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CN114401955A - 细胞周期蛋白依赖性激酶的抑制剂 - Google Patents

细胞周期蛋白依赖性激酶的抑制剂 Download PDF

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Publication number
CN114401955A
CN114401955A CN202080065039.5A CN202080065039A CN114401955A CN 114401955 A CN114401955 A CN 114401955A CN 202080065039 A CN202080065039 A CN 202080065039A CN 114401955 A CN114401955 A CN 114401955A
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CN
China
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optionally substituted
pharmaceutically acceptable
compound
solvate
acceptable salt
Prior art date
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Pending
Application number
CN202080065039.5A
Other languages
English (en)
Inventor
陶菲克·卡努尼
李·D·阿诺德
史蒂芬·W·卡尔多
埃里克·A·墨菲
约翰·泰霍纳斯
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Jinnaite Biopharmaceutical Co
Original Assignee
Jinnaite Biopharmaceutical Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jinnaite Biopharmaceutical Co filed Critical Jinnaite Biopharmaceutical Co
Publication of CN114401955A publication Critical patent/CN114401955A/zh
Pending legal-status Critical Current

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    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
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Abstract

本文提供了作为细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)的抑制剂的化合物，包含所述化合物的药物组合物，以及使用所述化合物治疗疾病的方法。

Description

细胞周期蛋白依赖性激酶的抑制剂
相关申请的交叉引用
本申请要求2019年7月17日提交的第62/875,168号美国临时申请的权益，该美国临时申请通过引用并入本申请的公开内容中。
背景技术
细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)是一类多功能酶，其修饰参与细胞周期进程的各种蛋白质底物。具体而言，CDK通过将磷酸基团从ATP转移到其底物中的特定氨基酸段上而对其底物进行磷酸化。CDK的失调与包括癌症在内的许多人类疾病的病因有关。
发明内容
本文提供了细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)的抑制剂，包含所述化合物的药物组合物，以及使用所述化合物治疗疾病的方法。
一个实施方案提供了一种化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其具有式(I)的结构：
Figure BDA0003549429610000011
其中，
环A是任选取代的选自吡啶、吡嗪、嘧啶、喹啉、异喹啉、喹唑啉、吡唑并吡啶、吡唑并嘧啶、噻吩并嘧啶、噻吩并吡啶、吡啶并吡啶、吡啶并嘧啶或三氮烯的杂芳基；
W选自具有以下结构的基团：
Figure BDA0003549429610000021
t是1或2；u是0、1或2；
R1、R2和R3各自独立地选自氢、任选取代的C1-C4烷基或任选取代的杂环基(烷基)；
R4是氢或任选取代的C1-C4烷基，或任选地，如果R3是任选取代的C1-C4烷基且R4是任选取代的C1-C4烷基，则R3和R4连接在一起形成环；
R5选自氢、-CN、-NH2、卤素、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C1-C4烷氧基或任选取代的C1-C4氨基烷基；
R6选自氢、-CN、-NH2、卤素、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C1-C4烷氧基或任选取代的C1-C4氨基烷基；
X为N或C-H；
Y为N或C-L1-R11；
Z为N或C-L2-R7；
L1和L2各自独立地是键、-O-或-N(R8)-；
R7选自氢、-CN、卤素、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C3-C7碳环基、任选取代的碳环基(烷基)、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基(烷基)；
R8为氢或任选取代的C1-C4烷基；
R9选自氢或任选取代的C1-C4烷基；
R10选自氢或任选取代的C1-C4烷基；且
R11选自氢、-CN、卤素、-NH2、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C3-C7碳环基、任选取代的碳环基(烷基)、任选取代的杂环基或任选取代的杂环基(烷基)。
一个实施方案提供了一种药物组合物，其包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。
一个实施方案提供了一种治疗有需要的患者的疾病或病症的方法，其包括向所述患者施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。另一个实施方案提供了所述方法，其中所述疾病或病症是癌症。
一个实施方案提供了一种治疗有需要的患者的癌症的方法，其包括向所述患者施用一种药物组合物，该组合物包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，以及至少一种药学上可接受的赋形剂。
援引并入
本说明书中提到的所有出版物、专利和专利申请均为了此处所述的具体目的而通过引用并入本文。
具体实施方式
如在本文中和在所附权利要求书中所用的，单数形式“一种”、“一个”和“所述”包括复数指代物，除非上下文另有明确说明。因此，例如，提及“一种药剂”包括多种这样的药剂，而提及“所述细胞”包括提及一种或多种细胞(或多个细胞)和本领域技术人员已知的其等同物，等等。当本文针对物理性质如分子量或化学性质如化学式使用范围时，旨在包括本文中范围和具体实施方案的所有组合和子组合。当提及数字或数值范围时使用的术语“约”是指所提及的数字或数值范围为在实验可变性范围内(或者在统计实验误差范围内)的近似值，因此在一些情况下，该数字或数值范围将在所述数字或数值范围的1％至15％之间变化。术语“包含”(以及相关的术语，如“包括”或“具有”或“含有”)并非旨在排除，在其他某些实施方案中，例如，本文描述的任何物质组成、组合物、方法或过程等的实施方案“由所述特征组成”或“基本上由所述特征组成”。
定义
如在本说明书及所附权利要求书中所使用的，除非指出意思相反，否则下列术语具有以下所述的含义。
“氨基”指-NH2基团。
“氰基”是指-CN基团。
“硝基”是指-NO2基团。
“氧杂”是指-O-基团。
“氧代”是指＝O基团。
“硫代”是指＝S基团。
“亚氨基”是指＝N-H基团。
“肟基”是指＝N-OH基团。
“肼基”是指＝N-NH2基团。
“烷基”是指仅由碳原子和氢原子组成、不含不饱和度、具有1-15个碳原子(例如，C1-C15烷基)的直链或支链的烃链基团。在某些实施方案中，烷基包含1至13个碳原子(例如，C1-C13烷基)。在某些实施方案中，烷基包含1-8个碳原子(例如，C1-C8烷基)。在其他实施方案中，烷基包含1至5个碳原子(例如，C1-C5烷基)。在其他实施方案中，烷基包含1至4个碳原子(例如，C1-C4烷基)。在其他实施方案中，烷基包含1至3个碳原子(例如，C1-C3烷基)。在其他实施方案中，烷基包含1至2个碳原子(例如，C1-C2烷基)。在其他实施方案中，烷基包含1个碳原子(例如，C1烷基)。在其他实施方案中，烷基包含5至15个碳原子(例如，C5-C15烷基)。在其他实施方案中，烷基包含5至8个碳原子(例如，C5-C8烷基)。在其他实施方案中，烷基包含2至5碳原子(例如，C2-C5烷基)。在其他实施方案中，烷基包含3至5个碳原子(例如，C3-C5烷基)。在其他实施方案中，所述烷基选自甲基、乙基、1-丙基(正丙基)、1-甲基乙基(异丙基)、1-丁基(正丁基)、1，1-甲基丙基(仲丁基)、2-甲基丙基(异丁基)、1，1-二甲基乙基(叔丁基)、1-戊基(正戊基)。烷基通过单键与分子的其余部分连接。除非在说明书中另有明确规定，否则烷基任选地被一个或多个下列取代基取代：卤代、氰基、硝基、氧代、硫代、亚氨基、肟基、三甲基硅烷基、-ORa、-SRa、-OC(O)-Ra、-N(Ra)2、-C(O)Ra、-C(O)ORa、-C(O)N(Ra)2、-N(Ra)C(O)ORa、-OC(O)-N(Ra)2、-N(Ra)C(O)Ra、-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-S(O)tORa(其中t为1或2)、-S(O)tRa(其中t为1或2)和-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)，其中每个Ra独立地为氢、烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、氟烷基、碳环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、碳环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)或杂芳基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)。
“烷氧基”是指式-O-烷基的通过氧原子键合的基团，其中烷基为如上定义的烷基链。
“烯基”是指仅由碳原子和氢原子组成、含有至少一个碳-碳双键且具有2-12个碳原子的直链或支链的烃链基团。在某些实施方案中，烯基包含2至8个碳原子。在其他实施方案中，烯基包含2至4个碳原子。该烯基通过单键与分子的其余部分连接，例如，乙烯基、丙-1-烯基(即烯丙基)、丁-1-烯基、戊-1-烯基、戊-1,4-二烯基等。除非在说明书中另有明确规定，否则烯基任选地被一个或多个下列取代基取代：卤代、氰基、硝基、氧代、硫代、亚氨基、肟基、三甲基硅烷基、-ORa、-SRa、-OC(O)-Ra、-N(Ra)2、-C(O)Ra、-C(O)ORa、-C(O)N(Ra)2、-N(Ra)C(O)ORa、-OC(O)-N(Ra)2、-N(Ra)C(O)Ra、-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-S(O)tORa(其中t为1或2)、-S(O)tRa(其中t为1或2)和-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)，其中每个Ra独立地为氢、烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、氟烷基、碳环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、碳环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)或杂芳基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)。
“炔基”是指仅由碳原子和氢原子组成、含有至少一个碳-碳三键、具有2-12个碳原子的直链或支链的烃链基团。在某些实施方案中，炔基包含2至8个碳原子。在其他实施方案中，炔基包含2至6个碳原子。在其他实施方案中，炔基包含2至4个碳原子。炔基通过单键与分子的其余部分连接，例如，乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基等。除非在说明书中另有明确规定，否则炔基任选地被一个或多个下列取代基取代：卤代、氰基、硝基、氧代、硫代、亚氨基、肟基、三甲基硅烷基、-ORa、-SRa、-OC(O)-Ra、-N(Ra)2、-C(O)Ra、-C(O)ORa、-C(O)N(Ra)2、-N(Ra)C(O)ORa、-OC(O)-N(Ra)2、-N(Ra)C(O)Ra、-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-S(O)tORa(其中t为1或2)、-S(O)tRa(其中t为1或2)和-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)，其中每个Ra独立地为氢、烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、氟烷基、碳环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、碳环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)或杂芳基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)。
“亚烷基”或“亚烷基链”指连接分子的其余部分与基团的直链或支链二价烃链，其仅由碳和氢组成，不包含不饱和度并具有1-12个碳原子，例如，亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚正丁基等。亚烷基链通过单键与分子的其余部分连接并通过单键与基团连接。亚烷基链与分子的其余部分以及与基团的连接点是通过亚烷基链中的一个碳或通过链内的任意两个碳。在某些实施方案中，亚烷基包含1至8个碳原子(例如，C1-C8亚烷基)。在其他实施方案中，亚烷基包含1至5个碳原子(例如，C1-C5亚烷基)。在其他实施方案中，亚烷基包含1至4个碳原子(例如，C1-C4亚烷基)。在其他实施方案中，亚烷基包含1至3个碳原子(例如，C1-C3亚烷基)。在其他实施方案中，亚烷基包含1至2个碳原子(例如，C1-C2亚烷基)。在其他实施方案中，亚烷基包含1个碳原子(例如，C1亚烷基)。在其他实施方案中，亚烷基包含5至8个碳原子(例如，C5-C8亚烷基)。在其他实施方案中，亚烷基包含2至5个碳原子(例如，C2-C5亚烷基)。在其他实施方案中，亚烷基包含3至5个碳原子(例如，C3-C5亚烷基)。除非在说明书中另有明确规定，否则亚烷基链任选地被一个或多个下列取代基取代：卤代、氰基、硝基、氧代、硫代、亚氨基、肟基、三甲基硅烷基、-ORa、-SRa、-OC(O)-Ra、-N(Ra)2、-C(O)Ra、-C(O)ORa、-C(O)N(Ra)2、-N(Ra)C(O)ORa、-OC(O)-N(Ra)2、-N(Ra)C(O)Ra、-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-S(O)tORa(其中t为1或2)、-S(O)tRa(其中t为1或2)和-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)，其中每个Ra独立地为氢、烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、氟烷基、碳环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、碳环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)或杂芳基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)。
“亚烯基”或“亚烯基链”是指将分子的其余部分与基团连接的直链或支链二价烃链，其仅由碳和氢组成，含有至少一个碳-碳双键，并且具有2至12个碳原子。亚烯基链通过单键连接至分子的其余部分，并且通过单键连接至基团。在某些实施方案中，亚烯基包含2至8个碳原子(例如，C2-C8亚烯基)。在其他实施方案中，亚烯基包含2至5个碳原子(例如，C2-C5亚烯基)。在其他实施方案中，亚烯基包含2至4个碳原子(例如，C2-C4亚烯基)。在其他实施方案中，亚烯基包含2至3个碳原子(例如，C2-C3亚烯基)。在其他实施方案中，亚烯基包含2个碳原子(例如，C2亚烯基)。在其他实施方案中，亚烯基包含5至8个碳原子(例如，C5-C8亚烯基)。在其他实施方案中，亚烯基包含3至5个碳原子(例如，C3-C5亚烯基)。除非在说明书中另有明确规定，否则亚烯基链任选地被一个或多个下列取代基取代：卤代、氰基、硝基、氧代、硫代、亚氨基、肟基、三甲基硅烷基、-ORa、-SRa、-OC(O)-Ra、-N(Ra)2、-C(O)Ra、-C(O)ORa、-C(O)N(Ra)2、-N(Ra)C(O)ORa、-OC(O)-N(Ra)2、-N(Ra)C(O)Ra、-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-S(O)tORa(其中t为1或2)、-S(O)tRa(其中t为1或2)和-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)，其中每个Ra独立地为氢、烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、氟烷基、碳环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、碳环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)或杂芳基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)。
“亚炔基”或“亚炔基链”是指将分子的其余部分与基团连接的直链或支链二价烃链，其仅由碳和氢组成，含有至少一个碳-碳三键，并且具有2至12个碳原子。亚炔基链通过单键连接至分子的其余部分，并且通过单键连接至基团。在某些实施方案中，亚炔基包含2至8个碳原子(例如，C2-C8亚炔基)。在其他实施方案中，亚炔基包含2至5个碳原子(例如，C2-C5亚炔基)。在其他实施方案中，亚炔基包含2至4个碳原子(例如，C2-C4亚炔基)。在其他实施方案中，亚炔基包含2至3个碳原子(例如，C2-C3亚炔基)。在其他实施方案中，亚炔基包含2个碳原子(例如，C2亚炔基)。在其他实施方案中，亚炔基包含5至8个碳原子(例如，C5-C8亚炔基)。在其他实施方案中，亚炔基包含3至5个碳原子(例如，C3-C5亚炔基)。除非在说明书中另有明确规定，否则亚炔基链任选地被一个或多个下列取代基取代：卤代、氰基、硝基、氧代、硫代、亚氨基、肟基、三甲基硅烷基、-ORa、-SRa、-OC(O)-Ra、-N(Ra)2、-C(O)Ra、-C(O)ORa、-C(O)N(Ra)2、-N(Ra)C(O)ORa、-OC(O)-N(Ra)2、-N(Ra)C(O)Ra、-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-S(O)tORa(其中t为1或2)、-S(O)tRa(其中t为1或2)和-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)，其中每个Ra独立地为氢、烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、氟烷基、碳环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、碳环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)或杂芳基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)。
“氨基烷基”是指-N(烷基)2基团，其中每个“烷基”独立地如上所定义，例如，二甲基氨基((CH3)2N-)、乙基(甲基)氨基(C2H5N(CH3)-、(2-氨基乙基)(甲基)氨基(H2N-CH2CH2N(CH3)-)、(2-(二甲基氨基)乙基)(甲基)氨基(CH3)2N-CH2CH2N(CH3)-)等。在一些实施方案中，氨基烷基基团的烷基部分如以上针对烷基所述任选地被取代。
“芳基”是指通过从环碳原子上去除氢原子而由芳族单环或多环烃环体系衍生的基团。芳族单环或多环烃环体系仅包含氢和来自5-18个碳原子的碳，其中该环系中的至少一个环是完全不饱和的，即，其根据休克尔(Hückel)理论包含环状、离域的(4n+2)π-电子体系。衍生出芳基的环系包括但不限于诸如苯、芴、茚满、茚、四氢化萘和萘等基团。除非在说明书中另有明确说明，否则术语“芳基”或前缀“芳”(如在“芳烷基”中)意在包括任选地被一个或多个独立地选自以下的取代基所取代的芳基基团：烷基、烯基、炔基、卤代、氟烷基、氰基、硝基、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的芳烯基、任选取代的芳炔基、任选取代的碳环基、任选取代的碳环基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的杂芳基、任选取代的杂芳基烷基、-Rb-ORa、-Rb-OC(O)-Ra、-Rb-OC(O)-ORa、-Rb-OC(O)-N(Ra)2、-Rb-N(Ra)2、-Rb-C(O)Ra、-Rb-C(O)ORa、-Rb-C(O)N(Ra)2、-Rb-O-Rc-C(O)N(Ra)2、-Rb-N(Ra)C(O)ORa、-Rb-N(Ra)C(O)Ra、-Rb-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-Rb-S(O)tRa(其中t为1或2)、-Rb-S(O)tORa(其中t为1或2)和-Rb-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)，其中每个Ra独立地为氢、烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、氟烷基、环烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、环烷基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)或杂芳基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)，每个Rb独立地为直接键或直链或支链亚烷基或亚烯基链，且Rc为直链或支链亚烷基或亚烯基链，并且除非另有说明，其中上述取代基中的每一个为未取代的。
“芳烷基”是指式-Rc-芳基的基团，其中Rc为如上文所定义的亚烷基链，例如，亚甲基、亚乙基等。芳烷基基团的亚烷基链部分如上文针对亚烷基链所述任选地被取代。芳烷基基团的芳基部分如上文针对芳基所述任选地被取代。
“芳烯基”是指式-Rd-芳基的基团，其中Rd为如上文所定义的亚烯基链。芳烯基基团的芳基部分如上文针对芳基所述任选地被取代。芳烯基基团的亚烯基链部分如上文针对亚烯基所述任选地被取代。
“芳炔基”是指式-Re-芳基的基团，其中Re为如上文所定义的亚炔基链。芳炔基基团的芳基部分如上文针对芳基所述任选地被取代。芳炔基基团的亚炔基链部分如上文针对亚炔基链所述任选地被取代。
“芳烷氧基”是指式-O-Rc-芳基的通过氧原子键合的基团，其中Rc为如上文所定义的亚烷基链，例如，亚甲基、亚乙基等。芳烷基的亚烷基链部分如上文针对亚烷基链所述任选地被取代。芳烷基基团的芳基部分如上文针对芳基所述任选地被取代。
“碳环基”是指仅由碳和氢原子组成的稳定的非芳族单环或多环烃基团，其包括稠环或桥环体系，具有3至15个碳原子。在某些实施方案中，碳环基包含3至10个碳原子。在其他实施方案中，碳环基包含5至7个碳原子。该碳环基通过单键与分子的其余部分连接。碳环基是饱和的(即仅包含单一C-C键)或不饱和的(即含有一个或多个双键或三键)。完全饱和的碳环基基团还被称为“环烷基”。单环环烷基的实例包括，例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。不饱和的碳环基还被称为“环烯基”。单环环烯基的实例包括，例如，环戊烯基、环己烯基、环庚烯基和环辛烯基。多环碳环基基团包括，例如，金刚烷基、降冰片基(即，双环[2.2.1]庚烷基)、降冰片烯基、十氢萘基、7，7-二甲基-双环[2.2.1]庚烷基等。除非在说明书中另有明确说明，否则术语“碳环基”意在包括任选地被一个或多个独立地选自以下的取代基所取代的碳环基基团：烷基、烯基、炔基、卤代、氟烷基、氧代、硫代、氰基、硝基、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的芳烯基、任选取代的芳炔基、任选取代的碳环基、任选取代的碳环基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的杂芳基、任选取代的杂芳基烷基、-Rb-ORa、-Rb-OC(O)-Ra、-Rb-OC(O)-ORa、-Rb-OC(O)-N(Ra)2、-Rb-N(Ra)2、-Rb-C(O)Ra、-Rb-C(O)ORa、-Rb-C(O)N(Ra)2、-Rb-O-Rc-C(O)N(Ra)2、-Rb-N(Ra)C(O)ORa、-Rb-N(Ra)C(O)Ra、-Rb-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-Rb-S(O)tRa(其中t为1或2)、-Rb-S(O)tORa(其中t为1或2)和-Rb-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)，其中每个Ra独立地为氢、烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、氟烷基、环烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、环烷基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)或杂芳基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)，每个Rb独立地为直接键或直链或支链亚烷基或亚烯基链，且Rc为直链或支链亚烷基或亚烯基链，并且除非另有说明，其中上述取代基中的每一个为未取代的。
“碳环基烷基”是指式-Rc-碳环基的基团，其中Rc为如上文所定义的亚烷基链。亚烷基链和碳环基基团如上文所述任选地被取代。
“碳环基炔基”是指式-Rc-碳环基的基团，其中Rc为如上文所定义的亚炔基链。亚炔基链和碳环基基团如上文所述任选地被取代。
“碳环基烷氧基”是指式-O-Rc-碳环基的通过氧原子键合的基团，其中Rc为如上所定义的亚烷基链。亚烷基链和碳环基基团如上文所述任选地被取代。
如本文所用的，“羧酸生物电子等排体”是指表现出与羧酸部分类似的物理、生物和/或化学性质的官能团或部分。羧酸生物电子等排体的实例包括但不限于：
Figure BDA0003549429610000121
Figure BDA0003549429610000122
等。
“卤代”或“卤素”是指溴代、氯代、氟代或碘代取代基。
“氟烷基”是指被一个或多个如上定义的氟代基团取代的如上定义的烷基基团，例如，三氟甲基、二氟甲基、氟甲基、2，2，2-三氟乙基、1-氟甲基-2-氟乙基等。在一些实施方案中，氟烷基的烷基部分如以上针对烷基所述任选地被取代。
“杂环基”是指稳定的3至18元非芳族环基团，其包含2至12个碳原子和1至6个选自氮、氧和硫的杂原子。除非在说明书中另有明确说明，否则杂环基基团是单环、双环、三环或四环的环系，其任选地包括稠环或桥环体系。杂环基基团中的杂原子任选地被氧化。如果存在一个或多个氮原子，其任选地被季铵化。杂环基是部分或完全饱和的。杂环基通过环中的任何原子连接至分子的其余部分。这类杂环基基团的实例包括但不限于二氧戊环基、噻吩基[1,3]二噻烷基、十氢异喹啉基、咪唑啉基、咪唑烷基、异噻唑烷基、异噁唑烷基、吗啉基、八氢吲哚基、八氢异吲哚基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代吡咯烷基、噁唑烷基、哌啶基、哌嗪基、4-哌啶酮基、吡咯烷基、吡唑烷基、奎宁环基、噻唑烷基、四氢呋喃基、三噻烷基、四氢吡喃基、硫代吗啉基、硫杂吗啉基、1-氧代-硫代吗啉基和1,1-二氧代-硫代吗啉基。除非在说明书中另有明确说明，否则术语“杂环基”意在包括任选地被一个或多个选自以下的取代基所取代的如上定义的杂环基基团：烷基、烯基、炔基、卤代、氟烷基、氧代、硫代、氰基、硝基、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的芳烯基、任选取代的芳炔基、任选取代的碳环基、任选取代的碳环基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的杂芳基、任选取代的杂芳基烷基、-Rb-ORa、-Rb-OC(O)-Ra、-Rb-OC(O)-ORa、-Rb-OC(O)-N(Ra)2、-Rb-N(Ra)2、-Rb-C(O)Ra、-Rb-C(O)ORa、-Rb-C(O)N(Ra)2、-Rb-O-Rc-C(O)N(Ra)2、-Rb-N(Ra)C(O)ORa、-Rb-N(Ra)C(O)Ra、-Rb-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-Rb-S(O)tRa(其中t为1或2)、-Rb-S(O)tORa(其中t为1或2)和-Rb-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)，其中每个Ra独立地为氢、烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、氟烷基、环烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、环烷基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)或杂芳基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)，每个Rb独立地为直接键或直链或支链亚烷基或亚烯基链，且Rc为直链或支链亚烷基或亚烯基链，并且除非另有说明，其中上述取代基中的每一个为未取代的。
“N-杂环基”或“N-连接的杂环基”是指含有至少一个氮的如上定义的杂环基基团，并且其中杂环基基团与分子的其余部分的连接点是通过杂环基基团中的氮原子。N-杂环基基团如上文针对杂环基基团所述任选地被取代。这样的N-杂环基基团的实例包括但不限于1-吗啉基、1-哌啶基、1-哌嗪基、1-吡咯烷基、吡唑烷基、咪唑啉基和咪唑烷基。
“C-杂环基”或“C-连接的杂环基”是指含有至少一个杂原子的如上定义的杂环基基团，并且其中杂环基基团与分子的其余部分的连接点是通过杂环基基团中的碳原子。C-杂环基基团如上文针对杂环基基团所述任选地被取代。这样的C-杂环基基团的实例包括但不限于2-吗啉基、2-或3-或4-哌啶基、2-哌嗪基、2-或3-吡咯烷基等。
“杂环基烷基”是指式-Rc-杂环基的基团，其中Rc为如上所定义的亚烷基链。如果杂环基为含氮的杂环基，则该杂环基任选地在该氮原子处连接至烷基基团。杂环基烷基基团的亚烷基链如上文针对亚烷基链所述任选地被取代。杂环基烷基基团的杂环基部分如上文针对杂环基所述任选地被取代。
“杂环基烷氧基”是指式-O-Rc-杂环基的通过氧原子键合的基团，其中Rc为如上所定义的亚烷基链。如果杂环基为含氮的杂环基，则该杂环基任选地在该氮原子处连接至烷基基团。杂环基烷氧基基团的亚烷基链如上文针对亚烷基链所述任选地被取代。杂环基烷氧基基团的杂环基部分如上文针对杂环基所述任选地被取代。
“杂芳基”是指由包含2至17个碳原子以及1至6个选自氮、氧和硫的杂原子的3至18元芳环基团衍生的基团。如本文所用的，杂芳基基团是单环、双环、三环或四环环系，其中该环系中的至少一个环是完全不饱和的，即，其根据休克尔理论包含环状、离域的(4n+2)π–电子体系。杂芳基包括稠合或桥连的环系。杂芳基基团中的杂原子任选地被氧化。如果存在一个或多个氮原子，其任选地被季铵化。杂芳基通过环中的任何原子与分子的其余部分连接。杂芳基的实例包括但不限于氮杂
Figure BDA0003549429610000141
基、吖啶基、苯并咪唑基、苯并吲哚基、1,3-苯并二氧戊环基、苯并呋喃基、苯并噁唑基、苯并[d]噻唑基、苯并噻二唑基、苯并[b][1,4]二氧杂
Figure BDA0003549429610000142
基、苯并[b][1,4]噁嗪基、1,4-苯并二噁烷基、苯并萘并呋喃基(benzonaphthofuranyl)、苯并噁唑基、苯并二氧戊环基、苯并二噁英基(benzodioxinyl)、苯并吡喃基、苯并吡喃酮基(benzopyranonyl)、苯并呋喃基、苯并呋喃酮基(benzofuranonyl)、苯并噻吩基(benzothienyl)(benzothiophenyl)、苯并噻吩并[3,2-d]嘧啶基、苯并三唑基、苯并[4,6]咪唑并[1,2-a]吡啶基、咔唑基、噌啉基、环戊并[d]嘧啶基、6,7-二氢-5H-环戊并[4,5]噻吩并[2,3-d]嘧啶基、5,6-二氢苯并[h]喹唑啉基、5,6-二氢苯并[h]噌啉基、6,7-二氢-5H-苯并[6,7]环庚并[1,2-c]哒嗪基、二苯并呋喃基、二苯并噻吩基、呋喃基、呋喃酮基、呋喃并[3,2-c]吡啶基、5,6,7,8,9,10-六氢环辛并[d]嘧啶基、5,6,7,8,9,10-六氢环辛并[d]哒嗪基、5,6,7,8,9,10-六氢环辛并[d]吡啶基、异噻唑基、咪唑基、吲唑基、吲哚基、吲唑基、异吲哚基、吲哚啉基、异吲哚啉基、异喹啉基、吲嗪基、异噁唑基、5,8-甲桥-5,6,7,8-四氢喹唑啉基、萘啶基、1,6-萘啶酮基(1,6-naphthyridinonyl)、噁二唑基、2-氧代氮杂
Figure BDA0003549429610000151
基、噁唑基、环氧乙烷基、5,6,6a,7,8,9,10,10a-八氢苯并[h]喹唑啉基、1-苯基-1H-吡咯基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁嗪基、酞嗪基、蝶啶基、嘌呤基、吡咯基、吡唑基、吡唑并[3,4-d]嘧啶基、吡啶基、吡啶并[3,2-d]嘧啶基、吡啶并[3,4-d]嘧啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、吡咯基、喹唑啉基、喹喔啉基、喹啉基、异喹啉基、四氢喹啉基、5,6,7,8-四氢喹唑啉基、5,6,7,8-四氢苯并[4,5]噻吩并[2,3-d]嘧啶基、6,7,8,9-四氢-5H-环庚并[4,5]噻吩并[2,3-d]嘧啶基、5,6,7,8-四氢吡啶并[4,5-c]哒嗪基、噻唑基、噻二唑基、三唑基、四唑基、三嗪基、噻吩并[2,3-d]嘧啶基、噻吩并[3,2-d]嘧啶基、噻吩并[2,3-c]吡啶基和噻吩基(thiophenyl)(即噻吩基(thienyl))。除非在说明书中另有明确说明，否则术语“杂芳基”意在包括任选地被一个或多个选自以下的取代基所取代的如上所定义的杂芳基基团：烷基、烯基、炔基、卤代、氟烷基、卤代烯基、卤代炔基、氧代、硫代、氰基、硝基、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的芳烯基、任选取代的芳炔基、任选取代的碳环基、任选取代的碳环基烷基、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基烷基、任选取代的杂芳基、任选取代的杂芳基烷基、-Rb-ORa、-Rb-OC(O)-Ra、-Rb-OC(O)-ORa、-Rb-OC(O)-N(Ra)2、-Rb-N(Ra)2、-Rb-C(O)Ra、-Rb-C(O)ORa、-Rb-C(O)N(Ra)2、-Rb-O-Rc-C(O)N(Ra)2、-Rb-N(Ra)C(O)ORa、-Rb-N(Ra)C(O)Ra、-Rb-N(Ra)S(O)tRa(其中t为1或2)、-Rb-S(O)tRa(其中t为1或2)、-Rb-S(O)tORa(其中t为1或2)和-Rb-S(O)tN(Ra)2(其中t为1或2)，其中每个Ra独立地为氢、烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、氟烷基、环烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、环烷基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、芳烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂环基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)、杂芳基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)或杂芳基烷基(任选地被卤素、羟基、甲氧基或三氟甲基取代)，每个Rb独立地为直接键或直链或支链亚烷基或亚烯基链，且Rc为直链或支链亚烷基或亚烯基链，并且除非另有说明，其中上述取代基中的每一个为未取代的。
“N-杂芳基”是指含有至少一个氮的如上定义的杂芳基基团，并且其中该杂芳基基团与分子的其余部分的连接点是通过该杂芳基基团中的氮原子。N-杂芳基基团如上文针对杂芳基基团所述任选地被取代。
“C-杂芳基”是指如上所定义的杂芳基，其中该杂芳基基团与分子的其余部分的连接点是通过该杂芳基基团中的碳原子。C-杂芳基基团如上文针对杂芳基基团所述任选地被取代。
“杂芳基烷基”是指式–Rc-杂芳基的基团，其中Rc为如上所定义的亚烷基链。如果杂芳基为含氮的杂芳基，则该杂芳基任选地在该氮原子处与烷基基团连接。杂芳基烷基基团的亚烷基链如上文针对亚烷基链所定义的任选地被取代。杂芳基烷基基团的杂芳基部分如上文针对杂芳基所定义的任选地被取代。
“杂芳基烷氧基”是指式–O-Rc-杂芳基的通过氧原子键合的基团，其中Rc为如上所定义的亚烷基链。如果杂芳基为含氮杂芳基，则该杂芳基任选地在氮原子处与烷基连接。杂芳基烷氧基基团的亚烷基链如上文针对亚烷基链所述任选地被取代。杂芳基烷氧基基团的杂芳基部分如上文针对杂芳基所定义的任选地被取代。
在一些实施方案中，本文公开的化合物含有一个或多个不对称中心，因此产生了对映异构体、非对映异构体以及根据绝对立体化学被定义为(R)-或(S)-的其他立体异构形式。除非另有说明，否则本公开意在涉及本文公开的化合物的所有立体异构形式。当本文所述的化合物含有烯烃双键时，除非另有说明，否则本公开意在同时包括E和Z几何异构体(例如，顺式或反式)。同样，还意在包括所有可能的异构体，以及其外消旋形式和光学纯形式，和所有互变异构形式。术语“几何异构体”是指烯烃双键的E或Z几何异构体(例如顺式或反式)。术语“位置异构体”是指围绕中心环的结构异构体，如围绕苯环的邻位、间位和对位异构体。
“互变异构体”是指这样的分子，其中质子从分子的一个原子移动到同一分子的另一原子是可能的。在某些实施方案中，本文提供的化合物作为互变异构体存在。在可能发生互变异构的情形下，将存在互变异构体的化学平衡。互变异构体的确切比例取决于若干因素，包括物理状态、温度、溶剂和pH。互变异构平衡的一些实例包括：
Figure BDA0003549429610000171
在一些实施方案中，本文公开的化合物以不同的富集同位素形式使用，例如，富含2H、3H、11C、13C和/或14C含量的形式。在一个特定实施方案中，所述化合物在至少一个位置处被氘化。这类氘化形式可通过美国专利5,846,514和6,334,997所述的程序制备。如美国专利5,846,514和6,334,997所述，氘化可改善代谢稳定性和/或功效，从而增加药物的作用持续时间。
除非另有说明，否则本文所示的结构旨在包括仅在是否存在一个或多个同位素富集的原子方面不同的化合物。例如，除了氢被氘或氚替代或者碳被13C-或14C-富集的碳替代之外具有本结构的化合物也在本公开的范围内。
本公开的化合物任选地在构成此类化合物的一个或多个原子处含有非天然比例的原子同位素。例如，可使用同位素如氘(2H)、氚(3H)、碘-125(125I)或碳-14(14C)标记化合物。用2H、11C、13C、14C、15C、12N、13N、15N、16N、16O、17O、14F、15F、16F、17F、18F、33S、34S、35S、36S、35Cl、37Cl、79Br、81Br、125I进行的同位素取代均在预期之内。在一些实施方案中，考虑用18F进行同位素取代。本发明化合物的所有同位素变化，无论是否为放射性的，均包括在本发明的范围内。
在某些实施方案中，本文公开的化合物的一些或全部1H原子被2H原子替代。含氘化合物的合成方法是本领域已知的，仅作为非限制性实例，包括以下合成方法。
使用各种方法来合成氘取代的化合物，所述方法例如描述于：Dean，Dennis C.编.Recent Advances in the Synthesis and Applications of Radiolabeled Compoundsfor Drug Discovery and Development.[Curr.,Pharm.Des.,2000；6(10)]2000,第110页；George W.；Varma,Rajender S.The Synthesis of Radiolabeled Compounds viaOrganometallic Intermediates,Tetrahedron,1989,45(21),6601-21；以及Evans,E.Anthony.Synthesis of radiolabeled compounds,J.Radioanal.Chem.,1981,64(1-2),9-32。
氘化起始材料容易获得，并且经受本文所述的合成方法以提供含氘化合物的合成。大量的含氘试剂和结构单元可以从化学供应商如Aldrich Chemical Co.商购获得。
适用于亲核取代反应的氘转移试剂如碘甲烷-d3(CD3I)易于获得，并且可用于在亲核取代反应条件下将氘取代的碳原子转移至反应底物。仅举例而言，CD3I的使用在以下的反应方案中示出。
Figure BDA0003549429610000191
使用氘转移试剂如氘化铝锂(LiAlD4)在还原条件下将氘转移至反应底物。仅举例而言，LiAlD4的使用在以下的反应方案中示出。
Figure BDA0003549429610000192
仅举例而言，如以下的反应方案所示，使用氘气和钯催化剂来还原不饱和的碳-碳键，并进行芳基碳-卤素键的还原性取代。
Figure BDA0003549429610000193
在一个实施方案中，本文公开的化合物含有一个氘原子。在另一个实施方案中，本文公开的化合物含有两个氘原子。在另一个实施方案中，本文公开的化合物含有三个氘原子。在另一个实施方案中，本文公开的化合物含有四个氘原子。在另一个实施方案中，本文公开的化合物含有五个氘原子。在另一个实施方案中，本文公开的化合物含有六个氘原子。在另一个实施方案中，本文公开的化合物含有多于六个氘原子。在另一个实施方案中，本文公开的化合物完全被氘原子取代，并且不含不可交换的1H氢原子。在一个实施方案中，氘并入的水平由使用氘化合成结构单元作为起始材料的合成方法决定。
“药学上可接受的盐”包括酸加成盐和碱加成盐。任一种本文所述的细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)抑制剂化合物的药学上可接受的盐均意在包括任何和所有药学上合适的盐形式。本文所述化合物的优选的药学上可接受的盐是药学上可接受的酸加成盐和药学上可接受的碱加成盐。
“药学上可接受的酸加成盐”是指保留了游离碱的生物有效性和性质的那些盐，其在生物学上或其他方面不是不合需要的，并且其是用诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸、氢碘酸、氢氟酸、亚磷酸等无机酸形成的。还包括用如下有机酸形成的盐：诸如脂肪族单羧酸和二羧酸、苯基取代的链烷酸、羟基链烷酸、链烷二酸、芳族酸、脂肪族和芳族磺酸等，并且包括例如乙酸、三氟乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。因此，示例性的盐包括硫酸盐、焦硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、亚硫酸氢盐、硝酸盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸盐、三氟乙酸盐、丙酸盐、辛酸盐、异丁酸盐、草酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、癸二酸盐、富马酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、苯甲酸盐、氯苯甲酸盐、甲基苯甲酸盐、二硝基苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、苯磺酸盐、甲苯磺酸盐、苯乙酸盐、柠檬酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、甲磺酸盐等。还涉及氨基酸的盐如精氨酸盐、葡糖酸盐和半乳糖醛酸盐(参见，例如，Berge S.M.等人，"Pharmaceutical Salts,"Journal of Pharmaceutical Science,66:1-19(1997))。在一些实施方案中，碱性化合物的酸加成盐通过按照熟练技术人员熟悉的方法和技术使其游离碱形式与足量的所需酸接触以产生盐而制备。
“药学上可接受的碱加成盐”是指保留了游离酸的生物有效性和性质的那些盐，其在生物学上或其他方面不是不合需要的。这些盐是通过向游离酸中加入无机碱或有机碱而制备的。在一些实施方案中，药学上可接受的碱加成盐用金属或胺如碱金属和碱土金属或有机胺形成。源于有机碱的盐包括但不限于钠盐、钾盐、锂盐、铵盐、钙盐、镁盐、铁盐、锌盐、铜盐、锰盐、铝盐等。源于有机碱的盐包括但不限于下列有机碱的盐：伯胺、仲胺和叔胺，取代的胺(包括天然存在的取代的胺)，环胺和碱离子交换树脂，例如，异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、二乙醇胺、2-二甲基氨基乙醇、2-二乙基氨基乙醇、二环己基胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、N,N-二苄基乙二胺、氯普鲁卡因、海巴明(hydrabamine)、胆碱、甜菜碱、乙二胺、亚乙基二苯胺、N-甲基葡糖胺、葡糖胺、甲基葡糖胺、可可碱(theobromine)、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、聚胺树脂等。参见Berge等人，同上。
“药学上可接受的溶剂化物”是指作为溶剂加成形式的物质的组成物。在一些实施方案中，溶剂化物含有化学计量或非化学计量的量的溶剂，并且在与药学上可接受的溶剂如水、乙醇等制备的过程中形成。当溶剂为水时形成水合物，或者当溶剂为醇时形成醇化物。本文所述化合物的溶剂化物在本文所述的工艺中方便地制备或形成。本文提供的化合物任选地以非溶剂化形式以及溶剂化形式存在。
术语“对象”或“患者”包括哺乳动物。哺乳动物的实例包括但不限于哺乳动物类的任何成员：人类、非人类灵长类动物(如黑猩猩)以及其他猿类和猴类；农场动物，如牛、马、羊、山羊、猪；家畜，如兔子、狗和猫；实验动物，包括啮齿动物，如大鼠、小鼠和豚鼠等。在一个方面中，哺乳动物是人。
如本文所用的，“治疗”或“处理”或“减轻”或“改善”可互换使用。这些术语是指获得有益的或期望的结果(包括但不限于治疗益处和/或预防益处)的途径。所谓“治疗益处”是指所治疗的潜在病症的消除或改善。另外，治疗益处也可以如下实现：一种或多种与该潜在病症相关的生理学症状得到根除或改善，使得在患者中观察到起色，虽然该患者仍受该潜在病症的折磨。对于预防益处，在一些实施方案中，将所述组合物施用于处于发生特定疾病的风险中的患者，或报告疾病的一种或多种生理学症状的患者，即便尚未作出该疾病的诊断。
细胞周期蛋白依赖性激酶
细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶家族，其已知在细胞周期调节、代谢、基因转录、RNA加工和DNA修复过程中起作用，每种CDK起着不同的作用(Malumbres，M.，2014，Genome Biol.15(6)，122-132；Lim等人，2013，Development 140，3079-3093)。CDK的抑制长期以来在治疗以细胞过度增殖为特征的病况如癌症、银屑病和真菌感染中具有治疗意义(Coleman，K.G.等人，1997，Annual Reports in MedicinalChemistry 32，171-179)。
CDK的特征在于依赖于一个或多个单独的催化细胞周期蛋白亚单位，以执行特定功能(Malumbres，2014)。在结构上，CDK包含保守的催化核心，该核心含有ATP结合口袋、细胞周期蛋白结合域和激活T环基序(Coleman，1997；Enke等人，1999，J.Biol.Chem.274(4)，1949-1956)。
已知人类细胞具有至少20种CDK和29种细胞周期蛋白，可分为8个亚家族(Lim，2013；Cao等人，2014，BMC Evol.Biol.14，10-26)。本领域已知的疗法包括特定CDK的选择性抑制。
CDK7和CDK9是通过RNA聚合酶II的羧基末端结构域的磷酸化来调节基因转录的转录CDK亚家族的一部分(Lücking，U.，2017，ChemMedChem.12(21)，1776-1793)。CDK7和CDK9的抑制剂在本领域中被认为对各种类型的癌症是治疗有益的。
已知CDK7是依赖活性的神经元基因表达、突触可塑性和长期记忆所需要的(He等人，2017，Front.Mol.Neurosci.10，365-377)。已知CDK7抑制通过阻断NF-kB激活和IL-1β/IL-6分泌来抑制类风湿性关节炎炎症(Hong等人，2017，J.Cell.Mol.Med.22，1292-1301)，并且已经显示出破坏高等级神经胶质瘤的细胞周期(Greenall等人，2017，Oncogenesis 6(5)，e336)。已显示CDK7抑制剂THZ1在体外显著影响T细胞白血病、神经母细胞瘤、小细胞肺癌和三阴性乳腺癌细胞中的转录(Gao等人，2017，Cell Chem.Biol.25，1-8；Kwiatkowski等人，2014，Nature 511(7511)，616-620)。当针对一组1,151个癌细胞系进行筛查时，低于200nM的THZ1浓度在其中52％的细胞系中表现出IC50(Kwiatkowski，2014，参见表3a)。
已知CDK9调节抗凋亡蛋白的表达以供癌细胞的存活(Pang等人，2017，CancerMed.6(10)，2398-2409)，并且已知其调节与细胞周期蛋白-K复合的DNA损伤反应(Lim，2013)。已显示CDK9抑制剂抑制与以下相关的基因的转录：B细胞淋巴瘤——非霍奇金淋巴瘤的最常见形式(Dey等人，2017，Sci.Rep.7(1)，18007)、肝细胞癌(Pang，2017)、NUT中线癌(
Figure BDA0003549429610000221
等人，2017，Cell Rep.20(12)，2833-2845)、卵巢癌、上皮癌、结直肠癌、子宫颈癌、前列腺腺癌、乳腺腺癌和胰腺癌(Lam等人，2014，Oncotarget 5，7691-7704)。
CDK12和CDK13是与转录相关的CDK，已知其调节与细胞周期蛋白K复合的RNA聚合酶II转录(Lim，2013)以及轴突和转录延伸(Chen等人，2014，Exp.Neurol.261，10-21；Paculová等人，2017，Cell Div.12，7-17)。
已提出CDK12具有致癌性，并在各种类型的癌症中突变或过表达，从而导致细胞增殖失调(Paculová，2017)。已发现CDK12抑制剂会降低BRCA细胞中的基因表达(Johnson等人，2016，Cell Rep.17(9)，2367-2381)。已经表明CDK12的突变会破坏DNA修复，促进乳腺肿瘤细胞的过度增殖和发病机理(Tien等人，2017，Nucleic Acids Res.45(11)，6698-6716)。据估计，CDK12突变存在于13％的乳腺癌和5％的卵巢癌中(Tien，2017；Cerami等人，2012，Cancer Discov.2，401–404；Cancer Genome Atlas Research Network，2011，Nature，474，609–615；Kandoth等人，2013，Nature 502，333–339；Cancer Genome Atlas Network，2012，Nature 490，61–70)。
已知CDK13调节与生长信号传导相关的过程(Greifenberg等人，2016，CellRep.14，320-331)。影响蛋白激酶结构域的CDK13突变与先天性心脏病、发育迟缓和智力障碍有关(Hamilton等人，2017，J.Med.Genet.55(1)，28-38)。已知CDK13与剪接因子SRSF1相互作用，并调节HIV mRNA的选择性剪接(Berro等人，2008，J.Virol.82，7155-7166)。
CDK抑制化合物在文献中已有描述。参见，例如：Gao等人，2018，CellChem.Biol.25(2)，135-142；WO2017/044858；WO2016/210296；WO2016/201370；Ficarro等人，2016，Anal.Chem.88(24)，12248-12254；WO2016/160617；Zhang等人，2016，NatureChem.Biol.12(10)，876-884；WO2016/105528；WO2015/058126；和WO2015/058163。其他实例包括：WO2015/124941；Ali等人，2009，Cancer Res.69(15)，6208-6215；WO2016/193939；Bajrami等人，2014，Cancer Res.74(1)，287-297；Li等人，2017，Cancer Res.77(14)，3834–3845；Cayrol等人，2017，Nature Commun.8：14290，1–11；Johnson等人，2016，Cell Reports17(9)，2367-2381；Kalan等人，2017，Cell Reports 21(2)，467-481；Christensen等人，2014，Cancer Cell 26(6)，909-922；Iniguez等人，2018，Cancer Cell 33(2)，202-216；Mertins等人，2016，Nature534(7605)，55–62；Nagaraja等人，2017，Cancer Cell 31(5)，635-652；Naidoo等人，2017，Mol.Cancer Ther.17(1)，306-315；Paculova等人，2017，CellDiv.12:7，1-10；和Evan等人，2017，Clin.Cancer Res.23(7)，1647-1655。
基于CDK在细胞周期调节、代谢、基因转录、RNA加工和DNA修复过程中的作用，认为改变CDK活性的化合物可用于治疗或预防各种病症，包括癌症。在一些实施方案中，本文描述了细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)的小分子抑制剂。在一些实施方案中，本文描述了包含细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)的小分子抑制剂的药物组合物。在其他实施方案中，细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)的小分子抑制剂用于治疗或预防有需要的对象的疾病或病况。
在一些实施方案中，本文所述的杂芳族CDK抑制化合物用于治疗或预防有需要的对象的癌症。在一些实施方案中，包含本文所述的杂芳族CDK抑制化合物的药物组合物用于治疗或预防有需要的对象的癌症。在一些实施方案中，本文公开了一种治疗癌症的方法，其包括向有需要的对象施用治疗有效量的本文所述的杂芳族CDK抑制化合物。在一些实施方案中，本文公开了一种治疗癌症的方法，其包括向有需要的对象施用治疗有效量的包含本文所述的杂芳族CDK抑制化合物的药物组合物。在一些实施方案中，本文公开了一种治疗癌症的方法，其包括向先前已被诊断出患有癌症的对象施用治疗有效量的本文所述的杂芳族CDK抑制化合物。
在一些实施方案中，杂芳族CDK抑制化合物为杂芳族CDK7、CDK9、CDK12和CDK13抑制化合物。在一些实施方案中，杂芳族CDK抑制化合物为杂芳族CDK7抑制化合物。在一些实施方案中，杂芳族CDK抑制化合物为杂芳族CDK9抑制化合物。在一些实施方案中，杂芳族CDK抑制化合物为杂芳族CDK12抑制化合物。在一些实施方案中，杂芳族CDK抑制化合物为杂芳族CDK13抑制化合物。在一些实施方案中，杂芳族CDK抑制化合物为杂芳族CDK7和CDK9抑制化合物。在一些实施方案中，杂芳族CDK抑制化合物为杂芳族CDK7和CDK12抑制化合物。在一些实施方案中，杂芳族CDK抑制化合物为杂芳族CDK7和CDK13抑制化合物。在一些实施方案中，杂芳族CDK抑制化合物为杂芳族CDK9和CDK12抑制化合物。在一些实施方案中，杂芳族CDK抑制化合物为杂芳族CDK9和CDK13抑制化合物。在一些实施方案中，杂芳族CDK抑制化合物为杂芳族CDK12和CDK13抑制化合物。在一些实施方案中，杂芳族CDK抑制化合物为杂芳族CDK7、CDK9和CDK12抑制化合物。
在一些实施方案中，杂芳族CDK抑制化合物为杂芳族CDK7、CDK9和CDK13抑制化合物。在一些实施方案中，杂芳族CDK抑制化合物为杂芳族CDK7、CDK12和CDK13抑制化合物。在一些实施方案中，杂芳族CDK抑制化合物为杂芳族CDK9、CDK12和CDK13抑制化合物。
杂芳族CDK抑制化合物
在一个方面，本文提供了杂芳族CDK抑制化合物。
一个实施方案提供了一种化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其具有式(I)的结构：
Figure BDA0003549429610000251
其中，
环A是任选取代的选自吡啶、吡嗪、嘧啶、喹啉、异喹啉、喹唑啉、吡唑并吡啶、吡唑并嘧啶、噻吩并嘧啶、噻吩并吡啶、吡啶并吡啶、吡啶并嘧啶或三氮烯的杂芳基；
W选自具有以下结构的基团：
Figure BDA0003549429610000261
t是1或2；u是0、1或2；
R1、R2和R3各自独立地选自氢、任选取代的C1-C4烷基或任选取代的杂环基(烷基)；
R4是氢或任选取代的C1-C4烷基，或任选地，如果R3是任选取代的C1-C4烷基且R4是任选取代的C1-C4烷基，则R3和R4连接在一起形成环；
R5选自氢、-CN、-NH2、卤素、选取代的C1-C4烷基、任选取代的C1-C4烷氧基或任选取代的C1-C4氨基烷基；
R6选自氢、-CN、-NH2、卤素、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C1-C4烷氧基或任选取代的C1-C4氨基烷基；
X为N或C-H；
Y为N或C-L1-R11；
Z为N或C-L2-R7；
L1和L2各自独立地是键、-O-或-N(R8)-；
R7选自氢、-CN、卤素、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C3-C7碳环基、任选取代的碳环基(烷基)、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基(烷基)；
R8为氢或任选取代的C1-C4烷基；
R9选自氢或任选取代的C1-C4烷基；
R10选自氢或任选取代的C1-C4烷基；且
R11选自氢、-CN、卤素、-NH2、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C3-C7碳环基、任选取代的碳环基(烷基)、任选取代的杂环基或任选取代的杂环基(烷基)。
一个实施方案提供了一种式(I)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其具有式(Ia)的结构：
Figure BDA0003549429610000271
其中，
环A是任选取代的选自吡啶、吡嗪、嘧啶、喹啉、异喹啉、喹唑啉、吡唑并吡啶、吡唑并嘧啶、噻吩并嘧啶、噻吩并吡啶、吡啶并吡啶或吡啶并嘧啶的杂芳基；
W选自具有以下结构的基团：
Figure BDA0003549429610000272
t是1或2；u是0、1或2；
R1、R2和R3各自独立地地选自氢、任选取代的C1-C4烷基或任选取代的杂环基(烷基)；
R4是氢或任选取代的C1-C4烷基，或任选地，如果R3是任选取代的C1-C4烷基且R4是任选取代的C1-C4烷基，则R3和R4连接在一起形成环；
R5选自氢、-CN、-NH2、卤素、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C1-C4烷氧基或任选取代的C1-C4氨基烷基；
R6选自氢、-CN、-NH2、卤素、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C1-C4烷氧基或任选取代的C1-C4氨基烷基；
X为N或C-H；
Y为N或C-L1-R11；
Z为N或C-L2-R7；
L1和L2各自独立地地是键、-O-或-N(R8)-；
R7选自氢、-CN、卤素、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C3-C7碳环基、任选取代的碳环基(烷基)、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基(烷基)；
R8是氢或任选取代的C1-C4烷基；
R9选自氢或任选取代的C1-C4烷基；
R10选自氢或任选取代的C1-C4烷基；且
R11选自氢、-CN、卤素、-NH2、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C3-C7碳环基、任选取代的碳环基(烷基)、任选取代的杂环基或任选取代的杂环基(烷基)。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中W选自：
Figure BDA0003549429610000281
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中W选自：
Figure BDA0003549429610000291
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中W选自：
Figure BDA0003549429610000292
另一实施方案提供了式(I)或(ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中W选自：
Figure BDA0003549429610000293
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中W为：
Figure BDA0003549429610000294
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中W为：
Figure BDA0003549429610000295
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R2是氢。另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R3是氢。另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R2和R3是氢。另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R1是氢。另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R1是任选取代的C1-C4烷基。另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R1是任选取代的C1-C2烷基。另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R1是任选取代的C1烷基。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中所述C1烷基被任选取代的氨基取代。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中任选取代的氨基为二甲基氨基。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R1是-CH2-N(Me)2。另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R1是任选取代的杂环基烷基。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中所述任选取代的杂环基烷基包括任选取代的C1烷基。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中所述任选取代的杂环基烷基包括任选取代的N-连接的杂环基。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中，任选取代的N-连接的杂环基是N-连接的吡咯烷或哌啶。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R4是氢。另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R4是任选取代的C1-C4烷基。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R5是氢。另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R6是氢。
另一个实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中X为N。另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中X为C-H。
另一实施方案提供式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中Y为N。
另一实施方案提供式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中Y为C-L1-R11。另一实施方案提供该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中L1是键。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中L1为-O-。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中L1为-NH-。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中L1为-N(R8)-，且R8是任选取代的C1-C4烷基。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R11是氢。另一实施方案提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R11是任选取代的C1-C4烷基。另一实施方案提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R11是任选取代的杂环基。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中Z为N。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中Z为C-L2-R7。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中L2是键。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中L2为-O-。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中L2为-NH-。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中L2为-N(R8)-，且R8是任选取代的C1-C4烷基。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R7是氢。另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R7是任选取代的C1-C4烷基。另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R7是任选取代的杂环基。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A是任选取代的吡啶。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A是任选取代的吡嗪。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A是任选取代的嘧啶。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A是任选取代的嘧啶-2-基。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A是任选取代的喹啉。
另一实施方案提供了式(I或(Ia))的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A是任选取代的异喹啉。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A是任选取代的喹唑啉。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A是任选取代的喹唑啉-2-基。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A是任选取代的吡唑并吡啶。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A是任选取代的吡唑并嘧啶。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A是任选取代的噻吩并嘧啶。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A是任选取代的噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A是任选取代的噻吩并吡啶。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A是任选取代的噻吩并[3,2-d]吡啶。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A是任选取代的吡啶并吡啶。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A是任选取代的吡啶并嘧啶。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A是任选取代的吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基。
另一实施方案提供了式(I)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A是任选取代的三氮烯。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A被选自氢、-CN、卤素、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C1-C6烯基、任选取代的C1-C6炔基、任选取代的C3-C7碳环基、任选取代的碳环基(烷基)、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基(烷基)、任选取代的C1-C4烷氧基、任选取代的C6芳氧基、-NH2、-OH或任选取代的C1-C4氨基烷基的取代基任选地取代。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A选自：
Figure BDA0003549429610000331
其中，
R15选自氢、卤素、-CN、任选取代的烷基、任选取代的氟烷基、任选取代的烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的环烷基-O-、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的芳氧基、任选取代的芳烷基氧基、任选取代的杂芳氧基、任选取代的杂芳烷基氧基、-OR22、-N(R22)2、-SO2R21、-N(R22)SO2R21、-SO2N(R22)2、-N(R22)SO2N(R22)2、-CON(R22)2、-N(R22)CO2R21、-N(R22)CON(R22)2、-N(R22)COR21、-OC(O)N(R22)2、-OSO2N(R22)2或-N(R22)SO3R21；
R16选自氢、卤素、-CN、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的氟烷基、任选取代的烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的环烷基-O-、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的杂芳基、任选取代的杂芳烷基、任选取代的芳氧基、任选取代的芳烷基氧基、任选取代的杂芳氧基、任选取代的杂芳烷基氧基、-OR22、-N(R22)2、-SO2R21、-N(R22)SO2R21、-SO2N(R22)2、-N(R22)SO2N(R22)2、-CON(R22)2、-N(R22)CO2R21、-N(R22)CON(R22)2、-N(R22)COR21、-OC(O)N(R22)2、-OSO2N(R22)2或-N(R22)SO3R21；
R17选自氢、卤素、-CN、任选取代的烷基、任选取代的氟烷基、任选取代的烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的环烷基-O-、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的芳氧基、任选取代的芳烷基氧基、任选取代的杂芳氧基、任选取代的杂芳烷基氧基、-OR22、-N(R22)2、-SO2R21、-N(R22)SO2R21、-SO2N(R22)2、-N(R22)SO2N(R22)2、-CON(R22)2、-N(R22)CO2R21、-N(R22)CON(R22)2、-N(R22)COR21、-OC(O)N(R22)2、-OSO2N(R22)2或-N(R22)SO3R21；
R18选自氢、卤素、-CN、任选取代的烷基、任选取代的氟烷基、任选取代的烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的环烷基-O-、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的杂芳基、任选取代的杂芳烷基、任选取代的芳氧基、任选取代的芳烷基氧基、任选取代的杂芳氧基、任选取代的杂芳烷基氧基、-OR22、-N(R22)2、-SO2R21、-N(R22)SO2R21、-SO2N(R22)2、-N(R22)SO2N(R22)2、-CON(R22)2、-N(R22)CO2R21、-N(R22)CON(R22)2、-N(R22)COR21、-OC(O)N(R22)2、-OSO2N(R22)2或-N(R22)SO3R21；
每个R21独立地选自烷基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂环基、杂环基烷基、杂芳基或杂芳基烷基；并且
每个R22独立地选自氢、烷基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂环基、杂环基烷基、杂芳基或杂芳基烷基。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为：
Figure BDA0003549429610000351
另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R15选自氢、卤素、-CN和任选取代的烷基。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R15是氢。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R16选自氢、卤素、-CN、任选取代的烷基、任选取代的氟烷基、任选取代的烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的环烷基-O-、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的杂芳基、任选取代的杂芳烷基、任选取代的芳氧基、任选取代的芳烷基氧基、任选取代的杂芳氧基、任选取代的杂芳烷基氧基、-OR22、-N(R22)2、-SO2R21、-N(R22)SO2R21、-SO2N(R22)2、–N(R22)SO2N(R22)2、-CON(R22)2、-N(R22)CO2R21、-N(R22)CON(R22)2、-N(R22)COR21、-OC(O)N(R22)2、-OSO2N(R22)2或-N(R22)SO3R21。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R16选自氢、卤素、-CN和任选取代的烷基。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R16是氢。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R16选自任选取代的烷基、任选取代的烯基或任选取代的炔基。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R16选自任选取代的炔基。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为：
Figure BDA0003549429610000352
另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R15选自氢、卤素、-CN和任选取代的烷基。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R15是氢。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R16选自氢、卤素、-CN、任选取代的烷基、任选取代的氟烷基、任选取代的烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的环烷基-O-、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的杂芳基、任选取代的杂芳烷基、任选取代的芳氧基、任选取代的芳烷基氧基、任选取代的杂芳氧基、任选取代的杂芳烷基氧基、-OR22、-N(R22)2、-SO2R21、-N(R22)SO2R21、-SO2N(R22)2、–N(R22)SO2N(R22)2、-CON(R22)2、-N(R22)CO2R21、-N(R22)CON(R22)2、-N(R22)COR21、-OC(O)N(R22)2、-OSO2N(R22)2或-N(R22)SO3R21。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R16选自氢、卤素、-CN和任选取代的烷基。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R16是氢。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R16选自任选取代的烷基、任选取代的烯基或任选取代的炔基。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R16选自任选取代的炔基。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为：
Figure BDA0003549429610000361
且R16不是氢。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为：
Figure BDA0003549429610000362
且R16是卤素。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为：
Figure BDA0003549429610000363
且R16选自任选取代的烷基、任选取代的烯基或任选取代的炔基。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为：
Figure BDA0003549429610000371
R15是氢，R16选自任选取代的炔基，且R17是氢或任选取代的烷氧基。
另一实施方案提供了式(I)或(Ia)的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为：
Figure BDA0003549429610000372
R15是氢，R16选自卤素、-CN、任选取代的烷基、任选取代的氟烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基，且R17是氢或任选取代的烷氧基。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R17是氢。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R18选自氢、卤素、-CN和任选取代的烷基。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R18是氢。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R15和R16是氢。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R17和R18是氢。另一实施方案提供了该化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R15和R17是氢。
在一些实施方案中，本文所述的式(I)或(Ia)的杂芳族CDK抑制化合物具有表1提供的结构。
表1
Figure BDA0003549429610000373
Figure BDA0003549429610000381
Figure BDA0003549429610000391
Figure BDA0003549429610000401
Figure BDA0003549429610000411
Figure BDA0003549429610000421
Figure BDA0003549429610000431
Figure BDA0003549429610000441
Figure BDA0003549429610000451
Figure BDA0003549429610000461
Figure BDA0003549429610000471
Figure BDA0003549429610000481
化合物的制备
在本文所述的反应中使用的化合物根据本领域技术人员已知的有机合成技术，从可商购获得的化学品和/或从化学文献中描述的化合物开始进行制备。“可商购获得的化学品”从标准商业来源获得，该商业来源包括Acros Organics(Pittsburgh,PA)、AldrichChemical(Milwaukee,WI，包括Sigma Chemical和Fluka)、Apin Chemicals Ltd.(MiltonPark,UK)、Avocado Research(Lancashire,U.K.)、BDH Inc.(Toronto,Canada)、Bionet(Cornwall,U.K.)、Chemservice Inc.(West Chester,PA)、Crescent Chemical Co.(Hauppauge,NY)、Eastman Organic Chemicals,Eastman Kodak Company(Rochester,NY)、Fisher Scientific Co.(Pittsburgh,PA)、Fisons Chemicals(Leicestershire,UK)、Frontier Scientific(Logan,UT)、ICN Biomedicals,Inc.(Costa Mesa,CA)、KeyOrganics(Cornwall,U.K.)、Lancaster Synthesis(Windham,NH)、Maybridge ChemicalCo.Ltd.(Cornwall,U.K.)、Parish Chemical Co.(Orem,UT)、Pfaltz&Bauer,Inc.(Waterbury,CN)、Polyorganix(Houston,TX)、Pierce Chemical Co.(Rockford,IL)、Riedel de Haen AG(Hanover,Germany)、Spectrum Quality Product,Inc.(NewBrunswick,NJ)、TCI America(Portland,OR)、Trans World Chemicals,Inc.(Rockville,MD)和Wako Chemicals USA,Inc.(Richmond,VA)。
详述了在本文所述化合物的制备中有用的反应物的合成或对描述该制备的文章提供参考的合适的参考书籍和论文包括，例如，"Synthetic Organic Chemistry",JohnWiley&Sons,Inc.,New York；S.R.Sandler等人,"Organic Functional GroupPreparations,"第2版,Academic Press,New York,1983；H.O.House,"Modern SyntheticReactions",第2版,W.A.Benjamin,Inc.Menlo Park,Calif.1972；T.L.Gilchrist,"Heterocyclic Chemistry",第2版,John Wiley&Sons,New York,1992；J.March,"AdvancedOrganic Chemistry:Reactions,Mechanisms and Structure",第4版,WileyInterscience,New York,1992。详述了在本文所述化合物的制备中有用的反应物的合成或对描述该制备的文章提供参考的其他合适的参考书籍和论文包括，例如，Fuhrhop,J.和Penzlin G."Organic Synthesis:Concepts,Methods,Starting Materials",第二次修订增补版(Second,Revised and Enlarged Edition)(1994)John Wiley&Sons ISBN:3-527-29074-5；Hoffman,R.V."Organic Chemistry,An Intermediate Text"(1996)OxfordUniversity Press,ISBN0-19-509618-5；Larock,R.C."Comprehensive OrganicTransformations:A Guide to Functional Group Preparations"第2版(1999)Wiley-VCH,ISBN:0-471-19031-4；March,J."Advanced Organic Chemistry:Reactions,Mechanisms,and Structure"第4版(1992)John Wiley&Sons,ISBN:0-471-60180-2；Otera,J.(编著)"Modern Carbonyl Chemistry"(2000)Wiley-VCH,ISBN:3-527-29871-1；Patai,S."Patai's 1992Guide to the Chemistry of Functional Groups"(1992)InterscienceISBN:0-471-93022-9；Solomons,T.W.G."Organic Chemistry"第7版(2000)John Wiley&Sons,ISBN:0-471-19095-0；Stowell,J.C.,"Intermediate Organic Chemistry"第2版(1993)Wiley-Interscience,ISBN:0-471-57456-2；"Industrial Organic Chemicals:Starting Materials and Intermediates:An Ullmann's Encyclopedia"(1999)JohnWiley&Sons,ISBN:3-527-29645-X,8卷；"Organic Reactions"(1942-2000)John Wiley&Sons,超过55卷；以及"Chemistry of Functional Groups"John Wiley&Sons,73卷。
特定的和类似的反应物任选地通过由美国化学学会(American ChemicalSociety)的化学文摘服务处(Chemical Abstract Service)编制的已知化学品索引来确定，该索引可从大多数公共图书馆和大学图书馆以及通过在线数据库(联系美国化学学会,Washington,D.C.获得更多细节)获得。目录中的已知但不可商购获得的化学品任选地由定制化学合成室(house)制备，其中许多标准化学供应室(例如，上文列出的那些)提供定制合成服务。可用于制备和选择本文所述杂芳族CDK抑制化合物的药用盐的参考文献是P.H.Stahl和C.G.Wermuth"Handbook of Pharmaceutical Salts",Verlag HelveticaChimica Acta,Zurich,2002。
细胞周期蛋白依赖性激酶的修饰
一个实施方案提供了一种抑制CDK酶的方法，其包括使该酶与式(I)或(Ia)化合物或表1中公开的化合物接触。另一个实施方案提供了所述方法，其中所述CDK酶是CDK12。
一个实施方案提供了一种修饰的CDK12多肽，其中未修饰的CDK12的活性位点半胱氨酸已被具有式(X)结构的取代基修饰：
Figure BDA0003549429610000511
其中，
环A是任选取代的6元含氮单环杂芳基，或9元或10元含氮的双环杂芳基；
R1、R2和R3各自独立地选自氢、任选取代的C1-C4烷基或任选取代的杂环基(烷基)；
R4是氢或任选取代的C1-C4烷基，或任选地，如果R3是任选取代的C1-C4烷基且R4是任选取代的C1-C4烷基，则R3和R4连接在一起形成环；
R5选自氢、-CN、-NH2、卤素、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C1-C4烷氧基或任选取代的C1-C4氨基烷基；
R6选自氢、-CN、-NH2、卤素、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C1-C4烷氧基或任选取代的C1-C4氨基烷基；
X为N或C-H；
Y为N或C-L1-R11；
Z为N或C-L2-R7；
L1和L2各自独立地地是键、-O-或-N(R8)-；
R7选自氢、-CN、卤素、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C3-C7碳环基、任选取代的碳环基(烷基)、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基(烷基)；
R8是氢或任选取代的C1-C4烷基；
R9选自氢或任选取代的C1-C4烷基；
R10选自氢或任选取代的C1-C4烷基；并且
R11选自氢、-CN、卤素、-NH2、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C3-C7碳环基、任选取代的碳环基(烷基)、任选取代的杂环基或任选取代的杂环基(烷基)。
在一些实施方案中，式(X)的环A选自吡啶、吡嗪、嘧啶或哒嗪。
在一些实施方案中，式(X)的环A选自喹啉、异喹啉、喹唑啉、吡唑并吡啶、吡唑并嘧啶、噻吩并嘧啶、噻吩并吡啶、吡啶并吡啶或吡啶并嘧啶。
在一些实施方案中，式(X)的R2为氢。
在一些实施方案中，式(X)的R3为氢。
在一些实施方案中，式(X)的R2和R3为氢。
在一些实施方案中，式(X)的R1为氢。
在一些实施方案中，式(X)的R1为任选取代的C1-C4烷基。
在一些实施方案中，式(X)的R1为任选取代的C1-C2烷基。
在一些实施方案中，式(X)的R1为任选取代的C1烷基。在一些实施方案中，该C1烷基被任选取代的氨基所取代。在一些实施方案中，该任选取代的氨基为二甲基氨基。
在一些实施方案中，式(X)的R1为–CH2-N(Me)2。
在一些实施方案中，式(X)的R1为任选取代的杂环基烷基。在一些实施方案中，该任选取代的杂环基烷基包含任选取代的C1烷基。在一些实施方案中，该任选取代的杂环基烷基包含任选取代的N-连接的杂环基。在一些实施方案中，该任选取代的N-连接的杂环基为N-连接的吡咯烷或哌啶。
在一些实施方案中，式(X)的R4为氢。
在一些实施方案中，式(X)的R4为任选取代的C1-C4烷基。
在一些实施方案中，式(X)的R5是氢。
在一些实施方案中，式(X)的R6是氢。
在一些实施方案中，式(X)的X为N。
在一些实施方案中，式(X)的X为C-H。
在一些实施方案中，式(X)的Y为N。
在一些实施方案中，式(X)的Y为C-L1-R11。
在一些实施方案中，式(X)的L1为键。
在一些实施方案中，式(X)的L1为-O-。
在一些实施方案中，式(X)的L1为-NH-。
在一些实施方案中，式(X)的L1为-N(R8)-，且R8是任选取代的C1-C4烷基。
在一些实施方案中，式(X)的R11是氢。
在一些实施方案中，式(X)的R11是任选取代的C1-C4烷基。
在一些实施方案中，式(X)的R11是任选取代的杂环基。
在一些实施方案中，式(X)的Z为N。
在一些实施方案中，式(X)的Z为C-L2-R7。
在一些实施方案中，式(X)的L2是键。
在一些实施方案中，式(X)的L2为-O-。
在一些实施方案中，式(X)的L2为-NH-。
在一些实施方案中，式(X)的L2为-N(R8)-，并且R8是任选取代的C1-C4烷基。
在一些实施方案中，式(X)的R7为氢。
在一些实施方案中，式(X)的R7是任选取代的C1-C4烷基。
在一些实施方案中，式(X)的R7是任选取代的杂环基。
另一个实施方案提供了修饰的CDK12多肽，其中未修饰的CDK12多肽是同工型1(智人)。
另一个实施方案提供了修饰的CDK12多肽，其中未修饰的CDK12多肽是同工型2(智人)。
另一个实施方案提供了修饰的CDK12多肽，其中未修饰的CDK12多肽是同工型1(智人)变体。另一个实施方案提供了修饰的CDK12多肽，其中未修饰的CDK12多肽是同工型1(智人)变体I1131V。另一个实施方案提供了修饰的CDK12多肽，其中未修饰的CDK12多肽是同工型1(智人)变体L1189Q。另一个实施方案提供了修饰的CDK12多肽，其中未修饰的CDK12多肽是同工型1(智人)变体T1195M。
另一个实施方案提供了修饰的CDK12多肽，其中未修饰的CDK12多肽是选自表2或表3中提供的SEQID的SEQID。
表2.CDK12序列
Figure BDA0003549429610000541
Figure BDA0003549429610000551
表3.变体CDK12序列
Figure BDA0003549429610000552
Figure BDA0003549429610000561
Figure BDA0003549429610000571
Figure BDA0003549429610000581
Figure BDA0003549429610000591
药物组合物
在某些实施方案中，本文所述的杂芳族CDK抑制化合物作为纯化学品施用。在其他实施方案中，本文所述的杂芳族CDK抑制化合物与药学上合适的或可接受的载体(本文中也为药学上合适的(或可接受的)赋形剂，生理学上合适的(或可接受的)赋形剂，或生理学上合适的(或可接受的)载体)组合，该载体是基于选定的施用途径和例如在Remington:TheScience and Practice of Pharmacy(Gennaro,第21版.Mack Pub.Co.,Easton，PA(2005))中描述的标准药学实践而选择的。
本文提供了一种药物组合物，其包含至少一种本文所述的杂芳族CDK抑制化合物或其立体异构体、药学上可接受的盐、水合物或溶剂化物，以及一种或多种药学上可接受的载体。如果该载体(或赋形剂)与该组合物的其他成分相容并且对该组合物的接受者(即，对象或患者)无害，则该载体(或赋形剂)是可接受的或合适的。
一个实施方案提供了一种药物组合物，其包含药学上可接受的赋形剂和式(I)或(Ia)化合物或表1中公开的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
一个实施方案提供了一种制备药物组合物的方法，其包括将式(I)或(Ia)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物与药学上可接受的载体混合。
在某些实施方案中，式(I)或(Ia)描述的杂芳族CDK抑制化合物或表1中公开的化合物是基本上纯的，因为其含有少于约5％，或少于约1％，或少于约0.1％的其他有机小分子，如例如在合成方法的一个或多个步骤中产生的未反应的中间体或合成副产物。
合适的口服剂型包括，例如，片剂、丸剂、囊剂，或硬或软明胶、甲基纤维素或在消化道中易于溶解的另一合适材料的胶囊。在一些实施方案中，使用合适的无毒性固体载体，其包括例如药物级的甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、滑石、纤维素、葡萄糖、蔗糖、碳酸镁等。(参见，例如，Remington:The Science and Practice of Pharmacy(Gennaro,第21版.Mack Pub.Co.,Easton,PA(2005))。
在一些实施方案中，将式(I)或(Ia)描述的杂芳族CDK抑制化合物或表1中公开的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物配制成用于通过注射施用。在一些情况下，该注射制剂是水性制剂。在一些情况下，该注射制剂是非水性制剂。在一些情况下，该注射制剂是基于诸如芝麻油等油的制剂。
包含至少一种本文所述的杂芳族CDK抑制化合物的组合物的剂量根据对象或患者(例如，人)的状况而不同。在一些实施方案中，这类因素包括总体健康状况、年龄和其他因素。
药物组合物以适合于待治疗(或预防)的疾病的方式施用。适当的剂量和合适的施用持续时间和频率将取决于诸如患者的状况、患者疾病的类型和严重程度、活性成分的特定形式和施用方法等因素。通常，适当的剂量和治疗方案以足以提供治疗和/或预防益处(例如，改善的临床结果，例如更频繁的完全或部分缓解，或更长的无病和/或总体存活期，或症状严重程度的减轻)的量提供组合物。通常使用实验模型和/或临床试验确定最佳剂量。最佳剂量取决于患者的身体质量、体重或血容量。
口服剂量一般在约1.0mg至约1000mg的范围内，每天一至四次或更多次。
治疗方法
一个实施方案提供了式(I)或(Ia)化合物或表1中公开的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于治疗人或动物体的方法中。
一个实施方案提供了式(I)或(Ia)化合物或表1中公开的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于治疗癌症、赘生性疾病或过度增殖性病症的方法中。
一个实施方案提供了式(I)或(Ia)化合物或表1中公开的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物在制备用于治疗癌症或赘生性疾病的药物中的用途。
在一些实施方案中，本文描述了一种治疗有需要的患者的癌症的方法，其包括向所述患者施用式(I)或(Ia)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。在一些实施方案中，本文描述了一种治疗有需要的患者的癌症的方法，其包括向所述患者施用表1中公开的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。在一些实施方案中，本文还描述了一种治疗有需要的患者的癌症的方法，其包括向所述患者施用包含式(I)或(Ia)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物和药学上可接受的赋形剂的药物组合物。在一些实施方案中，本文还描述了一种治疗有需要的患者的癌症的方法，其包括向所述患者施用包含表1中公开的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物和药学上可接受的赋形剂的药物组合物。在一些实施方案中，该癌症是乳腺癌、结直肠癌、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌或肺癌。
本文提供了所述方法，其中所述药物组合物经口服施用。本文提供了所述方法，其中所述药物组合物通过注射施用。
根据本公开，其他实施方案和用途对于本领域技术人员将是明显的。提供以下实施例仅仅是为了说明各实施方案，而不应解释为以任何方式限制本发明。
实施例
I.化学合成
在一些实施方案中，本文公开的杂芳族CDK抑制化合物按照以下实施例来合成。如以下所用的，在本发明的整篇说明书中，除非另有说明，否则下列缩写应理解为具有以下含义：
℃ 摄氏度
δH 从四甲基硅烷向低磁场以百万分率计的化学位移
DCM 二氯甲烷(CH2Cl2)
DMF 二甲基甲酰胺
DMSO 二甲基亚砜
EA 乙酸乙酯
ESI 电喷雾电离
Et 乙基
g 克
h 小时
HPLC 高效液相色谱法
Hz 赫兹
J 耦合常数(在NMR光谱中)
LCMS 液相色谱质谱法
μ 微
m 多重峰(光谱)；米；毫
M 摩尔
M+ 母分子离子
Me 甲基
Mhz 兆赫兹
min 分钟
mol 摩尔；分子(以mol wt计)
mL 毫升
MS 质谱法
nm 纳米
NMR 核磁共振
pH 酸碱度；水溶液的酸性或碱性的量度
PE 石油醚
RT 室温
s 单峰(光谱)
t 三重峰(光谱)
T 温度
TFA 三氟乙酸
THF 四氢呋喃
实施例1：(R)-N-(4-(3-((5-氯嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯 酰胺的合成
Figure BDA0003549429610000631
步骤1：(R)-叔丁基(1-(7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610000641
将4-氯-7-硝基喹唑啉(4.0g，19.0mmol)、(R)-叔丁基吡咯烷-3-基氨基甲酸酯(5.3g，28.5mml)和TEA(7.4mL，57.0mmol)在i-PrOH(60mL)中的混合物在80℃下搅拌16小时。将混合物冷却并浓缩。将得到的固体用ACN(50mL)稀释，并在室温(rt)搅拌20min。将反应过滤并用ACN(20mL)洗涤，得到[1-(7-硝基-喹唑啉-4-基)-吡咯烷-3-基]-氨基甲酸叔丁酯(5.0g，73％)，为黄色固体。针对C17H21N5O4的[M+H]计算值，360.2；实测值，360.2。
步骤2：(R)-叔丁基(1-(7-氨基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610000642
将(R)-叔丁基(1-(7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(5.0g，13.9mmol)和Pd/C(800mg)在MeOH(80mL)中的混合物在室温在H2气囊气氛下搅拌4小时。将反应混合物过滤并浓缩。经硅胶色谱法(DCM/甲醇＝20/1)纯化所得固体得到(R)-叔丁基(1-(7-氨基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(24.2g，91％)，为白色固体。针对C17H23N5O2的[M+H]计算值，330.2；实测值，330.1。
步骤3：(R)-叔丁基(1-(7-丙烯酰胺基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610000643
在0℃在氮气气氛下搅拌(R)-叔丁基(1-(7-氨基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.00g，3.03mmol)和DIEA(2.49mL，15.15mmol)在DCM(40mL)中的混合物。滴加丙烯酰氯(0.22mL，2.72mmol)在DCM(5mL)中的溶液，将混合物升温至室温，并搅拌3小时。将混合物浓缩，进行制备型HPLC得到(R)-叔丁基(1-(7-丙烯酰胺基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(220mg，19％)，为白色固体。针对C20H25N5O3的[M+H]计算值，384.2；实测值，384.1。
步骤4：(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000651
向(R)-叔丁基(1-(7-丙烯酰胺基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(220mg，0.57mmol)的DCM(20mL)溶液中加入TFA(1mL)，在室温下搅拌2小时。将混合物浓缩得到(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺的TFA盐(162mg，粗品)，为绿色液体。针对C15H17N5O的[M+H]计算值，284.1；实测值，284.1。
步骤5：(R)-N-(4-(3-((5-氯嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000652
将(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺的TFA盐(150mg，0.53mmol)、2,5-二氯嘧啶(118mg，0.79mmol)和DIEA(205mg，1.59mmol)在DMSO(10mL)中的混合物在60℃在氮气气氛下搅拌24小时。将反应混合物浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(4-(3-((5-氯嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(15.9mg，7.6％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):2.10-2.14(m,1H),2.25-2.29(m,1H),3.83-4.22(m,4H),4.45-4.49(m,1H),5.83-5.87(m,1H),6.32-6.58(m,1H),6.47-6.56(m,1H),7.63-7.67(m,1H),7.90-7.92(m,1H),8.17-8.25(m,2H),8.40(s,3H),10.54(s,1H)。针对C19H18ClN7O的[M+H]计算值，396.1；实测值，396.1。
实施例2：(R)-N-(4-(3-((5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉- 7-基)丙烯酰胺的合成
Figure BDA0003549429610000661
步骤1：(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000662
在室温下向(R)-叔丁基(1-(7-丙烯酰胺基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(600mg,0.78mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中，加入TFA(2mL)。在室温下搅拌反应混合物3h。将反应混合物浓缩得到(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(TFA盐)(600mg,粗品)，为黄色油状物。针对C15H17N5O的[M+H]计算值，284.1；实测值，284.1。
步骤2：(R)-N-(4-(3-((5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺的合成
Figure BDA0003549429610000671
将(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(TFA盐)(100mg,0.26mmol)、2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶(72mg,0.38mmol)和DIEA(166mg,1.30mmol)在DMSO(6mL)中的混合物在微波中在氮气气氛下加热至80℃，持续30分钟。将反应混合物冷却，并用DCM(10mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。经制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(4-(3-((5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(TFA盐)(64.1mg,59％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.11-2.40(m,2H),4.06-4.59(m,4H),4.66(s,1H),5.91(dd,J＝2.0,10.0Hz,1H),6.36-6.54(m,2H),7.70(d,J＝9.2Hz,1H),8.40-8.51(m,3H),8.68-8.78(m,3H),10.97(s,1H)。针对C20H18F3N7O的[M+H]计算值，430.2；实测值，430.1。
实施例3：(R)-N-(4-(3-((5-氯-4-乙氧基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉- 7-基)丙烯酰胺的合成
Figure BDA0003549429610000681
步骤1：(R)-5-氯-4-乙氧基-N-(1-(7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)嘧啶-2-胺
Figure BDA0003549429610000682
将4-氯-7-硝基喹唑啉(2.0g,9.5mmol)、(R)-5-氯-4-乙氧基-N-(吡咯烷-3-基)嘧啶-2-胺盐酸盐(2.9g,10.5mL)和TEA(5.8g,57.2mmol)在iPrOH(50mL)中的混合物在80℃下搅拌6小时。将反应混合物冷却并浓缩。将残余物经硅胶色谱法(PE/EA＝1/1)纯化得到(R)-5-氯-4-乙氧基-N-(1-(7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)嘧啶-2-胺(2.6g,66％)，为黄色固体。针对C18H18ClN7O3的[M+H]计算值，416.1；实测值，416.1。
步骤2：(R)-4-(3-((5-氯-4-乙氧基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-胺
Figure BDA0003549429610000683
在40℃下将(R)-5-氯-4-乙氧基-N-(1-(7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)嘧啶-2-胺(2.6g,6.3mmol)、Zn(4.1g,62.7mmol)和NH4Cl(6.7g,125.3mmol)在甲醇(MeOH)/THF/H2O(100mL/50mL/50mL)中的混合物搅拌过夜。将反应混合物过滤并浓缩。将残余物经硅胶色谱法(DCM/甲醇＝10/1)纯化得到(R)-4-(3-((5-氯-4-乙氧基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-胺(2.3g,97％)，为红色油状物。针对C18H20ClN7O的[M+H]计算值，386.1；实测值，386.1。
步骤3：(R)-N-(4-(3-((5-氯-4-乙氧基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000691
在氮气气氛下在0℃下将(R)-4-(3-((5-氯-4-乙氧基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-胺(300mg,0.77mmol)的二甲基甲酰胺溶液(10mL)进行搅拌。然后滴加吡啶(369mg,4.67mmol)，随后滴加丙烯酰氯(140mg,1.55mmol)。然后在35℃下搅拌反应混合物3小时。将反应混合物浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(4-(3-((5-氯-4-乙氧基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(10.5mg,3％),为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):1.30-1.34(m,3H),2.07-2.12(m,1H),2.22-2.26(m,1H),3.82-3.93(m,2H),4.01-4.06(m,1H),4.17-4.19(m,1H),4.39-4.46(m,3H),5.81-5.84(m,1H),6.30-6.35(m,1H),6.45-6.52(m,1H),7.60-7.63(m,1H),7.68-7.72(m,1H),8.13-8.15(m,2H),8.21-8.23(m,1H),8.38(s,1H),10.49(s,1H)。针对C21H22ClN7O2的[M+H]计算值,440.2；实测值，440.2。
实施例4：(R)-N-(4-(3-((5-氯-4-甲氧基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉- 7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000701
步骤1：4-氯喹唑啉-7-胺
Figure BDA0003549429610000702
在室温下将4-氯-7-硝基喹唑啉(1.2g,5.7mmol)、Na2S2O4(4.0g,22.9mmol)和甲基三辛基氯化铵(TOMAC)(1.1g,2.7mmol)在THF/H2O(36mL/12mL)中的混合物搅拌40min。将有机层分离，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩得到4-氯喹唑啉-7-胺(1.7g,粗品)，为黄色油状物。针对C8H6ClN3的[M+H]计算值，180.0；实测值，180.0。
步骤2：N-(4-氯喹唑啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000703
在0℃在氮气氛下将4-氯喹唑啉-7-胺(1.70g,2.86mmol)和DIEA(1.10g,8.5mmol)在THF(50mL)中的混合物进行搅拌。滴加丙烯酰氯在THF中的溶液(2.86mL，1.0mmol/L，2.86mmol)。将反应混合物升温至室温，搅拌3小时。将反应混合物浓缩得到N-(4-氯喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(1.82g,粗品)，为黄色固体。针对C11H8ClN3O的[M+H]计算值，234.0；实测值，234.0。
步骤3：(R)-N-(4-(3-((5-氯-4-甲氧基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000711
在40℃在氮气气氛下将N-(4-氯喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(180mg,0.76mmol)、(R)-5-氯-4-甲氧基-N-(吡咯烷-3-基)嘧啶-2-胺盐酸盐(244mg,0.92mml)和DIEA(995mg,7.7mmol)在DMSO(10mL)中的混合物搅拌1.5小时。将反应混合物浓缩。将反应混合物通过制备型HPLC纯化得到(R)-N-(4-(3-((5-氯-4-甲氧基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(10.7mg,3％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):2.08-2.12(m,1H),2.23-2.26(m,1H),3.82-3.91(m,5H),4.02-4.07(m,1H),4.18(m,1H),4.45-4.49(m,1H),5.81-5.84(m,1H),6.30-6.35(m,1H),6.45-6.52(m,1H),7.61-7.64(m,1H),7.74-7.76(m,1H),8.14-8.15(m,2H),8.21-8.23(m,1H),8.38(s,1H),10.49(s,1H)。针对C20H20ClN7O2的[M+H]计算值，426.1；实测值，426.1。
实施例5：(R)-N-(4-(3-((5-溴-4-甲氧基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉- 7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000712
步骤1：(R)-叔丁基3-((5-溴-4-甲氧基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-甲酸酯
Figure BDA0003549429610000721
在140℃在氮气气氛下将5-溴-2-氯-4-甲氧基嘧啶(2.0g,8.9mmol)、(R)-叔丁基3-氨基吡咯烷-1-甲酸酯(2.5g,13.4mml)和K2CO3(2.5g,11.9mmol)在DMSO(50mL)中的混合物搅拌4小时。将混合物冷却至室温，倒入200mL H2O中，用DCM(50mL*3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物经硅胶色谱法(PE/EA＝5/1)纯化得到(R)-叔丁基3-((5-溴-4-甲氧基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-甲酸酯(804mg,24％)，为白色固体。针对C14H21BrN4O3的[M+H]计算值，373.1；实测值，373.1。
步骤2：(R)-5-溴-4-甲氧基-N-(吡咯烷-3-基)嘧啶-2-胺盐酸盐
Figure BDA0003549429610000722
在室温下将(R)-叔丁基3-((5-溴-4-甲氧基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-甲酸酯(804mg,2.16mmol)在EA/HCl(10mL，1.0M)中的溶液搅拌1小时。将混合物浓缩获得(R)-5-溴-4-甲氧基-N-(吡咯烷-3-基)嘧啶-2-胺盐酸盐(809mg,粗品)，为白色固体。针对C9H13BrN4O的[M+H]计算值，273.0；实测值，273.0。
步骤3：(R)-N-(4-(3-((5-溴-4-甲氧基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000731
在40℃下在氮气气氛下将N-(4-氯喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(400mg,1.71mmol)、(R)-5-溴-4-甲氧基-N-(吡咯烷-3-基)嘧啶-2-胺盐酸盐(530mg,1.71mL)和DIEA(2.21g,17.16mmol)在DMSO(8mL)中的混合物搅拌1.5小时。将反应混合物浓缩。将残余物通过制备型HPLC纯化得到(R)-N-(4-(3-((5-溴-4-甲氧基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(11.2mg,1％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):2.08-2.13(m,1H),2.23-2.26(m,1H),3.83-3.90(m,5H),4.02-4.07(m,1H),4.16-4.20(m,1H),4.45-4.49(m,1H),5.81-5.84(m,1H),6.30-6.35(m,1H),6.45-6.52(m,1H),7.61-7.64(m,1H),7.76(s,1H),8.14-8.15(m,1H),8.21-8.23(m,2H),8.39(s,1H),10.49(s,1H)。针对C20H20BrN7O2的[M+H]计算值，470.1；实测值，470.1。
实施例6：(R)-N-(4-(3-((4-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基) 喹唑啉-7-基)丙烯酰胺的合成
Figure BDA0003549429610000732
步骤1：(R)-叔丁基3-((4-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-甲酸酯
Figure BDA0003549429610000733
将2-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-4-胺(400mg,2.0mmol)、(R)-叔丁基3-氨基吡咯烷-1-甲酸酯(755mg,4.0mmol)和K2CO3(552mg,4.0mmol)在DMSO(10mL)中的混合物在微波下加热至170℃，持续2小时。将混合物冷却至室温，倒入50mL H2O中并用EA(50mL*3)萃取。将合并有机相经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。用硅胶色谱法(PE/EA＝1/10-1/5)对残余物进行纯化得到(R)-叔丁基3-((4-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-甲酸酯(500mg,72％)，为白色固体。针对C14H20F3N5O2的[M+H]计算值，348.2；实测值，348.2。
步骤2：(R)-N2-(吡咯烷-3-基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2,4-二胺盐酸盐
Figure BDA0003549429610000741
在室温下将(R)-叔丁基3-((4-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-甲酸酯(500mg,1.4mmol)在HCl/EA(10mL，2.0M)中的混合物搅拌2小时。将混合物浓缩得到(R)-N2-(吡咯烷-3-基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2,4-二胺盐酸盐(395mg,100％)，为白色固体。针对C9H12F3N5的[M+H]计算值，248.1；实测值，248.1。
步骤3：(R)-N-(4-(3-((4-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000742
在室温下将N-(4-氯喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(311mg,1.3mmol)、(R)-N2-(吡咯烷-3-基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2,4-二胺盐酸盐(395mg,1.6mmol)和DIEA(168mg,1.3mmol)在DMSO(10mL)中的混合物搅拌1h。将该混合物用H2O(10mL)稀释，用EA(10mL*3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(4-(3-((4-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(13.9mg,2.4％),为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.05-2.25(m,2H),3.78-3.94(m,2H),4.01-4.15(m,2H),4.47-4.49(m,1H),5.82(dd,J＝8.0,12.0Hz,1H),6.30-6.35(m,1H),6.45-6.52(m,1H),6.70-6.83(m,2H),7.43-7.64(m,2H),8.06(br s,1H),8.14-8.22(m,2H),8.38(s,1H),10.47(s,1H)。针对C20H19F3N8O的[M+H]计算值，445.2；实测值，445.2。
实施例7：N-{4-[3-(5-氯-4-苯氧基-嘧啶-2-基氨基)-吡咯烷-1-基]-喹唑啉-7- 基}-丙烯酰胺的合成
Figure BDA0003549429610000751
步骤1：2,5-二氯-4-苯氧基嘧啶
Figure BDA0003549429610000752
在0℃下在N2下向2,4,5-三氯嘧啶(1.0g,5.5mmol)在二甲基甲酰胺(20mL)中的混合物中，加入NaH(220mg,60％,5.49mmol)。将混合物在0℃搅拌15分钟，然后加入PhOH(516mg,5.49mmol)。在室温下搅拌反应3小时。将混合物用H2O(5mL)淬灭，并用EA(30mL)萃取。将有机相经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。用硅胶色谱法(PE/EA＝1/10)对残余物进行纯化得到2,5-二氯-4-苯氧基嘧啶(1.2g,92％)，为白色固体。针对C10H6Cl2N2O的[M+H]计算值，241.0；实测值，241.0。
步骤2：(R)-叔丁基3-((5-氯-4-苯氧基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-甲酸酯
Figure BDA0003549429610000753
将2,5-二氯-4-苯氧基嘧啶(1.2g,5.0mmol)、3-氨基-吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯(1.4g,7.5mmol)和K2CO3(1.4g,10.0mmol)在DMSO(25mL)中的混合物加热至140℃，持续4小时。将混合物冷却并浓缩。用硅胶色谱法(PE/EA＝1/10-1/3)对残余物进行纯化得到(R)-叔丁基3-((5-氯-4-苯氧基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-甲酸酯(1.2g,62％)，为无色油状物。针对C19H23ClN4O3的[M+H]计算值，391.0；实测值，391.0。
步骤3：(R)-5-氯-4-苯氧基-N-(吡咯烷-3-基)嘧啶-2-胺
Figure BDA0003549429610000761
在室温下将(R)-叔丁基3-((5-氯-4-苯氧基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-甲酸酯(300mg,0.77mmol)在HCl/EA(10mL,1.0M)中的混合物搅拌2小时。将混合物浓缩得到(R)-5-氯-4-苯氧基-N-(吡咯烷-3-基)嘧啶-2-胺(250mg,100％)，为黄色固体。针对C14H15ClN4O的[M+H]计算值，291.0；实测值，291.0。
步骤4：(R)-N-(4-(3-((5-氯-4-苯氧基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000762
将N-(4-氯喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(179mg,0.76mmol)、(R)-5-氯-4-苯氧基-N-(吡咯烷-3-基)嘧啶-2-胺(250mg,0.76mmol)和DIEA(198mg,1.51mmol)在DMSO(10mL)中的混合物加热至40℃，持续1小时。向反应混合物加入H2O(5mL)。然后将混合物过滤。滤饼通过制备型HPLC纯化得到(R)-N-(4-(3-((5-氯-4-苯氧基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(4.4mg,12％)，为白色固体。1HNMR(400MHz,CDCl3):δ1.97-2.07(m,2H),3.78-4.01(m,5H),5.81-5.84(m,1H),6.30-6.35(m,1H),6.46-6.52(m,1H),7.21-7.53(m,7H),8.15(s,2H),8.32-8.36(m,2H),10.50(s,1H)。针对C25H22ClN7O2的[M+H]计算值488.0；实测值，488.0。
实施例8：(R)-N-(4-(3-((6-氟喹唑啉-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000771
在氮气气氛下将(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(TFA盐)(100mg,0.26mmol)、2-氯-6-氟喹唑啉(69mg,0.38mmol)和DIEA(166mg,1.30mmol)在DMSO(6mL)中的混合物在微波下加热至140℃，持续30min。将混合物冷却至室温，用水(20mL)稀释，用DCM(10mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(4-(3-((6-氟喹唑啉-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(TFA盐)(34.1mg,32％)，为黄色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.11-2.40(m,2H),4.06-4.95(m,4H),5.90(d,J＝11.2Hz,1H),6.36-6.54(m,2H),7.58-7.68(m,4H),7.95(s,1H),8.37-8.51(m,2H),8.78(s,1H),9.17(s,1H),10.96(s,1H),14.25(br s,1H)。针对C23H20FN7O的[M+H]计算值，430.1；实测值，430.1。
实施例9：(R)-N-(4-(3-((5-氯-4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000781
将(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺三氟乙酸盐(75mg,0.18mmol)、2,5-二氯-4-(三氟甲基)嘧啶(61mg,0.28mmL)和DIEA(123mg,0.9mmol)在DMSO(3mL)中的混合物在140℃在微波中加热，持续40分钟。经浓缩后，混合物通过制备型HPLC纯化得到(R)-N-(4-(3-((5-氯-4-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(14.5mg,16％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):2.09-2.14(m,1H),2.25-2.30(m,1H),3.85-3.88(m,2H),3.94-3.95(m,1H),4.06-4.08(m,1H),4.16-4.20(m,1H),4.50(s,1H),5.81-5.84(m,1H),6.30-6.35(m,1H),6.45-6.52(m,1H),7.61-7.64(m,1H),8.14-8.22(m,1H),8.39(s,1H),8.51(m,1H),8.71(m,1H),10.48(s,1H)。针对C20H17ClF3N7O的[M+H]计算值，464.1；实测值，464.1。
实施例10：(R)-N-(4-(3-((5-环丙基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7- 基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000782
步骤1：(R)-叔丁基3-((5-环丙基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-甲酸酯
Figure BDA0003549429610000783
在室温下，向2-氯-5-环丙基嘧啶(500mg,3.25mmol)和(R)-叔丁基3-氨基吡咯烷-1-甲酸酯(906mg,4.87mmol)在DMSO(10mL)中的溶液中加入K2CO3(894mg,6.48mmol)。将混合物在微波下在170℃搅拌2.5小时。将混合物冷却，用水(20mL)稀释，用DCM(10mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。经柱(PE/EA＝3/1)纯化残余物得到(R)-叔丁基3-((5-环丙基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-甲酸酯(170mg,17％)，为黄色油状物。针对C16H24N4O2的[M+H]计算值，305.2；实测值，305.2。
步骤2：(R)-5-环丙基-N-(吡咯烷-3-基)嘧啶-2-胺(HCl盐)
Figure BDA0003549429610000791
在室温下将(R)-叔丁基3-((5-环丙基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-甲酸酯(170mg,0.56mmol)在HCl/EA(5mL，1.0M)中的混合物搅拌2h。将反应混合物浓缩得到(R)-5-环丙基-N-(吡咯烷-3-基)嘧啶-2-胺(HCl盐)(120mg,89％)，为黄色固体。针对C11H16N4的[M+H]计算值，205.1；实测值，205.1。
步骤3：(R)-N-(4-(3-((5-环丙基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000792
在40℃下将N-(4-氯喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(270mg,1.16mmol)、(R)-5-环丙基-N-(吡咯烷-3-基)嘧啶-2-胺(HCl盐)(120mg,0.58mml)和DIEA(347mg,2.89mmol)在DMSO(4mL)中的混合物搅拌1h。用水(20mL)稀释混合物，用DCM和THF(DCM:THF＝1:1，10mL*3)萃取。用盐水(20mL)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(4-(3-((5-环丙基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(17.5mg,7.5％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):0.64-0.68(m,2H),0.82-0.86(m,2H),1.71-1.76(m,1H),2.07-2.10(m,1H),2.22-2.25(m,1H),3.81-4.18(m,4H),4.45-4.46(m,1H),5.83(dd,J＝10.0,1.6Hz,1H),6.30-6.35(m,1H),6.47-6.54(m,1H),7.35(d,J＝6.4Hz,1H),7.63(dd,J＝2.0,9.6Hz,1H),8.11-8.24(m,4H),8.41(s,1H),10.48(s,1H)。针对C22H23N7O的[M+H]计算值，402.2；实测值，402.2。
实施例11：(R)-N-(4-(3-(噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉- 7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000801
在氮气气氛下将(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(TFA盐)(100mg,0.26mmol)、2-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶(65mg,0.38mmol)和DIEA(166mg,1.30mmol)在DMSO(3mL)中的混合物在微波下加热至170℃，持续1.5h。将混合物冷却，用水(20mL)稀释，并用DCM(10mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(4-(3-(噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(3.9mg,3.8％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.03-2.20(m,1H),2.28-2.32(m,1H),3.90-4.11(m,4H),4.58-4.59(m,1H),5.83(dd,J＝2.0,10.4Hz,1H),6.31-6.35(m,1H),6.48-6.54(m,1H),7.23(d,J＝5.2Hz,1H),7.54(d,J＝6.0Hz,1H),7.66(dd,J＝2.0,9.2Hz,1H),8.20-8.28(m,3H),8.45(s,1H),9.01(s,1H),10.62(s,1H)。针对C21H19N7OS的[M+H]计算值，418.1；实测值，418.1。
实施例12：(R)-N-(4-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基) 丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000811
将(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺三氟乙酸盐(75mg,0.18mmol)、2-氯嘧啶-5-甲腈(39mg,0.28mmol)和DIEA(123mg,0.9mmol)在DMSO(3mL)中的混合物在微波下在140℃反应1h。将反应混合物冷却并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(4-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(18.9mg,26％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):2.10-2.13(m,1H),2.26-2.29(m,1H),3.85-3.87(m,1H),3.95-3.96(m,1H),4.05-4.08(m,1H),4.16-4.20(m,1H),4.57-4.59(m,1H),5.81-5.84(m,1H),6.30-6.35(m,1H),6.46-6.52(m,1H),7.62-7.65(m,1H),8.15-8.16(m,1H),8.20-8.23(m,1H),8.39-8.41(m,1H),8.69-8.71(m,2H),8.78-8.79(m,1H),10.51(s,1H)。针对C20H18N8O的[M+H]计算值，387.2；实测值，387.2。
实施例13：(R)-N-(4-(3-(喹唑啉-2-基氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰 胺
Figure BDA0003549429610000812
将(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(TFA盐)(44mg,0.16mmol)、2-氯喹唑啉(38mg,0.24mmol)和DIEA(60mg,0.47mmol)在DMSO(3mL)中的混合物在微波下加热至140℃，持续1h。将混合物用水(20mL)稀释，用DCM(10mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(4-(3-(喹唑啉-2-基氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(6.4mg,10％)，为白色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.16-2.19(m,1H),2.30-2.33(m,1H),3.89-4.25(m,4H),4.64-4.66(m,1H),5.82(dd,J＝2.0,10.0Hz,1H),6.30-6.35(m,1H),6.45-6.52(m,1H),7.26(t,J＝7.2Hz,1H),7.49-7.52(m,1H),7.62(dd,J＝2.0,9.2Hz,1H),7.69-7.73(m,1H),7.74-7.84(m,2H),8.16(d,J＝2.0Hz,1H),8.25(d,J＝9.2Hz,1H),8.40(s,1H),9.15(s,1H),10.49(s,1H)。针对C23H21N7O的[M+H]计算值，412.1；实测值，412.1。
实施例14：(R)-N-(4-(3-((5-氯-4-(甲基氨基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹 唑啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000821
将N-(4-氯喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(200mg,0.85mmol)、(R)-5-氯-N4-甲基-N2-(吡咯烷-3-基)嘧啶-2,4-二胺(HCl盐)(120mg,0.45mmol)和DIEA(580mg,4.5mmol)在DMSO(6mL)中的混合物加热至40℃，持续1h。将混合物用水(20mL)稀释，用DCM(10mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(4-(3-((5-氯-4-(甲基氨基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(15.6mg,8.2％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.16-2.19(m,1H),2.30-2.33(m,1H),2.82(d,J＝4.0Hz,3H),3.89-4.15(m,4H),4.44-4.46(m,1H),5.84(dd,J＝1.2,10.0Hz,1H),6.31-6.36(m,1H),6.46-6.53(m,1H),6.96(s,1H),7.12(m,1H),7.64(dd,J＝1.6,8.8Hz,1H),7.77(s,1H),8.20-8.26(m,2H),8.45(s,1H),10.59(s,1H)。针对C20H21ClN8O的[M+H]计算值，425.1；实测值，425.1。
实施例15：(R)-N-(4-(3-((4-(甲基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯 烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000831
步骤1：2-氯-N-甲基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-胺
Figure BDA0003549429610000832
在室温向2,4-二氯-5-(三氟甲基)嘧啶(6.7g,30.8mmol)在甲醇(150mL)中的冷却溶液中加入TEA(4.3mL，30.8mmol)和甲胺(15.6mL，在THF中为2.0M，31.1mmol)。将混合物在室温下搅拌16小时。将混合物浓缩且将残余物用硅胶色谱法(PE/EA＝10/1-5/1)纯化，得到2-氯-N-甲基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-胺(1.2g,18.5％)，为白色固体。针对C6H5ClF3N3的[M+H]计算值，212；实测值，212。
步骤2：(R)-叔丁基3-((4-(甲基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-甲酸酯
Figure BDA0003549429610000841
在室温下向2-氯-N-甲基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-胺(760mg,3.59mmol)和(R)-叔丁基3-氨基吡咯烷-1-甲酸酯(1.34g,7.18mmol)在DMSO(20mL)中的溶液中加入K2CO3(992mg,7.18mmol)。将混合物在微波下在170℃下搅拌1.5小时。将混合物在真空中浓缩。用硅胶色谱法(PE/EA＝10/1-5/1)对残余物进行纯化，得到(R)-叔丁基3-((4-(甲基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-甲酸酯(958mg,73.7％)，为白色固体。针对C15H22F3N5O2的[M+H]计算值，362；实测值，362。
步骤3：(R)-N4-甲基-N2-(吡咯烷-3-基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2,4-二胺盐酸盐
Figure BDA0003549429610000842
在室温下向(R)-叔丁基3-氨基吡咯烷-1-甲酸酯(958mg,2.65mmol)在乙酸乙酯(EtOAc)(2mL)中的冷却溶液中加入HCl(15.0mL，在乙酸乙酯中为2M，30.0mmol)，将混合物在室温下搅拌1小时。浓缩混合物得到(R)-N4-甲基-N2-(吡咯烷-3-基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2,4-二胺盐酸盐(789mg,粗品)，为白色固体。针对C10H14F3N5的[M+H]计算值，262；实测值，262。
步骤4：(R)-N-(4-(3-((4-(甲基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000851
向(R)-N4-甲基-N2-(吡咯烷-3-基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2,4-二胺盐酸盐(789mg,2.65mmol)在DMSO(20mL)中的溶液中加入DIEA(3.43g,26.5mmol)和N-(4-氯喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(618mg,2.65mmol)。将混合物在40℃下搅拌30分钟。将混合物用水(50mL)稀释，并用THF(50mL*3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥、过滤并移除。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(4-(3-((4-(甲基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(28mg,2.3％)，为白色固体。
1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.11(s,1H),2.25(s,1H),2.87-2.95(m,3H),3.84-3.93(m,2H),4.02-4.08(m,1H),4.19(s,1H),4.54(s,1H),5.83(dd,J＝2.0,12.0Hz,1H),6.33(dd,J＝1.6,18.8Hz,1H),6.49(dd,J＝10.0,27.0Hz,1H),6.86-6.92(m,1H),7.57-7.70(m,2H),8.04-8.08(m,1H),8.14(d,J＝2.0Hz,1H),8.22(d,J＝9.2Hz,1H),8.39(s,1H),10.47(s,1H)。针对C21H21F3N8O的[M+H]计算值，459；实测值，459。
实施例16：(R)-N-(4-(3-(吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉- 7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000852
将(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(TFA盐)(44mg,0.15mmol)、2-氯吡啶并[3,4-d]嘧啶(31mg,0.18mmol)和DIEA(97mg,0.75mmol)在DMSO(3mL)中的混合物在微波下加热至140℃，持续30分钟。将混合物用水(20mL)稀释，并用DCM(10mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(4-(3-(吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(3.7mg,6.0％)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.18-2.32(m,1H),2.32-2.35(m,1H),3.91-4.00(m,2H),4.10-4.13(m,1H),4.23-4.28(m,1H),4.67-4.69(m,1H),5.82(dd,J＝2.0,10.0Hz,1H),6.30-6.35(m,1H),6.45-6.52(m,1H),7.63(dd,J＝2.4,9.2Hz,1H),7.72(dd,J＝0.8,5.2Hz,1H),8.15(d,J＝2.4Hz,1H),8.23-8.26(m,2H),8.35(d,J＝5.2Hz,1H),8.40(s,1H),8.96(s,1H),9.31(s,1H),10.47(s,1H)。针对C22H20N8O的[M+H]计算值C22H20N8O，413.1；实测值，413.1。
实施例17：(R)-N-(4-(3-((5-氯嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-甲氧基喹唑 啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000861
步骤1：7-硝基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮
Figure BDA0003549429610000862
将2-氨基-4-硝基苯甲酸(10.0g,55.0mmol)和尿素(33.0g,55.0mmol)的混合物加热到160℃，持续6h。然后将反应混合物冷却到100℃，加入水(60mL)。将溶液搅拌5min，滤出形成的沉淀物，用冷水洗涤，并进一步悬浮在0.5N NaOH(50mL)中。将混合物回流5min。然后将反应混合物冷却至室温并过滤。将滤液用浓盐酸调节至pH＝2。滤出粗产物，用甲醇/H2O＝1:1(100mL)洗涤，真空干燥得到7-硝基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(10.4g,91％)，为黄色固体。针对C8H5N3O4的计算值，208.0；实测值，208.0。
步骤2：2,4-二氯-7-硝基喹唑啉
Figure BDA0003549429610000871
在室温下向7-硝基喹唑啉-2,4(1H,3H)-二酮(3.0g,14.4mmol)在三氯氧磷(20mL)中的混合物中缓慢加入DIEA(3.7g,28.9mmol)。将反应混合物加热至140℃，持续3h。然后将反应混合物冷却和在真空中浓缩。经柱色谱法(PE:EA＝5:1)纯化残余物得到2,4-二氯-7-硝基喹唑啉(2.5g,71％)，为黄色固体。
1HNMR(400MHz,CDCl3):δ8.48-8.49(m,2H),8.86(s,1H)。
步骤3：(R)-叔丁基(1-(2-氯-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610000872
在室温下向2,4-二氯-7-硝基喹唑啉(2.5g,10.3mmol)和(R)-叔丁基吡咯烷-3-基氨基甲酸酯(1.9g,10.3mmol)在IPA(40mL)中的混合物中，加入TEA(3.1g,30.9mmol)。将反应混合物加热至80℃，过夜。将反应混合物冷却和在真空中浓缩。经柱色谱法(PE:EA＝3:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(2-氯-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(2.0g,50％)，为黄色固体。针对C17H20ClN5O4的[M+H]计算值，394.1；实测值，394.1。
步骤4：(R)-叔丁基(1-(2-甲氧基-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610000881
向(R)-叔丁基(1-(2-氯-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(2.0g,5.0mmol)在DMF(15mL)中的溶液中加入甲醇钠(MeONa)(270mg,5.0mmol)在甲醇(5mL)中的溶液。将反应混合物加热到80℃，持续3h。将反应混合物冷却和在真空中浓缩。经柱(PE:EA＝5:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(2-甲氧基-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.5g,77％)，为黄色固体。针对C18H23N5O5的[M+H]计算值，390.1；实测值，390.1。
步骤5：(R)-叔丁基(1-(7-氨基-2-甲氧基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610000882
在1atm H2下在室温将(R)-叔丁基(1-(2-甲氧基-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.5g,3.8mmol)和Pd/C(300mg,20％)在甲醇(30mL)中的溶液搅拌过夜。将反应混合物过滤并浓缩得到(R)-叔丁基(1-(7-氨基-2-甲氧基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.0g,72％)，为黄色固体。针对C18H25N5O3的[M+H]计算值，360.2；实测值，360.2。
步骤6：(R)-叔丁基(1-(7-丙烯酰胺基-2-甲氧基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610000891
在0℃下向(R)-叔丁基(1-(7-氨基-2-甲氧基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.0g,3.0mmol)和DIEA(1.9g,15mmol)在DCM(20mL)中的溶液中加入丙烯酰氯(317mg,3.5mmol)在DCM(0.5mL)中的溶液。然后将混合物在N2下缓慢升温到室温，并搅拌过夜。将混合物用水(20mL)稀释，用DCM(10mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。经柱色谱法(DCM:甲醇＝20:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(7-丙烯酰胺基-2-甲氧基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(450mg,37.5％)，为棕色固体。针对C21H27N5O4的[M+H]计算值，414.2；实测值，414.2。
步骤7：(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-甲氧基喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(TFA盐)
Figure BDA0003549429610000892
在室温下将(R)-叔丁基(1-(7-丙烯酰胺基-2-甲氧基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(200mg,0.48mmol)和TFA(1mL)在DCM(10mL)中的溶液搅拌3h。在真空中浓缩反应混合物，得到(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-甲氧基喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(TFA盐)(200mg,粗品)，为黄色固体。针对C16H19N5O2的[M+H]计算值，314.1；实测值，314.1。
步骤8：(R)-N-(4-(3-((5-氯嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-甲氧基喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(TFA盐)
Figure BDA0003549429610000901
将(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-甲氧基喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(TFA盐)(200mg,0.48mmol)、2,5-二氯嘧啶(71mg,0.48mmol)和DIEA(309mg,2.4mmol)在DMSO(10mL)中的混合物加热到60℃，过夜。冷却反应混合物，用水(20mL)稀释，并用DCM(10mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(4-(3-((5-氯嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-甲氧基喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(TFA盐)(15.0mg,7.0％)，为黄色固体。
1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.07-2.40(m,2H),4.04-4.10(m,6H),4.56(m,1H),5.89(dd,J＝10.0,1.6Hz,1H),6.34-6.38(m,1H),6.45-6.52(m,1H),7.55(d,J＝8.4Hz,1H),7.92(d,J＝2.0Hz,1H),8.26-8.41(m,4H),10.84(s,1H),13.61(br s,1H)。针对C20H20ClN7O2的[M+H]计算值，426.1；实测值，426.1
实施例18：(R)-N-(1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙 烯酰胺
Figure BDA0003549429610000911
步骤1：(R)-叔丁基(1-(6-氨基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610000912
将1-氯异喹啉-6-胺(355mg,1.99mmol)、(R)-叔丁基吡咯烷-3-基氨基甲酸酯(1.11g,5.98mml)和K2CO3(413mg,2.99mmol)在DMSO(5mL)中的混合物在微波下在180℃下搅拌5小时。将混合物冷却，倒入50mL H2O中，并用EA(50mL*3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。经硅胶色谱法(PE/EA＝1/1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(6-氨基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(360mg,55％)，为白色固体。针对C18H24N4O2的[M+H]计算值，329.1；实测值，329.1。
步骤2：(R)-叔丁基(1-(6-氨基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610000913
在0℃下在氮气气氛下将(R)-叔丁基(1-(6-氨基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(320mg,0.98mmol)和DIEA(629mg,4.88mmol)在DMF(10mL)中的混合物搅拌。滴加丙烯酰氯(88mg,0.98mmol)在DMF(1mL)中的溶液，并将混合物升温至室温，持续1小时。将混合物倒入50mLH2O中，用EA(50mL*3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。经硅胶色谱法(PE/EA＝2/1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(6-丙烯酰胺基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(220mg,59％)，为黄色固体。针对C21H26N4O3的[M+H]计算值，383.4；实测值，383.4。
步骤3：(R)-叔丁基(1-(6-氨基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610000921
在室温下将(R)-叔丁基(1-(6-丙烯酰胺基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(220mg,0.58mmol)和TFA(1mL)在DCM(10mL)中的溶液搅拌2h。在真空中浓缩反应混合物得到(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺(TFA盐)(190mg,粗品)，为黄色油状物。针对C16H18N4O的[M+H]计算值，283.1；实测值，283.1。
步骤4：(R)-N-(1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000922
在60℃下将(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺(120mg,0.30mmol)、2,5-二氯-4-乙氧基嘧啶(58mg,0.30mml)和DIEA(194mg,1.51mmol)在DMSO(3mL)中的混合物搅拌16小时。将反应混合物冷却并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺(60.3mg,47％)，为灰色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):2.03-2.06(m,1H),2.21-2.22(m,1H),3.69-3.73(m,1H),3.81-3.83(m,1H),3.92-3.94(m,1H),4.03-4.07(m,1H),4.39-4.40(m,1H),5.80-5.83(m,1H),6.29-6.34(m,1H),6.46-6.53(m,1H),6.95-6.96(m,1H),7.55-7.58(m,1H),7.80-7.82(m,1H),7.86(d,J＝5.6Hz,1H),8.17-8.20(m,2H),8.40(s,2H),10.41(s,1H)。针对C20H19BrN6O2的[M+H]计算值，440.1；实测值，440.1。
实施例19：(R)-N-(1-(3-((5-氯-4-乙氧基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000931
在微波条件下在150℃下将(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺(50mg,0.13mmol)、2,5-二氯-4-乙氧基嘧啶(24mg,0.13mml)和DIEA(81mg,0.63mmol)在DMSO(3mL)中的混合物搅拌30分钟。将反应混合物冷却并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(1-(3-((5-氯-4-乙氧基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺(10.6mg,19％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):1.23-1.33(m,3H),2.03-2.08(m,1H),2.22-2.24(m,1H),3.70-3.74(m,1H),3.81-3.83(m,1H),3.90-3.91(m,1H),3.92-3.94(m,1H),4.06-4.08(m,1H),4.16-4.20(m,1H),4.50(s,1H),5.81-5.84(dd,J＝10.4,2.0,1H),6.30-6.35(m,1H),6.47-6.54(m,1H),6.96-6.98(m,1H),7.56-7.59(m,1H),7.68(brs,1H),8.13(m,1H),8.20-8.22(m,1H),10.44(s,1H)。针对C22H23ClN6O2的[M+H]计算值,439.9；实测值，439.9。
实施例20：(R)-N-(4-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-吗啉代喹唑 啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000941
步骤1：(R)-叔丁基(1-(2-氯-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610000942
在室温下向2,4-二氯-7-硝基喹唑啉(3.0g,12.3mmol)和(R)-叔丁基吡咯烷-3-基氨基甲酸酯(2.3g,12.3mmol)在DCM(50mL)中的混合物中加入DIEA(4.76g,36.9mmol)，搅拌2小时。将混合物用水(100mL)洗涤并浓缩。经硅胶色谱法(PE:EA＝1.5:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(2-氯-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(4.8g,99％)，为黄色固体。针对C17H20ClN5O4的[M+H]计算值，394.1；实测值，394.1。
步骤2：(R)-叔丁基(1-(2-吗啉代-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610000951
在90℃下将(R)-叔丁基(1-(2-氯-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.2g,3.0mmol)、吗啉(313mg,3.6mmol)和DIEA(1.16g,9.0mmol)在NMP(10mL)中的溶液搅拌3小时。将混合物冷却，用乙酸乙酯(200mL)稀释，用水(100mL*3)和盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩以得到(R)-叔丁基(1-(2-吗啉代-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.3g,98％)，为红色固体。针对C21H28N6O5的[M+H]计算值，445.2；实测值，445.2。
步骤3：(R)-叔丁基(1-(7-氨基-2-吗啉代喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610000952
在80℃下将(R)-叔丁基(1-(2-吗啉代-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.33g,3.0mmol)与NH4Cl(1.6g,30.0mmol)在甲醇(30mL)和水(10mL)中的混合物搅拌2小时。然后加入Zn(1.6g,30.0mmol)。将混合物在80℃搅拌2小时。将混合物冷却，过滤并浓缩。经柱色谱法(DCM:甲醇＝10:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(7-氨基-2-吗啉代喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(800mg,65％)，为红色固体。针对C21H30N6O3的[M+H]计算值，415.2；实测值，415.2。
步骤4：(R)-叔丁基(1-(7-丙烯酰胺基-2-吗啉代喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610000961
向(R)-叔丁基(1-(7-氨基-2-吗啉代喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.0g,2.41mmol)在DCM(10mL)中的溶液中加入DIEA(622mg,4.82mmol)和丙烯酰氯(219mg,2.41mmol)。将混合物在室温下搅拌2小时。将混合物用水(10mL)洗涤，并用DCM(40mL)萃取。将有机层浓缩。经柱色谱法(DCM:EA:THF＝4:1:0.5)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(7-丙烯酰胺基-2-吗啉代喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(800mg,71％)，为红色固体。针对C24H32N6O4的[M+H]计算值，469.2；实测值，469.2。
步骤5：(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-吗啉代喹唑啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000962
在室温下将(R)-叔丁基(1-(7-丙烯酰胺基-2-吗啉代喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(200mg,0.43mmol)和TFA(1.5mL)在DCM(6mL)中的溶液搅拌1h。在真空中浓缩反应混合物得到(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-吗啉代喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(TFA盐)(157mg,100％)，为红色油状物。针对C19H24N6O2的[M+H]计算值，369.2；实测值，369.2。
步骤6：(R)-N-(4-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-吗啉代喹唑啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000971
将(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-吗啉代喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(TFA盐)(157mg,0.43mmol)、5-溴-2-氯嘧啶(82mg,0.43mmol)和DIEA(278mg,2.15mmol)在DMSO(3mL)中的混合物加热至60℃，过夜。冷却反应混合物，用水(20mL)稀释，用DCM(40mL)萃取。用水(50mL*3)和盐水(20mL)洗涤有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(4-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-吗啉代喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(64.2mg,28％)，为白色固体。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.03-2.07(m,1H),2.20-2.22(m,1H),3.64-3.81(m,8H),3.77-3.81(m,1H),3.86-3.91(m,1H),4.01-4.13(m,2H),4.43-4.45(m,1H),5.79(dd,J＝2.0,10.0Hz,1H),6.27-6.32(m,1H),6.43-6.50(m,1H),7.21(dd,J＝2.4,9.2Hz,1H),7.83-7.87(m,2H),7.98(d,J＝9.2Hz,1H),8.13(s,1H),8.42(s,2H),10.27(s,1H)。针对C23H25BrN8O2的[M+H]计算值,525.1；实测值，525.1。
实施例21：(R)-N-(4-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑啉-7-基)丙烯酰胺的合成
Figure BDA0003549429610000981
步骤1：(R)-叔丁基(1-(2-甲基-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610000982
在微波下在115℃下将(R)-叔丁基(1-(2-氯-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(500mg,1.26mmol)、2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼杂环己烷(trioxatriborinane)(540mg,1.90mmol)、Pd(dppf)2Cl2(103mg,0.12mmol)和K2CO3(520mg,3.80mmol)在1,4-二噁烷(6mL)中的混合物搅拌2小时。经减压除去溶剂，用DCM(30mL)稀释残余物，然后用水(20mL*2)和盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。用(1:1，石油醚:乙酸乙酯)柱色谱法纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(2-甲基-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(200mg,42.2％)，为黄色固体。针对C18H23N5O4的[M+H]计算值，374.0；实测值，374.0。
步骤2：(R)-叔丁基(1-(7-氨基-2-甲基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610000983
向(R)-叔丁基(1-(2-甲基-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.4g,3.8mmol)在乙醇(50mL)中的混合物中加入Pd/C(0.8g)。在室温在氢气气氛下将反应搅拌3小时。将混合物过滤并浓缩得到(R)-叔丁基(1-(7-氨基-2-甲基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.2g,粗品)，为灰白色固体。针对C18H25N5O2的[M+H]计算值，344.3；实测值，344.3。
步骤3：(R)-叔丁基(1-(7-丙烯酰胺基-2-甲基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610000991
在0℃下将丙烯酰氯(0.27mL，3.41mmol)缓慢加入(R)-叔丁基(1-(7-氨基-2-甲基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.3g,3.78mmol)和DIEA(1.67mL，11.3mmol)在DCM(80mL)中的混合物中。将混合物在室温下搅拌3h。将反应混合物浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(7-丙烯酰胺基-2-甲基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(12mg,9.2％)，为白色固体。[M+H]计算值398.4；实测值，398.4。
步骤4：(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610000992
在室温下将TFA(0.2mL)加入(R)-叔丁基(1-(7-丙烯酰胺基-2-甲基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(135mg,0.34mmol)在二氯甲烷(3mL)中的溶液中。将混合物于室温搅拌3h。将反应混合物浓缩获得(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑啉-7-基)丙烯酰胺的TFA盐(200mg,粗品)，为棕色液体。[M+H]计算值298.2；实测值，298.3。
步骤5：(R)-N-(4-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001001
在氮气气氛下在100℃下将(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(100mg,0.33mmol)、5-溴-2-氯嘧啶(104mg,0.53mml)和DIEA(0.55mL,3.36mmol)在DMSO(10mL)中的混合物搅拌4小时。将反应混合物冷却并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(4-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(10.3mg,8.3％)，为白色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):2.07(m,1H),2.02(m,1H),2.41(s,3H),3.82-4.03(m,4H),4.421-4.44(m,1H),5.81(dd,J＝2.0,10.0Hz,1H),6.29-6.34(m,1H),6.45-6.52(m,1H),7.55(dd,J＝2.4,9.2Hz,1H),7.84(d,J＝6.0Hz,1H),8.048(d,J＝2.4Hz,1H),8.15(d,J＝9.6Hz,1H),8.42(s,2H),10.42(s,1H)。[M+H]计算值455.3；实测值，455.3。
实施例22：(R)-N-(4-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-吗啉代喹唑啉-7-基)丙烯酰胺的合成
Figure BDA0003549429610001002
将(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-吗啉代喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(TFA盐)(146mg,0.4mmol)、2-氯嘧啶-5-甲腈(55mg,0.4mmol)和DIEA(258mg,2.0mmol)在DMSO(2mL)中的混合物加热至70℃，持续2小时。将残余物冷却，用水(20mL)稀释，并用DCM(30mL*2)萃取。将合并的有机层用水(30mL*2)和盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。用制备型-HPLC纯化残余物得到(R)-N-(4-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-吗啉代喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(41.4mg,22％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.07-2.11(m,1H),2.23-2.28(m,1H),3.64-3.71(m,8H),3.79-3.83(m,1H),3.89-3.93(m,1H),4.02-4.05(m,1H),4.11-4.15(m,1H),4.55-4.59(m,1H),5.79(dd,J＝10.0,2.0Hz,1H),6.27-6.32(m,1H),6.44-6.50(m,1H),7.22(dd,J＝2.0,8.8Hz,1H),7.86(d,J＝2.0Hz,1H),7.97(d,J＝9.2Hz,1H),8.14(s,1H),8.65-8.69(m,2H),8.77(d,J＝2.4Hz,1H),10.26(s,1H)。针对C24H25N9O2的[M+H]计算值,472.2；实测值，472.2。
实施例23：(R)-N-(4-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-(4-甲基哌嗪- 1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001011
步骤1：(R)-N-(4-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001021
将(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(139mg,0.36mmol)、5-溴-2-氯嘧啶(75mg,0.36mmol)和DIEA(232mg,26.00mmol)在DMSO(2mL)中的混合物加热至60℃，过夜。冷却反应混合物，用水(10mL)稀释，并用DCM(10mL*2)萃取。将合并的有机层用水(10mL*2)和盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。残余物通过制备型HPLC纯化，得到(R)-N-(4-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(2.5mg,1％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ1.23-1.29(m,1H),1.44-1.46(m,1H),2.00-2.07(m,3H),2.19-2.24(m,2H),2.38-2.41(m,2H),3.73-4.12(m,8H),4.39-4.42(m,1H),5.79(dd,J＝2.0,10.0Hz,1H),6.26-6.31(m,1H),6.43-6.47(m,1H),7.19(dd,J＝2.4,9.2Hz,1H),7.82-7.83(m,2H),7.96(d,J＝9.2Hz,1H),8.42(s,2H),10.24(s,1H)。针对C24H28BrN9O的[M+H]MS计算值，538.2；实测值，538.2。
实施例24：(R)-N-(4-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-(4-甲基哌 嗪-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001031
步骤1：(R)-叔丁基(1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001032
在90℃下将(R)-叔丁基(1-(2-氯-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(10.0g,25.4mmol)、1-甲基哌嗪(2.6g,26.0mmol)和DIEA(6.6g,50.8mmol)在NMP(100mL)中的溶液搅拌3小时。将反应混合物冷却，用乙酸乙酯(200mL*2)萃取。将合并的有机层用水(100mL*3)和盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。经硅胶柱色谱法(DCM:甲醇＝10:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(9.0g,77％)，为红色固体。针对C22H31N7O4的[M+H]MS计算值458.2；实测值，458.2。
步骤2：(R)-叔丁基(1-(7-氨基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001041
在80℃下将(R)-叔丁基(1-(2-(4-甲基哌嗪-1-基)-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(9.0g,19.7mmol)与NH4Cl(10.4g,197.0mmol)在甲醇(90mL)和水(30mL)中的混合物搅拌2小时。然后加入Zn(12.8g,197.0mmol)。将混合物在80℃下搅拌2小时。将混合物冷却，过滤并浓缩。经柱(DCM:甲醇＝10:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(7-氨基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(6.7g,79％)，为红色固体。针对C22H33N7O2的[M+H]MS计算值428.3；实测值，428.3。
步骤3：(R)-叔丁基(1-(7-丙烯酰胺基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4-基)吡咯 烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001042
在0℃向(R)-叔丁基(1-(7-氨基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(6.7g,15.6mmol)在DCM(50mL)中的溶液中加入DIEA(8.0mL,46.8mmol)和丙烯酰氯(1.4g,15.6mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2小时。用水(50mL)稀释混合物，并用DCM(50mL*2)萃取。将合并的有机层浓缩。经柱(DCM:甲醇＝10:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(7-丙烯酰胺基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(2.2g,29％)，为黄色固体。针对C25H35N7O3的[M+H]MS计算值482.3；实测值，482.3。
步骤4：(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺TFA盐
Figure BDA0003549429610001051
将(R)-叔丁基(1-(7-丙烯酰胺基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(2.2g,5.6mmol)和TFA(6mL)在DCM(20mL)中的溶液在室温下搅拌1h。经真空浓缩反应混合物得到(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺的TFA盐(1.74g)，为黄色油状物。针对C20H27N7O的[M+H]MS计算值382.2；实测值，382.2。
步骤5：(R)-N-(4-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺HCCOH盐
Figure BDA0003549429610001052
将(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺的TFA盐(2.0g,5.2mmol)、2-氯嘧啶-5-甲腈(729mg,5.2mmol)和DIEA(4.6mL，26.0mmol)在DMSO(20mL)中的混合物加热至30℃，持续2h。冷却反应混合物，用水(40mL)稀释，并用DCM(40mL*2)萃取。将合并的有机层用水(50mL*2)和盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(4-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺的HCOOH盐(295.0mg,12％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.03-2.10(m,1H),2.20-2.27(m,1H),2.53-2.57(m,3H),2.67-2.81(m,4H),3.80-4.15(m,8H),4.57-4.59(m,1H),5.79(dd,J＝2.0,10.0Hz,1H),6.27-6.32(m,1H),6.43-6.50(m,1H),7.22(dd,J＝2.4,9.2Hz,1H),7.95-8.02(m,2H),8.13(s,1H),8.65-8.70(m,2H),8.78(s,1H),10.31(s,1H)。针对C25H28N10O的[M+H]MS计算值，485.2；实测值，485.2。
实施例25：(R)-N-(4-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙 烯酰胺
Figure BDA0003549429610001061
步骤1：(R)-N-(4-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺HCOOH盐
Figure BDA0003549429610001062
将(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(TFA盐)(170mg,0.60mmol)、5-溴-2-氯嘧啶(116mg,0.60mmol)和DIEA(0.5mL,3.0mmol)在DMSO(10mL)中的混合物加热至60℃，持续2天。经冷却反应混合物，用水(20mL)稀释，并用DCM(20mL*2)萃取。将合并的有机层用水(20mL*2)和盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物后得到(R)-N-(4-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺的HCOOH盐(29.8mg,11％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.03-2.10(m,1H),2.20-2.27(m,1H),3.82-3.85(m,1H),3.91-3.97(m,1H),4.03-4.10(m,1H),4.15-4.19(m,1H),4.43-4.47(m,1H),5.83(dd,J＝2.4,10.2Hz,1H),6.30-6.35(m,1H),6.45-6.52(m,1H),7.63(dd,J＝2.4,9.2Hz,1H),7.87(d,J＝6.0Hz,1H),8.13-8.16(m,2H),8.22(d,J＝9.2Hz,1H),8.38-8.42(m,3H),10.47(s,1H)。针对C19H18BrN7O的[M+H]MS计算值，440.1；实测值，440.0。
实施例26：(R)-N-(1-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基) 丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001071
步骤1：(R)-N-(1-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺HCOOH盐
Figure BDA0003549429610001072
在40℃下将(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺(160mg,0.56mmol)、2-氯嘧啶-5-甲腈(79mg,0.56mml)和DIEA(365mg,2.83mmol)在DMSO(10mL)中的混合物搅拌1h。冷却反应混合物，用水(20mL)稀释，用DCM(20mL*2)萃取。将合并的有机层用水(20mL*2)和盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(1-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺的HCOOH盐(165.8mg,76.7％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.06-2.09(m,1H),2.23-2.26(m,1H),3.72-3.75(m,1H),3.82-3.85(m,1H),3.94-3.96(m,1H),4.05-4.09(m,1H),4.51-4.54(m,1H),5.81(dd,J＝2.0,10.4Hz,1H),6.29-6.33(m,1H),6.46-6.52(m,1H),6.98(d,J＝5.6Hz,1H),7.58(dd,J＝2.0,9.2Hz,1H),7.87(d,J＝5.6Hz,1H),8.13-8.20(m,3H),8.67-8.76(m,3H),10.42(s,1H),12.61(br s,1H)。针对C21H19N7O的[M+H]MS计算值，386.2；实测值，386.2。
实施例27：(R)-N-(1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)-N- 甲基丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001081
步骤1：(R)-叔丁基(1-(6-氨基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001082
在微波中在160℃下将1-氯异喹啉-6-胺(500mg,2.8mmol)、(R)-叔丁基吡咯烷-3-基氨基甲酸酯(1.0g,5.6mml)和K2CO3(580mg,4.2mmol)在DMSO(10mL)中的混合物搅拌1h。冷却反应混合物，用水(20mL)稀释，并用DCM(20mL*2)萃取。将合并的有机层用水(20mL*2)和盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。经硅胶柱色谱法(PE:EA＝0:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(6-氨基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.4g,39％)，为黄色固体。针对C18H24N4O2的[M+H]MS计算值，329.2；实测值，329.2。
步骤2：(R)-叔丁基(1-(6-(甲基氨基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001091
向(R)-叔丁基(1-(6-氨基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(500mg,1.5mmol)在甲醇(20mL)中的溶液中加入HCHO(183mg,在水中为30％，6.0mmol)。将反应混合物在室温下搅拌1h。然后加入NaBH3CN(144mg,12.0mmol)。将混合物在60℃下搅拌过夜。将混合物冷却，用2N HCl溶剂(5mL)稀释，并用EA(20mL*2)萃取。将合并的有机层浓缩。经硅胶柱色谱法(PE:EA＝0:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(6-(甲基氨基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(300mg,53％)，为黄色固体。针对C19H26N4O2的[M+H]MS计算值，343.2；实测值，343.2。
步骤3：(R)-叔丁基(1-(6-(N-甲基丙烯酰胺基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001092
在0℃在氮气气氛下向(R)-叔丁基(1-(6-(甲基氨基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(250mg,0.72mmol)和DIEA(283mg,2.21mmol)在DCM(20mL)中的混合物缓慢加入丙烯酰氯(73mg,0.80mmol)。将混合物在室温搅拌过夜。将混合物浓缩并经硅胶柱色谱法(PE:EA＝0:1)纯化得到(R)-叔丁基(1-(6-(N-甲基丙烯酰胺基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(200mg,58％)，为黄色油状物。针对C22H28N4O3的[M+H]MS计算值，397.2；实测值，397.2。
步骤4：(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)-N-甲基丙烯酰胺TFA盐
Figure BDA0003549429610001101
将(R)-叔丁基(1-(6-(N-甲基丙烯酰胺基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(200mg,0.50mmol)和TFA(5mL)在DCM(5mL)中的溶液在室温下搅拌2小时。将混合物浓缩得到(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)-N-甲基丙烯酰胺的TFA盐(148mg)，为棕色油状物。针对C17H20N4O的[M+H]MS计算值，297.2；实测值，297.2。
步骤5：(R)-N-(1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)-N-甲基丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001102
将(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)-N-甲基丙烯酰胺(100mg,0.34mmol)、5-溴-2-氯嘧啶(98mg,0.51mmol)和DIEA(132mg,0.90mmol)在DMSO(10mL)中的混合物在微波中在80℃下搅拌1h。冷却反应混合物，用水(20mL)稀释，并用DCM(20mL*2)萃取。将合并的有机层用水(20mL*2)和盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物，得到(R)-N-(1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)-N-甲基丙烯酰胺(27.5mg,12％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.04-2.07(m,1H),2.21-2.25(m,1H),3.33(s,3H),3.71-3.75(m,1H),3.83-3.85(m,1H),3.95-3.98(m,1H),4.06-4.11(m,1H),4.40-4.42(m,1H),5.59(dd,J＝3.2,9.6Hz,1H),6.15-6.18(m,2H),7.04(d,J＝5.6Hz,1H),7.36(dd,J＝2.0,9.2Hz,1H),7.64(d,J＝2.0Hz,1H),7.82(d,J＝6.4Hz,1H),7.95(d,J＝5.6Hz,1H),8.28(d,J＝8.8Hz,1H),8.40(s,2H)。针对C21H21BrN6O的[M+H]MS计算值，453.1；实测值，453.2。
实施例28：(R)-N-(1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)-N- 甲基丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001111
步骤1：(R,E)-叔丁基(1-(6-(丁-2-烯酰胺基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001112
在0℃在氮气气氛下向(R)-叔丁基(1-(6-氨基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(600mg,1.83mmol)和DIEA(708mg,5.48mmol)在DCM(30mL)中的混合物缓慢加入(E)-丁-2-烯酰氯(190mg,1.83mmol)。将混合物在室温搅拌过夜。将混合物浓缩并经硅胶柱色谱法(DCM:甲醇＝20:1)纯化得到(R,E)-叔丁基(1-(6-(丁-2-烯酰胺基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(280mg,38.6％)，为黄色固体。针对C22H28N4O3的[M+H]MS计算值，397.2；实测值，397.2。
步骤2：(R,E)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)-丁-2-烯酰胺TFA盐
Figure BDA0003549429610001121
将(R,E)-叔丁基(1-(6-(丁-2-烯酰胺基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(280mg,0.71mmol)和TFA(10mL)在DCM(10mL)中的溶液在室温下搅拌2小时。将混合物浓缩得到(R,E)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丁-2-烯酰胺的TFA盐(210mg)，为棕色油状物。针对C17H20N4O的[M+H]MS计算值，297.2；实测值，297.2。
步骤3：(R,E)-N-(1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丁-2-烯酰胺HCOOH盐
Figure BDA0003549429610001122
将(R,E)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丁-2-烯酰胺(150mg,0.51mmol)、5-溴-2-氯嘧啶(98mg,0.51mmol)和DIEA(327mg,2.53mmol)在DMSO(10mL)中的混合物在微波中在80℃下搅拌1h。冷却反应混合物，用水(20mL)稀释，并用DCM(20mL*2)萃取。将合并的有机层用水(20mL*2)和盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R,E)-N-(1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丁-2-烯酰胺的HCOOH盐(27.5mg,12％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ1.89(dd,J＝1.2,7.2Hz,3H),2.02-2.05(m,1H),2.21-2.23(m,1H),3.68-3.72(m,1H),3.79-3.82(m,1H),3.91-3.93(m,1H),4.02-4.17(m,1H),4.38-4.40(m,1H),6.18(dd,J＝1.6,15.2Hz,1H),6.83-6.88(m,1H),6.94(d,J＝6.0Hz,1H),7.52-7.55(m,1H),7.82-7.85(m,2H),8.13-8.17(m,3H),8.40(s,2H),10.23(s,1H),12.78(br s,1H)。针对C21H21BrN6O的[M+H]MS计算值，453.1；实测值，453.2。
实施例29：(R)-N-(1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)-N- 甲基丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001131
步骤1：(R)-叔丁基(1-(7-硝基-2-(吡咯烷-1-基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001132
将(R)-叔丁基(1-(2-氯-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.5g,3.8mmol)、吡咯烷(409mg,5.7mmol)和DIEA(1.5g,11.4mmol)在DMSO(30mL)中的溶液在90℃下搅拌2小时。用水(70mL)稀释混合物并用乙酸乙酯(50mL*2)萃取。将合并的有机层用水(50mL*3)和盐水(50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。通过硅胶柱色谱法(PE/EA＝2/1)纯化残余物，得到(R)-叔丁基(1-(7-硝基-2-(吡咯烷-1-基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.6g,98％)，为黄色固体。针对C21H28N6O4的[M+H]MS计算值，429.2；实测值，429.2。
步骤2：(R)-叔丁基(1-(7-氨基-2-(吡咯烷-1-基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001141
将(R)-叔丁基(1-(7-硝基-2-(吡咯烷-1-基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.6g,3.7mmol)与NH4Cl(1.9g,37.0mmol)在甲醇(40mL)和水(8mL)中的混合物在80℃下搅拌2小时。然后加入Zn(2.4g,37.0mmol)。将混合物在80℃搅拌2小时。将混合物冷却，过滤并浓缩。经柱(DCM:甲醇＝10:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(7-氨基-2-(吡咯烷-1-基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.5g,98％)，为黄色固体。针对C21H30N6O2的[M+H]MS计算值，399.2；实测值，399.2。
步骤3：(R)-叔丁基(1-(7-丙烯酰胺基-2-(吡咯烷-1-基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001142
在0℃下向(R)-叔丁基(1-(7-氨基-2-(吡咯烷-1-基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.4g,3.5mmol)在DCM(40mL)中的溶液中加入DIEA(1.4g,10.5mmol)和丙烯酰氯(317mg,3.5mmol)。将混合物在室温下搅拌2小时。用水(50mL)洗涤混合物，并用DCM(50mL*2)萃取。将合并的有机层浓缩。经柱(DCM:甲醇＝10:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(7-丙烯酰胺基-2-(吡咯烷-1-基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(600mg,40％)，为黄色固体。针对C24H32N6O3的[M+H]MS计算值，453.3；实测值，453.3。
步骤4：(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-(吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺TFA盐
Figure BDA0003549429610001151
将(R)-叔丁基(1-(7-丙烯酰胺基-2-(吡咯烷-1-基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(600mg,1.3mmol)和TFA(10mL)在DCM(10mL)中的溶液在室温下搅拌1h。将反应混合物真空浓缩，得到(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-(吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺的TFA盐(467mg)，为黄色固体。针对C19H24N6O的[M+H]MS计算值，353.2；实测值，353.2。
步骤5：(R)-N-(4-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-(吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺HCOOH盐
Figure BDA0003549429610001152
将(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-(吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(TFA盐)(367mg,1.04mmol)、2-氯嘧啶-5-甲腈(217mg,1.60mmol)和DIEA(402mg,3.12mmol)在DMSO(15mL)中的混合物加热至30℃，持续2h。冷却反应混合物，用水(20mL)稀释，并用DCM(20mL*2)萃取。将合并的有机层用水(20mL*2)和盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(4-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-(吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺的HCOOH盐(328.5mg,54％)，为白色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ1.88-1.91(m,4H),2.05-2.09(m,1H),2.23-2.27(m,1H),3.50-3.53(m,4H),3.80-3.84(m,1H),3.89-3.92(m,1H),4.02-4.05(m,1H),4.11-4.15(m,1H),4.55-4.57(m,1H),5.79(dd,J＝1.6,10.0Hz,1H),6.27-6.32(m,1H),6.43-6.50(m,1H),7.15(dd,J＝2.0,9.2Hz,1H),7.89-7.96(m,2H),8.16(s,1H),8.65-8.69(m,2H),8.78(d,J＝2.4Hz,1H),10.23(s,1H)。针对C24H25N9O的[M+H]MS计算值，456.2；实测值，456.2。
实施例30：(R)-N-(4-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑 啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001161
将(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(165mg,0.55mmol)、2-氯嘧啶-5-甲腈(62mg,0.44mml)和DIEA(0.46mL，2.77mmol)在DMSO(10mL)中的混合物在40℃在氮气气氛下搅拌2小时。冷却反应混合物，用水(20mL)稀释，用DCM(20mL*2)萃取。将合并的有机层用水(20mL*2)和盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(4-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(58.5mg,26.3％)，为白色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):2.07-2.10(m,1H),2.26-2.28(m,1H),2.41(s,3H),3.82-3.85(m,1H),3.87-3.94(m,1H),4.04-4.07(m,1H),4.14-4.19(m,1H),4.55-4.57(m,1H),5.82(dd,J＝1.6,10.0Hz,1H),6.29-6.34(m,1H),6.45-6.52(m,1H),7.56(dd,J＝2.4,8.2Hz,1H),8.05(d,J＝2.0Hz,1H),8.16(d,J＝9.2Hz,1H),8.67-8.69(m,2H),8.79(d,J＝2.8Hz,1H),10.44(s,1H)。针对C21H20N8O的[M+H]MS计算值，401.2；实测值，401.2。
实施例31：(R)-N-(2-氨基-4-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑 啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001171
步骤1：(R)-叔丁基(1-(2-(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001172
将(R)-叔丁基(1-(2-氯-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(2.1g,5.6mmol)、DMBNH2(1.4g,8.4mml)和DIEA(3.6g,27.9mmol)在DMSO(20mL)中的混合物在90℃在氮气气氛下搅拌过夜。冷却反应混合物，用水(50mL)稀释，并用DCM(50mL*2)萃取。将合并的有机层用水(50mL*2)和盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶柱色谱法(PE:EA＝2:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(2-(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(2.3g,78％)，为红色固体。针对C26H32N6O6的[M+H]MS计算值，525.2；实测值，525.2。
步骤2：(R)-叔丁基(1-(7-氨基-2-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001181
将(R)-叔丁基(1-(2-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(2.3g,4.4mmol)与NH4Cl(2.4g,44.0mmol)在甲醇(40mL)和水(8mL)中的混合物在80℃下搅拌2小时。然后加入Zn(2.4g,44.0mmol)。将混合物在80℃搅拌2小时。将混合物冷却，过滤并浓缩。经硅胶柱色谱法(DCM:MeOH＝10:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(7-氨基-2-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(2.2g,100％)，为黄色固体。针对C26H34N6O4的[M+H]MS计算值，495.3；实测值，495.3。
步骤3：(R)-4-(3-氨基吡咯烷-1-基)喹唑啉-2,7-二胺
Figure BDA0003549429610001182
将(R)-叔丁基(1-(7-氨基-2-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(2.0g,4.0mmol)和TFA(8mL)在DCM(20mL)中的溶液在室温下搅拌1h。将反应混合物真空浓缩得到(R)-4-(3-氨基吡咯烷-1-基)喹唑啉-2,7-二胺的TFA盐(987mg)，为黑色油状物。针对C12H16N6的[M+H]MS计算值，245.1；实测值，245.1。
步骤4：(R)-2-((1-(2,7-二氨基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基)嘧啶-5-甲腈
Figure BDA0003549429610001191
将(R)-4-(3-氨基吡咯烷-1-基)喹唑啉-2,7-二胺(1.0g,4.1mmol)、2-氯嘧啶-5-甲腈(510mg,4.1mmol)和DIEA(1.6g,12.3mmol)在THF(20mL)中的混合物在30℃在氮气气氛下搅拌2小时。浓缩残余物并经硅胶柱色谱法(DCM:甲醇＝10:1)纯化得到(R)-2-((1-(2,7-二氨基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基)嘧啶-5-甲腈(1.2g,85％)，为黄色油状物。针对C17H17N9的[M+H]MS计算值，348.2；实测值，348.2。
步骤5：(R)-N-(2-氨基-4-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001192
在0℃下向(R)-2-((1-(2,7-二氨基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基)嘧啶-5-甲腈(600mg,1.7mmol)在丙酮(8mL)和H2O(4mL)中的溶液中加入K2CO3(716mg,5.2mmol)和丙烯酰氯(155mg,1.7mmol)。将混合物在0℃下搅拌1h。对混合物进行浓缩并通过制备型HPLC纯化，得到(R)-N-(2-氨基-4-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺的HCOOH盐(24.3mg,4％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):2.07-2.11(m,1H),2.23-2.28(m,1H),3.71-3.81(m,1H),3.87-3.93(m,1H),4.00-4.05(m,1H),4.10-4.15(m,1H),4.52-4.56(m,1H),5.78(dd,J＝2.0,10.0Hz,1H),6.27-6.31(m,1H),6.43-6.50(m,3H),7.29(d,J＝8.8Hz,1H),7.73(s,1H),7.97(d,J＝9.2Hz,1H),8.26(s,1H),8.67-8.69(m,2H),8.78(s,1H),10.33(s,1H)。针对C20H19N9O的[M+H]MS计算值，402.2；实测值，402.1。
实施例32：(R)-N-(4-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-(2,2,2-三 氟乙氧基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001201
步骤1：(R)-叔丁基(1-(7-硝基-2-(2,2,2-三氟乙氧基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001202
将(R)-叔丁基(1-(2-氯-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(5.0g,12.7mmol)、2,2,2-三氟乙醇(1.5g,15.3mml)和K2CO3(2.6g,19.0mmol)在DMA(40mL)中的混合物在110℃在氮气气氛下搅拌过夜。冷却反应混合物，用水(100mL)稀释，并用DCM(100mL*2)萃取。将合并的有机层用水(100mL*2)和盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。经硅胶柱色谱法(PE:EA＝2:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(7-硝基-2-(2,2,2-三氟乙氧基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(4.0g,69％)，为红色固体。针对C19H22F3N5O5的[M+H]MS计算值，458.2；实测值，458.2。
步骤2：(R)-叔丁基(1-(7-氨基-2-(2,2,2-三氟乙氧基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001211
将(R)-叔丁基(1-(7-硝基-2-(2,2,2-三氟乙氧基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(3.5g,7.7mmol)与NH4Cl(4.0g,77.0mmol)在甲醇(40mL)和水(8mL)中的混合物在80℃搅拌2小时。然后加入Zn(5.0g,77.0mmol)。将混合物在80℃下搅拌2小时。将混合物冷却，过滤并浓缩。经硅胶柱色谱法(DCM:甲醇＝10:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(7-氨基-2-(2,2,2-三氟乙氧基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(800mg,25％),为黄色固体。针对C19H24F3N5O3的[M+H]MS计算值，428.2；实测值，428.2。
步骤3：(R)-叔丁基(1-(7-丙烯酰胺基-2-(2,2,2-三氟乙氧基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001212
在0℃向(R)-叔丁基(1-(7-氨基-2-(2,2,2-三氟乙氧基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(427mg,1.0mmol)在DMF(20mL)中的溶液中加入DIEA(387mg,3.0mmol)和丙烯酰氯(90mg,1.0mmol)。将混合物在室温下搅拌5h。将混合物浓缩并经硅胶柱色谱法纯化得到(R)-叔丁基(1-(7-丙烯酰胺基-2-(2,2,2-三氟乙氧基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(280mg,58％)，为黄色固体。针对C22H26F3N5O4的[M+H]MS计算值，482.2；实测值，482.2。
步骤4：(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-(2,2,2-三氟乙氧基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺TFA盐
Figure BDA0003549429610001221
将(R)-叔丁基(1-(7-丙烯酰胺基-2-(2,2,2-三氟乙氧基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(280mg,0.58mmol)和TFA(10mL)在DCM(10mL)中的溶液在室温下搅拌1h。经真空浓缩反应混合物，得到(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-(2,2,2-三氟乙氧基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺的TFA盐(222mg)，为黄色固体。针对C17H18F3N5O2的[M+H]MS计算值，382.1；实测值，382.1。
步骤5：(R)-N-(4-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-(2,2,2-三氟乙氧基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001231
将(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-(2,2,2-三氟乙氧基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(222mg,0.58mmol)、2-氯嘧啶-5-甲腈(121mg,1.87mmol)和DIEA(224mg,1.74mmol)在DMSO(10mL)中的溶液在30℃下搅拌2h。将反应混合物用水(20mL)稀释，并用DCM(20mL*2)萃取。将合并的有机层用水(20mL*2)和盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(4-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-(2,2,2-三氟乙氧基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(97.7mg,35％)，为黄色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):2.09-2.13(m,1H),2.26-2.31(m,1H),3.85-3.88(m,1H),3.89-3.96(m,1H),4.00-4.06(m,1H),4.10-4.19(m,1H),4.57-4.61(m,1H),4.98-5.01(m,2H),5.82(dd,J＝1.6,10.0Hz,1H),6.30-6.34(m,1H),6.44-6.51(m,1H),7.47(dd,J＝2.4,9.2Hz,1H),8.06(d,J＝2.0Hz,1H),8.18(d,J＝9.2Hz,1H),8.67-8.69(m,2H),8.78(d,J＝2.4Hz,1H),10.44(s,1H)。针对C22H19F3N8O2的[M+H]MS计算值，485.2；实测值，485.1。
实施例33：(R)-N-(1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丁- 2-炔酰胺
Figure BDA0003549429610001241
步骤1：丁-2-炔酰氯
Figure BDA0003549429610001242
在0℃向丁-2-炔酸(697mg,8.3mmol)和DMF(1滴)在DCM(5mL)中的溶液中加入(COCl)2(1.05g,8.3mmol)。将反应混合物在0℃搅拌1h。然后将反应混合物浓缩，得到粗的丁-2-炔酰氯(700mg,100％)。
步骤2：(R)-叔丁基(1-(6-(丁-2-炔酰胺基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001243
在0℃向(R)-叔丁基(1-(6-氨基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(680mg,2.1mmol)和DIEA(1.06g,8.29mmol)在DCM(10mL)中的溶液中加入丁-2-炔酰氯(700mg)。将混合物在0℃搅拌30分钟。用水(20mL)稀释反应混合物，并用DCM(20mL*2)萃取。将合并的有机层用水(20mL*2)和盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，在真空中浓缩，并经硅胶柱色谱法(DCM:甲醇＝10:1)纯化获得(R)-叔丁基(1-(6-(丁-2-炔酰胺基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(2.3g,100％)，为棕色油状物。针对C22H26N4O3的[M+H]MS计算值，395.2；实测值，395.2。
步骤3：(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1基)异喹啉-6-基)丁-2-炔酰胺
Figure BDA0003549429610001251
将(R)-叔丁基(1-(6-(丁-2-炔酰胺基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(2.0g,2.1mmol)和TFA(9mL)在DCM(9mL)中的溶液在室温下搅拌1h。在真空浓缩反应混合物，并通过硅胶柱色谱法(DCM:甲醇＝4:1)纯化得到(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丁-2-炔酰胺(477mg,61％)，为棕色固体。针对C17H18N4O的[M+H]MS计算值，295.1；实测值，295.1。
步骤4：(R)-N-(1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丁-2-炔酰胺
Figure BDA0003549429610001252
在微波下在80℃下将(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丁-2-炔酰胺(400mg,1.36mmol)、5-溴-2-氯嘧啶(523mg,2.71mmol)和DIEA(877mg,6.80mmol)在DMSO(5mL)中的溶液搅拌2h。将反应混合物用水(20mL)稀释，并用DCM(20mL*2)萃取。将合并的有机层用水(20mL*2)和盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)-2-炔酰胺(98.9mg,16.2％)，为白色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):2.03-2.07(m,4H),2.21-2.32(m,1H),3.67-3.71(m,1H),3.77-3.83(m,1H),3.88-3.92(m,1H),4.03-4.06(m,1H),4.36-4.40(m,1H),6.94(d,J＝5.6Hz,1H),7.50(d,J＝8.8Hz,1H),7.81-7.68(m,2H),8.08(s,1H),8.13-8.16(m,1H),8.40(s,2H),10.89(s,1H)。针对C21H19BrN6O的[M+H]MS计算值，452.2；实测值，452.1。
实施例34：(R)-N-(4-(3-((1-乙基-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-6-基)氨基)吡咯烷- 1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001261
将N-(4-氯喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(180mg,0.77mmol)、(R)-1-乙基-N-(吡咯烷-3-基)-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-6-胺的HCl盐(247mg,0.97mmol)和DIEA(1.3mL，7.72mmol)在DMSO(10mL)中的溶液在40℃在N2下搅拌2h。冷却反应混合物，用水(20mL)稀释，并用EA(20mL*2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(4-(3-((1-乙基-1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-6-基)氨基)吡咯烷-1-基)喹唑啉-7-基)丙烯酰胺(38.4mg,11.5％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):1.33(t,J＝7.2Hz,3H),2.07-2.12(m,1H),2.29-2.33(m,1H),3.80-3.84(m,1H),3.95-3.97(m,1H),4.06-4.09(m,1H),4.21-4.28(m,3H),4.44-4.45(m,1H),5.83(dd,J＝10.0,1.6Hz,1H),6.30-6.35(m,1H),6.43-6.52(m,2H),6.75(d,J＝6.0Hz,1H),7.62(dd,J＝9.2,2.0Hz,1H),7.96(s,1H),8.15(d,J＝2.4Hz,1H),8.24(d,J＝8.8Hz,1H),8.40(s,1H),8.59(s,1H),10.48(s,1H)。针对C23H24N8O的[M+H]MS计算值，429.2；实测值：429.1。
实施例35：(R,E)-N-(4-(3-((5-氯-4-(吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)嘧啶-2-基)氨 基)吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑啉-7-基)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺
Figure BDA0003549429610001271
步骤1：3-碘代吡唑并[1,5-a]吡啶
Figure BDA0003549429610001272
将吡唑并[1,5-a]吡啶(900mg,7.63mmol)和NIS(2.1g,9.15mmol)在DMF(20mL)中的溶液在室温下搅拌16h。用水(50mL)稀释反应混合物，并用EA(20mL*2)萃取。将合并的有机层用水(20mL*2)和盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。经硅胶柱色谱法纯化残余物得到3-碘代吡唑并[1,5-a]吡啶(1.75g,87.5％)，为白色固体。针对C7H5IN2的[M+H]MS计算值，244.9；实测值，244.9。
步骤2：3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶
Figure BDA0003549429610001273
在冰浴下，向3-碘代吡唑并[1,5-a]吡啶(1.7g,6.9mmol)和2-异丙氧基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(2.6mL,13.8mmol)在THF(40mL)中的溶液中缓慢加入异丙基氯化镁(5.87mL，在THF中为2N)。将混合物在0℃下搅拌2h。用水(50mL)稀释反应混合物，并用EA(20mL*2)萃取。将合并的有机层用水(20mL*2)和盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。经硅胶柱色谱法(PE:EA＝10:1)纯化残余物得到3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶(1.0g,58.8％)，为白色固体。针对C13H17BN2O2的[M+H]MS计算值，245.1；实测值，245.1。
步骤3：3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶
Figure BDA0003549429610001281
在室温向3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡唑并[1,5-a]吡啶(938mg,3.85mmol)和2,4,5-三氯嘧啶(700mg,3.85mmol)在ACN(30mL)和H2O(5mL)中的溶液中加入Pd(PPh3)4(443mg,0.38mmol)和Na2CO3(815mg,7.69mmol)。将混合物在90℃下搅拌4h。用水(50mL)稀释反应混合物，并用DCM(30mL*2)萃取。将合并的有机层用水(30mL*2)和盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。经硅胶柱色谱法(PE:EA＝10:1)纯化残余物得到3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶(500mg,49％)，为白色固体。针对C11H6Cl2N4的[M+H]MS计算值，265.0；实测值，265.0。
步骤4：(R,E)-N-(4-(3-((5-氯-4-(吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑啉-7-基)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺
Figure BDA0003549429610001282
将3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶(371mg,1.69mmol)、(R,E)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑啉-7-基)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺(500mg,1.41mmol)和K2CO3(777mg,5.63mmol)在DMSO(10mL)中的溶液在100℃下搅拌4h。冷却反应混合物，用水(20mL)稀释，并用DCM(20mL*2)萃取。将合并的有机层用水(20mL*2)和盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R,E)-N-(4-(3-((5-氯-4-(吡唑并[1,5-a]吡啶-3-基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑啉-7-基)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺(18.7mg,2.2％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):1.95-2.00(m,1H),2.02-2.19(m,7H),2.41(s,3H),3.08(d,J＝4.8Hz,2H),3.80-3.91(m,2H),4.03-4.22(m,2H),4.50-4.57(m,1H),6.30-6.34(m,1H),6.77-6.83(m,1H),7.13-7.15(m,1H),7.52-7.54(m,2H),7.80(d,J＝5.2Hz,1H),8.04(s,1H),8.18(d,J＝9.2Hz,1H),8.37(s,1H),8.87-8.95(m,3H),10.36(s,1H)。针对C30H31ClN10O的[M+H]MS计算值，583.2；实测值，583.2。
实施例36：(R)-N-(1-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)- N-甲基丙烯酰胺的合成
Figure BDA0003549429610001291
步骤1：(R)-叔丁基(1-(6-氨基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001292
在微波条件下在160℃下将1-氯异喹啉-6-胺(1.5g,8.4mmol)、(R)-叔丁基吡咯烷-3-基氨基甲酸酯(3.0g,16.8mmol)和K2CO3(1.7g,12.6mmol)在DMSO(15mL)中的溶液搅拌5小时。冷却反应混合物，用水(100mL)稀释，并用EA(50mL*2)萃取。将合并的萃取物用水(100mL*2)和盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并通过FCC(PE/EA＝1:1)纯化得到(R)-叔丁基(1-(6-氨基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.4g,39％)，为黄色固体。针对C18H24N4O2的[M+H]计算值，329.2；实测值，329.2。
步骤2：(R)-叔丁基(1-(6-(甲基氨基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001301
在冰浴中向(R)-叔丁基(1-(6-氨基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(656mg,2.00mmol)在甲醇(40mL)中的混合物中，加入HCHO(649mg,在H2O为37％，4.00mmol)。搅拌30min后，在0℃下将NaBH3CN(992mg,15.74mmol)加入混合物中。然后将反应混合物在60℃搅拌15h。将反应混合物浓缩。向残余物中加入DCM(20mL)，并用0.5N HCl(10mL)洗涤，然后经Na2SO4干燥有机萃取物，过滤并浓缩。通过FCC(DCM/甲醇＝10:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(6-(甲基氨基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(439mg,59％)，为白色固体。针对C19H26N4O2的[M+H]计算值，343.2；实测值，343.2。
步骤3：(R)-叔丁基(1-(6-(N-甲基丙烯酰胺基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001302
在0℃向(R)-叔丁基(1-(6-(甲基氨基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(430mg,1.25mmol)和DIEA(484mg,3.75mmol)在DCM(20ml)中的溶液中加入丙烯酰氯(124mg,1.38mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3h。浓缩混合物并通过FCC(PE/EA＝1:1)纯化，得到(R)-叔丁基(1-(6-(N-甲基丙烯酰胺基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(300mg,61％)，为黄色固体。针对C22H28N4O3的[M+H]计算值，397.2；实测值，397.2。
步骤4：(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)-N-甲基丙烯酰胺TFA盐
Figure BDA0003549429610001311
将(R)-叔丁基(1-(6-(N-甲基丙烯酰胺基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(300mg,0.76mmol)在TFA/DCM(5mL/10mL)中的溶液在室温下搅拌2h。将混合物浓缩得到(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)-N-甲基丙烯酰胺的TFA盐(224mg,100％)，为黄色固体。针对C17H20N4O的[M+H]计算值，297.2；实测值，297.2。
步骤5：(R)-N-(1-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)-N-甲基丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001312
将(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)-N-甲基丙烯酰胺的TFA盐(224mg,0.57mmol)、2-氯嘧啶-5-甲腈(158mg,1.13mmol)和DIEA(294mg,2.28mmol)在DMSO(10ml)中的溶液在30℃搅拌2h。将混合物用水(50mL)稀释，并用EA(50mL*2)萃取。将合并的萃取物用水(100mL*2)和盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(1-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)-N-甲基丙烯酰胺(220.4mg,73％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.07-2.09(m,1H),2.25-2.27(m,1H),3.29(s,3H),3.74-3.78(m,1H),3.85-3.87(m,1H),3.97-4.00(m,1H),4.09-4.13(m,1H),4.54-4.56(m,1H),5.58-5.61(m,1H),6.15-6.19(m,2H),7.05(d,J＝6.0Hz,1H),7.37(dd,J＝2.0,8.8Hz,1H),7.65(d,J＝2.0Hz,1H),7.96(d,J＝5.6Hz,1H),8.28(d,J＝9.2Hz,1H),8.66-8.69(m,2H),8.76-8.77(s,1H)。针对C22H21N7O的[M+H]计算值，400.1；实测值，400.1。
实施例37：(R)-N-(1-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-3-吗啉代异喹 啉-6-基)丙烯酰胺的合成
Figure BDA0003549429610001321
步骤1：6-硝基异喹啉-1,3(2H,4H)-二酮
Figure BDA0003549429610001322
将2-(羧甲基)-4-硝基苯甲酸(45.0g,200.0mmol)与CH3COOH(500mL)的混合物在110℃下搅拌0.5h。然后将反应混合物冷却到90℃，加入尿素(71.0g,1.42mol)。将反应混合物在110℃下搅拌4h。将溶液冷却到室温，加入H2O(500mL)。将混合物在室温下搅拌0.5h，过滤并浓缩得到6-硝基异喹啉-1,3(2H,4H)-二酮(23.0g,56％)，为棕色固体。
步骤2：1,3-二氯-6-硝基异喹啉
Figure BDA0003549429610001331
将6-硝基异喹啉-1,3(2H,4H)-二酮(14.0g,67.9mmol)和苯基膦酰二氯(200mL)的混合物在140℃下搅拌4h。向溶液中加入水(200mL)，并用EA(200mL*2)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。经柱(PE:EA＝10:1)纯化残余物得到1,3-二氯-6-硝基异喹啉(19.0g,70％)，为黄色固体。针对C9H4Cl2N2O2的[M+H]计算值，242.9；实测值，242.9。
步骤3：(R)-叔丁基(1-(3-氯-6-硝基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001332
在室温向1,3-二氯-6-硝基异喹啉(5.0g,20.6mmol)和(R)-叔丁基吡咯烷-3-基氨基甲酸酯(3.5g,20.6mmol)在DMF(50mL)中的溶液中加入TEA(2.1g,20.6mmol)。将混合物在微波下在140℃搅拌2h。向残余物加入水(100mL)，并用EA(100mL*2)萃取。将合并的有机层用水(100mL*2)和盐水(100mL*2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。经柱(PE:EA＝5:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(3-氯-6-硝基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(4.8g,60％)，为棕色固体。针对C18H21ClN4O4的[M+H]计算值，393.1；实测值，393.1。
步骤4：(R)-叔丁基(1-(3-吗啉代-6-硝基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001341
在微波下在155℃下将(R)-叔丁基(1-(3-氯-6-硝基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.0g,2.5mmol)和吗啉(7.0mL)在DMSO(7.0mL)中的溶液搅拌3h。用水(10mL)稀释反应混合物，并用EA(10mL*2)萃取。将合并的萃取物用水(20mL*2)和盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。经二氧化硅柱(PE:EA＝2:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(3-吗啉代-6-硝基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.1g,97％)，为棕色固体。针对C22H29N5O5的[M+H]计算值，444.2；实测值，444.2。
步骤5：(R)-叔丁基(1-(6-氨基-3-吗啉代异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001342
在室温下向(R)-叔丁基(1-(3-吗啉代-6-硝基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.1g,2.48mmol)与NH4Cl(1.3g,2.48mmol)在乙醇(20mL)和H2O(3mL)中的溶液加入铁屑(1.4g,2.48mmol)。在80℃搅拌反应混合物4h。然后将反应混合物冷却至室温，过滤并在真空中浓缩。经柱(PE:EA＝1:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(6-氨基-3-吗啉代异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(400mg,39％)，为灰色固体。针对C22H31N5O3的[M+H]计算值，414.2；实测值，414.2。
步骤6：(R)-叔丁基(1-(6-丙烯酰胺基-3-吗啉代异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001351
在0℃将(R)-叔丁基(1-(6-氨基-3-吗啉代异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(250mg,0.6mmol)和DIEA(234mg,1.8mmol)在DCM(15mL)中的溶液搅拌10分钟。然后缓慢加入丙烯酰氯(55mg,0.6mmol)。将混合物在室温下搅拌0.5h。用水(10mL)稀释混合物，并用EA(10mL*2)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。经柱(PE:EA＝1:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(6-丙烯酰胺基-3-吗啉代异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(120mg,42％)，为黄色固体。针对C25H33N5O4的[M+H]计算值，468.3；实测值，468.3。
步骤7：(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)-3-吗啉代异喹啉-6-基)丙烯酰胺TFA盐
Figure BDA0003549429610001361
将(R)-叔丁基(1-(6-丙烯酰胺基-3-吗啉代异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(120mg,0.26mmol)和TFA(5mL)在DCM(5mL)中的溶液在室温下搅拌1h。将反应混合物真空浓缩，得到(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)-3-吗啉代异喹啉-6-基)丙烯酰胺的TFA盐(80mg,85％)，为棕色油状物。针对C20H25N5O2的[M+H]计算值，368.2；实测值，368.2。
步骤8：(R)-N-(1-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-3-吗啉代异喹啉-6-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001362
在室温向(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)-3-吗啉代异喹啉-6-基)丙烯酰胺(80mg,0.22mmol)和2-氯嘧啶-5-甲腈(31mg,0.22mmol)在DMSO(3mL)中的溶液中加入DIEA(141mg,1.09mmol)。将混合物在40℃下搅拌2h。向混合物加入水(10mL)，并用EA(10mL*2)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL*2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过制备型HPLC(0.2％HCOOH)纯化残余物得到(R)-N-(1-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-3-吗啉代异喹啉-6-基)丙烯酰胺的HCOOH盐(14.3mg,14％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.04-2.06(m,1H),2.22-2.24(m,1H),3.48-3.49(m,4H),3.69-3.74(m,5H),3.80-4.05(m,3H),4.51-4.53(m,1H),5.78(dd,J＝2.0,11.6Hz,1H),6.17(s,1H),6.26-6.30(m,1H),6.44-6.51(m,1H),7.19(dd,J＝9.6,11.2Hz,1H),7.97-7.99(m,2H),8.64-8.69(m,2H),8.76(d,J＝2.4Hz,1H),10.23(s,1H)。针对C25H26N8O2的[M+H]计算值，471.3；实测值，471.3。
实施例38：(R,E)-N-(4-(3-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷- 1-基)-2-甲基喹唑啉-7-基)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺的合成
Figure BDA0003549429610001371
步骤1：(R)-叔丁基(1-(2-甲基-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001372
在0℃下向(R)-叔丁基(1-(2-氯-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(12.0g,30.5mmol)和K2CO3(12.7g,91.5mmol)在1,4-二噁烷(100mL)中的溶液加入2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼杂环己烷(13.0g,45.8mmol)。然后在室温在N2下加入Pd(dppf)Cl2DCM(2.5g,3.0mmol)。将混合物在140℃下在密封管中搅拌6h。然后将反应混合物冷却到室温，过滤并浓缩。经柱(PE/EA＝1:1)纯化残余物得到((R)-叔丁基(1-(2-甲基-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(5.5g,48％)，为黄色固体。针对C18H23N5O4的[M+H]计算值374.1；实测值，374.1。
步骤2：(R)-叔丁基(1-(7-氨基-2-甲基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001381
将(R)-叔丁基(1-(2-甲基-7-硝基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(3.0g,8.0mmol)和Pd/C(1.6g,10％)在乙醇(40ml)中的溶液在室温在H2下搅拌3h。将混合物过滤。将有机层真空浓缩，得到粗的(R)-叔丁基(1-(7-氨基-2-甲基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(2.7g)，为黄色固体。针对C18H25N5O4的[M+H]计算值344.2；实测值，344.2。
步骤3：(R,E)-叔丁基(1-(7-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺基)-2-甲基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001382
在冰浴中向DIEA(12.0mL，67.6mmol)和(R)-叔丁基(1-(7-氨基-2-甲基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(5.8g,16.9mmol)在DCM(100mL)中的溶液中加入(E)-4-溴代丁-2-烯酰氯(5.1g,31.4mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h，然后加入二甲胺(37.8mL，在THF中为2.0M，67.6mmol)，将反应混合物在室温下搅拌2h。将混合物用H2O(50mL)稀释，并用DCM(50mL*2)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，并经柱(DCM:甲醇＝10:1)纯化得到(R,E)-叔丁基(1-(7-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺基)-2-甲基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(2.5g,33％)，为黑色固体。针对C24H34N6O3的[M+H]计算值，455.3；实测值，455.3。
步骤4：(R,E)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑啉-7-基)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺
Figure BDA0003549429610001391
将(R,E)-叔丁基(1-(7-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺基)-2-甲基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(800mg,1.76mmol)和TFA(3mL)在DCM(6mL)中的溶液在室温下搅拌2h。将混合物浓缩得到(R,E)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑啉-7-基)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺的TFA盐(1.0g,100％)，为灰色固体。针对C19H26N6O的[M+H]计算值，355.2；实测值，355.2。
步骤5：(R,E)-叔丁基3-(5-氯-2-((1-(7-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺基)-2-甲基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-1-甲酸酯
Figure BDA0003549429610001392
在室温向(R,E)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑啉-7-基-7-基)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺(520mg，1.46mmol)和3-(2,5-二氯嘧啶-4-基)-1H-吲哚-1-甲酸叔丁酯(531mg，1.46mmol)在DMA(6mL)中的溶液中加入DIEA(1.56mL，8.79mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌10h。将反应混合物冷却并加水(10mL)，过滤并浓缩得到(R,E)-叔丁基3-(5-氯-2-((1-(7-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺基)-2-甲基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基)嘧啶-4-基)-1H-吲哚-1-甲酸酯(600mg,60％)，为黄色固体。针对C36H40ClN9O3的[M+H]计算值，682.3；实测值，682.3。
步骤6：(R,E)-N-(4-(3-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑啉-7-基)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺HCOOH盐
Figure BDA0003549429610001401
将(R,E)-叔丁基3-(5-氯-2-((1-(7-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺基)-2-甲基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基)-嘧啶-4-基)-1H-吲哚-1-甲酸酯(600mg,0.88mmol)和TFA(1mL)在DCM(3mL)中的溶液在室温搅拌1天。将反应混合物在真空中浓缩。将残余物溶于EA(10mL)中，用DIEA调节pH至9，真空浓缩。通过制备型HPLC(0.1％HCOOH)纯化残余物得到(R,E)-N-(4-(3-((5-氯-4-(1H-吲哚-3-基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑啉-7-基)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺的HCOOH盐(2.0mg,0.4％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ1.94-2.00(m,2H),2.33(s,6H),2.41(s,3H),3.09-3.11(m,2H),3.92-4.29(m,4H),4.55-4.60(m,1H),6.30-6.34(m,1H),6.76-6.83(m,1H),7.10-7.22(m,2H),7.48-7.64(m,2H),7.65-7.67(m,1H),8.04(s,1H),8.17-8.19(m,3H),8.31(m,1H),8.47(s,1H),10.34(m,1H),11.83-11.85(m,1H)。针对C31H32ClN9O的[M+H]计算值，582.2；实测值，582.2。
实施例39：(R)-N-(4-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑 啉-7-基)-N-甲基丙烯酰胺的合成
Figure BDA0003549429610001411
步骤1：(R)-叔丁基(1-(2-甲基-7-(甲基氨基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001412
在室温下向((R)-叔丁基(1-(7-氨基-2-甲基喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(656mg,2.00mmol)在甲醇(40mL)中的混合物中加入HCHO(699mg,在H2O中为37％，23.3mmol)。搅拌30分钟后，在0℃下将NaCNBH4(2.89g,46.6mmol)加入混合物中。将反应混合物在60℃下搅拌16h。浓缩混合物。向残余物中加入DCM(20mL)，用0.5NHCl(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过FCC(DCM/甲醇＝10:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(2-甲基-7-(甲基氨基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(500mg,25％)，为灰白色固体。针对C19H27N5O2的[M+H]计算值，358.2；实测值，358.2。
步骤2：(R)-叔丁基(1-(2-甲基-7-(N-甲基丙烯酰胺基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001421
在0℃下向(R)-叔丁基(1-(2-甲基-7-(甲基氨基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(600mg,1.685mmol)和DIEA(0.83mL，3.0mmol)在DCM(50mL)中的溶液中加入丙烯酰氯(0.14mg,1.84mmol)。将反应混合物在-50℃下搅拌30分钟。浓缩混合物并通过FCC(DCM/甲醇＝20:1)纯化得到(R)-叔丁基(1-(2-甲基-7-(N-甲基丙烯酰胺基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(200mg,28.9％)，为灰白色固体。针对C22H29N5O3的[M+H]计算值，412.2；实测值，412.2。
步骤3：(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑啉-7-基)-N-甲基丙烯酰胺TFA盐
Figure BDA0003549429610001422
将(R)-叔丁基(1-(2-甲基-7-(N-甲基丙烯酰胺基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(200mg,0.48mmol)在TFA/DCM(1mL/10mL)中的溶液在室温下搅拌3h。将混合物浓缩得到(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑啉-7-基)-N-甲基丙烯酰胺的TFA盐(151mg,100％)，为黄色固体。针对C17H21N5O的[M+H]计算值，312.2；实测值，312.2。
步骤4：(R)-N-(4-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑啉-7-基)-N-甲基丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001431
在30℃下将(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑啉-7-基)-N-甲基丙烯酰胺的TFA盐(140mg,0.45mmol)、2-氯嘧啶-5-甲腈(93mg,0.67mmol)和DIEA(0.37mL，2.25mmol)在DMSO(5mL)中的溶液搅拌1h。将混合物用水(10mL)稀释，并用EA(10mL*2)萃取。将合并的萃取物用水(10mL*2)和盐水(10mL)洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到产物(R)-N-(4-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑啉-7-基)-N-甲基丙烯酰胺(85.2mg,45.8％)，为灰白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.12-2.15(m,1H),2.28-2.31(m,1H),2.45(s,3H),3.29-3.34(m,3H),3.86-3.89(m,1H),3.96-3.98(m,1H),4.08-4.11(m,1H),4.19-4.23(m,1H),4.58-4.61(m,1H),5.60-5.63(m,1H),6.18-6.20(m,2H),7.26(dd,J＝2.0,8.0Hz,1H),7.46(d,J＝2.0Hz,1H),8.25(d,J＝9.2Hz,1H),8.67-8.70(m,2H),8.79(s,1H)。针对C22H22N8O的[M+H]计算值，415.1；实测值，415.1。
实施例40：(R)-N-(4-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑啉- 7-基)-N-甲基丙烯酰胺的合成
Figure BDA0003549429610001432
在微波中在80℃下将(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑啉-7-基)-N-甲基丙烯酰胺的TFA盐(220mg,0.70mmol)、5-溴-2-氯嘧啶(218mg,1.13mmol)和DIEA(0.18mL,1.10mmol)在DMSO(5mL)中的溶液搅拌2h。将混合物用水(20mL)稀释，并用EA(20mL*2)萃取。将合并的萃取物用水(50mL*2)和盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(4-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-甲基喹唑啉-7-基)-N-甲基丙烯酰胺(47.3mg,14.2％)，为灰白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.07-2.09(m,1H),2.10-2.12(m,1H),2.46(s,3H),3.26-3.324(m,3H),3.84-3.88(m,1H),3.96-3.98(m,1H),4.09-4.11(m,1H),4.18-4.21(m,1H),4.45-4.46(m,1H),5.61-5.64(m,1H),6.19-6.21(m,2H),7.33(dd,J＝2.0,8.0Hz,1H),7.45(d,J＝2.4Hz,1H)7.87(d,J＝8.0Hz,1H),8.27(d,J＝8.0Hz,1H),8.43(s,2H)。针对C21H22BrN7O的[M+H]计算值，468.1；实测值，468.1。
实施例41：(R)-N-(4-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-(4-甲基哌 嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-N-甲基丙烯酰胺的合成
Figure BDA0003549429610001441
步骤1：(R)-叔丁基(1-(7-(甲基氨基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001451
将(R)-叔丁基(1-(7-氨基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(6.0g,14.0mmol)和(HCHO)n(1.7g,21.0mmol)在甲醇(300mL)中的溶液在室温下搅拌1h。然后加入NaBH3CN(2.7g,42.0mmol)。将混合物在40℃下搅拌过夜。将反应混合物除去溶剂。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(7-(甲基氨基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.3g,21％)，为黄色固体。针对C23H35N7O2的[M+H]计算值，442.3；实测值，442.3。
步骤2：(R)-4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-N-甲基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-7-胺TFA盐
Figure BDA0003549429610001452
将(R)-叔丁基(1-(7-(甲基氨基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(100mg,0.23mmol)和TFA(0.5mL)在DCM(5mL)中的溶液在室温下搅拌2h。将混合物浓缩得到(R)-4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-N-甲基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-7-胺的TFA盐(77mg)，为黄色油状物。针对C18H27N7的[M+H]计算值，342.2；实测值，342.2。
步骤3：(R)-2–((1-(7-(甲基氨基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基)嘧啶-5-甲腈
Figure BDA0003549429610001461
将(R)-4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-N-甲基-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-7-胺(77mg,0.22mmol)和2-氯嘧啶-5-甲腈(32mg,0.22mmol)、DIEA(117mg,0.99mmol)在DMSO(5mL)中的溶液在30℃下搅拌2h。将混合物用水(10mL)稀释，并用DCM(10mL*2)萃取。将合并的有机层用H2O(10mL*2)和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-2-((1-(7-(甲基氨基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基)嘧啶-5-甲腈(60mg,60％)，为黄色固体。针对C23H28N10的[M+H]计算值，445.3；实测值，445.3。
步骤4：(R)-N-(4-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-N-甲基丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001462
将(R)-2-((1-(7-(甲基氨基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基)嘧啶-5-甲腈(250mg,0.56mmol)和DIEA(218mg,1.69mmol)在DCM(20mL)中的溶液在0℃下搅拌10分钟。然后缓慢加入丙烯酰氯(77mg,0.85mmol)。将混合物在室温下搅拌1h。浓缩残余物并通过制备型HPLC纯化得到(R)-N-(4-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-N-甲基丙烯酰胺(119mg,43％)，为黄色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.07-2.11(m,1H),2.20-2.33(m,8H),3.29(s,3H),3.75-4.17(m,8H),4.57-4.59(m,1H),5.59(t,J＝6.4Hz,1H),6.17-6.18(m,2H),6.92(dd,J＝1.6,8.8Hz,1H),7.11(d,J＝2.0Hz,1H),8.04(d,J＝8.8Hz,1H),8.66-8.70(m,2H),8.78(s,1H)。针对C26H30N10O的[M+H]计算值，499.2；实测值，499.2。
实施例42：(R)-N-(1-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-3-(1-甲基-1, 2,3,6-四氢吡啶-4-基)异喹啉-6-基)-N-甲基丙烯酰胺的合成
Figure BDA0003549429610001471
步骤1：(R)-叔丁基(1-(3-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-6-硝基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001472
在N2下向(R)-叔丁基(1-(3-氯-6-硝基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(2.5g，6.4mmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶(1.6g，7.0mmol)在二噁烷(50mL)和H2O(5mL)中的溶液中加入Pd(dppf)Cl2(466mg,0.64mmol)和Cs2CO3(4.15g,12.7mmol)。将混合物在105℃下搅拌5h。对残余物进行过滤并浓缩。经柱(PE:EA＝10:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(3-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-6-硝基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.8g,62％)，为棕色固体。针对C24H31N5O4的[M+H]计算值，454.2；实测值，454.2。
步骤2：(R)-叔丁基(1-(6-氨基-3-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001481
在室温下向(R)-叔丁基(1-(3-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-6-硝基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.8g,3.97mmol)和NH4Cl(2.2g,3.97mmol)在乙醇(100mL)和H2O(10mL)中的溶液中加入铁屑(2.2g,3.97mmol)。将混合物在80℃下搅拌4h。将反应混合物进行过滤并浓缩。经柱(DCM:甲醇＝10:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(6-氨基-3-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.6g,85％)，为棕色固体。针对C24H33N5O2的[M+H]计算值，424.3；实测值，424.3。
步骤3：(R)-叔丁基(1-(3-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-6-(甲基氨基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001482
将(R)-叔丁基(1-(6-氨基-3-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.6g,3.78mmol)和HCHO(210mg,在水中为30％，7.09mmol)在甲醇(120mL)中的溶液在室温下搅拌1h。然后加入NaBH3CN(894mg,14.2mmol)。将混合物在40℃下搅拌过夜。除去反应混合物的溶剂。经二氧化硅柱(PE:EA＝10:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(3-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-6-(甲基氨基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.0g,61％)，为棕色固体。针对C25H35N5O2的[M+H]计算值，438.3；实测值，438.3。
步骤4：(R)-叔丁基(1-(3-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-6-(N-甲基丙烯酰胺基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001491
将(R)-叔丁基(1-(3-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-6-(甲基氨基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(900mg,2.06mmol)和DIEA(797mg,6.18mmol)在DCM(50mL)中的溶液在0℃下搅拌10min。然后在0℃下缓慢加入丙烯酰氯(185mg,2.06mmol)。将混合物在室温下搅拌1h。浓缩残余物并经柱(DCM:甲醇＝10:1)纯化得到(R)-叔丁基(1-(3-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-6-(N-甲基丙烯酰胺基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(600mg,59％)，为棕色固体。针对C28H37N5O3的[M+H]计算值，492.3；实测值，492.3。
步骤5：(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)-3-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)异喹啉-6-基)-N-甲基丙烯酰胺TFA盐
Figure BDA0003549429610001501
将(R)-叔丁基(1-(3-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-6-(N-甲基丙烯酰胺基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(600mg,1.22mmol)和TFA(100mL)在DCM(100mL)中的溶液在室温下搅拌1h。将混合物浓缩获得(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)-3-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)异喹啉-6-基)-N-甲基丙烯酰胺的TFA盐(450mg,94％)，为棕色油状物。针对C23H29N5O2的[M+H]计算值，392.2；实测值，392.2。
步骤6：(R)-N-(1-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-3-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)异喹啉-6-基)-N-甲基丙烯酰胺HCOOH盐
Figure BDA0003549429610001502
将(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)-3-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)异喹啉-6-基)-N-甲基丙烯酰胺(150mg，0.38mmol)和2-氯嘧啶-5-甲腈(54mg，0.38mmol)和DIEA(247mg，1.92mmol)在DMSO(5mL)中的溶液在40℃下搅拌1h。用水(15mL)稀释混合物，并用DCM(15mL*2)萃取。将合并的有机层用H2O(15mL*2)和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过制备型HPLC(0.2％HCOOH)纯化残余物得到(R)-N-(1-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-3-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)异喹啉-6-基)-N-甲基丙烯酰胺的HCOOH盐(47.3mg,25％)，为棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.08-2.11(m,1H),2.20-2.24(m,1H),2.40(s,3H),2.60-2.73(m,4H),3.22-3.32(m,5H),3.80-3.84(m,1H),3.88-3.93(m,1H),3.99-4.06(m,1H),4.15-4.18(m,1H),4.52-4.60(m,1H),5.60-5.66(m,1H),6.15-6.23(m,2H),6.85(s,1H),7.11(s,1H),7.28-7.33(m,1H),7.64(s,1H),8.15(s,1H),8.27-8.29(m,1H),8.63-8.80(m,3H)。针对C28H30N8O的[M+H]计算值，495.3；实测值，495.3。
实施例43：(R)-N-(4-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-(4-甲基哌嗪- 1-基)喹唑啉-7-基)-N-甲基丙烯酰胺的合成
Figure BDA0003549429610001511
步骤1：(R)-叔丁基(1-(7-(N-甲基丙烯酰胺基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001512
将(R)-叔丁基(1-(7-(甲基氨基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(400mg,0.91mmol)和DIEA(235mg,1.81mmol)在DCM(15mL)中的溶液在0℃下搅拌10分钟。然后缓慢加入丙烯酰氯(100mg,1.09mmol)。将混合物在0℃-室温下搅拌过夜。向反应混合物加入水(20mL)，并用EA(20mL*2)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL*2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩得到(R)-叔丁基(1-(7-(N-甲基丙烯酰胺基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(440mg,98％)，为黄色固体。针对C26H37N7O3的[M+H]计算值，496.3；实测值，496.3。
步骤2：(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-N-甲基丙烯酰胺TFA盐
Figure BDA0003549429610001521
将(R)-叔丁基(1-(7-(N-甲基丙烯酰胺基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-4-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(440mg,0.69mmol)和TFA(2mL)在DCM(10mL)中的溶液在室温下搅拌2h。将混合物浓缩得到(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-N-甲基丙烯酰胺的粗TFA盐(440mg)，为黄色油状物。针对C21H29N7O的[M+H]计算值，395.2；实测值，395.2。
步骤3：(R)-N-(4-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-N-甲基丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001522
在微波下在70℃下将(R)-N-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-N-甲基丙烯酰胺(200mg,0.51mmol)和5-溴-2-氯嘧啶(147mg,0.76mmol)、DIEA(130mg,1.02mmol)在DMSO(5mL)中的溶液搅拌2h。用水(15mL)稀释混合物，并用EA(15mL*2)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(4-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-2-(4-甲基哌嗪-1-基)喹唑啉-7-基)-N-甲基丙烯酰胺(15.1mg,5.4％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CD3OD):δ2.07-2.21(m,1H),2.32-2.40(m,4H),2.51-2.53(m,4H),3.40(s,3H),3.87-3.91(m,5H),3.99-4.05(m,1H),4.10-4.14(m,1H),4.23-4.27(m,1H),4.57-4.59(m,1H),5.62(dd,J＝3.2,9.6Hz,1H),6.26-6.34(m,2H),6.98(dd,J＝2.0,8.4Hz,1H),7.24(d,J＝2.4Hz,1H),8.16(d,J＝9.2Hz,1H),8.36(s,2H)。针对C25H30BrN9O的[M+H]计算值，552.2；实测值，552.2。
实施例44：(R)-N-(1-(3-((5-乙炔基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6- 基)-N-甲基丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001541
步骤1：6-硝基异喹啉-1,3(2H,4H)-二酮
Figure BDA0003549429610001542
将2-(羧甲基)-4-硝基苯甲酸(45.0g,200.0mmol)与CH3COOH(500mL)的混合物在110℃下搅拌0.5h。然后将反应混合物冷却到90℃，加入尿素(71.0g,1.42mol)。将反应混合物在110℃下搅拌4h。将溶液冷却到室温并加入H2O(500mL)。将混合物在室温下搅拌0.5h，过滤并浓缩得到6-硝基异喹啉-1,3(2H,4H)-二酮(23.0g,56％)，为棕色固体。
步骤2：1,3-二氯-6-硝基异喹啉
Figure BDA0003549429610001551
将6-硝基异喹啉-1,3(2H,4H)-二酮(14.0g,67.9mmol)和苯基膦酰二氯(200mL)的混合物在140℃下搅拌4h。冷却反应混合物，加入水(200mL)，并用EA(200mL*2)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。经柱(PE:EA＝10:1)纯化残余物得到1,3-二氯-6-硝基异喹啉(19.0g,70％)，为黄色固体。针对C9H4Cl2N2O2的[M+H]计算值，242.9；实测值，242.9。
步骤3：(R)-叔丁基(1-(3-氯-6-硝基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001552
在室温下向1,3-二氯-6-硝基异喹啉(5.0g,20.6mmol)和(R)-叔丁基吡咯烷-3-基氨基甲酸酯(3.5g,20.6mmol)在DMF(50mL)中的溶液中加入TEA(2.1g,20.6mmol)。将反应混合物在微波下在140℃下搅拌2h。冷却反应混合物，加入水(100mL)，并用EA(100mL*2)萃取。将合并的有机层用水(100mL*2)和盐水(100mL2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。经柱(PE:EA＝5:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(3-氯-6-硝基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(4.8g,60％)，为棕色固体。针对C18H21ClN4O4的[M+H]计算值，393.1；实测值，393.1。
步骤4：(R)-叔丁基(1-(6-氨基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001561
在室温向(R)-叔丁基(1-(3-氯-6-硝基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(5.0g,12.8mmol)在乙醇(150mL)中的溶液中加入Pd/C(500mg,5％)。在氢气气氛下在室温下搅拌反应混合物过夜。对反应混合物进行过滤。将滤液浓缩得到粗产物(3.8g,90％)，为黄色固体。针对C18H24N4O2的[M+H]MS计算值，329.4；实测值：329.4。
步骤5：(R)-叔丁基(1-(6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001562
在室温下向(R)-叔丁基(1-(6-氨基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(330mg,1.0mmol)在DCE(50mL)中的溶液中加入2,4-二甲氧基苯甲醛(184mg,1.1mmol)和NaBH(OAc)3(640mg,3.0mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜。用碳酸氢钠水溶液(50mL)淬灭残余物，并用EA(20mL*2)萃取。将合并的有机层用水(20mL*2)和盐水(20mL*2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。经柱(PE:EA＝1:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(200mg,42％)，为黄色固体。针对C27H34N4O4的[M+H]计算值，479.2；实测值，479.2。
步骤6：(R)-叔丁基(1-(6-((2,4-二甲氧基苄基)(甲基)氨基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001571
在室温下向(R)-叔丁基(1-(6-((2,4-二甲氧基苄基)氨基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(200mg,0.42mmol)在甲醇(5mL)中的溶液中加入乙醛(720mg,8.3mmol)和NaBHCN(105mg,1.7mmol)。将反应混合物回流过夜。将反应混合物冷却，加水(20mL)淬灭，用EA(10mL*2)萃取。将合并的有机层用水(10ml*2)和盐水(10ml*2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。用C18柱(ACN/H2O＝40％-90％)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(6-((2,4-二甲氧基苄基)(甲基)氨基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(100mg,50％)，为黄色固体。针对C28H36N4O4的[M+H]计算值，493.3；实测值，493.3。
步骤7：(R)-1-(6-(甲基氨基)萘-1-基)吡咯烷-3-胺
Figure BDA0003549429610001572
向(R)-叔丁基(1-(6-((2,4-二甲氧基苄基)(甲基)氨基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(200mg,0.41mmol)在DCM(5mL)中的溶液中加入TFA(1mL)，将混合物在室温搅拌2h。然后除去反应混合物的溶剂，得到(R)-1-(6-(甲基氨基)萘-1-基)吡咯烷-3-胺的粗品(200mg)，为黄色油状物。
步骤8：(R)-N-甲基-1-(3-((5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-胺
Figure BDA0003549429610001581
在室温下将粗品(R)-1-(6-(甲基氨基)萘-1-基)吡咯烷-3-胺(200mg)在DMSO(5mL)中溶解。并加入DIEA(210mg,1.6mmol)。在室温下搅拌混合物10min。然后加入2-氯-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)嘧啶(85mg,0.41mmol)。将混合物在40℃下搅拌过夜。向反应混合物加入水(20mL)，并用EA(10mL*2)萃取。将合并的有机层用水(10ml*2)和盐水(10ml*2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。经柱(DCM:甲醇＝20:1)纯化残余物得到(R)-N-甲基-1-(3-((5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-胺(140mg,82％)，为黄色油状物。针对C23H28N6Si的[M+H]计算值，417.2；实测值，417.2。
步骤9：(R)-N-甲基-N-(1-(3-((5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001582
在室温下向(R)-N-甲基-1-(3-((5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-胺(140mg,0.34mmol)在DCM(5mL)中的溶液中加入DIEA(90mg,0.68mmol)。然后在冰浴中滴加丙烯酰氯(30mg,0.34mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h。用氯化铵水溶液(20mL)淬灭混合物，并用EA(10mL*2)萃取。将合并的有机层用水(10ml*2)和盐水(10ml*2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到(R)-N-甲基-N-(1-(3-((5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺粗品(100mg,63％)，为黄色固体。针对C26H30N6OSi的[M+H]计算值，471.2；实测值，471.2。
步骤10：(R)-N-(1-(3-((5-乙炔基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)-N-甲基丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001591
在冰浴中向(R)-N-甲基-N-(1-(3-((5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺(100mg,0.21mmol)在甲醇(5mL)中的溶液中加入K2CO3(30mg，0.21mmol)。将反应混合物在室温下搅拌10min。向反应混合物加入H2O(20mL)，并用EA(10mL*2)萃取。将合并的有机层用水(10mL*2)和盐水(10mL*2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩得到残余物，将残余物用C18柱(ACN/H2O＝10％-80％)进行纯化，得到(R)-N-(1-(3-((5-乙炔基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)-N-甲基丙烯酰胺(20.2mg,23％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CD3OD):δ2.18-2.21(m,1H),2.37-2.40(m,1H),3.45(s,3H),3.64(s,1H),3.80-3.84(m,1H),3.94-3.97(m,1H),4.05-4.08(m,1H),4.19-4.24(m,1H),4.62-4.66(m,1H),6.63(dd,J＝2.0,10.4Hz,1H),6.31-6.36(m,2H),7.08(d,J＝6.0Hz,1H),7.38(dd,J＝2.4,8.8Hz,1H),7.63(d,J＝2.4Hz,1H),7.95(d,J＝5.6Hz,1H),8.40-8.43(m,3H)。针对C23H22N6O的[M+H]MS计算值，399.1；实测值：399.1。
实施例45：(R)-N-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-1-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯 烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺甲酸盐
Figure BDA0003549429610001601
步骤1：6-硝基-2,3-二氢酞嗪-1,4-二酮
Figure BDA0003549429610001602
在室温下向5-硝基异吲哚啉-1,3-二酮(50.0g,0.26mol)在乙醇(500mL)中的溶液中加入水合肼(52.0g,1.04mol)。然后将反应混合物回流5h。冷却至室温后，将反应混合物倒入水(300mL)中，滤出固体并用水(50mL*3)洗涤。将滤饼干燥得到6-硝基-2,3-二氢酞嗪-1,4-二酮(43.0g,80％)，为黄色固体。针对C8H5N3O4的[M+H]MS计算值，208.0；实测值：208.0。
步骤2：1,4-二氯-6-硝基酞嗪
Figure BDA0003549429610001603
在室温下向6-硝基-2,3-二氢酞嗪-1,4-二酮(5.0g,24.1mmol)在POCl3(40mL)中的溶液中加入DIEA(6.23g,48.3mmol)，将反应混合物回流3h。将反应混合物冷却到室温并浓缩。将残余物溶于DCM(100mL)中，用饱和NaHCO3(50ml*2)和盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到1,4-二氯-6-硝基酞嗪(5.0g,85％)，为橙色固体。针对C8H3Cl2N3O2的[M+H]MS计算值，243.9；实测值：243.9。
步骤3：4-(氮杂环丁烷-1-基)-1-氯-6-硝基酞嗪
Figure BDA0003549429610001611
在室温下向1,4-二氯-6-硝基酞嗪(5.0g,0.024mol)在DMSO(50mL)中的溶液中加入氮杂环丁烷盐酸盐(2.2g,0.024mol)和K2CO3(10.0g,0.072mol)。然后将反应混合物在80℃下搅拌12h。将反应液冷却至室温，用水(150mL)稀释，并用EA(80mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。经硅胶柱色谱法(PE:EA＝2:1)纯化残余物得到4-(氮杂环丁烷-1-基)-1-氯-6-硝基酞嗪(0.9g,16.6％)，为红色固体。针对C11H9ClN4O2的[M+H]MS计算值，265.1；实测值：265.1。
步骤4：(R)-叔丁基(1-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001612
在室温在N2气氛下，向4-(氮杂环丁烷-1-基)-1-氯-6-硝基酞嗪(1.3g,4.9mmol)和(R)-叔丁基吡咯烷-3-基氨基甲酸酯(3.67g,19.7mmol)在甲苯(50mL)中的溶液中加入BINAP(123mg,0.2mmol)、Pd2(dba)3(57mg,0.06mmol)和t-BuONa(950mg,9.8mmol)。然后将反应混合物在80℃下搅拌2h。将反应混合物冷却至室温并过滤。浓缩滤液并经硅胶柱色谱法(PE:EA＝1:1)纯化得到(R)-叔丁基(1-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(400mg,20％)，为黄色固体。针对C20H26N6O4的[M+H]MS计算值，415.2；实测值：415.2。
步骤5：(R)-N-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001621
在室温下向(R)-叔丁基(1-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(400mg,0.97mmol)在乙醇(30mL)和H2O(10mL)中的溶液中加入Fe(540mg,9.70mmol)和NH4Cl(525mg,9.70mmol)。然后将反应混合物回流3h。冷却至室温后，将反应混合物过滤并浓缩滤液。用饱和NaHCO3调节残余物的pH至8，并用EA(20mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到(R)-N-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺(300mg,80％)，为黄色固体。针对C20H28N6O2的[M+H]MS计算值，385.2；实测值：385.2。
步骤6：(R)-叔丁基(1-(6-丙烯酰胺基-4-(氮杂环丁烷-1-基)酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001631
在0℃向(R)-N-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-酞嗪-6-基)丙烯酰胺(300mg,0.78mmol)在DCM(15mL)中的溶液中，加入丙烯酰氯(105mg,1.17mmol)和DIEA(305mg,2.34mmol)。然后将混合物升温至室温并搅拌1h。用饱和NH4Cl(50mL)对反应混合物进行淬灭。浓缩分离的有机层并通过C18柱(ACN:H2O＝5％-40％)纯化得到(R)-叔丁基(1-(6-丙烯酰胺基-4-(氮杂环丁烷-1-基)酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(80mg,24％)，为黄色油状物。针对C23H30N6O3的[M+H]MS计算值，439.2；实测值：439.2。
步骤7：(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)-4-(氮杂环丁烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺2,2,2-三氟乙酸盐
Figure BDA0003549429610001632
在室温下向(R)-叔丁基(1-(6-丙烯酰胺基-4-(氮杂环丁烷-1-基)酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(80mg,0.18mmol)在DCM(5mL)中的溶液中加入TFA(1mL)。将反应混合物在室温下搅拌1h。将反应混合物浓缩得到(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)-4-(氮杂环丁烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺2,2,2-三氟乙酸盐(80mg,100％)，为黄色油状物。针对C18H22N6O的[M+H]计算值，339.2；实测值，339.2。
步骤8：(R)-N-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-1-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺甲酸盐
Figure BDA0003549429610001641
在室温下向(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)-4-(氮杂环丁烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺2,2,2-三氟乙酸盐(75mg,0.22mmol)在DMA(3mL)中的溶液中加入2-氯嘧啶-5-甲腈(15mg,0.11mmol)和DIEA(85mg,0.66mmol)。然后将混合物在室温下搅拌40min。用水(10mL)淬灭反应混合物，并用EA(10mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-1-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺甲酸盐(19mg,19％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.04-2.10(m,3H),2.22-2.32(m,1H),3.49-3.89(m,6H),4.08-4.10(m,1H),4.50-4.54(m,1H),5.85-5.88(m,1H),6.36(dd,J＝2.0,16.8Hz,1H),6.50(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H),8.12-8.18(m,2H),8.37(s,1H),8.64-8.76(m,3H),8.92(s,1H),11.06(s,1H)。针对C23H23N9O的[M+H]MS计算值，442.2；实测值：442.2。
实施例46：(R)-N-(1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-3-(1-甲基哌啶- 4-基)异喹啉-6-基)-N-甲基丙烯酰胺的合成
Figure BDA0003549429610001651
步骤1：(R)-叔丁基(1-(3-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-6-硝基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001652
在N2下向(R)-叔丁基(1-(3-氯-6-硝基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(2.5g,6.4mmol)和1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶(1.6g,7.0mmol)在二噁烷(50mL)和H2O(5mL)中的溶液中加入Pd(dppf)Cl2(466mg,0.64mmol)和Cs2CO3(4.15g,12.7mmol)。将反应混合物在105℃下搅拌5h。对反应混合物进行冷却，过滤并浓缩。经柱(PE:EA＝10:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(3-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-6-硝基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.8g,62％)，为棕色固体。针对C24H31N5O4的[M+H]计算值，454.2；实测值，454.2。
步骤2：(R)-叔丁基(1-(6-氨基-3-(1-甲基哌啶-4-基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001661
将(R)-叔丁基(1-(3-(1-甲基-1,2,3,6-四氢吡啶-4-基)-6-硝基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.8g,3.97mmol)和Pd/C(200mg,5％)在乙醇(100mL)中的溶液在室温在H2(1atm)下搅拌4h。对反应混合物进行过滤并浓缩。经柱(DCM:甲醇＝10:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(6-氨基-3-(1-甲基哌啶-4-基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.6g,85％)，为棕色固体。针对C24H35N5O2的[M+H]计算值，426.3；实测值，426.3。
步骤3：(R)-叔丁基(1-(6-丙烯酰胺基-3-(1-甲基哌啶-4-基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001662
在0℃下向(R)-叔丁基(1-(6-氨基-3-(1-甲基哌啶-4-基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(4.0g,9.4mmol)和DIEA(3.0g,23.5mmol)在DCM(100mL)中的溶液中加入丙烯酰氯(1.0g,11.3mmol)。然后将反应混合物升温至室温，搅拌2h。将混合物用饱和NH4Cl(30mL)淬灭。分离的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。经硅胶柱色谱法(DCM/甲醇＝10/1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(6-丙烯酰胺基-3-(1-甲基哌啶-4-基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.5g,32％)，为白色固体。针对C27H37N5O3的[M+H]MS计算值，480.3；实测值：480.3。
步骤4：(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)-3-(1-甲基哌啶-4-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001671
在室温下向(R)-叔丁基(1-(6-丙烯酰胺基-3-(1-甲基哌啶-4-基)异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.40g,2.92mmol)在DCM(15mL)中的溶液中加入TFA(5mL)。将反应混合物在室温下搅拌2h。浓缩反应混合物，将残余物用饱和NaHCO3调节pH为9。将混合物过滤，将滤液浓缩得到残余物，经C18柱(ACN:H2O＝5％-40％)纯化残余物，得到(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)-3-(1-甲基哌啶-4-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺(600mg,55％)，为白色固体。针对C22H29N5O的[M+H]计算值，380.2；实测值，380.2。
步骤5：(R)-N-(1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-3-(1-甲基哌啶-4-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001681
在室温下向(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)-3-(1-甲基哌啶-4-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺(370mg,0.98mmol)在2-甲基丙-1-醇(10mL)中的溶液中加入5-溴-2-氯嘧啶(284mg,1.46mmol)和DIEA(380mg,2.94mmol)。然后将混合物在90℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却到室温并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-3-(1-甲基哌啶-4-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺(50mg,10％)，为黄色固体。针对C26H30BrN7O的[M+H]MS计算值，536.2；实测值：536.2。
步骤6：(R)-N-(1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-3-(1-甲基哌啶-4-基)异喹啉-6-基)-N-甲基丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001682
在0℃在氮气气氛下向(R)-N-(1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-3-(1-甲基哌啶-4-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺(40mg,0.074mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中的搅拌溶液中分批加入60重量％在矿物油中的氢化钠(36mg，0.089mmol)。将反应混合物升温至室温，在室温搅拌10min。然后加入CH3I(13mg,0.089mmol)，在室温搅拌2h。将反应混合物用水淬灭后，用DCM(10mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)-3-(1-甲基哌啶-4-基)异喹啉-6-基)-N-甲基丙烯酰胺(3.2mg,7.8％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CD3OD):δ1.99-2.07(m,5H),2.22-2.25(m,1H),2.58(s,3H),2.68-2.75(m,3H),3.21-3.31(m,5H),3.70-3.74(m,1H),3.86-3.95(m,2H),4.05-4.08(m,1H),4.42-4.45(m,1H),5.49(dd,J＝2.0,11.6Hz,1H),6.17-6.22(m,2H),6.83(s,1H),7.18(dd,J＝2.0,8.8Hz,1H),7.44(d,J＝2.0Hz,1H),8.21-8.23(m,3H)。针对C27H32BrN7O的[M+H]MS计算值，550.2；实测值：550.2。
实施例47：(R)-N-(1-(3-((6-乙炔基-1,2,4-三嗪-3-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹 啉-6-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001691
步骤1：(R)-叔丁基(1-(6-丙烯酰胺基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001701
在0℃下向(R)-叔丁基(1-(6-氨基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(2.0g,6.1mmol)和DIEA(2.0g,15.2mmol)在DCM(50mL)中的溶液中加入丙烯酰氯(607mg,6.7mmol)。然后将反应混合物升温至室温并搅拌0.5h。将混合物用饱和NH4Cl(30mL)淬灭。分离的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。经硅胶柱色谱法(PE/EA＝1/1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(6-丙烯酰胺基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.8g,77％)，为白色固体。针对C21H26N4O3的[M+H]MS计算值，383.2；实测值：383.2。
步骤2：(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺2,2,2-三氟乙酸盐
Figure BDA0003549429610001702
向(R)-叔丁基(1-(6-丙烯酰胺基异喹啉-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.8g,4.7mmol)在DCM(60mL)中的溶液中加入TFA(4mL)。将反应混合物在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩得到(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺2,2,2-三氟乙酸盐(1.7g,100％)，为棕色油状物。针对C16H18N4O的[M+H]计算值，283.2；实测值，283.2。
步骤3：6-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1,2,4-三嗪-3-胺
Figure BDA0003549429610001711
在室温下向6-溴-1,2,4-三嗪-3-胺(2.00g,11.49mmol)和CuI(654mg,3.45mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(805mg,1.14mmol)在THF(20mL)和TEA(50mL)中的混合物中加入乙炔基三甲基硅烷(4.50g,45.91mmol)。在90℃在氮气气氛下搅拌反应混合物16h。冷却至室温后，除去溶剂得到残余物，将残余物经快速柱色谱法(flash)(PE/EA＝1/3)纯化得到6-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1,2,4-三嗪-3-胺(1.60g,72％)，为灰白色固体。针对C8H12N4Si的[M+H]MS计算值，193.1；实测值：193.1。
步骤4：3-氯-6-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1,2,4-三嗪
Figure BDA0003549429610001712
在室温下向6-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1,2,4-三嗪-3-胺(1.6g,8.33mmol)和2-甲基-2-硝基丙烷(1.5g,12.49mmol)在ACN(50mL)中的溶液中加入CuCl2(1.3g,9.9mmol)。将反应混合物在60℃下搅拌2h。冷却至室温后，将混合物过滤，将滤液浓缩得到残余物。将残余物溶于EA(50mL)中，用H2O(15mL)和盐水(15mL)冲洗。有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并减压浓缩。经硅胶柱色谱法(PE/EA＝1/1)纯化残余物得到3-氯-6-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1,2,4-三嗪(0.75g,42％)，为灰白色固体。针对C8H10ClN3Si的[M+H]MS计算值，212.0；实测值：212.0。
步骤5：(R)-N-(1-(3-((6-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1,2,4-三嗪-3-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001721
在室温下向(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺2,2,2-三氟乙酸盐(1.0g，3.54mmol)在DMSO(15mL)中的溶液中加入3-氯-6-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1,2,4-三嗪(650mg，2.19mmol)和DIEA(1.8g，14.2mmol)。然后将混合物在50℃下搅拌2h。将反应混合物冷却，用水(15mL)淬灭，并用EA(10mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。经硅胶柱色谱法(100％EA)纯化残余物得到(R)-N-(1-(3-((6-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1,2,4-三嗪-3-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺(1.0g,62％)，为黄色固体。针对C24H27N7OSi的[M+H]MS计算值，458.2；实测值：458.2。
步骤6：(R)-N-(1-(3-((6-乙炔基-1,2,4-三嗪-3-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001722
向(R)-N-(1-(3-((6-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1,2,4-三嗪-3-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺(500mg,1.1mmol)在THF(20mL)中的溶液中加入TBAF在THF中的溶液(1.6mL，1.0M，1.6mol)。然后将反应混合物在室温下搅拌0.5h。将反应混合物用水(30mL)淬灭，并用EA(10mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。经硅胶柱色谱法(PE/EA＝1/1)纯化残余物得到(R)-N-(1-(3-((6-乙炔基-1,2,4-三嗪-3-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺(222.9mg,52.9％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.08-2.12(m,1H),2.27-2.30(m,1H),3.32-4.10(m,4H),4.64(s,2H),5.81(dd,J＝2.0,10.0Hz,1H),6.32(dd,J＝2.0,16.8Hz,1H),6.50(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H),6.97(d,J＝5.6Hz,1H),7.58(dd,J＝2.0,9.2Hz,1H),7.88(d,J＝5.6Hz,1H),8.20-8.21(m,2H),8.42(br s,2H),10.42(s,1H)。针对C21H19N7O的[M+H]MS计算值，386.2；实测值：386.2。实施例48：(R)-N-(1-(3-((5-乙炔基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基) 异喹啉-6-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001731
步骤1：(R)-N-(1-(3-((5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001732
在室温下向(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺2,2,2-三氟乙酸盐(500mg，1.77mmol)在DMSO(15mL)中的溶液中加入2-氯-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)嘧啶(483mg，2.30mmol)和DIEA(915mg，7.09mmol)。然后将混合物在50℃下搅拌2h。将反应混合物冷却，用水(15mL)淬灭，并用EA(10mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。经硅胶柱色谱法(PE/EA＝1/1)纯化残余物得到(R)-N-(1-(3-((5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺(380mg,39％)，为黄色固体。针对C25H28N6OSi的[M+H]MS计算值，457.2；实测值：457.2。
步骤2：(R)-N-(1-(3-((5-((乙炔基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001741
向(R)-N-(1-(3-((5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺(180mg,0.40mmol)在THF(10mL)中的溶液中加入TBAF在THF中的溶液(0.50mL，0.50mmol)。然后在室温搅拌混合物2h。将反应混合物用水(30mL)淬灭，并用EA(10mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(1-(3-((5-((乙炔基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)异喹啉-6-基)丙烯酰胺(165.5mg,57.7％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.02-2.07(m,1H),2.22-2.26(m,1H),3.70-3.74(m,1H),3.82-3.86(m,1H),3.91-3.95(m,1H),4.04-4.08(m,1H),4.25(s,1H),4.45-4.50(m,1H),5.81(dd,J＝2.0,10.0Hz,1H),6.31(dd,J＝2.0,17.2Hz,1H),6.48(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H),6.96(d,J＝5.6Hz,1H),7.57(dd,J＝2.0,9.2Hz,1H),7.87(d,J＝5.6Hz,1H),8.01(d,J＝6.4Hz,1H),8.20-8.21(m,2H),8.43(brs,2H),10.41(s,1H)。针对C22H20N6O的[M+H]MS计算值，385.2；实测值：385.2。
实施例49：(R)-N-(1-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙 烯酰胺
Figure BDA0003549429610001751
步骤1：3-羟基-5-硝基异苯并呋喃-1(3H)-酮
Figure BDA0003549429610001752
在室温下向2-溴-5-硝基苯甲醛(10.0g,43.5mmol)在ACN(300mL)中的溶液中加入4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽(Xantphos)(2.5g,4.35mmol)、Pd(OAc)2(500mg,2.18mmol)、TEA(30mL)和H2O(40mL)。然后在80℃在CO气氛下搅拌反应混合物过夜。将反应混合物冷却至室温并过滤。浓缩滤液并经C18柱(ACN:H2O＝5％-40％)纯化，得到3-羟基-5-硝基异苯并呋喃-1(3H)-酮(7.5g,88％)，为黄色固体。针对C8H5NO5的[M+H]MS计算值，196.0；实测值：196.1。
步骤2：6-硝基酞嗪-1-酚
Figure BDA0003549429610001753
在室温下向3-羟基-5-硝基异苯并呋喃-1(3H)-酮(7.0g,35.9mmol)在乙醇(100mL)中的溶液中加入水合肼(3.6g,71.8mmol)。然后将混合物回流3h。冷却至室温后，浓缩反应混合物，将残余物倒入水(100mL)中，滤出固体并用水(10mL*3)洗涤。将滤饼干燥，得到6-硝基酞嗪-1-酚(4.0g,58％)，为黄色固体。针对C8H5N3O3的[M+H]MS计算值，192.0；实测值：192.0。
步骤3：1-氯-6-硝基酞嗪
Figure BDA0003549429610001761
将6-硝基酞嗪-1-酚(3.0g,15.7mmol)在POCl3(30mL)中的溶液在120℃下搅拌3h。将混合物冷却到室温并浓缩。将残余物用冰水(30mL)淬灭，并用EA(10mL*3)萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到1-氯-6-硝基酞嗪(2.8g,85％)，为橙色固体。针对C8H4ClN3O2的[M+H]MS计算值，210.0；实测值：210.0。
步骤4：(R)-叔丁基(1-(6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001762
在室温下，向1-氯-6-硝基酞嗪(2.8g,13.3mmol)在DMSO(20mL)中的溶液中加入(R)-叔丁基吡咯烷-3-基氨基甲酸酯(2.5g,13.3mmol)和DIEA(3.4g,26.6mmol)。然后在60℃搅拌混合物过夜。将反应混合物冷却至室温，用水(60mL)稀释，并用EA(30mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。经硅胶柱色谱法(PE:EA＝1:1至DCM:甲醇＝10:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(3.0g,62％)，为黄色固体。针对C17H21N5O4的[M+H]MS计算值，360.2；实测值：360.2。
步骤5：(R)-叔丁基(1-(6-氨基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001771
在室温下向(R)-叔丁基(1-(6-氨基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(2.8g,7.8mmol)在DCM(100mL)和甲醇(100mL)中的溶液中加入10重量％钯/炭(280mg)。将混合物在室温在氢气气氛下搅拌过夜。对反应混合物进行过滤。浓缩滤液。经硅胶柱色谱法(DCM:甲醇＝10:1)纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(6-氨基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(1.6g,64％)，为黄色固体。针对C17H23N5O2的[M+H]MS计算值，330.2；实测值：330.2。
步骤6：(R)-叔丁基(1-(6-丙烯酰胺基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001772
在0℃下向(R)-叔丁基(1-(6-氨基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(600mg,1.82mmol)在DMA(10mL)中的溶液中加入丙烯酰氯(250mg,2.73mmol)和K2CO3(503mg,3.35mmol)。然后将混合物升温到室温并在室温搅拌过夜。将反应混合物用水(30mL)淬灭，并用EA(10mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-叔丁基(1-(6-丙烯酰胺基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(100mg,14％)，为黄色固体。针对C20H25N5O3的[M+H]MS计算值，384.2；实测值：384.2。
步骤7：(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺2,2,2-三氟乙酸盐
Figure BDA0003549429610001781
向(R)-叔丁基(1-(6-丙烯酰胺基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(40mg,0.10mmol)在DCM(5mL)中的溶液中加入TFA(2mL)。将反应混合物在室温下搅拌1h。将反应混合物浓缩得到(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺2,2,2-三氟乙酸盐(40mg,100％)，为黄色油状物。针对C15H17N5O的[M+H]计算值，284.2；实测值，284.2。
步骤8：(R)-N-(1-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺甲酸盐
Figure BDA0003549429610001782
在室温下向(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺2,2,2-三氟乙酸盐(100mg，0.20mmol)在DMSO(5mL)中的溶液加入2-氯嘧啶-5-甲腈(28mg，0.20mmol)和DIEA(80mg，0.60mmol)。然后将混合物在室温下搅拌3h。将反应混合物用水(15mL)淬灭，并用EA(10mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(1-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺甲酸盐(8.8mg,9％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.11-2.14(m,1H),2.28-2.32(m,1H),3.81-3.83(m,1H),3.87-3.93(m,1H),4.00-4.05(m,1H),4.13-4.18(m,1H),4.57-4.61(m,1H),5.85(dd,J＝1.6,10.0Hz,1H),6.35(dd,J＝2.0,16.8Hz,1H),6.50(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H),7.89(dd,J＝2.4,9.2Hz,1H),8.16(s,1H),8.26(d,J＝9.2Hz,1H),8.38(d,J＝2.0Hz,1H),8.68-8.78(m,3H),8.92(s,1H),10.65(s,1H)。针对C20H18N8O的[M+H]MS计算值，387.2；实测值：387.2。
实施例50：(R)-N-(1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯 酰胺
Figure BDA0003549429610001791
步骤1：(R)-5-溴-N-(1-(6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)嘧啶-2-胺
Figure BDA0003549429610001792
在室温下向1-氯-6-硝基酞嗪(210mg,1.0mmol)在DMSO(5mL)中的溶液中加入(R)-5-溴-N-(吡咯烷-3-基)嘧啶-2-胺(242mg,1.0mmol)和DIEA(390mg,3.0mmol)。然后在70℃下将混合物搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温，用水(15mL)稀释，并用EA(10mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到((R)-5-溴-N-(1-(6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)嘧啶-2-胺(350mg,84％)，为黄色固体。针对C16H14BrN7O2的[M+H]MS计算值，416.2；实测值：416.2。
步骤2：(R)-1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-胺
Figure BDA0003549429610001801
在室温条件下向((R)-5-溴-N-(1-(6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)嘧啶-2-胺(200mg,0.48mmol)在乙醇(15mL)和H2O(5mL)中的溶液中加入Fe(270mg,4.80mmol)和NH4Cl(270mg,5.00mmol)。然后将反应混合物回流3h。冷却至室温后，将反应混合物过滤并浓缩滤液。将残余物用饱和NaHCO3调至pH 8，并用EA(20mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。经C18柱(ACN:H2O＝5％-40％)纯化残余物得到(R)-1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-胺(70mg,38％)，为黄色固体。针对C16H16BrN7的[M+H]MS计算值，386.2；实测值：386.2。
步骤3：(R)-N-(1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺甲酸盐
Figure BDA0003549429610001802
在0℃下向(R)-1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-胺(300mg,0.78mmol)在DMA(10mL)中的溶液中加入丙烯酰氯(141mg,1.55mmol)和K2CO3(225mg,1.55mmol)。然后将混合物升温到室温，搅拌过夜。将反应混合物用水(30mL)淬灭，并用EA(10mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺甲酸盐(37.6mg,11％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.06-2.11(m,1H),2.24-2.29(m,1H),3.78-3.80(m,1H),3.86-3.92(m,1H),3.99-4.04(m,1H),4.11-4.16(m,1H),4.43-4.48(m,1H),5.85(dd,J＝1.6,10.0Hz,1H),6.35(dd,J＝1.6,12.8Hz,1H),6.50(dd,J＝10.4,17.2Hz,1H),7.85-7.90(m,2H),8.18(s,1H),8.26(d,J＝9.2Hz,1H),8.36-8.41(m,3H),8.91(s,1H),10.66(s,1H)。针对C19H18BrN7O的[M+H]MS计算值，440.1；实测值：440.1。
实施例51：(R)-N-(1-(3-((5-乙炔基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基) 丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001811
步骤1：(R)-1-(6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-胺2,2,2-三氟乙酸盐
Figure BDA0003549429610001812
向(R)-叔丁基(1-(6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(100mg,0.28mmol)在DCM(5mL)中的溶液中加入TFA(1mL)。将反应混合物在室温下搅拌1h。将反应混合物浓缩得到(R)-1-(6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-胺2,2,2-三氟乙酸盐(100mg,100％)，为黄色油状物。针对C12H13N5O2的[M+H]计算值，260.1；实测值，260.2。
步骤2：(R)-N-(1-(6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)嘧啶-2-胺
Figure BDA0003549429610001821
在室温下向(R)-1-(6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-胺2,2,2-三氟乙酸盐(100mg，0.27mmol)在DMSO(5mL)中的溶液中加入2-氯-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)嘧啶(65mg，0.30mmol)和DIEA(145mg，1.1mmol)。然后将混合物在40℃下搅拌过夜。用水(15mL)淬灭反应混合物，并用EA(10mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。经硅胶柱色谱法(PE:EA＝1:1)纯化残余物得到(R)-N-(1-(6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)嘧啶-2-胺(50mg,42％)，为黄色固体。针对C21H23N7O2Si的[M+H]MS计算值，434.2；实测值：434.2。
步骤3：(R)-1-(3-((5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-胺
Figure BDA0003549429610001822
在室温下向(R)-N-(1-(6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)-5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)嘧啶-2-胺(270mg,0.62mmol)在乙醇(30mL)和H2O(10mL)中的溶液中加入Fe(350mg,6.2mmol)和NH4Cl(350mg,6.5mmol)。然后将混合物回流3h。冷却至室温后，将反应混合物过滤，将滤液浓缩。用饱和NaHCO3调节残余物的pH为8，并用EA(20mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到(R)-1-(3-((5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-胺(240mg,96％)，为黄色固体。针对C21H25N7Si的[M+H]MS计算值，404.2；实测值：404.2。
步骤4：(R)-N-(1-(3-((5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001831
在0℃下向(R)-1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-胺(240mg,0.59mmol)在DMA(10mL)中的溶液中加入丙烯酰氯(108mg,1.20mmol)和K2CO3(165mg,1.20mmol)。然后将混合物升温到室温，搅拌过夜。将反应混合物用水(30mL)淬灭，并用EA(10mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(1-(3-((5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺(20mg,7.5％)，为黄色固体。针对C24H27N7OSi的[M+H]MS计算值，458.2；实测值：458.2。
步骤5：(R)-N-(1-(3-((5-乙炔基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺甲酸盐
Figure BDA0003549429610001832
向(R)-N-(1-(3-((5-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺(30mg,0.066mmol)在THF(10mL)中的溶液中加入TBAF在THF中的溶液(0.07mL，0.07mmol)。然后将混合物在室温下搅拌2h。将反应混合物用水(30mL)淬灭，并用EA(10mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(1-(3-((5-乙炔基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺甲酸盐(12.3mg,50％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.07-2.12(m,1H),2.25-2.30(m,1H),3.78-3.82(m,1H),3.87-3.93(m,1H),4.00-4.04(m,1H),4.12-4.16(m,1H),4.51-4.55(m,1H),5.85(dd,J＝2.0,10.0Hz,1H),6.35(dd,J＝2.0,17.2Hz,1H),6.50(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H),7.89(dd,J＝2.0,9.2Hz,1H),8.05(d,J＝6.4Hz,1H),8.15(s,1H),8.26(d,J＝9.2Hz,1H),8.37-8.44(m,3H),8.91(s,1H),10.65(s,1H)。针对C21H19N7O的[M+H]MS计算值，386.2；实测值：386.2。
实施例52：(R)-N-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷- 1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺的合成
Figure BDA0003549429610001841
步骤1：(R)-1-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-胺盐酸盐
Figure BDA0003549429610001851
在室温下向(R)-叔丁基(1-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(400mg,0.96mmol)在EA(5mL)中的溶液中加入4M HCl/EA(15mL)。将反应混合物在室温下搅拌2h。真空浓缩反应混合物，得到粗的(R)-1-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-胺盐酸盐(340mg,100％)，为黄色固体。针对C15H18N6O2的[M+H]MS计算值，315.2；实测值：315.2。
步骤2：(R)-N-(1-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)-5-溴嘧啶-2-胺
Figure BDA0003549429610001852
在室温下，向(R)-1-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-胺盐酸盐(340mg,0.97mmol)在DMSO(10mL)中的溶液中加入5-溴-2-氯嘧啶(190mg,0.97mmol)和DIEA(380mg,2.91mmol)。然后在70℃下搅拌混合物过夜。将反应混合物冷却至室温，用水(30mL)稀释，并用EA(20mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。经硅胶柱色谱法(DCM:甲醇＝20:1)纯化残余物得到(R)-N-(1-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)-5-溴嘧啶-2-胺(240mg,53％)，为黄色固体。针对C19H19BrN8O2的[M+H]MS计算值，471.1；实测值：471.1。
步骤3：(R)-4-(氮杂环丁烷-1-基)-1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-胺
Figure BDA0003549429610001861
在室温下向(R)-N-(1-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)-5-溴嘧啶-2-胺(240mg,0.51mmol)在乙醇(30mL)和H2O(10mL)中的溶液中加入Fe(285mg,5.1mmol)和NH4Cl(275mg,5.1mmol)。然后将混合物回流5h。冷却至室温后，将反应混合物过滤，将滤液浓缩。用饱和NaHCO3调节残余物的pH为8，并用EA(20mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩得到(R)-4-(氮杂环丁烷-1-基)-1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-胺(200mg,89％)，为黄色固体。针对C19H21BrN8的[M+H]MS计算值，441.1；实测值：441.1。
步骤4：(R)-N-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺甲酸盐
Figure BDA0003549429610001871
在0℃下向(R)-4-(氮杂环丁烷-1-基)-1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-胺(200mg,0.45mmol)在DMA(5mL)中的溶液中加入丙烯酰氯(83mg,0.91mmol)和K2CO3(126mg,0.91mmol)。然后将混合物升温至室温，搅拌2h。将反应混合物过滤，通过制备型HPLC纯化滤液得到(R)-N-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-1-(3-((5-溴嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺甲酸盐(88.5mg,39％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CD3OD):δ2.14-2.19(m,1H),2.31-2.40(m,3H),3.67-3.72(m,3H),3.80-3.84(m,1H),3.93-3.97(m,1H),4.06-4.10(m,1H),4.35(t,J＝5.6Hz,2H),4.56(t,J＝4.2Hz,1H),5.93(t,J＝5.6Hz,1H),6.53(d,J＝6.0Hz,2H),8.01(dd,J＝2.0,9.2Hz,1H),8.36-8.40(m,3H),8.51(s,1H),8.90(d,J＝2.4Hz,1H)。针对C22H23BrN8O的[M+H]MS计算值，495.1；实测值：495.1。
实施例53：(R)-N-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-1-(3-((6-乙炔基-1,2,4-三嗪-3-基) 氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001872
步骤1：(R)-N-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-1-(3-((6-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1,2,4-三嗪-3-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001881
在室温下向(R)-N-(1-(3-氨基吡咯烷-1-基)-4-(氮杂环丁烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺2,2,2-三氟乙酸盐(80mg，0.18mmol)在DMSO(5mL)中的溶液中加入3-氯-6-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1,2,4-三嗪(37mg，0.18mmol)和DIEA(70mg，0.54mmol)。然后将混合物在40℃下搅拌3h。用水(15mL)淬灭反应混合物，并用EA(10mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-1-(3-((6-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1,2,4-三嗪-3-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺(17mg,18％)，为黄色固体。针对C26H31N9OSi的[M+H]MS计算值，514.2；实测值：514.2。
步骤2：(R)-N-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-1-(3-((6-乙炔基-1,2,4-三嗪-3-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺甲酸盐
Figure BDA0003549429610001882
向(R)-N-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-1-(3-((6-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)-1,2,4-三嗪-3-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺(17mg,0.033mmol)在THF(5mL)中的溶液中加入TBAF在THF中的溶液(0.05mL，0.05mmol)。然后将混合物在室温下搅拌2h。用水(15mL)淬灭反应混合物，并用EA(5mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物得到(R)-N-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-1-(3-((6-乙炔基-1,2,4-三嗪-3-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺甲酸盐(9.5mg,65％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CD3OD):δ2.25-2.28(m,1H),2.44-2.49(m,1H),2.55-2.63(m,2H),3.77-3.89(m,2H),3.87-4.01(m,1H),4.03(s,1H),4.06-4.18(m,1H),4.57(t,J＝8.0Hz,4H),4.74(br s,1H),5.90(dd,J＝4.8,7.2Hz,1H),6.49-6.51(m,2H),7.96(dd,J＝2.4,8.8Hz,1H),8.38-8.48(m,2H),8.92(s,1H),8.93(s,1H)。针对C23H23N9O的[M+H]MS计算值，442.2；实测值：442.2。
实施例54：(R)-N-(4-(3-氰基氮杂环丁烷-1-基)-1-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨 基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001901
步骤1：1-(4-氯-7-硝基酞嗪-1-基)氮杂环丁烷-3-甲腈
Figure BDA0003549429610001902
在室温下向1,4-二氯-6-硝基酞嗪(6.0g,24.5mmol)在DMSO(40mL)中的溶液中加入氮杂环丁烷-3-甲腈盐酸盐(2.9g,24.5mmol)和K2CO3(10.1g,73.7mmol)。然后将混合物在室温搅拌16h。将反应混合物冷却至室温，用水(100mL)稀释，并用EA(50mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶柱色谱法(PE:EA＝1:1)纯化残余物得到1-(4-氯-7-硝基酞嗪-1-基)氮杂环丁烷-3-甲腈(2.9g,26％)，为棕色固体。针对C12H8ClN5O2的[M+H]MS计算值，290.0；实测值：290.0。
步骤2：(R)-叔丁基(1-(4-(3-氰基氮杂环丁烷-1-基)-6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯
Figure BDA0003549429610001911
在室温在N2气氛下向1-(4-氯-7-硝基酞嗪-1-基)氮杂环丁烷-3-甲腈(2.7g,9.3mmol)和(R)-叔丁基吡咯烷-3-基氨基甲酸酯(6.9g,37.2mmol)在甲苯(100mL)中的溶液中加入BINAP(463mg,0.74mmol)、Pd2(dba)3(214mg,0.37mmol)和t-BuONa(1.79mg,18.62mmol)。然后在80℃搅拌混合物12h。将反应混合物冷却至室温并过滤。浓缩滤液并经硅胶柱色谱法(PE:EA＝1:1)纯化，得到(R)-叔丁基(1-(4-(3-氰基氮杂环丁烷-1-基)-6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(0.6g,14％)，为棕色固体。针对C21H25N7O4的[M+H]MS计算值，440.2；实测值：440.2。
步骤3：(R)-1-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-7-硝基酞嗪-1-基)氮杂环丁烷-3-甲腈2,2,2-三氟乙酸盐
Figure BDA0003549429610001912
向(R)-叔丁基(1-(4-(3-氰基氮杂环丁烷-1-基)-6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)氨基甲酸酯(500mg,1.14mmol)在DCM(5mL)中的溶液中加入TFA(2.5mL)。将反应混合物在室温下搅拌2h。将反应混合物浓缩得到(R)-1-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-7-硝基酞嗪-1-基)氮杂环丁烷-3-甲腈2,2,2-三氟乙酸盐(386mg,粗品),为棕色油状物。针对C16H17N7O2的[M+H]计算值，340.1；实测值，340.1。
步骤4：(R)-2-((1-(4-(3-氰基氮杂环丁烷-1-基)-6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)氨基)嘧啶-5-甲腈
Figure BDA0003549429610001921
在室温下向(R)-1-(4-(3-氨基吡咯烷-1-基)-7-硝基酞嗪-1-基)氮杂环丁烷-3-甲腈2,2,2-三氟乙酸盐(386mg，1.14mmol)在DMSO(10mL)中的溶液中加入2-氯嘧啶-5-甲腈(174mg，1.25mmol)和DIEA(734g，5.69mmol)。然后将混合物在室温下搅拌2h。用水(15mL)淬灭反应混合物，并用EA(10mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过硅胶柱色谱法(PE:EA＝1:1)纯化残余物得到(R)-2-((1-(4-(3-氰基氮杂环丁烷-1-基)-6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)氨基)嘧啶-5-甲腈(251mg,50％)，为棕色固体。针对C21H18N10O2的[M+H]MS计算值，443.2；实测值：443.2。
步骤5：(R)-2-((1-(6-氨基-4-(3-氰基氮杂环丁烷-1-基)酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)氨基)嘧啶-5-甲腈
Figure BDA0003549429610001931
在室温下向(R)-2-((1-(4-(3-氰基氮杂环丁烷-1-基)-6-硝基酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)氨基)嘧啶-5-甲腈(250mg,0.57mmol)在乙醇(15mL)和H2O(15mL)中的溶液中加入Fe(216mg,5.66mmol)和NH4Cl(202mg,5.66mmol)。然后将混合物在60℃下搅拌2h。冷却至室温后，将反应混合物过滤，将滤液浓缩。用饱和NaHCO3水溶液将残余物的pH调至8，并用EA(20mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。经硅胶柱色谱法(DCM:甲醇＝20:1)纯化残余物得到(R)-2-((1-(6-氨基-4-(3-氰基氮杂环丁烷-1-基)酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)氨基)嘧啶-5-甲腈(200mg,61％)，为白色固体。针对C21H20N10的[M+H]MS计算值，413.2；实测值：413.2。
步骤6：(R)-N-(4-(3-氰基氮杂环丁烷-1-基)-1-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺
Figure BDA0003549429610001932
在0℃下向(R)-2-((1-(6-氨基-4-(3-氰基氮杂环丁烷-1-基)酞嗪-1-基)吡咯烷-3-基)氨基)嘧啶-5-甲腈(150mg,0.36mmol)在DMA(5mL)中的溶液中加入丙烯酰氯(65mg,0.72mmol)和K2CO3(100mg,0.72mmol)。将混合物升温至室温，搅拌30min。将反应混合物用水(30mL)淬灭，并用DCM(10mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。通过制备型HPLC纯化残余物，得到(R)-N-(4-(3-氰基氮杂环丁烷-1-基)-1-(3-((5-氰基嘧啶-2-基)氨基)吡咯烷-1-基)酞嗪-6-基)丙烯酰胺(79.2mg,46％)，为灰白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ2.04-2.09(m,1H),2.25-2.30(m,1H),3.62-4.01(m,5H),4.29-4.34(m,2H),4.44-4.57(m,3H),5.87(dd,J＝2.0,10.0Hz,1H),6.37(dd,J＝1.6,16.8Hz,1H),6.49(dd,J＝10.0,16.8Hz,1H),7.96(dd,J＝2.0,9.2Hz,1H),8.20(d,J＝9.2Hz,1H),8.43(d,J＝2.0Hz,1H),8.66-8.76(m,3H),10.69(s,1H)。针对C24H22N10O的[M+H]MS计算值，467.2；实测值：467.2。
II.生物学评价
实施例1–测定条件2(含巯基的条件)
目的：使用蛋白激酶确定测试化合物的IC50谱。通过以单份测试每种化合物的10个浓度(1x10-04M、3x10-05M、1x10-05M、3x10-06M、1x10-06M、3x10-07M、1x10-07M、3x10-08M、1x10-08M和3x10-09M)来测量IC50值。
测试化合物：化合物以预先称重的粉末在小瓶中提供。通过加入DMSO将化合物溶解至1x10-02M。将100μl每种所得储备溶液转移到四个96孔“母板”的第2列中。
在测试之前，使用100％DMSO作为溶剂，对母板第2列中的1x10-02M储备溶液进行系列半对数稀释。这产生了10个不同的浓度，第12列中的稀释终点为3x10-07M/100％DMSO。在第1列和第7列填充100％DMSO作为对照。随后，用96通道移液器将系列稀释的复制板的每个孔中的2x10μl移入两个相同的组的“化合物稀释板”中。
在该过程中，将90μl H2O加入至一组化合物稀释板的每个孔中。为了最大程度地减少潜在的沉淀，仅在将化合物溶液转移到测定板中之前几分钟，将H2O加入到每个板中。充分摇动每个板，得到“化合物稀释板/10％DMSO”。
对于该测定，将来自化合物稀释板/10％DMSO的每孔的5μl溶液转移到测定板中。该测定的最终体积为50μl。所有化合物均以10个最终测定浓度在1x10-04M至3x10-09M的范围内进行单份测试。在所有情况下，反应混合物中的最终DMSO浓度均为1％。
重组蛋白激酶：所有蛋白激酶均在Sf9昆虫细胞或大肠杆菌中表达为重组GST融合蛋白或His标记的蛋白质，为全长或酶活性片段。所有激酶均从人cDNA产生，并通过GSH亲和色谱法或固定化金属纯化。在纯化过程中，从许多激酶中去除亲和标签。通过SDS-PAGE/考马斯染色检查蛋白激酶的纯度，通过质谱法核实身份。
蛋白激酶测定：使用放射性测量蛋白激酶测定(
Figure BDA0003549429610001952
Activity Assay)测量激酶活性。所有激酶测定均在来自PerkinElmer(Boston,MA,USA)的96孔FlashPlatesTM中进行，反应体积为50μl。按以下顺序通过四个步骤将反应混合物移液：
·20μl测定缓冲液(标准缓冲液)
·5μl ATP溶液(在H2O中)
·5μl测试化合物(在10％DMSO中)
·20μl酶/底物混合物
所有蛋白激酶的测定均含有70mM HEPES-NaOH pH 7.5，3mM MgCl2，3mM MnCl2，3μM原钒酸钠，1.2mM DTT，50μg/ml PEG20000，ATP(可变浓度，对应于相应激酶的表观ATP-Km)，[γ-33P]-ATP(每孔约9x1005cpm)，蛋白激酶，和底物。
每孔使用以下量的酶和底物：
Figure BDA0003549429610001951
*最大摩尔酶测定浓度，表示酶制品仅含有100％活性酶
将反应混合物在30℃下温育60分钟。用50μl 2％(v/v)H3PO4终止反应，抽吸板，并用200μl 0.9％(w/v)NaCl洗涤两次。用微板闪烁计数器(Microbeta,Wallac)确定33Pi的掺入。所有测定均使用BeckmanCoulter/SAGIANTMCore System进行。
原始数据的评价：将每个测定板(n＝8)的第1列中的计数的中值定义为“低对照”。该值反映了在不存在蛋白激酶但存在底物的情况下放射性与板的非特异性结合。将每个测定板(n＝8)的第7列中的计数的中值作为“高对照”，即在不存在任何抑制剂的情况下的完全活性。高对照与低对照之间的差值被视为100％活性。
作为数据评价的一部分，将特定板的低对照值从相应板的高对照值以及所有80个“化合物值”中减去。使用以下公式计算特定板的每个孔的残余活性(以％计)：
残余活性(％)＝100X[(化合物的cpm–低对照)/(高对照–低对照)]
使用Quattro Workflow V3.1.1(Quattro Research GmbH,Munich,德国)计算每个浓度的残余活性和化合物IC50值。IC50测定的拟合模型为“S形响应(可变斜率)”，参数“顶部”固定为100％，“底部”固定为0％。使用的拟合方法是最小二乘拟合。
结果：表1汇总了所有化合物的IC50值。该表显示所有计算出的IC50值，以及相应曲线的Hill斜率。所有在测试浓度范围以外的IC50值(<3x10-09M；>1x10-04M)被标记为灰色。高于-0.4的Hill斜率表明该曲线不是S形，非常平坦，或者不是下降的。
实施例2–测定条件1(无巯基的条件)
在定制的无巯基测定中使用蛋白激酶确定化合物的IC50谱。通过针对每种目的激酶以单份测试每种测试化合物的10个浓度(1x10-05M至3x10-10M)来测量IC50值。在测试之前，使用100％DMSO作为溶剂，对母板第2列中的1x10-03M储备溶液进行系列半对数稀释。这产生了10个不同的浓度，第12列中的稀释终点为3x10-08M/100％DMSO。在第1列和第7列填充100％DMSO作为对照。随后，用96通道移液器将系列稀释的复制板的每个孔中的2x10微升移入两个相同的组的“化合物稀释板”中。所有板均为了自动标识和跟踪目的进行条形码化。通过以单份测试每种化合物的10个浓度(1x10-05M至3x10-10M)来测量IC50值。在溶解在DMSO中之前，所有化合物均以粉末形式储存。溶解的化合物以1x10-02M/100％DMSO储备溶液的形式储存。在测定过程之前，将90微升H2O加入至一组化合物稀释板的每个孔中。为了最大程度地减少潜在的沉淀，仅在将化合物溶液转移到测定板中之前几分钟，将H2O加入到每个板中。充分摇动每个板，得到最终具有10％DMSO的化合物稀释板。对于每个测定，将来自化合物稀释板/10％DMSO的每孔的5微升溶液转移到测定板中。该测定的最终体积为50μl。所有化合物均以10个最终测定浓度在1x10-05M至3x10-10M的范围内进行单份测试。在所有情况下，反应混合物中的最终DMSO浓度均为1％。使用放射性测量蛋白激酶测定(
Figure BDA0003549429610001971
Activity Assay)测量蛋白激酶的激酶活性。所有激酶测定均在来自PerkinElmer(Boston,MA,USA)的96孔FlashPlatesTM中进行，反应体积为50微升。按以下顺序通过四个步骤将反应混合物移液：20微升测定缓冲液(标准缓冲液)·5微升ATP溶液(在H2O中)·5微升测试化合物(在10％DMSO中)·20微升酶/底物混合物。蛋白激酶的每个测定均含有70mM HEPES-NaOH pH 7.5，3mM MgCl2，3mM MnCl2，3μM原钒酸钠，1mM TCEP，50μg/mlPEG20000，ATP(对应于激酶的表观ATP-Km，参见表A)，[γ-33P]-ATP(每孔约6x10xE5 cpm)，其中根据所讨论的激酶，以预定的量使用蛋白激酶和相关底物。对于所有被标记为“无巯基”的实验，所有谷胱甘肽均从蛋白质制品交换，以便从测定中去除，并且最终缓冲液条件不包含含巯基的试剂。这样做是为了不干扰目的蛋白质中的关键半胱氨酸。
对于数据分析，将每个测定板(n＝8)的第1列中的计数的中值定义为“低对照”。该值反映了在不存在蛋白激酶但存在底物的情况下放射性与板的非特异性结合。将每个测定板(n＝8)的第7列中的计数的中值作为“高对照”，即在不存在任何抑制剂的情况下的完全活性。高对照与低对照之间的差值被视为100％活性。作为数据评价的一部分，将特定板的低对照值从相应板的高对照值以及所有80个“化合物值”中减去。使用以下公式计算特定板的每个孔的残余活性(以％计)：
残余活性(％)＝100X[(化合物的cpm–低对照)/(高对照–低对照)]
使用Quattro Workflow V3.1.1(Quattro Research GmbH,Munich,德国；www.quattro-research.com)计算每个浓度的残余活性和化合物IC50值。IC50测定的拟合模型为“S形响应(可变斜率)”，其中参数“顶部”固定为100％，“底部”固定为0％。使用的拟合方法是最小二乘拟合。作为测定质量的参数，使用每个测定板(n＝8)的低和高对照的Z′-因子(Zhang等人,J.Biomol.Screen.2:67-73,1999)。测定板的重复的ProQinase标准是Z′-因子低于0.4(Iversen等人,J.Biomol.Screen.3:247-252,2006)。
表1公开的示例性化合物的代表性数据在以下表4中给出：
表4
Figure BDA0003549429610001981
Figure BDA0003549429610001991
Figure BDA0003549429610002001
注：生化测定IC50数据在以下范围内给出：
A：≤0.10μM C：>1.0μM至≤10μM
B：>0.10μM至≤1.0μM D：>10μM至<30μM
E：>30μM至<100μM
III.药物剂型的制备
实施例1：口服胶囊
活性成分是表1的化合物或其药学上可接受的盐。通过将1-1000mg活性成分与淀粉或其他合适的粉末掺合物混合来制备用于口服施用的胶囊。将该混合物掺入适于口服施用的口服剂量单位如硬明胶胶囊中。
实施例2：用于注射的溶液
活性成分是表1的化合物或其药学上可接受的盐，并且配制为在芝麻油中浓度为50mg-eq/mL的溶液。
本文所述的实施例和实施方案仅用于说明性目的，并且对本领域技术人员而言为提示性的各种修改或变化都将包含在本申请的精神和范围以及所附权利要求书的范围内。

Claims (94)

1.一种化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其具有式(I)的结构：
Figure FDA0003549429600000011
其中，
环A是任选取代的选自吡啶、吡嗪、嘧啶、喹啉、异喹啉、喹唑啉、吡唑并吡啶、吡唑并嘧啶、噻吩并嘧啶、噻吩并吡啶、吡啶并吡啶、吡啶并嘧啶或三氮烯的杂芳基；
W选自具有以下结构的基团：
Figure FDA0003549429600000012
t是1或2；u是0、1或2；
R1、R2和R3各自独立地选自氢、任选取代的C1-C4烷基或任选取代的杂环基(烷基)；
R4是氢或任选取代的C1-C4烷基，或任选地，如果R3是任选取代的C1-C4烷基且R4是任选取代的C1-C4烷基，则R3和R4连接在一起形成环；
R5选自氢、-CN、-NH2、卤素、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C1-C4烷氧基或任选取代的C1-C4氨基烷基；
R6选自氢、-CN、-NH2、卤素、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C1-C4烷氧基或任选取代的C1-C4氨基烷基；
X为N或C-H；
Y为N或C-L1-R11；
Z为N或C-L2-R7；
L1和L2各自独立地是键、-O-或-N(R8)-；
R7选自氢、-CN、卤素、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C3-C7碳环基、任选取代的碳环基(烷基)、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基(烷基)；
R8为氢或任选取代的C1-C4烷基；
R9选自氢或任选取代的C1-C4烷基；
R10选自氢或任选取代的C1-C4烷基；并且
R11选自氢、-CN、卤素、-NH2、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C3-C7碳环基、任选取代的碳环基(烷基)、任选取代的杂环基或任选取代的杂环基(烷基)。
2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中W选自：
Figure FDA0003549429600000021
3.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中W选自：
Figure FDA0003549429600000022
4.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中W选自：
Figure FDA0003549429600000031
5.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中W选自：
Figure FDA0003549429600000032
6.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中W为：
Figure FDA0003549429600000033
7.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中W为：
Figure FDA0003549429600000034
8.根据权利要求1-7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R2为氢。
9.根据权利要求1-7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R3为氢。
10.根据权利要求1-7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R2和R3为氢。
11.根据权利要求1-10中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R1为氢。
12.根据权利要求1-10中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R1为任选取代的C1-C4烷基。
13.根据权利要求1-10中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R1是任选取代的C1-C2烷基。
14.根据权利要求1-10中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R1是任选取代的C1烷基。
15.根据权利要求14所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中C1烷基被任选取代的氨基取代。
16.根据权利要求15所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中所述任选取代的氨基是二甲基氨基。
17.根据权利要求1-16中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R1是CH2-N(Me)2。
18.根据权利要求1-14中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R1为任选取代的杂环基烷基。
19.根据权利要求18所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中所述任选取代的杂环基烷基包括任选取代的C1烷基。
20.根据权利要求18或19所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中所述任选取代的杂环基烷基包括任选取代的N-连接的杂环基。
21.根据权利要求20所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中所述任选取代的N-连接的杂环基是N-连接的吡咯烷或哌啶。
22.根据权利要求1-21中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R4为氢。
23.根据权利要求1-21中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R4是任选取代的C1-C4烷基。
24.根据权利要求1-23中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R5为氢。
25.根据权利要求1-24中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R6为氢。
26.根据权利要求1-25中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中X为N。
27.根据权利要求1-25中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中X为C-H。
28.根据权利要求1-25中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中Y为N。
29.根据权利要求1-25中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中Y为C-L1-R11。
30.根据权利要求29所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中L1是键。
31.根据权利要求29所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中L1是-O-。
32.根据权利要求29所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中L1为-NH-。
33.根据权利要求29所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中L1为-N(R8)-，并且R8为任选取代的C1-C4烷基。
34.根据权利要求29所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R11是氢。
35.根据权利要求29所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R11是任选取代的C1-C4烷基。
36.根据权利要求29所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R11是任选取代的杂环基。
37.根据权利要求1-36中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中Z为N。
38.根据权利要求1-25中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中Z为C-L2-R7。
39.根据权利要求38所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中L2是键。
40.根据权利要求29所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中L2为-O-。
41.根据权利要求29所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中L2是-NH-。
42.根据权利要求29所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中L2为-N(R8)-，且R8为任选取代的C1-C4烷基。
43.根据权利要求29所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R7为氢。
44.根据权利要求29所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R7为任选取代的C1-C4烷基。
45.根据权利要求29所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R7为任选取代的杂环基。
46.根据权利要求1-45中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为任选取代的吡啶。
47.根据权利要求1-45中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为任选取代的吡嗪。
48.根据权利要求1-45中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为任选取代的嘧啶。
49.根据权利要求1-45中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为任选取代的嘧啶-2-基。
50.根据权利要求1-45中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为任选取代的喹啉。
51.根据权利要求1-45中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为任选取代的异喹啉。
52.根据权利要求1-45中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为任选取代的喹唑啉。
53.根据权利要求1-45中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为任选取代的喹唑啉-2-基。
54.根据权利要求1-45中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为任选取代的吡唑并吡啶。
55.根据权利要求1-45中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为任选取代的吡唑并嘧啶。
56.根据权利要求1-45中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为任选取代的噻吩并嘧啶。
57.根据权利要求1-45中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为任选取代的噻吩并[3,2-d]嘧啶-2-基。
58.根据权利要求1-45中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为任选取代的噻吩并吡啶。
59.根据权利要求1-45中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为任选取代的噻吩并[3,2-d]吡啶。
60.根据权利要求1-45中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为任选取代的吡啶并吡啶。
61.根据权利要求1-45中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为任选取代的吡啶并嘧啶。
62.根据权利要求1-45中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为任选取代的吡啶并[3,4-d]嘧啶-2-基。
63.根据权利要求1-62中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A被选自氢、-CN、卤素、任选取代的C1-C4烷基、任选取代的C1-C6烯基、任选取代的C1-C6炔基、任选取代的C3-C7碳环基、任选取代的碳环基(烷基)、任选取代的杂环基、任选取代的杂环基(烷基)、任选取代的C1-C4烷氧基、任选取代的C6芳氧基、-NH2、-OH或任选取代的C1-C4氨基烷基的取代基任选地取代。
64.根据权利要求1-45中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A选自：
Figure FDA0003549429600000071
其中，
R15选自氢、卤素、-CN、任选取代的烷基、任选取代的氟烷基、任选取代的烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的环烷基-O-、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的芳氧基、任选取代的芳烷基氧基、任选取代的杂芳氧基、任选取代的杂芳烷基氧基、-OR22、-N(R22)2、-SO2R21、-N(R22)SO2R21、-SO2N(R22)2、–N(R22)SO2N(R22)2、-CON(R22)2、-N(R22)CO2R21、-N(R22)CON(R22)2、-N(R22)COR21、-OC(O)N(R22)2、-OSO2N(R22)2或-N(R22)SO3R21；
R16选自氢、卤素、-CN、任选取代的烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基、任选取代的氟烷基、任选取代的烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的环烷基-O-、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的杂芳基、任选取代的杂芳烷基、任选取代的芳氧基、任选取代的芳烷基氧基、任选取代的杂芳氧基、任选取代的杂芳烷基氧基、-OR22、-N(R22)2、-SO2R21、-N(R22)SO2R21、-SO2N(R22)2、–N(R22)SO2N(R22)2、-CON(R22)2、-N(R22)CO2R21、-N(R22)CON(R22)2、-N(R22)COR21、-OC(O)N(R22)2、-OSO2N(R22)2或-N(R22)SO3R21；
R17选自氢、卤素、-CN、任选取代的烷基、任选取代的氟烷基、任选取代的烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的环烷基-O-、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的芳氧基、任选取代的芳烷基氧基、任选取代的杂芳氧基、任选取代的杂芳烷基氧基、-OR22、-N(R22)2、-SO2R21、-N(R22)SO2R21、-SO2N(R22)2、-N(R22)SO2N(R22)2、-CON(R22)2、-N(R22)CO2R21、-N(R22)CON(R22)2、-N(R22)COR21、-OC(O)N(R22)2、-OSO2N(R22)2或-N(R22)SO3R21；
R18选自氢、卤素、-CN、任选取代的烷基、任选取代的氟烷基、任选取代的烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的环烷基-O-、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的杂芳基、任选取代的杂芳烷基、任选取代的芳氧基、任选取代的芳烷基氧基、任选取代的杂芳氧基、任选取代的杂芳烷基氧基、-OR22、-N(R22)2、-SO2R21、-N(R22)SO2R21、-SO2N(R22)2、-N(R22)SO2N(R22)2、-CON(R22)2、-N(R22)CO2R21、-N(R22)CON(R22)2、-N(R22)COR21、-OC(O)N(R22)2、-OSO2N(R22)2或-N(R22)SO3R21；
每个R21独立地选自烷基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂环基、杂环基烷基、杂芳基或杂芳基烷基；并且
每个R22独立地选自氢、烷基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂环基、杂环基烷基、杂芳基或杂芳基烷基。
65.根据权利要求64所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A是：
Figure FDA0003549429600000091
66.根据权利要求64所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A是：
Figure FDA0003549429600000092
67.根据权利要求64-66中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R15选自氢、卤素、-CN和任选取代的烷基。
68.根据权利要求64-66中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R15为氢。
69.根据权利要求64-68中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R16选自氢、卤素、-CN、任选取代的烷基、任选取代的氟烷基、任选取代的烷氧基、任选取代的环烷基、任选取代的杂环基、任选取代的环烷基烷基、任选取代的环烷基-O-、任选取代的芳基、任选取代的芳烷基、任选取代的杂芳基、任选取代的杂芳烷基、任选取代的芳氧基、任选取代的芳烷基氧基、任选取代的杂芳氧基、任选取代的杂芳烷基氧基、-OR22、-N(R22)2、-SO2R21、-N(R22)SO2R21、-SO2N(R22)2、–N(R22)SO2N(R22)2、-CON(R22)2、-N(R22)CO2R21、-N(R22)CON(R22)2、-N(R22)COR21、-OC(O)N(R22)2、-OSO2N(R22)2或-N(R22)SO3R21。
70.根据权利要求64-68中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R16选自氢、卤素、-CN和任选取代的烷基。
71.根据权利要求64-68中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R16是氢。
72.根据权利要求64-68中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R16选自任选取代的烷基、任选取代的烯基或任选取代的炔基。
73.根据权利要求64-68中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R16选自任选取代的炔基。
74.根据权利要求64所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为：
Figure FDA0003549429600000101
且R16不是氢。
75.根据权利要求64所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为：
Figure FDA0003549429600000102
且R16是卤素。
76.根据权利要求64所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为：
Figure FDA0003549429600000103
且R16选自任选取代的烷基、任选取代的烯基或任选取代的炔基。
77.根据权利要求64所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为：
Figure FDA0003549429600000104
R15为氢，R16选自任选取代的炔基，且R17为氢或任选取代的烷氧基。
78.根据权利要求64所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中环A为：
Figure FDA0003549429600000111
R15为氢，R16选自卤素、-CN、任选取代的烷基、任选取代的氟烷基、任选取代的烯基、任选取代的炔基，且R17为氢或任选取代的烷氧基。
79.根据权利要求64所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R17为氢。
80.根据权利要求64所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R18选自氢、卤素、-CN和任选取代的烷基。
81.根据权利要求64所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R18为氢。
82.根据权利要求64所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R15和R16为氢。
83.根据权利要求64所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R17和R18为氢。
84.根据权利要求64所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其中R15和R17为氢。
85.一种化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，其具有表1中列出的化合物的结构。
86.一种药物组合物，其包含根据权利要求1-85中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，以及药学上可接受的赋形剂。
87.一种制备药物组合物的方法，其包括将根据权利要求1-85中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐与药学上可接受的载体混合。
88.根据权利要求1-85中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗人或动物体的方法中。
89.根据权利要求1-85中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗癌症、赘生性疾病或过度增殖性病症的方法中。
90.根据权利要求1-85中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗癌症或赘生性疾病的药物中的用途。
91.一种治疗有需要的患者的疾病或病症的方法，其包括向所述患者施用根据权利要求1-85中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
92.一种治疗有需要的患者的癌症的方法，其包括向所述患者施用根据权利要求1-85中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物。
93.一种治疗有需要的患者的癌症的方法，其包括向所述患者施用药物组合物，所述药物组合物包含根据权利要求1-85中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，以及药学上可接受的赋形剂。
94.一种抑制CDK12酶的方法，其包括使所述酶与根据权利要求1-85中任一项所述的化合物接触。
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