CN112680492A - 一种无腥味低分子量牡蛎肽及其制备方法 - Google Patents
一种无腥味低分子量牡蛎肽及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112680492A CN112680492A CN202011401572.2A CN202011401572A CN112680492A CN 112680492 A CN112680492 A CN 112680492A CN 202011401572 A CN202011401572 A CN 202011401572A CN 112680492 A CN112680492 A CN 112680492A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- oyster
- molecular
- fishy smell
- weight
- enzymolysis
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 241000237502 Ostreidae Species 0.000 title claims abstract description 160
- 235000020636 oyster Nutrition 0.000 title claims abstract description 160
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 78
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 22
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 44
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims abstract description 33
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims abstract description 31
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims abstract description 31
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims abstract description 31
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims abstract description 31
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 31
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims abstract description 31
- -1 sucrose fatty acid ester Chemical class 0.000 claims abstract description 31
- 229920001218 Pullulan Polymers 0.000 claims abstract description 21
- 239000004373 Pullulan Substances 0.000 claims abstract description 21
- 235000019423 pullulan Nutrition 0.000 claims abstract description 21
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 20
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 17
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 claims abstract description 13
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 11
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 claims abstract description 9
- 239000004627 regenerated cellulose Substances 0.000 claims abstract description 9
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims abstract description 9
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000007974 sodium acetate buffer Substances 0.000 claims abstract description 7
- BHZOKUMUHVTPBX-UHFFFAOYSA-M sodium acetic acid acetate Chemical compound [Na+].CC(O)=O.CC([O-])=O BHZOKUMUHVTPBX-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 7
- 108091005658 Basic proteases Proteins 0.000 claims description 27
- 108090000145 Bacillolysin Proteins 0.000 claims description 21
- 102000035092 Neutral proteases Human genes 0.000 claims description 21
- 108091005507 Neutral proteases Proteins 0.000 claims description 21
- 108010059345 keratinase Proteins 0.000 claims description 21
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims description 4
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 abstract description 16
- 230000003266 anti-allergic effect Effects 0.000 abstract description 8
- 230000007065 protein hydrolysis Effects 0.000 abstract description 5
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 27
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 18
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 18
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 16
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 16
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 16
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 12
- 108010003272 Hyaluronate lyase Proteins 0.000 description 7
- 102000001974 Hyaluronidases Human genes 0.000 description 7
- 235000019658 bitter taste Nutrition 0.000 description 7
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 7
- 229960002773 hyaluronidase Drugs 0.000 description 7
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 7
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 7
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 7
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 230000001953 sensory effect Effects 0.000 description 6
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 5
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 5
- 235000019640 taste Nutrition 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 4
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 3
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 3
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000013329 compounding Methods 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- TXQVDVNAKHFQPP-UHFFFAOYSA-N [3-hydroxy-2,2-bis(hydroxymethyl)propyl] octadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OCC(CO)(CO)CO TXQVDVNAKHFQPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- XKMRRTOUMJRJIA-UHFFFAOYSA-N ammonia nh3 Chemical compound N.N XKMRRTOUMJRJIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- 241000190633 Cordyceps Species 0.000 description 1
- 235000019750 Crude protein Nutrition 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004278 EU approved seasoning Substances 0.000 description 1
- YIKYNHJUKRTCJL-UHFFFAOYSA-N Ethyl maltol Chemical compound CCC=1OC=CC(=O)C=1O YIKYNHJUKRTCJL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001116 FEMA 4028 Substances 0.000 description 1
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 238000007696 Kjeldahl method Methods 0.000 description 1
- 229920002385 Sodium hyaluronate Polymers 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 238000003916 acid precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N beta-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N 0.000 description 1
- 235000011175 beta-cyclodextrine Nutrition 0.000 description 1
- 229960004853 betadex Drugs 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000013065 commercial product Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 235000020247 cow milk Nutrition 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 229940093503 ethyl maltol Drugs 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 235000011194 food seasoning agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 235000008216 herbs Nutrition 0.000 description 1
- 235000020256 human milk Nutrition 0.000 description 1
- 210000004251 human milk Anatomy 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 239000000413 hydrolysate Substances 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 239000005457 ice water Substances 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 229940010747 sodium hyaluronate Drugs 0.000 description 1
- YWIVKILSMZOHHF-QJZPQSOGSA-N sodium;(2s,3s,4s,5r,6r)-6-[(2s,3r,4r,5s,6r)-3-acetamido-2-[(2s,3s,4r,5r,6r)-6-[(2r,3r,4r,5s,6r)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2- Chemical compound [Na+].CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 YWIVKILSMZOHHF-QJZPQSOGSA-N 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 238000000194 supercritical-fluid extraction Methods 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Meat, Egg Or Seafood Products (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
本发明涉及生物活性成分技术领域，具体涉及一种无腥味低分子量牡蛎肽的制备方法，包括以下步骤：S1.以新鲜无壳牡蛎粉为原料，分散于pH值6.5～7.5的乙酸‑乙酸钠缓冲溶液中，配成质量浓度为5～8％的牡蛎粉溶液，添加蔗糖脂肪酸酯；S2.向牡蛎粉溶液添加复合酶进行酶解，在酶解结束后加入普鲁兰多糖，制得牡蛎酶解液；S3.对牡蛎酶解液进行灭酶操作，调节牡蛎肽酶解液的pH值为5.5～6.0，离心取上清液；将上清液用再生纤维素透析袋进行透析，再进行浓缩干燥得牡蛎肽。本发明制备的牡蛎肽无腥味和异味，顾客极易接受，具有较佳抗过敏效果，且牡蛎酶解液中蛋白质水解度可达到42％以上，回收率可达到90％以上。
Description
技术领域
本发明涉及生物活性成分技术领域，尤其是涉及一种无腥味低分子量牡蛎肽及其制备方 法。
背景技术
牡蛎(Oyster)是一种资源丰富、极具经济价值的水产品，其肉质鲜美，营养丰富，具 有很高的食用和药用价值。研究表明，利用不同水解酶及反应条件水解牡蛎蛋白得到的水解 产物具有多种生物活性。牡蛎软体干物质中蛋白质含量高达50％，其氨基酸组成完善，超过 牛乳和人乳，具有“海底牛奶”的美誉。因此，牡蛎生物活性肽的开发和应用也得到广泛关注。 如包卫洋等人在中国专利201811214654.9中公布了一种牡蛎来源的ACE抑制及抗肿瘤活性 肽；叶常青等人在中国专利201810127963.6公布了牡蛎活性多肽的制备方法；楼良水等人在 中国专利201810171659.1中公布了补肾生精的虫草牡蛎肽复合物的制备方法和应用。
现有专利技术(申请号201711065482.9)公开了一种牡蛎肽提取方法，该方法利用碱溶 酸沉蛋白的方法提取牡蛎粗蛋白，利用双频超声与微波辅助酶解，提高了酶解效率，节约了 成本。由于碱溶酸沉的方法并不能沉淀出牡蛎中所有的蛋白，因此，利用该方法制备牡蛎肽 未能实现牡蛎原料中蛋白利用的最大化。此外，牡蛎肉中富含不饱和脂肪酸，这些物质不断 地代谢、氧化和相互作用，令许多含硫含氮化合物发生转化游离脂肪酸发生酸败，产生难以 去除的腥臭味，以及其在水解过程中释放出的苦味肽，风味不佳，影响牡蛎肽及其产品的感 官性能，是制约牡蛎肽及其相关产品开发的重要因素之一。常规水产品酶解多肽的脱腥方法 有：一、物理吸附或包埋法，使用粉末活性炭对腥味物质进行吸附，使用β-环糊精，甲壳素 和壳聚糖进行包埋，缺点为蛋白质损失率高；二、遮蔽法，加入辛香味调料，比如乙基麦芽 酚，乙酸乙酯等物质遮挡原有腥味，引入其他味道；三、超临界萃取脱腥，一般与其他工艺 配合使用，设备成本高，不能工业化生产。
因此，亟需一种蛋白质回收率高、制备的牡蛎肽无腥味和异味，香气浓郁，无不良气味， 风味可口，顾客极易接受，并且可工业化生产的无腥味低分子量牡蛎肽的制备方法。
发明内容
针对现有技术存在的不足，本发明的目的是提供一种无腥味低分子量牡蛎肽及其制备方 法，制备的牡蛎肽质量佳，无腥味和异味，香气浓郁，无不良气味，风味可口，顾客极易接 受；本发明采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和角蛋白酶复配，结合牡蛎酶解液的pH值、酶解 温度和酶解时间的调节，使得牡蛎酶解液中蛋白质水解度和回收率明显增强，其蛋白质水解 度可达到42％以上，回收率可达到90％以上。
本发明的上述发明目的是通过以下技术方案得以实现的：
一种无腥味低分子量牡蛎肽的制备方法，包括以下步骤：
S1.以新鲜无壳牡蛎粉为原料，分散于pH值6.5～7.5的乙酸-乙酸钠缓冲溶液中，配成质 量浓度为5～8％的牡蛎粉溶液，添加蔗糖脂肪酸酯；
S2.向牡蛎粉溶液添加复合酶进行酶解，在酶解结束后加入普鲁兰多糖，制得牡蛎酶解液；
S3.对牡蛎酶解液进行灭酶操作，调节牡蛎肽酶解液的pH值为5.5～6.0，离心取上清液； 将上清液用再生纤维素透析袋进行透析，再进行浓缩干燥得牡蛎肽，所述牡蛎肽的分子量在 1000道尔顿以下。
优选地，所述复合酶包括碱性蛋白酶、中性蛋白酶和角蛋白酶，所述碱性蛋白酶、中性 蛋白酶和角蛋白酶的质量比为1:(2.5～4):(1.5～3)。
优选地，所述碱性蛋白酶、中性蛋白酶和角蛋白酶的质量比为1:3.5:2。
优选地，所述牡蛎粉溶液与碱性蛋白酶的质量比为1:(0.1～0.3)。
优选地，所述蔗糖脂肪酸酯的添加量为无壳牡蛎粉重量的0.2～0.7倍。
优选地，所述蔗糖脂肪酸酯的HLB为6～9。
优选地，所述普鲁兰多糖的添加量为无壳牡蛎粉重量的0.3～0.9倍。
优选地，所述步骤S1中，酶解温度为50～60℃，酶解时间为2～3h。
优选地，所述步骤S1中灭酶温度为85～95℃，所述离心速度为8000～9000r/min，离心 时间为15～20min。
蔗糖脂肪酸酯，是一种非离子型表面活性剂，含有亲水性和亲油性基团，乳化稳定性高， 耐水解性强，能降低表面张力，蔗糖脂肪酸酯含有的亲水性基团可以破坏大分子分子间和分 子内的氢键，以提高牡蛎的溶解性，在本发明的技术方案中，发明人意外在牡蛎粉酶解过程 后添加HLB为6～9的蔗糖脂肪酸酯，发现制备的牡蛎肽腥味和异味大大减弱，风味较佳。 本发明机理还在研究中，推测酶解过程中蔗糖脂肪酸酯可以减慢不饱和脂肪酸氧化，使得不 容易释放牡蛎原有的海腥物质，阻止了蛋白质酶解产物中大量释放的氨基酸与其他脂肪氧化 产物发生反应，以减少酸败的作用，减少牡蛎酶解液色、香、味的不断恶化。并且添加普鲁 兰多糖后降低牡蛎肽的腥味和异味的效果达到最佳，牡蛎肽香气浓郁，无不良气味，风味可 口，顾客极易接受，并且两者复配还可以提高牡蛎肽抗过敏的效果，目前现有技术中还暂未 公开蔗糖脂肪酸酯和普鲁兰多糖具备去腥的作用，且当蔗糖脂肪酸酯和普鲁兰多糖单独使用 时，达不到降低牡蛎肽腥味和异味的最佳效果。
本发明使用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和角蛋白酶三种蛋白酶以特定的比例复配，结合牡蛎酶解液pH值、酶解温度和酶解时间的调节，使得牡蛎酶解液中蛋白质水解度和回收率明 显增强，其蛋白质水解度可达到42％以上，回收率可达到90％以上。此外，本发明制备的牡蛎肽粉具有抑制透明质酸酶的活性较佳，进而提高了抗过敏作用。
综上所述，本发明包括以下至少一种有益技术效果：
1.本发明提供了一种无腥味低分子量牡蛎肽，创造性引入蔗糖脂肪酸酯和普鲁兰多糖复 配，制备的牡蛎肽的气味、口感和整体可接受度三方面均较佳，不引入带有味道的物质，无 腥味和异味，香气浓郁，无不良气味，风味较佳，顾客极易接受，并且可增强抗过敏作用；
2.本发明提供了一种无腥味低分子量牡蛎肽的制备方法，其蛋白质的水解度和回收率明 显增强，其蛋白质水解度可达到42％以上，回收率可达到90％以上；
3.本发明提供了一种无腥味低分子量牡蛎肽的制备方法，制备方法简单，可工业化生产， 提高了牡蛎肽的品质。
具体实施方式
以下对本发明作进一步详细说明。
牡蛎肉为市售产品，营养成分含量(以鲜重％计)如下：蛋白质9.80±0.31，脂肪2.65 ±0.33，糖2.74±0.11，灰分1.69±0.06，水分79.12±0.95；本发明将新鲜牡蛎肉通过常规技 术进行干燥，然后粉碎，制得新鲜无壳牡蛎粉。
蔗糖脂肪酸酯(深圳乐芙生物科技有限公司)；普鲁兰多糖(上海源叶生物科技有限公 司，CAS号为9057-02-7)；碱性蛋白酶(Alcalase2.4L，诺维信中国生物技术有限公司)、 中性蛋白酶(上海前尘生物科技有限公司，货号为04942078001)和角蛋白酶(深圳乐芙生 物科技有限公司)。
实施例1
本发明无腥味低分子量牡蛎肽的制备方法，包括以下步骤：
S1.以新鲜无壳牡蛎粉为原料，分散于pH值6.5的乙酸-乙酸钠缓冲溶液中，配成质量浓 度为5％的牡蛎粉溶液，添加0.2倍无壳牡蛎粉重量的蔗糖脂肪酸酯，蔗糖脂肪酸酯的HLB 为6；
S2.向牡蛎粉溶液添加碱性蛋白酶、中性蛋白酶和角蛋白酶，在温度为50℃恒温酶解2h， 在酶解结束后加入0.3倍无壳牡蛎粉重量的普鲁兰多糖，形成牡蛎酶解液；
S3.对牡蛎酶解液进行灭酶操作，灭酶温度为85℃，调节牡蛎肽酶解液的pH值为5.5， 冷却后于8000r/min离心15min，取上清液用分子截留量为500Da的再生纤维素透析袋透析， 再进行浓缩干燥得牡蛎肽，制备的牡蛎肽的分子量在1000道尔顿以下。
所述碱性蛋白酶、中性蛋白酶和角蛋白酶的质量比为1:2.5:1.5。
所述牡蛎粉溶液与碱性蛋白酶的质量比为1:0.1。
实施例2
本发明无腥味低分子量牡蛎肽的制备方法，包括以下步骤：
S1.以新鲜无壳牡蛎粉为原料，分散于pH值7.0的乙酸-乙酸钠缓冲溶液中，配成质量浓 度为6％的牡蛎粉溶液，添加0.5倍无壳牡蛎粉重量的蔗糖脂肪酸酯，蔗糖脂肪酸酯的HLB 为8；
S2.向牡蛎粉溶液添加碱性蛋白酶、中性蛋白酶和角蛋白酶，在温度为55℃恒温酶解2.5h， 在酶解结束后加入0.6倍无壳牡蛎粉重量的普鲁兰多糖，形成牡蛎酶解液；
S3.对牡蛎酶解液进行灭酶操作，灭酶温度为90℃，调节牡蛎肽酶解液的pH值为5.8， 冷却后于8500r/min离心15min，取上清液用分子截留量为1000Da的再生纤维素透析袋透析， 再进行浓缩干燥得牡蛎肽，制备的牡蛎肽的分子量在1000道尔顿以下。
所述碱性蛋白酶、中性蛋白酶和角蛋白酶的质量比为1:3:2。
所述牡蛎粉溶液与碱性蛋白酶的质量比为1:0.15。
实施例3
本发明无腥味低分子量牡蛎肽的制备方法，包括以下步骤：
S1.以新鲜无壳牡蛎粉为原料，分散于pH值7.5的乙酸-乙酸钠缓冲溶液中，配成质量浓 度为8％的牡蛎粉溶液，添加0.7倍无壳牡蛎粉重量的蔗糖脂肪酸酯，蔗糖脂肪酸酯的HLB 为9；
S2.向牡蛎粉溶液添加碱性蛋白酶、中性蛋白酶和角蛋白酶，在温度为60℃恒温酶解3h， 在酶解结束后加入0.9倍无壳牡蛎粉重量的普鲁兰多糖，形成牡蛎酶解液；
S3.对牡蛎酶解液进行灭酶操作，灭酶温度为95℃，调节牡蛎肽酶解液的pH值为6.0， 冷却后于9000r/min离心15min，取上清液用分子截留量为1000Da的再生纤维素透析袋透析， 再进行浓缩干燥得牡蛎肽，制备的牡蛎肽的分子量在1000道尔顿以下。
所述碱性蛋白酶、中性蛋白酶和角蛋白酶的质量比为1:4:3。
所述牡蛎粉溶液与碱性蛋白酶的质量比为1:0.3。
实施例4
本发明无腥味低分子量牡蛎肽的制备方法，包括以下步骤：
S1.以新鲜无壳牡蛎粉为原料，分散于pH值6.8的乙酸-乙酸钠缓冲溶液中，配成质量浓 度为6％的牡蛎粉溶液，添加0.6倍无壳牡蛎粉重量的蔗糖脂肪酸酯，蔗糖脂肪酸酯的HLB 为8；
S2.向牡蛎粉溶液添加碱性蛋白酶、中性蛋白酶和角蛋白酶，在温度为55℃恒温酶解2h， 在酶解结束后加入0.7倍无壳牡蛎粉重量的普鲁兰多糖，形成牡蛎酶解液；
S3.对牡蛎酶解液进行灭酶操作，灭酶温度为90℃，调节牡蛎肽酶解液的pH值为5.7， 冷却后于9000r/min离心20min，取上清液用分子截留量为1000Da的再生纤维素透析袋透析， 再进行浓缩干燥得牡蛎肽，制备的牡蛎肽的分子量在1000道尔顿以下。
所述碱性蛋白酶、中性蛋白酶和角蛋白酶的质量比为1:3.5:2。
所述牡蛎粉溶液与碱性蛋白酶的质量比为1:0.15。
对比例1
与实施例4相比，本对比例的区别在于，牡蛎肽制备过程中，不添加蔗糖脂肪酸酯和普 鲁兰多糖。
对比例2
与实施例4相比，本对比例的区别在于，牡蛎肽制备过程中，不添加蔗糖脂肪酸酯。
对比例3
与实施例4相比，本对比例的区别在于，牡蛎肽制备过程中不添加普鲁兰多糖。
对比例4
与实施例4相比，本对比例的区别在于，牡蛎肽制备过程中，使用相同量的异戊四醇硬 脂酸酯替换蔗糖脂肪酸酯。
对比例5
与实施例4相比，本对比例的区别在于，牡蛎肽制备过程中，不含有角蛋白酶，碱性蛋 白酶和中性蛋白酶的质量比为3:3.5。
对比例6
与实施例4相比，本对比例的区别在于，牡蛎肽制备过程中，不含有中性蛋白酶，碱性 蛋白酶和角蛋白酶的质量比为2.5:4。
试验例一、感官评定
从气味(鲜香味，腥味)、口感(腥苦味、异味)和整体可接受度三方面对实施例1～4及对 比例1～4制备的牡蛎肽进行感官评定，随机编号，由10名经过培训的感官评定人员按表1 标准评分，分值越大表示风味越优，越易接受，最后评分取平均值，见表2。
表1
| 评分 | 整体气味(鲜香味、腥味) | 口感(腥苦味、异味) | 整体可接受度 |
| 5 | 香气浓郁，无不良气味 | 无腥苦味，无异味 | 极易接受 |
| 4 | 有较浓郁的鲜香味，轻微腥味 | 略有腥苦味，轻微异味 | 轻易接受 |
| 3 | 牡蛎香味较淡，腥味较淡 | 腥苦味较淡，异味较淡 | 大多数人能接受 |
| 2 | 鲜香味几乎没有，腥味明显 | 腥苦味明显，异味明显 | 不易接受 |
| 1 | 无鲜味，腥味重 | 腥味重，异味重 | 难以接受 |
表2
| 组别 | 评分平均值 |
| 实施例5 | 4.8 |
| 实施例6 | 4.8 |
| 实施例7 | 4.9 |
| 实施例8 | 5.0 |
| 对比例1 | 1.0 |
| 对比例2 | 2.2 |
| 对比例3 | 4.0 |
| 对比例4 | 2.5 |
从表2的数据可知，实施例1～4制备的牡蛎肽评分平均值均大于4，整体气味香气浓郁， 无不良气味，感官评定人员认为口感无腥苦味，无异味，整体上极易接受。
对比例1不添加蔗糖脂肪酸酯和普鲁兰多糖制备的牡蛎肽，整体气味上无鲜味，腥味重， 口感上腥味也重，异味重，感官评定人员难以接受，其评分最低；
对比例2不添加蔗糖脂肪酸酯，整体气味上鲜香味几乎没有，腥味明显，腥苦味明显， 异味明显，整体上不易接受，说明蔗糖脂肪酸酯的添加可以大大去除牡蛎肽的腥味和异味， 推测酶解过程中蔗糖脂肪酸酯减慢了不饱和脂肪酸氧化，使得不容易释放牡蛎原有的海腥物 质，阻止了蛋白质酶解产物中大量释放的氨基酸与其他脂肪氧化产物发生反应，以减少酸败 的作用，减少牡蛎酶解液色、香、味的不断恶化。
对比例3缺少普鲁兰多糖，复合蛋白粉具有较浓郁的鲜香味，轻微腥味，略有腥苦味， 轻微异味，能轻易接受，说明添加普鲁兰多糖后降低牡蛎肽的腥味和异味的效果达到最佳， 使得牡蛎肽香气浓郁，无不良气味，风味可口，顾客极易接受。
对比例4使用异戊四醇硬脂酸酯替换蔗糖脂肪酸酯，制备的牡蛎肽的气味、口感和整体 可接受度达不到实施例1～4的风味效果，与对比例1风味效果类似，说明蔗糖脂肪酸酯是不 能随意替换的，本发明在制备牡蛎肽过程中添加蔗糖脂肪酸酯，可以提升牡蛎肽的气味、口 感和整体可接受度，风味佳。
试验例二、抗过敏活性检测
0.25mmol/L CaCl2 0.1mL加入0.5mL透明质酸酶溶液(50mg透明质酸酶溶于20mL0.1 mol/L醋酸缓冲液中，pH 4.01)37℃培养20min；分别加入0.5mL实施例1～4及对比例1～ 4制备的含有牡蛎肽的复合蛋白粉相同质量浓度的溶液(60mg/ml)，37℃保温20min；然后 在加入0.6mL透明质酸钠(0.6mg/mL)37℃保温20min；加入0.4mol/L NaOH 1mL，迅速 置于冰上冷却15min；加入0.2mL硼酸，沸水水浴3min，立即冰水冷却5min，加入P-DAB 试剂3mL，37℃保温20min，显色，在585nm下测定OD值。
抗过敏活性计算:
式中:A，对照溶液(酶+缓冲液+底物)的OD值；B，对照空白(缓冲液+缓冲液+底物)的 OD值；C，样品(酶+样+底物)的OD值；D，样品空白对照(缓冲液+样+底物)的OD值。结果见表3。
表3
从表3的数据可知，实施例1～4制备的无腥味低分子量牡蛎肽，具有较高的安全性，作 用温和，对透明质酸酶的抑制率较高，抗过敏活性最强，以实施例4透明质酸酶的抑制率最 高，可达到84.8％。
对比例1～4制备的无腥味低分子量牡蛎肽对透明质酸酶的抑制率较低，抗过敏活性效果 均不及实施例1～4，说明蔗糖脂肪酸酯和普鲁兰多糖相互协同，提高了透明质酸酶的抑制率， 增强了牡蛎肽的抗过敏活性，安全性高。
试验例三、测定蛋白质回收率和水解度
取实施例1～4及对比例5～6经再生纤维素透析袋透析得到的透析液测定其中的蛋白质 回收率和水解度，使用凯氏定氮法测定原料和酶解液的总氮含量，用中性甲醛滴定法测定氨 氮含量，蛋白回收率定义为牡蛎酶解液中蛋白总量与原料蛋白总量的比值，水解度定义为牡蛎酶解液中游离氨氮量与原料总氮量的比值，结果见表4。
表4
| 组别 | 蛋白质回收率(％) | 蛋白质水解度(％) |
| 实施例1 | 39.12 | 89.43 |
| 实施例2 | 43.89 | 90.15 |
| 实施例3 | 42.06 | 91.43 |
| 实施例4 | 45.89 | 92.61 |
| 对比例5 | 28.54 | 57.23 |
| 对比例6 | 30.62 | 63.17 |
根据表4的数据知，本发明实施例1～4制备的牡蛎肽采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和角 蛋白酶三种蛋白酶以特定的比例复配，结合牡蛎酶解液pH值、酶解温度和酶解时间的调节， 使得牡蛎酶解液中蛋白质水解度和回收率明显增强，其蛋白质水解度可达到45.89％，回收率 可达到92.61％；
对比例5或对比例6用相同量的碱性蛋白酶替换角蛋白酶或含有中性蛋白酶，牡蛎酶解 液中蛋白质水解度和回收率不高，不及实施1～4的效果，说明蛋白酶类对蛋白质水解度和回 收率有着较大影响。
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术 的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所 属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效 修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。
Claims (10)
1.一种无腥味低分子量牡蛎肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.以新鲜无壳牡蛎粉为原料，分散于pH值6.5～7.5的乙酸-乙酸钠缓冲溶液中，配成质量浓度为5～8％的牡蛎粉溶液，添加蔗糖脂肪酸酯；
S2.向牡蛎粉溶液添加复合酶进行酶解，在酶解结束后加入普鲁兰多糖，制得牡蛎酶解液；
S3.对牡蛎酶解液进行灭酶操作，调节牡蛎肽酶解液的pH值为5.5～6.0，离心取上清液；将上清液用再生纤维素透析袋进行透析，再进行浓缩干燥得牡蛎肽，所述牡蛎肽的分子量在1000道尔顿以下。
2.根据权利要求1所述的无腥味低分子量牡蛎肽的制备方法，其特征在于，所述复合酶包括碱性蛋白酶、中性蛋白酶和角蛋白酶，所述碱性蛋白酶、中性蛋白酶和角蛋白酶的质量比为1:(2.5～4):(1.5～3)。
3.根据权利要求2所述的无腥味低分子量牡蛎肽的制备方法，其特征在于，所述碱性蛋白酶、中性蛋白酶和角蛋白酶的质量比为1:3.5:2。
4.根据权利要求1所述的无腥味低分子量牡蛎肽的制备方法，其特征在于，所述牡蛎粉溶液与碱性蛋白酶的质量比为1:(0.1～0.3)。
5.根据权利要求1所述的无腥味低分子量牡蛎肽的制备方法，其特征在于，所述蔗糖脂肪酸酯的添加量为无壳牡蛎粉重量的0.2～0.7倍。
6.根据权利要求1所述的无腥味低分子量牡蛎肽的制备方法，其特征在于，所述蔗糖脂肪酸酯的HLB为6～9。
7.根据权利要求1所述的无腥味低分子量牡蛎肽的制备方法，其特征在于，所述普鲁兰多糖的添加量为无壳牡蛎粉重量的0.3～0.9倍。
8.根据权利要求1所述的无腥味低分子量牡蛎肽的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中，酶解温度为50～60℃，酶解时间为2～3h。
9.根据权利要求1所述的无腥味低分子量牡蛎肽的制备方法，其特征在于，所述步骤S1中灭酶温度为85～95℃，所述离心速度为8000～9000r/min，离心时间为15～20min。
10.根据权利要求1所述的无腥味低分子量牡蛎肽的制备方法，其特征在于，再生纤维素透析袋的分子截留量为500～1000Da。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202011401572.2A CN112680492A (zh) | 2020-12-04 | 2020-12-04 | 一种无腥味低分子量牡蛎肽及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202011401572.2A CN112680492A (zh) | 2020-12-04 | 2020-12-04 | 一种无腥味低分子量牡蛎肽及其制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN112680492A true CN112680492A (zh) | 2021-04-20 |
Family
ID=75447279
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202011401572.2A Pending CN112680492A (zh) | 2020-12-04 | 2020-12-04 | 一种无腥味低分子量牡蛎肽及其制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN112680492A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114041603A (zh) * | 2021-11-09 | 2022-02-15 | 中国农业大学 | 肽-锌螯合物在抗过敏产品中的应用 |
| CN114431457A (zh) * | 2022-01-19 | 2022-05-06 | 广州市沐家健康产业有限公司 | 一种海藻酵素粉及其制备方法 |
Citations (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101228957A (zh) * | 2007-01-24 | 2008-07-30 | 王伟成 | 一种低分子海参、牡蛎活性物质滴丸的制备方法 |
| CN101263860A (zh) * | 2008-05-05 | 2008-09-17 | 山东天久生物技术有限公司 | 从牡蛎粉中酶法制取牡蛎肽的工业生产方法 |
| EP3231873A1 (en) * | 2015-11-05 | 2017-10-18 | Infinitus (China) Company Ltd. | Oyster peptide capable of enhancing sexual function, and preparation method and application thereof |
| CN107815482A (zh) * | 2017-11-02 | 2018-03-20 | 金华市艾力生物科技有限公司 | 一种牡蛎肽提取方法 |
| CN108396048A (zh) * | 2018-02-08 | 2018-08-14 | 舟山海研食品科技有限公司 | 牡蛎活性多肽的制备方法 |
| CN109007848A (zh) * | 2018-07-16 | 2018-12-18 | 北京九鼎君健医药科技项城有限公司 | 一种提高性功能且抗疲劳的复合低聚肽、其口服制剂及该口服制剂的制备方法 |
| CN109007643A (zh) * | 2018-08-15 | 2018-12-18 | 雅安利涵商贸有限公司 | 一种高钙脆骨鱼肉板及其生产方法 |
| CN109195452A (zh) * | 2016-05-31 | 2019-01-11 | 三得利控股株式会社 | 含有咖啡因及环丙氨酰丙氨酸的组合物 |
| CN109897878A (zh) * | 2019-03-29 | 2019-06-18 | 集美大学 | 一种牡蛎肽及其生产方法和应用 |
| CN110438187A (zh) * | 2019-08-26 | 2019-11-12 | 大连工业大学 | 一种高水溶性牡蛎锌螯合肽的制备方法及其应用 |
| CN110819677A (zh) * | 2019-11-29 | 2020-02-21 | 鲁东大学 | 一种脱苦抗氧化牡蛎肽的制备方法 |
| CN110916197A (zh) * | 2019-12-16 | 2020-03-27 | 荣成市海洋绿洲生物科技有限公司 | 一种具有护肝功能的牡蛎肽粉及其制备方法和应用 |
| WO2020224058A1 (zh) * | 2019-05-09 | 2020-11-12 | 烟台嘉惠海洋生物科技有限公司 | 一种酶法制备牡蛎肽的工业化生产方法 |
| CN112641103A (zh) * | 2020-12-02 | 2021-04-13 | 广州天启生物科技有限公司 | 一种含有牡蛎肽的复合蛋白粉及其制备方法 |
-
2020
- 2020-12-04 CN CN202011401572.2A patent/CN112680492A/zh active Pending
Patent Citations (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101228957A (zh) * | 2007-01-24 | 2008-07-30 | 王伟成 | 一种低分子海参、牡蛎活性物质滴丸的制备方法 |
| CN101263860A (zh) * | 2008-05-05 | 2008-09-17 | 山东天久生物技术有限公司 | 从牡蛎粉中酶法制取牡蛎肽的工业生产方法 |
| EP3231873A1 (en) * | 2015-11-05 | 2017-10-18 | Infinitus (China) Company Ltd. | Oyster peptide capable of enhancing sexual function, and preparation method and application thereof |
| CN109195452A (zh) * | 2016-05-31 | 2019-01-11 | 三得利控股株式会社 | 含有咖啡因及环丙氨酰丙氨酸的组合物 |
| CN107815482A (zh) * | 2017-11-02 | 2018-03-20 | 金华市艾力生物科技有限公司 | 一种牡蛎肽提取方法 |
| CN108396048A (zh) * | 2018-02-08 | 2018-08-14 | 舟山海研食品科技有限公司 | 牡蛎活性多肽的制备方法 |
| CN109007848A (zh) * | 2018-07-16 | 2018-12-18 | 北京九鼎君健医药科技项城有限公司 | 一种提高性功能且抗疲劳的复合低聚肽、其口服制剂及该口服制剂的制备方法 |
| CN109007643A (zh) * | 2018-08-15 | 2018-12-18 | 雅安利涵商贸有限公司 | 一种高钙脆骨鱼肉板及其生产方法 |
| CN109897878A (zh) * | 2019-03-29 | 2019-06-18 | 集美大学 | 一种牡蛎肽及其生产方法和应用 |
| WO2020224058A1 (zh) * | 2019-05-09 | 2020-11-12 | 烟台嘉惠海洋生物科技有限公司 | 一种酶法制备牡蛎肽的工业化生产方法 |
| CN110438187A (zh) * | 2019-08-26 | 2019-11-12 | 大连工业大学 | 一种高水溶性牡蛎锌螯合肽的制备方法及其应用 |
| CN110819677A (zh) * | 2019-11-29 | 2020-02-21 | 鲁东大学 | 一种脱苦抗氧化牡蛎肽的制备方法 |
| CN110916197A (zh) * | 2019-12-16 | 2020-03-27 | 荣成市海洋绿洲生物科技有限公司 | 一种具有护肝功能的牡蛎肽粉及其制备方法和应用 |
| CN112641103A (zh) * | 2020-12-02 | 2021-04-13 | 广州天启生物科技有限公司 | 一种含有牡蛎肽的复合蛋白粉及其制备方法 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| JOANNA TKACZEWSKA: "Peptides and protein hydrolysates as food preservatives and bioactive components of edible films and coatings", 《TRENDS IN FOOD SCIENCE & TECHNOLOGY》 * |
| KAZUHIRO SHIOZAKI等: "Identification of oyster-derived hypotensive peptide acting as angiotensin-I-converting enzyme inhibitor", 《FISH SCI》 * |
| KAZUNARI TANAKA等: "Effects of Dietary Oyster Extract on Lipid Metabolism, Blood Pressure, and Blood Glucose in SD Rats, Hypertensive Rats, and Diabetic Rats", 《BIOSCI. BIOTECHNOL. BIOCHEM》 * |
| 张霖雲等: "普鲁兰多糖的改性处理研究进展", 《食品研究与开发》 * |
| 赵修念编著: "《畜禽骨肉提取物生产工艺与技术》", 30 April 2018, 中国轻工业出版社 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN114041603A (zh) * | 2021-11-09 | 2022-02-15 | 中国农业大学 | 肽-锌螯合物在抗过敏产品中的应用 |
| CN114431457A (zh) * | 2022-01-19 | 2022-05-06 | 广州市沐家健康产业有限公司 | 一种海藻酵素粉及其制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111084346B (zh) | 一种海参压片的制备工艺及其制得的海参压片 | |
| CN107997115B (zh) | 鳗鱼酱油及其制作方法 | |
| CN111418827B (zh) | 一株植物乳杆菌具有改善燕窝酶解发酵风味、增加小分子肽和唾液酸的用途 | |
| CN104782877B (zh) | 一种低致敏大豆肽全粉及其制备方法和应用 | |
| CN112680492A (zh) | 一种无腥味低分子量牡蛎肽及其制备方法 | |
| CN112641103B (zh) | 一种含有牡蛎肽的复合蛋白粉及其制备方法 | |
| CN111670956A (zh) | 一种桑叶米豆腐及其制作方法 | |
| CN109329868B (zh) | 一种营养强化型风味鱼露及其加工方法 | |
| CN111387489A (zh) | 一种乳酸菌燕窝制品及其制备方法 | |
| CN113749235A (zh) | 一种花胶鸡汤及加工方法 | |
| CN107712792A (zh) | 一种利用虾头和虾壳制备调味汁的方法 | |
| CN117898375A (zh) | 一种改善猪肉风味的饲料组合物及其制备方法 | |
| CN111772011A (zh) | 皮蛋苏打水及其制作方法 | |
| CN117122037A (zh) | 一种发酵型海产基料及其制备方法和应用 | |
| CN109452575B (zh) | 一种以金枪鱼鱼肉为原料的鱼糕加工方法 | |
| CN113373196A (zh) | 一种金线鱼抗疲劳肽的加工方法 | |
| CN113424946A (zh) | 一种使用蟹味菇制备的酱油及其制备方法 | |
| CN112868957A (zh) | 一种增强免疫力和抗疲劳的复合水解肽饮品 | |
| CN112715958A (zh) | 一种微囊化大米肽及其制备方法 | |
| CN115067488B (zh) | 小龙虾虾壳的高效酶解方法及虾壳调味料的制备方法 | |
| CN112063481A (zh) | 一种富含氨基酸的大鲵酒制备方法 | |
| CN111493308A (zh) | 一种禽类肝脏风味酱及其加工方法 | |
| CN115413764B (zh) | 一种高稳定性天然杂环胺抑制剂的制备方法和在预烤制鸡胸肉中的应用 | |
| KR102393428B1 (ko) | 키토산수를 이용한 육류의 가공방법 및 이에 따라 키토산수 처리된 육류 | |
| JP2004187594A (ja) | 食肉改質方法並びに食肉改質剤及び食肉下処理液 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20210420 |