CN114350534B - 一种酿酒酵母菌、育肥羊生物饲料及其制备方法与应用 - Google Patents
一种酿酒酵母菌、育肥羊生物饲料及其制备方法与应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供一种酿酒酵母菌、育肥羊生物饲料及其制备方法和应用,涉及动物饲料领域。本发明提供的酿酒酵母菌具体为酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)FMSW‑1,保藏编号为CGMCC No.23637。本发明还提供了所述的酿酒酵母菌在制备育肥羊生物饲料中的应用。酿酒酵母菌FMSW‑1能够通过代谢分解发酵底料中难消化的大分子物质,提高育肥羊生物饲料的消化吸收利用率,改善饲料营养价值。通过选择合理的发酵底料以及酿酒酵母菌FMSW‑1与乳酸片球菌复配发酵,能够提高动物日增重,增加采食量,降低料重比,同时能够改善动物肠道菌群,提高机体免疫力。
Description
技术领域
本发明涉及动物饲料领域,具体涉及一种酿酒酵母菌、育肥羊生物饲料及其制备方法和应用。
背景技术
生物饲料是指使用《饲料原料目录(2013)》和《饲料添加剂品种目录(2013)》等国家相关法规允许使用的饲料原料和添加剂,通过发酵工程、酶工程、蛋白质工程和基因工程等生物工程技术开发的饲料产品总称。生物饲料主要作用是改变胃肠道微生物群组成,使有益或无害微生物占据种群优势,通过竞争抑制病原或有害微生物的增殖,调节肠道微生态平衡。基于生物饲料在调节动物肠道微生物菌群中表现出的积极作用,目前已经广泛应用在多种类型动物的养殖实践中。
育肥羊生物饲料作为一种无抗养殖时代的绿色生物饲料,已受到广大养殖户和饲料企业的应用及关注。育肥羊生物饲料可以改善羊只瘤胃的发酵环境,调节消化道优势菌群及机体内微生物的平衡;能提高饲料的消化和利用效率,提升肉羊的生产性能和产品质量;能减少蛋白质向氨和胺的转化,降低粪便恶臭,改善环境卫生;还能提高羊只肠道内的免疫功能,及时杀死入侵病菌,增强羊只对疾病的免疫能力。
现有技术中育肥羊生物饲料按照饲料添加剂的不同主要分为三类:由饲料原料和微生物通过发酵工程技术生产的发酵饲料,由饲料原料和酶制剂通过酶工程技术生产的酶解饲料,由饲料原料、酶制剂和微生物通过发酵工程和酶工程技术协同作用生产的菌酶协同发酵饲料。发酵饲料通过添加微生物发酵制得,虽然引入了调节肠道的有益菌群,然而,由于用于育肥羊饲料中常用饲料原料大多为纤维类粗饲料,制备得到的发酵饲料粗纤维含量高,影响育肥羊对饲料中营养物质的消化吸收,降低育肥羊生长性能和屠宰性能。酶解饲料通过添加酶制剂能够对饲料中难消化分解的物质进行酶解,促进饲料中营养物质的消化利用,但是其缺乏调节肠道微生物菌群的作用。菌酶协同发酵饲料能够兼顾酶解作用和改善肠道菌群的作用,但是其需要添加多种饲料添加剂,这无疑增加了育肥羊生物饲料的成本。
提出一种能够同时兼顾提高育肥羊生物饲料营养物质含量作用和改善动物肠道菌群作用的发酵菌种,对于开发优质的育肥羊发酵饲料具有重要的现实意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种新的酿酒酵母菌,能够兼顾提高育肥羊生物饲料营养物质含量和改善动物肠道菌群的作用,从而提高动物生产性能和提高动物机体免疫力。
为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:
第一方面,本发明提供一种酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae) FMSW-1,于2021年10月21日,保藏于中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心,保藏单位地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏编号为CGMCC No.23637。
本发明提供的酿酒酵母菌FMSW-1来源于自酿葡萄酒采集样品,采集方法如下:采摘成熟后的山葡萄(沈阳丰美生物技术有限公司内种植),装入密封罐,加入山葡萄质量20%的白糖,于32℃下密封发酵50天,密封罐内有气泡产生并具有醇香味,接出适量酒液在麦芽汁琼脂培养基(麦芽膏粉130g/L,氯霉素0.1g/L,琼脂40g/L,其余为水,pH值5.6)中进行选择性分离培养,于37℃下培养48h后培养基表面长出乳白色、圆形、表面光滑、略微鼓起的菌落,随后选取菌落大且饱满的单菌落在麦芽汁琼脂培养基中进行传代培养,传至3~4代得到单一菌种,即酿酒酵母菌FMSW-1,进行显微镜观察,如图1所示。
第二方面,本发明提供所述的酿酒酵母菌在制备育肥羊生物饲料中的应用。
第三方面,本发明提供一种育肥羊生物饲料,包括所述的酿酒酵母菌。
进一步地,所述的育肥羊生物饲料,其原料包括发酵底料、水和复合菌液,所述复合菌液包括酿酒酵母菌菌液和乳酸片球菌菌液,其中,所述酿酒酵母菌菌液为权利要求1所述的酿酒酵母菌的菌液。
进一步地,所述乳酸片球菌菌液中,乳酸片球菌的保藏编号为CGMCC No.20658。
乳酸片球菌(pediococcus acidilacticii)来源于手工酸菜作坊采集样品,于2020年9月16日,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏单位地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏编号为 CGMCC No.20658。该菌种已经在申请号为202110416893.8,发明名称为“一种高消化率乳酸片球菌发酵湿豆粕及其制备方法”的专利文献中公开。
进一步地,按照重量份数计,其原料包括如下组分:发酵底料70~80 份、水15~25份和复合菌液5~15份,
进一步地,按照重量份数计,其原料包括如下组分:发酵底料70份、水20份和复合菌液10份。
进一步地,按照重量份数计,其原料包括如下组分:发酵底料70份、水25份和复合菌液5份。
进一步地,按照重量份数计,其原料包括如下组分:发酵底料70份、水15份和复合菌液15份。
进一步地,所述酿酒酵母菌菌液和乳酸片球菌菌液的质量比为5~7: 3~5。
进一步地,所述酿酒酵母菌菌液和乳酸片球菌菌液中的活菌数均为1.0 ×109~1.0×1010CFU/mL。
进一步地,所述酿酒酵母菌菌液的制备方法包括:将所述酿酒酵母菌按照1~10%接种量接种到麦芽汁液体培养基中,于32~38℃培养24~72h,活化2~3代。
进一步地,所述酿酒酵母菌菌液的制备方法包括:将所述酿酒酵母菌按照1%接种量接种到麦芽汁液体培养基中,于37℃培养24h,活化3代。
进一步地,所述乳酸片球菌菌液的制备方法包括:将所述乳酸片球菌按照1~10%接种量接种到MRS液体培养基中,于32~38℃培养24~72h,活化2~3代。
进一步地,所述乳酸片球菌菌液的制备方法包括:将所述乳酸片球菌按照1%接种量接种到MRS液体培养基中,于37℃培养24h,活化3代。
进一步地,所述麦芽汁液体培养基由如下组分组成:麦芽膏粉130g/L,氯霉素0.1g/L,其余为水,pH值5.4-5.8。
进一步地,所述MRS液体培养基由如下组分组成:酪蛋白酶消化物 10.0g/L、柠檬酸三铵2.0g/L、牛肉膏粉10.0g/L、硫酸镁0.2g/L、酵母膏粉4.0g/L、硫酸锰0.05g/L、乙酸钠5.0g/L、磷酸氢二钾2.0g/L、葡萄糖20.0g/L、吐温-80 1.08g/L,其余为水,pH值5.5-5.9。
进一步地,所述发酵底料包括质量比为3~5:2~4:3~4的压片玉米、麸皮和喷浆玉米皮。
进一步地,所述发酵底料包括质量比为4:3:3、3:4:4、5:2:3 中任一比例的压片玉米、麸皮和喷浆玉米皮。
第四方面,本发明提供所述育肥羊生物饲料的制备方法,包括以下步骤:将所述发酵底料、水和复合菌液混合后于32~38℃培养24~96h。
进一步地,将所述发酵底料、水和复合菌液混合后于37℃培养72h。
第五方面,本发明提供所述的育肥羊生物饲料或者所述的制备方法得到的育肥羊生物饲料在提高动物生产性能和/或提高动物机体免疫力中的应用。
本发明技术方案,具有如下优点:
本发明提供的酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)FMSW-1,能够通过代谢分解发酵底料中难消化的大分子物质,提高育肥羊生物饲料的消化吸收利用率,改善饲料营养价值。酿酒酵母菌FMSW-1相较于其他酿酒酵母菌能够显著提高饲料中活菌含量、粗蛋白含量、酸溶蛋白占比和总酸含量,同时能够显著降低粗纤维含量。对于氨基酸含量来说,酿酒酵母菌 FMSW-1相较于其他酿酒酵母菌制备的育肥羊生物饲料中必需氨基酸含量和风味氨基酸含量均有所提高,其中,必需氨基酸有利于提高动物生产性能,呈味氨基酸含量增加有助于改善饲料风味,增加动物摄食量。
本发明提供的育肥羊生物饲料,通过选择合理的发酵底料以及酿酒酵母菌FMSW-1与乳酸片球菌复配发酵,能够提高动物日增重,增加采食量,降低料重比,可间接提高经济效益。同时本发明提供的育肥羊生物饲料可降低粪便中肠道有害菌大肠杆菌的数量,提高粪便中肠道益生菌乳酸菌的数量,能够改善动物肠道菌群,提高机体免疫力。
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案,下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图是本发明的一些实施方式,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明提供的酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)FMSW-1 在显微镜下观察的图片。
具体实施方式
提供下述实施例是为了更好地进一步理解本发明,并不局限于所述最佳实施方式,不对本发明的内容和保护范围构成限制,任何人在本发明的启示下或是将本发明与其他现有技术的特征进行组合而得出的任何与本发明相同或相近似的产品,均落在本发明的保护范围之内。
本发明实施例中使用的乳酸片球菌(pediococcus acidilacticii)保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No.20658。
本发明实施例中麦芽汁液体培养基由如下组分组成:麦芽膏粉130g/L,氯霉素0.1g/L,其余为水,pH值5.4-5.8。
本发明实施例中MRS液体培养基由如下组分组成:酪蛋白酶消化物 10.0g/L、柠檬酸三铵2.0g/L、牛肉膏粉10.0g/L、硫酸镁0.2g/L、酵母膏粉 4.0g/L、硫酸锰0.05g/L、乙酸钠5.0g/L、磷酸氢二钾2.0g/L、葡萄糖20.0g/L、吐温-80 1.08g/L,其余为水,pH值5.5-5.9。
实施例中未注明具体实验步骤或条件者,按照本领域内的文献所描述的常规实验步骤的操作或条件即可进行。所用原料或仪器,均为可以通过市购获得的常规产品,包括但不限于本申请实施例中采用的原料或仪器。
实施例1
本实施例提供一种育肥羊生物饲料,其制备方法如下:
(1)制备复合菌液
将酿酒酵母菌FMSW-1按照1%接种量接种到麦芽汁液体培养基中,于 37℃培养24h进行活化,再将活化好的酿酒酵母菌种子液按照1%接种量接种到麦芽汁液体培养基中,于37℃培养24h,按照上述步骤共活化3代,检测活菌数可达109CFU/mL,得到酿酒酵母菌菌液;
将乳酸片球菌按照1%接种量接种到MRS液体培养基中,于37℃培养 24h进行活化,再将活化好的乳酸片球菌种子液按照1%接种量接种到MRS 液体培养基中,于37℃培养24h,按照上述步骤共活化3代,检测活菌数可达109CFU/mL,得到乳酸片球菌菌液;
将酿酒酵母菌菌液和乳酸片球菌菌液按照质量比1:1混合,得到复合菌液。
(2)制备发酵底料
将喷浆玉米皮和麸皮粉碎,压片玉米不进行粉碎,按照压片玉米、麸皮、喷浆玉米皮质量比4:3:3混合均匀,得到发酵底料。
(3)发酵
将制备好的发酵底料和复合菌液按照发酵底料70%、水20%、复合菌液10%混合后于37℃恒温发酵72h,得到育肥羊生物饲料。
实施例2
本实施例提供一种育肥羊生物饲料,其制备方法参照实施例1,不同之处仅在于,步骤(3)中,按照发酵底料70%、水25%、复合菌液5%混合。
实施例3
本实施例提供一种育肥羊生物饲料,其制备方法参照实施例1,不同之处仅在于,步骤(3)中,按照发酵底料70%、水5%、复合菌液15%混合。
实施例4
本实施例提供一种育肥羊生物饲料,其制备方法参照实施例1,不同之处仅在于,步骤(2)中,压片玉米、麸皮、喷浆玉米皮质量比为3: 4:4。
实施例5
本实施例提供一种育肥羊生物饲料,其制备方法参照实施例1,不同之处仅在于,步骤(2)中,压片玉米、麸皮、喷浆玉米皮质量比为5: 2:3。
对比例1
本对比例提供一种育肥羊生物饲料,其制备方法参照实施例1,不同之处仅在于,使用安琪酿酒酵母菌的菌液替代实施例1中的酿酒酵母菌菌液。
安琪酿酒酵母菌是耐高温酿酒高活性干酵母,购自安琪酵母股份有限公司,乳白色颗粒。称取1g溶于100mL灭菌水中,取100uL涂布于麦芽汁琼脂培养基(麦芽膏粉130g/L,氯霉素0.1g/L,琼脂40g/L,其余为水,pH值5.4~5.8)进行选择性分离培养,于37℃下培养48h后培养基表面长出乳白色、圆形、表面光滑、略微鼓起的菌落,随后选取菌落大且饱满的单菌落在麦芽汁琼脂培养基中进行传代培养,传至3~4代得到单一菌种,挑取单菌落接种量接种到麦芽汁液体培养基中,于37℃培养24h进行活化,再将活化好的酿酒酵母菌种子液按照1%接种量接种到麦芽汁液体培养基中,于37℃培养24h,按照上述步骤共活化3代,检测活菌数可达109CFU/mL,得到安琪酿酒酵母菌的菌液。
对比例2
本对比例提供一种育肥羊生物饲料,其制备方法参照实施例1,不同之处仅在于,使用广州微元酿酒酵母菌的菌液替代实施例1中的酿酒酵母菌菌液。
广州微元酿酒酵母菌,购自广州市微元生物科技有限公司,酵母菌粉、饲用活性干酵母,乳灰色颗粒。称取1g溶于100mL灭菌水中,取 100uL涂布于麦芽汁琼脂培养基(麦芽膏粉130g/L,氯霉素0.1g/L,琼脂 40g/L,其余为水,pH值5.4~5.8)进行选择性分离培养,于37℃下培养48h 后培养基表面长出乳白色、圆形、表面光滑、略微鼓起的菌落,随后选取菌落大且饱满的单菌落在麦芽汁琼脂培养基中进行传代培养,传至3~4代得到单一菌种,挑取单菌落接种量接种到麦芽汁液体培养基中,于37℃培养24h进行活化,再将活化好的酿酒酵母菌种子液按照1%接种量接种到麦芽汁液体培养基中,于37℃培养24h,按照上述步骤共活化3代,检测活菌数可达109CFU/mL,得到广州微元酿酒酵母菌的菌液。
实验例1
本实验例旨在对实施例1~5和对比例1~2制得的育肥羊生物饲料进行营养指标检测,包括:活菌总数、粗蛋白含量、酸溶蛋白占比、粗灰分、总酸含量、粗纤维含量以及17种氨基酸的含量。各指标的检测方法如下:
活菌总数的检测方法:
以无菌操作称取25g样品,置于装有225mL生理盐水的无菌均质杯内,于10000r/min均质2min,制成1:10样品匀液;用1mL无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1mL,沿管壁缓慢注于装有9mL生理盐水的无菌试管中,漩涡震荡充分混合均匀,制成1:100的样品匀液。另取1mL无菌吸管或微量移液器吸头,按上述操作顺序,做10倍递增样品匀液,每递增稀释一次,即换用1次1mL灭菌吸管或吸头。根据待检样品活菌总数的估计,选择3个连续的适宜稀释度,每个稀释度吸取0.1mL样品匀液分别置于2 个琼脂平板,使用L形棒进行表面涂布。翻转平皿置30±1℃培养箱中培养 48h后计算平板上的所有菌落数。从样品稀释到平板涂布尽量在30min内完成。
结果计算:
产品的活菌含量即检测得到的总活菌数。
根据菌落计数结果出具报告,称重取样以CFU/g为单位报告,体积取样以CFU/mL为单位报告。
粗蛋白含量的检测方法参照GB/T 6432-2018饲料中粗蛋白的测定-凯氏定氮法;
酸溶蛋白占比的检测方法参照NY/T 3801-2020饲料原料中酸溶蛋白的测定-酸溶蛋白/粗蛋白;
粗灰分的检测方法参照GB/T 6438-2007饲料中粗灰分的测定;
总酸含量的检测方法参照GB 12456-2021食品安全国家标准食品中总酸的测定;
粗纤维含量的检测方法参照GB/T 6434-2006饲料中粗纤维的含量测定-过滤法;
氨基酸含量的检测方法参照GB5009.235-2016食品安全国家标准食品中氨基酸态氮的测定-比色法。
作为对照,同时按照上述方法检测实施例1步骤(2)制备的发酵底料的营养指标。
实施例1、对比1~2的检测结果对比如表1所示,实施例1~3的检测结果对比如表2所示,实施例1、4~6的检测结果对比如表3所示。
表1实施例1、对比1~2的检测结果对比
如表1所示,实验结果表明,使用本发明提出的酿酒酵母菌FMSW-1 发酵制备育肥羊生物饲料,相较于发酵前的发酵底料粗蛋白含量提高 32.48%,酸溶蛋白占比提高32.9%,总酸含量提高81.4%,粗纤维含量降低 2%;使用本发明提出的酿酒酵母菌FMSW-1发酵制备育肥羊生物饲料,相较于使用现有技术中的安琪酿酒酵母菌、广州微元酿酒酵母菌发酵制备育肥羊生物饲料,显著提高了饲料的活菌总数、粗蛋白含量、酸溶蛋白占比、总酸含量,并且各氨基酸含量均有所提高,同时显著降低了饲料的粗纤维含量。其中,使用本发明提出的酿酒酵母菌FMSW-1发酵制备育肥羊生物饲料中,必需氨基酸含量和风味氨基酸含量均有所提高,必需氨基酸有利于提高动物生产性能,呈味氨基酸有利于改善饲料风味,从而增加动物摄食量。
表2实施例1~3的检测结果对比
如表2所示,实验结果表明,添加不同比例的复合菌液发酵对育肥羊生物饲料的营养指标具有影响,10%复合菌液处理后,其营养指标优化率高于5%和15%复合菌液发酵,虽然部分指标15%复合菌液接种发酵效果也同样良好,但出于成本考虑,选择10%复合菌液接种最为适宜。
表3实施例1、4~5的检测结果对比
如表3所示,实验结果表明,采用不同底物配比的发酵底料,制备得到的育肥羊生物发酵饲料之间营养指标存在差异,压片玉米、麸皮、喷浆玉米皮质量比为4:3:3时饲料营养最丰富,可满足动物营养需要,提高机体免疫力,其氨基酸组分含量最高,呈味氨基酸含量较高,有利于改善动物适口性。
实验例2
本实验例旨在研究本发明提供的育肥羊生物饲料对育肥羊生产性能和肠道菌群的影响。
本实验在育肥羊阶段进行,将体重在30公斤左右的育肥羊(吉林松原市乾安道子乡)150头,随机分为3组,每组5个重复,每个重复10只羊,分别为对照组、实验组1、实验组2,各组按如下方式进行饲喂:
对照组:饲喂育肥羊日粮。
实验组1:饲喂育肥羊日粮+实施例5制得的育肥羊生物饲料,育肥羊生物饲料的添加量为育肥羊日粮的10%。
实验组2:饲喂育肥羊日粮+实施例5制得的育肥羊生物饲料,育肥羊生物饲料的添加量为育肥羊日粮的20%。
每天饲喂育肥羊日粮+育肥羊生物饲料共计3公斤,分三次饲喂,每次饲喂一公斤,分别为早8:00、中午12:00、晚5:00;饲喂后自由采食2~ 3小时后记录采食量。实验周期30天。育肥羊日粮的组成及营养含量如表 4~5所示。
表4育肥羊日粮组成
原料 | 配比(%) |
玉米 | 44 |
玉米秸秆 | 17.5 |
DDGS | 24 |
豆粕(43) | 5 |
石粉 | 1 |
氯化铵 | 0.5 |
食盐 | 0.5 |
小苏打 | 0.5 |
大豆皮 | 7 |
合计 | 100 |
表5育肥羊日粮营养含量
营养指标 | 营养含量 |
消化能MJ/Kg | 90.13 |
灰分% | 6.2 |
粗蛋白% | 14.95 |
粗脂肪% | 5.10 |
中性洗涤纤维% | 29.90 |
酸性洗涤纤维% | 15.25 |
木质素% | 3.5 |
钙% | 0.5 |
磷% | 0.4 |
统计对照组和实验组1~2的育肥羊生产性能指标,采用SPSS 9.1(2003) 软件进行单因素方差分析(One-way ANOVA),结果用“平均值±标准差”表示,多重比较选择的方法是LSD,以P<0.01(差异极显著),P<0.05(差异显著)作为差异显著性判断标准,结果如表6所示。
表6对照组和实验组1~2的育肥羊生产性能指标结果
注:同行数据肩标相同小写字母表示差异不显著(P>0.05),肩标相邻小写字母表示差异显著(P<0.05),肩标相间小写字母表示差异极显著(P<0.01)。
如表6所示,添加育肥羊生物饲料可不同程度地提高日增重,增加采食量,降低料重比,其中添加量为20%时,料重比降低最多,可间接提高经济效益。
实验结束后检测育肥羊粪便中的大肠杆菌和乳酸菌数量,检测方法参照活菌总数检测方法,各组结果以组内均值的形式表示,结果如表7所示。
表7对照组和实验组1~2的育肥羊粪便微生物检测结果
组别 | 对照组 | 实验组1 | 实验组2 |
大肠杆菌(cfu/g) | 2.13×107 | 5.02×105 | 1.87×104 |
乳酸菌(cfu/g) | 5.47×105 | 6.88×107 | 4.01×108 |
如表7所示,添加育肥羊生物饲料可降低粪便中肠道有害菌大肠杆菌的数量,提高粪便中肠道益生菌乳酸菌的数量,由粪便微生物情况可间接表现肠道菌群的健康情况,说明饲喂育肥羊生物饲料可明显改善动物肠道菌群,提高机体免疫力。
显然,上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例,而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说,在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
Claims (13)
1. 一种酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae),其特征在于,所述酿酒酵母菌具体为酿酒酵母菌FMSW-1,保藏编号为CGMCC No.23637。
2.权利要求1所述的酿酒酵母菌在制备育肥羊生物饲料中的应用。
3.一种育肥羊生物饲料,其特征在于,包括权利要求1所述的酿酒酵母菌。
4.根据权利要求3所述的育肥羊生物饲料,其特征在于,其原料包括发酵底料、水和复合菌液,所述复合菌液包括酿酒酵母菌菌液和乳酸片球菌菌液,其中,所述酿酒酵母菌菌液为权利要求1所述的酿酒酵母菌的菌液。
5.根据权利要求4所述的育肥羊生物饲料,其特征在于,按照重量份数计,其原料包括如下组分:发酵底料70~80份、水15~25份和复合菌液5~15份。
6. 根据权利要求5所述的育肥羊生物饲料,其特征在于,按照重量份数计,其原料包括如下组分:
发酵底料70份、水20份和复合菌液10份,或者
发酵底料70份、水25份和复合菌液5份,或者
发酵底料70份、水15份和复合菌液15份。
7.根据权利要求4所述的育肥羊生物饲料,其特征在于,
所述乳酸片球菌菌液中,乳酸片球菌的保藏编号为CGMCC No.20658;
所述酿酒酵母菌菌液和乳酸片球菌菌液的质量比为5~7:3~5;
所述酿酒酵母菌菌液和乳酸片球菌菌液中的活菌数均为1.0×109~1.0×1010CFU/mL。
8.根据权利要求4所述的育肥羊生物饲料,其特征在于,
所述酿酒酵母菌菌液的制备方法包括:将所述酿酒酵母菌按照1~10%接种量接种到麦芽汁液体培养基中,于32~38℃培养24~72h,活化2~3代;
所述麦芽汁液体培养基由如下组分组成:麦芽膏粉130g/L,氯霉素0.1g/L,其余为水,pH值5.4-5.8;
所述乳酸片球菌菌液的制备方法包括:将所述乳酸片球菌按照1~10%接种量接种到MRS液体培养基中,于32~38℃培养24~72h,活化2~3代;
所述MRS液体培养基由如下组分组成:酪蛋白酶消化物10.0g/L、柠檬酸三铵2.0g/L、牛肉膏粉10.0g/L、硫酸镁0.2g/L、酵母膏粉4.0g/L、硫酸锰0.05g/L、乙酸钠5.0g/L、磷酸氢二钾2.0g/L、葡萄糖20.0g/L、吐温-80 1.08g/L,其余为水,pH值5.5-5.9。
9.根据权利要求4所述的育肥羊生物饲料,其特征在于,所述发酵底料包括质量比为3~5:2~4:3~4的压片玉米、麸皮和喷浆玉米皮。
10.根据权利要求9所述的育肥羊生物饲料,其特征在于,所述发酵底料包括质量比为4:3:3、3:4:4、5:2:3中任一比例的压片玉米、麸皮和喷浆玉米皮。
11.权利要求4~10任一项所述育肥羊生物饲料的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:将所述发酵底料、水和复合菌液混合后于32~38℃培养24~96h。
12.权利要求11所述育肥羊生物饲料的制备方法,其特征在于,将所述发酵底料、水和复合菌液混合后于37℃培养72h。
13.权利要求3~10任一项所述的育肥羊生物饲料或者权利要求11或12所述的制备方法得到的育肥羊生物饲料在制备提高动物生产性能和/或提高动物机体免疫力的产品中的应用。
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