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CN114209067B - 一种脱腥蜂蛹肽及其制备方法与应用 - Google Patents

一种脱腥蜂蛹肽及其制备方法与应用 Download PDF

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CN114209067B CN202111610512.6A CN202111610512A CN114209067B CN 114209067 B CN114209067 B CN 114209067B CN 202111610512 A CN202111610512 A CN 202111610512A CN 114209067 B CN114209067 B CN 114209067B
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Guangzhou Honsea Industry Co ltd
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Abstract

本发明公开了一种脱腥蜂蛹肽及其制备方法与应用。本发明通过采用索氏抽提法将蜂蛹冻干粉抽提脱脂,接着用蛋白酶酶解,对酶解液进行发酵脱腥,再用活性炭吸附脱腥,最后通过滤、超滤、纳滤除杂除盐制得精制的蜂蛹酶解液,喷雾干燥制得脱腥蜂蛹肽。该脱腥蜂蛹肽无腥味,能够用于保健品开发或功能性食品的蜂蛹肽原料,成本低廉,适合工业化生产。

Description

一种脱腥蜂蛹肽及其制备方法与应用
技术领域
本发明涉及一种蜂蛹肽类技术领域,特别涉及一种脱腥蜂蛹肽及其制备方法与应用。
背景技术
蜂蛹的营养丰富,成分组成比例合理,具有高蛋白、低脂肪,富含维生素A、维生素C、维生素E等对人体有重要意义的维生素和Zn、Ca、Fe等矿物质元素。蜂蛹的食用及药用历史悠久,公元前1200年前《尔雅》就有蜂蛹的相关记载。《神农本草经》认为蜂蛹具有强身健体、抗衰老、美容养颜的功效,曾有“蜂子为神仙长命药,主养命,久服多服不伤人,欲轻生益气,不老延年,主治头痛,除蛊毒,补虚赢伤中,久服令人光泽,好颜色不老”的记载。《本草纲目》中也记载蜜蜂幼虫主治除蛊虫,补虚赢中,丹毒风疹,腹内留热,利大小便涩,去浮血,下浮汁,妇人带下病。现代研究表明蜂蛹具有抗疲劳、增强免疫、抗肿瘤、抗氧化、抗衰老等的功效,此外对慢性炎症和免疫性炎症方面也具有明显的抑制作用。
随着现代社会生活节奏的逐步加快,人们生活和工作压力不断曾大,人们身体状况常处于亚健康状态。一方面,工作和生活的压力造成机体身体和精神上的疲惫,造成我们精神萎靡不振、记忆力下降、免疫力下降等;另一方面,不规律的生活习惯,容易造成生体机能紊乱,往往造成男性精子量和精子活力下降。根据现代研究表明蜂蛹在增加免疫、抗疲劳、抗氧化、抗衰老、改善男性生殖功能方面具备良好的生理功效,将其制备成生物活性肽形式将有利于提高其生物活性和生物利用度。
然而,蜂蛹经酶解后会使产品带来腥臭味等不良风味,对后续的产品开发利用带来不利影响,所以有必要对蜂蛹产品进行处理,使其风味能够被大众所接受。然而,腥味物质并不是指某一种单一的物质,它是由很多物质共同组成,组分比较复杂。专利申请CN201610171073.6公开一种无腥味的蜂产品保健酒及其制备方法,以蜂王胎或蜂蛹为原料,在-18~-22℃条件下将其破碎处理,向其中添加0.10-0.18%的复合酶,混合均匀,在真空度-0.05~0.07MPa、脱气5~8min的条件下对其进行单一的脱腥处理,可能存在脱腥效果不理想。专利CN202023006329.9公开了一种提取牡蛎肽用脱腥装置,其脱腥原理是采用臭氧发生器,臭氧通过出气口时推动遮挡盖发生转动,从而可以顺利排出到牡蛎汤液内进行脱腥处理,臭氧在水溶液中的分解速度快,随着温度升高,分解速度加快,该装置实现了通过臭氧对牡蛎进行脱腥处理。虽然臭氧脱腥法能够将其腥味物质氧化,使其结构发生改变,转化成腥味阈值更大的物质从而减轻腥味,但是其效果并不是很理想。
对于蜂蛹肽,目前还没有有效的脱腥处理方法。
发明内容
本发明的首要目的在于解决上诉现有技术的难点和不足之处,开发一种脱腥蜂蛹肽的制备方法。该脱腥方法采用串联脱腥技术顺序为先采用乙醚脱脂除去脂肪和部分腥味,然后酶解,采用微生物发酵法对蜂蛹酶解液进行初步脱腥处理,进而采用活性炭吸附法对蜂蛹酶解液进行进一步脱腥脱色处理,最后通过喷雾干燥后制得口感好,无腥味,能够用于保健品开发或功能性食品的蜂蛹肽原料,并且适合工业化生产,成本低廉。
本发明的另一目的在于提供上述制备方法制备得到的脱腥蜂蛹肽,解决现有蜂蛹产品中风味差,可接受度不甚理想,无法得到人们广泛欢迎的问题。
本发明通过下述技术方案来实现:
一种脱腥蜂蛹肽的制备方法,包括以下步骤:
(1)脱脂:蜂蛹冻干粉采用索氏抽提法除去脂肪,制得脱脂蜂蛹蛋白原料;
(2)蜂蛹酶解物制备:用水分散脱脂蜂蛹蛋白原料,制得蜂蛹蛋白浆;将蜂蛹蛋白浆升温至80~90℃,保温30~50min,使得蜂蛹蛋白分子充分的舒展;接着冷却,调节pH至7~9,加入蛋白酶进行酶解,在45~55℃条件下持续搅拌酶解4~8h,其中蛋白酶的添加量为脱脂蜂蛹蛋白原料质量的0.5%~1.5%,制得酶解液;
(3)灭酶、离心:将步骤(2)得到的酶解液升温灭酶,冷却后固液分离,得到的液体为蜂蛹酶解液;
(4)发酵脱腥:将步骤(3)得到的蜂蛹酶解液的pH调节至4~6,然后在持续搅拌下将蜂蛹酶解液的温度控制在30~40℃,接入菌种,菌种的接种量为0.5~2.5%,发酵0.5~1.5h;
(5)吸附脱腥:将步骤(4)发酵脱腥处理后的蜂蛹酶解液中加入活性炭,在30~50℃条件下保温并搅拌;
(6)分离精制:将经步骤(5)吸附处理后的蜂蛹酶解液经过板框压滤机过滤除去杂质制得清液,再通过超滤膜截留5kDa以下分子量,然后通过纳滤膜除去盐制得精制的蜂蛹酶解液;
(7)喷雾干燥:将步骤(6)得到的精制蜂蛹酶解液进行真空减压浓缩后,通过喷雾干燥制得脱腥蜂蛹肽。
步骤(1)中所述的蜂蛹冻干粉为雄蜂蛹冻干粉和蜂王胎冻干粉中的至少一种。
步骤(1)中所述的索氏抽提法中所用的溶剂优选为乙醚。
步骤(1)中所述的索氏抽提法中的抽提时间优选为1~3h。
步骤(1)中所述的水的用量优选按蜂蛹蛋白浆中蜂蛹蛋白为质量百分比5~15%计算。
所述的水优选为去离子水。
步骤(2)中所述的冷却的程度优选为冷却至55℃以下。
步骤(2)中所述的所述蛋白酶为风味蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶和胰蛋白酶中的至少一种;优选为碱性蛋白酶和中性蛋白酶的混合物;更优选为碱性蛋白酶和中性蛋白酶按质量比1~2:1:2混合得到的复合酶。
步骤(3)中所述的灭酶的条件优选为于80~90℃保温30~40min;更优选为于80~90℃保温35~40min。
步骤(3)中所述的冷却的程度优选为冷却至40℃以下。
步骤(3)中所述的固液分离的方式优选为离心。
所述的离心的条件优选为于3500~4500rpm离心15~25min;更优选为于4000rpm离心20分钟。
步骤(4)中所述的菌种为瑞士乳杆菌、保加利亚乳杆菌、嗜热乳杆菌和酵母中至少一种。
所述的酵母优选为高活性干酵母。
步骤(5)所述的活性炭的添加量优选为蜂蛹酶解液质量的1~3%。
步骤(5)中所述的活性炭优选为200目的活性炭。
步骤(5)中所述的搅拌的时间优选为1~3h。
步骤(7)中所述的喷雾干燥的温度优选为:进口温度是165~190℃,出口温度是70~90℃;更优选为:进口温度是165~190℃,出口温度是70~80℃。
一种脱腥蜂蛹肽,通过上述制备方法得到。
上述脱腥蜂蛹肽在食品领域中的应用。
一种脱腥蜂蛹肽食品组合物,含有上述脱腥蜂蛹肽。
所述的脱腥蜂蛹肽食品组合物优选包括如下按质量百分比计算的成分:脱腥蜂蛹肽25~35%、重瓣玫瑰花粉4~8%、针叶樱桃提取物4~8%、黄精提取物4~8%和辅料41~63%;更优选包括如下按质量百分比计算的成分:脱腥蜂蛹肽25~35%、重瓣玫瑰花粉4~6%、针叶樱桃提取物4%、黄精提取物4%和辅料53~63%。
所述的辅料是依据所需剂型所运用的辅料,优选为山梨糖醇、抗性糊精、硬脂酸镁和食用香精中的至少一种;更优选为山梨糖醇:抗性糊精:硬脂酸镁:食用香精按质量比30~40:11.8~31.8:1:0.2复配得到。
上述脱腥蜂蛹肽食品组合物的制备方法,包括如下步骤:
(A)过筛:将脱腥蜂蛹肽、针叶樱桃提取物、重瓣红玫瑰花粉、黄精提取物和辅料分别过筛;
(B)混合:称取过筛后的脱腥蜂蛹肽、针叶樱桃提取物、重瓣红玫瑰花粉、黄精提取物和辅料混合,得到脱腥蜂蛹肽食品组合物。
上述脱腥蜂蛹肽食品组合物的制备方法,还包括如下步骤:
(C)制剂:将步骤(B)制得的混合料制成所需剂型。
步骤(A)中所述的辅料是依据所需剂型所运用的辅料,优选为山梨糖醇、抗性糊精、硬脂酸镁和食用香精中的至少一种;更优选为山梨糖醇:抗性糊精:硬脂酸镁:食用香精按质量比30~40:11.8~31.8:1:0.2复配得到。
步骤(A)中所述的过筛优选为过60~80目筛。
步骤(B)中所述的混合的条件优选为于10~30r/min混合50~70min。
步骤(C)中所述的剂型优选为片剂、胶囊、粉剂、软糖或口服液。
所述的片剂的压片条件优选为:糖单片剂规格为0.5~0.7g/片,调节压片机参数分别将压片厚度设置为1.9~2.1mm,预压厚度设置为4.8~5.0mm,填充深度设置为8.3~8.5mm,将环境湿度控制在60%以下。
与现有技术相比,本发明的有益效果表现为:
本发明旨在解决现有蜂蛹产品中风味差,可接受度不慎理想,无法得到人们得到人们广泛欢迎的问题。本发明在采用串联脱腥技术顺序为先采用乙醚脱脂除去脂肪和部分腥味,然后采用微生物发酵法对蜂蛹酶解液进行初步脱腥处理,进而采用活性炭吸附法对蜂蛹酶解液进行进一步脱腥脱色处理,最后通过喷雾干燥后制得口感好,无腥味,能够用于保健品开发或功能性食品的蜂蛹肽原料,并且适合工业化生产,成本低廉;并且本发明还通过脱腥处理制备的蜂蛹为原料,提供一种食品组合物的制备方法,制得的产品风味良好,可接受度高。本发明可实现蜂蛹产品精深加工提高附加值,扩大蜂蛹原料的使用范围,提高相关企业的经济效益,促进行业的良性发展。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述,但本发明的实施方式不限于此。具体实施方式中所用的物质如无额外注明来源,则与注明来源的物质是同一物质。
实施例1
一种脱腥蜂蛹肽及脱腥蜂蛹肽食品组合物的制备方法,包括以下质量百分比计算的成分:山梨糖醇(P60,罗盖特)30%、脱腥蜂蛹肽25%、抗性糊精31.8%(FB-06S,罗盖特)、针叶樱桃提取物(纳图瑞克斯)4%、重瓣红玫瑰花粉(FY-EF120,杭州径山神龙茶业有限公司)4%、黄精提取物(汉中天然谷生物科技有限公司)4%、硬脂酸镁1%、食用香精0.2%,其制备步骤如下:
(1)脱脂:雄蜂蛹冻干粉以乙醚为溶剂采用索氏抽提法抽提1h除去脂肪,制得脱脂蜂蛹蛋白原料。
(2)酶解:将脱脂蜂蛹蛋白原料加入去离子水分散,制得蜂蛹蛋白浆,其中脱脂蜂蛹蛋白原料为质量百分比5%;升温至80℃,并保持30min使得蛋白分子充分舒展,冷却至45℃,用氢氧化钠溶液调节pH至7.0,加入碱性蛋白酶(Alcalase2.4L,诺维信)与中性蛋白酶(Neutrase0.8L,诺维信)按质量比2:1复配得到的复合酶,添加量为脱脂蜂蛹蛋白原料质量的0.5%,在45℃条件下持续搅拌酶解4h,制得酶解液。
(3)灭酶、离心:将步骤(2)得到的酶解液升温至80℃灭酶,维持35min,冷却至30℃后,4000rpm离心20分钟,取上清,得蜂蛹酶解液。
(4)发酵脱腥:将步骤(3)得到的蜂蛹酶解液的pH调节至4.0,然后置于水浴锅中加热保温并不断持续搅拌,温度控制在30℃,加入相当于蜂蛹酶解液0.5%(w/w)的酵母(高活性干酵母粉,安琪酵母股份有限公司),发酵0.5h。
(5)吸附脱腥:在发酵脱腥处理后的蜂蛹酶解液中加入相当于蜂蛹酶解液1%(w/w)的活性炭(200目),继续在30℃条件下保温并不断搅拌1h。
(6)分离精制:将经吸附脱腥处理后的蜂蛹酶解液经过板框压滤机过滤除去杂质制得清液,再通过超滤膜截留5kDa以下分子量,而后通过纳滤膜除去盐制得精制的蜂蛹酶解液。
(7)喷雾干燥:将步骤(6)得到的精制的蜂蛹酶解液进行真空减压浓缩后,浓缩液经过喷雾干燥塔,进口温度165℃,出口温度70℃,干燥制得脱腥蜂蛹肽。
(8)过筛:将山梨糖醇、脱腥蜂蛹肽、抗性糊精、针叶樱桃提取物、重瓣红玫瑰花粉、黄精提取物、硬脂酸镁分别过60目筛。
(9)混合:按照配方质量比例称取过筛后的山梨糖醇、脱腥蜂蛹肽、抗性糊精、针叶樱桃提取物、重瓣红玫瑰花粉、黄精提取物、硬脂酸镁,投入三维混合机中进行混料,混合转速控制10r/min,混合50min,制得混合料。
(10)压片:将步骤(9)得到的混合料投放至压片机中,压片糖单片剂规格为0.5g/片,调节压片机参数分别将压片厚度设置为1.9mm,预压厚度设置为4.8mm,填充深度设置为8.3mm,并将环境湿度控制在60%以下。
实施例2
一种脱腥蜂蛹肽及脱腥蜂蛹肽食品组合物的制备方法,包括以下质量百分比计算的成分:山梨糖醇35%、脱腥蜂蛹肽30%、抗性糊精19.8%、针叶樱桃提取物4%、重瓣红玫瑰花粉6%、黄精提取物4%、硬脂酸镁1%、食用香精0.2%,其制备步骤如下:
(1)脱脂:雄蜂蛹冻干粉以乙醚为溶剂采用索氏抽提法抽提2h除去脂肪,制得脱脂蜂蛹蛋白原料。
(2)酶解:将脱脂蜂蛹蛋白原料加入去离子水分散,制得蜂蛹蛋白浆,其中蜂蛹蛋白质量百分比为10%;升温至85℃,并保持40min使得蛋白分子充分舒展,冷却至50℃,用氢氧化钠溶液调节pH至8.0,加入碱性蛋白酶与中性蛋白酶按质量比1:1复配得到的复合酶,添加量为脱脂蜂蛹蛋白原料质量的1%,在50℃条件下持续搅拌酶解6h,制得酶解液。
(3)灭酶、离心:将步骤(2)得到的酶解液升温至85℃灭酶,维持35min,冷却至35℃后,4000rpm离心20分钟,取上清,得蜂蛹酶解液。
(4)发酵脱腥:将步骤(3)得到的蜂蛹酶解液的pH调节至5.0,然后置于水浴锅中加热保温并不断持续搅拌,温度控制在35℃,加入1.5%(w/w)的酵母,发酵1h。
(5)吸附脱腥:在发酵脱腥处理后的蜂蛹酶解液中加入2%(w/w)的活性炭,继续在40℃条件下保温并不断搅拌2h。
(6)分离精制:将经吸附脱腥处理后的蜂蛹酶解液经过板框压滤机过滤除去杂质制得清液,再通过超滤膜截留5kDa以下分子量,而后通过纳滤膜除去盐制得精制的蜂蛹酶解液。
(7)喷雾干燥:将步骤(6)得到的精制的蜂蛹酶解液进行真空减压浓缩后,浓缩液经过喷雾干燥塔,进口温度175℃,出口温度80℃,干燥制得脱腥蜂蛹肽。
(8)过筛:将山梨糖醇、脱腥蜂蛹肽、抗性糊精、针叶樱提取物、重瓣红玫瑰花粉、黄精提取物、硬脂酸镁分别过70目筛。
(9)混合:按照配方质量比例称取过完筛后的山梨糖醇、脱腥蜂蛹肽、抗性糊精、针叶樱提取物、重瓣红玫瑰花粉、黄精提取物、硬脂酸镁,投入三维混合机中进行混料,混合转速控制20r/min,混合60min,制得混合料。
(10)压片:将步骤(9)得到的混合料投放至压片机中,压片糖单片剂规格为0.6g/片,调节压片机参数分别将压片厚度设置为2.0mm,预压厚度设置为4.9mm,填充深度设置为8.4mm,并将环境湿度控制在60%以下。
实施例3
一种脱腥蜂蛹肽及脱腥蜂蛹肽食品组合物的制备方法,包括以下质量百分比计算的成分:山梨糖醇40%、脱腥蜂蛹肽35%、抗性糊精11.8%、针叶樱桃提取物4%、重瓣红玫瑰花粉4%、黄精提取物4%、硬脂酸镁1%、食用香精0.2%,其制备步骤如下:
(1)脱脂:雄蜂蛹冻干粉以乙醚为溶剂采用索氏抽提法抽提3h除去脂肪制得脱脂蜂蛹蛋白原料。
(2)酶解:将脱脂蜂蛹蛋白原料加入去离子水分散,制得蜂蛹蛋白浆,其中蜂蛹蛋白质量百分比为15%;升温至90℃,并保持50min使得蛋白分子充分舒展,冷却至55℃,用氢氧化钠溶液调节pH至9,加入碱性蛋白酶与中性蛋白酶按质量比1:2复配得到的复合酶,添加量为脱脂蜂蛹蛋白原料质量的1.5%,在55℃条件下持续搅拌酶解8h,制得酶解液。
(3)灭酶、离心:将步骤(2)得到的酶解液升温至90℃灭酶,维持40min,冷却至40℃后,4000rpm离心20分钟,取上清,得蜂蛹酶解液。。
(4)发酵脱腥:将步骤(3)得到的蜂蛹酶解液的pH调节至6.0,然后置于水浴锅中加热保温并不断持续搅拌,温度控制在40℃,加入2.5%(w/w)的酵母,发酵1.5h。
(5)吸附脱腥:在发酵脱腥处理后的蜂蛹酶解液中加入3%(w/w)的活性炭,继续在50℃条件下保温并不断搅拌3h。
(6)分离精制:将经吸附脱腥处理后的蜂蛹酶解液经过板框压滤机过滤除去杂质制得清液,再通过超滤膜截留5kDa以下分子量,而后通过纳滤膜除去盐制得精制的蜂蛹酶解液。
(7)喷雾干燥:将步骤(6)得到的精制的蜂蛹酶解液进行真空减压浓缩后,浓缩液经过喷雾干燥塔,进口温度190℃,出口温度80℃,干燥制得脱腥蜂蛹肽。
(8)过筛:将山梨糖醇、脱腥蜂蛹肽、抗性糊精、针叶樱桃提取物、重瓣红玫瑰花粉、黄精提取物、硬脂酸镁分别过80目筛。
(9)混合:按照配方质量比例称取过筛后的山梨糖醇、脱腥蜂蛹肽、抗性糊精、针叶樱桃提取物、重瓣红玫瑰花粉、黄精提取物、硬脂酸镁,投入三维混合机中进行混料,混合转速控制30r/min,混合70min,制得混合料。
(10)压片:将步骤(9)得到的混合料投放至压片机中,压片糖单片剂规格为0.7g/片,调节压片机参数分别将压片厚度设置为2.1mm,预压厚度设置为5.0mm,填充深度设置为8.5mm,并将环境湿度控制在60%以下。
实施例4
与实施例1比较区别在于复合酶为木瓜蛋白酶(南宁东恒华道生物科技有限责任公司)和风味蛋白酶(Flavourzyme1000L,诺维信)按质量比2:1复配得到的复合酶。
实施例5
与实施例2比较区别在于加入1.5%(w/w)的保加利亚乳杆菌(L.bulgaricus,山东菌乐生物科技有限公司)进行发酵。
实施例6
与实施例3比较,区别在于复合酶为木瓜蛋白酶和风味蛋白酶按质量比1:2复配得到的复合酶,加入保加利亚乳杆菌进行发酵。
对比例1
与实施例2比较,区别在于酶解所用的酶为碱性蛋白酶,添加量为脱脂蜂蛹蛋白原料质量的1%。
对比例2
与实施例2比较,区别在于酶解所用的酶为中性蛋白酶,添加量为脱脂蜂蛹蛋白原料质量的1%。
效果实施例
1、由10名食品专业人士构成的小组,采用表1和表2对实施例1~6制备得到的脱腥蜂蛹肽和脱腥蜂蛹肽食品组合物进行感官评分,取平均分,结果如表3所示。
2、采用GB/T5009.5规定的方法测定蛋白含量;采用GB/T22492-2008附录A高效凝胶过滤色谱法分析蜂蛹肽中小于1000Da肽占比。试验结果如表3所示。
表1脱腥蜂蛹肽风味评价标准
表2脱腥蜂蛹肽食品组合物产品风味评价标准
表3蜂蛹肽及蜂蛹肽食品组合物试验结果表
由表3可知,该脱腥方法采用串联脱腥技术顺序为先采用乙醚脱脂除去脂肪和部分腥味,然后酶解,采用微生物发酵法对蜂蛹酶解液进行初步脱腥处理,进而采用活性炭吸附法对蜂蛹酶解液进行进一步脱腥脱色处理,喷雾干燥后制得蜂蛹肽在制备蜂蛹肽食品组合物时具有较好的风味和接受度。实施例4中除了酶解的复合酶与实施例1不同外其他条件均一致,小分子肽占比略有一定比例的下降;实施例5与实施例2比较采用不同的菌种进行发酵,产品感官得分略有下降,而实施例6相较于实施例3采用不同的复合酶酶解与不同菌种发酵,产品小分子肽占比和产品感官得分方面均略有下降。从对比例1和对比例2可知,碱性蛋白酶和中性蛋白酶复合酶解的效果比单酶酶解效果优。可见,本发明中,酶解所使用的酶和发酵所用的菌种是有机的组合。
以上所述仅为本发明较佳的具体实施方式,但是本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明披露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种脱腥蜂蛹肽的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)脱脂:蜂蛹冻干粉采用索氏抽提法除去脂肪,制得脱脂蜂蛹蛋白原料;
(2)蜂蛹酶解物制备:用水分散脱脂蜂蛹蛋白原料,制得蜂蛹蛋白浆;将蜂蛹蛋白浆升温至80~90℃,保温30~50 min,使得蜂蛹蛋白分子充分的舒展;接着冷却,调节pH至7~9,加入蛋白酶进行酶解,在45~55℃条件下持续搅拌酶解4~8 h,其中蛋白酶的添加量为脱脂蜂蛹蛋白原料质量的0.5%~1.5%,制得酶解液;
(3)灭酶、离心:将步骤(2)得到的酶解液升温灭酶,冷却后固液分离,得到的液体为蜂蛹酶解液;
(4)发酵脱腥:将步骤(3)得到的蜂蛹酶解液的pH调节至4~6,然后在持续搅拌下将蜂蛹酶解液的温度控制在30~40℃,接入菌种,菌种的接种量为0.5~2.5%,发酵0.5~1.5 h;
(5)吸附脱腥:将步骤(4)发酵脱腥处理后的蜂蛹酶解液中加入活性炭,在30~50℃条件下保温并搅拌;
(6)分离精制:将经步骤(5)吸附处理后的蜂蛹酶解液经过板框压滤机过滤除去杂质制得清液,再通过超滤膜截留5 kDa以下分子量,然后通过纳滤膜除去盐制得精制的蜂蛹酶解液;
(7)喷雾干燥:将步骤(6)得到的精制蜂蛹酶解液进行真空减压浓缩后,通过喷雾干燥制得脱腥蜂蛹肽;
步骤(2)中所述蛋白酶为碱性蛋白酶和中性蛋白酶按质量比1~2:1~2混合得到的复合酶;
步骤(4)中所述的菌种为酵母。
2.根据权利要求1所述的脱腥蜂蛹肽的制备方法,其特征在于:
所述的酵母为高活性干酵母。
3.根据权利要求1所述的脱腥蜂蛹肽的制备方法,其特征在于:
步骤(1)中所述的蜂蛹冻干粉为雄蜂蛹冻干粉和蜂王胎冻干粉中的至少一种;
步骤(1)中所述的索氏抽提法中所用的溶剂为乙醚;
所述的水为去离子水;
步骤(5)中所述的活性炭为200目的活性炭;
步骤(2)中所述的水的用量按蜂蛹蛋白浆中蜂蛹蛋白为质量百分比5~15%计算;
步骤(5)所述的活性炭的添加量为蜂蛹酶解液质量的1~3%。
4.根据权利要求1所述的脱腥蜂蛹肽的制备方法,其特征在于:
步骤(1)中所述的索氏抽提法中的抽提时间为1~3h;
步骤(2)中所述的冷却的程度为冷却至55℃以下;
步骤(3)中所述的灭酶的条件为于80~90℃保温30~40 min;
步骤(3)中所述的冷却的程度为冷却至40℃以下;
步骤(3)中所述的固液分离的方式为离心;
步骤(5)中所述的搅拌的时间1~3 h;
步骤(7)中所述的喷雾干燥的温度为:进口温度是165~190℃,出口温度是70~90℃。
5.一种脱腥蜂蛹肽,其特征在于:通过权利要求1~4任一项所述的制备方法得到。
6.权利要求5所述的脱腥蜂蛹肽在食品领域中的应用。
7.一种脱腥蜂蛹肽食品组合物,其特征在于:含有权利要求5所述的脱腥蜂蛹肽。
8.根据权利要求7所述的脱腥蜂蛹肽食品组合物,其特征在于包括如下按质量百分比计算的成分:脱腥蜂蛹肽25~35%、重瓣玫瑰花粉4~8%、针叶樱桃提取物4~8%、黄精提取物4~8%和辅料41~63%。
9.根据权利要求8所述的脱腥蜂蛹肽食品组合物,其特征在于:所述的辅料为山梨糖醇、抗性糊精、硬脂酸镁和食用香精中的至少一种。
10.权利要求8所述的脱腥蜂蛹肽食品组合物的制备方法,其特征在于包括如下步骤:
(A)过筛:将脱腥蜂蛹肽、针叶樱桃提取物、重瓣红玫瑰花粉、黄精提取物和辅料分别过筛;
(B)混合:称取过筛后的脱腥蜂蛹肽、针叶樱桃提取物、重瓣红玫瑰花粉、黄精提取物和辅料混合,得到脱腥蜂蛹肽食品组合物。
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