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CN112969461A - 用于治疗乳腺癌的TGFβ抑制剂和CDK抑制剂的组合 - Google Patents

用于治疗乳腺癌的TGFβ抑制剂和CDK抑制剂的组合 Download PDF

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CN112969461A CN201980075956.9A CN201980075956A CN112969461A CN 112969461 A CN112969461 A CN 112969461A CN 201980075956 A CN201980075956 A CN 201980075956A CN 112969461 A CN112969461 A CN 112969461A
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breast cancer
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palbociclib
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Abstract

本发明涉及通过向有此需要的患者施用TGFβ抑制剂与CDK抑制剂的组合来治疗乳腺癌的方法。

Description

用于治疗乳腺癌的TGFβ抑制剂和CDK抑制剂的组合
技术领域
本发明涉及可用于治疗癌症的组合疗法。特别是，本发明涉及通过施用TGFβ抑制剂与CDK抑制剂的组合来治疗癌症的方法。也描述了本发明的组合的药物用途。
背景技术
TGFβ信号传导为癌症进展的新兴途径且在调节免疫反应及许多其他癌症途径(包括转移和血管生成)中具有作用。在许多癌症中观察到肿瘤和肿瘤微环境中的基质细胞增加TGFβ表达和TGFβ受体胞内信号传导的激活(Massague J. TGFbeta in Cancer. Cell2008; 134(2):215-30; Neuzillet C, Tijeras-Raballand A, Cohen R等人，Targetingthe TGFß pathway for cancer therapy. Pharmacol Ther 2015; 147:22-31)。当二聚体TGFβ配体与其特异性细胞表面跨膜丝氨酸/苏氨酸激酶受体相互作用时可激活所述TGFβ信号传导途径。所述激活的TGFβ配体与TGFβ II型受体(TGFβR2)相互作用，这在特定的丝氨酸和苏氨酸残基处募集并磷酸化TGFβ I型受体(TGFβR1，也称为激活素(activin)受体样激酶(ALK5))(Principe DR, Doll JA, Bauer J等人，TGF-ß: duality of function betweentumor prevention and carcinogenesis. J Natl Cancer Inst 2014; 106(2):djt369)。激活的TGFβR1又磷酸化SMAD2和SMAD3，然后所述SMAD2和SMAD3可与SMAD4组装成复合物并移位至细胞核，它们在细胞核中调节TGFβ靶基因的表达(Massague J. TGFbeta inCancer. Cell 2008; 134(2):215-30)。除了SMAD信号传导外，非SMAD信号传导也可启动TGFβ受体下游，这可导致各种途径激活，诸如磷酸肌醇3-激酶(PI3K)、c-Jun N-末端激酶(JNK)及胞外信号调节激酶(P38/ERK)、丝裂原激活蛋白(MAP)激酶(Mu Y, Gudey SK,Landström M. Non-Smad signaling pathways. Cell Tissue Res 2012; 347(1):11-20)。
癌细胞中的TGFβ途径激活可诱导上皮细胞间质转型(epithelial tomesenchymal transition)(EMT)，其中上皮细胞失去其顶面-底侧极性和细胞-细胞黏附而变成高度迁移性间质细胞，导致转移。除了在肿瘤细胞迁移和转移中的重要性外，EMT也已与肿瘤细胞逃避免疫监视相关联(Akalay I, Janji B, Hasmim M等人，Epithelial-to-mesenchymal transition and autophagy induction in breast carcinoma promoteescape from T-cell-mediated lysis. Cancer Res 2013;
73(8):2418-27)。TGFβ为先天性和适应性免疫细胞(包括树突细胞、巨噬细胞、自然杀伤细胞，和CD4+及CD8+ T细胞)上的强效免疫抑制剂。相反地，TGFβ在刺激免疫抑制调节性T(Treg)细胞和髓源性抑制细胞(MDSC)的分化中具有关键作用(Akalay I, Janji B,Hasmim M等人，Epithelial-to-mesenchymal transition and autophagy induction inbreast carcinoma promote escape from T-cell-mediated lysis. Cancer Res 2013;73(8):2418-27)。
TGFβ途径在广范围的肿瘤中的疾病进展和对疗法的耐药性中具有关键作用(Neuzillet C, Tijeras-Raballand A, Cohen R等人，Targeting the TGFß pathway forcancer therapy. Pharmacol Ther 2015; 147:22-31; Colak S, Ten Dijke P.Targeting TGF-ß signaling in cancer. Trends in Cancer 2017; 3(1):56-71)。在多种肿瘤中发现高TGFβ标签和EMT基因表达(Mak MP, Tong P, Diao L等人，A Patient-Derived, Pan-Cancer EMT Signature Identifies Global Molecular Alterations andImmune Target Enrichment Following Epithelial-to-Mesenchymal Transition. ClinCancer Res 2016; 22(3):609-20)。
TGFβ为重要的肿瘤微环境调节剂，其通过诱导细胞外基质(ECM)蛋白质表达及抑制T细胞肿瘤浸润所需的趋化因子和细胞因子表达，创建具有密集ECM和T细胞排除的浸润表型的反应性基质(伴随肿瘤周围或间质T细胞定位)来进行调节(Hegde PS, KaranikasV, Evers S. The Where, the When, and the How of Immune Monitoring for CancerImmunotherapies in the Era of Checkpoint Inhibition. Clin Cancer Res 2016; 22(8):1865-74)。
化合物4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(也称为“PF-06952229”或“PF-'2229”)为强效和选择性TGFβ(转化生长因子β)抑制剂，其具有以下结构：
Figure DEST_PATH_IMAGE002
。
PF-06952229及其药学上可接受的盐公开于国际公开号WO2015/103355和美国专利号10,030,004中。每个前述参考文献的内容通过引用以其整体并入本文。
细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)为重要的细胞酶，其在调节真核细胞分裂和增殖中执行基本功能。细胞周期蛋白依赖性激酶催化单位由称为细胞周期蛋白的调节亚单位激活。至少16种哺乳动物细胞周期蛋白已被鉴定出(Johnson DG, Walker CL. Cyclins andCell Cycle Checkpoints. Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. (1999) 39:295-312)。细胞周期蛋白B/CDK1、细胞周期蛋白A/CDK2、细胞周期蛋白E/CDK2、细胞周期蛋白D/CDK4、细胞周期蛋白D/CDK6和可能的其他外差为细胞周期进展的重要调节剂。细胞周期蛋白/CDK外差的附加功能包括调节转录、DNA修复、分化和凋亡(Morgan DO. Cyclin-dependentkinases: engines, clocks, and microprocessors. Annu. Rev. Cell. Dev. Biol.(1997) 13:261-291)。
细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂已被证明可用于治疗癌症。细胞周期蛋白依赖性激酶活性增加或暂时性异常激活已被证明导致发展人类肿瘤，且人类肿瘤发展通常与任一CDK蛋白本身或其调节剂中的改变有关(Cordon-Cardo C. Mutations of cell cycleregulators: biological and clinical implications for human neoplasia. Am. J. Pathol. (1995) 147:545-560；Karp JE, Broder S. Molecular foundations ofcancer: new targets for intervention. Nat. Med. (1995) 1:309-320；Hall M,Peters G. Genetic alterations of cyclins, cyclin-dependent kinases, and Cdkinhibitors in human cancer. Adv. Cancer Res. (1996) 68:67-108)。CDK和细胞周期蛋白的调节亚单位的扩增，和内源性CDK抑制剂的突变、基因缺失或转录沉默也已有报道(Smalley等人，Identification of a novel subgroup of melanomas with KIT/cyclin-dependent kinase-4 overexpression. Cancer Res (2008) 68: 5743-52)。
作为单一药剂或与其他治疗剂组合的CDK4/6抑制剂帕博西尼(palbociclib)、瑞博西林(ribociclib)和阿贝西林(abemaciclib)用于乳腺癌和其他癌症的临床试验正在进行。帕博西尼、瑞博西林和阿贝西林已被批准在某些患者中在一线环境中与芳香酶抑制剂(诸如来曲唑(letrozole))组合，及在二线疗法或后续疗法中与氟维司群(fulvestrant)组合用于治疗激素受体(HR)阳性、人表皮生长因子受体2(HER2)阴性的晚期或转移性乳腺癌。(O’Leary等人，Treating cancer with selective CDK4/6 inhbitors.Nature Reviews(2016)13:417-430)。虽然CDK4/6抑制剂已在ER阳性转移性乳腺癌中显示出显著的临床功效，如同其他激酶，随着时间的推移，其效果可能因发展出原发性或获得性耐药性而受到限制。
CDK2的过度表达与细胞周期的异常调节有关。细胞周期蛋白E/CDK2复合物在调节G1/S转换、组蛋白生物合成和中心体复制中具有重要作用。由细胞周期蛋白D/Cdk4/6和细胞周期蛋白E/Cdk2所造成的Rb进行性磷酸化释放G1转录因子E2F并促进进入S期。在S期早期期间，细胞周期蛋白A/CDK2激活促进内源性基质磷酸化，这允许DNA复制并使E2F失活以完成S期。(Asghar等人，The history and future of targeting cyclin-dependent kinases in cancer therapy, Nat. Rev. Drug. Discov. 2015; 14(2): 130-146)。在癌症中细胞周期蛋白E(CDK2的调节性细胞周期蛋白)经常过度表达。细胞周期蛋白E扩增或过度表达长期以来与乳腺癌的不良预后有关。(Keyomarsi等人, Cyclin E and survival inpatients with breast cancer. N Engl J Med. (2002) 347:1566-75)。细胞周期蛋白E2(CCNE2)过度表达与乳腺癌细胞中的内分泌耐药性有关，且据报道，抑制CDK2恢复在他莫昔芬(tamoxifen)耐药性及CCNE2过度表达细胞中的对他莫昔芬或CDK4抑制剂的敏感性。(Caldon等人, Cyclin E2 overexpression is associated with endocrine resistancebut not insensitivity to CDK2 inhibition in human breast cancer cells. Mol. Cancer Ther. (2012) 11:1488-99; Herrera-Abreu等人, Early Adaptation andAcquired Resistance to CDK4/6 Inhibition in Estrogen Receptor–Positive BreastCancer, Cancer Res. (2016) 76: 2301–2313)。据报道，细胞周期蛋白E扩增也有助于HER2+乳腺癌中的曲妥珠单抗(trastuzumab)耐药性。(Scaltriti等人，Cyclin Eamplification/overexpression is a mechanism of trastuzumab resistance in HER2+ breast cancer patients, Proc Natl Acad Sci. (2011) 108: 3761-6)。据报道，细胞周期蛋白E过度表达也在基底样和三阴性乳腺癌(TNBC)，及炎性乳腺癌中具有作用。(Elsawaf & Sinn, Triple Negative Breast Cancer: Clinical and HistologicalCorrelations, Breast Care (2011) 6:273-278; Alexander等人, Cyclin Eoverexpression as a biomarker for combination treatment strategies ininflammatory breast cancer, Oncotarget (2017) 8: 14897-14911。)。
帕博西尼，或6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮(也称为PD-0332991)为CDK4和CDK6的强效和选择性抑制剂，其具有以下结构：
Figure DEST_PATH_IMAGE004
。
帕博西尼描述于WHO Drug Information, Vol. 27, No. 2, 第172页(2013)中。帕博西尼及其药学上可接受的盐公开于国际公开号WO 2003/062236和美国专利号6,936,612、7,208,489和7,456,168；国际公开号WO 2005/005426和美国专利号7,345,171和7,863,278；国际公开号WO 2008/032157和美国专利号7,781,583；和国际公开号WO 2014/128588中。每个前述参考文献的内容通过引用以其整体并入本文。
PF-06873600，或6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-(1-(甲磺酰基)哌啶-4-基氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮，为CDK2、CDK4和CDK6的强效和选择性抑制剂，其具有以下结构：
Figure DEST_PATH_IMAGE006
。
PF-06873600公开于2018年2月22日公开的国际公开号WO 2018/033815中。该参考文献的内容通过引用以其整体并入本文。
虽然选择性CDK4/6抑制剂帕博西尼已被证明在临床上对乳腺癌有效(DeMicheleA, Clark AS, Tan KS等人，CDK 4/6 inhibitor palbociclib (PD-0332991) in Rb+advanced breast cancer: phase II activity, safety, and predictive biomarkerassessment. Clin Cancer Res 2015; 21(5):995-1001; Finn RS, Martin M, Rugo HS等人，Palbociclib and Letrozole in Advanced Breast Cancer. New Engl J Med2016; 375(20):1925-36; Cristofanilli M, Turner NC, Bondarenko I等人，Fulvestrant plus palbociclib versus fulvestrant plus placebo for treatment ofhormone-receptor-positive, HER2-negative metastatic breast cancer thatprogressed on previous endocrine therapy (PALOMA-3): final analysis of themulticentre, double-blind, phase 3 randomised controlled trial. Lancet Oncol2016; 17(4):425-39)，但在最初的临床利益后，可能发生对帕博西尼的获得性耐药性(Knudsen Erik S., Witkiewicz Agnieszka K., The Strange Case of CDK4/6Inhibitors:Mechanisms, Resistance, and Combination Strategies. Trends Cancer2017;3(1):39-55)。在临床前研究中，使用帕博西尼治疗肿瘤细胞诱导TGFβ和EMT基因标签表达，增强肿瘤细胞侵袭力。
用于治疗乳腺癌(包括对CDK抑制剂具有耐药性的乳腺癌)的改善的组合疗法包含大量未被满足的医学需求，并且需要鉴定新颖的组合方案以改善治疗结果。
发明内容
下文描述的各实施方案可与本文所述的任何其他实施方案(与其所组合的实施方案并无矛盾)组合。此外，本文所述的各实施方案在其范围内预期本文所述的化合物的药学上可接受的盐。因此，短语“或其药学上可接受的盐”隐含在本文所述的所有化合物的描述中。
本文所述的实施方案涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和一定量的CDK抑制剂，其中所述量一起有效治疗所述癌症。该实施方案的其他方面包括施用第三组分，所述第三组分为芳香酶抑制剂或氟维司群。
本文所述的另外的实施方案涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用协同量的TGFβ抑制剂与CDK抑制剂的组合。该实施方案的其他方面包括施用第三组分，所述第三组分为芳香酶抑制剂或氟维司群。
本文所述的其他实施方案涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的TGFβ抑制剂与CDK抑制剂的组合。该实施方案的其他方面包括施用第三组分，所述第三组分为芳香酶抑制剂或氟维司群。
本文所述的一些实施方案涉及TGFβ抑制剂和CDK抑制剂在制备用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的药物中的用途。该实施方案的其他方面包括第三组分的用途，所述第三组分为芳香酶抑制剂或氟维司群。
本文所述的另外的实施方案涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的TGFβ抑制剂与CDK抑制剂的组合，其中所述组合是协同组合。该实施方案的其他方面包括也包含第三组分的组合，所述第三组分为芳香酶抑制剂或氟维司群。
本文所述的一些实施方案涉及协同量的TGFβ抑制剂和CDK抑制剂在制备用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的药物中的用途。该实施方案的其他方面包括第三组分的用途，所述第三组分为芳香酶抑制剂或氟维司群。
在本发明的方法或用途的某些实施方案中，所述TGFβ抑制剂选自galunisertib、LY2109761、SB525334、SP505124、GW788388、LY364947、RepSox、SD-208、vactosertib、LY3200882和4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐。
在本发明的方法或用途的某些实施方案中，所述TGFβ抑制剂为4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐。
在本发明的方法或用途的某些实施方案中，所述CDK抑制剂为CDK 4/6抑制剂或CDK 2/4/6抑制剂。
在本发明的方法或用途的某些实施方案中，所述CDK抑制剂为CDK 4/6抑制剂。
在本发明的方法或用途的一些实施方案中，所述CDK 4/6抑制剂选自阿贝西林、瑞博西林和帕博西尼或其药学上可接受的盐。
在本发明的方法或用途的一些实施方案中，所述CDK 4/6抑制剂为帕博西尼或其药学上可接受的盐。
在本发明的方法或用途的某些实施方案中，所述CDK抑制剂为CDK 2/4/6抑制剂。
在本发明的方法或用途的一些实施方案中，所述CDK 2/4/6抑制剂为6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-(1-(甲磺酰基)哌啶-4-基氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮(“PF-06873600”)或其药学上可接受的盐。
本文所述的实施方案涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐和一定量的帕博西尼或其药学上可接受的盐，其中所述量一起有效治疗乳腺癌。
本文所述的另外的实施方案涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用协同量的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐与帕博西尼或其药学上可接受的盐的组合。
本文所述的其他实施方案涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐与帕博西尼或其药学上可接受的盐的组合。
本文所述的一些实施方案涉及4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐及帕博西尼或其药学上可接受的盐在制备用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的药物中的用途。
本文所述的另外的实施方案涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐与帕博西尼或其药学上可接受的盐的组合，其中所述组合是协同组合。
本文所述的一些实施方案涉及协同量的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐，及帕博西尼或其药学上可接受的盐在制备用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的药物中的用途。
本文所述的其他实施方案涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的TGFβ抑制剂与CDK抑制剂的组合，其中所述CDK抑制剂根据非标准临床给药方案施用。
本文所述的另外的实施方案涉及TGFβ抑制剂和CDK抑制剂在制备用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的药物中的用途，其中所述CDK抑制剂根据非标准临床给药方案施用。
在本发明的方法或用途的实施方案中，所述非标准临床给药方案为非标准临床剂量。
在本发明的方法或用途的实施方案中，所述非标准临床剂量为CDK抑制剂的低剂量量。
在本发明的方法或用途的实施方案中，所述非标准临床给药方案为非标准给药时间表。
在本发明的方法或用途的实施方案中，所述非标准给药时间表为CDK抑制剂的连续给药时间表。
在本发明的方法或用途的实施方案中，所述CDK抑制剂为CDK 4/6抑制剂。
在本发明的方法或用途的实施方案中，所述TGFβ抑制剂为4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐，并且所述CDK抑制剂为帕博西尼或其药学上可接受的盐。
本文所述的实施方案涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐，和一定量的帕博西尼或其药学上可接受的盐，其中帕博西尼或其药学上可接受的盐根据非标准临床给药方案施用，且进一步地，其中所述量一起有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。
本文所述的其他实施方案涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(“PF-06952229”)或其药学上可接受的盐与帕博西尼或其药学上可接受的盐的组合，其中帕博西尼或其药学上可接受的盐根据非标准临床给药方案施用。
本文所述的另外的实施方案涉及4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐及帕博西尼或其药学上可接受的盐在制备用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的药物中的用途，其中帕博西尼或其药学上可接受的盐根据非标准临床给药方案施用。
在本发明的方法或用途的实施方案中，所述非标准临床给药方案为非标准临床剂量。
在本发明的方法或用途的实施方案中，所述非标准临床剂量为帕博西尼或其药学上可接受的盐的低剂量量。
在本发明的方法或用途的实施方案中，所述帕博西尼或其药学上可接受的盐的低剂量量为每天一次约50mg、约75mg或约100mg。
在本发明的方法或用途的实施方案中，所述帕博西尼或其药学上可接受的盐的低剂量量为每天一次约75mg。
在本发明的方法或用途的实施方案中，所述帕博西尼或其药学上可接受的盐的低剂量量为每天一次约100mg。
在本发明的方法或用途的实施方案中，所述非标准临床给药方案为非标准给药时间表。
在本发明的方法或用途的实施方案中，所述非标准给药时间表为帕博西尼或其药学上可接受的盐的连续给药时间表。
在本发明的方法或用途的实施方案中，所述帕博西尼或其药学上可接受的盐的连续给药时间表为21天的完整周期。
在本发明的方法或用途的实施方案中，所述帕博西尼或其药学上可接受的盐的连续给药时间表为28天的完整周期。
在本发明的方法或用途的实施方案中，所述非标准给药时间表包括施用帕博西尼或其药学上可接受的盐，每天一次连续14天，随后7天停止治疗。
在本发明的方法或用途的实施方案中，所述非标准临床给药方案包括施用约75mg的帕博西尼或其药学上可接受的盐，每天一次连续14天，随后7天停止治疗。
本文所述的实施方案涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐和一定量的帕博西尼或其药学上可接受的盐，其中帕博西尼或其药学上可接受的盐根据非标准临床给药方案施用，且进一步地，其中所述量一起有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。
本文所述的其他实施方案涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐与帕博西尼或其药学上可接受的盐的组合，其中帕博西尼或其药学上可接受的盐根据非标准临床给药方案施用。
本文所述的另外的实施方案涉及4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐及帕博西尼或其药学上可接受的盐在制备用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的药物中的用途，其中帕博西尼或其药学上可接受的盐根据非标准临床给药方案施用。
本文所述的实施方案涉及(a)和(b)的协同组合：
(a)TGFβ抑制剂；和
(b)CDK抑制剂。
本文所述的其他实施方案涉及(a)和(b)的协同组合：
(a)TGFβ抑制剂；和
(b)CDK抑制剂，
其中组分(a)和组分(b)是协同的。
另外的实施方案涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的TGFβ抑制剂的药物组合物及CDK抑制剂的药物组合物。
在本发明的组合的实施方案中，所述TGFβ为4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐。
在本发明的组合的实施方案中，所述CDK抑制剂为CDK 4/6抑制剂。
在本发明的组合的实施方案中，所述CDK 4/6抑制剂选自阿贝西林、瑞博西林和帕博西尼或其药学上可接受的盐。
在本发明的组合的实施方案中，所述CDK 4/6抑制剂为帕博西尼或其药学上可接受的盐。
在本发明的组合的实施方案中，所述TGFβ抑制剂为4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐，且所述CDK抑制剂为帕博西尼或其药学上可接受的盐。
附图说明
图1显示用媒介物、PF-0332991、PF-06873600、PF-06952229、PF-06952229与PD-0332991的组合或PF-06952229与PF-06873600的组合处理的携带CT26肿瘤的小鼠的存活曲线。
图2显示在CT26同源肿瘤模型中，在媒介物、PF-06952229、PF-0332991、PF-06783600、PF-06952229与PD-0332991的组合，或PF-06952229与PF-06783600的组合处理后第17天的肿瘤体积。这些组合显示增加肿瘤生长抑制。
图3显示在MCF-7 ER+乳腺癌肿瘤模型中，在媒介物、PF-06952229、PF-0332991及PF-06952229与PD-0332991的组合处理后第21天的肿瘤体积。这些组合显示增加肿瘤生长抑制。
图4显示在MCF-7 ER+乳腺癌肿瘤模型中，在媒介物、PF-06952229、PF-0332991与氟维司群的组合及PF-06952229与PD-0332991和氟维司群的组合处理后第21天的肿瘤体积。这些组合显示增加肿瘤生长抑制。
图5显示在先前接受CDK4/6抑制剂帕博西尼或帕博西尼+氟维司群21天的小鼠中添加TGFβ抑制剂PF-06952229处理，并且在MCF7 ER+异种移植乳腺癌肿瘤模型中在处理开始后第66天显示出肿瘤生长抑制增加的趋势。
图6显示在MCF7 ER+异种移植乳腺癌肿瘤模型中，TGFβ抑制剂PF-06952229与CDK4/6抑制剂帕博西尼(PD-0332991)或帕博西尼+氟维司群的组合21天导致对pSMAD2的抑制改善。
图7显示在MCF7 ER+异种移植乳腺癌肿瘤模型中，TGFβ抑制剂PF-06952229与CDK4/6抑制剂帕博西尼(PD-0332991)+氟维司群的组合21天导致对pS807/811 Rb的抑制改善。
发明详述
通过参考以下对本发明的优选实施方案的详细说明和本文所包含的实施例可更容易地理解本发明。应理解的是，本文所用的术语仅用于描述特定的实施方案的目的，并非意图限制。还应理解的是，除非本文特别定义，否则本文所用的术语应被赋予如其在相关领域中已知的传统含义。
除非另外指明，否则如本文所用的单数形式“一(a)”、“一个(an)”和“所述(the)”包括复数指代物。例如，“一种”赋形剂包括一种或多种赋形剂。
如本文所用的术语“约”当用于修饰数字定义的参数(例如TGFβ抑制剂或CDK抑制剂的剂量)时是指所述参数可在所陈述的该参数的数值上或下至多10%变化。例如，约5mg的剂量可在4.5mg至5.5mg之间变化。
如本文所用的术语，包括但不限于“药剂”、“组分”、“组合物”、“化合物”、“物质”、“靶向剂”、“靶向治疗剂”和“治疗剂”可互换使用以指本发明的化合物，特别是TGFβ抑制剂和CDK抑制剂。
本文可使用下列缩写：DMSO(二甲亚砜)；FBS(胎牛血清)；RPMI(罗斯维尔公园纪念学院，Roswell Park Memorial Institute)；mpk(mg/kg或每kg动物体重的mg药物)；和w/w(重量/重量)。
细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)和相关的丝氨酸/苏氨酸激酶为重要的细胞酶，其在调节细胞分裂和增殖中执行基本功能。CDK抑制剂包括靶向广谱CDK的泛CDK抑制剂或靶向特定CDK的选择性CDK抑制剂。CDK抑制剂可能具有针对除了CDK外的靶标(诸如Aurora A、Aurora B、Chk1、Chk2、ERK1、ERK2、GST-ERK1、GSK-3α、GSK-3β、PDGFR、TrkA和VEGFR)的活性。CDK抑制剂包括但不限于阿贝西林、alvocidib、迪那西利(dinaciclib)、帕博西尼、瑞博西林、trilaciclib、lerociclib、罗斯科维汀(roscovitine)、AT7519、AZD5438、BMS-265246、BMS-387032、BS-181、JNJ-7706621、K03861、MK-8776、P276-00、PHA-793887、R547、RO-3306和SU 9516。泛CDK抑制剂的实例包括但不限于alvocidib、迪那西利、罗斯科维汀、AT7519、AZD5438、BMS-387032、P276-00、PHA-793887、R547和SU 9516。CDK1抑制剂的非限制性实例为RO-3306。CDK2抑制剂的实例包括但不限于K03861和MK-8776。CDK1/2抑制剂的实例包括但不限于BMS-265246和JNJ-7706621。CDK4/6抑制剂的实例包括但不限于阿贝西林、瑞博西林和帕博西尼。CDK7抑制剂的非限制性实例为BS-181。
在一个实施方案中，本发明的CDK4/6抑制剂包括帕博西尼。除非本文另外指明，否则帕博西尼(本文中也称为“palbo”或“Palbo”)是指6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基)-8H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮或其药学上可接受的盐。
一些实施方案涉及本文所述的化合物的药学上可接受的盐。本文所述的化合物的药学上可接受的盐包括其酸加成盐和碱加成盐。
一些实施方案也涉及本文所述的化合物的药学上可接受的酸加成盐。合适的酸加成盐由形成无毒盐的酸形成。合适的酸加成盐(即，含有药理学上可接受的阴离子的盐)的非限制性实例包括但不限于乙酸盐、酸式柠檬酸盐、己二酸盐、天门冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、酒石酸氢盐、硼酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环己氨基磺酸盐、乙二磺酸盐、乙磺酸盐、乙烷磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡萄糖酸盐、葡萄糖醛酸盐、六氟磷酸盐、海苯酸盐(hibenzate)、盐酸盐/氯化物、氢溴酸盐/溴化物、氢碘酸盐/碘化物、羟乙基磺酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、甲烷磺酸盐、甲硫酸盐、萘甲酸盐(naphthylate)、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、乳清酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、焦谷氨酸盐、蔗糖酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、鞣酸盐、酒石酸盐、对甲苯磺酸盐、甲苯磺酸盐、三氟乙酸盐和昔萘酸盐(xinofoate)盐。
另外的实施方案涉及本文所述的化合物的碱加成盐。合适的碱加成盐从形成无毒盐的碱形成。合适的碱式盐的非限制性实例包括铝、精氨酸、苄星(benzathine)、钙、胆碱、二乙胺、二乙醇胺、甘氨酸、赖氨酸、镁、葡甲胺、乙醇胺、钾、钠、氨丁三醇和锌盐。
本质上为碱性的本文所述的化合物能够与各种无机和有机酸形成多种多样的盐。可用于制备本文所述的此类碱性化合物的药学上可接受的酸加成盐的酸为形成无毒酸加成盐的那些，例如含有药理学上可接受的阴离子的盐，诸如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硝酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、异烟酸盐、乙酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、柠檬酸盐、酸式柠檬酸盐、酒石酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸盐、葡萄糖醛酸盐、蔗糖酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲烷磺酸盐、乙烷磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐和双羟萘酸盐[即，1,1'-亚甲基-双-(2-羟基-3-萘甲酸盐)]盐。除了上述的酸外，包括碱性部分(诸如氨基)的本文所述的化合物可与各种氨基酸形成药学上可接受的盐。
可用作制备本文所述的本质上为酸性的化合物的那些化合物的药学上可接受的碱式盐的试剂的化学碱为与此类化合物形成无毒碱式盐的那些。此类无毒碱式盐包括但不限于衍生自此类药理学上可接受的阳离子如碱金属阳离子(例如钾和钠)和碱土金属阳离子(例如钙和镁)的那些，铵或水溶性胺加成盐如N-甲基葡糖胺-(葡甲胺)及低级烷醇铵和其他药学上可接受的有机胺的碱式盐。
也可形成酸和碱的半盐，例如半硫酸盐和半钙盐。
关于合适的盐的综述，参见Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties,Selection, and Use，Stahl and Wermuth (Wiley-VCH, 2002)。用于制备本文所述的化合物的药学上可接受的盐的方法是本领域技术人员已知的。
术语“溶剂化物”在本文中用于描述分子复合物，所述分子复合物包含本文所述的化合物和一种或多种药学上可接受的溶剂分子，例如水和乙醇。
本文所述的化合物也可以未溶剂化和溶剂化形式存在。因此，一些实施方案涉及本文所述的化合物的水合物和溶剂化物。
本文所述的含有一个或多个不对称碳原子的化合物可以两种或更多种立体异构体的形式存在。当本文所述的化合物含有烯基或亚烯基时，几何顺式/反式(或Z/E)异构体是可能的。当结构异构体可经由低能垒相互转化时，可能发生互变异构的异构现象(“互变异构现象(tautomerism)”)。这在本文所述的含有例如亚氨基、酮或肟基的化合物中可采取质子互变异构现象的形式，或在含有芳族部分的化合物中可采取所谓的价互变异构现象。单一化合物可能表现出多于一种类型的异构现象。
本文所述的实施方案的化合物包括本文所述的化合物的所有立体异构体(例如顺式和反式异构体)和所有光学异构体(例如R和S对映异构体)，以及此类异构体的外消旋、非对映异构体和其他混合物。虽然所有立体异构体均包含在我们的权利要求范围内，但本领域技术人员将认识到特定的立体异构体可能是优选的。
在一些实施方案中，本文所述的化合物可以数种互变异构形式存在，包括烯醇和亚胺形式，以及酮和烯胺形式，及其几何异构体和混合物。所有此类互变异构形式均包括在本实施方案的范围内。在溶液中，互变异构体以互变异构体组的混合物形式存在。在固体形式中，通常是一种互变异构体占绝大多数。即使可能描述一种互变异构体，但本实施方案包括本化合物的所有互变异构体。
本文所述的化合物的所有立体异构体、几何异构体和互变异构形式，包括表现出多于一种类型的异构现象的化合物及其一种或多种的混合物均包括在本实施方案的范围内。也包括酸加成盐或碱式盐，其中抗衡离子为光学活性的，例如d-乳酸盐或l-赖氨酸，或外消旋的，例如dl-酒石酸盐或dl-精氨酸。
本实施方案也包括本文所述的化合物的阻转异构体(atropisomer)。阻转异构体是指可分离成旋转受限的异构体的化合物。
顺式/反式异构体可通过本领域技术人员熟知的常规技术分离，例如色谱法和分级结晶。
用于制备/分离单个对映异构体的常规技术包括从合适的光学纯前体手性合成或使用例如手性高压液相色谱法(HPLC)拆分外消旋体(或盐或衍生物的外消旋体)。
或者，可使外消旋体(或外消旋前体)与合适的光学活性化合物(例如醇)反应，或者在其中本文所述的化合物含有酸性或碱性部分的情况中，与碱或酸(诸如1-苯乙胺或酒石酸)反应。所产生的非对映异构体混合物可通过如下方式分离：色谱法和/或分级结晶，并将所述非对映异构体的一个或两个通过本领域技术人员熟知的方式转化为对应的纯对映异构体。
除非另外指明，否则如本文所用的术语“治疗(treating)”是指逆转、减轻、抑制进展或预防此类术语所应用的病症或病况或此类病症或病况的一种或多种症状。除非另外指明，否则如本文所用的术语“治疗(treatment)”是指治疗(“治疗”如紧接上文所定义)行为。
根据本发明待治疗的“患者”包括任何温血动物，诸如但不限于人、猴或其他较低级的灵长类动物、马、狗、兔、豚鼠或小鼠。例如，所述患者为人。医学领域的技术人员能够容易地鉴别患有乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌且需要治疗的个体患者。
如本文所用的术语“晚期”当涉及乳腺癌时，包括局部晚期(非转移性)疾病和转移性疾病。局部晚期乳腺疾病(其可或可不使用根治性目的治疗)和转移性疾病(其不能使用根治性目的治疗)包括在如本发明中使用的“晚期乳腺癌”的范围内。本领域技术人员将能够识别和诊断患者的晚期乳腺癌。
就本发明的目的而言，“反应持续时间”是指从记录由于药物治疗引起肿瘤模型生长抑制的时间至获得与治疗前生长速率相似的恢复生长速率的时间。
术语“加成”用于指两种化合物、组分或靶向剂的组合的结果不大于单独的每种化合物、组分或靶向剂的总和。术语“加成”是指与单独使用每种化合物、组分或靶向剂相比，所治疗的疾病状况或病症未得到改善。
术语“协同”或“协同的”用于指两种化合物、组分或靶向剂的组合的结果大于各药剂一起的总和。术语“协同”或“协同的”是指与单独使用每种化合物、组分或靶向剂相比，所治疗的疾病状况或病症得到改善。所治疗的疾病状况或病症的这种改善为“协同效果”。“协同量”为导致协同效果(“协同的”如本文所定义)的两种化合物、组分或靶向剂的组合的量。
确定一种或两种组分之间的协同相互作用、所述效果的最佳范围和所述效果的各组分的绝对剂量范围可通过向需要治疗的患者施用在不同w/w比范围和剂量内的组分来明确测量。然而，在体外模型或体内模型中观察协同可预测在人类和其他物种及如本文所述的现有的体外模型或体内模型中的效果以测量协同效果，且此类研究的结果也可通过应用药代动力学/药效学方法来用于预测人类和其他物种中所需的有效剂量和血浆浓度比范围，以及绝对剂量和血浆浓度。
根据本发明，将一定量的第一化合物或组分与一定量的第二化合物或组分组合，且所述量一起有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。所述在一起有效的量将在某种程度上减轻所治疗的病症的一种或多种症状。关于癌症的治疗，有效量是指具有以下效果的量：(1)减少肿瘤的大小，(2)抑制(即，在某种程度上减缓，优选停止)肿瘤转移出现，(3)在某种程度上抑制(即，在某种程度上减缓，优选停止)肿瘤生长或肿瘤侵袭，和/或(4)在某种程度上减轻(或，优选消除)与所述癌症相关的一种或多种体征或症状。所述剂量和施用方案的治疗或药理效力也可表征为在具有这些特定肿瘤的患者中诱导、增强、维持或延长疾病控制和/或总体存活的能力，其可测量为疾病进展前的时间的延长。
在一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂与一定量的CDK抑制剂的组合，所述一定量的TGFβ抑制剂与一定量的CDK抑制剂的组合有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。在进一步的实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和一定量的CDK抑制剂，其中所述量一起有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的TGFβ抑制剂和CDK抑制剂的组合。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和一定量的CDK抑制剂，其中所述量一起实现治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的协同效果。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的TGFβ抑制剂和CDK抑制剂的组合，其中所述组合为协同组合。在一个实施方案中，本发明的方法或用途涉及靶向治疗剂具体是TGFβ抑制剂与CDK抑制剂的协同组合。
在一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂与一定量的CDK抑制剂的组合，所述一定量的TGFβ抑制剂与一定量的CDK抑制剂的组合有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。在进一步的实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和一定量的CDK抑制剂，其中所述量一起有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的TGFβ抑制剂与CDK抑制剂的组合。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和一定量的CDK抑制剂，其中所述量一起实现治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的协同效果。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的TGFβ抑制剂与CDK抑制剂的组合，其中所述组合为协同组合。在一个实施方案中，本发明的方法或用途涉及靶向治疗剂具体是TGFβ抑制剂与CDK抑制剂的协同组合。
在一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂与一定量的CDK 4/6抑制剂的组合，所述一定量的TGFβ抑制剂与一定量的CDK 4/6抑制剂的组合有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。在进一步的实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和一定量的CDK 4/6抑制剂，其中所述量一起有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的TGFβ抑制剂与CDK 4/6抑制剂的组合。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和一定量的CDK 4/6抑制剂，其中所述量一起实现治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的协同效果。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的TGFβ抑制剂与CDK 4/6抑制剂的组合，其中所述组合是协同组合。在一个实施方案中，本发明的方法或用途涉及靶向治疗剂具体是TGFβ抑制剂与CDK 4/6抑制剂的协同组合。
在一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂与一定量的CDK 4/6抑制剂的组合，所述一定量的TGFβ抑制剂与一定量的CDK 4/6抑制剂的组合有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。在进一步的实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和一定量的CDK 4/6抑制剂，其中所述量一起有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的TGFβ抑制剂与CDK 4/6抑制剂的组合。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和一定量的CDK 4/6抑制剂，其中所述量一起实现治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的协同效果。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的TGFβ抑制剂与CDK 4/6抑制剂的组合，其中所述组合是协同组合。在一个实施方案中，本发明的方法或用途涉及靶向治疗剂具体是TGFβ抑制剂与CDK 4/6抑制剂的协同组合。
在一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐与一定量的帕博西尼或其药学上可接受的盐的组合，所述一定量的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐与一定量的帕博西尼或其药学上可接受的盐的组合有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。在进一步的实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐和一定量的帕博西尼或其药学上可接受的盐，其中所述量一起有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。在另一个实施方案中，本发明涉及4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐与帕博西尼或其药学上可接受的盐的组合，其中所述量一起有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐和一定量的帕博西尼或其药学上可接受的盐，其中所述量一起实现治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的协同效果。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐与帕博西尼或其药学上可接受的盐的组合，其中所述组合是协同组合。在一个实施方案中，本发明的方法或用途涉及靶向治疗剂具体是4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐与帕博西尼或其药学上可接受的盐的协同组合。
如本文所用的“标准临床给药方案(standard clinical dosing regimen)”是指用于施用物质、药剂、化合物或组合物的方案，其通常用于临床环境中。“标准临床给药方案”包括“标准临床剂量”或“标准给药时间表”。
如本文所用的“非标准临床给药方案”是指用于施用物质、药剂、化合物或组合物的方案，其与通常用于临床环境中的量、剂量或时间表不同。“非标准临床给药方案”包括“非标准临床剂量”或“非标准给药时间表”。
在一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂与一定量的CDK抑制剂的组合，所述一定量的TGFβ抑制剂与一定量的CDK抑制剂的组合有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌，其中所述CDK抑制剂根据非标准临床给药方案施用。在进一步的实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和一定量的CDK抑制剂，其中所述CDK抑制剂根据非标准临床给药方案施用，且进一步地，其中所述量一起有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的TGFβ抑制剂与一定量的CDK抑制剂的组合，其中所述CDK抑制剂根据非标准临床给药方案施用。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和一定量的CDK抑制剂，其中所述CDK抑制剂根据非标准临床给药方案施用，且进一步地，其中所述量一起实现治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的协同效果。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的TGFβ抑制剂与CDK抑制剂的组合，其中所述CDK抑制剂根据非标准临床给药方案施用，且进一步地，其中所述组合是协同组合。
在一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂与一定量的CDK抑制剂的组合，所述一定量的TGFβ抑制剂与一定量的CDK抑制剂的组合有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌，其中所述CDK抑制剂根据非标准临床给药方案施用。在进一步的实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和一定量的CDK抑制剂，其中所述CDK抑制剂根据非标准临床给药方案施用，且进一步地，其中所述量一起有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。在另一个实施方案中，本发明涉及TGFβ抑制剂与CDK抑制剂的组合在治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌中的用途，其中所述CDK抑制剂根据非标准临床给药方案施用。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和一定量的CDK抑制剂，其中所述CDK抑制剂根据非标准临床给药方案施用，且进一步地，其中所述量一起实现治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的协同效果。在另一个实施方案中，本发明涉及一定量的TGFβ抑制剂与CDK抑制剂的组合用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的用途，其中所述CDK抑制剂根据非标准临床给药方案施用。
在一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂与一定量的CDK 4/6抑制剂的组合，所述一定量的TGFβ抑制剂与一定量的CDK 4/6抑制剂的组合有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌，其中所述CDK 4/6抑制剂根据非标准临床给药方案施用。在进一步的实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和一定量的CDK 4/6抑制剂，其中所述CDK 4/6抑制剂根据非标准临床给药方案施用，且进一步地，其中所述量一起有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的TGFβ抑制剂与CDK 4/6抑制剂的组合，其中所述CDK 4/6抑制剂根据非标准临床给药方案施用。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和一定量的CDK 4/6抑制剂，其中所述CDK 4/6抑制剂根据非标准临床给药方案施用，且进一步地，其中所述量一起实现治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的协同效果。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的TGFβ抑制剂与CDK4/6抑制剂的组合，其中所述CDK 4/6抑制剂根据非标准临床给药方案施用，且进一步地，其中所述组合是协同组合。
在一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂与一定量的CDK 4/6抑制剂的组合，所述一定量的TGFβ抑制剂与一定量的CDK 4/6抑制剂的组合有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌，其中所述CDK 4/6抑制剂根据非标准临床给药方案施用。在进一步的实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和一定量的CDK 4/6抑制剂，其中所述CDK 4/6抑制剂根据非标准临床给药方案施用，且进一步地，其中所述量一起有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的TGFβ抑制剂与一定量的CDK 4/6抑制剂的组合，其中所述CDK 4/6抑制剂根据非标准临床给药方案施用。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和一定量的CDK 4/6抑制剂，其中所述CDK 4/6抑制剂根据非标准临床给药方案施用，且进一步地，其中所述量一起实现治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的协同效果。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的TGFβ抑制剂与CDK 4/6抑制剂的组合，其中所述CDK 4/6抑制剂根据非标准临床给药方案施用，且进一步地，其中所述组合是协同组合。
在一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐与一定量的帕博西尼或其药学上可接受的盐的组合，所述一定量的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐与一定量的帕博西尼或其药学上可接受的盐的组合有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌，其中所述帕博西尼或其药学上可接受的盐根据非标准临床给药方案施用。在进一步的实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐和一定量的帕博西尼或其药学上可接受的盐，其中所述帕博西尼或其药学上可接受的盐根据非标准临床给药方案施用，且进一步地，其中所述量一起有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐与帕博西尼或其药学上可接受的盐的组合，其中所述帕博西尼或其药学上可接受的盐根据非标准临床给药方案施用。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐和一定量的帕博西尼或其药学上可接受的盐，其中所述帕博西尼或其药学上可接受的盐根据非标准临床给药方案施用，且进一步地，其中所述量一起实现治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的协同效果。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐与帕博西尼或其药学上可接受的盐的组合，其中所述帕博西尼或其药学上可接受的盐根据非标准临床给药方案施用，且进一步地，其中所述组合是协同组合。
如本文所用的“低剂量量”是指物质、药剂、化合物或组合物的量或剂量，所述量或剂量低于临床环境中通常使用的量或剂量。
在一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂与低剂量量的CDK抑制剂的组合，所述一定量的TGFβ抑制剂与低剂量量的CDK抑制剂的组合有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。在进一步的实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和低剂量量的CDK抑制剂，其中所述量一起有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的TGFβ抑制剂与低剂量量的CDK抑制剂的组合。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和低剂量量的CDK抑制剂，其中所述量一起实现治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的协同效果。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的TGFβ抑制剂与低剂量量的CDK抑制剂的组合，其中所述组合是协同组合。
在一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂与低剂量量的CDK抑制剂的组合，所述一定量的TGFβ抑制剂与低剂量量的CDK抑制剂的组合有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。在进一步的实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和低剂量量的CDK抑制剂，其中所述量一起有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的TGFβ抑制剂与低剂量量的CDK抑制剂的组合。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和低剂量量的CDK抑制剂，其中所述量一起实现治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的协同效果。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的TGFβ抑制剂与低剂量量的CDK抑制剂的组合，其中所述组合是协同组合。
在一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂与低剂量量的CDK 4/6抑制剂的组合，所述一定量的TGFβ抑制剂与低剂量量的CDK 4/6抑制剂的组合有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。在进一步的实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和低剂量量的CDK 4/6抑制剂，其中所述量一起有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的TGFβ抑制剂与低剂量量的CDK 4/6抑制剂的组合。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和低剂量量的CDK 4/6抑制剂，其中所述量一起实现治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的协同效果。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的TGFβ抑制剂与低剂量量的CDK 4/6抑制剂的组合，其中所述组合是协同组合。
在一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂与低剂量量的CDK 4/6抑制剂的组合，所述一定量的TGFβ抑制剂与低剂量量的CDK 4/6抑制剂的组合有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。在进一步的实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和低剂量量的CDK 4/6抑制剂，其中所述量一起有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的TGFβ抑制剂与低剂量量的CDK 4/6抑制剂的组合。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和低剂量量的CDK 4/6抑制剂，其中所述量一起实现治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的协同效果。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的TGFβ抑制剂与低剂量量的CDK 4/6抑制剂的组合，其中所述组合是协同组合。
在一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐与低剂量量的帕博西尼或其药学上可接受的盐的组合，所述一定量的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐与低剂量量的帕博西尼或其药学上可接受的盐的组合有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。在进一步的实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐和低剂量量的帕博西尼或其药学上可接受的盐，其中所述量一起有效治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐与低剂量量的帕博西尼或其药学上可接受的盐的组合。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐和低剂量量的帕博西尼或其药学上可接受的盐，其中所述量一起实现治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的协同效果。在另一个实施方案中，本发明涉及用于治疗乳腺癌，特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的一定量的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺(PF-06952229)或其药学上可接受的盐与低剂量量的帕博西尼或其药学上可接受的盐的组合，其中所述组合是协同组合。
本领域技术人员能够根据已知方法，考虑诸如年龄、体重、总体健康、施用的化合物、施用途径、乳腺癌、特别是HR-阳性、HER2-阴性的晚期或转移性乳腺癌的性质和进展，需要治疗及其他药物的存在的因素确定本发明的组合中所使用的每种化合物的适当量、剂量(dose)或剂量(dosage)。
在一个实施方案中，帕博西尼或其药学上可接受的盐以每天一次约125mg，每天一次约100mg，每天一次约75mg，或每天约50mg的日剂量施用。在一个实施方案中，帕博西尼或其药学上可接受的盐以每天一次约125mg的日剂量施用，这为推荐起始剂量或标准临床剂量。在一个实施方案中，帕博西尼或其药学上可接受的盐以非标准临床剂量施用。在一个实施方案中，非标准临床剂量为帕博西尼或其药学上可接受的盐的低剂量量。例如，帕博西尼或其药学上可接受的盐以每天一次约100mg，每天一次约75mg，或每天一次约50mg的剂量施用。在一个实施方案中，帕博西尼或其药学上可接受的盐以每天一次约100mg的剂量施用。在一个实施方案中，帕博西尼或其药学上可接受的盐以每天一次约75mg的剂量施用。在一个实施方案中，帕博西尼或其药学上可接受的盐以每天一次约50mg的剂量施用。本文所提供的剂量量是指帕博西尼的游离碱形式的剂量，或以施用的帕博西尼盐形式的游离碱等价物计算。例如，帕博西尼的剂量或量(诸如100mg、75mg或50mg)是指游离碱等价物。该剂量方案可经调整以提供最佳的治疗反应。例如，所述剂量可根据治疗情况紧急程度的指示按比例减少或增加。
在一个实施方案中，PF-06873600或其药学上可接受的盐以每天一次约125mg，每天一次约100mg，每天一次约75mg，或每天约50mg的日剂量施用。在一个实施方案中，PF-06873600或其药学上可接受的盐以每天一次约125mg的日剂量施用。在一个实施方案中，PF-06873600或其药学上可接受的盐以非标准临床剂量施用。在一个实施方案中，非标准临床剂量为低剂量量的PF-06873600或其药学上可接受的盐。例如，PF-06873600或其药学上可接受的盐以每天一次约100mg，每天一次约75mg，或每天一次约50mg的剂量施用。在一个实施方案中，PF-06873600或其药学上可接受的盐以每天一次约100mg的剂量施用。在一个实施方案中，PF-06873600或其药学上可接受的盐以每天一次约75mg的剂量施用。在一个实施方案中，PF-06873600或其药学上可接受的盐以每天一次约50mg的剂量施用。本文所提供的剂量量是指PF-06873600的游离碱形式的剂量，或以施用的PF-06873600盐形式的游离碱等价物计算。例如，PF-06873600的剂量或量(诸如100mg、75mg或50mg)是指游离碱等价物。该剂量方案可经调整以提供最佳的治疗反应。例如，所述剂量可根据治疗情况紧急程度的指示按比例减少或增加。
本发明方法的实施可通过各种施用或给药方案完成。本发明的组合的化合物可间歇、并行或顺序施用。在一个实施方案中，本发明的组合的化合物可在并行给药方案中施用。
施用或给药方案可依需要重复进行以实现所需的癌细胞减少或缩小。如本文所用的“连续给药时间表”为无剂量中断(例如无停止治疗天数)的施用或给药方案。连续给药时间表的实例为重复21或28天治疗周期，且在治疗周期之间不中断剂量。在一个实施方案中，本发明的组合的化合物可在连续给药时间表中施用。在一个实施方案中，本发明的组合的化合物可在连续给药时间表中并行施用。
在一个实施方案中，每天一次施用PF-06952229或其药学上可接受的盐以包含28天的完整周期。在使用本发明的组合治疗期间持续重复所述28天周期。
在一个实施方案中，每天一次施用PF-06952229或其药学上可接受的盐以包含21天的完整周期。在使用本发明的组合治疗期间持续重复所述21天周期。
帕博西尼或其药学上可接受的盐的标准推荐给药方案(其包括标准给药时间表)为每天一次施用，连续21天，随后7天停止治疗以包含28天的完整周期。在使用本发明的组合治疗期间持续重复所述28天周期。
在一个实施方案中，帕博西尼或其药学上可接受的盐根据非标准给药时间表施用。例如，每天一次施用帕博西尼或其药学上可接受的盐以包含28天的完整周期。在使用本发明的组合治疗期间持续重复所述28天周期。
在一个实施方案中，帕博西尼或其药学上可接受的盐根据非标准给药时间表施用。例如，每天一次施用帕博西尼或其药学上可接受的盐以包含21天的完整周期。在使用本发明的组合治疗期间持续重复所述21天周期。
在一个实施方案中，帕博西尼或其药学上可接受的盐根据非标准给药时间表施用。例如，每天一次施用帕博西尼或其药学上可接受的盐，连续14天，随后7天停止治疗以包含21天的完整周期。在使用本发明的组合治疗期间持续重复所述21天周期。
帕博西尼或其药学上可接受的盐的标准临床给药方案为每天一次施用125mg，连续21天，随后7天停止治疗以包含28天的完整周期。在使用本发明的组合治疗期间持续重复所述28天周期。
在一个实施方案中，帕博西尼或其药学上可接受的盐根据非标准临床给药方案施用。例如，帕博西尼或其药学上可接受的盐以约50mg、约75mg或约100mg每天一次施用以包含28天的完整周期。在使用本发明的组合治疗期间持续重复所述28天周期。在一个实施方案中，帕博西尼或其药学上可接受的盐以约50mg施用。在一个实施方案中，帕博西尼或其药学上可接受的盐以约75mg施用。在一个实施方案中，帕博西尼或其药学上可接受的盐以约100mg施用。
在一个实施方案中，帕博西尼或其药学上可接受的盐根据非标准临床给药方案施用。例如，帕博西尼或其药学上可接受的盐以约50mg、约75mg或约100mg每天一次施用以包含21天的完整周期。在使用本发明的组合治疗期间持续重复所述21天周期。在一个实施方案中，帕博西尼或其药学上可接受的盐以约50mg施用。在一个实施方案中，帕博西尼或其药学上可接受的盐以约75mg施用。在一个实施方案中，帕博西尼或其药学上可接受的盐以约100mg施用。
在一个实施方案中，帕博西尼或其药学上可接受的盐根据非标准临床给药方案施用。例如，每天一次以约75mg施用帕博西尼或其药学上可接受的盐，连续14天，随后7天停止治疗以包含21天的完整周期。在使用本发明的组合治疗期间持续重复所述21天周期。
在本发明的一个实施方案中，PF-06952229以20mg每天两次(BID)施用，任选地使用在28天周期中的7天给药/7天停药方案。
在本发明的一个实施方案中，PF-06952229以40mg每天两次(BID)施用，任选地使用在28天周期中的7天给药/7天停药方案。
在本发明的一个实施方案中，PF-06952229以80mg每天两次(BID)施用，任选地使用在28天周期中的7天给药/7天停药方案。
在本发明的一个实施方案中，PF-06952229以150mg每天两次(BID)施用，任选地使用在28天周期中的7天给药/7天停药方案。
在本发明的一个实施方案中，PF-06952229以250mg每天两次(BID)施用，任选地使用在28天周期中的7天给药/7天停药方案。
在本发明的一个实施方案中，PF-06952229以375mg每天两次(BID)施用，任选地使用在28天周期中的7天给药/7天停药方案。
在本发明的一个实施方案中，PF-06952229以500mg每天两次(BID)施用，任选地使用在28天周期中的7天给药/7天停药方案。
在本发明的一个实施方案中，PF-06952229以625mg每天两次(BID)施用，任选地使用在28天周期中的7天给药/7天停药方案。
在本发明的进一步的实施方案中，PF-06952229与帕博西尼和来曲唑(letrozole)组合施用，其中帕博西尼以125mg口服施用，每天一次，持续21天，随后7天停药，且其中来曲唑以2.5mg每天口服施用。
施用本发明的组合的化合物可能被任何能够将所述化合物递送至作用部位的方法影响。这些方法包括口服途径、十二指肠内途径、肠胃外注射(包括静脉内、皮下、肌肉内、血管内或输注)、局部和直肠施用。
本发明的方法或组合的化合物可在施用前配制。优选地，所述制剂将适合特定的施用模式。这些化合物可与本领域已知的药学上可接受的载体一起配制并以本领域已知的多种剂型施用。在制备本发明的药物组合物时，通常将活性成分与药学上可接受的载体混合，或以载体稀释或包封在载体中。此类载体包括但不限于固体稀释剂或填充剂、赋形剂、无菌水性介质和各种非毒性有机溶剂。剂量单位形式或药物组合物包括包装在适合细分为单独剂量的容器中的片剂、胶囊如明胶胶囊、丸剂、粉剂、颗粒、水性和非水性口服溶液和悬浮液、锭剂、糖锭、硬糖、喷雾剂、乳膏、药膏、栓剂、果胶、凝胶、糊剂、洗剂、软膏、注射液、酏剂、糖浆和肠胃外溶液。
肠胃外制剂包括药学上可接受的水性或非水性溶液、分散体、悬浮液、乳液和无菌粉末(用于它们的制备)。载体的实例包括水、乙醇、多元醇(丙二醇、聚乙二醇)、植物油和可注射的有机酯，诸如油酸乙酯。流动性可通过使用涂层，诸如卵磷脂、表面活性剂或保持适当的粒度维持。示例性肠胃外施用形式包括在无菌水溶液，例如丙二醇水溶液或右旋糖溶液中的本发明化合物的溶液或悬浮液。如果需要的话，可适当地缓冲此类剂型。
此外，润滑剂，诸如硬脂酸镁、月桂基硫酸钠和滑石通常可用于压片目的。相似类型的固体组合物也可用于软和硬填充明胶胶囊中。因此，优选的材料包括乳糖(lactose或milk sugar)和高分子量聚乙二醇。当需要水性悬浮液或酏剂以用于口服施用时，其中的活性化合物可与各种甜味剂或调味剂、着色剂或染料，并且如果需要的话，乳化剂或悬浮剂，以及稀释剂如水、乙醇、丙二醇、甘油或其组合合并。
使用特定量的活性化合物制备各种药物组合物的方法是本领域技术人员已知的或显而易见的。例如，参见Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack PublishingCompany, Easter, Pa., 第15版(1975)。
本发明也涉及试剂盒，其包含本发明的组合的治疗剂和用于施用所述治疗剂的书面说明。在一个实施方案中，所述书面说明详述和限定所述治疗剂的施用模式，例如以用于同时或顺序施用本发明的治疗剂。在一个实施方案中，所述书面说明详述和限定所述治疗剂的施用模式，例如通过指定在28天周期期间各治疗剂的施用天数来详述和限定所述治疗剂的施用模式。
实施例
实施例1：在CT26同源小鼠肿瘤模型中，TGFβ抑制剂PF-06952229与CDK4/6抑制剂帕博西尼及与CDK 2/4/6抑制剂(PF-068736000)协同作用
概述
在CT26同源小鼠肿瘤模型中评价PF-06952229与帕博西尼的组合以评估对原发性肿瘤生长和存活的功效。PF-06952229与CDK4/6抑制剂帕博西尼的组合导致存活相对于PF-06952229单一疗法(p = 0.009)和帕博西尼单一疗法(p= 0.017)显著增加。
材料和方法
从美国典型菌种保藏中心(ATCC)获得CT26细胞并培养在补充有10%胎牛血清(FBS)的罗斯维尔公园纪念学院(Roswell Park Memorial Institute)(RPMI1640)中。将所有细胞保持在37℃和5%二氧化碳(CO2)的湿润培养箱中。从Jackson Laboratories获得8周龄的雌性Balb/cJ小鼠。为了产生同源模型，将25万个CT26肿瘤细胞皮下植入雌性BALB/cJ小鼠的右胁腹。在植入肿瘤细胞后第10天，基于每组约50mm3的平均肿瘤大小，将荷瘤(tumor bearing)小鼠随机分为六个处理组。研究组包括媒介物、30mg/kg PF-06952229、10mg/kg PD-0332991(帕博西尼)、PF-06873600(CDK 2/4/6抑制剂)、PF-06952229+PD-0332991的组合及PF-06952229+PF-06873600的组合。每天两次(BID)口服施用PF-06952229，利用7天给药和7天停药时间表。持续BID口服施用PD-0332991或PF-06873600，直到研究结束。所述处理组和剂量方案信息总结于表1中：
Figure DEST_PATH_IMAGE008
每周三次测量肿瘤体积。基于二维卡尺测量，使用公式(长度×宽度2)×0.5计算立方毫米体积来计算肿瘤体积。当肿瘤体积达到2000 mm3时(这为所述研究的存活终点)处死小鼠。使用GraphPad Prism 7软件绘制存活曲线。使用Log-rank(Mantel-Cox)检验进行统计分析。
结果：
在CT26同源肿瘤模型中，处理开始后第40天的存活结果显示使用TGFβ抑制剂PF-06952229单一疗法处理并未显著增加存活；然而，相对于PF-06952229单一疗法(p=0.0088)和相对于帕博西尼单一疗法(p=0.0173)，PF-06952229处理与CDK4/6抑制剂帕博西尼的组合导致存活显著增加。当将TGFβ抑制剂PF-06952229与CDK 2/4/6抑制剂PF-06873600组合时，也观察到显著的组合效果，导致相对于PF-06952229单一疗法(p＜0.0001)和相对于PF-06873600单一疗法(p= 0.0013)存活显著增加。参见图1和表2：
Figure DEST_PATH_IMAGE010
在CT26异种移植肿瘤模型中，处理开始后第17天，肿瘤生长结果显示使用TGFβ抑制剂PF-06952229单一疗法处理并未显著抑制肿瘤生长；然而，PF-06952229处理与CDK 2/4/6抑制剂PF-06873600的组合导致显著的组合效果，且因此相对于PF-06952229单一疗法(p=0.0005)和相对于PF-06873600单一疗法(p=0.0004)，导致肿瘤生长抑制增加(图2)。类似地，当与单独的PF-06952229或帕博西尼单一疗法处理相比时，PF-06952229与帕博西尼(PD-0332991)的组合也显示组合效果(肿瘤生长抑制增加)的趋势(图2)。
结论
在CT26同源肿瘤模型中，相对于PF-06952229单一疗法或CDK抑制剂单一疗法，TGFβ抑制剂PF 06952229与CDK4/6抑制剂帕博西尼或CDK2/4/6抑制剂的组合导致较大的肿瘤生长抑制和显著的存活改善。
实施例2：在MCF7人ER+异种移植小鼠肿瘤模型中，PF-06952229与帕博西尼和帕博西尼+氟维司群协同作用
概述
在MCF-7 ER+ HER2-乳腺癌肿瘤小鼠模型的小鼠中，在无或有选择性雌激素受体降解剂氟维司群的情况下评价PF-06952229与CDK 4/6抑制剂帕博西尼的组合。相对于任一单独的单一疗法，PF-06952229与CDK4/6抑制剂帕博西尼(PD-0332991)的组合导致显著抑制肿瘤生长。当将PF-06952229与帕博西尼加氟维司群组合时观察到类似的结果。
材料和方法
从美国典型菌种保藏中心(ATCC)获得MCF7人ER+乳腺癌细胞并培养在补充有10%胎牛血清(FBS)的罗斯维尔公园纪念学院(RPMI1640)中。将所有细胞保持在37℃和5%二氧化碳(CO2)的湿润培养箱中。从Jackson Laboratories获得7周龄的雌性NSG小鼠。为了产生异种移植模型，在植入肿瘤细胞前7天，将17β-雌二醇小丸(0.36mg，释放90天)皮下植入雌性NSG小鼠的左胁腹。然后，将500万个MCF7癌细胞皮下植入雌性NSG小鼠的右轴区。在肿瘤细胞植入后第27天，基于约180mm3的平均肿瘤大小，将荷瘤小鼠随机分至处理组并开始处理。处理组包括媒介物、10mg/kg PD-0332991、30mg/kg PF-06952229、PD-0332991+PF-05279929(10mg/kg)、PF-06952229 +PD-0332991和PF-06952229+PD-0332991+PF-05279929的三重组合。每天两次(BID)口服施用PF-06952229，利用7天给药和7天停药时间表。持续BID口服施用PD-0332991，直到研究结束。每周两次皮下施用PF-05279929。处理组和剂量方案信息总结于表3中：
Figure DEST_PATH_IMAGE012
每周两次测量肿瘤体积。基于二维卡尺测量，使用公式(长度×宽度2)×0.5计算立方毫米体积来计算肿瘤体积。每周两次测量体重。使用GraphPad Prism 7软件绘制肿瘤生长曲线。应用协方差统计分析(ANCOVA)模型来评价在处理后各个时间点对肿瘤大小的处理效果，按单独动物的基线肿瘤大小调整。使用t统计量在ANCOVA模型下利用倍数变化比较处理组与对照组，或处理组与其他处理组，并计算相关的95%置信区间。
pSMAD2生物测定：在分析之前收集肿瘤样品并在2.0mL低温管(Nalgene™)中快速冷冻。将解冻的肿瘤样品在添加有蛋白酶和磷酸酶抑制剂的细胞提取缓冲液(Invitrogen，Carlsbad，CA)中均质化。将肿瘤裂解物离心以将不溶的碎片沉淀，并将澄清的上清液转移至新的管中。使用6-Plex TGFβ信号传导磁珠试剂盒(Millipore，Burlington，MA)测量pSmad2。所有测定均在室温下进行。用测定缓冲液封闭96孔黑色圆底板10分钟后，向板中添加25μL的工作微球珠混合物(使用来自试剂盒的测定缓冲液将珠稀释1X)和25μL的1:10稀释的肿瘤裂解物(使用测定缓冲液1:10稀释)。在4℃下在摇动下孵育过夜后，使用手持式磁性分离块(EMD Millipore Catalog # 40-285)洗涤珠混合物。将具有结合的pSmad2的珠与25μL的生物素化检测抗体溶液一起孵育1小时，然后洗涤所述珠混合物。为了检测，添加25μL的链霉亲和素-PE溶液并孵育15分钟，并且然后添加25μL的扩增缓冲液，孵育另外15分钟。洗涤后，将珠重新悬浮于150μL/孔的鞘液(Bio-Rad catalog # 171-000055)中，并使用Bio-Plex 200分析仪(Bio-Rad，Hercules CA)进行分析。使用Bio-Plex Manager软件6.1版(Bio-Rad)确定每个孔的平均荧光强度(MFI)。使用减去空白孔的信号强度的MFI进行进一步分析。
总Smad2生物测定：根据制造商的说明，使用PathScan总Smad2夹心ELISA试剂盒(Cell signaling, Catolog #7244C)确定总Smad2蛋白。使用稀释缓冲液以1：100稀释肿瘤裂解物样品并将100μL添加至合适的孔中。将板在37℃下孵育2小时。洗涤所述板后，添加检测溶液(100μL/孔)，并将所述板在37℃下孵育1小时。洗涤所述板，并且然后添加100μL的HRP连接的二抗，并在37℃下孵育30分钟。再次洗涤所述板，添加TMB底物，并将所述板在室温下孵育30分钟。为了淬灭反应，向每个孔中添加终止液。在Spectramax读板仪(MolecularDevices)上测量在450nm处样品的吸光度。
Phospho-Rb Ser807/811生物测定：利用多重测定分析肿瘤裂解物中的phospho-Rb蛋白S807/811，其使用10点96孔U-PLEX板和购自Meso-Scale Discovery (MSD)的独特接头开发和表征。phospho-Rb特异性抗体pS807/811(8516BF)和总Rb抗体(9309BF)购自CellSignaling Technology (CST)。在该5-PLEX测定中，phospho-Rb特异性抗体被生物素化并与U-PLEX接头偶联。然后，所述接头自组装到U-PLEX板上的独特点上作为捕获试剂。将经适当稀释的肿瘤裂解物添加到板中。所述样品中的分析物与捕获试剂结合后，与电化学发光标记(MSD GOLD SULFO-TAG)缀合的Rb检测抗体与分析物结合以完成夹心免疫测定。
结果
在MCF7异种移植肿瘤模型中，在处理开始后第21天，肿瘤生长结果显示使用TGFβ抑制剂PF-06952229单一疗法处理并未显著抑制肿瘤生长；然而，PF-06952229处理与CDK4/6抑制剂帕博西尼的组合导致显著的组合效果，并且因此相对于PF-06952229单一疗法(p＜0.00001)和相对于帕博西尼单一疗法(p=0.0002)，导致肿瘤生长抑制增加(图3)。与帕博西尼+氟维司群处理相比时，当与帕博西尼+氟维司群组合时，PF-06952229也显示出显著的组合效果，p=0.0342(图4)。
在研究的同一天(处理开始后第21天)，将第2组(帕博西尼)中的动物随机分配以创建两个新的处理组，每组n=5只动物。然后，将TGFβ抑制剂PF-06592229处理添加至新创建的组中的一个，并在两个新创建组中持续帕博西尼处理，直到处理开始后第66天(研究结束时)。在第21天为第4组执行相同程序，当该组中的动物被随机分在两个新的处理组中，并将TGFβ抑制剂PF-06952229处理添加至这些组中的一个时，同时两个新创建的组均持续帕博西尼+氟维司群处理直到第66天。虽然与单独的帕博西尼或帕博西尼+氟维司群相比，在帕博西尼组或帕博西尼+氟维司群组中添加TGFβ抑制剂PF-06952229不具有统计学上显著的效果，但当在帕博西尼组或帕博西尼+氟维司群组中添加TGFβ抑制剂PF-06952229处理时有更大肿瘤抑制的趋势(图5)。
处理开始后第21天分离出的肿瘤样品的生物标记物分析证明使用TGFβ抑制剂PF-06592229处理导致显著抑制pSMAD2(TGFβ信号传导途径的关键组分)(图6)。在帕博西尼+氟维司群组中也观察到pSMAD2的适度抑制，然而，单独的TGFβ抑制剂PF-06952229的效果优于帕博西尼+氟维司群组合(p=0.004)(图6)。在施用TGFβ抑制剂PF-06952229与帕博西尼或帕博西尼+氟维司群的组合的组中观察到最强的pSMAD2抑制(两组中~80%抑制)，证明添加帕博西尼改善了PF-06952229下调pSMAD2水平的能力(分别为p=0.01和p=0.007)(图6)。磷酸化Rb为癌细胞中CDK4/6抑制的下游生物标记物。使用单一药剂帕博西尼处理导致pS807/811 Rb水平在第21天略微降低，而使用TGFβ抑制剂PF-06952229的单一药剂处理导致这些相同的磷蛋白略微增加(图7)。使用帕博西尼和氟维司群的组合观察到改善的pS807/811Rb水平抑制(p=0.04)，且在使用帕博西尼和PF-06952229的组合处理的肿瘤中观察到类似的改善(p=0.04)。在帕博西尼+氟维司群的组合中添加TGFβ抑制剂PF-06952229导致最强的pS807/811 Rb水平抑制(p＜0.0001)(图7)。总体而言，所述数据表明当将TGFβ抑制剂PF-06952229与单独的帕博西尼或帕博西尼+氟维司群组合使用时，有改善pS808/811 Rb抑制的趋势。
结论
在MCF-7 ER+ HER2-异种移植乳腺癌肿瘤模型中，相对于PF-06952229或帕博西尼单一疗法，或相对于帕博西尼+氟维司群组合，TGFβ抑制剂PF-06952229与CDK4/6抑制剂帕博西尼或帕博西尼加氟维司群(一种选择性雌激素受体降解剂)的组合导致更大的肿瘤生长抑制。相对于帕博西尼单一疗法或相对于帕博西尼+氟维司群组合，在先前接受CDK4/6抑制剂帕博西尼或帕博西尼+氟维司群处理21天的动物中添加TGFβ抑制剂PF-06952229导致肿瘤生长抑制增加的趋势。此外，TGFβ抑制剂PF-06952229+帕博西尼或帕博西尼+氟维司群的组合导致对TGFβR1(pSMAD2)和CDK4/6(pS807/811 Rb)二者的下游信号传导途径的抑制增加。

Claims (28)

1.一种治疗乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和一定量的CDK抑制剂，其中所述量一起有效治疗乳腺癌。
2.权利要求1的方法，其中所述乳腺癌为激素受体阳性(HR+)、人表皮生长因子受体2阴性(HER2-)乳腺癌。
3.一种治疗乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺或其药学上可接受的盐和一定量的CDK抑制剂，其中所述量一起有效治疗乳腺癌。
4.权利要求3的方法，其中所述乳腺癌为HR-阳性、HER2-阴性乳腺癌。
5.一种治疗乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和一定量的帕博西尼或其药学上可接受的盐，其中所述量一起有效治疗乳腺癌。
6.权利要求5的方法，其中所述乳腺癌为HR-阳性、HER2-阴性乳腺癌。
7.一种治疗乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的TGFβ抑制剂和一定量的6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-(1-(甲磺酰基)哌啶-4-基氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮或其药学上可接受的盐，其中所述量一起有效治疗乳腺癌。
8.权利要求7的方法，其中所述乳腺癌为HR-阳性、HER2-阴性乳腺癌。
9.一种治疗乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺或其药学上可接受的盐和一定量的帕博西尼或其药学上可接受的盐，其中所述量一起有效治疗乳腺癌。
10.权利要求9的方法，其中所述乳腺癌为HR-阳性、HER2-阴性乳腺癌。
11.一种治疗乳腺癌的方法，所述方法包括向有此需要的患者施用一定量的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺或其药学上可接受的盐和一定量的6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-(1-(甲磺酰基)哌啶-4-基氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮或其药学上可接受的盐，其中所述量一起有效治疗乳腺癌。
12.权利要求11的方法，其中所述乳腺癌为HR-阳性、HER2-阴性乳腺癌。
13.权利要求1-4中任一项的方法，其中所述CDK抑制剂为选择性CDK4/6抑制剂或选择性CDK2/4/6抑制剂。
14.权利要求1-12中任一项的方法，其中所述乳腺癌为晚期乳腺癌。
15.权利要求1-12中任一项的方法，其中所述乳腺癌为转移性乳腺癌。
16.权利要求5、6、9和10中任一项的方法，其中帕博西尼或其药学上可接受的盐根据非标准临床给药方案施用，并且进一步地其中所述量一起有效治疗乳腺癌。
17.权利要求16的方法，其中所述非标准临床给药方案为非标准临床剂量。
18.权利要求17的方法，其中所述非标准临床剂量为帕博西尼或其药学上可接受的盐的低剂量量。
19.权利要求18的方法，其中所述帕博西尼或其药学上可接受的盐的低剂量量为每天一次约75mg。
20.权利要求16的方法，其中所述非标准临床给药方案为非标准给药时间表。
21.权利要求20的方法，其中所述非标准给药时间表为帕博西尼或其药学上可接受的盐的连续给药时间表。
22.权利要求16-21中任一项的方法，其中所述非标准临床给药方案包括施用约75mg的帕博西尼或其药学上可接受的盐，每天一次，连续14天，随后7天停止治疗。
23.一种(a)和(b)的协同组合产品：
(a) 4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺或其药学上可接受的盐；和
(b) 帕博西尼或其药学上可接受的盐；
其中组分(a)和组分(b)是协同的。
24.一种用于治疗乳腺癌的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺或其药学上可接受的盐与帕博西尼或其药学上可接受的盐的组合产品。
25.一种(a)和(b)的协同组合产品：
(a) 4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺或其药学上可接受的盐；和
(b) 6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-(1-(甲磺酰基)哌啶-4-基氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮或其药学上可接受的盐；
其中组分(a)和组分(b)是协同的。
26.一种用于治疗乳腺癌的4-(2-(5-氯-2-氟苯基)-5-异丙基吡啶-4-基氨基)-N-(1,3-二羟基丙-2-基)烟酰胺或其药学上可接受的盐与6-(二氟甲基)-8-((1R,2R)-2-羟基-2-甲基环戊基)-2-(1-(甲磺酰基)哌啶-4-基氨基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮或其药学上可接受的盐的组合产品。
27.权利要求1-22中任一项的方法，所述方法进一步包括施用一定量的氟维司群。
28.权利要求23-26中任一项的组合产品，其进一步包含氟维司群。
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