CN112535239A - 一种用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂及其制备及应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂及其制备方法，它由板蓝根酶解多糖10~20份、苦豆子生物碱1~2份、丹参药渣发酵多糖5~15份、柚子皮多糖5~10份、忍冬藤多糖5~15份原料制成。本发明通过实验表明复方中草药饲料添加剂能增强动物食欲，促进动物生长，提高动物机体免疫力。并且发明具有取材环保、成本低廉、工艺创新、实用性好等特点，添加在养殖日常饲料中，能够提高动物自身免疫功能，平衡胃肠道微生态，形成极佳的保健效果，从而降低动物发病率，在养殖过程中减少用药甚至不用，提高饲料报酬，降低料肉比，提升动物生长速度，保证产品品质，增强竞争力，提高养殖户（场）经济效益。

Description

一种用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂及其 制备及应用

技术领域

本发明涉及中兽药技术领域，具体涉及一种促生长、增强免疫力的用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂及其制备方法。

背景技术

在禽畜业，抗生素作为饲料添加剂，在饲料中的长期、大量滥用，导致动物食品中抗生素残留过量，对食品安全和人类健康造成极大危害。自2020年7月1日起，饲料生产企业停止生产含有除中药外的促生长类药物饲料添加剂的商品饲料。中兽药在对抗病毒、提高免疫力、抗应激和促进生长发育等方面具有的优势，使中兽药作为预防、治疗疾病及促进动物生长的药物受到广泛的关注。

目前市场对中兽药的需求主要集中在以下几类：一是具有抗菌作用的中药，如黄芩、黄连、鱼腥草、穿心莲等；二是具有促进动物生长的中药，主要为消食健脾类，如山楂、麦芽、陈皮等，以及与之配方的补中益气类，如白术、甘草、黄精等；三是具有驱虫作用的中药，如使君子、贯众、槟榔等。目前，中兽药研发中的主要问题表现在以下方面：一是基于中医理论进行组方，对中药的药性，配伍考虑少；二是新剂型少，大部分是水提或直接使用原药粉碎，新制剂的较少，对中药有效成分的生物利用度研究少；三是在中兽药研发中，绝大多数为采用原药直接进行制备，制备工艺简单，制备成本较高，易造成中草药资源的浪费。因此市场上亟需成本低、效果好、精细化的饲料添加产品。

板蓝根是我国传统常用的大宗品种中药材，板蓝根多糖具有抗病毒、抗氧化、抗炎抑菌、抗肿瘤、免疫调节等作用。传统的板蓝根制剂工艺采用水提醇沉法，把占总质量四分之一之多的板蓝根多糖当成残渣抛弃，板蓝根醇沉后的多糖分子量较大，溶解性极差，通过生物酶对其进行酶解，获得分子量较小的多糖片段，增加其水溶性和生物利用度，可以作为一种优质的动物饲料添加剂。

苦豆子为豆科植物，具有营养价值高的特性，是一种潜在的牧草资源。有分析结果表明，苦豆子生物碱成分具有抗肿瘤、抑菌、抗病毒、镇痛、抗惊厥、抗心律失常、改善心肌缺血、降血脂等药理作用。可见，苦豆子及其苦豆渣可以提高动物免疫力，是一种优质的补充饲料。

现代药理学研究表明，丹参在抑菌、抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗肝硬化、抗纤维化、心机保护、神经保护和免疫调节等诸多方面均具有较强的药理作用由于丹参的大量使用，其药渣对生态环境造成的压力日益严峻，将经过有效成分二次回收的丹参药渣再次进行多菌种混合发酵，其丰富的纤维素、木质素等难利用成分可转化为可溶性发酵多糖，用于生产生物饲料。

柚子为人们日常生活中最常食用的水果之一，柚子皮为柚子的尚未完全成熟或者是完全成熟的最外层干燥果皮，柚子皮在整个柚子中占比为30%～40%，柚子皮多糖可以增强机体免疫力、抗炎症、抗病毒、抗氧化、对肿瘤有一定的预防作用，还可以调节机体血糖血脂等。将废弃的柚子皮重新加工利用，添加进动物饲料中，不仅具有良好的适口性，同时能够促进生长、提高动物免疫力。

忍冬藤的干燥花蕾金银花直接入药的同时还被作为工业提取有效成分的原料，因而需求量颇大，特别在某些流行病爆发的时期，常常出现供不应求的局面。相比之下忍冬藤的开发利用不如金银花广泛，忍冬藤多糖的药理作用与金银花相似，具有抗菌、抗病毒、抗炎、抗氧化、保肝利胆、抗肿瘤等作用，对免疫系统和心血管系统也都具有一定的影响，利用超声波辅助提取忍冬藤中的多糖，多糖产率可达9.05%，具有巨大的饲用价值。

本发明制备的饲料添加剂由多种成分组成的复合物，作用功能多样，不仅能够对传染病的病原有抑制或驱杀的作用，而且能够增强动物机体的非特异性免疫功能，从而减少某些传染性疾病的发病率，还可以改善调节动物肠道菌群，促进动物的食欲。且来源广泛，价格低廉。相比较于传统的抗生素类抗菌抗病毒药物，毒副作用小，无抗药性，长期使用不会增加细菌对药物的耐受性，能够防止因滥用抗生素产生的多抗性细菌通过食物链转移，给人类带来潜在的危害。

发明内容

本发明提供一种用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂。

本发明所提供的用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂，由以下重量份数的原料制备得到：

板蓝根酶解多糖10~20份；苦豆子生物碱1~2份；丹参药渣发酵多糖5~15份；柚子皮多糖5~10份；忍冬藤多糖5~15份。

作为本发明一种优选的技术方案，所述用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂(组方一)的各个中药具体为：板蓝根酶解多糖10份；苦豆子生物碱1份；丹参药渣发酵多糖10份；柚子皮多糖5份；忍冬藤多糖5份，测得总多糖含量为78.30%。

作为本发明一种优选的技术方案，所述用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂(组方二)的各个中药具体为：板蓝根酶解多糖15份；苦豆子生物碱2份；丹参药渣发酵多糖15份；柚子皮多糖10份；忍冬藤多糖10份，测得总多糖含量为81.73%。

作为本发明一种优选的技术方案，所述用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂(组方三)的各个中药具体为：板蓝根酶解多糖20份；苦豆子生物碱1份；丹参药渣发酵多糖15份；柚子皮多糖10份；忍冬藤多糖10份，测得总多糖含量为89.41%。

三个复方中草药饲料添加剂组方，以组方三得到的总多糖含量最高。

本发明所述用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂通过包括如下步骤的方法制备得到：

(1)取板蓝根粗多糖，用乙醇冷浸提取，收集沉淀，将所得沉淀中的乙醇挥干，冷冻干燥后所得即板蓝根精制多糖；取纯化后的多糖溶于水中，酶解，冷却离心，收集上清液，减压浓缩成稠膏状提取物，经真空干燥制得板蓝根酶解多糖；

(2)取苦豆子，除杂粉碎，超声提取，过滤，取滤液减压浓缩；用适量酸水溶解浸膏得酸水液，通过大孔吸附树脂吸附，收集流出液，减压浓缩，真空干燥，得苦豆子生物碱提取物；

(3)取丹参水提药渣，用乙醇回收脂溶性成分后，烘干，置于培养基中，使用药用真菌发酵，低温鼓风干燥，得丹参药渣发酵多糖；

(4)取柚子皮粗粉，复合酶酶解，恒温振摇，抽滤，收集滤液，蒸发浓缩，冷却；加入无水乙醇稀释，静置，抽滤，所得滤饼即为柚子皮多糖；

(5)取忍冬藤粉碎后过筛，加入蒸馏水，加热超声提取，抽滤，取滤液旋蒸浓缩，乙醇沉淀，过夜，滤液离心，取沉淀，用超纯水溶解，经过陶瓷膜分离，收集透过液，浓缩，真空干燥得忍冬藤多糖；

(6)将板蓝根酶解多糖、苦豆子生物碱、丹参药渣发酵多糖、柚子皮多糖及忍冬藤多糖与蔗糖、糊精混合研磨成均匀的细粉，即得饲料添加剂。

上述步骤（1）中，取板蓝根粗多糖，按药液比为1：5~6，加入体积浓度为60~80%的乙醇，4 ℃冷浸提取4~8 h，收集沉淀，将所得沉淀中的乙醇挥干，冷冻干燥后得板蓝根精制多糖；取板蓝根精制多糖溶于水中，加入纤维素酶、果胶酶或α-淀粉酶（枯草杆菌）进行酶解，酶活力为100~500 U/mL，40~60℃酶解3~7 h，沸水加热15~30 min，冷却离心，收集上清液，减压浓缩成稠膏状提取物，经真空干燥制得板蓝根酶解多糖；

上述步骤（2）中，取苦豆子，除杂粉碎，按药液比为1：4~6，加入体积浓度为50~70%的乙醇超声提取1.5~3 h，过滤，取滤液减压浓缩，得浸膏；用适量酸水溶解浸膏得酸水液，用50g/L的氢氧化钠溶液调节pH为10~13，4500~5000 r·min^-1离心，取上清液，加入等体积的0.5~1.0 mol/LNaCl溶液，得吸附液；大孔吸附树脂选择NKA-12树脂、X-5树脂、DF01树脂或DA101树脂，树脂充分溶胀后装入玻璃柱中，将吸附液自上而下通过孔吸附树脂柱，吸附温度为15~25 ℃，以体积浓度为70%的乙醇洗脱液为洗脱液，吸附流速为2~8 BV/h；收集流出液，减压浓缩，真空干燥，得苦豆子生物碱；

上述步骤（3）中，用体积浓度为70~100%乙醇回收脂溶性成分后，药液比为1：8~10，回流3~3.5 h，温度55~70 ℃；烘干，置于培养基中，使用药用真菌发酵，发酵菌种可为灵芝G1、灵芝G8和茯苓P01，接种量为10~20％，温度为20~35 ℃，培养基丹参与麸皮比例3：1~1.2；50~60 ℃鼓风干燥，得丹参药渣发酵多糖；

上述步骤（4）中，取柚子皮粗粉，加入质量比为1：0.5~1.5的纤维素酶与果胶酶，酶用量为1.0~5.0%，加入pH值为4.0~6.0的磷酸氢二钠柠檬酸缓冲液，料液比为1：25~35，提取温度为40~60 ℃，提取时间为60~80 min；恒温振摇，抽滤，收集滤液，蒸发浓缩，冷却；加入无水乙醇稀释，添加量为浓缩液的1.5~3.5倍，静置30~50 min，抽滤，所得滤饼即为柚子皮多糖；

上述步骤（5）中，取忍冬藤粉碎后过筛，粒度为50~65目，加入蒸馏水，液料比为30：1~1.2，加热超声提取，提取时间为30~50 min，超声功率为180~220 W，提取温度为60~70℃；抽滤，取滤液旋蒸浓缩，乙醇沉淀，过夜，滤液离心，取沉淀，用超纯水溶解，经过陶瓷膜分离，陶瓷膜可为UF-100、UF-50、UF-10或UF-5，进料流量为25~40 mL/min，超滤温度为40~50 ℃，操作压力为0.15~0.2 MPa；收集透过液，浓缩，真空干燥得忍冬藤多糖；

上述步骤（6）中板蓝根酶解多糖、苦豆子生物碱、丹参药渣发酵多糖、柚子皮多糖、忍冬藤多糖、蔗糖、糊精质量比为10~20：1~2：5~15：5~10：5~15：10：10。

上述用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂作为中兽药，在促进动物生长、增强免疫力、提高抗菌抗病毒能力中的应用也属于本发明的保护范围。

本发明经研究表明将板蓝根酶解多糖、苦豆子生物碱、丹参药渣发酵多糖、柚子皮多糖用于制备动物饲料添加剂，能够促进动物生长、增强免疫力。本发明提供一种效果稳定、安全方便的用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂，起到促生长、增强免疫力、提高抗菌抗病毒能力的作用，创造更多的经济价值和社会价值。

本发明的用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂是以板蓝根酶解多糖、苦豆子生物碱、丹参药渣发酵多糖、柚子皮多糖、忍冬藤多糖等中药药渣提取物为原料制备而成。本发明具有成本低廉、促进生长、提高饲料利用率、提高机体免疫力和增强抗氧化应激能力等优势。

本发明采用中医药与畜禽产业结合的方法，在传统中医药理论指导下结合用药经验，将板蓝根酶解多糖、苦豆子生物碱、丹参药渣发酵多糖、柚子皮多糖、忍冬藤多糖组成复方，应用于畜禽饲料产业，生产功能性饲料添加剂，可提高动物的免疫能力，起到促进生长，增强免疫力和提高饲料利用率的效果，且无毒副作用。这一中药复方饲料的开发，拓展了中药复方的使用领域，为市场上提供了一种安全可靠的中药复方饲料添加剂产品。

本发明基于中医理论进行组方，板蓝根在饲料用药中作为君药可增强免疫力，配伍其他药物，从促进生长、改善免疫力等多个作用方面进行组方，着力开发用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂，保留了中药有效成分的自然性和生物活性，易被吸收和利用，以提高和促进机体非特异性免疫功能为主，增强动物机体免疫力和抗病力，增强抗氧化能力等正向调节。通过对有效成分的富集，制备成颗粒，利于贮藏，利于与饲料的复配混合。通过选用有效的提取工艺，以提高有效成分的利用率，达到增效的目标。

具体实施方式

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法；下述实施例中所用的试剂、材料等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

实施例1

1、复方中草药饲料添加剂组方：板蓝根酶解多糖20份、苦豆子生物碱1份、丹参药渣发酵多糖15份、柚子皮多糖10份、忍冬藤多糖10份。

2、制备工艺：

(1)取板蓝根粗多糖，按药液比为1：5，加入体积浓度为60%的乙醇，4℃冷浸提取6h，收集沉淀，将所得沉淀中的乙醇挥干，冷冻干燥后得板蓝根精制多糖；取板蓝根精制多糖溶于水中，加入纤维素酶进行酶解，酶活力为200 U/mL，40 ℃酶解4 h，沸水加热15 min，冷却离心，收集上清液，减压浓缩成稠膏状提取物，经真空干燥制得板蓝根酶解多糖；

(2)取苦豆子，除杂粉碎，按药液比为1：5，加入体积浓度为70%的乙醇超声提取1.5h，过滤，取滤液减压浓缩，得浸膏；用适量酸水溶解浸膏得酸水液，用50g/L的氢氧化钠溶液调节pH为10，5000 r·min^-1离心，取上清液，加入等体积的1.0mol/L的NaCl溶液，得吸附液；准备大孔吸附树脂选择DF01树脂，树脂充分溶胀后装入玻璃柱中，自上而下通过吸附液，吸附温度为25 ℃，以体积浓度为70%的乙醇为洗脱液进行洗脱，洗脱吸附流速为4 BV/h；收集流出液，减压浓缩，真空干燥，得苦豆子生物碱；

(3)取丹参水提药渣，按药液比为1：8，用体积浓度为70%乙醇，温度55℃下回流3 h回收脂溶性成分，然后烘干，置于培养基中，使用药用真菌发酵，发酵菌种为灵芝G1，接种量为10％，温度为20℃，培养基丹参与麸皮比例3：1；60℃鼓风干燥，得丹参药渣发酵多糖；

(4)取柚子皮粗粉，加入质量比为1：1.5的纤维素酶与果胶酶，酶用量为3.0%，加入pH值为4.0的磷酸氢二钠柠檬酸缓冲液，料液比为1：30，提取温度为40℃，提取时间为60min；恒温振摇，抽滤，收集滤液，蒸发浓缩，冷却；加入无水乙醇稀释，添加量为浓缩液的1.5倍，静置30 min，抽滤，所得滤饼即为柚子皮多糖；

(5)取忍冬藤粉碎后过筛，粒度为65目，加入蒸馏水，液料比为30：1，加热超声提取，提取时间为30 min，超声功率为180 W，提取温度为60 ℃；抽滤，取滤液旋蒸浓缩，乙醇沉淀，过夜，滤液离心，取沉淀，用超纯水溶解，经过陶瓷膜分离，陶瓷膜为UF-50，进料流量为25 mL/min，超滤温度为50 ℃，操作压力为0.2 MPa；收集透过液，浓缩，真空干燥得忍冬藤多糖；

(6)将板蓝根酶解多糖20份、苦豆子生物碱1份、丹参药渣发酵多糖15份、柚子皮多糖10份、忍冬藤多糖10份与蔗糖10份、糊精10份，混合研磨成均匀的细粉，即得饲料添加剂。

实施例2

1、复方中草药饲料添加剂组方：

板蓝根酶解多糖10份；苦豆子生物碱1份；丹参药渣发酵多糖10份；柚子皮多糖5份；忍冬藤多糖5份。

2、制备工艺：

步骤（1）~步骤（5）同实施例1；

步骤（6）：将板蓝根酶解多糖10份、苦豆子生物碱1份、丹参药渣发酵多糖10份、柚子皮多糖5份、忍冬藤多糖5份与蔗糖10份、糊精10份，混合研磨成均匀的细粉，即得饲料添加剂。

实施例3

1、复方中草药饲料添加剂组方：

板蓝根酶解多糖15份；苦豆子生物碱2份；丹参药渣发酵多糖15份；柚子皮多糖10份；忍冬藤多糖10份。

2、制备工艺：

步骤（1）~步骤（5）同实施例1；

步骤（6）：将板蓝根酶解多糖15份；苦豆子生物碱2份；丹参药渣发酵多糖15份；柚子皮多糖10份；忍冬藤多糖10份与蔗糖10份、糊精10份，混合研磨成均匀的细粉，即得饲料添加剂。

实施例4 安全性评价急性毒性试验

1、实验动物与试剂：健康SPF级BALB/c小鼠，雌雄各半，体质量(18.0±2.0) g，购自上海杰思捷实验动物有限公司，质量合格证号：SCXK（沪）2018-0004。常规分笼饲养，自由饮水进食，室内温度控制在21~24 ℃，湿度30～50％，空气流通。受试药物：实施例1制备得到的饲料添加剂。

2、实施过程：雌雄按体重分组，前一天晚上禁食12 h不禁水，以最大给药浓度(2.98 g/mL)，(指1 mL中相当于含原药材2.98 g，即298 g药材提取浓缩到100 mL，1mL相当于2.98 g原药材)、给药体积(0.3 mL/10 g)灌胃一天3次，灌胃结束后1 h恢复食物，观察小鼠情况，如表1所示。

结果表明：一天3次灌胃后无动物死亡，对外界反应、外观、行为及呼吸等均未见异常，未观察到明显中毒症状。给药后第一天至第14天均未观察到明显的异常症状(皮毛、呼吸、眼睛、黏膜、行为)。14天后剖检，结果显示：心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺、性器官等均未见明显病变。

表1小鼠体重变化情况（）

组别

第1天

第2天

第5天

第8天

第11天

第14天

雌性组

22.28±2.27

22.54±2.34

23.51±2.21

24.31±1.93

25.84±2.20

25.81±2.56

雄性组

22.61±2.01

22.97±2.11

23.87±2.00

25.70±1.97

27.4±1.20

27.66±1.42

实施例5质量标准研究

受试药物：实施例1制备得到的饲料添加剂。

试剂：麦芽糊精(山东西王糖业有限公司，GB/I20884)、乙醇(分析纯，天津永大化学试剂有限公司)、苯酚、浓硫酸(分析纯，广州化学试剂厂)、香草醛(分析纯，南京正三角化学试剂有限公司)。

仪器：药典筛、干燥器、称量瓶、UV-6100S 紫外可见分光光度计(上海元析仪器有限责任公司)、AX523ZH万分之一分析天平(奥豪斯仪器有限公司)、EX225DZH分析天平(奥豪斯仪器有限公司)、BSG-12定时恒温水浴锅(金坛市杰瑞尔电器有限公司)、DHG-9145A立式电热恒温鼓风干燥箱(上海环竞试验设备厂)、JIDI-20D台式多用途高速离心机(广州吉迪仪器有限公司)、JIDI-5D台式大容量低速离心机(广州吉迪仪器有限公司)。

性状分析结果：本品是一种黄褐色，无特殊气味，且颗粒干燥、均匀，无吸潮、结块、潮解等现象的可溶性颗粒剂。

粒度检查结果：称取用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂6.22g，过筛后，不能通过1号筛的0 g，通过5号筛的1.07 g，结果表明，不能通过一号筛与能通过五号筛的总百分数为17.20％。

溶化性检查结果：取用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂10 g，加热水200 mL，搅拌5分钟，立即观察，可溶颗粒应全部溶化或轻微浑浊。称取用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂14.9 g，加热水，搅拌，出现轻微浑浊的现象，溶化性符合规定。

水分测定结果：平行测定三次，含水量分别为3.24％、2.73％、3.46％，均小于8％，符合规定。

实施例6 对肉鸡的功效实验

1、对肉鸡生长的影响

采用实施例1~实施例3得到的用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂进行有关实验比较。

选用1日龄健康的100羽罗斯308肉鸡，公母混合，适应性饲喂7d后，按重复体重无差异原则随机分为4个处理，每组5个重复，每个重复5羽。实验动物肉仔鸡采用三层笼养，红外灯保温，各组分别隔离饲养，自由采食和饮水，于第20天进行新支二联多价疫苗接种。试验1～21 d均采用肉小鸡颗粒料(徐州益盛禽业有限公司，商品名：肉小鸡颗粒料)。试验22～42 d，对照组饲喂肉中鸡配合料(徐州益盛禽业有限公司，商品名：肉中鸡配合料)，试验组分别于肉中鸡配合料(徐州益盛禽业有限公司，商品名：肉中鸡配合料)中添加实施例1~3的饲料添加剂0.95%、1.90%、3.80%用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂，混合均匀后饲养，试验周期21 d。

用SPSS22.0统计软件对各项数据进行方差分析，结果表示为平均值±标准误(或标准差)。

肉鸡饲喂至42d，以重复为单位称重称取全部试验鸡的体重，计算饲料消耗量(kg)、平均采食量(g)、增重(kg)、平均日增重(g)、耗料增重比(g/g)。每个组分别测量3个差异个体的3~5个数据，各指标取平均数做方差分析作为测定数据。

平均采食量(g)＝饲料消耗量/天数

增重(kg)＝末重-始重

平均日增重(g)＝增重/天数

耗料增重比(g/g)＝饲料量/增重

表2用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂对肉鸡生产性能的影响

组别	饲料消耗量/kg	平均采食量/g	增重/kg	平均日增重/g	料重比
						对照组	4.70±0.01	111.86±0.31	2.72±0.07<sup>B</sup>	64.82±1.55<sup>B</sup>	1.73±0.04<sup>A</sup>
实施例1 0.95%组	4.70±0.02	111.95±0.39	2.81±0.06<sup>B</sup>	66.81±1.33<sup>B</sup>	1.68±0.03<sup>A</sup>
						实施例1 1.90%组	4.72±0.01	112.43±0.18	2.88±0.14<sup>A</sup>	68.62±3.32<sup>A</sup>	1.64±0.08<sup>B</sup>
实施例1 3.80%组	4.73±0.04	112.57±1.00	2.93±0.14<sup>A</sup>	69.85±3.24<sup>A</sup>	1.61±0.06<sup>B</sup>
						实施例2 0.95%组	4.65±0.07	110.81±1.64	2.76±0.06<sup>B</sup>	65.72±1.37<sup>B</sup>	1.69±0.04<sup>A</sup>
实施例2 1.90%组	4.71±0.01	112.14±0.34	2.80±0.11<sup>A</sup>	66.70±2.61<sup>A</sup>	1.68±0.06<sup>B</sup>
						实施例2 3.80%组	4.72±0.05	112.33±1.21	2.90±0.11<sup>A</sup>	68.95±2.54<sup>A</sup>	1.63±0.06<sup>B</sup>
实施例3 0.95%组	4.64±0.06	110.38±1.54	2.76±0.06<sup>B</sup>	65.74±1.40<sup>B</sup>	1.68±0.05<sup>A</sup>
						实施例3 1.90%组	4.69±0.03	111.67±0.75	2.81±0.10<sup>A</sup>	66.88±2.48<sup>A</sup>	1.67±0.06<sup>B</sup>
实施例3 3.80%组	4.72±0.04	112.38±1.06	2.91±0.13<sup>A</sup>	69.40±3.11<sup>A</sup>	1.62±0.07<sup>B</sup>

注：同列数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，不同大写字母表示差异显著(P<0.01)，无字母或含相同字母表示差异不显著(P>0.05)。

肉鸡饲喂试验全程无发病和死亡情况。由表2可见，与对照组相比，各试验组饲料消耗量和平均采食量均高于对照组，但无显著性差异(P＞0.05)；各试验组的增重和平均日增重均有提高，且1.90%组、4.19％组用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂组与对照组相比增重了5.88％、7.72％(P＜0.01)，耗料增重比降低了5.20％、6.93％(P＜0.01)；表明饲喂用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂对肉鸡的生长性能有一定的促进作用。

表3用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂对肉鸡十二指肠结构的影响

注：同列数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，不同大写字母表示差异显著(P<0.01)，无字母或含相同字母表示差异不显著(P>0.05)。

由表3可见，与对照组相比，各试验组鸡的十二指肠的肠壁厚度均显著增加(P<0.05)；绒毛高度均极显著增加(P<0.01)；隐窝深度均降低，0.95%组隐窝深度极显著降低(P<0.01)。

2、对肉鸡免疫功能的影响

试剂与仪器：超氧化物岐化酶(SOD)试剂盒、丙二醛(MDA)试剂盒(批号20191016)购北京杰辉博高生物技术有限公司。试验仪器：Multiskan Sky 全波长酶标仪(赛默飞世尔科技（中国）有限公司，51119570)、全自动组织脱水机、全自动轮转式切片机、研究级荧光显微图像系统(德国莱卡)。

实施过程：于试验第42 d每组随机选取10只肉鸡，翅下静脉采血，取脾脏、双侧胸腺和法氏囊，剥离脂肪和结缔组织，称重并计算免疫器官指数(g/kg)。翅静脉采血，静置30min，2000 r/min离心15 min，制备血清。

脏器指数(g/kg)＝脏器重/活体重。

表4用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂对肉鸡免疫器官指数的影响

注：同列数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，不同大写字母表示差异显著(P<0.01)，无字母或含相同字母表示差异不显著(P>0.05)。

各组肉鸡饲喂至42 d，分别取脾脏、双侧胸腺、法氏囊称重并计算免疫器官指数(g/kg)，结果见表4，与对照组相比，各试验组的脾脏指数和胸腺指数均有提高，但无显著差异(P＞0.05)。各试验组法氏囊指数均有提高，其中0.95%、3.80%组显著高于对照组(P＜0.05)，分别提高了52.68％、48.21％。

用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂对肉鸡法氏囊组织结构的影响如表5表示，各试验组法氏囊淋巴滤泡的面积均大于对照组，且为极显著增加(P＜0.01)。

表5用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂对肉鸡法氏囊组织结构的影响

注：同列数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，不同大写字母表示差异显著(P<0.01)，无字母或含相同字母表示差异不显著(P>0.05)。

如表6所示，与对照组相比，各试验组鸡的脾小结面积均极显著增加(P<0.01)；动脉周围淋巴鞘均显著增加(P<0.05)，其中1.90%组和3.80%呈极显著增加(P<0.01)，0.95%组呈显著增加(P<0.05)。

表6用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂对肉鸡脾脏组织结构的影响

注：同列数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，不同大写字母表示差异显著(P<0.01)，无字母或含相同字母表示差异不显著(P>0.05)。

3、对肉鸡抗氧化能力的影响

分析肉鸡血清的抗氧化指标，SOD测定采用WST-1法，于450 nm处测定吸光度进而计算SOD活力。MDA测定采用TBA法，于532 nm下测定吸光度。

表7用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂对肉鸡血清SOD和MDA的影响

注：同列数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，不同大写字母表示差异显著(P<0.01)，无字母或含相同字母表示差异不显著(P>0.05)。

由表7可见，与对照组相比，各试验组SOD含量均高于对照组，且3.80%组剂量组SOD含量有显著提高(P＜0.05)；MDA虽无显著差异，但含量均低于对照组。

上述实施例表明，本发明的中药药渣复方提取物颗粒剂能够有效地提高饲料利用率，促进肉鸡生长，促进免疫器官发育、增强免疫功能，具有提高氧化的能力。并且与实施例2和实施例3相比，实施例1效果最佳，取得了很好的技术效果。

在日粮中添加适量用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂可以促进脾脏、胸腺和法氏囊等免疫器官的发育；促进淋巴细胞增殖；促进肠道微生物环境平衡作用；促进小肠吸收营养的能力的增强；增强机体抵抗细菌和病毒的能力，这为中草药作为免疫增强剂添加于饲料中提供了实验依据。

实施例7对猪生长的影响

受试对象：实施例1制备得到的用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂。以下通过饲喂试验对本实施例的饲料添加剂的效果进行检测。

采用单因子设计，选择健康状况、体重接近的外三元生长育肥猪100头(公母各半)，随机分为4个处理组(每个处理组分为5个重复组，每个重复组5头猪)，分别为对照组和3个试验组(0.95%组、1.90%组、3.80%组)。4个处理组均采用基础日粮(参照美国NRC(2012)猪营养需要)进行喂养。其中，3个试验组采用的基础日粮中添加有3种不同的含量实施例1制备得到的饲料添加剂(饲料添加剂的添加比例均为基础日粮的0.95%、1.90%、3.80%)。按照上述要求进行饲喂试验，预饲期7d，试验期60d。试验期间饲养管理程序和免疫程序参照常规的商品猪饲养管理手册进行，记录试验期内耗料量并称重，饲喂60天，试验结束后，测定猪的生产性能各项指标。用SPSS22.0统计软件对各项数据进行方差分析，结果表示为平均值±标准误(或标准差)，猪的生产性能各项指标见表8。

表8 猪的生产性能指标

组别	始重(kg)	末重(kg)	增重(kg)	平均日增重(kg)	料重比(kg/kg)
						对照组	82.18±2.56	134.46±3.43	52.28±5.67<sup>B</sup>	0.87±0.09<sup>B</sup>	3.58±0.39<sup>A</sup>
0.95%组	81.25±1.27	139.73±2.62	58.48±2.58<sup>B</sup>	0.97±0.04<sup>B</sup>	3.18±0.13<sup>A</sup>
						1.90%组	80.87±1.45	140.58±1.74	59.71±2.25<sup>A</sup>	1.00±0.04<sup>A</sup>	3.11±0.14<sup>B</sup>
3.80%组	80.46±1.14	143.20±3.14	62.74±3.64<sup>A</sup>	1.05±0.06<sup>A</sup>	2.91±0.20<sup>B</sup>

注：同列数据肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，不同大写字母表示差异显著(P<0.01)，无字母或含相同字母表示差异不显著(P>0.05)。

由表8可知，与对照组相比，各试验组饲料消耗量和平均采食量均高于对照组，但无显著性差异(P＞0.05)；各试验组的增重和平均日增重均有提高，且1.90%组、3.80％组用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂组与对照组相比增重了14.21％、20.01％(P＜0.01)，耗料增重比降低了13.13％、18.72％(P＜0.01)；不同的比例饲料添加剂对猪生产性能影响不同，其中3.80%组平均增重最高，生长速度最快，料重比最低，饲料转化效率最高，表明用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂对生猪具有促进猪生长、提高饲料利用率方面的效果。

上述说明示出并描述了本申请的若干优选实施例，但如前所述，应当理解本申请并非局限于本文所披露的形式了，不应看作是对其他实施例的排除，而可用于各种其他组合、修改和环境，并能够在本文所述申请构想范围内，通过上述教导或相关领域的技术或知识进行改动。而本领域人员所进行的改动和变化不脱离本申请的精神和范围，则都应在本申请所附权利要求的保护范围内。

Claims (8)

1.一种用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂，其特征在于，它由下述重量份数的原料制成：

板蓝根酶解多糖10~20份、苦豆子生物碱1~2份、丹参药渣发酵多糖5~15份、柚子皮多糖5~10份、忍冬藤多糖5~15份。

2.根据权利要求1所述的一种用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂，其特征在于，它由下述重量份数的原料制成：

板蓝根酶解多糖10份、苦豆子生物碱1份、丹参药渣发酵多糖10份、柚子皮多糖5份、忍冬藤多糖5份；

或者：

板蓝根酶解多糖15份、苦豆子生物碱2份、丹参药渣发酵多糖15份、柚子皮多糖10份、忍冬藤多糖10份；

或者：

板蓝根酶解多糖20份、苦豆子生物碱1份、丹参药渣发酵多糖15份、柚子皮多糖10份、忍冬藤多糖10份。

3.权利要求1或2所述的复方中草药饲料添加剂的应用方法，其特征在于，将复方中草药饲料添加剂用蒸馏水稀释到30%，按质量比1：80~100添加至动物日常饮水中；

或将复方中草药饲料添加剂用稀释剂稀释至30%，按质量比1：25~50添加至动物配合饲料中。

4.权利要求1或2所述的复方中草药饲料添加剂的应用方法，其特征在于，所述的稀释剂为大豆粉、玉米粉、蔗糖、小麦粉中的任意一种或多种组合物。

5.权利要求1或2所述的复方中草药饲料添加剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）取板蓝根粗多糖，用乙醇冷浸提取，收集沉淀，将所得沉淀中的乙醇挥干，冷冻干燥后得板蓝根精制多糖；取板蓝根精制多糖溶于水中，酶解，冷却离心，收集上清液，减压浓缩成稠膏状提取物，经真空干燥制得板蓝根酶解多糖；

（2）取苦豆子，除杂粉碎，超声提取，过滤，取滤液减压浓缩，得浸膏；用适量酸水溶解浸膏得酸水液，通过大孔吸附树脂吸附，收集流出液，减压浓缩，真空干燥，得苦豆子生物碱；

（3）取丹参水提药渣，用乙醇回收脂溶性成分后，烘干，置于培养基中，使用药用真菌发酵，低温鼓风干燥，得丹参药渣发酵多糖；

（4）取柚子皮粗粉，采用复合酶酶解，恒温振摇，抽滤，收集滤液，蒸发浓缩，冷却；加入无水乙醇稀释，静置，抽滤，所得滤饼即为柚子皮多糖；

（5）取忍冬藤粉碎后过筛，加入蒸馏水，加热超声提取，抽滤，取滤液旋蒸浓缩，乙醇沉淀，过夜，滤液离心，取沉淀，用超纯水溶解，经过陶瓷膜分离，收集透过液，浓缩，真空干燥得忍冬藤多糖；

（6）将板蓝根酶解多糖、苦豆子生物碱、丹参药渣发酵多糖、柚子皮多糖及忍冬藤多糖与蔗糖、糊精混合研磨成均匀的细粉，即得饲料添加剂。

6.根据权利要求5所述的复方中草药饲料添加剂的制备方法，其特征在于，

上述步骤（1）中，取板蓝根粗多糖，按药液比为1：5~6，加入体积浓度为60~80%的乙醇，4℃冷浸提取4~8 h，收集沉淀，将所得沉淀中的乙醇挥干，冷冻干燥后得板蓝根精制多糖；取板蓝根精制多糖溶于水中，加入纤维素酶、果胶酶或α-淀粉酶（枯草杆菌）进行酶解，酶活力为100~500 U/mL，40~60℃酶解3~7 h，沸水加热15~30 min，冷却离心，收集上清液，减压浓缩成稠膏状提取物，经真空干燥制得板蓝根酶解多糖；

上述步骤（2）中，取苦豆子，除杂粉碎，按药液比为1：4~6，加入体积浓度为50~70%的乙醇超声提取1.5~3 h，过滤，取滤液减压浓缩，得浸膏；用适量酸水溶解浸膏得酸水液，用50g/L的氢氧化钠溶液调节pH为10~13，4500~5000 r·min-1离心，取上清液，加入等体积的0.5~1.0 mol/LNaCl溶液，得吸附液；大孔吸附树脂选择NKA-12树脂、X-5树脂、DF01树脂或DA101树脂，大孔吸附树脂充分溶胀后装入玻璃柱中，吸附液自上而下通过，吸附温度为15~25 ℃，然后用体积浓度为70%的乙醇洗脱，流速为2~8 BV/h，收集流出液，减压浓缩，真空干燥，得苦豆子生物碱；

上述步骤（3）中，用体积浓度为70~100%乙醇回收脂溶性成分后，药液比为1：8~10，回流3~3.5 h，温度55~70 ℃；烘干，置于培养基中，使用药用真菌发酵，发酵菌种为灵芝G1、灵芝G8和/或茯苓P01，接种量为10~20％，温度为20~35 ℃，培养基丹参与麸皮比例3：1~1.2；50~60℃鼓风干燥，得丹参药渣发酵多糖；

上述步骤（4）中，取柚子皮粗粉，加入质量比为1：0.5~1.5的纤维素酶与果胶酶，酶用量为1.0~5.0%，加入pH值为4.0~6.0的磷酸氢二钠柠檬酸缓冲液，料液比为1：25~35，提取温度为40~60 ℃，提取时间为60~80 min；恒温振摇，抽滤，收集滤液，蒸发浓缩，冷却；加入无水乙醇稀释，添加量为浓缩液的1.5~3.5倍，静置30~50 min，抽滤，所得滤饼即为柚子皮多糖；

上述步骤（5）中，取忍冬藤粉碎后过筛，粒度为50~65目，加入蒸馏水，液料比为30：1~1.2，加热超声提取，提取时间为30~50 min，超声功率为180~220 W，提取温度为60~70℃；抽滤，取滤液旋蒸浓缩，加乙醇沉淀，过夜，滤液离心，取沉淀，用超纯水溶解，经过陶瓷膜分离，陶瓷膜可为UF-100、UF-50、UF-10或UF-5，进料流量为25~40 mL/min，超滤温度为40~50℃，操作压力为0.15~0.2 MPa；收集透过液，浓缩，真空干燥得忍冬藤多糖；

上述步骤（6）中板蓝根酶解多糖、苦豆子生物碱、丹参药渣发酵多糖、柚子皮多糖、忍冬藤多糖、蔗糖、糊精质量比为10~20：1~2：5~15：5~10：5~15：10：10。

7.权利要求1或2所述的用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂在制备促进动物生长、增强免疫力、提高抗菌抗病毒能力的动物饲料添加剂中的应用。

8.一种促进生长、增强免疫力的动物饲料，其特征在于，它包括权利要求1或2所述的用于禽畜日常保健促生长的复方中草药饲料添加剂。