CN113286593A - 治疗骨髓增生性病症的方法 - Google Patents

Abstract

本公开提供了治疗骨髓增生性病症的方法。在一些方面，本公开提供了治疗一种或多种骨髓增生性病症、使其稳定或减轻其严重性或进展的方法，所述方法包括向先前用鲁索替尼治疗的患者施用药学上可接受的组合物，所述组合物包含也称为菲卓替尼的式I的化合物，或其药学上可接受的盐或水合物。

Description

治疗骨髓增生性病症的方法

相关申请的交叉引用

本申请要求2018年9月25日提交的美国临时专利申请第62/736,349号的优先权，其据此通过引用整体并入本文。

技术领域

本发明提供了治疗骨髓增生性病症、使其稳定或者减轻其严重性或进展的方法。

背景技术

近年来，人们更好地了解了与疾病相关的酶和其他生物分子的结构，这极大地帮助了寻找新的治疗剂。已成为广泛研究的主题的一类重要的酶是蛋白激酶。

蛋白激酶构成了一个大的负责控制细胞内的各种信号转导过程的结构相关酶家族。蛋白激酶由于其结构和催化功能的保守性而被认为是从一个共同祖先基因进化而来的。几乎所有的激酶都含有相似的250-300个氨基酸的催化结构域。激酶可以通过它们施以磷酸化的底物(例如，蛋白质-酪氨酸、蛋白质-丝氨酸/苏氨酸、脂质等)分类为多个家族。

一般而言，通过实现磷酰基从核苷三磷酸到参与信号传导途径的蛋白质受体的转移，蛋白激酶介导细胞内信号传导。这些磷酸化事件起到可调节或调控靶蛋白生物学功能的分子通/断开关的作用。响应于各种细胞外刺激和其他刺激，这些磷酸化事件最终被触发。这样的刺激的例子包括环境和化学应激信号(例如渗透压休克、热休克、紫外线辐射、细菌内毒素和H₂O₂)、细胞因子(例如白介素-1(IL-1)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)和生长因子(例如，粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和成纤维细胞生长因子(FGF))。细胞外刺激可影响与细胞生长、迁移、分化、激素分泌、转录因子活化、肌肉收缩、葡萄糖代谢、蛋白质合成控制和细胞周期调控有关的一种或多种细胞反应。

许多疾病与由如上所述的蛋白激酶介导的事件触发的异常细胞反应相关。这些疾病包括但不限于自身免疫性疾病、炎性疾病、骨骼疾病、代谢性疾病、神经系统疾病和神经退行性疾病、癌症、心血管疾病、过敏和哮喘、阿尔茨海默病和激素相关疾病。因此，仍然需要找到可用作治疗剂的蛋白激酶抑制剂。

发明内容

本公开提供了治疗一种或多种骨髓增生性病症、使其稳定或减轻其严重性或进展的方法。在某些实施方案中，本公开提供了治疗先前用鲁索替尼(

；(3R)-3-环戊基-3-[4-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡唑-1-基]丙腈)治疗的患者的方法。

在一些方面，本公开提供了治疗一种或多种骨髓增生性病症、使其稳定或减轻其严重性或进展的方法，所述方法包括向先前用鲁索替尼治疗的患者施用药学上可接受的组合物，所述组合物包含式I的化合物：

或其药学上可接受的盐或水合物。式I的化合物在本文中也称为“化合物I”。在一些实施方案中，化合物I呈二盐酸盐的形式。化合物I或其药学上可接受的盐也可以水合物形式存在。在一些实施方案中，化合物I呈二盐酸盐一水合物的形式。因此，在一些实施方案中，所提供的方法包括向有需要的患者施用化合物II：

在一些实施方案中，本公开提供了一种治疗骨髓增生性病症的方法，其包括向先前用鲁索替尼治疗的患者施用化合物I或其药学上可接受的盐或水合物(例如化合物II)。

在一些实施方案中，患者先前已经用鲁索替尼治疗至少3个月。在一些实施方案中，患者先前已经用鲁索替尼治疗至少3个月，其中功效反应不足被定义为根据MRI的脾脏体积减小<10％或者根据触诊的脾脏尺寸从基线下降<30％，或者在初始反应后再生长至这些参数。经历效率不足的患者被说成是难治的。经历再生长至这些参数的患者被说成是复发的。

在一些实施方案中，患者先前已经用鲁索替尼治疗至少28天，并伴有

i.红细胞输注需求的发展；或者

ii.在用鲁索利替尼治疗期间出现血小板减少、贫血、血肿和/或出血的一个或多个≥3级不良事件。

在一些实施方案中，本公开提供了一种使患有或诊断出骨髓增生性病症的患者的脾脏体积减小至少25％的方法。在一些实施方案中，患者的脾脏体积减小了至少35％。在一些实施方案中，通过磁共振成像(MRI)或计算机断层摄影(CT)来测量脾脏体积。

在一些实施方案中，本公开提供了一种改善患有或诊断出骨髓增生性病症的患者的总生存期的方法。在一些实施方案中，总生存期相对于最佳可用疗法得到改善。

在一些实施方案中，本公开提供了一种治疗患有或诊断出对鲁索替尼耐药的或鲁索替尼难治的骨髓增生性病症的患者的方法。在一些实施方案中，患者在用鲁索替尼治疗期间表现出或经历以下一者或多者：缺乏反应、疾病进展，或反应/治疗效果的丧失。在一些实施方案中，疾病的进展由鲁索替尼治疗期间脾脏尺寸的增加来证明。

在一些实施方案中，本公开提供了一种治疗对鲁索替尼不耐受的患者中的骨髓增生性病症的方法。在一些实施方案中，对鲁索替尼的不耐受由血液学毒性(例如贫血、血小板减少等)或非血液学毒性来证明。

在一些实施方案中，本公开提供了一种治疗先前用鲁索替尼治疗的患者中的骨髓增生性病症的方法，其中所述患者已经复发。

在一些实施方案中，本公开提供了一种改善患有或诊断出骨髓增生性病症的患者的症状反应率的方法。在一些这样的实施方案中，症状反应率由如下文所定义的总症状评分(TSS)降低至少50％来证明。在一些实施方案中，症状反应率相对于最佳可用疗法得到改善。

在一些实施方案中，本公开提供了增加已复发的或鲁索替尼难治的患者的中位生存期的方法。在一些实施方案中，中位生存期相对于最佳可用疗法增加。

在费城染色体阴性骨髓增生性病症中，JAK2假激酶结构域中的激活突变以高频率发生。增加JAK2 V617F等位基因负担已被证明与疾病严重程度(骨髓功能障碍、器官肿大和全身症状(constitutional symptom))相关，这与扩大的JAK2信号传导在骨髓增生性病症中发挥中心作用相一致。因此，在一些实施方案中，本公开提供了一种降低具有与骨髓增生性病症相关或指示骨髓增生性病症的体细胞突变或克隆标志物的患者的等位基因负担的方法。在一些实施方案中，体细胞突变选自JAK2突变、钙网蛋白(CALR)突变或骨髓增生性白血病病毒(MPL)突变。在一些实施方案中，JAK2突变是V617F。在一些实施方案中，CALR突变是外显子9中的突变。在一些实施方案中，MPL突变选自W515K和W515L。在一些实施方案中，等位基因负担相对于在用化合物I或其药学上可接受的盐或水合物治疗之前患者的等位基因负担降低。

在一些实施方案中，骨髓增生性病症选自中度风险MPN相关的骨髓纤维化和高风险MPN相关的骨髓纤维化。

在一些实施方案中，中度风险MPN相关的骨髓纤维化选自原发性骨髓纤维化、真性红细胞增多症后(PV后)骨髓纤维化和原发性血小板增多症后(ET后)骨髓纤维化。

在一些实施方案中，高风险MPN相关的骨髓纤维化选自原发性骨髓纤维化、真性红细胞增多症后(PV后)骨髓纤维化和原发性血小板增多症后(ET后)骨髓纤维化。

在一些实施方案中，所提供的方法诱导如下文所定义的完全反应(CR)。在一些实施方案中，所提供的方法诱导如下文所定义的部分缓解。在一些实施方案中，所提供的方法诱导如下文所定义的临床改善。在一些实施方案中，所提供的方法诱导如下文所定义的脾脏反应。

在一些实施方案中，本公开提供了一种治疗先前用鲁索替尼治疗的患者的骨髓增生性病症的方法，其中向所述患者施用约400mg的化合物I。在一些实施方案中，化合物I的剂量从约400mg降低至约300mg。在一些实施方案中，化合物I的剂量从约300mg降低至约200mg。在一些实施方案中，每天施用一次化合物I，持续一个或多个28天的周期。在一些实施方案中，每天施用一次化合物I，持续至少六个28天的周期。

在一些实施方案中，本公开提供了一种将与化合物I治疗有关或由化合物I治疗引起的一个或多个不良事件降低至最低限度的方法。在一些实施方案中，患者处于罹患韦尼克脑病的风险中。在一些这样的实施方案中，针对韦尼克脑病监测患者。

定义

当涉及诸如参数、量、时距等等的可测量值时，如本文使用的术语“约”意在涵盖指定值的以及与指定值相比的+/-10％或更小、优选+/-5％或更小、更优选+/-1％或更小，以及还更优选+/-0.1％或更小的变化，只要这样的变化适合于在所公开的发明中执行即可。举个例子，当术语“约”与一定的天数结合使用时，它包括所述特定的天数加上或减去1天，例如，“约6天”包括介于5天与到7天之间的任何天数。应当理解，修饰语“约”所指的值本身也被具体且优选地公开。

如本文所用，术语“治疗”(“treat”或“treating”)是指病症或疾患或者所述病症或疾患的一种或多种症状的部分或完全缓和、抑制、发作延迟、预防、改善和/或解除。如本文所用，术语“治疗”(“treatment”、“treat”和“treating”)是指如本文所述的病症或疾患或所述病症或疾患的一种或多种症状的部分或完全缓和、抑制、发作延迟、预防、改善和/或解除。在一些实施方案中，可以在一种或多种症状出现之后施用治疗。在一些实施方案中，术语“治疗”包括预防或阻止病症或疾患的进展。在其他实施方案中，可以在没有症状的情况下施用治疗。例如，可以在症状发作前对易感个体施用治疗(例如，根据症状史和/或根据遗传或其他易感因素)。症状消退后也可以继续治疗，以便例如预防或延迟其复发。因此，在一些实施方案中，术语“治疗”包括预防疾病或病症的复发或反复。

如本文所用的表述“单位剂型”是指适于待治疗受试者的本发明制剂的物理离散单位。然而，应当理解，本发明组合物的每日总用量将由主治医师在合理的医学判断范围内决定。对于任何特定的受试者或生物体，具体有效剂量水平将取决于多种因素，所述因素包括所治疗的病症和所述病症的严重性；采用的具体活性剂的活性；采用的具体组合物；受试者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；给药时间和采用的具体活性剂的排泄率；治疗持续时间；与采用的一种或多种具体化合物组合或同时使用的药物和/或另外的疗法；以及医学领域熟知的类似因素。

具体实施方式

骨髓纤维化

骨髓增生性赘生物(MPN)相关的骨髓纤维化(MF)是一种严重且危及生命的疾病，其可作为从头发生(de novo)或原发性骨髓纤维化(PMF)存在或者从先前的真性红细胞增多症或原发性血小板增多症演化而来(Swerdlow SH,Campo E,Harris NL,Jafie ES,Pileri SA,Stein H等人，World Health Organization classification of tumors ofhaematopoietic and lymphoid tissues.Lyon:IARC Press 2008)。所述疾病的特征为克隆性骨髓增生、无效性红细胞生成、骨髓基质改变、肝脾髓外造血，以及细胞因子表达异常(Tefferi A,Pardanani A.JAK inhibitors in myeloproliferative neoplasms:rationale,current data and perspective.Blood Rev.2011Sep；25(5):229-37)。患者通常表现为脾脏肿大、全身症状、中度至重度贫血、血小板减少和白细胞增多。

原发性骨髓纤维化是一组费城染色体(Ph1)阴性MPN的成员，所述费城染色体(Ph1)阴性MPN还包括真性红细胞增多症(PV)和原发性血小板增多症(ET)(Tefferi A.Therecent advances in classic BCR-ABL-negative myeloproliferative disorders.Clin.Adv.Hematol.Oncol.2007a；5:113-5)。几乎所有的PV患者以及约一半的ET和PMF患者都有JAK2突变，通常是JAK2V617F。PMF患者的其他突变包括CALR和MPL。约20％的PMF患者没有可检测到的JAK2、CALR或MPL的突变，并被称为三阴性(Levine RL,Wadleigh M,Cools J,Ebert BL,Wernig G,Huntly BJ等人，Activating mutation in the tyrosine kinaseJAK2 in polycythemia vera,essential thrombocythemia,and myeloid metaplasiawith myelofibrosis.Cancer Cell.2005；7:387-97；Werning G,Mercher T,Okabe R,Levine L,Lee BH,Gilliland GL.Expression of JAK2V617F causes a polycythemiavera-like disease with associated myelofibrosis in a murine bone marrowtransplant model.Blood.2006；107:4274-81)。JAK2、CALR和MPL的突变导致JAK/STAT信号传导通路激活，从而导致细胞增殖并抑制细胞死亡。其结果是克隆扩增(Ilhe JN,Gilliland DG.JAK2:normal function and role in hematopoietic disorders.Curr.Opin.Genet.Dev.2007；17:8-14)。因此，预期可下调JAK/STAT通路的JAK2抑制剂有助于降低细胞增殖。

真性红细胞增多症(PV)和原发性血小板增多症(ET)的特征为红细胞(RBC)和血小板水平升高。然而，约10％的受累患者发生在形态学上无法与PMF区分开的骨髓纤维化。这些疾患被称为真性红细胞增多症后骨髓纤维化(PV后-MF)和原发性血小板增多症后骨髓纤维化(ET后-MF)(Campbell PJ,Green AR.Management of polycythemia vera andessential thrombocythemia.Hematology Am.Soc.Hematol.Educ.Program.2005；201-8)，并在临床上被称为MPN相关的骨髓纤维化。MPN相关的骨髓纤维化患者的生存预后与PMF相似，并且具有约10％的转化为急性髓系白血病(AML)的累积风险。

有几种预测PMF患者生存期的预后评分系统。国际预后评分系统(IPSS)用于在诊断时预测生存期，而动态国际预后评分系统(DIPSS)用于在病程中的任何时间预测生存期(Cervantes F,Dupriez B,Pereira A等人，New prognostic scoring system forprimary myelofibrosis based on a study of the International Working Group forMyelofibrosis Research and Treatment.Blood.2009；Mar 26；113(13):2895-901；Passamonti F,Cervantes F,Vannucchi AM,Morra E,Rumi E,Pereira A等人，A dynamicprognostic model to predict survival in primary myelofibrosis:a study by theIWG-MRT(International Working Group for Myeloproliferative Neoplasms Researchand Treatment).Blood.2010Mar 4；115(9):1703-8)。包括在IPSS中的变量是年龄>65岁、全身症状、血红蛋白水平<10g/dL和白细胞(WBC)计数。另外的最近的预后评分系统包括动态国际预后评分系统Plus(DIPSS Plus)和并入了来自突变分析的数据的评分系统。MF患者的总生存期与中位生存期分别为15.4、6.5、2.9和1.3年的低风险、中度风险1、中度风险2或高风险患者的DIPSS风险类别之间存在强相关性(Tefferi A.Primary myelofibrosis:2017update on diagnosis,risk-stratification,andmanagement.Am.J.Hematol.2016Dec；91(12):1262-1271)。

大约70％的MF个体属于中度风险2或高风险类别(Gangat N,Caramazza D,VaidyaR,George G,Begna K,Schwager S等人，DIPSS plus:a refined Dynamic InternationalPrognostic Scoring System for primary myelofibrosis that incorporatesprognostic information from karyotype,platelet count,and transfusionstatus.J.Clin.Oncol.2011Feb1；29(4):392-7)，代表了最大的未满足医疗需求。症状性肝脾肿大、需要RBC输血、恶病质以及其他MF相关的症状导致这些患者的生活质量大打折扣(Mesa RA,Camoriano JK,Geyer SM,Wu W,Kaufmann SH,Rivera CE等人，A phase IItrial of tipifarnib in myelofibrosis:primary,post-polycythemia vera and post-essential thrombocythemia.Leukemia.2007Sep；21(9):1964-70)。

同种异体干细胞移植(SCT)是目前唯一能诱导MF患者长期缓解的治疗。在被诊断为MF时的平均年龄为65岁；因此，大多数患者不符合SCT的条件。因此，治疗选择主要是以症状为导向，以帮助减轻贫血、脾脏肿大、全身症状以及不太常见的血小板和WBC水平升高的临床表现。迄今为止，这些以症状为导向的的治疗均未显示出抗克隆作用，尽管已证明在脾脏尺寸和脾脏不适、症状和贫血方面具有缓和作用(Vannucchi AM,Harrison CN.Emergingtreatments for classical myeloproliferative neoplasms.Blood.2017Feb 9；129(6):693-703)。

幸运的是，人们对MPN及该疾病的分子机制的了解正在扩大。

2005年，在大约50％至60％的PMF或ET患者以及90％至95％的PV患者中发现并观察到JAK2V617F突变。这项发现，连同对在MPN患者中发现的激活JAK/信号转导和转录激活因子(STAT)通路(JAK2外显子12、骨髓增生性白血病和衔接蛋白LNK)的其他突变的观察(OhST,Simonds EF,Jones C,Hale MB,Goltsev Y,Gibbs KD,Jr.等人，Novel mutations inthe inhibitory adaptor protein LNK drive JAK-STAT signaling in patients withmyeloproliferative neoplasms.Blood.2010Aug 12；116(6):988-92；Pikman Y,Lee BH,Mercher T,McDowell E,Ebert BL,Gozo M等人，MPLW515L is a novel somaticactivating mutation in myelofibrosis with myeloid metaplasia.PLoSMed.2006Jul；3(7):e270；Scott LM,Tong W,Levine RL,Scott MA,Beer PA,Stratton MR等人，JAK2 exon 12mutations in polycythemia vera and idiopathic erythrocytosis.N.Engl.J.Med.2007Feb 1；356(5):459-68)，已经确定JAK信号传导通路的失调是MPN发病机制的主要因素。它也被转化为对小分子JAK抑制剂的开发。

JAK1/2抑制剂鲁索替尼是目前唯一批准用于MF的疗法。鲁索替尼适用于治疗患有中度或高风险MPN相关的骨髓纤维化(MF)的患者，所述中度或高风险MPN相关的骨髓纤维化包括原发性MF、真性红细胞增多症后MF和原发性血小板增多症后MF。鲁索替尼的注册基于2项随机对照研究(COMFORT-I和COMFORT-II)，所述2项随机对照研究分别将鲁索替尼与安慰剂和最佳可用疗法(BAT)进行了比较(Harrison C,Vannucchi AD.Ruxolitinib:a potentand selective Janus kinase 1and 2inhibitor in patients with myelofibrosis.Anupdate for clinicians.Ther.Adv.Hematol.2012Dec；3(6):341-54；Verstovsek S,MesaRA,Gotlib J,Levy RS,Gupta V,DiPersio JF等人，A double-blind,placebo-controlledtrial of ruxolitinib for myelofibrosis.N.Engl.J.Med.2012Mar 1；366(9):799-807)。所述研究证明了这样的益处，如通过磁共振成像(MRI)测量的，在COMFORT-I中的第24周(鲁索替尼的41.9％与安慰剂的0.7％)和在COMFORT-II中的第48周(鲁索替尼的28.5％与BAT的0％)，鲁索替尼臂中有更高比例的受试者展现出≥35％的脾脏体积减小。在COMFORT-I中，45.9％的鲁索替尼受试者在24周时的骨髓纤维化症状评估表(MFSAF)总症状评分(TSS)改善>50％，相比之下，安慰剂受试者为5.3％。根据COMFORT-II研究最近3年的随访数据，还证明了鲁索替尼臂中的生存期相比于BAT得到改善。Kaplan-Meier估计的144周生存概率在鲁索替尼臂中为81％，而在BAT臂中为61％(Cervantes F,Kiladjian JJ,Niederwieser D,Sirulnik A,Stalbovskaya V,McQuity M等人，Long-Term Safety,Efficacy,and Survival Findings From Comfort-II,a Phase 3Study ComparingRuxolitinib with Best Available Therapy(BAT)for the Treatment ofMyelofibrosis(MF).Blood.2012；120(21):801)。在24个月时，在15％的接受鲁索替尼的受试者中观察到骨髓纤维化的改善，相比之下，在5％的接受BAT的受试者中观察到这种改善；然而，在可随访的少数受试者中，到48个月时该改善下降。尚不清楚这项研究中包括的任何受试者的脾和症状在临床上得到了消退(Kvasnicka HD.WHO classification ofmyeloproliferative neoplasms(MPN):A critical update.Curr.Hematol.Malig.Rep.2013Dec；8(4):333-41)。

鲁索替尼已在美国(US)和欧盟(EU)被批准用于治疗MPN相关的骨髓纤维化。

在美国，美国食品和药物管理局(FDA)于2011年11月批准鲁索替尼

用于治疗包括原发性骨髓纤维化、真性红细胞增多症后骨髓纤维化和原发性血小板增多症后骨髓纤维化在内的中度或高风险骨髓纤维化的患者。鲁索替尼还已经被批准用于治疗对羟基脲反应不足或不耐受的患者的真性红细胞增多症。

在欧盟，欧洲药品管理局(EMA)于2012年8月批准鲁索替尼

用于治疗原发性骨髓纤维化(也称为慢性特发性骨髓纤维化)、真性红细胞增多症后骨髓纤维化或原发性血小板增多症后骨髓纤维化的成年患者中的疾病相关脾脏肿大或症状。

MPN相关的骨髓纤维化，特别是中度或高风险疾病，是一种严重且致命的疾患。虽然鲁索替尼疗法在脾脏反应和改善全身症状方面的益处是显著的，但鲁索替尼也与治疗相关的贫血风险(相对于BAT的12.3％，为40.4％)和血小板减少症风险(相对于BAT的9.65％，为44.5％)相关(Harrison C,Vannucchi AD.Ruxolitinib:a potent and selectiveJanus kinase 1and 2inhibitor in patients with myelofibrosis.An update for clinicians.Ther.Adv.Hematol.2012Dec；3(6):341-54)。1年、2年和3年停用率分别为49％、71％和86％。停用的主要原因是治疗效果丧失、缺乏反应和药物诱导的血细胞减少症(Tefferi A,Pardanani A.JAK inhibitors in myeloproliferative neoplasms:rationale,current data and perspective.Blood Rev.2011Sep；25(5):229-37)。另外，通常在治疗开始后的前3-6个月内观察对鲁索替尼的反应(Verstovsek S,Mesa RA,GotlibJ,Levy RS,Gupta V,DiPersio JF等人，A double-blind,placebo-controlled trial ofruxolitinib for myelofibrosis.N.Engl.J.Med.2012Mar1；366(9):799-807；HarrisonC,Vannucchi AM.Ruxolitinib:a potent and selective Janus kinase 1and2inhibitor in patients with myelofibrosis.An update for clinicians.Ther.Adv.Hematol.2012Dec；3(6):341-54)，并且有人建议，对于在那段时期之后脾脏尺寸没有减小或症状没有改善的患者，应当考虑替代疗法(Keohane C,Radia DH,HarrisonCN.Treatment and management of myelofibrosis in the era of JAKinhibitors.Biologics.2013；7:189-98；Harrison CN,Mesa RA,Jamieson C,Hood J,Bykowski J,Zuccoli G等人，Case Series of Potential Wernicke’s Encephalopathyin Patients Treated with Fedratinib.Blood.2017b；130(Suppl 1),4197.AccessedMarch 23,2018。检索自http://www.bloodjournal.org/content/130/Suppl_1/4197)。鲁索替尼对总生存期(OS)的影响仍在争论中，对骨髓纤维化和驱动突变等位基因负担的不明确的有限效果表明，所述药物的疾病调修活性可能较小。因此，尽管鲁索替尼可用，但一线骨髓纤维化患者的未满足的医疗需求仍然很高，特别是对于基线血小板计数低且易患骨髓抑制/血小板减少症的患者来说更是如此。

对于先前接受过JAK抑制剂治疗的患者，尚无批准的疗法，并且预后很差(Newberry KJ,Patel K,Masarova L,Luthra R,Manshouri T,Jabbour E等人，Clonalevolution and outcomes in myelofibrosis after ruxolitinib discontinuation。Blood.2017Aug 31；130(9):1125-31)。对鲁索替尼耐药的机制仍不清楚。临床前已经证明，骨髓纤维化本质上比真性红细胞增多症或原发性血小板增多症对JAK2抑制更具耐药性，并且对鲁索替尼治疗失败后有效的JAK2抑制剂仍然存在巨大的未满足的需求。而且，据报道停用鲁索替尼的复发和难治患者的中位生存期为6个月(Jabbour E,Hagop M,KantarjianHM,Garcia-Manero G,Quintas-Cardama A,Cardena-Turanzas M等人，Outcome ofPatients(pts)With Myelofibrosis(MF)After Ruxolutinib(Rux)Therapy.Blood.2013；122(21):1584.Accessed March 25,2018。检索自http://www.bloodjournal.org/content/122/21/1584)。值得注意的是，在距离停止鲁索替尼的10个月中位随访之后，只有27位(34％)患者仍然活着(Kantarjian HM,Silver RT,Komrokji RS,Mesa RA,Tacke R,Harrison CN.Ruxolitinib for myelofibrosis--an update of its clinicaleffects.Clin.Lymphoma Myeloma Leuk.2013Dec；13(6):638-45)。在COMFORT-I试验中，5年后只有27％的患者仍在接受治疗。在这种情况下停用鲁索替尼的患者的结局很差，并且这样的患者的结局很糟糕。

两项随机研究评估了与连续或再次使用鲁索替尼治疗的BAT相比，先前用鲁索替尼治疗的受试者的JAK抑制剂的使用情况。

在PERSIST-2研究中，血小板计数为100×10⁹/L或更少的受试者被随机分配接受帕瑞替尼400mg每天一次、帕瑞替尼200mg每天两次或包括鲁索替尼在内的BAT。在既往使用鲁索替尼的受试者亚组(n＝95)中，在24周时，分别有2位受试者(6％)和4位受试者(13％)以及1位BAT受试者(3％)在24周时达到了35％或更高的脾脏体积反应(Mascarenhas J,Hoffman R,Talpaz M,Gerds AT,Stein B,Gupta V等人，Pacritinib vs Best AvailableTherapy,Including Ruxolitinib,in Patients With Myelofibrosis:A RandomizedClinical Trial.JAMA Oncol.2018May 1；4(5):652-9)。

在SIMPLFY-2研究中，先前用鲁索替尼治疗至少28天，但在接受鲁索替尼的同时需要红细胞输注或者需要将鲁索替尼剂量降低到少于20mg每天两次，并出现3级血小板减少、贫血或3级或更严重的出血中的至少一者的MF受试者(n＝156)以2:1随机分配来接受莫洛替尼或包括鲁索替尼在内的BAT。

在24周时，有7位受试者(7％)和3位BAT受试者(6％)在24周时达到了35％或更高的脾脏体积反应(Harrison CN,Vannucchi AM,Platzbecker U,Cervantes F,Gupta V,Lavie D等人，Momelotinib versus best available therapy in patients withmyelofibrosis previously treated with ruxolitinib(SIMPLIFY 2):a randomised,open-label,phase 3trial.Lancet Haematol.2018Feb；5(2):e73-e81)。

目前，用于治疗先前已接受鲁索替尼治疗的MF患者的最佳可用疗法(BAT)受到限制。BAT可包括用鲁索替尼、化学疗法(例如，羟基脲)、阿那格雷、皮质类固醇、造血生长因子、免疫调节剂、雄激素、干扰素进行再治疗，并且还可包括“不治疗”和针对症状的治疗。

因此，由于预期寿命低，尤其是鲁索替尼的停用率高和骨髓抑制，先前已接受JAK抑制剂治疗的患者的需求仍然没有得到满足。

化合物I

化合物I的合成公开于2009年5月5日授权的美国专利7,528,143的实施例90中，该专利特此通过引用整体并入本文。化合物I，也称为菲卓替尼，是一种强效且具选择性的JAK2激酶活性抑制剂，其在细胞测定中抑制JAK2信号传导、由突变JAK2或突变MPL驱动的细胞增殖，并诱导表达组成性活性JAK2的细胞的凋亡。化合物I还抑制从骨髓增生性赘生物(MPN)患者中分离的造血祖细胞的红细胞系集落形成。

用菲卓替尼进行了十八项临床研究。在MPN相关的骨髓纤维化患者的治疗中，菲卓替尼已被广泛研究。

在一项随机、安慰剂对照的3期研究(JAKARTA [EFC12153])中，菲卓替尼展现出对先前未经治疗的中度2或高风险MF患者的临床功效。主要终点是反应率，其被定义为直到第6周期结束时脾脏体积从基线减小≥35％并在4周后通过MRI证实的受试者比例。根据IWG-MRT标准的建议，在第6周期结束时(例如，不管是否证实)，同样进行了脾脏反应分析。基于患者报告结局(PRO)工具，即，评估6种关键MF相关症状(夜间盗汗、瘙痒、腹部不适、早饱、左侧肋骨下疼痛，和骨痛或肌肉痛)的修正的骨髓纤维化症状评估表(MFSAF)的症状反应率(SRR)是关键次要终点。SRR被定义为从基线到第6周期结束时，修正的MFSAF日记的总症状评分(TSS)降低≥50％的受试者比例。这两个终点都是证明在被建议的人群中的临床益处的量度。在400mg(这项研究的建议剂量)和500mg日剂量下，每个主要终点的反应率分别为36.5％和40.2％，而在安慰剂臂中为1％。在分别用400mg和500mg每日剂量治疗的患者中，IWG-MRT推荐的在第6周期的反应率为46.9％和49.5％。接受400mg和500mg剂量的受试中总共分别有36.3％和34.1％的受试者的TSS降低≥50％，相比之下，接受安慰剂的受试者为7.1％。这两个活动组(400mg和500mg组)的反应者的中位反应持续时间(脾脏体积减小≥35％)为10.4个月。在菲卓替尼400mg每日剂量组中，报告的所有级别的最常见的治疗紧急不良事件(TEAE)为腹泻65.6％、恶心63.5％、贫血(G3和G4)42.7％、呕吐41.7％、疲劳15.6％和周围水肿15.6％。证实了400mg剂量比500mg剂量具有更好的耐受性，特别是更少的受试者报告了3级或4级TEAE(分别为70.8％和78.4％)、治疗紧急严重不良事件(SAE)(分别为38.5％和44.3％)和导致永久性治疗剂停用的TEAE(分别为27.1％和36.1％)(Pardanani A,Tefferi A,Jamieson C,Gabrail NY,Lebedinsky C,Gao G等人，A phase2randomized dose-ranging study of the JAK2-selective inhibitor fedratinib(SAR302503)in patients with myelofibrosis.Blood Cancer J.2015Aug 7；5:e335)。

单臂2期JAKARTA2研究(ARD12181)录入了先前已用鲁索替尼治疗的中度风险1且有症状、中度风险2或高风险MPN相关的骨髓纤维化的患者。主要终点是反应率，其被定义为在每个方案定义的群体中直到第6周期结束时脾脏体积从基线减小≥35％的受试者比例。

如同在3期JAKARTA研究中一样，关键次要终点之一是症状反应率(SRR)，其被定义为直到第6周期结束时使用修正的MFSAF日记的TSS从基线降低≥50％的受试者比例。

对鲁索替尼的耐药性被定义为以下中的任何一者：a)缺乏反应(没有反应)；b)疾病进展(在鲁索替尼治疗期间脾脏尺寸增加)；或c)在鲁索替尼治疗期间的任何时间反应丧失。对鲁索替尼的不耐受被定义为以下中的任何一者：a)血液学毒性(贫血、血小板减少等)；b)非血液学毒性。

脾脏总反应率(在第6周期结束时脾脏体积从基线减小≥35％的患者比例)为55.4％。总共25.6％的受试者的TSS降低≥50％。

所有97位患者都具有至少1种TEAE(所有级别)；62.9％的患者报告了3级或4级TEAE。最常见的非血液学TEAE(≥10％的患者报告)(所有级别)是胃肠道病症，包括腹泻(61.9％)、恶心(55.7％)和呕吐(41.2％)。最常见的血液学TEAE(>10位患者报告)(所有级别)是贫血(48.5％)和血小板减少(26.8％)。百分之三十八和百分之十的患者经历了3级或4级贫血，并且21.6％的患者经历了3级或4级血小板减少。没有5级血液学TEAE的报道。在研究中对55.7％的患者给予了全身使用的抗感染药(Harrison CN,McLornan DP.Currenttreatment algorithm for the management of patients with myelofibrosis,JAKinhibitors,and beyond.Hematology Am.Soc.Hematol.Educ.Program.2017Dec 8；2017(1):489-97)。

骨髓纤维化是一种由造血干细胞中的突变引起的克隆性疾病，所述突变促进异常增殖和髓样分化(Mead AJ,Mullally A.Myeloproliferative neoplasm stemcells.Blood.2017Mar23；129(12):1607-16)。除JAK2V617F外，在MF患者中还发现了JAK2和其他基因中的其他几个突变，这些突变与预后、AML进展以及对JAK抑制剂鲁索替尼的反应相关联(Vainchenker W,Kralovics R.Genetic basis and molecular pathophysiologyof classical myeloproliferative neoplasms.Blood.2017Feb 9；129(6):667-679,Tefferi A,Guglielmelli P,Nicolosi M,Mannelli F等人，GIPSS:genetically inspiredprognostic scoring system for primary myelofibrosis.Leukemia.2018Mar 23；Spiegel JY,McNamara C,Kennedy JA,Panzarella T等人，Impact of genomicalterations on outcomes in myelofibrosis patients undergoing JAK1/2inhibitortherapy.Blood.2017Sep 8；1(20):1729-1738；Newberry KJ,Patel K,Masarova L,LuthraR等人，Clonal evolution and outcomes in myelofibrosis after ruxolitinibdiscontinuation.Blood.2017Aug 31；130(9):1125-1131；Patel KP,Newberry KJ,LuthraR,Jabbour E等人，Correlation of mutation profile and response in patients withmyelofibrosis treated with ruxolitinib.Blood.2015Aug 6；126(6):790-7；LevineRL,Wadleigh M,Cools J,Ebert BL,Wernig G,Huntly BJ等人，Activating mutation inthe tyrosine kinase JAK2 in polycythemia vera,essential thrombocythemia,andmyeloid metaplasia with myelofibrosis.Cancer Cell.2005；7:387-97；Werning G,Mercher T,Okabe R,Levine L,Lee BH,Gilliland GL.Expression of JAK2V617F causesa polycythemia vera-like disease with associated myelofibrosis in a murinebone marrow transplant model.Blood.2006；107:4274-81；Mercher T,Wernig G,MooreSA,Levine RL,Gu TL,

S,Cullen D,Polakiewicz RD,Bernard OA,Boggon TJ,Lee BH,Gilliland DG.JAK2T875N is a novel activating mutation that results inmyeloproliferative disease with features of megakaryoblastic leukemia in amurine bone marrow transplantation model.Blood.2006Oct 15；108(8):2770-9；ScottLM,Tong W,Levine RL,Scott MA,Beer PA,Stratton MR等人，JAK2 exon 12mutations inpolycythemia vera and idiopathic erythrocytosis.N.Engl.J.Med.2007Feb1；356(5):459-68；Pardanani A,Tefferi A,Jamieson C,Gabrail NY等人，A phase 2randomizeddose-ranging study of the JAK2-selective inhibitor fedratinib(SAR302503)inpatients with myelofibrosis.Blood Cancer J.2015Aug 7；5:e335)。据报道，菲卓替尼在MF的非临床模型中(Wernig G,Kharas MG,Okabe R,Moore SA,Leeman DS,Cullen DE等人，Efficacy of TG101348,a selective JAK2 inhibitor,in treatment of a murinemodel of JAK2V617F-induced polycythemia vera.Cancer Cell.2008Apr；13(4):311-20)和MF患者中(Pardanani A,Gotlib JR,Jamieson C,Cortes JE,Talpaz M,Stone RM等人，Safety and efficacy of TG101348,a selective JAK2 inhibitor,in myelofibrosis.J.Clin.Oncol.2011Mar1；29(7):789-96)降低了JAK2V617F频率。

细胞因子异常表达和骨髓纤维化是MF的标志(Vainchenker W,KralovicsR.Genetic basis and molecular pathophysiology of classical myeloproliferativeneoplasms.Blood.2017Feb 9；129(6):667-679；Mondet J,Hussein K,MossuzP.Circulating Cytokine Levels as Markers of Inflammation in PhiladelphiaNegative Myeloproliferative Neoplasms:Diagnostic and PrognosticInterest.Mediators Inflamm.2015:670580)。已报道高水平的促炎细胞因子和纤维化细胞因子可导致MF中的骨髓(BM)基质改变、无效性红细胞生成/髓外造血和全身症状(MondetJ,Hussein K,Mossuz P.Circulating Cytokine Levels as Markers of Inflammationin Philadelphia Negative Myeloproliferative Neoplasms:Diagnostic andPrognostic Interest.Mediators Inflamm.2015:670580；Tefferi A,Pardanani A.JAKinhibitors in myeloproliferative neoplasms:rationale,current data andperspective.Blood Rev.2011Sep；25(5):229-37)。发现菲卓替尼调节先前未用JAK抑制剂治疗的MF患者中的循环细胞因子(Pardanani A,Tefferi A,Jamieson C,Gabrail NY等人，A phase 2randomized dose-ranging study of the JAK2-selective inhibitorfedratinib(SAR302503)in patients with myelofibrosis.Blood Cancer J.2015Aug7；5:e335)。细胞因子调节与这些患者中的持续病毒反应和全身症状改善有关(Pardanani A,Tefferi A,Jamieson C,Gabrail NY等人，A phase 2randomized dose-ranging study ofthe JAK2-selective inhibitor fedratinib(SAR302503)in patients withmyelofibrosis.Blood Cancer J.2015Aug7；5:e335)。然而，尚未表征菲卓替尼对先前暴露于鲁索替尼的患者中的循环细胞因子的影响。

最近的研究正在开始揭示JAK2V617F以及像鲁索替尼和菲卓替尼之类的JAK抑制剂的免疫调节作用。例如，据报道，JAK2V617F通过上调程序性死亡配体1(PD-L1)来促进MPN髓样细胞的免疫逃逸(Prestipino A,Emhardt AJ,Aumann K,O'Sullivan D等人，Oncogenic JAK2V617F causes PD-L1 expression,mediating immune escape inmyeloproliferative neoplasms.Sci.Transl.Med.2018Feb 21；10(429))。据报道，鲁索替尼可调节这些细胞中的PD-L1表达(Prestipino A,Emhardt AJ,Aumann K,O'Sullivan D等人，Oncogenic JAK2V617F causes PD-L1 expression,mediating immune escape inmyeloproliferative neoplasms.Sci.Transl.Med.2018Feb 21；10(429))。据报道，菲卓替尼调节淋巴瘤肿瘤细胞中的PD-L1表达(Hao Y,Chapuy B,Monti S,Sun HH,Rodig SJ,Shipp MA.Selective JAK2 inhibition specifically decreases Hodgkin lymphomaand mediastinal large B-cell lymphoma growth in vitro and in vivo.Clin CancerRes.2014；20(10):2674-83)。临床前和临床数据表明，鲁索替尼可以起到强效免疫抑制药的作用，抑制移植物抗宿主病(GVHD)，降低MF患者的T细胞和NK细胞的频率并损害其活化(Betts BC,Bastian D,Iamsawat S,Nguyen H等人，Targeting JAK2reduces GVHD andxenograft rejection through regulation of T cell differentiation.Proc NatlAcad Sci U S A.2018Feb 13；115(7):1582-1587.Epub 2018；

K,Rudolph J,Vonnahme M,Parampalli等人，JAK Inhibition Impairs NK Cell Function inMyeloproliferative Neoplasms.Cancer Res.2015Jun 1；75(11):2187-99；ParampalliYajnanarayana S,Stübig T,Cornez I,Alchalby H等人，JAK1/2inhibition impairs Tcell function in vitro and in patients with myeloproliferativeneoplasms.Br.J.Haematol.2015Jun；169(6):824-33)。临床前数据表明，菲卓替尼能够调节淋巴瘤肿瘤细胞中的PD-L1表达(Hao Y,Chapuy B,Monti S,Sun HH,Rodig SJ,ShippMA.Selective JAK2 inhibition specifically decreases Hodgkin lymphoma andmediastinal large B-cell lymphoma growth in vitro and in vivo.Clin.CancerRes.2014May 15；20(10):2674-83)。然而，非临床数据表明，菲卓替尼对GVHD(Betts BC,Veerapathran A,Pidala J,Yang H等人，Targeting Aurora kinase A and JAK2prevents GVHD while maintaining Treg and antitumor CTLfunction.Sci.Transl.Med.2017Jan 11；9(372))和T细胞发育(Wernig G,Kharas MG,Okabe R,Moore SA,Leeman DS,Cullen DE等人，Efficacy of TG101348,a selectiveJAK2 inhibitor,in treatment of a murine model of JAK2V617F-inducedpolycythemia vera.Cancer Cell.2008Apr；13(4):311-20)发挥微弱作用。

治疗骨髓增生性病症的方法

在一些实施方案中，本公开提供了治疗一种或多种骨髓增生性病症、使其稳定或减轻其严重性或进展的方法。在某些实施方案中，本公开提供了治疗先前用鲁索利替尼(

；(3R)-3-环戊基-3-[4-(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)吡唑-1-基]丙腈)治疗的患者的方法。

在一些实施方案中，所提供的方法包括向先前用鲁索替尼治疗的患者施用化合物I：

或其药学上可接受的盐或水合物。在一些实施方案中，化合物I呈二盐酸盐的形式。化合物I或其药学上可接受的盐也可以水合物形式存在。在一些这样的实施方案中，化合物I呈二盐酸盐一水合物的形式。因此，在一些实施方案中，所提供的方法包括向有需要的患者施用化合物II：

在一些实施方案中，患者先前已经用鲁索替尼治疗至少3个月。在一些实施方案中，患者先前已经用鲁索替尼治疗至少3个月，其中功效反应不足被定义为根据MRI的脾脏体积减小<10％。在一些实施方案中，患者先前已经用鲁索替尼治疗至少3个月，其中功效反应不足被定义为根据触诊的脾脏尺寸从基线下降<30％。在一些实施方案中，患者在初始反应后经历了再生长至通过MRI确定的<10％的脾脏体积减小。在一些实施方案中，患者在初始反应后经历了再生长至根据触诊的脾脏尺寸从基线下降<30％。经历效率不足的患者被说成是难治的。经历再生长至这些参数的患者被说成复发。

在一些实施方案中，患者先前已经用鲁索替尼治疗至少28天，并伴有

i.红细胞输注需求的发展；或者

ii.在用鲁索利替尼治疗期间出现血小板减少、贫血、血肿和/或出血的一个或多个≥3级不良事件。

在一些实施方案中，患者患有或已被诊断为对鲁索替尼无反应的骨髓增生性病症。

在一些实施方案中，患者患有或已被诊断为鲁索替尼难治的或对鲁索替尼耐药的骨髓增生性病症。

在一些实施方案中，患者在鲁索替尼治疗期间或之后复发。

在一些实施方案中，患者对鲁索替尼不耐受。在一些实施方案中，患者对鲁索替尼的不耐受由血液学毒性(例如贫血、血小板减少等)或非血液学毒性来证明。

在一些实施方案中，患者对羟基脲的反应不足或者对羟基脲不耐受。

在一些实施方案中，患者在用鲁索替尼治疗期间正在表现出或经历或已经表现出或经历了以下中的一种或多种：在鲁索替尼治疗期间的任何时间缺乏反应、疾病进展或反应丧失。在一些实施方案中，疾病的进展由鲁索替尼治疗期间脾脏尺寸的增加来证明。

在一些实施方案中，先前用鲁索替尼治疗的患者具有与骨髓增生性病症相关或指示骨髓增生性病症的体细胞突变或克隆标志物。在一些实施方案中，体细胞突变选自JAK2突变、CALR突变或MPL突变。在一些实施方案中，JAK2突变是V617F。在一些实施方案中，CALR突变是外显子9中的突变。在一些实施方案中，MPL突变选自W515K和W515L。

在一些实施方案中，本公开提供了一种治疗复发性或难治性骨髓增生性病症的方法，其中所述骨髓增生性病症是复发的或鲁索替尼难治的。

在一些实施方案中，骨髓增生性病症选自中度风险MPN相关的骨髓纤维化和高风险MPN相关的骨髓纤维化。

在一些实施方案中，中度风险MPN相关的骨髓纤维化选自原发性骨髓纤维化、真性红细胞增多症后(PV后)骨髓纤维化和原发性血小板增多症后(ET后)骨髓纤维化。在一些实施方案中，MPN相关的骨髓纤维化为中度风险1(也称为中度1风险)。在一些实施方案中，MPN相关的骨髓纤维化是中度风险2(也称为中度2风险)。

在一些实施方案中，高风险MPN相关的骨髓纤维化选自原发性骨髓纤维化、真性红细胞增多症后(PV后)骨髓纤维化和原发性血小板增多症后(ET后)骨髓纤维化。

在一些实施方案中，本公开提供了一种使患有或诊断出骨髓增生性病症的患者的脾脏体积减小至少25％的方法。在一些实施方案中，患者的脾脏体积减小了至少35％。在一些实施方案中，脾脏体积通过磁共振成像(MRI)、计算机断层摄影(CT)和/或触诊来测量。在一些实施方案中，脾脏体积减小至少35％在第6周期结束时出现。

在一些实施方案中，本公开提供了一种改善患有或诊断出骨髓增生性病症的患者的总生存期的方法。在一些实施方案中，总生存期相对于最佳可用疗法得到改善。

在一些实施方案中，本公开提供了一种改善患有或诊断出骨髓增生性病症的患者的症状反应率的方法。在一些这样的实施方案中，症状反应率由总症状评分(TSS)降低至少50％来证明。在一些实施方案中，症状反应率由在48周时总症状评分(TSS)降低至少50％来证明。在一些实施方案中，症状反应率由在24周时总症状评分(TSS)降低至少50％来证明。在一些实施方案中，症状反应率相对于最佳可用疗法得到改善。

在一些实施方案中，本公开提供了增加已复发的或鲁索替尼难治的患者群体的中位生存期的方法。在一些实施方案中，已复发的或鲁索替尼难治的患者的中位生存期大于6个月。在一些实施方案中，已复发的或鲁索替尼难治的患者的中位生存期大于1年。在一些实施方案中，已复发的或鲁索替尼难治的患者的中位生存期大于1.5年。在一些实施方案中，已复发的或鲁索替尼难治的患者的中位生存期大于3年。在一些实施方案中，已复发的或鲁索替尼难治的患者的中位生存期大于5年。在一些实施方案中，中位生存期相对于最佳可用疗法增加。

在一些实施方案中，本公开提供了一种降低具有与骨髓增生性病症相关或指示骨髓增生性病症的体细胞突变或克隆标志物的患者中的等位基因负担的方法。在一些实施方案中，等位基因负担相对于在用化合物I或其药学上可接受的盐或水合物治疗之前患者的等位基因负担降低。在一些实施方案中，体细胞突变选自JAK2突变、CALR突变或MPL突变。在一些实施方案中，JAK2突变是V617F。在一些实施方案中，CALR突变是外显子9中的突变。在一些实施方案中，MPL突变选自W515K和W515L。

在一些实施方案中，所提供的方法诱导完全反应(CR)。在一些实施方案中，完全反应包括以下中的一者或多者：

·骨髓：*按年龄调整的正常细胞构成；<5％胚细胞；≤1级骨髓纤维化和

·外周血：血红蛋白≥100g/L且<正常上限(UNL)；中性粒细胞计数≥1x 10⁹/L且<UNL；

·血小板计数≥100x 10⁹/L且<UNL；<2％的未成熟髓样细胞和

·临床：疾病症状消退；肝脾不可触及；无髓外造血(EMH)证据

在一些实施方案中，所提供的方法诱导部分反应(PR)。在一些实施方案中，部分反应包括以下中的一者或多者：

·外周血：血红蛋白≥100g/L且<UNL；中性粒细胞计数≥1x 10⁹/L且<UNL；血小板计数≥100x 10⁹/L且<UNL；<2％的未成熟髓样细胞和

·临床：疾病症状消退；肝脾不可触及；无EMH证据，或

·骨髓：*按年龄调整的正常细胞构成；<5％胚细胞；≤1级骨髓纤维化，和外周血：血红蛋白≥85但<100g/L且<UNL；中性粒细胞计数≥1x 10⁹/L且<UNL；血小板计数≥50但<100x 10⁹/L且<UNL；<2％的未成熟髓样细胞和

·临床：疾病症状消退；肝脾不可触及；无EMH证据

在一些实施方案中，所提供的方法诱导临床改善(CI)。在一些实施方案中，临床改善包括获得贫血、脾脏或症状反应，而没有进行性疾病或者贫血、血小板减少或中性粒细胞减少的严重程度的增加。

在一些实施方案中，所提供的方法诱导脾脏反应。在一些实施方案中，脾脏反应包括以下中的一者或多者：

·在左肋缘(LCM)下方5-10cm处可触及的基线脾脏肿大变得不可触及，或者

·在LCM下方>10cm处可触及的基线脾脏肿大减小了≥50％

·在LCM下方<5cm处可触及的基线脾脏肿大不符合脾脏反应

·脾脏反应需要由显示出脾脏体积减小≥35％的MRI或计算机断层摄影来证实

在一些实施方案中，与最佳可用疗法相比，所提供的方法诱导脾脏和疾病无进展生存期(SDPFS)。

在一些实施方案中，本公开提供了一种将与用化合物I和/或化合物II治疗有关或者由用化合物I和/或化合物II治疗引起的一个或多个不良事件降低至最低限度的方法。在一些实施方案中，患者处于罹患韦尼克脑病的风险中。在一些这样的实施方案中，针对韦尼克脑病监测患者。

在一些实施方案中，骨髓增生性病症是骨髓纤维化。在一些实施方案中，骨髓纤维化是原发性骨髓纤维化。在一些实施方案中，骨髓纤维化是继发性骨髓纤维化。在一些实施方案中，骨髓纤维化是原发性血小板增多症后骨髓纤维化。在一些实施方案中，骨髓纤维化是真性红细胞增多症后骨髓纤维化。

在一些实施方案中，骨髓增生性病症是真性红细胞增多症。在一些实施方案中，骨髓增生性病症是原发性血小板增多症。在一些实施方案中，骨髓增生性病症是急性髓系白血病。

在一些实施方案中，化合物I以盐酸盐的形式施用。在一些这样的实施方案中，化合物I以二盐酸盐的形式施用。在一些实施方案中，化合物I以二盐酸盐一水合物(例如，化合物II)的形式施用。应理解的是，本文中对化合物I的提及旨在涵盖所有盐和形式，包括盐酸盐、二盐酸盐和二盐酸盐一水合物形式。

在一些实施方案中，化合物I或其药学上可接受的盐或水合物(例如化合物II)以单位剂型施用于患者。在一些实施方案中，化合物I或化合物II的单位剂型是所述化合物的游离碱重量的摩尔当量。例如，100mg剂量的化合物I的游离碱形式等于约117.30mg化合物I的二盐酸盐一水合物形式(即化合物II)。在一些实施方案中，化合物I或化合物II的单位剂型为约50mg、约100mg、约150mg或约200mg，其中化合物I或化合物II的量为所述化合物的游离碱重量的摩尔当量。在一些实施方案中，化合物I或化合物II的单位剂型为100mg，其中化合物II的量为所述化合物的游离碱重量的摩尔当量。

在一些实施方案中，化合物I或其药学上可接受的盐或水合物(例如化合物II)以口服剂型施用。在一些这样的实施方案中，口服剂型是胶囊。在一些实施方案中，口服剂型是片剂。

在一些实施方案中，化合物I或其药学上可接受的盐或水合物(例如化合物II)每天施用一次(QD)。在一些实施方案中，化合物I或其药学上可接受的盐或水合物(例如化合物II)以约200mg、约300mg或约400mg的每日总剂量施用。在一些实施方案中，化合物I或化合物II以约400mg的每日总剂量施用于患者。在一些实施方案中，化合物I或化合物II以约300mg的每日总剂量施用于患者。在一些实施方案中，化合物I或化合物II以约200mg的每日总剂量施用于患者。在一些实施方案中，化合物I或化合物II的每日总剂量因不良事件而被修正。在一些实施方案中，化合物I或化合物II的每日总剂量降低。在一些实施方案中，化合物I或化合物II的每日总剂量从约400mg降低至约300mg。在一些实施方案中，化合物I或化合物II的每日总剂量降低至约200mg。应理解的是，化合物I或化合物II的量(例如，每日总剂量)为例如，约400mg、约300mg或约200mg的游离碱重量的摩尔当量。

在一些实施方案中，化合物I或其药学上可接受的盐或水合物(例如化合物II)每天施用一次，持续28天的周期。在一些实施方案中，化合物I或其药学上可接受的盐或水合物(例如化合物II)每天施用一次，持续两个28天的周期。在一些实施方案中，化合物I或其药学上可接受的盐或水合物(例如化合物II)每天施用一次，持续三个、四个、五个或更多个28天的周期。在一些实施方案中，化合物I或其药学上可接受的盐或水合物(例如化合物II)每天施用一次，持续六个、七个、八个、九个、十个、十一个、十二个或更多个28天的周期。在一些实施方案中，化合物I或其药学上可接受的盐或水合物(例如化合物II)每天施用一次，持续至少六个28天的周期。在一些实施方案中，化合物I或其药学上可接受的盐或水合物(例如化合物II)每天施用一次，直到疾病的症状不再可测量为止。在一些实施方案中，化合物I或化合物II在患者的整个生命期内施用。在一些实施方案中，化合物I或化合物II每天施用一次，持续一个或多个28天的周期，随后是剂量假期。如本文所用的“剂量假期”是指不向患者施用化合物I或化合物II的时间段。在一些实施方案中，剂量假期是一天、一周或一个28天的周期。在一些实施方案中，化合物I或化合物II每天施用一次，持续一个或多个28天的周期，随后是剂量假期，然后以与剂量假期前的剂量相同的剂量水平恢复化合物I或化合物II的每天一次施用。在一些实施方案中，化合物I或化合物II每天施用一次，持续一个或多个28天的周期，随后是剂量假期，然后以比剂量假期前化合物I或化合物II的剂量低100mg的剂量水平恢复化合物I或化合物II的每天一次施用。在一些实施方案中，在先前的剂量降低后，以100mg向上滴定化合物I或化合物II的每日总剂量。应理解的是，化合物I或化合物II的量(例如，每日总剂量)为例如，约400mg、约300mg或约200mg的游离碱重量的摩尔当量。

在一些实施方案中，患者患有骨髓增生性疾病或疾患。在一些实施方案中，骨髓增生性疾病或疾患选自原发性骨髓纤维化、继发性骨髓纤维化、真性红细胞增多症和原发性血小板增多症。在一些实施方案中，继发性骨髓纤维化选自真性红细胞增多症后骨髓纤维化和原发性血小板增多症后骨髓纤维化。在一些实施方案中，骨髓增生性病症是急性髓系白血病(AML)。在一些实施方案中，原发性骨髓纤维化是动态国际预后评分系统(DIPSS)中度或高风险原发性骨髓纤维化。在一些实施方案中，所述方法包括向有需要的患者施用包含化合物I或其药学上可接受的盐或水合物的组合物。在一些实施方案中，所提供的方法包括向有需要的患者施用包含化合物II的组合物。

在一些实施方案中，先前疗法为用化合物I或其药学上可接受的盐或其水合物治疗。在一些实施方案中，先前疗法在出现淀粉酶、脂肪酶、天冬氨酸转氨酶(“AST”)、丙氨酸转氨酶(“ALT”)和/或肌酸酐水平升高的迹象后停用。在一些实施方案中，先前疗法在出现选自由贫血、血小板减少和中性粒细胞减少组成的组的血液学疾患的迹象后停用。

本文中列出的每一篇参考文献均据此通过引用整体并入本文。

实施例

实施例1.

方案概述.这项研究录入大约192位受试者，以2:1的比例将其随机分配到一项多中心、开放标签、随机、多国研究的两个臂之一中，其中受试者先前已经用鲁索替尼治疗，并且具有DIPSS(动态国际预后评分系统)中度或高风险原发性骨髓纤维化(PMF)、真性红细胞增多症后骨髓纤维化(PV后MF)或原发性血小板增多症后骨髓纤维化(ET后MF)。

目的.本研究的主要目的是评价在菲卓替尼和最佳可用疗法(BAT)臂中脾脏体积减小至少35％的受试者的百分比。次要目的是：

·评价如通过骨髓纤维化症状评估表(MFSAF)测量的骨髓纤维化(MF)相关症状

·评价脾脏体积减小(SVR)至少25％的受试者的百分比

·评价菲卓替尼的安全性

·评价根据触诊的脾脏尺寸的减小

·评价根据MRI/CT以及根据触诊的脾脏反应的持久性

·评价症状反应的持久性

·评价脾脏和疾病无进展生存期

·评估胃肠道事件和韦尼克脑病(WE)的风险减轻策略的有效性

·评价如通过欧洲癌症研究与治疗生活质量组织C30(European Organizationfor Research and Treatment of Cancer Quality of Life C30,EORTC QLQ-C30)测量的健康相关生活质量(HRQoL)

·评价如通过EQ-5D-5L问卷测量的患者报告结局(PRO)

·评价总生存期(OS)

探索性目的是：

·评价根据触诊的脾脏反应时间

·评价通过MRI-CT确定的脾脏反应，其中在前6个周期期间反应最佳

·探索与功效参数有关的菲卓替尼活性的药效学作用(例如，循环细胞因子、造血细胞谱分析)

·探索与功效参数有关的预后标志物(例如，基因突变)

·评价接受菲卓替尼治疗的受试者的菲卓替尼的群体药代动力学和暴露-反应关系

·评估研究治疗对用不良事件通用术语标准的患者报告结局版本(PatientReported Outcome Version of the Common Terminology Criteria for AdverseEvents,PRO-CTCAE)评估的来自受试者的角度的选定治疗相关症状(腹泻、恶心、呕吐、头晕、头痛)的影响。

研究群体.将大约192位受试者按2:1的比例随机分配到菲卓替尼臂或最佳可用疗法(BAT)臂中。

根据以下进行随机分层：

·风险类别(DIPSS)中度-1和中度-2与高风险

·根据触诊的脾脏尺寸：LCM下方<15cm与LCM下方≥15cm

·血小板≥100,000/μL与血小板<100,000/μL

纳入标准.受试者必须满足以下标准才能录入本研究：

1.受试者签署知情同意书(ICF)时的年龄至少为18岁

2.受试者的美国东部肿瘤协作组(ECOG)体能状态评分(PS)为0、1或2

3.受试者具有根据2016年世界卫生组织(WHO)标准的原发性骨髓纤维化(PMF)的诊断，或根据IWG-MRT 2007标准的ET后或PV后骨髓纤维化的诊断，所述诊断被最新的局部病理学报告所证实。

4.受试者具有中度或高DIPSS风险评分

5.受试者在筛选期间具有可测量的脾脏肿大，如由根据MRI或CT扫描评估脾脏体积≥450cm³或者由在左肋缘下方测得≥5cm的可触及脾脏所证明的

6.受试者先前已暴露于鲁索替尼，并且必须至少符合以下标准之一(a或b)

a.用鲁索替尼治疗≥3个月，其中功效反应不足被定义为根据MRI的脾脏体积减小<10％或者根据触诊的脾脏尺寸从基线下降<30％，或在初始反应后再生长至这些参数。

b.用鲁索替尼治疗≥28天，并伴有以下中的任一种：

-红细胞输注需求的发展(至少2个单位/月，持续2个月)或

-在用鲁索替尼治疗时出现血小板减少、贫血、血肿和/或出血的≥3级的AE。

7.受试者的来自既往疗法的治疗相关毒性必须在随机分配前消退为1级或最后一次疗法开始之前的预治疗基线

8.在进行任何研究相关评估/程序之前，受试者必须了解并自愿签署ICF

9.受试者愿意并能够遵守研究访问时间表和其他协议要求

10.有生育潜能的女性(FCBP)必须：

a.在开始研究治疗前的筛选期间，经研究者两次证实妊娠试验阴性。她必须同意在研究过程中以及在研究治疗结束之后进行妊娠试验。即使受试者对异性接触实行真正的节制禁欲*，这也适用。

b.在开始使用研究用产品之前14天、在研究疗法(包括剂量中断)期间以及在研究疗法停用之后28天内，要么承诺对异性接触实行真正禁欲*(必须每月审查一次，并记录来源)，要么同意使用并且能够不间断地遵守可接受的有效避孕措施**。

注意：有生育潜能(FCBP)的女性是：1)在某个时间点已达到月经初潮的女性；2)未经历子宫切除术或双侧卵巢切除术的女性；或3)至少尚未自然地绝经(癌症疗法后的闭经不排除有生育潜能)连续24个月(即，在先前连续24个月的任何时间点有过月经)的女性。

11.男性受试者必须：

在参加研究时、在剂量中断期间以及在研究用产品停用后至少30天或者针对每种化合物和/或根据当地法规的要求更长的时间内，实行真正禁欲*(必须每月审查)，或者与怀孕的女性或有生育能力的女性进行性接触期间同意使用避孕套，即使他已经历过成功的输精管切除术也是如此。

*当真正禁欲与受试者的首选和通常的生活方式一致时，真正禁欲是可以接受的。[周期性禁欲(例如日历、排卵、安全期避孕(symptothermal)、排卵后方法)和体外射精(withdrawal)是不可接受的避孕方法]。

**同意使用高效避孕方法，所述高效避孕方法是当在整个研究过程中持续正确使用时，单独或组合使用会导致Pearl指数的失败率每年低于1％的避孕方法。这样的方法包括：组合的(含雌激素和孕激素)激素避孕：口服、阴道内、透皮；与抑制排卵相关的仅有孕激素的激素避孕：口服；可注射的激素避孕；可植入的激素避孕；放置宫内节育器(IUD)；放置宫内激素释放系统(IUS)；双侧输卵管阻塞；伴侣输精管切除。

排除标准.任何以下情况的存在都将排除对受试者的录入：

1.任何以下实验室异常：

a.血小板<50,000/μL

b.中性粒细胞绝对计数(ANC)<1.0x 10⁹/L

c.外周血中成髓细胞≥5％

d.血清肌酐清除率<30mL/min(根据肾脏疾病饮食修正[MDRD]的公式)

e.血清淀粉酶和脂肪酶>1.5x ULN

f.天冬氨酸转氨酶(AST)或丙氨酸转氨酶(ALT)>3x正常上限(ULN)

g.总胆红素>1.5x ULN，如果直接胆红素分数<总胆红素的25％，则受试者的总胆红素在1.5–3.0x ULN之间是合格的2.受试者是怀孕女性或哺乳期女性

3.先前接受脾切除术的受试者

4.先前或计划接受造血细胞移植的受试者

5.既往有韦尼克脑病(WE)病史的受试者

6.具有WE体征或症状(例如，严重共济失调、眼麻痹或小脑体征)的受试者没有根据硫胺素水平和脑MRI排除WE的记录

7.受试者患有硫胺素缺乏症(被定义为全血中的硫胺素水平低于根据机构标准的正常范围)，并且在分组前未证明得到纠正

8.受试者采用了利用或使用以下的伴随治疗：已知为细胞色素P450 3A4(CYP3A4)、治疗范围狭窄的敏感的CYP3A4底物、治疗范围狭窄的敏感的细胞色素P450 2C19(CYP2C19)底物，或治疗范围狭窄的敏感的细胞色素P450 2D6(CYP2D6)底物的的强诱导剂的药物、草药剂或食物

9.受试者正在接受任何化学疗法、免疫调节药物疗法(例如沙利度胺，干扰素-α)、阿那格雷、免疫抑制疗法、>10mg/天的强的松或等效物的全身性皮质类固醇。过去已经既往暴露于羟基脲(例如Hydrea)的受试者可以被录入研究，只要在随机分配之前的14天内没有施用它即可

10.受试者在随机分配之前的14天内接受了鲁索替尼

11.受试者先前暴露于除鲁索替尼治疗以外的Janus激酶(JAK)抑制剂

12.受试者正在接受每日剂量>150mg的阿司匹林治疗

13.受试者在随机分配前28天内接受大手术

14.受试者诊断为慢性肝病(例如，慢性酒精性肝病、自身免疫性肝炎、硬化性胆管炎、原发性胆汁性肝硬化、血色素沉着症、非酒精性脂肪性肝炎)

15.受试者既往患有除所研究的疾病以外的恶性肿瘤，除非该受试者在随机分配之前至少三年不需要接受针对该恶性肿瘤的治疗。然而，具有以下病史/并发疾患且已成功治疗的受试者可以录入：非浸润性皮肤癌、原位宫颈癌、原位乳腺癌、前列腺癌的偶然组织学发现(使用肿瘤、淋巴结、转移[TNM]临床分期系统的T1a或T1b)，或者无疾病且仅接受激素治疗

16.受试者患有不受控制的充血性心力衰竭(纽约心脏协会分级为3级或4级)

17.受试者患有已知的人类免疫缺陷病毒(HIV)感染、已知的活动性感染性乙型肝炎(HepB)和/或已知的活动性感染性丙型肝炎(HepC)

18.受试者患有严重的活动性感染

19.受试者患有会抑制口服药物吸收的任何重大胃病或其他病症

20.受试者无法吞下胶囊

21.受试者患有会妨碍受试者参与研究的任何重大医学疾患、实验室异常或精神病。

22.受试者具有在受试者参与研究时会使他/她处于不可接受的风险中的任何状况(包括实验室异常的存在)，或者任何扰乱了解释来自研究的数据的能力的状况

23.受试者具有扰乱了解释来自研究的数据的能力的任何状况

24.受试者在随机分配前30天内参与了研究用剂(药物、生物制剂、装置)的任何研究

研究设计.该研究包括：

·28天的筛选期

·以2:1随机分配给菲卓替尼或最佳可用疗法(BAT)

·根据以下进行随机分层：

-风险类别(DIPSS)中度-1和中度-2与高风险

-根据触诊的脾脏尺寸：左肋缘(LCM)下方<15cm与LCM下方≥15cm

-血小板≥100,000/μL与血小板<100,000/μL

·研究治疗期(接受研究药物的时间加上最后一个剂量之后的30天)

·在第6周期反应评估之后，或在通过MRI/CT扫描证实脾脏肿大进展的情况下在第6周期反应评估之前，允许受试者从BAT转换到菲卓替尼臂

·针对进展和生存的生存随访期

预期的研究持续时间大约为5年，其中包括大约24个月用于完全录入，以及30个月用于治疗和随访。试验的实际持续时间将取决于受试者的中位治疗持续时间。

试验的结束定义为：完成生存随访的最后一位受试者的最后访问日期，或者从最后一位受试者那里收到如协议中预先指定的主要、次要和/或探索性分析所需的最后一个数据点的日期，以较晚的日期为准。试验的结束预期在最后一位受试者被随机分配之后大约2年。当已经分析了研究的所有关键终点和目的时，试验结束。保持积极治疗并继续获益的受试者可在研究结束之后获得续期协议(roll-over protocol)或向他们提供研究药物的替代方式。

筛选期.所有录入的受试者将在筛选期间经历筛选程序，所述筛选程序必须在研究治疗开始之前的28天内完成。这将用于基于协议中定义的所有纳入和排除标准确定研究资格。对于在筛选期间接受鲁索替尼或在筛选期间检测到具有潜在可逆的实验室异常(或其他排除患者录入的标准)的受试者，筛选期可延长至35天(另外加7天)。如果需要的话，随机分配之前将会有按照纳入和排除标准的根据处方信息的先前治疗递减期以及先前治疗洗脱期，所述先前治疗递减期以及先前治疗洗脱期将在本研究的筛选MRI/CT扫描之前至少14天开始。

随机分配.证实符合资格后，将受试者将按2:1的比例随机分配至以下臂之一中：

·第1臂(菲卓替尼)将包括多达128位接受400mg菲卓替尼的受试者

·第2臂(BAT)将包括多达64位接受最佳可用疗法的受试者

治疗期.出于管理目的，将周期定义为4周(28天)，而不考虑指定的治疗臂。受试者可以用研究治疗继续治疗，直到出现不可接受的毒性、缺乏治疗效果、疾病进展或直到撤回同意书为止。

菲卓替尼的剂量为400mg/天口服(4x 100mg胶囊)，可在门诊连续每天一次自行施用，优选每天在相同时间与晚餐一起施用。如果漏服一剂，则应在第二天的与先前在错过剂量之前服用的时间相同的时间服用下一剂。菲卓替尼以二盐酸盐一水合物形式(即化合物II)施用。

与菲卓替尼相关的最常见不良事件是血液学和胃肠道的不良事件。与JAK抑制剂相关的血液学不良事件是剂量依赖性的、是基于机制的，并且通过剂量降低、剂量中断和输血来管理。

如果从起始剂量降低2个剂量水平之后受试者仍不耐受菲卓替尼治疗，则必须将他/她从研究治疗中撤出。如果毒性在如“剂量修正时间表(Dose Modification Scheduletable)”的表格(表1)中指定的时间段内仍未消退，则必须将受试者研究治疗中撤出。如剂量修正时间表的表格(表1)中所定义，在某些情况下可再度逐步升级剂量。菲卓替尼的日剂量不能超过400mg/天。

对接受最佳可用疗法方案(BAT)臂治疗的受试者将根据当地处方信息进行治疗。BAT可包括任何研究者选定的治疗，并且不限于经过批准的JAK抑制剂(根据处方信息加以使用)、化学疗法(例如，羟基脲)、阿那格雷、皮质类固醇、造血生长因子、免疫调节剂、雄激素、干扰素，并且还可包括“不治疗”和针对症状的治疗。BAT不得包括研究用剂、菲卓替尼(如果在研究过程中获得批准)和造血干细胞移植。

在证实脾脏肿大进展(根据MRI/CT扫描)情况下在第6周期反应评估之前的任何时间，或者在第6周期反应评估之后，受试者可从BAT臂转换到菲卓替尼臂。证实脾脏肿大进展被定义为与中央成像实验室所评估的受试者基线相比，根据MRI/CT扫描(在转换之前28天之内)的脾脏体积增大≥25％。BAT臂中的在第6周期反应评估之前停用治疗剂但未被证实脾脏肿大进展的受试者被允许继续留在研究中，并最终在第6周期反应评估时转换。

任何以下情况的存在都将排除受试者转换到菲卓替尼治疗：

1.在转换之前28天之内评估的以下任何实验室异常：

·在伴有大出血的情况下，血小板<25,000/μL或血小板<50,000/μL

·中性粒细胞绝对计数(ANC)<0.5x 109/L

·外周血中成髓细胞≥5％

·血清肌酐清除率<30mL/min(根据肾脏疾病饮食修正[MDRD]的公式)

·血清淀粉酶或脂肪酶>2.0x ULN

·天冬氨酸转氨酶(AST)或丙氨酸转氨酶(ALT)>3x正常上限(ULN)

·总胆红素>1.5x ULN，如果直接胆红素分数<总胆红素的25％，则受试者的总胆红素在1.5–3.0x ULN之间是合格的2.受试者具有指示转化/进展到骨髓纤维化急变期的体征

3.受试者在转换前14天之内接受了鲁索替尼、任何其他JAK抑制剂或羟基脲

4.受试者患有硫胺素缺乏症(被定义为全血中的硫胺素水平低于根据机构标准的正常范围)，并且在转换前未证明得到纠正

5.具有WE体征或症状(例如，严重共济失调、眼麻痹或小脑体征)的受试者没有根据硫胺素水平和脑MRI排除WE的记录

6.受试者采用了利用或使用以下的伴随治疗：已知为细胞色素P450 3A4(CYP3A4)、治疗范围狭窄的敏感的CYP3A4底物、治疗范围狭窄的敏感的细胞色素P450 2C19(CYP2C19)底物，或治疗范围狭窄的敏感的细胞色素P450 2D6(CYP2D6)底物的的强诱导剂的药物、草药剂或食物

7.受试者患有严重的活动性感染

在研究过程中将监测所有受试者的不良事件。出于任何原因停用协议规定的疗法的所有受试者将在最后一剂研究药物后的30天内被随访，以收集安全性数据。

预期菲卓替尼臂中每位受试者的平均治疗期大约为12个月。在证实脾脏肿大进展(根据MRI/CT扫描)情况下在第6周期反应评估之前的任何时间，或者在第6周期反应评估之后，接受BAT的受试者可转换至菲卓替尼治疗。个体受试者的实际研究持续时间将取决于实际治疗持续时间和生存随访持续时间，预期不超过5年。

可以采用灵活的剂量修正方案将个体受试者的药物毒性降低至最低限度，可能的每日剂量为200mg、300mg或400mg。对于肾功能严重损伤并且共同施用强或中等CYP3A4抑制剂的受试者，调整菲卓替尼的剂量，这在下文中有讨论。

菲卓替尼的剂量修正时间表

与菲卓替尼相关的最常见不良事件是血液学和胃肠道事件。与JAK抑制剂相关的血液学不良事件是剂量依赖性的、是基于机制的，并且通过剂量降低、剂量中断和输血来管理。

如果受试者经历下表1中指定的药物毒性，则必须中断给药；在一些情况下(即，当它不是肝功能测试(LFT)异常时)，剂量可以根据研究者的判断在研究过程中以100mg/天递减来滴定，降低到200mg/天的最小剂量。

如果从起始剂量降低2个剂量水平之后受试者仍不耐受菲卓替尼治疗，则必须将他/她从研究治疗中撤出。如果毒性在表1中指定的时间段内仍未消退，则必须将受试者从研究治疗中撤出。在某些情况下，可再度逐步升级剂量。菲卓替尼的日剂量不能超过400mg/天(基于游离碱重量)。

表1.菲卓替尼的剂量修正时间表

AE＝不良事件；ALT＝丙氨酸转氨酶；AST＝天冬氨酸转氨酶；GI＝胃肠道；LFT＝肝功能测试。

与强和中度CYP3A4抑制剂共同施用的剂量调整

菲卓替尼与强或中度CYP3A4抑制剂伴随施用可增加菲卓替尼的暴露。菲卓替尼暴露增加可增加暴露相关AE的风险，需要仔细考虑。

对于采用与强CYP3A4抑制剂的共同施用的受试者，建议菲卓替尼起始剂量的剂量降低-从400mg剂量降低至200mg。如果治疗期间需要引入强CYP3A4抑制剂，考虑以2个剂量水平递减的剂量降低(例如，从300mg减少至100mg)。强CYP3A4抑制剂包括但不限于波普瑞韦、可比司他(cobicistat)、考尼伐坦、达诺瑞韦和利托那韦、埃替拉韦和利托那韦、葡萄柚汁、茚地那韦和利托那韦、伊曲康唑、酮康唑、洛匹那韦和利托那韦、帕利瑞韦和利托那韦和(奥比他韦和/或达沙布韦)、泊沙康唑、利托那韦、沙奎那韦和利托那韦、特拉匹韦、替拉那韦和利托那韦、醋竹桃霉素和伏立康唑。

对于采用与中度CYP3A4抑制剂的共同施用的受试者，建议菲卓替尼起始剂量的剂量降低-从400mg剂量降低至300mg。如果治疗期间需要引入中度CYP3A4抑制剂，考虑以1个剂量水平递减的剂量降低(例如，从300mg降低至200mg)。中度CYP3A4抑制剂包括但不限于阿瑞吡坦、西咪替丁、环丙沙星、克霉唑、克唑替尼、环孢菌素、决奈达隆、红霉素、氟康唑、氟伏沙明、伊马替尼、托非索泮和维拉帕米。

如果由于菲卓替尼血浆浓度可能增加，需要基于任何菲卓替尼相关AE将菲卓替尼的剂量降低至每天每日100mg以下，则考虑通过每隔天施用例如100mg菲卓替尼来降低平均每日剂量，这等同于50mg的每日平均剂量。如果在降低菲卓替尼剂量之后仍不能使AE消退，则基于患者的总体获益/风险考虑中断菲卓替尼或强CYP3A4抑制剂的给药。在停用与CYP3A4抑制剂共同施用的情况下，则应当相应地再度逐步升级菲卓替尼的剂量。

针对肾功能损害的剂量调整。对于发生轻度至中度肾功能损害的受试者，建议不调整剂量。在研究过程中发生严重肾功能损害的受试者中，应当按照一个剂量递减水平(例如，从400mg到300mg每天一次[QD])调整菲卓替尼的剂量。对于计划剂量为200mg QD的受试者，允许减少至100mg。

将收集外周血和血清用于探索性评价在基线以及治疗期间的突变、细胞因子和循环血细胞谱，以评价菲卓替尼的药效学作用。药效学措施可包括炎性细胞因子(例如，肿瘤坏死因子-a[TNF-a]、白细胞介素12[IL-12])、免疫调节细胞因子(例如IL-2、IL-6、IL-8和IL-15))(Tefferi A,Pardanani A.JAK inhibitors in myeloproliferative neoplasms:rationale,current data and perspective.Blood Rev.2011Sep；25(5):229-37),fibrosis markers(e.g.,transforming growth factor-β[TGF-β]),signalingpathways,gene expression and/or other molecular markers。将评价在开始进入研究时血液中的突变谱，以对患者的预后风险进行分类。将评价治疗期间的突变谱，以评估与针对菲卓替尼疗法的反应和复发相关的分子变化。还将药效学作用与针对菲卓替尼疗法的反应和复发进行关联评价。

关键功效评估概述.

脾脏尺寸的评估.在筛选期间以及在第3、6、12、18、24周期结束时以及在治疗访问结束时，将在研究站点评估脾脏体积(MRI，或如果MRI禁忌则用CT扫描)。将集中审查MRI/CT扫描。集中审查将对臂分配和治疗设盲。

在筛选时以及在每个治疗周期的第1天、在治疗访问结束时以及在最后一剂菲卓替尼之后的30天随访时，还通过触诊评估脾脏尺寸。

MF相关症状的评估.将使用7天回忆期，使用MFSAF 4.0版进行MF相关症状评价(Gwaltney C,Paty J,Kwitkowski VE,Mesa RA,Dueck AC,Papadopoulos EJ等人，Development of a harmonized patient-reported outcome questionnaire to assessmyelofibrosis symptoms in clinical trials.Leuk Res.2017Aug；59:26-31)。

关键安全性评估概述.基于治疗紧急不良事件(TEAE)的发生率和临床实验室参数的变化、美国东部肿瘤协作组(ECOG)体能状态评分(PS)、心电图(ECG)和生命体征，评价菲卓替尼的安全性。

安全性评估将包括：

·每次研究访问时的不良事件(AE)和严重不良事件(SAE)的记录

·体格检查包括异常眼球运动、小脑异常、体重的评估

·生命体征

·认知评估：小型精神状态检查(MMSE)

·实验室评估：血液学、血清化学、硫胺素水平、凝血、尿液分析、血清/尿液妊娠测试

·心电图(ECG)

其他患者报告结局概述.将使用以下工具进行HRQoL/PRO评价：

·将使用欧洲癌症研究与治疗组织生活质量C30(European Organization forResearch and Treatment of Cancer Quality of Life C30,EORTC QLQ-C30)问卷第3版(Aaronson等人，1993)评估HRQoL及其各个领域。

·将使用针对5个等级的EQ-5D-5L分类器评估健康效用。该仪器包含评估可动性、自我护理、日常活动、疼痛/不适和焦虑/抑郁的5个项目，以及针对总体健康状况的视觉模拟量表(VAS)。

·将通过PRO-CTCAE评估从受试者角度出发选择的5种治疗相关症状(腹泻、恶心、呕吐、头晕、头痛)。

将在每个治疗周期的第1天、在治疗结束(EOT)和研究治疗的最后一剂之后的30天随访时，在所述站点进行所有的HRQoL/PRO评价。所有这些QoL相关评估都应当在研究者或指定人员在访问期间进行任何其他评估之前进行。

表2.研究终点

AE＝不良事件；C1D1＝第1周期的第1天；CT＝计算机断层摄影；CTCAE＝不良事件通用术语标准；EORTC QLQ-C30＝欧洲癌症研究与治疗生活质量组织；HRQoL＝健康相关生活质量；ICF＝知情同意书；LCM＝左肋缘；MFSAF＝骨髓纤维化症状评估表；MRI＝磁共振成像；NCI＝美国国家癌症研究所；PK＝药代动力学；PRO＝患者报告结局；PRO-CTCAE＝不良事件通用术语标准的患者报告结局版本；WE＝韦尼克脑病

功效分析.

ITT群体：这个群体将由被随机分配的所有受试者组成。这是功效变量的主要分析群体。所有使用这个群体的分析都将基于由交互式响应技术(IRT)分配的治疗。

根据MRI/CT的脾脏体积反应率(35％).根据MRI/CT的脾脏体积反应率的主要分析将基于ITT群体。当最后一个被随机分配的受试者完成了6个周期的菲卓替尼或BAT时，将发生RR的数据截止。在第6周期结束时MRI/CT脾脏体积缺失的受试者(包括那些在第6周期结束之前符合脾脏肿大进展标准的受试者)将被视为非反应者。对于转换受试者，将仅包括转换之前的数据。将进行Cochran-Mantel-Haenszel(CMH)测试，以在单侧2.5％α水平下比较菲卓替尼与BAT。将为每个臂提供RR和95％置信区间(CI)，并且提供菲卓替尼与BAT的RR差值和所述差值的95％置信区间。另外，将提供脾脏体积测量值和距离基线的变化百分比的描述性概要。

根据MRI/CT的脾脏体积反应率(25％).在第6周期结束时脾脏体积减小≥25％(RR25)的受试者比例是关键次要终点，并且将使用与RR相同的方法加以概述。在第6周期结束时MRI/CT脾脏体积缺失的受试者(包括那些在第6周期结束之前符合脾脏肿大进展标准的受试者)将被视为非反应者。对于转换受试者，将仅包括转换之前的数据。将使用ITT和功效可评价的群体(已接受治疗并具有基于基线MRI/CT扫描的可评价的脾脏体积测量值以及至少一项根据MRI/CT扫描的基线后反应评估的ITT群体受试者的子集)进行分析。所有使用这个群体的分析都将基于接受的实际治疗。这个群体将用作针对主要的和选定的次要功效变量的次要分析群体。

根据触诊的脾脏反应率(RRP).根据触诊的脾脏反应率为与基线相比在第6周期结束时具有根据IWG-MRT 2013的脾脏反应的受试者的比例。这将针对基线时脾脏增大(在LCM下方≥5cm)的受试者进行计算。在第6周期结束时脾脏尺寸评估缺失的受试者(包括那些在第6周期结束之前符合脾脏肿大进展标准的受试者)将不被视为反应者。将为每个臂提供根据触诊的RR和95％CI，并且提供菲卓替尼与BAT的差值和所述差值的95％CI。将基于ITT群体进行分析。

症状反应率(SRR).SRR是关键次要终点，并且被定义为通过MFSAF 4.0版测量的总症状评分(TSS)从基线到第6周期结束时降低≥50％的受试者的比例。对于SRR分析，没有基线TSS>0的受试者将被视为不可评价(由于没有可能减轻症状)。在第6周期结束时TSS缺失的受试者或在第6周期结束之前疾病进展的受试者将被视为非反应者。对于在第6周期评估结束之前转换的转换受试者，将仅包括转换日期之前的数据用于与菲卓替尼臂进行比较。将进行CMH测试，以在单侧2.5％α水平下比较菲卓替尼与BAT。将为每个臂提供比例和95％CI，并且提供菲卓替尼与BAT的比例差值和所述差值的95％CI。对于转换受试者，将使用与上述相同的方法单独地概述在菲卓替尼期间的SRR。不进行正式的统计测试来与BAT进行比较。该分析将基于转换时具有可评价TSS的转换功效群体。

根据触诊的脾脏反应持久性.根据触诊的脾脏反应持续时间(DRP)被定义为从首次记录到根据IWG-MRT 2013的可触及反应的时间到首次记录到根据IWG-MRT 2013的反应丧失的时间。将针对在基线时脾脏增大(在LCM下方≥5cm)并且具有根据触诊的脾脏反应的受试者，计算根据IWG-MRT 2013标准的根据触诊的脾脏反应持久性。在执行分析之前没有事件的情况下(即，没有根据触诊的脾脏反应丧失)，则将于在分析执行日期之前执行的最后一次有效评估的日期对DRP进行检查。对于没有事件的转换受试者，将在日期之前的最后一次有效评估的日期对DR进行检查。将使用Kaplan-Meier方法分析根据触诊的脾脏反应持续时间。将提供第25、50和75百分位数的K-M估计值以及中位数的95％置信区间。将绘制K-M曲线。将基于ITT群体进行分析。

根据MRI/CT的脾脏体积反应持久性.根据MRI/CT的脾脏体积反应持续时间(DR)被定义为从首次记录到脾脏反应(即，脾脏体积减小≥35％)到首次记录到脾脏体积减小<35％的时间。在执行分析之前没有事件(即，随后的脾脏体积减小<35％)的情况下，则将于在分析执行日期之前执行的最后一次有效评估的日期对DR进行检查。对于没有事件的转换受试者，将在转换日期之前的最后一次有效评估的日期对DR进行检查。将使用Kaplan-Meier方法分析根据MRI/CT扫描的脾脏体积反应持续时间。将为菲卓替尼臂和BAT臂两者提供第25、50和75百分位数的K-M估计值和中位值的95％置信区间。将绘制K-M曲线。

症状反应持久性(DSR).DSR被定义为从首次记录到通过MFSAF4.0版测量的TSS的反应(即，TSS降低≥50％)到首次记录到TSS降低<50％的时间。在分析执行之前没有发生TSS降低<50％的情况下，则将于在分析执行日期之前执行的最后一次有效评估的日期对DSR进行检查。将使用Kaplan-Meier(K-M)方法分析DRS。将提供第25、50和75百分位数的K-M估计值以及中位数的95％置信区间。将绘制K-M曲线。

总症状评分(TSS).TSS被定义为7个症状评分中每一者的总和(Gwaltney C,PatyJ,Kwitkowski VE,Mesa RA,Dueck AC,Papadopoulos EJ等人，Development of aharmonized patient-reported outcome questionnaire to assess myelofibrosissymptoms in clinical trials.Leuk.Res.2017Aug；59:26-31)。为了允许与先前的MF研究进行间接比较，还将从考虑的6种症状(盗汗、瘙痒、腹部不适、早饱、左侧肋骨下疼痛、骨痛或肌肉痛)中得出修正的TSS(Mesa RA,Gotlib J,Gupta V,Catalano JV,Deininger MW,Shields AL等人，Effect of ruxolitinib therapy on myelofibrosis-relatedsymptoms and other patient-reported outcomes in COMFORT-I:a randomized,double-blind,placebo-controlled trial.J.Clin.Oncol.2013Apr 1；31(10):1285-92)，并且也将进行SRR分析。疲劳将作为EORTC QLQ-C30的一部分加以评估。在每个时间点，将计算TSS(基于7种症状)和修正的TSS。将提供针对基线评分、基线后评分以及TSS、修正的TSS和症状评分距离从基线的变化的描述性概要统计(尺寸、平均值、标准偏差、中位数、范围)。

脾脏和疾病无进展生存期(SDPFS).脾脏和疾病无进展生存期被定义为由于任何原因或疾病进展(IWG-MRT 2013修正版，包括根据MRI/CT的脾脏体积增加≥25％)所致的从随机分配到死亡的时间。在分析执行之前没有事件的情况下，则将在最后一次有效评估的日期对SDPFS进行检查。对于没有事件的转换受试者，将在转换日期之前的最后一次有效评估的日期对SDPFS进行检查。将使用Kaplan-Meier方法分析SDPFS。将为菲卓替尼臂和BAT臂两者提供第25、50和75百分位数的K-M估计值和中位值的95％置信区间。将绘制K-M曲线。将基于ITT群体进行分析。

总生存期.总生存期(OS)被定义为由于任何原因所致的从随机分配的日期到死亡的日期之间的时间间隔。在分析执行之前没有证实死亡的情况下，则将在已知受试者还活着的最后日期或在研究截止日期(如果适用)(以较早者为准)对OS进行检查。基于ITT群体，将使用Kaplan-Meier(K-M)方法分析OS。将为菲卓替尼臂和BAT臂两者提供第25、50和75百分位数的K-M估计值和中位值的95％置信区间。将绘制K-M曲线。

转换功效分析.对于转换受试者，将从菲卓替尼暴露期间的第1周期重新计数访问周期。将使用与上述相同的方法单独地概述在菲卓替尼期间的分析。不进行正式的统计测试来与BAT进行比较。所述分析将基于转换功效群体，所述转换功效群体被定义为所有从BAT臂转换到菲卓替尼臂的受试者。

探索性分析.

根据触诊的脾脏反应时间：根据触诊的脾脏反应时间(TTR)被定义为从随机分配到首次记录到可触及反应(即，根据触诊的脾脏尺寸下降≥50％，其中在基线时可触及脾脏)的时间。将针对在基线时脾脏增大的受试者，计算根据IWG-MRT 2013标准的根据触诊的脾脏反应时间。在分析执行之前没有可触及反应的情况下，则将在分析执行日期之前执行的最后有效评估的日期对TTR进行检查。将使用Kaplan-Meier方法分析TTR。将为两个臂提供第25、50和75百分位数的K-M估计值和中位值的95％置信区间。将绘制K-M曲线。

根据MRI/CT的最佳脾脏反应率：在前6个周期期间的最佳脾脏反应率(BRR)被定义为在前6个周期期间的任何时间脾脏体积从基线减小≥35％的受试者的比例。将为每个臂提供BRR和95％CI，并且提供菲卓替尼与BAT的BRR差值和所述差值的95％置信区间。

生存随访期.出于任何原因停用协议规定的疗法的所有受试者每3个月都将被随访以了解生存期、后续疗法、新的恶性肿瘤以及骨髓纤维化到急性髓系白血病(AML)的进展，直到死亡、失访、撤回针对进一步收集数据的同意书，或研究结束时为止，以先到者为准。

治疗后的随访期将持续长达12个月，并且预期的总研究持续时间(包括生存随访期)大约为4年。

胃肠道不良事件的管理.

潜在的韦尼克脑病(WE)的管理

潜在的WE病例为医疗紧急情况。按照以下步骤进行WE的筛选和在用菲卓替尼治疗期间的潜在的WE病例的管理：

临床和认知评估.间隔史：包括审查患者的意识错乱、记忆力问题、视力问题(例如，复视)以及营养不良的病史，吸收不良的体征和症状以及酒精使用

·体格检查：包括在筛选期间以及每个治疗周期的第1天、在治疗结束(EOT)时和30天随访期间评估异常眼球运动、小脑异常和体重(与先前检查或患者病史相比的体重减轻)

·小型精神状态检查(MMSE)：在筛选期间、在第2和第3周期以及此后每第3周期的第1天、在治疗访问结束时以及根据临床指示更频繁地客观地评估脑病的体征/症状

如果出现可能指示WE的体征或症状：

·保持菲卓替尼直到WE被排除

·获得针对硫胺素水平的样品

·根据经验开始施用硫胺素补充剂

·将事件以AESI形式报告给发起者

·进行神经学咨询

·进行脑部MRI

·如果证实WE，则永久停用菲卓替尼

硫胺素监测和纠正。将监测硫胺素水平(针对全血)，并且将向所有硫胺素水平低于正常范围的受试者施用硫胺素补充剂。

·硫胺素水平是在筛选时评估的，并且需要在开始菲卓替尼治疗之前加以纠正和重新测试

·在用菲卓替尼治疗期间，在第1、2、3周期和此后每第3周期的开始时、在治疗随访结束时以及根据以下临床指示评估硫胺素水平：

-如果受试者正在施用硫胺素补充剂，则应当在针对硫胺素补充剂的禁食状态下评估硫胺素水平，并在抽血后给予硫胺素

-如果硫胺素水平结果低于正常值，则该站点将尽快与受试者联系，以便开始施用硫胺素补充剂

-对于低于正常范围但≥30nM/L而无WE体征或症状的硫胺素水平：

ο必须开始补充100mg口服硫胺素

ο如果结果是通过当地实验室获得的，则将所述事件以特别关注的不良事件AESI)的形式报告给发起者

-对于<30nM/L并且有或无WE体征或症状的硫胺素水平：

ο立即用硫胺素(最好是IV)以治疗剂量(例如，经30分钟IV输注500mg，每天3次，持续2到3天，或者可替代地根据当地护理标准以等效剂量IM输注)进行治疗；

ο随后IV输注施用250mg到500mg硫胺素，每天一次，持续3到5天，或者可替代地根据当地护理标准以等效剂量IM输注施用；和

ο继续施用100mg每天口服剂量的硫胺素，持续至少90天

ο将所述事件以特别关注的不良事件AESI)的形式报告给发起者

ο必须保持菲卓替尼，直到硫胺素水平恢复到正常范围时为止。

-硫胺素补充剂应当以仅硫胺素的制剂的形式来施用

-如果硫胺素水平低，则要确保镁水平正常或如果低则予以纠正

特别关注的不良事件(AESI)是对了解研究用产品特有的引起科学关注和医学关注的事件，并且可能需要研究者密切监控并与发起者快速沟通。AESI将在研究者知道所述事件的24小时之内通过EDC或如果没有可用的EDC系统则通过其他指示的适当方法被报告，并且必须被视为“重要医疗事件”，即使没有其他严格标准适用也是如此；这些事件也必须记录在EDC中的SAE eCRF的一个或多个适当页面中。AESI的快速报告允许对这些事件进行持续监控，以表征和了解它们与这种研究用产品的使用的关联。根据需要可以将特别关注的事件提交给外部专家进行审查。

以下各项被视为特别关注的不良事件(AESI)：

·与硫胺素水平低于正常范围相关的韦尼克脑病(WE)或疑似WE病例。

·硫胺素水平低于正常范围伴有或不伴有WE体征或症状

·在开始研究治疗之后的新的恶性肿瘤

·骨髓纤维化进展为急性髓系白血病(AML)

·根据CTCAE标准v 5.0的3级和4级高脂肪酶血症

·根据CTCAE标准v 5.0的3级和4级高淀粉酶血症或胰腺炎事件

·3或4级丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)或总胆红素升高或肝脏毒性事件

恶心和呕吐的管理.按照以下步骤进行在用菲卓替尼治疗期间的恶心和呕吐的管理：

·在开始治疗之前，将为受试者提供管理说明(包括何时联系研究站点)

·为了减轻恶心和呕吐事件，推荐在晚餐期间将菲卓替尼与食物一起服用。将在PK采样日(C1D1，即在C2D1的前一天，和C2D1)提供有关菲卓替尼给药的具体说明

·强烈推荐在治疗的前8周根据当地实践进行预防性的抗恶心/呕吐治疗(例如，昂丹司琼)。如果使用茶苯海明或其他毒蕈碱型受体拮抗剂治疗恶心和呕吐，则要在晚上施用这些剂，以最大限度地减少嗜睡和其他潜在的神经系统AE

·根据表1保持/降低菲卓替尼的剂量

·对于3级或以上的恶心或呕吐或持续的事件，可能需要住院

·对于为了预防恶心和呕吐而施用的药物，如果在菲卓替尼治疗的前8周期间没有发生临床上显著的恶心和呕吐，则考虑使受试者断掉这些用药

腹泻的管理.按照以下步骤进行在用菲卓替尼治疗期间的腹泻的管理：

·在开始治疗之前，受试者应当具有在家中可用的洛哌丁胺，并且将为受试者提供腹泻管理说明(包括何时联系研究站点)

·如果受试者没有经历腹泻，则不应当给予洛哌丁胺作为预防

·腹泻开始时按照当地实践用洛哌丁胺治疗。考虑洛哌丁胺以4mg的负荷剂量开始，每次腹泻排便后2mg，不超过16mg/24小时

·饮食调整，包括充分的水合作用，避免食用含乳糖的食物和酒精，少量食用米饭、香蕉、面包等。

·根据表1保持/降低菲卓替尼的剂量

·对于3级或以上持续腹泻，可能需要住院

·在每个随后的28天周期的第1天、在前三个周期的第15天的受试者随访期间以及在第一个周期的第8天通过强制电话联系，评估恶心、呕吐和腹泻的管理。

Claims (25)

1.一种治疗骨髓增生性病症的方法，所述方法包括向先前用鲁索替尼治疗的患者施用化合物I

或其药学上可接受的盐或水合物。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述骨髓增生性病症是对鲁索替尼耐药的或鲁索替尼难治的。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述患者对鲁索替尼不耐受。

4.根据权利要求3所述的方法，其中对鲁索替尼的不耐受由血液学毒性或非血液学毒性来证明。

5.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述患者已经复发。

6.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其中所述患者在用鲁索替尼治疗期间表现出或经历以下一者或多者：缺乏反应、疾病进展或反应丧失。

7.根据权利要求6所述的方法，其中疾病进展由脾脏尺寸的增加来证明。

8.一种使患有或诊断出骨髓增生性病症的患者中的脾脏体积减小至少25％的方法，所述方法包括向先前用鲁索替尼治疗的患者施用化合物I

或其药学上可接受的盐或水合物。

9.根据权利要求8所述的方法，其中使所述患者的脾脏体积减小至少35％。

10.一种改善患有或诊断出骨髓增生性病症的患者的总生存期的方法，所述方法包括向先前用鲁索替尼治疗的患者施用化合物I

或其药学上可接受的盐或水合物。

11.一种提高患有或诊断出骨髓增生性病症的患者的症状反应率的方法，所述方法包括向先前用鲁索替尼治疗的患者施用化合物I

或其药学上可接受的盐或水合物。

12.根据权利要求11所述的方法，其中症状反应率由总症状评分(TSS)降低至少50％来证明。

13.一种增加患有或诊断出已经复发和/或用鲁索替尼难治的骨髓增生性病症的患者群体的中位生存期的方法，所述方法包括向先前用鲁索替尼治疗的患者施用化合物I

或其药学上可接受的盐或水合物。

14.一种降低具有与骨髓增生性病症相关或指示骨髓增生性病症的体细胞突变或克隆标志物的患者中的等位基因负担的方法，所述方法包括向先前用鲁索替尼治疗的患者施用化合物I

或其药学上可接受的盐或水合物。

15.根据权利要求14所述的方法，其中所述体细胞突变选自JAK2突变、CALR突变或MPL突变。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述JAK2突变是V617F。

17.根据权利要求15所述的方法，其中所述CALR突变是外显子9中的突变。

18.根据权利要求15所述的方法，其中所述MPL突变选自W515K和W515L。

19.根据权利要求1-18中任一项所述的方法，其中所述骨髓增生性病症选自中度风险MPN相关的骨髓纤维化和高风险MPN相关的骨髓纤维化。

20.根据权利要求19所述的方法，其中所述中度风险MPN相关的骨髓纤维化选自原发性骨髓纤维化、真性红细胞增多症后(PV后)骨髓纤维化和原发性血小板增多症后(ET后)骨髓纤维化。

21.根据权利要求19所述的方法，其中所述高风险MPN相关的骨髓纤维化选自原发性骨髓纤维化、真性红细胞增多症后(PV后)骨髓纤维化和原发性血小板增多症后(ET后)骨髓纤维化。

22.根据权利要求1-21中任一项所述的方法，其中化合物I呈二盐酸盐一水合物的形式。

23.根据权利要求1-22中任一项所述的方法，其中所述患者先前已经用鲁索替尼治疗至少3个月。

24.根据权利要求1-22中任一项所述的方法，其中所述患者先前已经用鲁索替尼治疗至少28天，并伴有

i.红细胞输注需求的发展；或者

ii.在用鲁索利替尼治疗期间出现血小板减少、贫血、血肿和/或出血的一个或多个≥3级不良事件。

25.根据权利要求1-24中任一项所述的方法，其中化合物I或其药学上可接受的盐的剂量基于化合物I的游离碱重量为约400mg。