CN113624700B - 一种检测对硝基苯酚的方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于分析化学检测技术领域，具体涉及一种检测对硝基苯酚的方法。本发明的方法采用紫外‑可见分光光度法检测，其在助色剂下进行对硝基苯酚的检测，检测波长为400nm；所述助色剂为氢氧化钠溶液、Na₂CO₃溶液、碳酸钾溶液、氢氧化钾溶液、硫酸镁溶液、氯化钾溶液、氨水中的一种或几种，所述助色剂的浓度为0.1‑1M。本发明实现了对硝基苯酚简单、快速、高灵敏检测，该方法可以有效屏蔽待测样本中农药类污染物的干扰，提升了对硝基苯特异性定量分析，具有重要的研究意义和应用价值。

Description

一种检测对硝基苯酚的方法

技术领域

本发明属于分析化学检测技术领域，具体涉及一种检测对硝基苯酚的方法。

背景技术

芳香酚类污染物是环境体系中一类重要的污染物，能够对环境微生态产生危害作用。对硝基苯酚常被用作指示剂和用于有机合成中，该物质在水中微溶，但可溶解在乙醇、乙醚、苯中。有关的毒理研究表明，对硝基苯酚能对生物细胞产生的一定的毒害作用，因此对环境微生物、水生动物、人体健康等都产生影响。

目前，常用的对硝基苯酚检测方法主要是采用气相色谱-质谱法、液相色谱法-质谱法，具有灵敏度高、准确性好等优点。紫外-可见吸收光谱法是根据分子对特定范围波长的吸收特性所建立起来的一种定性、定量分析方法，与其他大型色谱仪器分析方法相比，紫外-可见吸收光谱法具有价格低廉，操作简单、准确度高、重现性好的优点，在很多领域有着十分广泛的应用，如水果品质分析、水质分析、食品中营养成分测定、污染物界面作用研究等。

但研究发现，环境体系中农药的存在会对对硝基苯酚的紫外-可见吸收光谱法检测产生干扰，无法用于实际样品分析，限制了其应用范围。此外，目前常规紫外-可见吸收光谱法检测对硝基苯酚灵敏度也不高，因此，如何进一步提升对硝基苯酚检测的精准度，提高紫外-可见吸收光谱法的检测灵敏度、特异性，对环境中对硝基苯酚污染定量检测及健康安全科学评估具有重要意义。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明提供了一种对硝基苯酚高灵敏、特异性的测定方法。

具体地，本发明的技术方案如下：

一种检测对硝基苯酚的方法，采用紫外-可见分光光度法检测，其在助色剂下进行对硝基苯酚的检测，检测波长为400nm；所述助色剂为氢氧化钠溶液、Na₂CO₃溶液、碳酸钾溶液、氢氧化钾溶液、硫酸镁溶液、氯化钾溶液、氨水中的一种或几种，所述助色剂的浓度为0.1-1M。

优选，所述助色剂为氢氧化钠、Na₂CO₃和硫酸钠的水溶液，总浓度为2.5-6.0mg/mL，其中氢氧化钠、Na₂CO₃和硫酸钠的质量比为(4-8):1:1。

更优选，所述助色剂为氢氧化钠、Na₂CO₃和硫酸钠的水溶液，总浓度为4.5mg/mL，其中氢氧化钠、Na₂CO₃和硫酸钠的质量比为8:1:1。

本发明经研究发现，本发明的特定助色剂体系，可以实现对硝基苯酚特征吸收峰的增色效果，有效提升对硝基苯酚的吸收峰强度，有利于提高检测的准确度，降低了检测的检测限；吸收峰发生红移，有利于提升特异性。且仅通过一次单波长测量，即可实现准确检测的效果，提高了检测效率。

本发明的方法，其包括：

(1)配置助色剂；

(2)在所述助色剂中加入含对硝基苯酚的待测物后进行检测；孵育体系的时间为0-240s。

本发明的方法，其还可以为：

(1)配置含有不同浓度对硝基苯酚的助色剂；

(2)分别进行紫外-可见分光光度法检测，根据检测结果绘制标准曲线；

(3)在所述助色剂中加入含对硝基苯酚的待测物后进行检测；

(4)根据步骤(2)绘制的标准曲线计算出待测物中对硝基苯酚的浓度。

本发明检测方法具体过程包括：

a)用超纯水配制助色剂(记为A液)，用漩涡仪混匀，室温密封备用；

b)取适量A液加入到离心管中，将含对硝基苯酚待测物加入到上述离心管中，用漩涡仪混匀，置于室温(记为B液)；孵育体系的时间为0-240s。

c)以紫外-可见分光光度法在400nm下进行检测。

本发明还提供了一种对硝基苯酚的紫外-可见分光光度法检测方法，具体步骤包括：

a)取上述A液配制不同浓度的对硝基苯酚溶液；

b)将a)液分别进行紫外-可见分光光度法检测，根据测定结果绘制标准曲线；

c)取待测液B液3000μL进行紫外-可见分光光度法检测；

d)根据b)绘制的标准曲线计算B液中对硝基苯酚的浓度。

本发明还提供一种助色剂在检测对硝基苯酚中的应用，所述助色剂为氢氧化钠溶液、Na₂CO₃溶液、碳酸钾溶液、氢氧化钾溶液、硫酸镁溶液、氯化钾溶液、氨水中的一种或几种，所述助色剂的浓度为0.1-1M。

优选，所述助色剂为氢氧化钠、Na₂CO₃和硫酸钠的水溶液，总浓度为2.5-6.0mg/mL，其中氢氧化钠、Na₂CO₃和硫酸钠的质量比为(4-8):1:1。

更优选，所述助色剂为氢氧化钠、Na₂CO₃和硫酸钠的水溶液，总浓度为4.5mg/mL，其中氢氧化钠、Na₂CO₃和硫酸钠的质量比为8:1:1。

本发明的有益效果：

本发明方法有利于提高检测的准确度，降低了检测的检测限；吸收峰发生红移，有利于提升特异性。可以有效屏蔽待测样本中农药类污染物的干扰。仅通过一次单波长检测即可获得更加准确的检测结果，提升了检测效率。

本发明中的助色剂具有原料便宜、无污染，环境友好的优点，其配制简单，使用方便。

附图说明

图1为对比例1中的标准曲线。

图2为实施例3中的标准曲线。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的优选实施方式进行详细说明。需要理解的是以下实施例的给出仅是为了起到说明的目的，并不是用于对本发明的范围进行限制。本领域的技术人员在不背离本发明的宗旨和精神的情况下，可以对本发明进行各种修改和替换。若未特别指明，实施例中所用的技术手段均为本领域技术人员所熟知的常规手段。

实施例1

本实施例为比较本发明的助色剂方案(a)和其他助色剂方案在效果上的差异。进行各助色剂配置，具体如下：

(a)称取0.36g氢氧化钠，0.045g Na₂CO₃，0.045g硫酸钠，然后用超纯水溶解，定容至100ml，混匀、静置备用；

(b)称取0.004g氢氧化钠，0.2g氯化钾，然后用超纯水溶解，定容至100ml，混匀、静置备用；

(c)称取0.0001g碳酸钠，0.08g硫酸钠，然后用超纯水溶解，定容至100ml，混匀、静置备用；

(d)称取0.1mg碳酸氢钠，硫酸钠0.08g，然后用超纯水溶解，定容至100ml，混匀、静置备用；

(e)称取0.04g氢氧化钠，然后用超纯水溶解，定容至100ml，混匀、静置备用。

实施例2

本实施例使用实施例1中配制的助色剂(a)、(b)、(c)、(d)、(e)及(f)10mM磷酸缓冲液分别配置对硝基苯酚浓度为7.2μM的溶液，进行紫外-可见吸收光谱400nm处特征吸收峰(Abs)检测。具体将对硝基苯酚与助色剂分别混合，孵育120s后进行检测。结果见表1。

表1不同助色剂检测结果

结果表明，本发明助色剂(a)对对硝基苯酚具有较强的助色作用，400nm处特征吸收峰强度，可以显著增强。

对比例1

用超纯水配制不同浓度(10，25，30，40，50ppb)的对硝基苯酚溶液，并在315nm处进行紫外-可见分光光度法测定，根据测定结果绘制标准曲线，如图1。

结果表明，未使用助色剂制备的对硝基苯酚溶液在315nm处进行标准曲线测定，在25-50ppb范围内具有较好的线性关系，但灵敏度较低，检测限为10ppb。

实施例3

用上述实施例1中配制的助色剂(a)分别配制不同浓度(1，5，10，50，100，250，400，800，1000ppb)的对硝基苯酚溶液，并在400nm处进行紫外-可见分光光度法测定，孵育体系的时间为120s。根据测定结果绘制标准曲线，如图2。

结果表明，使用助色剂(a)制备的对硝基苯酚溶液进行标准曲线测定，在1-1000ppb范围内具有较好的线性关系(R²＝0.999)，并具有较高的灵敏度，检测限达到1ppb。

实施例4

使用实施例1中配制的助色剂(a)配制4μΜ对硝基苯酚、4μM啶虫脒、4μM氧乐果、4μM毒死蜱、4μM丙溴磷、4μM氯唑磷溶液，分别进行紫外-可见吸收光谱检测，孵育体系的时间为120s。记录400nm处吸收峰强度，结果见表2。

表2不同物质紫外-可见吸收光谱强度

结果表明，在400nm处只有对硝基苯酚具有较强的紫外-可见吸收峰，而其它农药的紫外-可见吸收峰均非常低，说明其它农药的存在不会对对硝基苯酚的检测产生干扰。结果表明，该方法可以有效屏蔽其它可能共存的农药污染物的干扰，实现对硝基苯酚的特异性检测。

实施例5

本实施例提供一种对硝基苯酚的检测，包括：

(1)配置助色剂；助色剂为氢氧化钠、Na₂CO₃和硫酸钠加水后获得的混合溶液，总浓度为4.5mg/mL。其中，氢氧化钠、Na₂CO₃和硫酸钠的质量比为8:1:1。

(2)在所述助色剂中加入含4μΜ对硝基苯酚的待测物后进行检测；孵育体系的时间为120s。检测结果为0.0868，检测准确度为100％。

实施例6

本实施例提供一种对硝基苯酚的检测，包括：

(1)配置助色剂；助色剂为氢氧化钠、Na₂CO₃和硫酸钠混合水溶液，总浓度为4.5mg/mL。其中，氢氧化钠、Na₂CO₃和硫酸钠的质量比为8:1:1。

(2)在所述助色剂中加入含4μΜ对硝基苯酚、4μΜ啶虫脒的待测物后进行检测；孵育体系的时间为120s。检测结果为0.0870，检测准确度为99.8％。

实施例7

本实施例提供一种对硝基苯酚的检测，包括：

(1)配置助色剂；助色剂为氢氧化钠、Na₂CO₃和硫酸钠混合水溶液，总浓度为4.5mg/mL。其中，氢氧化钠、Na₂CO₃和硫酸钠的质量比为8:1:1。

(2)在所述助色剂中加入含4μΜ对硝基苯酚、4μΜ氯唑磷的待测物后进行检测；孵育体系的时间为120s。检测结果为0.0869，检测准确度为99.9％。

实施例8

本实施例提供一种对硝基苯酚的检测，包括：

(1)配置助色剂；助色剂为氢氧化钠、Na₂CO₃和硫酸钠混合水溶液，总浓度为4.5mg/mL。其中，氢氧化钠、Na₂CO₃和硫酸钠的质量比为8:1:1。

(2)在所述助色剂中加入含4μΜ对硝基苯酚、4μΜ氧乐果的待测物后进行检测；孵育体系的时间为120s。检测结果为0.0869，检测准确度为99.9％。

对比例2

本对比例提供一种对硝基苯酚的检测，包括：

(1)配置助色剂；助色剂为氢氧化钠、Na₂CO₃和硫酸钠加水后获得的混合溶液，总浓度为4.5mg/mL。其中，氢氧化钠、Na₂CO₃和硫酸钠的质量比为7:1:1。

(2)在所述助色剂中加入含1ppm对硝基苯酚的待测物后进行检测；孵育体系的时间为120s。检测结果为0.1492。

对比例3

本对比例提供一种对硝基苯酚的检测，包括：

(1)配置助色剂；助色剂为Na₂CO₃和硫酸钠加水制得的混合溶液，总浓度为2.5mg/mL。Na₂CO₃和硫酸钠的质量比为9:1。

(2)在所述助色剂中加入含1ppm对硝基苯酚的待测物后进行检测；孵育体系的时间为120s。检测结果为0.0650，检测准确度计为100％。

对比例4

本对比例提供一种对硝基苯酚的检测，包括：

(1)配置助色剂；助色剂为Na₂CO₃和硫酸钠混合水溶液，总浓度为2.5mg/mL。Na₂CO₃和硫酸钠的质量比为9:1。

(2)在所述助色剂中加入含1ppm对硝基苯酚、1ppm啶虫脒的待测物后进行检测；孵育体系的时间为120s。检测结果为0.0680，检测准确度为95.4％。

对比例5

本对比例提供一种对硝基苯酚的检测，包括：

(1)配置助色剂；助色剂为Na₂CO₃和硫酸钠混合溶液，浓度为2.5mg/mL。Na₂CO₃和硫酸钠的质量比为9:1。

(2)在所述助色剂中加入含1ppm对硝基苯酚、1ppm的氯唑磷待测物后进行检测；孵育体系的时间为120s。检测结果为0.0730，检测准确度为87.7％。

对比例6

本对比例提供一种对硝基苯酚的检测，包括：

(1)配置助色剂；助色剂为Na₂CO₃和硫酸钠混合水溶液，总浓度为2.5mg/mL。Na₂CO₃和硫酸钠的质量比为9:1。

(2)在所述助色剂中加入含1ppm对硝基苯酚、1ppm的氧乐果待测物后进行检测；孵育体系的时间为120s。检测结果为0.0740，检测准确度为86.2％。

从上述实施例5-8和对比例3-6可以看出，未采用本发明助色剂的检测精准度最低达到86.2％，采用本发明助色剂后，检测精准度提升至99.9％。由此可以得知，使用本发明助色剂可以有效提升采用紫外可见分光光度法检测对硝基苯酚的精准度。

虽然，上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims (4)

1.一种检测对硝基苯酚的方法，采用紫外-可见分光光度法检测，其特征在于，在助色剂中加入含对硝基苯酚的待测物后进行检测，检测波长为400nm；所述助色剂为氢氧化钠、Na₂CO₃和硫酸钠的水溶液，总浓度为4.5mg/mL，其中氢氧化钠、Na₂CO₃和硫酸钠的质量比为8:1:1。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括：

（1）配制助色剂；

（2）在所述助色剂中加入含对硝基苯酚的待测物后进行检测；孵育体系的时间为0-240s。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括：

（1）配制含有不同浓度对硝基苯酚的助色剂；

（2）分别进行紫外-可见分光光度法检测，根据检测结果绘制标准曲线；

（3）在所述助色剂中加入含对硝基苯酚的待测物后进行检测；

（4）根据步骤（2）绘制的标准曲线计算出待测物中对硝基苯酚的浓度。

4.一种助色剂在检测对硝基苯酚中的应用，其特征在于，所述助色剂为氢氧化钠、Na₂CO₃和硫酸钠的水溶液，总浓度为4.5mg/mL，其中氢氧化钠、Na₂CO₃和硫酸钠的质量比为8:1:1；

在检测对硝基苯酚时，在助色剂中加入含对硝基苯酚的待测物后采用紫外-可见分光光度法进行检测，检测波长为400nm。