CN112535682B - 一种沙尔威酮衍生物在药物制备中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种沙尔威酮衍生物或其盐在药物制备中的应用，所述的化合物用于治疗或者预防慢性肾病，优选于高血糖或高血压引起的肾病，但不仅局限于这两种诱导因素，具体的，该药物可以抑制或改善各种类型的肾脏损伤。

Description

一种沙尔威酮衍生物在药物制备中的应用

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种式(I)的化合物(代号15a) 在制备用于治疗或预防慢性肾脏病药物中的用途。

背景技术

慢性肾病是高血糖或高血压等基础性疾病最常见的并发症之一。在这 些风险因素的刺激下，肾小球基底膜变厚、肾小管间质扩展进行性纤维化。 随着疾病的进展，最终发展为终末性肾病，严重影响患者的生活质量，甚 至危及生命。

本发明人发现式(I)结构的化合物能够作为一种抗急性肺损伤药物， 不过并未对该化合物的其他用途进行报道。

发明内容

本发明的目的在于提供了C₂₇H₂₃NO₃(式(I)的化合物，代号15a) 的新的用途。

具体而言，本发明提供了式(I)的化合物(15a)或用于治疗或预防 慢性肾脏病的药物中的用途。

本发明人经过进一步的研究发现式(I)结构的化合物除了作为一种 抗急性肺损伤药物之外，还能够有效治疗高血糖、高血压等因素诱发的慢 性肾病，所诱发的相关病理变化可被显著改善，该用途是与抗急性肺损伤 不同的新用途。

优选本发明的用途是在制备用于治疗或预防慢性肾脏病的药物中的 用途。

本发明还提供了式(I)的化合物(15a)在制备用于改善慢性肾病的 药物中的用途。

优选本发明的用途是在制备用于改善慢性肾病的药物用途。

肾病的发生有多种病因，包括泌尿系统阻塞、高血脂、高血压、自身 免疫以及药物毒性反应等。不同的病因其治疗方式也有所不同，作为优选， 本发明所针对的主要是糖尿病肾病或高血压性肾病，但不仅限于这两种致 病因素；最优选，用于治疗肾脏损伤和肾脏组织功能改变。

优选在本发明的用途中，肾病的主要病理特征是是肾小球硬化、肾小 管扩张、组织间隙胶原纤维的堆积。

所述的肾脏组织功能改变包括蛋白尿、肾功能降低、肾小管纤维化、 基底膜增厚。

优选在本发明的用途中，式(I)的化合物(15a)对血糖或血压的影 响没有统计学意义。

本发明的用途中的药物含有有效剂量的式(I)的化合物(15a)。有效 剂量可以是单位给药剂量形式(如一片、一针、一丸或一剂)的药物中的 含量，也可以是所需治疗/预防的患者的单位剂量(如单位体重剂量)。在 本发明中，有效剂量(以含量计)可以是10μg—1g，优选是0.1mg—500 mg，更优选是1mg—100mg。

本发明的用途中的药物通常还含有药学上可接受的载体。使用的药学 上可接受的载体指无毒的填充剂、稳定剂、稀释剂、佐剂或其他制剂辅料。 例如，稀释剂、赋形剂，如水、生理盐水等；填充剂，如淀粉、蔗糖等； 粘合剂，如纤维素衍生物、藻酸盐、明胶和/或聚乙烯吡咯烷酮；湿润剂， 如甘油；崩解剂，如琼脂、碳酸钙和/或碳酸氢钠；吸收促进剂，如季铵化 合物；表面活性剂，如十六烷醇；吸附载体，如高岭土和/或皂粘土；润滑 剂，如滑石粉、硬脂酸钙/镁、聚乙二醇等。另外，本发明的药物组合物还 可以进一步含有其它辅料，如香味剂、甜味剂等。根据本领域的公知技术， 可以根据治疗目的、给药途径的需要将药物组合物制成各种剂型，优选该 组合物为单位给药剂量形式，如冻干剂、片剂、胶囊、粉剂、乳液剂、水 针剂或喷雾剂，更优选该药物组合物为注射剂型(如，冻干粉针剂)或口 服剂型(如，片剂、胶囊)。药物可以通过常规途径施用，特别是肠内， 例如口服，例如以片剂或胶囊剂形式，或非肠道施用，例如以可注射溶液 剂或混悬剂形式，局部施用，例如以洗剂或凝胶剂，或以鼻剂或检剂形式。

以下将通过具体的实施例和附图对本发明进行详细地描述。需要特别 指出的是，这些描述仅仅是部分示例性的描述，并不构成对本发明范围的 限制。依据本说明书的论述，本发明的许多变化、改变对所属领域技术人 员来说都是显而易见了。

附图说明：

图1为式(I)的化合物(15a)对糖尿病鼠血糖和体重的影响以及对 模型尿蛋白和肾功能的改善作用。

图2为式(I)的化合物(15a)对糖尿病小鼠肾脏纤维化的抑制效果。

图3为式(I)的化合物(15a)对高浓度葡萄糖引起的体外肾小管上 皮细胞纤维化的抑制效果。

图4为式(I)的化合物(15a)对AngII引起的高血压肾小球纤维化、 肿大的治疗作用。

具体实施方式：

本发明在以下的实施例中进一步说明。这些实施例只是为了说明本发 明的目的，而不是用来限制本发明的范围。

实施例1本发明的化合物不影响小鼠的血糖与体重。

C57L/B6小鼠随机分为3组(每组6只)，分别为：

对照组(Control组)：健康C57L/B6小鼠；

1型糖尿病模型鼠(STZ)：利用链脲佐菌素(STZ)构建1型糖尿病 老鼠模型；

化合物治疗组(STZ+15a 20mg/kg)：1型糖尿病模型鼠构建完成后， 在第9周开始用20mg/kg/day的剂量给鼠灌胃给药式(I)的化合物(15a)， 1％CMC-Na悬液，连续给药8周。

造模后的16周期间，每周记录各组鼠的血糖(Serum glucose)和体 重(Bodyweight)。结果如图1A-B所示，治疗组小鼠血糖水平与STZ组 没有差异。同时，应用化合物(15a)并不影响糖尿病小鼠模型的体重。

给药周期结束后处死小鼠，收取尿液和血液样本，采用生化分析，检 测尿蛋白、尿肌酐和血尿素氮水平。图1C-E显示，式(I)的化合物(15a) 显著性缓解高糖引起的尿蛋白与肾功能低下。

实施例2本发明的化合物可明显抑制高血糖引起的肾脏纤维化

动物分组按照实施例1进行，在给药8周后，处死小鼠并获取肾脏组织。以4%福尔马林液固定、石蜡包埋、切片5 μm厚度后进行苏木素&伊红（H&E）染色、天狼星红（Sirus Red）染色、马松染色（Masson）、糖原染色（PAS）并镜检。图2A显示，高血糖引起肾小球肥大、肾小球基底膜变厚、肾小管扩张；同时，引起肾小管间质纤维化和糖类沉积，但15a治疗后病理特征显著缓解，图2B-2D。

另外，利用蛋白质免疫印迹法检测胶原蛋白4(COL-4)、纤维化标志 物TGF-β。图2E显示，STZ组的COL-4和TGF-β显著增加，而15a可明 显抑制这些蛋白的表达(p<0.05)。

将组织破碎提取RNA后，利用实时定量PCR法分别检测结缔组织生 长因子CTGF；纤维化相关标志物COL-4、TGF-β；。结果如图2F所示， 15a显著性抑制高血糖引起的肾脏中CTGF、COL-4、TGF-β的表达。

实施例3本发明的化合物明显改善高血糖引起的体外肾小管上皮细 胞的纤维化。

利用高浓度的葡萄糖(HG，33mM)刺激NRK-52E细胞24小时， 随后裂解细胞，获得总蛋白并利用蛋白免疫印迹法检测纤维化相关蛋白 COL-4、TGF-β，以GAPDH作为内参。结果如图3A所示，HG诱导引起 的COL-4和TGF-β表达增加可被15a明显抑制。另外，利用HG刺激NRK-52E细胞10小时，利用TRIzol提取细胞总RNA，应用实时定量PCR 的方法检测COL-4、TGF-β、CTGF的RNA表达水平。结果见图3B-D， 15a在体外亦可显著抑制HG诱导引起的纤维化RNA水平增加。

实施例4本发明的化合物不影响小鼠血压但明显改善高血压引起的 肾小球纤维化、肿大

C57BL/6小鼠分为3组，每组6只，分别为：

空白对照组(Ctrl)：健康鼠；

肾性高血压模型组(AngII)：利用AngII皮下微泵注射(1000 ng/kg/min)，连续4周；

治疗组(Ang II+15a 20mg/kg)：利用Ang II皮下微泵注射(1000 ng/kg/min)2周；第15天以20mg/kg/day的剂量给鼠灌胃给药式(I)的化 合物，连续2周。

结果如图4A所示，治疗组小鼠的血压与AngII相比，没有显著差异， 表明式(I)不影响模型小鼠的血压，其药理作用不通过降压而实现。给 药后，处死小鼠，取肾脏组织，以4％福尔马林液固定、石蜡包埋、切片5μm厚度后进行苏木素&伊红(H&E)染色、天狼星红(Sirus Red)染色、 马松染色(Masson)并镜检。图4B显示，AngII引起肾小球肥大、肾小 管扩张；同时，引起肾小管间质纤维化，而15a治疗后病理特征得到明显 改善，图4C和4D。

Claims (5)

1.一种沙尔威酮衍生物在药物制备中的应用，其特征在于，所述的药物用于治疗或者预防肾脏病变；

所述的沙尔威酮衍生物为结构如式（I）所示化合物或其药学上可接受的盐：

（І）

所述的肾脏病变由高血糖或者高血压引起。

2.根据权利要求1所述的沙尔威酮衍生物在药物制备中的应用，其特征在于，所述的药物不影响血糖或者血压。

3.根据权利要求1所述的沙尔威酮衍生物在药物制备中的应用，其特征在于，所述的肾脏病变由高血糖引起，所述肾脏病变为：高血糖引起的尿蛋白、肾功能低下、肾小球肥大、肾小球基底膜变厚、肾小管扩张、肾小管间质纤维化和糖类沉积。

4.根据权利要求1所述的沙尔威酮衍生物在药物制备中的应用，其特征在于，所述的药物可抑制高血糖引起的肾脏中CTGF、COL-4、TGF-β的表达。

5.根据权利要求1所述的沙尔威酮衍生物在药物制备中的应用，其特征在于，所述的肾脏病变由高血压引起，所述肾脏病变为：肾小球肥大、肾小管扩张、肾小管间质纤维化。

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