CN114487252B - 一种用于区别牛樟芝和牛樟木的薄层色谱鉴别方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及薄层色谱分析方法，具体涉及一种用于区别牛樟芝和牛樟木的薄层色谱鉴别方法。解决了现有对牛樟芝进行的液相指纹图谱鉴别研究方法，图谱单一，操作繁琐，不能直观的区分牛樟芝和牛樟木的技术问题。本发明方法包括以下步骤：1)制备样品液；2)进行薄层点样；3)制备展开剂；4)展开；5)显色与鉴别。本发明薄层色谱鉴别方法具有快速，低成本，简便高效、专属性强，检测结果直观，易于识别等多种优点，可快速的鉴别区分出牛樟芝和牛樟木，有效的保证了牛樟芝的质量，同时也填补了目前还没有对牛樟芝和牛樟木进行过薄层色谱研究的空白。
Description
技术领域
本发明涉及一种薄层色谱分析方法，具体涉及一种用于区别牛樟芝和牛樟木的薄层色谱鉴别方法。
背景技术
牛樟芝(Antrodiacamphorata)又名樟芝、牛樟菇、红樟芝、樟窟内菇，通常腐生于上百年牛樟树的树干空洞内。牛樟树是牛樟芝的唯一宿主，而且适合生长的地区极为有限，导致野生牛樟芝资源稀缺。牛樟芝是一种非常珍稀的药用菌，研究表明，牛樟芝具有多种药理作用，如抗肿瘤、抗炎、抗氧化、免疫调节及保肝等，也可用于治疗食物和药物中毒、腹泻、腹痛、高血压和皮肤瘙痒等。牛樟芝在中国台湾很早就作为中药使用，并在近十几年成为热点。因此，牛樟芝被称为“药中之王”、“森林红宝石”。由于牛樟树的滥采，野生牛樟芝数量日益稀少，中国台湾已将牛樟树列为保护树种。牛樟芝市场价每千克达十几万甚至几十万，市场前景巨大。牛樟芝因其独特性、稀有性以及神奇功效，使市场上出现了大量劣质的，甚至是假冒的牛樟芝药材。牛樟木是牛樟芝生长的宿主，因此市场上也出现了用牛樟木替代牛樟芝的现象，使牛樟芝的质量信誉受到了严重的影响。
相关研究人员用高效液相色谱法对牛樟芝做过指纹图谱研究，但是液相指纹图谱受其图谱单一，操作繁琐等因素影响，不能很好的体现牛樟芝的质量，同时也不能直观的区分牛樟芝和牛樟木。
发明内容
本发明的目的是解决现有对牛樟芝进行的液相指纹图谱鉴别研究方法，图谱单一，操作繁琐，不能很好的体现牛樟芝的质量，同时也不能直观的区分牛樟芝和牛樟木的技术问题，而提供一种用于区别牛樟芝和牛樟木的薄层色谱鉴别方法。薄层色谱具有分离效果高、鉴别快、灵敏度高，成本低，图谱直观等多种优点，在中药材生产过程中得到了广泛应用。但目前还未见有对牛樟芝和牛樟木进行区分的薄层色谱研究报道。
本发明的技术方案是：
一种用于区别牛樟芝和牛樟木的薄层色谱鉴别方法，其特殊之处在于，包括以下步骤：
1)制备样品液
取牛樟芝原料、牛樟木原料，粉碎后过筛，分别置于可密封的试验容器中，再分别加入所述牛樟芝原料、牛樟木原料质量6～10倍量，质量浓度为70％～100％的乙醇，并进行超声提取30～60分钟，放至室温，然后采用微孔滤膜过滤，收集滤液作为样品液；
2)进行薄层点样
将步骤1)中制备好的样品液依次点于同一硅胶G薄层板上同一高度的不同位置上形成点样原点；
3)制备展开剂
3.1)将甲苯、乙酸乙酯和甲酸以6～10:4～6:0.6～1.0的体积比混合均匀，得到展开剂；
3.2)将展开剂置于展开缸中，密封展开缸，预饱和15～20分钟；
4)展开
4.1)将步骤3)预饱和后的展开缸打开，迅速将步骤2)点样后的硅胶G 薄层板放入展开缸中，使硅胶G薄层板斜靠在展缸中且展开缸中的展开剂不能没过点样原点位置；
4.2)当展开剂的前沿上行至距离点样原点6cm～10cm时，将硅胶G薄层板取出；
5)显色与鉴别
待步骤4.2)展开好的硅胶G薄层板上的试剂干燥后，在光照下进行检视，得到检视图；有多个斑点且显示较为明显的为牛樟芝原料，多个斑点显示不明显，或者无显示的为牛樟木原料。
进一步地，步骤5)具体为：吹干步骤4.2)展开好的硅胶G薄层板上的试剂后，再向硅胶G薄层板喷以质量比浓度为5～10％的硫酸乙醇溶液，随后在 100-110℃下加热3～5分钟，放至室温后，将硅胶G薄层板在365nm紫外光光照下进行检视，得到检视图；检视图显示为，在Rf＝0.18～0.21、Rf＝0.40～0.42、 Rf＝0.50～0.53、Rf＝0.54～0.60、Rf＝0.60～0.64以及Rf＝0.65～0.70处各有斑点且显示明显的为牛樟芝原料；在Rf＝0.58～0.62和Rf＝0.65～0.70处各有斑点且显示不明显的为牛樟木原料。
进一步地，步骤5)具体为：吹干步骤4.2)展开好的硅胶G薄层板上的试剂后，再向硅胶G薄层板喷以质量比浓度为5～10％的硫酸乙醇溶液，随后在 100-110℃下加热3～5分钟，放至室温后，将硅胶G薄层板在白光光照下进行检视，得到检视图；在Rf＝0.18～0.21、Rf＝0.40～0.42、Rf＝0.50～0.53、Rf＝0.54～0.60、 Rf＝0.60～0.64、Rf＝0.65～0.70处各有斑点且显示明显的为牛樟芝原料；在 Rf＝0.23～0.28和Rf＝0.36～0.41处各有斑点且显示不明显的为牛樟木原料。
进一步地，步骤5)具体为：吹干步骤4.2)展开好的硅胶G薄层板上的试剂后，在254nm紫外光照下进行检视，得到检视图；在Rf＝0.18～0.21、Rf＝0.40～0.42、 Rf＝0.50～0.53、Rf＝0.54～0.60、Rf＝0.60～0.64以及Rf＝0.65～0.70处各有斑点的为牛樟芝原料；斑点无显示的为牛樟木原料。
进一步地，步骤1)具体为，取牛樟芝原料、牛樟木原料，粉碎后过80目筛，分别置于带塞的三角瓶中，再分别加入所述牛樟芝原料、牛樟木原料质量8～10倍量、质量浓度为70％的乙醇，并进行超声提取60分钟，放至室温，然后采用微孔滤膜过滤，收集滤液作为样品液。
进一步地，步骤2)中，所述点样原点位置距离硅胶G薄层板下边缘的距离为1.0～1.5cm。
进一步地，步骤3.1)中，甲苯、乙酸乙酯和甲酸的体积比为8:5:0.8。
进一步地，步骤3.2)中，所述展开缸采用双槽展开缸，双槽展开缸的大小为10×10cm、20×10cm或10×20cm，且双槽中的展开剂剂量保持一致，并预饱和15分钟。
进一步地，步骤4.2)具体为，当展开剂的前沿上行至距离点样原点 8cm～10cm时，将硅胶G薄层板取出。
进一步地，步骤5)中，所述硫酸乙醇溶液质量比浓度为10％。
本发明的有益效果：
1、本发明提供了一种快速，低成本，简便高效、专属性强，检测结果直观，易于识别的薄层鉴别方法，可解决牛樟芝和牛樟木的鉴别区分问题。
2、本发明提供的薄层鉴别方法，区分明显，易于识别，在254nm、365nm 和日光下，可对牛樟芝和牛樟木之间进行明显区分。
3、本发明选用适量的乙醇直接对原料药材进行超声处理，过滤，滤液作为检测溶液，样品前处理简单，成本低，易于操作。
4、本发明采用甲苯、乙酸乙酯和甲酸以6～10:4～6:0.6～1.0体积比混合，得到展开剂，斑点分离效果好，各样品特征斑点突出，且没有斑点拖尾和斑点扩散现象，结果对比明显，容易判断。
附图说明
图1为本发明实施例中展开后的硅胶G薄层板在254nm光照下的检视图；
图2为本发明实施例中喷完显色剂后的硅胶G薄层板在365nm光照下的检视图；
图3为本发明实施例中喷完显色剂后的硅胶G薄层板在白光光照下的检视图。
具体实施方式
以下结合附图和具体实施例对本发明的内容作进一步的详细描述。
实施例一
1)制备样品液
取牛樟芝原料、牛樟木原料，粉碎后过80目筛，分别置于带塞的三角瓶中，再分别加入牛樟芝原料、牛樟木原料质量6倍量、质量浓度为70％的乙醇，并进行超声提取60分钟，放至室温，然后采用微孔滤膜过滤，收集滤液作为样品液。为确保结果准确，牛樟芝和牛樟木样品液分别制备两份，将牛樟芝和牛樟木样品液编号分别标为1号和2号；
2)进行薄层点样
将步骤1)中制备好的样品液依次点于同一硅胶G薄层板上同一高度的不同位置上形成四个点样原点；且点样原点距离硅胶G薄层板下边缘的距离为 1.0cm；
3)制备展开剂
3.1)将甲苯、乙酸乙酯和甲酸以8:5:0.8的体积比混合均匀，配制得到20mL 展开剂，此处甲苯、乙酸乙酯和甲酸均为纯品。
3.2)将展开剂置于10×10cm双槽展开缸中，两槽中展开剂的量一致，随后密封展开缸，进行预饱和15分钟；
4)展开
4.1)将步骤3)预饱和后的展开缸打开，迅速将步骤2)点样后的硅胶G 薄层板放入展开缸中，使硅胶G薄层板斜靠在展缸中且展开缸中的展开剂不能没过点样原点位置；
4.2)当展开剂沿着薄层板上行展开，至展开剂的前沿上行至距离点样原点 8cm的时，将硅胶G薄层板取出；
5)显色与鉴别
用吹风机吹干步骤4)展开好的硅胶G薄层板上的试剂后，先在254nm光照下进行检视，得到图1检视图；
再向硅胶G薄层板喷以质量比浓度为10％的硫酸乙醇溶液，随后将硅胶G 薄层板置于电加热板上，在105℃下加热4分钟，放至室温后，将硅胶G薄层板分别在365nm紫外光和白光光照下进行检视，分别得到图2和图3检视图。
如图1所示，喷显色剂前，在254nm紫光光照下，硅胶G薄层板上对应编号为1的两个点样处，在Rf＝0.18～0.21、Rf＝0.40～0.42、Rf＝0.50～0.53、Rf＝0.54～0.60、 Rf＝0.60～0.64以及Rf＝0.65～0.70处各有1个黑颜色的荧光斑点，共6个，则对应样品为牛樟芝原料。而对应编号为2的两个点样处，斑点显示不明显，或几乎没有斑点，则对应样品为牛樟木原料。
如图2所示，喷显色剂后，在365nm紫光光照下，硅胶G薄层板上对应编号为1的两个点样处，在Rf＝0.18～0.21、Rf＝0.40～0.42、Rf＝0.50～0.53、Rf＝0.54～0.60、 Rf＝0.60～0.64以及Rf＝0.65～0.70处各有1个斑点，且为8个不同颜色的斑点，则对应样品为牛樟芝原料。而对应编号为2的两个点样处，在Rf＝0.58～0.62、 Rf＝0.65～0.70处各有1个模糊的斑点，其余斑点不明显，或几乎没有斑点，则对应样品为牛樟木原料。
如图3所示，喷显色剂后，在白光光照下，硅胶G薄层板上对应编号为1 的两个点样处，在Rf＝0.18～0.21、Rf＝0.40～0.42、Rf＝0.50～0.53、Rf＝0.54～0.60、 Rf＝0.60～0.64、Rf＝0.65～0.70处各有1个斑点，且为6个不同深浅的棕颜色的斑点，则对应样品为牛樟芝原料。在对应编号为2的两个点样处，在Rf＝0.23～0.28、 Rf＝0.36～0.41处各有1个淡黄色斑点，且不明显，其余斑点很弱或几乎没有斑点，则对应样品为牛樟木原料。
喷显色剂之前，在254nm紫光光照下进行检视得到的检视图，与喷显色剂后，在365nm紫光和白光光照下进行检视得到的检视图，均能明显的区分出牛樟芝原料和牛樟木原料，但考虑到没喷显色剂有可能会显示不全或者显示模糊使结果不够准确，因此宜结合喷显色剂后的检视图进行分析对比使结果更准确。此外，为使结果更加准确可靠，本实施例中在喷显色剂后，分别进行了365nm 紫光和白光的色谱检视，将检视图进行互相验证，确保结果的准确和可靠。
实施例二
1)制备样品液
取牛樟芝原料、牛樟木原料，粉粹后过80目筛，分别置于带塞的三角瓶中，再分别加入牛樟芝原料、牛樟木原料质量8倍量、质量浓度为100％的乙醇，并进行超声提取60分钟，放至室温，然后采用微孔滤膜过滤，收集滤液作为样品液。为确保结果准确，牛樟芝和牛樟木样品液分别制备两份，将牛樟芝和牛樟木样品液编号分别标为1号和2号；
2)进行薄层点样
将步骤1)中制备好的样品液依次点于同一硅胶G薄层板上同一高度的不同位置上形成四个点样原点；且点样原点距离硅胶G薄层板下边缘的距离为 1.3cm；
3)制备展开剂
3.1)将甲苯、乙酸乙酯和甲酸以10:6:1.0的体积比混合均匀，配制得到20mL 展开剂，此处甲苯、乙酸乙酯和甲酸均为纯品。
3.2)将展开剂置于10×10cm双槽展开缸中，两槽中展开剂的量一致，随后密封展开缸，进行预饱和20分钟；
4)展开
4.1)将步骤3)预饱和后的展开缸打开，迅速将步骤2)点样后的硅胶G 薄层板放入展开缸中，使硅胶G薄层板斜靠在展缸中且展开缸中的展开剂不能没过点样原点位置；
4.2)当展开剂沿着薄层板上行展开，至展开剂的前沿上行至距离点样原点 6cm的时，将硅胶G薄层板取出；
5)显色与鉴别
用吹风机吹干步骤4)展开好的硅胶G薄层板上的试剂后，在254nm光照下进行检视，得到检视图与图1类似。
实施例三
1)制备样品液
取牛樟芝原料、牛樟木原料，粉粹后过80目筛，分别置于带塞的三角瓶中，再分别加入牛樟芝原料、牛樟木原料质量6倍量、质量浓度为90％的乙醇，并进行超声提取30分钟，放至室温，然后采用微孔滤膜过滤，收集滤液作为样品液。为确保结果准确，牛樟芝和牛樟木样品液分别制备两份，将牛樟芝和牛樟木样品液编号分别标为1号和2号；
2)进行薄层点样
将步骤1)中制备好的样品液依次点于同一硅胶G薄层板上同一高度的不同位置上形成四个点样原点；且点样原点距离硅胶G薄层板下边缘的距离为 1.5cm；
3)制备展开剂
3.1)将甲苯、乙酸乙酯和甲酸以8:4:0.7的体积比混合均匀，配制得到20mL 展开剂，此处甲苯、乙酸乙酯和甲酸均为纯品。
3.2)将展开剂置于10×10cm双槽展开缸中，两槽中展开剂的量一致，随后密封展开缸，进行预饱和17分钟；
4)展开
4.1)将步骤3)预饱和后的展开缸打开，迅速将步骤2)点样后的硅胶G 薄层板放入展开缸中，使硅胶G薄层板斜靠在展缸中且展开缸中的展开剂不能没过点样原点位置；
4.2)当展开剂沿着薄层板上行展开，至展开剂的前沿上行至距离点样原点 10cm的时，将硅胶G薄层板取出；
5)显色与鉴别
用吹风机吹干步骤4)展开好的硅胶G薄层板上的试剂后，再向硅胶G薄层板喷以质量比浓度为5％的硫酸乙醇溶液，随后将硅胶G薄层板置于电加热板上，在100℃下加热5分钟，放至室温后，将硅胶G薄层板在365nm紫外光光照下进行检视，得到检视图与图2一致。
实施例四
1)制备样品液
取牛樟芝原料、牛樟木原料，粉粹后过80目筛，分别置于带塞的三角瓶中，再分别加入牛樟芝原料、牛樟木原料质量10倍量、质量浓度为70％的乙醇，并进行超声提取50分钟，放至室温，然后采用微孔滤膜过滤，收集滤液作为样品液。为确保结果准确，牛樟芝和牛樟木样品液分别制备两份，将牛樟芝和牛樟木样品液编号分别标为1号和2号；
2)进行薄层点样
将步骤1)中制备好的样品液依次点于同一硅胶G薄层板上同一高度的不同位置上形成四个点样原点；且点样原点距离硅胶G薄层板下边缘的距离为 1.0cm；
3)制备展开剂
3.1)将甲苯、乙酸乙酯和甲酸以6:5:0.6的体积比混合均匀，配制得到20mL 展开剂，此处甲苯、乙酸乙酯和甲酸均为纯品。
3.2)将展开剂置于10×10cm双槽展开缸中，两槽中展开剂的量一致，随后密封展开缸，进行预饱和15分钟；
4)展开
4.1)将步骤3)预饱和后的展开缸打开，迅速将步骤2)点样后的硅胶G 薄层板放入展开缸中，使硅胶G薄层板斜靠在展缸中且展开缸中的展开剂不能没过点样原点位置；
4.2)当展开剂沿着薄层板上行展开，至展开剂的前沿上行至距离点样原点 8cm的时，将硅胶G薄层板取出；
5)显色与鉴别
用吹风机吹干步骤4)展开好的硅胶G薄层板上的试剂后，再向硅胶G薄层板喷以质量比浓度为7％的硫酸乙醇溶液，随后将硅胶G薄层板置于电加热板上，在110℃下加热3分钟，放至室温后，将硅胶G薄层板在白光光照下进行检视，得到检视图与图3一致。
实施例五
1)制备样品液
取牛樟芝原料、牛樟木原料，粉粹后过80目筛，分别置于带塞的三角瓶中，再分别加入牛樟芝原料、牛樟木原料质量6倍量、质量浓度为70％的乙醇，并进行超声提取30分钟，放至室温，然后采用微孔滤膜过滤，收集滤液作为样品液。为确保结果准确，牛樟芝和牛樟木样品液分别制备两份，将牛樟芝和牛樟木样品液编号分别标为1号和2号；
2)进行薄层点样
将步骤1)中制备好的样品液依次点于同一硅胶G薄层板上同一高度的不同位置上形成四个点样原点；且点样原点距离硅胶G薄层板下边缘的距离为 1.5cm；
3)制备展开剂
3.1)将甲苯、乙酸乙酯和甲酸以6:4:0.6的体积比混合均匀，配制得到20mL 展开剂，此处甲苯、乙酸乙酯和甲酸均为纯品。
3.2)将展开剂置于10×10cm双槽展开缸中，两槽中展开剂的量一致，随后密封展开缸，进行预饱和20分钟；
4)展开
4.1)将步骤3)预饱和后的展开缸打开，迅速将步骤2)点样后的硅胶G 薄层板放入展开缸中，使硅胶G薄层板斜靠在展缸中且展开缸中的展开剂不能没过点样原点位置；
4.2)当展开剂沿着薄层板上行展开，至展开剂的前沿上行至距离点样原点6cm的时，将硅胶G薄层板取出；
5)显色与鉴别
用吹风机吹干步骤4)展开好的硅胶G薄层板上的试剂后，再向硅胶G薄层板喷以质量比浓度为10％的硫酸乙醇溶液，随后将硅胶G薄层板置于电加热板上，在105℃下加热5分钟，放至室温后，将硅胶G薄层板分别在365nm紫外光和白光光照下进行检视，分别得到检视图，得到的检视图分别与图2和图3 相似。
实施例二至实施例五得到的检视图可对应参考实施例一得到的检视图，实验结果分析为，喷显色剂前，在254nm光照下，硅胶G薄层板上对应编号为1 的两个点样处，在Rf＝0.18～0.21、Rf＝0.40～0.42、Rf＝0.50～0.53、Rf＝0.54～0.60、 Rf＝0.60～0.64以及Rf＝0.65～0.70处各有的荧光斑点的为牛樟芝原料。而对应编号为2的两个点样处，斑点显示不明显，或几乎没有斑点的为牛樟木原料。在喷显色剂后，在365nm紫光光照下，硅胶G薄层板上对应编号为1的两个点样处，在Rf＝0.18～0.21、Rf＝0.40～0.42、Rf＝0.50～0.53、Rf＝0.54～0.60、Rf＝0.60～0.64 以及Rf＝0.65～0.70处各有斑点，且为不同颜色的斑点，则为牛樟芝原料。而对应编号为2的两个点样处，在Rf＝0.58～0.62、Rf＝0.65～0.70处各有模糊的斑点，其余斑点不明显，或几乎没有斑点，则为牛樟木原料。喷显色剂后，在白光光照下，硅胶G薄层板上对应编号为1的两个点样处，在Rf＝0.18～0.21、 Rf＝0.40～0.42、Rf＝0.50～0.53、Rf＝0.54～0.60、Rf＝0.60～0.64、Rf＝0.65～0.70处各有斑点，且为不同深浅的棕颜色的斑点，则为牛樟芝原料。在对应编号为2的两个点样处，在Rf＝0.23～0.28、Rf＝0.36～0.41处各有淡黄色斑点，且不明显，其余斑点很弱或几乎没有斑点，则为牛樟木原料。
本发明提供了一种牛樟芝和牛樟木的薄层色谱鉴别方法，且得到了牛樟芝和牛樟木的薄层色谱检视图，在实际应用中可将需要鉴别或区分的样品与本发明得到的检视图进行比对，即可区分出牛樟芝和牛樟木，或者鉴别出样品是否为真牛樟芝或者真牛樟木。
本发明提供的薄层色谱鉴别方法，具有快速，低成本，简便高效、专属性强，检测结果直观，对比区分明显、易于识别的优点，在254nm、365nm和白光下，可对牛樟芝和牛樟木之间进行明显区分。
Claims (10)
1.一种用于区别牛樟芝和牛樟木的薄层色谱鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）制备样品液
取牛樟芝原料、牛樟木原料，粉碎后过筛，分别置于可密封的试验容器中，再分别加入所述牛樟芝原料、牛樟木原料质量6~10倍量，质量浓度为70%~100%的乙醇，并进行超声提取30~60分钟，放至室温，然后采用微孔滤膜过滤，收集滤液作为样品液；
2）进行薄层点样
将步骤1）中制备好的样品液依次点于同一硅胶G薄层板上同一高度的不同位置上形成点样原点；
3）制备展开剂
3.1）将甲苯、乙酸乙酯和甲酸以6~10:4~6:0.6~1.0的体积比混合均匀，得到展开剂；
3.2）将展开剂置于展开缸中，密封展开缸，预饱和15~20分钟；
4）展开
4.1）将步骤3）预饱和后的展开缸打开，迅速将步骤2）点样后的硅胶G薄层板放入展开缸中，使硅胶G薄层板斜靠在展缸中且展开缸中的展开剂不能没过点样原点位置；
4.2）当展开剂的前沿上行至距离点样原点6cm~10cm时，将硅胶G薄层板取出；
5）显色与鉴别
待步骤4.2）展开好的硅胶G薄层板上的试剂干燥后，直接在254nm紫外光照下进行检视，得到检视图；或者，待步骤4.2）展开好的硅胶G薄层板上的试剂干燥后，再向硅胶G薄层板喷以质量比浓度为5%~10%的硫酸乙醇溶液，随后在100-110℃下加热3~5分钟，放至室温后，将硅胶G薄层板在白光、365nm紫外光二者之一的光照下进行检视，得到检视图；
检视图中，有多个斑点且显示较为明显的为牛樟芝原料，多个斑点显示不明显，或者无显示的为牛樟木原料。
2.根据权利要求1所述的一种用于区别牛樟芝和牛樟木的薄层色谱鉴别方法，其特征在于，步骤5）具体为：吹干步骤4.2）展开好的硅胶G薄层板上的试剂后，再向硅胶G薄层板喷以质量比浓度为5%~10%的硫酸乙醇溶液，随后在100-110℃下加热3~5分钟，放至室温后，将硅胶G薄层板在365nm紫外光光照下进行检视，得到检视图；在Rf=0.18~0.21、Rf=0.40~0.42、Rf=0.50~0.53、Rf=0.54~0.60、Rf=0.60~0.64以及Rf=0.65~0.70处各有斑点且显示明显的为牛樟芝原料；在Rf=0.58~0.62和Rf=0.65~0.70处各有斑点且显示不明显的为牛樟木原料。
3.根据权利要求1所述的一种用于区别牛樟芝和牛樟木的薄层色谱鉴别方法，其特征在于，步骤5）具体为：吹干步骤4.2）展开好的硅胶G薄层板上的试剂后，再向硅胶G薄层板喷以质量比浓度为5%~10%的硫酸乙醇溶液，随后在100-110℃下加热3~5分钟，放至室温后，将硅胶G薄层板在白光光照下进行检视，得到检视图；在Rf=0.18~0.21、Rf=0.40~0.42、Rf=0.50~0.53、Rf=0.54~0.60、Rf=0.60~0.64、Rf=0.65~0.70处各有斑点且显示明显的为牛樟芝原料；在Rf=0.23~0.28和Rf= 0.36~0.41处各有斑点且显示不明显的为牛樟木原料。
4.根据权利要求1所述的一种用于区别牛樟芝和牛樟木的薄层色谱鉴别方法，其特征在于，步骤5）具体为：吹干步骤4.2）展开好的硅胶G薄层板上的试剂后，在254nm紫外光照下进行检视，得到检视图；在Rf=0.18~0.21、Rf=0.40~0.42、Rf=0.50~0.53、Rf=0.54~0.60、Rf=0.60~0.64以及Rf=0.65~0.70处各有斑点的为牛樟芝原料；斑点无显示的为牛樟木原料。
5.根据权利要求1-4任一所述的一种用于区别牛樟芝和牛樟木的薄层色谱鉴别方法，其特征在于：
步骤1）具体为，取牛樟芝原料、牛樟木原料，粉碎后过80目筛，分别置于带塞的三角瓶中，再分别加入所述牛樟芝原料、牛樟木原料质量8~10倍量、质量浓度为70%的乙醇，并进行超声提取60分钟，放至室温，然后采用微孔滤膜过滤，收集滤液作为样品液。
6.根据权利要求5所述的一种用于区别牛樟芝和牛樟木的薄层色谱鉴别方法，其特征在于：
步骤2）中，所述点样原点位置距离硅胶G薄层板下边缘的距离为1.0~1.5cm。
7.根据权利要求6所述的一种用于区别牛樟芝和牛樟木的薄层色谱鉴别方法，其特征在于：
步骤3.1）中，甲苯、乙酸乙酯和甲酸的体积比为8:5:0.8。
8.根据权利要求7所述的一种用于区别牛樟芝和牛樟木的薄层色谱鉴别方法，其特征在于：
步骤3.2）中，所述展开缸采用双槽展开缸，双槽展开缸的大小为10×10cm、20×10cm或10×20cm，且双槽中的展开剂剂量保持一致，并预饱和15分钟。
9.根据权利要求8所述的一种用于区别牛樟芝和牛樟木的薄层色谱鉴别方法，其特征在于：
步骤4.2）具体为，当展开剂的前沿上行至距离点样原点8cm~10cm时，将硅胶G薄层板取出。
10.根据权利要求2或3所述的一种用于区别牛樟芝和牛樟木的薄层色谱鉴别方法，其特征在于：
步骤5）中，所述硫酸乙醇溶液质量比浓度为10%。
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