc cactgagggc ctcctgctct gcctgggctg ggccaggggc tttgaggaga 2700

gggtaaacat aggcccggag atggggctga cacctcgagt ggccagaata tgcccaaacc 2760

ccggcttctc ccttgtccct aggcagaggg gggtcccttc ttttgttccc tctggtcacc 2820

acaatgcttg atgccagctg ccataggaag agggtgctgg ctggccatgg tggcacacac 2880

ctgtcctccc agcactttgc agggctgagg tggaaggacc gcttaagccc aggtgttcaa 2940

ggctgctgtg agctgtgttc gagccactac actccagcct ggggacggag caaaactttg 3000

cctcaaaaca aattttaaaa agaaagaaag aaggaaagag ggtatgtttt tcacaattca 3060

tgggggcctg catggcagga gtggggacag gacacctgct gttcctggag tcgaaggaca 3120

agcccacagc ccagattccg gttctcccaa ctcaggaaga gcatgccctg ccctctgggg 3180

aggctggcct ggccccagcc ctcagctgct gaccttgagg cagagacaac ttctaagaat 3240

ttggctgcca gaccccaggc ctggctgctg ctgtgtggag agggaggcgg cccgcagcag 3300

aacagccacc gcacttcctc ctcagcttcc tctggtgcgg ccctgccctc tcttctctgg 3360

acccttttac aactgaacgc atctgggctt cgtggtttcc tgttttcagc gaaatttact 3420

ctgagctccc agttccatct tcatccatgg ccacaggccc tgcctacaac gcactaggga 3480

cgtccctccc tgctgctgct ggggaggggc aggctgctgg agccgccctc tgagttgccc 3540

gggatggtag tgcctctgat gccagccctg gtggctgtgg gctggggtgc atgggagagc 3600

tgggtgcgag aacatggcgc ctccaggggg cgggaggagc actaggggct ggggcaggag 3660

gctcctggag cgctggattc gtggcacagt ctgaggccct gagagggaaa tccatgcttt 3720

taagaactaa ttcattgtta ggagatcaat caggaattag gggccatctt acctatctcc 3780

tgacattcac agtttaatag agacttcctg cctttattcc ctcccaggga gaggctgaag 3840

gaatggaatt gaaagcacca tttggagggt tttgctgaca cagcggggac tgctcagcac 3900

tccctaaaaa cacaccatgg aggccactgg tgactgctgg tgggcaggct ggccctgcct 3960

gggggagtcc gtggcgatgg gcgctggggt ggaggtgcag gagccccagg acctgctttt 4020

caaaagactt ctgcctgacc agagctccca ctacatgcag tggcccaggg cagaggggct 4080

gatacatggc ctttttcagg gggtgctcct cgcggggtgg acttgggagt gtgcagtggg 4140

acagggggct gcaggggtcc tgccaccacc gagcaccaac ttggcccctg gggtcctgcc 4200

tcatgaatga ggccttcccc agggctggcc tgactgtgct gggggctggg ttaacgtttt 4260

ctcagggaac cacaatgcac gaaagaggaa ctggggttgc taaccaggat gctgggaaca 4320

aaggcctctt gaagcccagc cacagcccag ctgagcatga ggcccagccc atagacggca 4380

caggccacct ggcccattcc ctgggcattc cctgctttgc attgctgctt ctcttcaccc 4440

catggaggct atgtcaccct aactatcctg gaatgtgttg agagggattc tgaatgatca 4500

atatagcttg gtgagacagt gccgagatag atagccatgt ctgccttggg cacgggagag 4560

ggaagtggca gcatgcatgc tgtttcttgg ccttttctgt tagaatactt ggtgctttcc 4620

aacacacttt cacatgtgtt gtaacttgtt tgatccaccc ccttccctga aaatcctggg 4680

aggttttatt gctgccattt aacacagagg gcaatagagg ttctgaaagg tctgtgtctt 4740

gtcaaaacaa gtaaacggtg gaactacgac taaa 4774

<210> 4

<211> 311

<212> PRT

<213> 智人

<400> 4

Met Gly Val Pro Thr Ala Leu Glu Ala Gly Ser Trp Arg Trp Gly Ser

1 5 10 15

Leu Leu Phe Ala Leu Phe Leu Ala Ala Ser Leu Gly Pro Val Ala Ala

20 25 30

Phe Lys Val Ala Thr Pro Tyr Ser Leu Tyr Val Cys Pro Glu Gly Gln

35 40 45

Asn Val Thr Leu Thr Cys Arg Leu Leu Gly Pro Val Asp Lys Gly His

50 55 60

Asp Val Thr Phe Tyr Lys Thr Trp Tyr Arg Ser Ser Arg Gly Glu Val

65 70 75 80

Gln Thr Cys Ser Glu Arg Arg Pro Ile Arg Asn Leu Thr Phe Gln Asp

85 90 95

Leu His Leu His His Gly Gly His Gln Ala Ala Asn Thr Ser His Asp

100 105 110

Leu Ala Gln Arg His Gly Leu Glu Ser Ala Ser Asp His His Gly Asn

115 120 125

Phe Ser Ile Thr Met Arg Asn Leu Thr Leu Leu Asp Ser Gly Leu Tyr

130 135 140

Cys Cys Leu Val Val Glu Ile Arg His His His Ser Glu His Arg Val

145 150 155 160

His Gly Ala Met Glu Leu Gln Val Gln Thr Gly Lys Asp Ala Pro Ser

165 170 175

Asn Cys Val Val Tyr Pro Ser Ser Ser Gln Asp Ser Glu Asn Ile Thr

180 185 190

Ala Ala Ala Leu Ala Thr Gly Ala Cys Ile Val Gly Ile Leu Cys Leu

195 200 205

Pro Leu Ile Leu Leu Leu Val Tyr Lys Gln Arg Gln Ala Ala Ser Asn

210 215 220

Arg Arg Ala Gln Glu Leu Val Arg Met Asp Ser Asn Ile Gln Gly Ile

225 230 235 240

Glu Asn Pro Gly Phe Glu Ala Ser Pro Pro Ala Gln Gly Ile Pro Glu

245 250 255

Ala Lys Val Arg His Pro Leu Ser Tyr Val Ala Gln Arg Gln Pro Ser

260 265 270

Glu Ser Gly Arg His Leu Leu Ser Glu Pro Ser Thr Pro Leu Ser Pro

275 280 285

Pro Gly Pro Gly Asp Val Phe Phe Pro Ser Leu Asp Pro Val Pro Asp

290 295 300

Ser Pro Asn Phe Glu Val Ile

305 310

<210> 5

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽1

<400> 5

Ala Gly Pro Arg Ala Pro Cys Ala Ala Ala Cys Thr Cys Ala Gly Asp

1 5 10 15

Ser Leu Asp Cys

20

<210> 6

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽2

<400> 6

Cys Thr Cys Ala Gly Asp Ser Leu Asp Cys Gly Gly Arg Gly Leu Ala

1 5 10 15

Ala Leu Pro Gly

20

<210> 7

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽3

<400> 7

Gly Gly Arg Gly Leu Ala Ala Leu Pro Gly Asp Leu Pro Ser Trp Thr

1 5 10 15

Arg Ser Leu Asn

20

<210> 8

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽4

<400> 8

Asp Leu Pro Ser Trp Thr Arg Ser Leu Asn Leu Ser Tyr Asn Lys Leu

1 5 10 15

Ser Glu Ile Asp

20

<210> 9

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽5

<400> 9

Leu Ser Tyr Asn Lys Leu Ser Glu Ile Asp Pro Ala Gly Phe Glu Asp

1 5 10 15

Leu Pro Asn Leu

20

<210> 10

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽6

<400> 10

Pro Ala Gly Phe Glu Asp Leu Pro Asn Leu Gln Glu Val Tyr Leu Asn

1 5 10 15

Asn Asn Glu Leu

20

<210> 11

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽7

<400> 11

Gln Glu Val Tyr Leu Asn Asn Asn Glu Leu Thr Ala Val Pro Ser Leu

1 5 10 15

Gly Ala Ala Ser

20

<210> 12

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽8

<400> 12

Thr Ala Val Pro Ser Leu Gly Ala Ala Ser Ser His Val Val Ser Leu

1 5 10 15

Phe Leu Gln His

20

<210> 13

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽9

<400> 13

Ser His Val Val Ser Leu Phe Leu Gln His Asn Lys Ile Arg Ser Val

1 5 10 15

Glu Gly Ser Gln

20

<210> 14

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽10

<400> 14

Asn Lys Ile Arg Ser Val Glu Gly Ser Gln Leu Lys Ala Tyr Leu Ser

1 5 10 15

Leu Glu Val Leu

20

<210> 15

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽11

<400> 15

Leu Lys Ala Tyr Leu Ser Leu Glu Val Leu Asp Leu Ser Leu Asn Asn

1 5 10 15

Ile Thr Glu Val

20

<210> 16

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽12

<400> 16

Asp Leu Ser Leu Asn Asn Ile Thr Glu Val Arg Asn Thr Cys Phe Pro

1 5 10 15

His Gly Pro Pro

20

<210> 17

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽13

<400> 17

Arg Asn Thr Cys Phe Pro His Gly Pro Pro Ile Lys Glu Leu Asn Leu

1 5 10 15

Ala Gly Asn Arg

20

<210> 18

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽14

<400> 18

Ile Lys Glu Leu Asn Leu Ala Gly Asn Arg Ile Gly Thr Leu Glu Leu

1 5 10 15

Gly Ala Phe Asp

20

<210> 19

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽15

<400> 19

Ile Gly Thr Leu Glu Leu Gly Ala Phe Asp Gly Leu Ser Arg Ser Leu

1 5 10 15

Leu Thr Leu Arg

20

<210> 20

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽16

<400> 20

Gly Leu Ser Arg Ser Leu Leu Thr Leu Arg Leu Ser Lys Asn Arg Ile

1 5 10 15

Thr Gln Leu Pro

20

<210> 21

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽17

<400> 21

Leu Ser Lys Asn Arg Ile Thr Gln Leu Pro Val Arg Ala Phe Lys Leu

1 5 10 15

Pro Arg Leu Thr

20

<210> 22

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽18

<400> 22

Val Arg Ala Phe Lys Leu Pro Arg Leu Thr Gln Leu Asp Leu Asn Arg

1 5 10 15

Asn Arg Ile Arg

20

<210> 23

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽19

<400> 23

Gln Leu Asp Leu Asn Arg Asn Arg Ile Arg Leu Ile Glu Gly Leu Thr

1 5 10 15

Phe Gln Gly Leu

20

<210> 24

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽20

<400> 24

Leu Ile Glu Gly Leu Thr Phe Gln Gly Leu Asn Ser Leu Glu Val Leu

1 5 10 15

Lys Leu Gln Arg

20

<210> 25

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽21

<400> 25

Asn Ser Leu Glu Val Leu Lys Leu Gln Arg Asn Asn Ile Ser Lys Leu

1 5 10 15

Thr Asp Gly Ala

20

<210> 26

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽22

<400> 26

Asn Asn Ile Ser Lys Leu Thr Asp Gly Ala Phe Trp Gly Leu Ser Lys

1 5 10 15

Met His Val Leu

20

<210> 27

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽23

<400> 27

Phe Trp Gly Leu Ser Lys Met His Val Leu His Leu Glu Tyr Asn Ser

1 5 10 15

Leu Val Glu Val

20

<210> 28

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽24

<400> 28

His Leu Glu Tyr Asn Ser Leu Val Glu Val Asn Ser Gly Ser Leu Tyr

1 5 10 15

Gly Leu Thr Ala

20

<210> 29

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽25

<400> 29

Asn Ser Gly Ser Leu Tyr Gly Leu Thr Ala Leu His Gln Leu His Leu

1 5 10 15

Ser Asn Asn Ser

20

<210> 30

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽26

<400> 30

Leu His Gln Leu His Leu Ser Asn Asn Ser Ile Ala Arg Ile His Arg

1 5 10 15

Lys Gly Trp Ser

20

<210> 31

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽27

<400> 31

Ile Ala Arg Ile His Arg Lys Gly Trp Ser Phe Cys Gln Lys Leu His

1 5 10 15

Glu Leu Val Leu

20

<210> 32

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽28

<400> 32

Phe Cys Gln Lys Leu His Glu Leu Val Leu Ser Phe Asn Asn Leu Thr

1 5 10 15

Arg Leu Asp Glu

20

<210> 33

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽29

<400> 33

Ser Phe Asn Asn Leu Thr Arg Leu Asp Glu Glu Ser Leu Ala Glu Leu

1 5 10 15

Ser Ser Leu Ser

20

<210> 34

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽30

<400> 34

Glu Ser Leu Ala Glu Leu Ser Ser Leu Ser Val Leu Arg Leu Ser His

1 5 10 15

Asn Ser Ile Ser

20

<210> 35

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽31

<400> 35

Val Leu Arg Leu Ser His Asn Ser Ile Ser His Ile Ala Glu Gly Ala

1 5 10 15

Phe Lys Gly Leu

20

<210> 36

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽32

<400> 36

His Ile Ala Glu Gly Ala Phe Lys Gly Leu Arg Ser Leu Arg Val Leu

1 5 10 15

Asp Leu Asp His

20

<210> 37

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽33

<400> 37

Arg Ser Leu Arg Val Leu Asp Leu Asp His Asn Glu Ile Ser Gly Thr

1 5 10 15

Ile Glu Asp Thr

20

<210> 38

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽34

<400> 38

Asn Glu Ile Ser Gly Thr Ile Glu Asp Thr Ser Gly Ala Phe Ser Gly

1 5 10 15

Leu Asp Ser Leu

20

<210> 39

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽35

<400> 39

Ser Gly Ala Phe Ser Gly Leu Asp Ser Leu Ser Lys Leu Thr Leu Phe

1 5 10 15

Gly Asn Lys Ile

20

<210> 40

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽36

<400> 40

Ser Lys Leu Thr Leu Phe Gly Asn Lys Ile Lys Ser Val Ala Lys Arg

1 5 10 15

Ala Phe Ser Gly

20

<210> 41

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽37

<400> 41

Lys Ser Val Ala Lys Arg Ala Phe Ser Gly Leu Glu Gly Leu Glu His

1 5 10 15

Leu Asn Leu Gly

20

<210> 42

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽38

<400> 42

Leu Glu Gly Leu Glu His Leu Asn Leu Gly Gly Asn Ala Ile Arg Ser

1 5 10 15

Val Gln Phe Asp

20

<210> 43

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽39

<400> 43

Gly Asn Ala Ile Arg Ser Val Gln Phe Asp Ala Phe Val Lys Met Lys

1 5 10 15

Asn Leu Lys Glu

20

<210> 44

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽40

<400> 44

Ala Phe Val Lys Met Lys Asn Leu Lys Glu Leu His Ile Ser Ser Asp

1 5 10 15

Ser Phe Leu Cys

20

<210> 45

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽41

<400> 45

Leu His Ile Ser Ser Asp Ser Phe Leu Cys Asp Cys Gln Leu Lys Trp

1 5 10 15

Leu Pro Pro Trp

20

<210> 46

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽42

<400> 46

Asp Cys Gln Leu Lys Trp Leu Pro Pro Trp Leu Ile Gly Arg Met Leu

1 5 10 15

Gln Ala Phe Val

20

<210> 47

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽43

<400> 47

Leu Ile Gly Arg Met Leu Gln Ala Phe Val Thr Ala Thr Cys Ala His

1 5 10 15

Pro Glu Ser Leu

20

<210> 48

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽44

<400> 48

Thr Ala Thr Cys Ala His Pro Glu Ser Leu Lys Gly Gln Ser Ile Phe

1 5 10 15

Ser Val Pro Pro

20

<210> 49

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽45

<400> 49

Lys Gly Gln Ser Ile Phe Ser Val Pro Pro Glu Ser Phe Val Cys Asp

1 5 10 15

Asp Phe Leu Lys

20

<210> 50

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽46

<400> 50

Glu Ser Phe Val Cys Asp Asp Phe Leu Lys Pro Gln Ile Ile Thr Gln

1 5 10 15

Pro Glu Thr Thr

20

<210> 51

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽47

<400> 51

Pro Gln Ile Ile Thr Gln Pro Glu Thr Thr Met Ala Met Val Gly Lys

1 5 10 15

Asp Ile Arg Phe

20

<210> 52

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽48

<400> 52

Met Ala Met Val Gly Lys Asp Ile Arg Phe Thr Cys Ser Ala Ala Ser

1 5 10 15

Ser Ser Ser Ser

20

<210> 53

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽49

<400> 53

Thr Cys Ser Ala Ala Ser Ser Ser Ser Ser Pro Met Thr Phe Ala Trp

1 5 10 15

Lys Lys Asp Asn

20

<210> 54

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽50

<400> 54

Pro Met Thr Phe Ala Trp Lys Lys Asp Asn Glu Val Leu Thr Asn Ala

1 5 10 15

Asp Met Glu Asn

20

<210> 55

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽51

<400> 55

Glu Val Leu Thr Asn Ala Asp Met Glu Asn Phe Val His Val His Ala

1 5 10 15

Gln Asp Gly Glu

20

<210> 56

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽52

<400> 56

Phe Val His Val His Ala Gln Asp Gly Glu Val Met Glu Tyr Thr Thr

1 5 10 15

Ile Leu His Leu

20

<210> 57

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽53

<400> 57

Val Met Glu Tyr Thr Thr Ile Leu His Leu Arg Gln Val Thr Phe Gly

1 5 10 15

His Glu Gly Arg

20

<210> 58

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽54

<400> 58

Arg Gln Val Thr Phe Gly His Glu Gly Arg Tyr Gln Cys Val Ile Thr

1 5 10 15

Asn His Phe Gly

20

<210> 59

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽55

<400> 59

Tyr Gln Cys Val Ile Thr Asn His Phe Gly Ser Thr Tyr Ser His Lys

1 5 10 15

Ala Arg Leu Thr

20

<210> 60

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽56

<400> 60

Ser Thr Tyr Ser His Lys Ala Arg Leu Thr Val Asn Val Leu Pro Ser

1 5 10 15

Phe Thr Lys Thr

20

<210> 61

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽57

<400> 61

Val Asn Val Leu Pro Ser Phe Thr Lys Thr Pro His Asp Ile Thr Ile

1 5 10 15

Arg Thr Thr Thr

20

<210> 62

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽58

<400> 62

Pro His Asp Ile Thr Ile Arg Thr Thr Thr Met Ala Arg Leu Glu Cys

1 5 10 15

Ala Ala Thr Gly

20

<210> 63

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽59

<400> 63

Met Ala Arg Leu Glu Cys Ala Ala Thr Gly His Pro Asn Pro Gln Ile

1 5 10 15

Ala Trp Gln Lys

20

<210> 64

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽60

<400> 64

His Pro Asn Pro Gln Ile Ala Trp Gln Lys Asp Gly Gly Thr Asp Phe

1 5 10 15

Pro Ala Ala Arg

20

<210> 65

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽61

<400> 65

Asp Gly Gly Thr Asp Phe Pro Ala Ala Arg Glu Arg Arg Met His Val

1 5 10 15

Met Pro Asp Asp

20

<210> 66

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽62

<400> 66

Glu Arg Arg Met His Val Met Pro Asp Asp Asp Val Phe Phe Ile Thr

1 5 10 15

Asp Val Lys Ile

20

<210> 67

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽63

<400> 67

Asp Val Phe Phe Ile Thr Asp Val Lys Ile Asp Asp Ala Gly Val Tyr

1 5 10 15

Ser Cys Thr Ala

20

<210> 68

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽64

<400> 68

Asp Asp Ala Gly Val Tyr Ser Cys Thr Ala Gln Asn Ser Ala Gly Ser

1 5 10 15

Ile Ser Ala Asn

20

<210> 69

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽65

<400> 69

Gln Asn Ser Ala Gly Ser Ile Ser Ala Asn Ala Thr Leu Thr Val Leu

1 5 10 15

Glu Thr Pro Ser

20

<210> 70

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽66

<400> 70

Ala Thr Leu Thr Val Leu Glu Thr Pro Ser Leu Val Val Pro Leu Glu

1 5 10 15

Asp Arg Val Val

20

<210> 71

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽67

<400> 71

Leu Val Val Pro Leu Glu Asp Arg Val Val Ser Val Gly Glu Thr Val

1 5 10 15

Ala Leu Gln Cys

20

<210> 72

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽68

<400> 72

Ser Val Gly Glu Thr Val Ala Leu Gln Cys Lys Ala Thr Gly Asn Pro

1 5 10 15

Pro Pro Arg Ile

20

<210> 73

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽69

<400> 73

Lys Ala Thr Gly Asn Pro Pro Pro Arg Ile Thr Trp Phe Lys Gly Asp

1 5 10 15

Arg Pro Leu Ser

20

<210> 74

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽70

<400> 74

Thr Trp Phe Lys Gly Asp Arg Pro Leu Ser Leu Thr Glu Arg His His

1 5 10 15

Leu Thr Pro Asp

20

<210> 75

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽71

<400> 75

Leu Thr Glu Arg His His Leu Thr Pro Asp Asn Gln Leu Leu Val Val

1 5 10 15

Gln Asn Val Val

20

<210> 76

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽72

<400> 76

Asn Gln Leu Leu Val Val Gln Asn Val Val Ala Glu Asp Ala Gly Arg

1 5 10 15

Tyr Thr Cys Glu

20

<210> 77

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽73

<400> 77

Ala Glu Asp Ala Gly Arg Tyr Thr Cys Glu Met Ser Asn Thr Leu Gly

1 5 10 15

Thr Glu Arg Ala

20

<210> 78

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽74

<400> 78

Met Ser Asn Thr Leu Gly Thr Glu Arg Ala His Ser Gln Leu Ser Val

1 5 10 15

Leu Pro Ala Ala

20

<210> 79

<211> 20

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽75

<400> 79

His Ser Gln Leu Ser Val Leu Pro Ala Ala Gly Cys Arg Lys Asp Gly

1 5 10 15

Thr Thr Val Gly

20

<210> 80

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> LRIG肽76

<400> 80

Gly Cys Arg Lys Asp Gly Thr Thr Val Gly

1 5 10

<210> 81

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR1-H

<400> 81

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

1 5

<210> 82

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR2-H

<400> 82

Trp Ile Tyr Pro Gly Asn Val Asn Thr Lys Tyr Asn

1 5 10

<210> 83

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR3-H

<400> 83

Glu Glu Leu Gly Gly Phe Ala Tyr

1 5

<210> 84

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR4-H

<400> 84

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Phe Trp

1 5

<210> 85

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR5-H

<400> 85

Ile Tyr Pro Gly Ser Ser Ser Ala

1 5

<210> 86

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR6-H

<400> 86

Ala Arg Ser Ser Tyr Arg Tyr Ser Tyr Tyr Ser

1 5 10

<210> 87

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR7-H

<400> 87

Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr Gly

1 5

<210> 88

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR8-H

<400> 88

Ile Trp Ser Gly Gly Ser Thr

1 5

<210> 89

<211> 16

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR9-H

<400> 89

Ala Arg Asn Trp Ala Tyr Tyr Ser Asn His Tyr Tyr Val Met Asp Tyr

1 5 10 15

<210> 90

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR10-H

<400> 90

Gly Phe Thr Phe Ser Ala Ser Ala

1 5

<210> 91

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR11-H

<400> 91

Ser Asp Arg Gly Ser Ser Ser Asp

1 5

<210> 92

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR12-H

<400> 92

Ala Gly Gly Val Ser Thr Val Ile Asn Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 93

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR13-H

<400> 93

Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr Trp

1 5

<210> 94

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR14-H

<400> 94

Ile Leu Pro Gly Ser Gly Ser Thr

1 5

<210> 95

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR15-H

<400> 95

Glu Arg Glu Val Tyr Asp Asn Asp Glu Gly Ala Trp Phe Ala Asn

1 5 10 15

<210> 96

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR16-H

<400> 96

Gly Tyr Asn Phe Ile Asn Ser Trp

1 5

<210> 97

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR17-H

<400> 97

Phe Tyr Pro Gly Asn Ser Asp Thr

1 5

<210> 98

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR18-H

<400> 98

Thr Glu Leu Gly Gly Asp Tyr

1 5

<210> 99

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR19-H

<400> 99

Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly Tyr Asp

1 5

<210> 100

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR20-H

<400> 100

Ile Ser Tyr Ser Gly Tyr Thr

1 5

<210> 101

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR21-H

<400> 101

Ala Arg Asp Ser Asn Trp Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 102

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR22-H

<400> 102

Gly Phe Thr Phe Ser Ser His Ala

1 5

<210> 103

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR23-H

<400> 103

Ile Ser Asp Gly Gly Arg Tyr Thr

1 5

<210> 104

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR24-H

<400> 104

Ala Arg Asp Ala Tyr Val Ser Thr Ser Phe Ala Tyr

1 5 10

<210> 105

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR25-H

<400> 105

Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr Trp

1 5

<210> 106

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR26-H

<400> 106

Ile Arg Leu Lys Ser Glu Asn Tyr Pro Thr

1 5 10

<210> 107

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR27-H

<400> 107

Thr Gly Arg Gly Tyr Ser Asn Tyr Ala

1 5

<210> 108

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR28-H

<400> 108

Gly His Thr Phe Ser Ser Tyr Trp

1 5

<210> 109

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR29-H

<400> 109

Ile Leu Pro Gly Lys Gly Asn Thr

1 5

<210> 110

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR30-H

<400> 110

Ala Arg Asn Phe Asp Val

1 5

<210> 111

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR31-H

<400> 111

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Trp

1 5

<210> 112

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR32-H

<400> 112

Ile Asp Pro Ser Asp Ser Tyr Thr

1 5

<210> 113

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR33-H

<400> 113

Ala Arg Ala Arg Val Asp Phe Asp Tyr

1 5

<210> 114

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR34-H

<400> 114

Gly Phe Asn Ile Lys Asp Asp Tyr

1 5

<210> 115

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR35-H

<400> 115

Ile Asp Pro Glu Asn Gly Asp Thr

1 5

<210> 116

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR36-H

<400> 116

Thr Thr Gly Ser Thr Val

1 5

<210> 117

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR37-H

<400> 117

Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr Gly

1 5

<210> 118

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR38-H

<400> 118

Ile Asn Thr Tyr Ser Gly Val Pro

1 5

<210> 119

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR39-H

<400> 119

Ala Leu Thr Gly Val Leu Glu Asn

1 5

<210> 120

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR40-H

<400> 120

Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Tyr

1 5

<210> 121

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR41-H

<400> 121

Ile Ser Pro Lys Asn Gly Gly Thr

1 5

<210> 122

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR42-H

<400> 122

Ala Ser Pro Phe Tyr Asp Asp Tyr Tyr

1 5

<210> 123

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR43-H

<400> 123

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Asn

1 5

<210> 124

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR44-H

<400> 124

Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Tyr Thr

1 5

<210> 125

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR45-H

<400> 125

Ala Arg Gly Val Gly Phe Asp Tyr

1 5

<210> 126

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR46-H

<400> 126

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Gly

1 5

<210> 127

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR47-H

<400> 127

Ile Tyr Pro Gly Thr Ser Ser Thr

1 5

<210> 128

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR48-H

<400> 128

Ser Arg Ser Ser Tyr Arg Tyr Thr Tyr Tyr Ser

1 5 10

<210> 129

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR49-H

<400> 129

Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr Asp

1 5

<210> 130

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR50-H

<400> 130

Ile Tyr Pro Arg Asp Gly Thr Thr

1 5

<210> 131

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR51-H

<400> 131

Ala Arg Glu Asp Tyr Gly Ser Ser Phe His Asn

1 5 10

<210> 132

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR52-H

<400> 132

Ile Leu Pro Gly Ser Gly Arg Thr

1 5

<210> 133

<211> 15

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR53-H

<400> 133

Ala Arg Glu Ile Tyr Asp Gly His Tyr Glu Ala Trp Tyr Ala Tyr

1 5 10 15

<210> 134

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR54-H

<400> 134

Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Thr

1 5

<210> 135

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR55-H

<400> 135

Ala Arg Gly Trp Leu Leu Arg Asn Phe Asp Phe

1 5 10

<210> 136

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR56-H

<400> 136

Ile Asp Pro Asn Ser Gly Gly Thr

1 5

<210> 137

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR57-H

<400> 137

Ala Arg Leu Gly Tyr Gly Asn Pro Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 138

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR58-H

<400> 138

Gly Phe Lys Ile Lys Asp Asp Tyr

1 5

<210> 139

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR59-H

<400> 139

Ile Tyr Pro Gly Asn Ser Glu Thr

1 5

<210> 140

<211> 13

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR60-H

<400> 140

Thr Arg Pro Leu Ala Asn Trp Asp Gly Pro Phe Asp Tyr

1 5 10

<210> 141

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR61-H

<400> 141

Ile Arg Leu Lys Ser Asp Asn Tyr Ala Thr

1 5 10

<210> 142

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR62-H

<400> 142

Ile Asp Pro Glu Lys Gly Asp Thr

1 5

<210> 143

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR63-H

<400> 143

Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Ala

1 5

<210> 144

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR64-H

<400> 144

Ile Ser Asp Gly Gly Ser Tyr Thr

1 5

<210> 145

<211> 12

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR65-H

<400> 145

Ser Arg Ala Gly Ser Thr Val Val Asn Phe Gly Tyr

1 5 10

<210> 146

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR1-L

<400> 146

Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr Leu Ser

1 5 10

<210> 147

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR2-L

<400> 147

Tyr Thr Ser Ile Leu His Ser

1 5

<210> 148

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR3-L

<400> 148

Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Arg Thr

1 5

<210> 149

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR4-L

<400> 149

Gln Ser Ile Val His Ser Asn Gly Asn Thr Phe

1 5 10

<210> 150

<211> 3

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR5-L

<400> 150

Lys Val Ser

1

<210> 151

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR6-L

<400> 151

Phe Gln Gly Ser His Val Pro Leu Ser

1 5

<210> 152

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR7-L

<400> 152

Gln Ser Ile Val His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr

1 5 10

<210> 153

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR8-L

<400> 153

Phe Gln Gly Ser His Val Pro Leu Thr

1 5

<210> 154

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR9-L

<400> 154

Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Asp Gly Lys Thr Tyr

1 5 10

<210> 155

<211> 3

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR10-L

<400> 155

Gln Val Ser

1

<210> 156

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR11-L

<400> 156

Leu Gln Gly Thr Tyr Tyr Pro His Thr

1 5

<210> 157

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR12-L

<400> 157

Glu Asn Val Asp Thr Tyr

1 5

<210> 158

<211> 3

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR13-L

<220>

<221> 混合_特征

<222> (3)..(3)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<400> 158

Gly Ala Xaa

1

<210> 159

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR14-L

<400> 159

Leu Gln Gly His Lys Asp Pro Tyr Thr

1 5

<210> 160

<211> 3

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR15-L

<400> 160

Gly Ala Ser

1

<210> 161

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR16-L

<400> 161

Gly Gln Ser His Asn Tyr Pro Tyr Thr

1 5

<210> 162

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR17-L

<400> 162

Phe Gln Gly Ser His Phe Pro Trp Thr

1 5

<210> 163

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR18-L

<400> 163

Ser Ser Ile Ser Ser Ser Thr

1 5

<210> 164

<211> 3

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR19-L

<400> 164

Gly Thr Ser

1

<210> 165

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR20-L

<400> 165

Gln Gln Trp Ser Gly Tyr Pro Leu Thr

1 5

<210> 166

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR21-L

<400> 166

Ser Thr Thr Gly Ser Val His

1 5

<210> 167

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR22-L

<400> 167

Phe Gln Gly Ser His Val Pro Phe Thr

1 5

<210> 168

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR23-L

<400> 168

Gln Ser Leu Leu His Arg Asn Gly Lys Thr Tyr

1 5 10

<210> 169

<211> 3

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR24-L

<400> 169

Leu Val Ser

1

<210> 170

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR25-L

<400> 170

Phe Gln Thr Thr His Phe Pro His Thr

1 5

<210> 171

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR26-L

<400> 171

Gln Ser Ile Val His Ser Asn Gly Asn Ser Tyr

1 5 10

<210> 172

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR27-L

<400> 172

Gln Ser Ile Val Gln Ser Asn Gly Ile Thr Tyr

1 5 10

<210> 173

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR28-L

<400> 173

Glu Asp Val Asp Thr Tyr

1 5

<210> 174

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR29-L

<400> 174

Gly Gln Ser Tyr Ser Tyr Pro Trp Thr

1 5

<210> 175

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR30-L

<400> 175

Glu Asn Ile Tyr Ser Asn

1 5

<210> 176

<211> 3

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR31-L

<400> 176

Thr Ala Thr

1

<210> 177

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR32-L

<400> 177

Gln His Phe Tyr Gly Ser Pro Arg Thr

1 5

<210> 178

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR33-L

<220>

<221> 混合_特征

<222> (7)..(7)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<400> 178

Gln Ser Leu Leu Tyr Ser Xaa Gly Lys Thr Tyr

1 5 10

<210> 179

<211> 3

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR34-L

<220>

<221> 混合_特征

<222> (1)..(1)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> 混合_特征

<222> (3)..(3)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<400> 179

Xaa Val Xaa

1

<210> 180

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR35-L

<400> 180

Val Gln Gly Ile His Phe Pro Leu Thr

1 5

<210> 181

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR36-L

<400> 181

Glu Asn Val Gly Thr Tyr

1 5

<210> 182

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR37-L

<400> 182

Gly Gln Ser Tyr Thr Asp Leu Thr

1 5

<210> 183

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR38-L

<400> 183

Gln Asn Ile Val His Thr Asn Gly Asn Thr Tyr

1 5 10

<210> 184

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR39-L

<400> 184

Phe Gln Gly Ser His Ile Pro Trp Thr

1 5

<210> 185

<211> 3

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR40-L

<400> 185

Leu Val Ser

1

<210> 186

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR41-L

<400> 186

Val Gln Gly Pro His Phe Pro Leu Thr

1 5

<210> 187

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR42-L

<400> 187

Gln Asn Ile Ala His Ser Asn Gly Asn Thr Tyr

1 5 10

<210> 188

<211> 117

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VH-1

<400> 188

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Tyr Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Tyr Pro Gly Asn Val Asn Thr Lys Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Ile Thr Ala Asp Lys Ser Ala Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Glu Glu Leu Gly Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 189

<211> 117

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VH-2

<400> 189

Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Tyr Leu His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Arg Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Trp Ile Tyr Pro Gly Asn Val Asn Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Arg Val Thr Leu Thr Ala Asp Lys Ser Ala Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Glu Glu Leu Gly Gly Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 190

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VL-1

<400> 190

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Ile Gly

1 5 10 15

Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Tyr Thr Ser Ile Leu His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Arg

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 191

<211> 106

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> VL-2

<400> 191

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Asn Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Asp Ile Ser Asn Tyr

20 25 30

Leu Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Val Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Tyr Thr Ser Ile His Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Thr Asp Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu

65 70 75 80

Asp Val Ala Thr Tyr Phe Cys Gln Gln Gly Asn Thr Leu Pro Arg Thr

85 90 95

Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys

100 105

<210> 192

<211> 118

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.1H3.2A4 VH

<400> 192

Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Asp Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Phe

20 25 30

Trp Ile His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Asn Ile Tyr Pro Gly Ser Ser Ser Ala Asn Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Ser Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Asp Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ser Ser Tyr Arg Tyr Ser Tyr Tyr Ser Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Thr Leu Thr Val Ser Ser

115

<210> 193

<211> 122

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.2B7.2D9 VH

<400> 193

Gln Val Gln Leu Lys Gln Ser Gly Pro Gly Leu Val Gln Pro Ser Gln

1 5 10 15

Ser Leu Ser Ile Thr Cys Thr Val Ser Gly Phe Ser Leu Thr Ser Tyr

20 25 30

Gly Val His Trp Val Arg Gln Ser Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Leu

35 40 45

Gly Val Ile Trp Ser Gly Gly Ser Thr Asp Tyr Asn Ala Ala Phe Ile

50 55 60

Ser Arg Leu Ser Ile Ser Lys Asp Asn Ser Lys Ser Gln Val Phe Phe

65 70 75 80

Lys Met Asn Ser Leu Arg Ala Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala

85 90 95

Arg Asn Trp Ala Tyr Tyr Ser Asn His Tyr Tyr Val Met Asp Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 194

<211> 119

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.2B7.2F9 VH

<400> 194

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Ala Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ala Ser

20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Thr Ile Ser Asp Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Asn Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Asn Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser His Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Gly Gly Val Ser Thr Val Ile Asn Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser

115

<210> 195

<211> 122

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.2F11.2B6 VH

<400> 195

Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Met Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Thr Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr

20 25 30

Trp Ile Glu Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly His Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly Ser Thr His Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Phe Thr Ala Asp Thr Ser Ser Asn Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Ile Gln Leu Ser Ser Leu Thr Thr Glu Asp Ser Ala Ile Tyr Tyr Cys

85 90 95

Glu Arg Glu Val Tyr Asp Asn Asp Glu Gly Ala Trp Phe Ala Asn Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala

115 120

<210> 196

<211> 114

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.2F4.2A3 VH

<400> 196

Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Ile Leu Lys Pro Ser Gln

1 5 10 15

Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser

20 25 30

Gly Met Ala Val Gly Trp Ile Arg Gln Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu

35 40 45

Trp Leu Ala His Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys Tyr Tyr Asn Pro Ser

50 55 60

Leu Lys Ser Gln Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Arg Asn Gln Val

65 70 75 80

Phe Leu Lys Ile Thr Ser Val Asp Thr Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr

85 90 95

Cys Ala Arg Arg Ala Tyr Pro Tyr Phe Asp Val Trp Gly Ala Gly Pro

100 105 110

Arg Ser

<210> 197

<211> 114

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.2F4.2C7 VH

<400> 197

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Thr Val Leu Ala Arg Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Asn Phe Ile Asn Ser

20 25 30

Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Ala Phe Tyr Pro Gly Asn Ser Asp Thr Arg Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Met Gly Lys Ala Lys Leu Thr Ala Val Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Val Ser Ser Leu Thr Asn Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Thr Glu Leu Gly Gly Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val

100 105 110

Ser Ser

<210> 198

<211> 117

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.3B10.2C10 VH

<400> 198

Asp Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Pro Gly Leu Val Lys Pro Ser Leu

1 5 10 15

Ser Leu Ser Leu Thr Cys Thr Val Thr Gly Tyr Ser Ile Thr Ser Gly

20 25 30

Tyr Asp Trp His Trp Ile Arg His Phe Pro Gly Asn Ile Leu Glu Trp

35 40 45

Met Gly Tyr Ile Ser Tyr Ser Gly Tyr Thr Asn Tyr Asn Pro Ser Leu

50 55 60

Lys Ser Arg Ile Ser Ile Thr His Asp Thr Ser Lys Asn His Phe Phe

65 70 75 80

Leu Lys Leu Asn Ser Val Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Ser Asn Trp Tyr Phe Asp Val Trp Gly Ala Gly Thr Thr

100 105 110

Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 199

<211> 119

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.3D4.2D4 VH

<400> 199

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser His

20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Thr Ile Ser Asp Gly Gly Arg Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Asn Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Asn Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser His Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asp Ala Tyr Val Ser Thr Ser Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Leu Val Thr Val Ser Ala

115

<210> 200

<211> 118

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.3D5.2G4 VH

<400> 200

Glu Val Lys Leu Glu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Met Thr Leu Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

Trp Val Asn Trp Val Arg Gln Ser Pro Glu Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Gln Ile Arg Leu Lys Ser Glu Asn Tyr Pro Thr His Tyr Ala Glu

50 55 60

Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asp Ser Lys Ser Ser

65 70 75 80

Val Tyr Leu Gln Met Asn Asn Leu Arg Ala Glu Asp Thr Gly Ile Tyr

85 90 95

Tyr Cys Thr Gly Arg Gly Tyr Ser Asn Tyr Ala Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Thr Leu Thr Val Ser Ser

115

<210> 201

<211> 113

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.3E6.2F9 VH

<400> 201

Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Met Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Val Thr Gly His Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Trp Ile Glu Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly His Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Glu Ile Leu Pro Gly Lys Gly Asn Thr Glu Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Phe Thr Ala Asp Thr Ser Ser Asn Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Asn Phe Asp Val Trp Gly Ala Gly Thr Thr Val Thr Val Ser

100 105 110

Ser

<210> 202

<211> 116

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.3E6.2H9 VH

<400> 202

Gln Val Gln Lys Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Met Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Trp Met His Trp Val Met Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Asp Ile Asp Pro Ser Asp Ser Tyr Thr Asn Tyr Asn Gln Gln Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Ile Ser Ser Ser Ser Ala Tyr

65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Phe Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Ala Arg Val Asp Phe Asp Tyr Trp Gly Arg Gly Thr Thr Leu

100 105 110

Thr Val Ser Ser

115

<210> 203

<211> 113

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.3G8.2A3 VH

<400> 203

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Asp

20 25 30

Tyr Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Glu Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Trp Ile Asp Pro Glu Asn Gly Asp Thr Ala Tyr Ala Ser Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Lys Ala Thr Ile Thr Ala Asp Thr Ser Ser Asn Ile Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Leu Ser Ser Leu Thr Phe Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Thr Thr Gly Ser Thr Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser

100 105 110

Ser

<210> 204

<211> 115

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.3G8.2F7 VH

<400> 204

Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys Pro Gly Glu

1 5 10 15

Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Thr Tyr

20 25 30

Gly Met Ser Trp Val Lys Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Lys Trp Met

35 40 45

Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Ser Gly Val Pro Thr Tyr Thr Asp Asp Phe

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Leu Thr Gly Val Leu Glu Asn Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr

100 105 110

Val Ser Ser

115

<210> 205

<211> 116

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.3H4.2D11 VH

<400> 205

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Asp

1 5 10 15

Ser Glu Lys Arg Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr

20 25 30

Tyr Met Asp Trp Val Lys Gln Ser His Gly Arg Ser Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Tyr Ile Ser Pro Lys Asn Gly Gly Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Ile Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Leu His Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Ser Pro Phe Tyr Asp Asp Tyr Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu

100 105 110

Thr Val Ser Ser

115

<210> 206

<211> 115

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.3H4.2G3 VH

<400> 206

Gln Ala Tyr Leu Gln His Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Asn Met His Trp Val Lys Gln Thr Pro Arg Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Gly Tyr Thr Ser Tyr Asn Gln Lys Phe

50 55 60

Met Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Gln Leu Thr Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Val Gly Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ile Leu Thr

100 105 110

Val Ser Ser

115

<210> 207

<211> 118

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.4B6.2E11 VH

<400> 207

Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Asp Thr Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Trp Ile Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Asn Ile Tyr Pro Gly Thr Ser Ser Thr Asn Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Ser Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Pro Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Asp Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ser Arg Ser Ser Tyr Arg Tyr Thr Tyr Tyr Ser Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Thr Leu Thr Val Ser Ser

115

<210> 208

<211> 118

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.4B6.2F6 VH

<400> 208

Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Asp Ile Asn Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Trp Ile Tyr Pro Arg Asp Gly Thr Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Ile His Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Ala Arg Glu Asp Tyr Gly Ser Ser Phe His Asn Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Thr Leu Thr Val Ser Ser

115

<210> 209

<211> 122

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.4C12.3C5 VH

<400> 209

Gln Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Gly Glu Leu Met Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Thr Gly Tyr Thr Phe Thr Gly Tyr

20 25 30

Trp Ile Glu Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly His Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Glu Ile Leu Pro Gly Ser Gly Arg Thr Tyr Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Thr Phe Thr Ala Asp Thr Ser Ser Asn Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Thr Glu Asp Ser Ala Ile Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Glu Ile Tyr Asp Gly His Tyr Glu Ala Trp Tyr Ala Tyr Trp

100 105 110

Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ala

115 120

<210> 210

<211> 118

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.4H12.2A9 VH

<400> 210

Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Thr Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Thr Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Thr Ile Ser Asp Gly Gly Arg Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Asn Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Asn Asn Asn Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser His Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Gly Trp Leu Leu Arg Asn Phe Asp Phe Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Thr Leu Thr Val Ser Ser

115

<210> 211

<211> 118

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.4H12.2D2 VH

<400> 211

Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Lys Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Arg Ile Asp Pro Asn Ser Gly Gly Thr Lys Tyr Asn Glu Lys Phe

50 55 60

Lys Ser Lys Ala Ile Leu Thr Val Asp Lys Pro Ser Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ala Arg Leu Gly Tyr Gly Asn Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Thr Leu Thr Val Ser Ser

115

<210> 212

<211> 113

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.4H6.2D11 VH

<220>

<221> 混合_特征

<222> (4)..(5)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> 混合_特征

<222> (7)..(7)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> 混合_特征

<222> (9)..(9)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> 混合_特征

<222> (32)..(32)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<400> 212

Glu Val Gln Xaa Xaa Gln Xaa Gly Xaa Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Trp Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Lys Ile Lys Asp Xaa

20 25 30

Tyr Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Glu Gln Gly Pro Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Trp Ile Asp Pro Glu Asn Gly Asp Thr Glu His Ala Ser Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Lys Ala Thr Ile Thr Val Asp Thr Ser Ser Asn Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys

85 90 95

Thr Thr Gly Ser Thr Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser

100 105 110

Ser

<210> 213

<211> 120

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.4H6.2F8 VH

<400> 213

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Thr Val Leu Ala Arg Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Met Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr

20 25 30

Trp Met His Trp Val Lys Gln Arg Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Ala Ile Tyr Pro Gly Asn Ser Glu Thr Ser Tyr Asn Gln Asn Phe

50 55 60

Lys Gly Lys Ala Glu Leu Thr Ala Val Thr Ser Ala Ser Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Met Glu Ile Ser Ser Leu Thr Asn Glu Asp Ser Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Thr Arg Pro Leu Ala Asn Trp Asp Gly Pro Phe Asp Tyr Trp Gly Gln

100 105 110

Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser

115 120

<210> 214

<211> 118

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.4H6.2G12 VH

<400> 214

Glu Val Lys Val Glu Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Met Lys Phe Ser Cys Val Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Tyr

20 25 30

Trp Met Asn Trp Val Arg Gln Ser Pro Glu Lys Gly Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Gln Ile Arg Leu Lys Ser Asp Asn Tyr Ala Thr His Tyr Ala Glu

50 55 60

Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asp Ser Lys Ser Ser

65 70 75 80

Val Tyr Leu Gln Met Asn Asn Leu Arg Ala Glu Asp Thr Gly Ile Tyr

85 90 95

Tyr Cys Thr Gly Arg Gly Tyr Ser Asn Tyr Ala Trp Gly Gln Gly Thr

100 105 110

Thr Leu Thr Val Ser Ser

115

<210> 215

<211> 113

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.5G6.2B11 VH

<400> 215

Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Ala Glu Leu Val Arg Pro Gly Ala

1 5 10 15

Ser Val Lys Leu Ser Cys Thr Ala Ser Gly Phe Asn Ile Lys Asp Asp

20 25 30

Tyr Leu His Trp Val Lys Gln Arg Pro Glu Gln Gly Leu Glu Trp Ile

35 40 45

Gly Trp Ile Asp Pro Glu Lys Gly Asp Thr Glu Cys Ala Ser Lys Phe

50 55 60

Gln Gly Lys Ala Thr Ile Thr Val Asp Thr Ser Ser Asn Thr Ala Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys

85 90 95

Thr Thr Gly Ser Thr Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Leu Thr Val Ser

100 105 110

Ser

<210> 216

<211> 119

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.5G6.2B8 VH

<400> 216

Glu Val His Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Met Lys Pro Gly Gly

1 5 10 15

Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr

20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Glu Lys Arg Leu Glu Trp Val

35 40 45

Ala Thr Ile Ser Asp Gly Gly Ser Tyr Thr Tyr Tyr Pro Asp Asn Val

50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Asn Leu Tyr

65 70 75 80

Leu Gln Met Ser Arg Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys

85 90 95

Ser Arg Ala Gly Ser Thr Val Val Asn Phe Gly Tyr Trp Gly Gln Gly

100 105 110

Thr Thr Leu Thr Val Ser Ser

115

<210> 217

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.1H3.2A4 VL

<400> 217

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser

20 25 30

Asn Gly Asn Thr Phe Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Asn Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly

85 90 95

Ser His Val Pro Leu Ser Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys

100 105 110

<210> 218

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.2B7.2D9 VL

<400> 218

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Tyr Ala Phe Val Gly

1 5 10 15

Glu Thr Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Asn Ile Tyr Ser Tyr

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr His Gln Lys Gln Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Val

35 40 45

Tyr Asn Ser Asn Ser Leu Ala Glu Gly Val Pro Leu Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Gly Asn Tyr Tyr Cys Gln His His Tyr Val Thr Pro Leu

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Met Lys

100 105

<210> 219

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.2B7.2F9 VL

<400> 219

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Gln Val Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser

20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly

85 90 95

Ser His Val Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys

100 105 110

<210> 220

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.2F11.2B6 VL

<400> 220

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Ile Gly

1 5 10 15

Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser

20 25 30

Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Lys Arg Leu Met Tyr Gln Val Ser Lys Leu Asp Pro Gly Ile Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Glu Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly

85 90 95

Thr Tyr Tyr Pro His Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 221

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.2F4.2A3 VL

<220>

<221> 混合_特征

<222> (7)..(7)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> 混合_特征

<222> (12)..(14)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> 混合_特征

<222> (33)..(33)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> 混合_特征

<222> (41)..(42)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> 混合_特征

<222> (44)..(44)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> 混合_特征

<222> (46)..(46)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> 混合_特征

<222> (52)..(52)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> 混合_特征

<222> (62)..(62)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> 混合_特征

<222> (68)..(68)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> 混合_特征

<222> (73)..(73)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> 混合_特征

<222> (83)..(83)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> 混合_特征

<222> (93)..(93)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> 混合_特征

<222> (105)..(105)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<400> 221

Asn Ile Met Lys Arg His Xaa Pro Ser Ser Gln Xaa Xaa Xaa Ser Gly

1 5 10 15

Glu Lys Val Ile Gly Ser Cys Ile Ser Ser Gln Ser Val Phe Cys Arg

20 25 30

Xaa Ile Gln Lys Asn His Leu Ala Xaa Xaa Gln Xaa Lys Xaa Gly Gln

35 40 45

Ser Lys Gln Xaa Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Arg Arg Glu Xaa Gly Val

50 55 60

Pro Asp Arg Xaa Thr Gly Arg Gly Xaa Gly Ala Asp Phe Ile Pro Ile

65 70 75 80

Ile Ser Xaa Val Gln Glu Glu Asp Ala Ala Asp Tyr Xaa Gly Gln Gln

85 90 95

Tyr Leu Ser Ser Trp Thr Phe Gly Xaa Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 222

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.2F4.2C7 VL

<400> 222

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Asn

20 25 30

Asp Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Phe Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile His Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Phe Cys Ser Gln Ser

85 90 95

Thr His Val Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 223

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.3B10.2C10 VL

<400> 223

Asn Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Lys Ser Met Ser Met Leu Val Gly

1 5 10 15

Glu Arg Val Ile Leu Asn Cys Lys Ala Ser Glu Asn Val Asp Thr Tyr

20 25 30

Val Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Glu Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Ala Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Gly

65 70 75 80

Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Gln Ser His Asn Tyr Pro Tyr

85 90 95

Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 224

<211> 111

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.3D4.2D4 VL

<220>

<221> 混合_特征

<222> (52)..(52)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> 混合_特征

<222> (61)..(61)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<400> 224

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Leu Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Gln Ala Ser Ile Ser Arg Arg Phe Ser Gln Ser Ile Val His Ser

20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Val Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Lys Leu Xaa Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Xaa Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly

85 90 95

Ser His Val Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Lys

100 105 110

<210> 225

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.3D5.2G4 VL

<400> 225

Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser

20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly

85 90 95

Ser His Phe Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 226

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.3E6.2F9 VL

<400> 226

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu Val His Arg

20 25 30

Asn Gly His Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Val Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Gly Glu Asp Val Gly Val Tyr Phe Cys Ser Gln Ser

85 90 95

Thr His Val Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 227

<211> 108

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.3E6.2H9 VL

<400> 227

Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Leu Leu Ala Ala Ser Pro Gly

1 5 10 15

Asp Lys Val Thr Ile Thr Cys Ser Val Ser Ser Ser Ile Ser Ser Ser

20 25 30

Thr Leu His Trp Tyr Gln Gln Lys Ser Gly Thr Ser Pro Lys Pro Trp

35 40 45

Ile Tyr Gly Thr Ser Asn Leu Ala Ser Gly Val Pro Val Arg Phe Ser

50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Ser Tyr Ser Leu Thr Ile Ser Ser Met Glu

65 70 75 80

Ala Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Trp Ser Gly Tyr Pro

85 90 95

Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys

100 105

<210> 228

<211> 74

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.3G8.2A3 VL

<220>

<221> 混合_特征

<222> (9)..(10)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> 混合_特征

<222> (13)..(14)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> 混合_特征

<222> (17)..(18)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> 混合_特征

<222> (21)..(21)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> 混合_特征

<222> (24)..(24)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> 混合_特征

<222> (31)..(33)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> 混合_特征

<222> (36)..(36)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<220>

<221> 混合_特征

<222> (48)..(49)

<223> Xaa可以是任何天然存在的氨基酸

<400> 228

Tyr Leu Asn Trp Leu Glu Gln Ser Xaa Xaa Gly Gln Xaa Xaa Arg Leu

1 5 10 15

Xaa Xaa Tyr Leu Xaa Pro Thr Xaa Asn Glu Ser Leu Arg Asp Xaa Xaa

20 25 30

Xaa Ala Val Xaa Asp Ser Arg Leu His Pro Gln His Pro Ser Glu Xaa

35 40 45

Xaa Arg Arg Met Gln Leu Ile Ser Ala Ser Thr Thr Gly Ser Val His

50 55 60

Val Arg Arg Gly Asp Gln Ala Gly Asn Lys

65 70

<210> 229

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.3G8.2F7 VL

<400> 229

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Phe Thr Gln Ser Ile Val His Ser

20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Asn Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Cys Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Pro Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly

85 90 95

Ser His Val Pro Phe Thr Phe Gly Thr Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 230

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.3H4.2D11 VL

<400> 230

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser Val Thr Ile Gly

1 5 10 15

Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu His Arg

20 25 30

Asn Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Glu Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Tyr Cys Phe Gln Thr

85 90 95

Thr His Phe Pro His Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 231

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.3H4.2G3 VL

<400> 231

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser

20 25 30

Asn Gly Asn Ser Tyr Leu Asp Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly

85 90 95

Ser His Val Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys

100 105 110

<210> 232

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.4B6.2E11 VL

<400> 232

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val Gln Ser

20 25 30

Asn Gly Ile Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Lys Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Asn Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Leu Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Asp Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly

85 90 95

Ser His Val Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys

100 105 110

<210> 233

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.4B6.2F6 VL

<400> 233

Asn Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Lys Ser Met Ser Met Ser Val Gly

1 5 10 15

Glu Arg Val Thr Leu Ser Cys Lys Ala Ser Glu Asp Val Asp Thr Tyr

20 25 30

Val Ser Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Asn Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Ala Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Ala

65 70 75 80

Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Gln Ser Tyr Ser Tyr Pro Trp

85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105

<210> 234

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.4C12.3C5 VL

<400> 234

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Ser Val Thr Ile Gly

1 5 10 15

Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser

20 25 30

Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Gln Gln Arg Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Lys Arg Leu Met Tyr Gln Val Ser Lys Leu Asp Pro Gly Ile Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Glu Thr Asp Phe Thr Leu Glu Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Leu Gln Gly

85 90 95

Thr Tyr Tyr Pro His Thr Phe Gly Ser Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 235

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.4H12.2A9 VL

<400> 235

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Ile Val His Ser

20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly

85 90 95

Ser His Val Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys

100 105 110

<210> 236

<211> 107

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.4H12.2D2 VL

<400> 236

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly

1 5 10 15

Glu Thr Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Glu Asn Ile Tyr Ser Asn

20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Gln Gly Lys Ser Pro Gln Leu Leu Val

35 40 45

Tyr Thr Ala Thr Asn Leu Ala Asp Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Gln Phe Ser Leu Lys Ile Asn Ser Leu Gln Pro

65 70 75 80

Glu Asp Phe Gly Ser Tyr Tyr Cys Gln His Phe Tyr Gly Ser Pro Arg

85 90 95

Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys

100 105

<210> 237

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.4H6.2D11 VL

<400> 237

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser Val Thr Ile Gly

1 5 10 15

Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser

20 25 30

Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Ser Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Glu Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Arg Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Val Gln Gly

85 90 95

Ile His Phe Pro Leu Thr Phe Gly Thr Gly Thr Lys Leu Glu Met Lys

100 105 110

<210> 238

<211> 106

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.4H6.2F8 VL

<400> 238

Asn Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Lys Ser Met Ser Met Ser Val Gly

1 5 10 15

Glu Arg Val Thr Leu Thr Cys Lys Ala Ser Glu Asn Val Gly Thr Tyr

20 25 30

Val Ser Trp Phe Gln Gln Lys Pro Glu Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile

35 40 45

Tyr Gly Ala Ser Asn Arg Tyr Thr Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly

50 55 60

Ser Gly Ser Ala Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Ala

65 70 75 80

Glu Asp Leu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Gln Ser Tyr Thr Asp Leu Thr

85 90 95

Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys

100 105

<210> 239

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.4H6.2G12 VL

<400> 239

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asn Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Asn Ile Val His Thr

20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Cys Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Leu Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly

85 90 95

Ser His Ile Pro Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys

100 105 110

<210> 240

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.5G6.2B11 VL

<400> 240

Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser Val Thr Ile Gly

1 5 10 15

Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Tyr Ser

20 25 30

Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Ser Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Glu Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Ile Tyr Leu Cys Val Gln Gly

85 90 95

Pro His Phe Pro Leu Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys

100 105 110

<210> 241

<211> 112

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> 802.5G6.2B8 VL

<400> 241

Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val Ser Leu Gly

1 5 10 15

Asp Gln Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Asn Ile Ala His Ser

20 25 30

Asn Gly Asn Thr Tyr Leu Glu Trp Tyr Leu Gln Lys Pro Gly Gln Ser

35 40 45

Pro Gln Leu Leu Ile Tyr Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser Gly Val Pro

50 55 60

Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Lys Ile

65 70 75 80

Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr Cys Phe Gln Gly

85 90 95

Ser His Val Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys Leu Glu Leu Lys

100 105 110

<210> 242

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR66-H

<400> 242

Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser Gly Met Ala

1 5 10

<210> 243

<211> 7

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR67-H

<400> 243

Ile Trp Trp Asp Asp Asp Lys

1 5

<210> 244

<211> 10

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR68-H

<400> 244

Ala Arg Arg Ala Tyr Pro Tyr Phe Asp Val

1 5 10

<210> 245

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR69-H

<400> 245

Glu Asn Ser Ile Thr Ser Ser Tyr Asp

1 5

<210> 246

<211> 6

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR43-L

<400> 246

Glu Asn Ile Tyr Ser Tyr

1 5

<210> 247

<211> 3

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR44-L

<400> 247

Asn Ser Asn

1

<210> 248

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR45-L

<400> 248

Gln His His Tyr Val Thr Pro Leu Thr

1 5

<210> 249

<211> 3

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR46-L

<400> 249

Trp Ala Ser

1

<210> 250

<211> 8

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR47-L

<400> 250

Gln Gln Tyr Leu Ser Ser Trp Thr

1 5

<210> 251

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR48-L

<400> 251

Gln Ser Leu Val His Asn Asp Gly Asn Thr Tyr

1 5 10

<210> 252

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR49-L

<400> 252

Ser Gln Ser Thr Leu Val Pro Tyr Thr

1 5

<210> 253

<211> 11

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR50-L

<400> 253

Gln Ser Leu Val His Arg Asn Gly His Thr Tyr

1 5 10

<210> 254

<211> 9

<212> PRT

<213> 人工序列

<220>

<223> CDR51-L

<400> 254

Ser Gln Ser Thr His Val Pro Tyr Thr

1 5

Claims

1.一种抗原结合多肽，其中所述多肽表现出与LRIG1蛋白(SEQ ID NO:2)的特异性结合，并且其中所述多肽与存在于LRIG1的一个或多个区域上的表位结合，所述表位选自LRIG1蛋白的N末端到C末端的位置1至564或位置655至1093的氨基酸残基的任何氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于LRIG1蛋白的N末端至C末端的位置674至714的氨基酸残基的氨基酸序列内的表位结合。

3.根据权利要求1或2所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于LRIG1蛋白的N末端至C末端的位置704至744的氨基酸残基的氨基酸序列内的表位结合。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与LRIG1在从N末端到C末端的位置1至564或位置655至1093之间的未确定表位结合。

5.根据权利要求1-4中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括全长抗体或其片段。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括双特异性抗体或其结合片段。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括单价Fab’、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。

8.根据权利要求1-7中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽包括选自SEQ IDNO:84-145、149-187或242-254的至少一个互补决定区。

9.根据权利要求1-8中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括IgG框架。

10.根据权利要求1-9中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括IgG1框架、IgG2框架或IgG4框架。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、20nM、25nM或30nM的k_D。

12.根据权利要求1-11中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括人源化抗体。

13.根据权利要求1-12中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8。

14.一种抗原结合多肽，其中所述多肽破坏LRIG1-VISTA相互作用，并且其中所述多肽与来自SEQ ID NO:69至75的区域中的LRIG1的表位结合。

15.根据权利要求14所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于由肽65(SEQ ID NO:69)定义的LRIG1的区域内的表位结合。

16.根据权利要求14或15所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于由肽66(SEQ IDNO:70)定义的LRIG1的区域内的表位结合。

17.根据权利要求14-16中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于由肽67(SEQ ID NO:71)定义的LRIG1的区域内的表位结合。

18.根据权利要求14-17中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于由肽68(SEQ ID NO:72)定义的LRIG1的区域内的表位结合。

19.根据权利要求14-18中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于由肽69(SEQ ID NO:73)定义的LRIG1的区域内的表位结合。

20.根据权利要求14-19中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于由肽70(SEQ ID NO:74)定义的LRIG1的区域内的表位结合。

21.根据权利要求14-20中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与存在于由肽71(SEQ ID NO:75)定义的LRIG1的区域内的表位结合。

22.根据权利要求14-21中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括全长抗体或其片段。

23.根据权利要求14-22中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括双特异性抗体或其结合片段。

24.根据权利要求14-23中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括单价Fab’、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。

25.根据权利要求14-24中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽包括选自SEQ IDNO:84-145、149-187或242-254的至少一个互补决定区。

26.根据权利要求14-25中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括IgG框架。

27.根据权利要求14-26中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括IgG1框架、IgG2框架或IgG4框架。

28.根据权利要求14-27中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、20nM、25nM或30nM的k_D。

29.根据权利要求14-28中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括人源化抗体。

30.根据权利要求14-29中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8。

32.根据权利要求31所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与LRIG1的结合将LRIG1-VISTA之间的相互作用减弱至不含所述抗原结合多肽的LRIG1-VISTA之间的相互作用的小于20％、小于15％、小于10％、小于5％或小于1％。

33.根据权利要求31或32所述的抗原结合多肽，其中所述多肽与SEQ ID NO:69至75的区域中的LRIG1的表位结合。

34.根据权利要求31-33中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括全长抗体或其片段。

35.根据权利要求31-34中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括双特异性抗体或其结合片段。

36.根据权利要求31-35中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括单价Fab’、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。

37.根据权利要求31-36中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽包括选自SEQ IDNO:84-145、149-187或242-254的至少一个互补决定区。

38.根据权利要求31-37中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括IgG框架。

39.根据权利要求31-38中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括IgG1框架、IgG2框架或IgG4框架。

40.根据权利要求31-39中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、20nM、25nM或30nM的k_D。

41.根据权利要求31-40中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括人源化抗体。

42.根据权利要求31-41中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8。

44.根据权利要求43所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括全长抗体或其片段。

45.根据权利要求43或44所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括双特异性抗体或其结合片段。

46.根据权利要求43-45中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括单价Fab’、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。

47.根据权利要求43-46中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述多肽包括选自SEQ IDNO:84-145、149-187或242-254的一个以上的互补决定区。

48.根据权利要求43-47中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括IgG框架。

49.根据权利要求43-48中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括IgG1框架、IgG2框架或IgG4框架。

50.根据权利要求43-49中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、20nM、25nM或30nM的k_D。

51.根据权利要求43-50中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽包括人源化抗体。

52.根据权利要求43-51中任一项所述的抗原结合多肽，其中所述抗原结合多肽是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8。

54.一种复合物，所述复合物包括权利要求1-53中任一项的抗原结合多肽，其中所述复合物包括与LRIG1蛋白结合的多肽。

55.一种阻断VISTA与LRIG1之间相互作用的方法，所述方法包括：

使包括LRIG1表达细胞、VISTA表达细胞或其组合的多种细胞与根据权利要求1-54中任一项所述的抗原结合多肽接触。

56.根据权利要求55所述的方法，其中所述LRIG1-VISTA相互作用减弱至小于21％、小于20％、小于19％、小于17％、小于10％、小于5％或小于1％。

57.根据权利要求55或56所述的方法，其中所述相互作用发生在选自区域245-260的LRIG1的一个或多个残基处，其中所述残基位置对应于SEQ ID NO:2的位置245-260。

58.根据权利要求55-57中任一项所述的方法，其中所述相互作用发生在选自区域78-90或68-92的VISTA的一个或多个残基处，其中所述残基位置对应于SEQ ID NO:4的位置78-90或68-92。

59.根据权利要求55-58中任一项所述的方法，其中所述抗原结合多肽与SEQ ID NO.69至75的任何肽中的至少一个氨基酸残基结合。

60.根据权利要求55-59中任一项所述的方法，其中所述抗原结合多肽包括小于1nM、1.2nM、2nM、5nM、10nM、13.5nM、15nM、20nM、25nM或30nM的k_D。

61.根据权利要求55-60中任一项所述的方法，其中所述抗原结合多肽包括人源化抗体。

62.根据权利要求55-61中任一项所述的方法，其中所述抗原结合多肽包括全长抗体或其结合片段。

63.根据权利要求55-62中任一项所述的方法，其中所述抗原结合多肽包括双特异性抗体或其结合片段。

64.根据权利要求55-63中任一项所述的方法，其中所述抗原结合多肽包括单价Fab’、二价Fab2、单链可变片段(scFv)、双抗体、微抗体、纳米抗体、单结构域抗体(sdAb)或骆驼化抗体或其结合片段。

65.根据权利要求55-64中任一项所述的方法，其中所述抗原结合多肽是人源化抗体，所述人源化抗体包括来自SEQ ID NO:84-145、149-187或242-254的至少一个互补性决定区域(CDR)。

66.根据权利要求55-65中任一项所述的方法，其中所述人源化抗体包括重链可变区(VH)，所述重链可变区(VH)包括SEQ ID NO:84至145或242-245中的任何三个序列。

67.根据权利要求55-66中任一项所述的方法，其中所述人源化抗体包括轻链可变区(VL)，所述轻链可变区(VL)包括SEQ ID NO:149至187或246-254中的任何三个序列。

68.根据权利要求55-67中任一项所述的方法，其中所述抗原结合多肽是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8。

69.根据权利要求55-68中任一项所述的方法，其中所述抗原结合多肽包括IgG框架。

70.根据权利要求59-69中任一项所述的方法，其中所述抗原结合多肽包括IgG1框架、IgG2框架或IgG4框架。

71.一种调节受试者免疫应答的方法，所述方法包括：向受试者施用与LRIG1蛋白(SEQID NO:2)特异性结合的抗原结合多肽。

72.根据权利要求71所述的方法，其中所述抗原结合肽破坏LRIG1与VISTA之间的相互作用。

73.根据权利要求71或72所述的方法，其中调节所述免疫应答包括增强所述受试者中T细胞介导的免疫应答和/或B细胞介导的免疫应答的水平。

74.根据权利要求71-73中任一项所述的方法，其中调节所述免疫应答包括降低T细胞介导的免疫应答和/或B细胞介导的免疫应答的水平，或增加所示受试者中调节性T细胞的免疫抑制功能。

75.根据权利要求71-74中任一项所述的方法，其中所述受试者包括癌症，并且调节所述免疫应答改善、治疗或减轻所述癌症的症状。

76.根据权利要求71-75中任一项所述的方法，其中所述癌症是乳腺癌、结肠直肠癌、肾癌、肝癌、肺癌、脑癌、胰腺癌、膀胱癌或胃癌、血液恶性肿瘤或其任何组合。

77.根据权利要求71-76中任一项所述的方法，其中所述受试者包括免疫相关障碍，并且调节所述免疫应答改善、治疗或减轻所述免疫相关障碍的症状。

78.根据权利要求71-77中任一项所述的方法，其中所述免疫相关障碍是自体免疫性疾病、炎性疾病、伤口愈合、纤维化、肝纤维化、肾纤维化、心脏纤维化、肺纤维化、非酒精性脂肪性肝病、非酒精性脂肪性肝炎、脓毒症、特应性皮炎、银屑病、系统性红斑狼疮、炎性肠综合征、关节炎或其任何组合。

79.根据权利要求71-78中任一项所述的方法，所述方法进一步包括向所述受试者施用另外治疗剂。

80.根据权利要求71-79中任一项所述的方法，其中所述另外治疗剂包括免疫治疗剂、免疫检查点调节剂、化疗剂、靶向治疗剂、激素治疗剂或基于干细胞的治疗剂。

81.根据权利要求71-80中任一项所述的方法，其中所述抗原结合多肽经胃肠外施用。

82.根据权利要求71-81中任一项的方法，其中所述抗原结合多肽是根据权利要求1-53中任一项所述的抗原结合多肽。

83.根据权利要求71-82中任一项所述的方法，其中所述抗原结合多肽是802.1H3.2A4、802.2B7.2D9、802.2B7.2F9、802.2F11.2B6、802.2F4.2A3、802.2F4.2C7、802.3B10.2C10、802.3D4.2D4、802.3D5.2G4、802.3E6.2F9、802.3E6.2H9、802.3G8.2A3、802.3G8.2F7、802.3H4.2D11、802.3H4.2G3、802.4B6.2E11、802.4B6.2F6、802.4C12.3C5、802.4H12.2A9、802.4H12.2D2、802.4H6.2D11、802.4H6.2F8、802.4H6.2G12、802.5G6.2B11或802.5G6.2B8。

84.根据权利要求71-83中任一项所述的方法，其中所述受试者是哺乳动物。

85.根据权利要求71-84中任一项所述的方法，其中所述受试者是人。

86.根据权利要求1-53中任一项所述的抗原结合多肽，其在有需要的受试者中治疗癌症中使用。

87.根据权利要求86所述使用的抗原结合多肽，其中所述癌症是乳腺癌、结肠直肠癌、肾癌、肝癌、肺癌、脑癌、胰腺癌、膀胱癌或胃癌或血液恶性肿瘤或其任何组合。

88.根据权利要求1-53中任一项所述的抗原结合多肽，其在治疗免疫相关障碍中使用。

89.根据权利要求88所述使用的抗原结合多肽，其中所述免疫相关障碍是自体免疫性疾病、炎性疾病、伤口愈合、纤维化、肝纤维化、肾纤维化、心脏纤维化、肺纤维化、非酒精性脂肪性肝病、非酒精性脂肪性肝炎、脓毒症、特应性皮炎、银屑病或其任何组合。

90.根据权利要求86-89中任一项所述使用的抗原结合多肽，其中所述受试者是哺乳动物。

91.根据权利要求86-90中任一项所述使用的抗原结合多肽，其中所述受试者是人。

92.一种药物组合物，所述药物组合物包括根据权利要求1-53中任一项所述的抗原结合多肽和至少一种药学上可接受的载体、赋形剂、稀释剂或佐剂。

93.根据权利要求1-53或86-92中任一项所述的抗原结合多肽、根据权利要求54所述的复合物、根据权利要求55-85中任一项所述的方法或根据权利要求92所述的药物组合物，其中所述抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:84、87、90、93、96、99、102、105、108、111、114、117、120、123、126、129、134、138、143和242的至少一个重链CDR1。

94.根据权利要求93所述的抗原结合多肽、复合物、方法或药物组合物，其中所述抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:85、88、91、94、97、100、103、106、109、112、115、118、121、124、127、130、132、136、139、141、142、144和243的至少一个重链CDR2。

95.根据权利要求93或94所述的抗原结合多肽、复合物、方法或药物组合物，其中所述抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:86、89、92、95、98、101、104、107、110、113、116、119、122、125、128、131、133、135、137、140、145和244的至少一个重链CDR3。

96.根据权利要求93-95中任一项所述的抗原结合多肽、复合物、方法或药物组合物，其中所述抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:149、152、154、157、163、166、168、171、172、173、175、178、181、183、187、246、251和253的至少一个轻链CDR1。

97.根据权利要求93-96中任一项所述的抗原结合多肽、复合物、方法或药物组合物，其中所述抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:150、155、158、160、164、169、176、179、185、247和249的至少一个轻链CDR2。

98.根据权利要求93-97中任一项所述的抗原结合多肽、复合物、方法或药物组合物，其中所述抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:151、153、156、159、161、162、165、167、170、174、177、180、182、184、186、248、250和252的至少一个轻链CDR3。

99.根据权利要求93-98中任一项所述的抗原结合多肽、复合物、方法或药物组合物，其中所述抗原结合多肽包括选自SEQ ID NO:81-145和242-245的3个重链CDR和选自SEQ IDNO:146-187和246-254的3个轻链CDR。

100.根据权利要求93-99中任一项所述的抗原结合多肽、复合物、方法或药物组合物，其中所述抗原结合多肽包括根据图9的3个重链CDR和3个轻链CDR。

101.根据权利要求93-100中任一项所述的抗原结合多肽、复合物、方法或药物组合物，其中所述抗原结合多肽包括具有与SEQ ID NO:192-216至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列的VH结构域。

102.根据权利要求93-101中任一项所述的抗原结合多肽、复合物、方法或药物组合物，其中所述抗原结合多肽包括与SEQ ID NO:217-241至少80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同源性的序列的VL结构域。

103.根据权利要求93-102中任一项所述的抗原结合多肽、复合物、方法或药物组合物，其中所述抗原结合多肽包括根据表5的VH和VL。

104.一种调节免疫系统活性的方法，所述方法包括：