CN112569215A - 度米芬在制备防治结直肠癌的药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于医药技术领域，具体涉及度米芬在制备防治结直肠癌的药物中的应用，本发明提供了度米芬的新应用，即应用于防治结直肠癌；本发明的研究显示，度米芬可有效抑制不同来源结直肠癌细胞的活力，还可以抑制结直肠癌细胞的增殖，诱导结直肠癌细胞的凋亡，对结直肠癌表现出显著的疗效，可应用于开发高效防治结直肠癌的药物。本发明不仅提供了度米芬的一种新应用，也为结直肠癌的治疗提供了一种新的治疗药物和治疗途径。

Description

度米芬在制备防治结直肠癌的药物中的应用

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及度米芬在制备防治结直肠癌的药物中的应用。

背景技术

结直肠癌是最常见和高致死率的恶性肿瘤之一，在世界范围内，其发病率高居第4位，致死率高居第5位。据《2019年中国肿瘤登记年报》数据显示，我国的结直肠癌发病率高居第3位。目前，手术加以放化疗的综合治疗仍是结直肠癌的主要治疗手段。就化疗而言，随着现代医学研究的不断发展，用于治疗结直肠癌的化疗药物得到不断开发，现用于临床治疗结直肠癌的化疗药物包括5-氟尿嘧啶、伊立替康、奥沙利铂和卡培他滨等；另外，化疗方案也得到不断的改进，例如奥沙利铂联合5-氟尿嘧啶及亚叶酸钙的FOLFOX方案被临床广泛用于治疗Ⅱ/Ⅲ期结直肠癌。化疗药物的应用，使得结直肠癌患者的生存率得到显著提高，例如，与单纯手术相比，5-氟尿嘧啶的辅助治疗可使Ⅲ期结肠癌患者的死亡风险下降15％左右，而与奥沙利铂联合治疗时，死亡风险可进一步下降5％左右。然而，由于化疗不应答、化疗耐受和毒副作用等问题的限制，上述化疗药物的治疗效果仍不能令人满意，对于转移性结直肠癌不可切除的患者在仅接受化疗的情况下，中位生存期仅为5～6个月。因此，研发治疗结直肠癌的新药刻不容缓。

度米芬，属季铵盐类化合物，其分子式C₂₂H₄₀NO.Br，分子量为414.46，是一种安全有效的广谱型灭菌剂，度米芬对真菌、革兰氏阳性细菌和革兰氏阴性细菌都有杀灭作用，具有用量少、效果好和毒副作用低等优点。当前，度米芬除了被医院广泛用于皮肤黏膜的消毒之外，也被应用于农业畜牧业的杀菌防病。然而，至今未见有关度米芬抗肿瘤的报道。

发明内容

为了克服上述现有技术的不足，本发明的首要目的是提供度米芬在制备防治结直肠癌的药物中的应用。

本发明的第二个目的是提供一种防治结直肠癌的药物。

为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：

本发明提供度米芬在制备防治结直肠癌的药物中的应用。

本发明经研究发现，度米芬可明显抑制不同来源结直肠癌细胞(人结直肠癌细胞HCT116、SW480、RKO、HCT-15)的活力；进一步研究表明，度米芬还可以抑制结直肠癌细胞的增殖，诱导结直肠癌细胞的凋亡；说明度米芬具有很好的抗结直肠癌效果，有望开发成全新高效治疗结直肠癌的药物。

优选地，所述结直肠癌包括但不限于人结直肠癌细胞HCT116、SW480、RKO、HCT-15。

优选地，所述药物为抑制结直肠癌细胞活力的药物。研究显示，度米芬均可有效抑制HCT116、SW480、RKO、HCT-15细胞株系的活力，说明度米芬可抑制结直肠癌细胞的活力。

优选地，所述药物为抑制结直肠癌细胞增殖的药物。研究显示，度米芬均能抑制HCT116细胞的增殖，说明度米芬可抑制结直肠癌细胞的增殖。

优选地，所述药物为诱导结直肠癌细胞凋亡的药物。研究显示，度米芬对结直肠癌细胞HCT116的凋亡具有诱导作用，说明度米芬可诱导结直肠癌细胞的凋亡。

本发明还提供一种防治结直肠癌的药物，该药物包括度米芬，即该药物以度米芬为主要活性成分。

优选地，该药物还包括药学上可接受的载体和/或赋形剂。即该药物可与药学上可接受的载体或赋形剂混合制备成组合物。

上述赋形剂是指可用于药学领域的稀释剂、黏合剂、润滑剂、崩解剂、助溶剂、稳定剂等以及一些药用基质。上述载体是药物领域中可得到的功能性药用辅料，包括表面活性剂、助悬剂、乳化剂以及一些新型药用高分子材料，如环糊精、壳聚糖、聚乳酸(PLA)、聚乙醇酸聚乳酸共聚物(PLGA)、透明质酸等。

优选地，该药物可制备成临床上可接受的剂型，所述剂型包括但不限于片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂、输液剂和注射剂。

上述剂型是指临床上常用的剂型。药物制剂可以经口服或胃肠外方式(例如静脉、皮下、腹膜内或局部)给药，如果某些药物在胃部条件下是不稳定的，可将其制备成肠衣片剂。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

本发明提供了度米芬的新应用，即应用于防治结直肠癌；本发明的研究显示，度米芬可有效抑制不同来源结直肠癌细胞的活力，还可以抑制结直肠癌细胞的增殖，诱导结直肠癌细胞的凋亡，对结直肠癌表现出显著的疗效，可应用于开发高效防治结直肠癌的药物。本发明不仅提供了度米芬的一种新应用，也为结直肠癌的治疗提供了一种新的治疗药物和治疗途径。

附图说明

图1为度米芬对不同结直肠癌细胞活力的抑制作用；

图2为度米芬对结直肠癌细胞增殖能力的抑制作用；

图3为度米芬对结直肠癌细胞凋亡的诱导作用。

具体实施方式

下面对本发明的具体实施方式作进一步说明。在此需要说明的是，对于这些实施方式的说明用于帮助理解本发明，但并不构成对本发明的限定。此外，下面所描述的本发明各个实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互组合。

下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为可通过常规的商业途径购买得到的。

实验例1度米芬对结直肠癌细胞活力的抑制作用

将对数生长期的结直肠癌细胞(人结直肠癌细胞HCT116、SW480、RKO、HCT-15)接于96孔板，每孔5000个细胞，200μLRPMI-1640培养基。分别设置药物处理组、对照组和空白组。其中药物处理组为含有不同度米芬浓度的组别(0μM、1μM、10μM、50μM、100μM)，对照组只含细胞不加药物，空白组不含细胞只含培养基。处理结束前4h，每孔加入20μLCCK8溶液并继续培养4h。用全波长多功能酶标仪在波长450nm处读取吸光度值，并通过吸光度值计算细胞活力。

细胞活力＝(药物处理组OD值-空白组OD值)/(对照组OD值-空白组OD值)×100％。细胞活力半抑制溶度(IC₅₀)用Graphpad软件计算。

结果如图1所示，10μM-100μM的度米芬均可有效抑制HCT116、SW480、RKO、HCT-15细胞株系的活力，说明度米芬可抑制结直肠癌细胞的活力。

实验例2度米芬对结直肠癌细胞增殖能力的抑制作用

将对数生长期的结直肠癌细胞(HCT116)接于六孔板中，每孔500个细胞，200μLRPMI-1640培养基，并设置对照组(只含细胞不加药物)。待细胞完全贴壁后用不同浓度的度米芬(0.625μM、1.25μM、2.5μM)处理细胞9天。每3天更换一次培养基。处理完成后的细胞弃去培养基，用PBS清洗2次，然后用冰浴甲醇固定5min，最后进行结晶紫染色。

结果如图2所示，浓度为0.625μM、1.25μM、2.5μM的度米芬均能抑制HCT116细胞的增殖，其中以2.5μM度米芬的抑制效果最好，说明度米芬可抑制结直肠癌细胞的增殖。

实验例3度米芬对结直肠癌细胞凋亡的诱导作用

将对数生长期的结直肠癌细胞(HCT116)接于六孔板中，每孔500个细胞，200μLRPMI-1640培养基，并设置对照组(只含细胞不加药物)。待细胞完全贴壁后用10μM的度米芬处理细胞48h，然后用不含EDTA的胰蛋白酶消化，2000rpm离心5min，PBS洗涤2次。再往细胞中加入工作液(500μLbinding buffer，5μLAnnexin V-FITC染料和5μLPI染料)，打散混匀后置于暗处反应15min。用BD FACSCanto II流式细胞仪检测细胞凋亡比例。Annexin V-FITC单阳性和AnnexinV-FITC/PI双阳性的细胞计为凋亡细胞。

结果如图3所示，度米芬对结直肠癌细胞HCT116的凋亡具有诱导作用，说明度米芬可诱导结直肠癌细胞的凋亡。

综合实施例1-3可见，度米芬可明显抑制不同来源的结直肠癌细细胞的活力；同时可抑制结直肠癌细胞的增殖，诱导结直肠癌细胞的凋亡；证明度米芬具有很好的抗结直肠癌效果，有望开发成全新高效治疗结直肠癌的药物。

以上对本发明的实施方式作了详细说明，但本发明不限于所描述的实施方式。对于本领域的技术人员而言，在不脱离本发明原理和精神的情况下，对这些实施方式进行多种变化、修改、替换和变型，仍落入本发明的保护范围内。

Claims (8)

1.度米芬在制备防治结直肠癌的药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述结直肠癌包括但不限于人结直肠癌细胞HCT116、SW480、RKO、HCT-15。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物为抑制结直肠癌细胞活力的药物。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物为抑制结直肠癌细胞增殖的药物。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物为诱导结直肠癌细胞凋亡的药物。

6.一种防治结直肠癌的药物，其特征在于，包括度米芬。

7.根据权利要求6所述的一种防治结直肠癌的药物，其特征在于，还包括药学上可接受的载体和/或赋形剂。

8.根据权利要求6所述的一种防治结直肠癌的药物，其特征在于，所述药物的剂型包括但不限于片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸剂、输液剂和注射剂。

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