CN112353942A - Irx4及其诱导剂在筛选/制备保护心脏的药物中的应用 - Google Patents
Irx4及其诱导剂在筛选/制备保护心脏的药物中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN112353942A CN112353942A CN202011346074.2A CN202011346074A CN112353942A CN 112353942 A CN112353942 A CN 112353942A CN 202011346074 A CN202011346074 A CN 202011346074A CN 112353942 A CN112353942 A CN 112353942A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- irx4
- screening
- protecting
- application
- heart
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 101000977765 Homo sapiens Iroquois-class homeodomain protein IRX-4 Proteins 0.000 title claims abstract description 72
- 102100023531 Iroquois-class homeodomain protein IRX-4 Human genes 0.000 title claims abstract description 70
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 37
- 238000012216 screening Methods 0.000 title claims abstract description 20
- 239000000411 inducer Substances 0.000 title claims abstract description 16
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title claims abstract description 15
- 206010007572 Cardiac hypertrophy Diseases 0.000 claims abstract description 44
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 19
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 17
- 230000004217 heart function Effects 0.000 claims abstract description 17
- 208000006029 Cardiomegaly Diseases 0.000 claims abstract description 13
- 206010028594 Myocardial fibrosis Diseases 0.000 claims abstract description 11
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 34
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims description 26
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 22
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 21
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 12
- 206010020871 hypertrophic cardiomyopathy Diseases 0.000 claims description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 8
- 239000003596 drug target Substances 0.000 claims description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 7
- 206010007558 Cardiac failure chronic Diseases 0.000 claims description 6
- 239000000556 agonist Substances 0.000 claims description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 6
- 208000031225 myocardial ischemia Diseases 0.000 claims description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 5
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 claims description 5
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 5
- 206010048858 Ischaemic cardiomyopathy Diseases 0.000 claims description 4
- 239000002502 liposome Substances 0.000 claims description 4
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 4
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000004952 protein activity Effects 0.000 claims description 4
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 claims description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 2
- 208000031229 Cardiomyopathies Diseases 0.000 claims description 2
- 108091061960 Naked DNA Proteins 0.000 claims description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 2
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000010931 gold Substances 0.000 claims description 2
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 claims description 2
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 claims description 2
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 claims description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 claims description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 2
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 claims description 2
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 claims description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 2
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 claims description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims 2
- 230000002950 deficient Effects 0.000 claims 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims 1
- 238000002493 microarray Methods 0.000 claims 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 abstract description 27
- 101150016847 IRX4 gene Proteins 0.000 abstract description 9
- 230000006870 function Effects 0.000 abstract description 9
- 210000002376 aorta thoracic Anatomy 0.000 abstract description 6
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 abstract description 6
- 238000003208 gene overexpression Methods 0.000 abstract description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 abstract description 4
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 abstract description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000002861 ventricular Effects 0.000 description 24
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 12
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 11
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 10
- 108010051583 Ventricular Myosins Proteins 0.000 description 9
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 8
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 8
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 7
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 102000012422 Collagen Type I Human genes 0.000 description 6
- 108010022452 Collagen Type I Proteins 0.000 description 6
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 6
- 101800000407 Brain natriuretic peptide 32 Proteins 0.000 description 5
- 102400000667 Brain natriuretic peptide 32 Human genes 0.000 description 5
- 101800002247 Brain natriuretic peptide 45 Proteins 0.000 description 5
- 210000004413 cardiac myocyte Anatomy 0.000 description 5
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 5
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- 101800001288 Atrial natriuretic factor Proteins 0.000 description 4
- 102400001282 Atrial natriuretic peptide Human genes 0.000 description 4
- 101800001890 Atrial natriuretic peptide Proteins 0.000 description 4
- 108010039419 Connective Tissue Growth Factor Proteins 0.000 description 4
- 102000015225 Connective Tissue Growth Factor Human genes 0.000 description 4
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000006180 TBST buffer Substances 0.000 description 4
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 4
- 102000006602 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 4
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 4
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 4
- 238000007789 sealing Methods 0.000 description 4
- 102100031168 CCN family member 2 Human genes 0.000 description 3
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 3
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 3
- 101000777550 Homo sapiens CCN family member 2 Proteins 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 3
- 230000009787 cardiac fibrosis Effects 0.000 description 3
- 210000001168 carotid artery common Anatomy 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 3
- 210000005003 heart tissue Anatomy 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 3
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010011985 Decubitus ulcer Diseases 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010048671 Homeodomain Proteins Proteins 0.000 description 2
- 102000009331 Homeodomain Proteins Human genes 0.000 description 2
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000005604 Myosin Heavy Chains Human genes 0.000 description 2
- 102100032975 Myosin-1 Human genes 0.000 description 2
- 101800005149 Peptide B Proteins 0.000 description 2
- NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N Tamoxifen Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(/CC)=C(C=1C=CC(OCCN(C)C)=CC=1)/C1=CC=CC=C1 NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N 0.000 description 2
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 2
- 230000001746 atrial effect Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 2
- NSQLIUXCMFBZME-MPVJKSABSA-N carperitide Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=CC=C1 NSQLIUXCMFBZME-MPVJKSABSA-N 0.000 description 2
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 2
- 230000003205 diastolic effect Effects 0.000 description 2
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 2
- 239000012154 double-distilled water Substances 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 230000000004 hemodynamic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 2
- 210000005240 left ventricle Anatomy 0.000 description 2
- HPNRHPKXQZSDFX-OAQDCNSJSA-N nesiritide Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CO)C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1N=CNC=1)C(O)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=CC=C1 HPNRHPKXQZSDFX-OAQDCNSJSA-N 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 2
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 210000000115 thoracic cavity Anatomy 0.000 description 2
- 102000009310 vitamin D receptors Human genes 0.000 description 2
- 108050000156 vitamin D receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- ZNCXJJQGNNRNPR-UHFFFAOYSA-N 2-amino-4-nitrophenol;hydrochloride Chemical compound Cl.NC1=CC([N+]([O-])=O)=CC=C1O ZNCXJJQGNNRNPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010059245 Angiopathy Diseases 0.000 description 1
- 102000015427 Angiotensins Human genes 0.000 description 1
- 108010064733 Angiotensins Proteins 0.000 description 1
- 108010084085 Atrial Myosins Proteins 0.000 description 1
- 206010056370 Congestive cardiomyopathy Diseases 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 201000010046 Dilated cardiomyopathy Diseases 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010064571 Gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 206010020880 Hypertrophy Diseases 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 108010084498 Myosin Heavy Chains Proteins 0.000 description 1
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 1
- 241000209046 Pennisetum Species 0.000 description 1
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 1
- 206010042434 Sudden death Diseases 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 206010047281 Ventricular arrhythmia Diseases 0.000 description 1
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N all-trans-retinoic acid Chemical compound OC(=O)\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C SHGAZHPCJJPHSC-YCNIQYBTSA-N 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 210000000038 chest Anatomy 0.000 description 1
- 230000001447 compensatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000000249 desinfective effect Effects 0.000 description 1
- 230000035487 diastolic blood pressure Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 239000000890 drug combination Substances 0.000 description 1
- 238000007876 drug discovery Methods 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 210000002253 embryonic cardiomyocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000001671 embryonic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 210000002837 heart atrium Anatomy 0.000 description 1
- 210000002064 heart cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000009067 heart development Effects 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000007490 hematoxylin and eosin (H&E) staining Methods 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000013011 mating Effects 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 238000000643 oven drying Methods 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000003540 papillary muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 229960001412 pentobarbital Drugs 0.000 description 1
- WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N pentobarbital Chemical compound CCCC(C)C1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O WEXRUCMBJFQVBZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DHRLEVQXOMLTIM-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;trioxomolybdenum Chemical compound O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.O=[Mo](=O)=O.OP(O)(O)=O DHRLEVQXOMLTIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N picric acid Chemical compound OC1=C([N+]([O-])=O)C=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O OXNIZHLAWKMVMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000054765 polymorphisms of proteins Human genes 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 229930002330 retinoic acid Natural products 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 238000013424 sirius red staining Methods 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 230000035488 systolic blood pressure Effects 0.000 description 1
- 229960001603 tamoxifen Drugs 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 1
- 210000003437 trachea Anatomy 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 1
- 229960001727 tretinoin Drugs 0.000 description 1
- 208000019553 vascular disease Diseases 0.000 description 1
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种IRX4及其诱导剂在筛选/制备保护心脏的药物中的应用。本发明选用野生型小鼠和心脏特异性IRX4基因过表达小鼠为实验对象，手术组给予主动脉弓缩窄手术构建心肌肥厚模型，术后4周对各组小鼠进行心肌肥厚、纤维化及心功能的测定来研究IRX4基因的功能。结果发现IRX4具有抑制心肌肥厚及抗纤维化，改善心功能的作用。因此，IRX4可用于筛选保护心脏功能，抗心肌纤维化和/或预防，缓解和/或治疗心肌肥厚及相关疾病的药物，可用于制备保护心脏功能，抗心肌纤维化和/或预防，缓解和/或治疗心肌肥厚的药物。本发明为心肌肥厚的治疗提供了一条有效的新途径。
Description
技术领域
本发明属于基因的功能与应用领域，特别涉及一种IRX4及其诱导剂在筛选/制备保护心脏的药物中的应用。
背景技术
心肌肥厚是高血压，血管疾病和慢性心力衰竭等多种心血管疾病发生发展的共同病理过程，是心脏对压力或容积负荷增加，血管紧张素，生长因子以及激素等多种心血管刺激因素做出的代偿反应。长期的刺激会导致病理性心肌肥大，主要表现为心肌细胞体积增大、蛋白合成增多、细胞外基质增多，发生纤维化等特征，最终引发扩张性心肌病，室性心律失常，心肌缺血，心力衰竭甚至猝死等。心肌肥厚已成为心力衰竭等多种心血管疾病的独立危险因素及不良预后的信号，心肌肥厚继而导致的心力衰竭等心血管疾病是全世界死亡的主要原因。目前关于心肌肥厚的治疗可以延缓这些疾病的进展，但却不能逆转或阻止此类疾病的发生。研究心肌肥厚的发生发展机制，发现参与心肌肥厚的特异性因子及信号转导通路，探索新的治疗靶点，具有重要的理论与实践意义。
易洛魁家族同源盒4(iroquois homeobox 4，IRX4)，是易洛魁家族同源盒转录因子中的一员，主要在发育中心脏的心室表达，并在心脏发育过程中作为心室分化的重要中介。Irx4在各个心室区域表达同样丰富，且其表达在胚胎，新生儿和成年心脏中观察到的水平相同，其可用于专门标记心室祖细胞。在心室肌中，IRX4可与维生素D受体的异源二聚体(VDR)和维甲酸X受体(RXR)相互作用,调节其靶基因在心肌细胞中的表达。IRX4亦可通过激活心室肌球蛋白重链-1(VMHC1)基因，抑制心房肌球蛋白重链-1(AMHC1)表达，正向调节心室的特定基因表达。此外，研究表明，大鼠心室中大量的Irx4表达，与左心室壁的Irx5和Kv4.2水平之间呈负相关。Irx4抑制细胞中Irx5诱导的通道启动子活性的增加，当内源性Irx4表达被siRNA抑制时，Irx5会增加新生儿心肌细胞中的通道启动子活性。在小鼠中,Irx4基因的破坏导致心室特异性表达的肌球蛋白重链基因受到抑制，导致心室基因表达异常，从而诱导成年期心肌肥厚。在没有基因受Irx4控制的情况下，心室功能恶化，继而发生心肌病。Irx4虽不足以形成心室，但需要建立心室特异性基因表达程序的某些组件。
已有临床研究发现Irx4基因突变与肥厚性心肌病之间存在关联，在IRX4基因中发现了4种多态性，A381>G多态性AA基因型具有更高的最大左心室流出道梯度，和延长的校正QT离散度，表明IRX4可能会对间隔厚度产生调节作用，从而导致校正后的QT离散度增加和流出梯度增加。Ban,K等通过靶向IRX4分子的RNA，可以从胚胎干细胞中纯化心室心肌细胞，这表明基于分子信标的方法生成的同质且功能正常的心室心肌细胞可用于疾病的研究，药物发现和基于细胞的疗法。那么靶向心肌细胞IRX4，特异性过表达IRX4是否可以在病理性心肌肥厚中发挥作用，值得我们深入研究。
发明内容
为解决临床防治心肌肥厚疾病现有技术的缺陷和不足，本发明的目的在于确定IRX4基因的表达与心肌肥厚之间的相互关系，且发现了一种用于治疗心肌肥厚的靶基因IRX4的新用途，进而把IRX4基因应用于心肌肥厚相关疾病的治疗。本发明提供了一种IRX4及其诱导剂在筛选/制备保护心脏的药物中的应用，即IRX4在治疗心肌肥厚中的功能和应用，具体是在IRX4作为靶基因在制备抗心肌纤维化和/或预防、缓解和/或治疗心肌肥厚药物中的应用。
本发明的目的通过下述技术方案实现：
本发明以野生型小鼠及心脏特异性IRX4过表达的小鼠为实验对象，通过AB手术诱导的心肌肥厚模型来研究IRX4基因的功能。结果发现AB刺激，小鼠心功能显著恶化，显著促进了心肌肥厚和心肌纤维化。较野生型+AB组小鼠，AB+IRX4过表达组小鼠心功能有所改善，心肌细胞面积及纤维化面积显著减少。这表明IRX4过表达显著减轻压力负荷诱导的心肌肥厚，即IRX4基因能够对心肌肥厚及相关疾病起保护作用。
为实现上述目的，本发明的技术方案如下：
第一方面，本发明提供一种IRX4作为药物靶标在筛选/制备保护心脏的药物中的应用，其特征在于：所述保护心脏的药物活性成分是IRX4，或者是提高IRX4表达量的试剂。
作为优选方案，所述应用包括利用IRX4作为药物靶标筛选/制备抗心肌纤维化和/或预防、缓解和/或治疗心肌肥厚及相关疾病的药物。
进一步地，所述预防、缓解和/或治疗心肌肥厚及其相关疾病药物是提高IRX4表达量的试剂，或者促进IRX4表达，或者增强IRX4作用的药物。
更进一步地，所述提高IRX4表达量的试剂给药方式为直接裸DNA注射法、脂质体包裹DNA直接注射法、金包被DNA基因枪轰击法、繁殖缺陷细菌携带质粒DNA法、复制缺陷腺病毒携带目的DNA法、PEG修饰蛋白药物注射法、脂质体包裹蛋白静脉注射法或蛋白微球制剂皮下注射法中任一种。
更进一步地，所述心肌肥厚及其相关疾病包括肥厚性心肌病，缺血性心肌病，心肌缺血和慢性心力衰竭。
第二方案，本发明提供一种IRX4的诱导剂在制备保护心脏功能的药物中的应用，其特征在于：所述应用包括利用IRX4的诱导剂制备预防、缓解和/或治疗心肌肥厚及其相关疾病药物。
作为优选方案，所述IRX4的诱导剂是促进蛋白质活性或蛋白质水平的激动剂、或者促进IRX4的mRNA水平的激动剂，其促进活性是可逆的或不可逆的。
进一步地，所述促进IRX4蛋白质活性或蛋白质水平的激动剂包括促进IRX4蛋白质活性或蛋白质水平的蛋白质、多肽、酶、天然化合物、合成化合物、有机物和无机物。
更进一步地，所述心肌肥厚及其相关疾病包括肥厚性心肌病，缺血性心肌病，心肌缺血和慢性心力衰竭。
本发明的药物可施用于会发生或已经发心肌肥厚及相关疾病的任何动物。这些动物包括人类和非人类的动物，例如宠物或牲畜等。
本发明的药物可以本领域已知的途径施用于受试者，包括但不限于口服，胃肠外，皮下，肌内，静脉内，腹腔内，肝内，心肌内，肾内，阴道，直肠，颊，舌下，鼻内，透皮方式等。施用的剂量将取决于接受者的年龄、健康和体重，联用药物的种类，治疗频率，给药途径等。药物可以单一日剂量施用，或者总日剂量以每天两次，三次或四次的分开剂量施用。剂量可以施用一次或多次，施药时间可以单日至几个月或更长时间。
本发明所述心肌肥厚及相关疾病包括但不限于：肥厚性心肌病，缺血性心肌病，心肌缺血，慢性心力衰竭等。
本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：
(1)本发明发现IRX4的新功能，即IRX4具有抑制心肌肥厚及心肌纤维化，改善心功能，保护肥厚性心肌病的作用。
(2)基于IRX4在保护心脏中的功能，其可以为研制预防、缓解和/或治疗肥厚性心肌病和制备抗心肌纤维化的药物提供靶标。
(3)IRX4的诱导剂可用于制备预防、缓解和/或治疗肥厚性心肌病的药物。
附图说明
图1：PCR检测结果显示心脏特异性过表达IRX4基因小鼠构建成功，且AB术后IRX4表达量下降(*：p＜0.05)
图2：WT和TG-IRX4小鼠AB模型4W后，心重体重比(HW/BW)，肺重体重比(LW/BW)及心重胫骨长度比(HW/TL)的统计柱状图，结果显示IRX4过表达显著降低HW/BW、LW/BW及HW/TL(*：p＜0.05)。
图3：是WT和TG-IRX4组小鼠AB模型4W后，心脏大体照，心脏组织HE染色和心肌细胞横截面积统计柱状图，结果显示IRX4过表达显著改善心肌细胞肥大(*：p＜0.05)。
图4：是WT和TG-IRX4小鼠AB模型4W后，心脏组织天狼猩红染色图，结果显示IRX4过表达显著改善心肌的纤维化(*：p＜0.05)。
图5：是WT和TG-IRX4小鼠AB模型4W后心脏组织中心肌肥厚标志物ANP，BNP，αMHC，βMHC以及心肌纤维化标志物Collagen1，Collagen3，CTGF的mRNA水平。结果表明IRX4过表达显著减少心肌肥厚标志物ANP，BNP，βMHC以及心脏纤维化标志物Collagen1，Collagen3，CTGF的mRNA水平(*：p＜0.05)。
图6：是WT和TG-IRX4小鼠AB模型4W后超声检测心功能结果统计柱状图，结果显示IRX4过表达显著改善AB手术诱导的心室扩张和心功能恶化；其中，LVEDD为左室舒张末期内径、LVESD为左室收缩末期内径、LVEF为左室射血分数、FS为短轴缩短率(FS＝(LVEDD-LVESD)/LVEDD)(*：p＜0.05)。
具体实施方式
通过以下详细说明结合附图可以进一步理解本发明的特点和优点。所提供的实施例仅是对本发明方法的说明，而不以任何方式限制本发明揭示的其余内容。
1.实验动物的饲养与构建
心肌特异性IRX4过表达小鼠的构建：将TG-IRX4小鼠与心脏特异性α-MHC-Cre(购自Jackson Laboratory)转基因小鼠交配，筛选得到IRX4/α-MHC-Cre小鼠，待该小鼠长至6周龄左右后，腹腔注射Tamoxifen，诱导Cre酶的表达，最后得到心脏细胞特异性IRX4基因过表达的小鼠。
选用8-10周龄、体重在23.5-27.5g，雄性，野生型小鼠和心脏特异性IRX4基因过表达小鼠(TG-IRX4)为实验对象。所有实验小鼠均饲养在武汉大学SPF级实验动物中心，室温在22-24℃之间，湿度在40-70％之间，明暗交替照明时间为12h，自由饮水摄食。
实施例1：
根据基因小鼠构建方式，建立IRX4心肌细胞特异性过表达的小鼠。WB验证IRX4的表达情况。结果如图1所示，可见IRX4过表达小鼠，IRX4的表达显著升高，表明基因小鼠构建成功。
实施例2：
IRX4过表达显著改善了AB诱导的心肌肥厚，纤维化和对心功能恶化
1、实验分组：WT+sham组，WT+AB组，TG-IRX4+sham组，TG-IRX4+AB
2、心肌肥厚模型的建立和检测：
AB组小鼠给予主动脉弓缩窄术(AB)。具体方法：①麻醉，称重并用3％戊巴比妥钠麻醉小鼠；②备皮：将手术区域的毛发去除；③气管插管；④主动脉弓降支结扎手术：小鼠取右侧卧位，皮肤消毒，打开胸腔，游离主动脉弓降至，用7-0手术锋线穿过血管病结扎，之后关闭胸腔，缝合皮肤。
Sham组小鼠：在游离出主动脉降支后，只穿线不结扎，其余步骤同AB术。
实施例3：
术后四周测定各组小鼠的心功能，心肌肥厚和纤维化，研究IRX4基因过表达对主动脉弓给诱导的心肌肥厚的影响。
超声心功能的检测：小鼠用异氟烷麻醉后剃毛备皮，小鼠取左侧卧位或仰卧位，并在剃毛区均匀涂抹超声耦合剂，采用高频超声诊断仪，频率为15MHz，选取标准左心室乳头肌短轴切面，测量左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)、射血分数(EF)及短轴缩短率(FS)。
血流动力学检测：①仪器准备：预热加热垫，打开计算机，打开MPVS-400生物信号釆集系统软件，润洗Millar 1.4F超微导管，打开麻醉机及氧气通道；②消毒颈部皮肤，异氟烷吸入麻醉；③小鼠颈部纵切0.5cm切口，分离出颈总动脉，血管下方穿双线，结扎远心端，活结结扎近心端，于血管结扎区近远心端处，用显微剪作1/3-1/2管径的横切口；将Millar1.4F超微导管插入颈总动脉，解开近心端活结，沿颈总动脉走行，将导管插入左心室；④数据釆集与分析：信号稳定后记录数值：小鼠心率(heart rate，HR)、左心室舒张末期压力(end-diastolic pressure，EDP)、收缩末期压力(end-systolic pressure，ESP)、舒张末期容积(end-diastolic volume，EDV)、收缩末期容积(end-systolic volume，ESV)、左心室射血分数(LVEF)、等容收缩期左室压力上升最大速率(maximal rate ofpressuredeve10pment，dp/dt max)以及等容舒张期左室压力下降最大速率(maximal rateofpressure decay，dp/dt min)等。
取材：将做过超声和血流动力学检测的小鼠，称重，颈椎断颈的方法处死，打开胸腔，取出心脏。随机分为两组。一组将剪下来的心脏迅速置于10％的KCL中，使心脏停跳在舒张期之后，取出心脏，擦干，称重并将其放入福尔马林中固定，48h后用于病理学的检测；另一组心脏减下来挤干心腔中的血液，称重，去除心房，保留左心室并保存在冻存管置于液氮中，以用于后期分子生物学的检测。同时，称重小鼠的肺重和胫骨长度。
病理学检测：
1、制备石蜡标本切片：将福尔马林中的心脏取出，拍大体照之后，脱水，包埋并切片后烘干备用
2、HE苏木精-伊红染色：55℃烘烤30min→二甲苯5min，3次→100％酒精1min→95％酒精1min→70％酒精1min→双蒸水1min→苏木素溶液5min→水洗1min→1％盐酸酒精1-3s→水洗1min→Scott液1min→水洗1min→伊红溶液3-5min→蒸馏水洗去浮色→70％酒精1s→95％酒精1s→100％酒精30s，3次→二甲苯2min，3次→趁二甲苯未干立即封片→通风橱内吹干，显微镜拍照。每张图片选择3个以上边界清楚，核大致位于中央的细胞，用Image-Pro Plus 6.0软件圈细胞面积。
3、天狼猩红(PSR)染色：55℃烘烤30min→二甲苯2min，3次→100％酒精1min→95％酒精1min→70％酒精1min→流水冲洗10min→双蒸水1min→质量分数0.2％磷钼酸2min→0.1％天狼猩红苦味酸溶液滴于组织上，湿盒中染色90min→去除残液→0.01N盐酸4s→70％酒精1次→90％酒精1次→100％酒精30s，3次→二甲苯2min，3次→趁二甲苯未干立即盖玻片封片，显微镜拍照。
分子生物学检测：
1.蛋白Western blot检测方法：
①组织蛋白的提取：组织样品加入裂解液，离心取上清，BCA定量将组织蛋白样品浓度定量在5000ng/ml；②SDS-PAGE凝胶电泳：将10uL组织蛋白样品上样至电泳槽里配置好的电泳凝胶中，75V电泳2h左右；③转膜：4℃冰浴中，恒流200mA转1h40min，将凝胶转至PVDF膜上；④封闭：TBST洗去转膜液之后，将PVDF膜放入封闭液中，封闭1h；⑤孵育一抗：TBST将PVDF膜洗涤5min/次，3次后，将蛋白膜置入一抗孵育盒中，4℃冰箱摇床孵育过夜；⑥第二天，将蛋白膜从一抗中取出，TBST洗三次后，孵育对应的二抗，摇床孵育1h；⑦TBST洗蛋白膜三次后，用显影A液+B液混合液，显影。
2.心肌肥厚指标mRNA的表达：
①提取RNA，每组样品中加入1ml Trizol，静置10min；
②每管加入200ul三氯甲烷抽提，静置5min后，4℃，12000g离心15min；
③RNA沉淀：吸取上层水相至新的EP管中，并加入等体积的异丙醇，混匀后静置10min，12000g，4℃离心10min；
④离心后，可见管底有白色絮状沉淀(RNA)，去除上清，用75％乙醇充分漂洗RNA沉淀后，7500g，4℃离心5min；
⑤RNA沉淀的溶解：去除上清，诗文干燥10min，待沉淀变为无色后，用20ulDEPC水溶解RNA沉淀；
⑥测定每个样品的RNA浓度；
⑦反转录PCR；
⑧RT-PCR：用cDNA模板，特定引物序列测定指标的RNA水平
RNA所用序列如下表：
| 基因 | 正向引物 | 编号 | 反向引物 | 编号 |
| IRX4 | GGGCTATGGCAACTACGTGA | SEQ ID NO：1 | GCAGATCCCGAACCATCCTT | SEQ ID NO：2 |
| ANP | ATTGACAGGATTGGAGCCCAG | SEQ ID NO：3 | TCAAGCAGAATCGACTGCCTT | SEQ ID NO：4 |
| BNP | TTTGGGCTGTAACGCACTGA | SEQ ID NO：5 | CACTTCAAAGGTGGTCCCAGA | SEQ ID NO：6 |
| αMHC | ACATTGGTGCCAAGAAGATGC | SEQ ID NO：7 | GGCAGAGTCGAACGTTTATGT | SEQ ID NO：8 |
| βMHC | CCGAGTCCCAGGTCAACAA | SEQ ID NO：9 | CTTCACGGGCACCCTTGGA | SEQ ID NO：10 |
| CollagenI | AGCACGTCTGGTTTGGAGAG | SEQ ID NO：11 | GACATTAGGCGCAGGAAGGT | SEQ ID NO：12 |
| CollagenIII | TGACTGTCCCACGTAAGCAC | SEQ ID NO：13 | GAGGGCCATAGCTGAACTGA | SEQ ID NO：14 |
| CTGF | AGACCTGTGCCTGCCATTAC | SEQ ID NO：15 | ACGCCATGTCTCCGTACATC | SEQ ID NO：16 |
| GAPDH | ACTCCACTCACGGCAAATTC | SEQ ID NO：17 | TCTCCATGGTGGTGAAGACA | SEQ ID NO：18 |
序列表
<110> 武汉大学
<120> IRX4及其诱导剂在筛选/制备保护心脏的药物中的应用
<160> 18
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 20
<212> DNA
<213> 易洛魁类同源域蛋白4(iroquois homeobox 4)
<400> 1
gggctatggc aactacgtga 20
<210> 2
<211> 20
<212> DNA
<213> 易洛魁类同源域蛋白4(iroquois homeobox 4)
<400> 2
gcagatcccg aaccatcctt 20
<210> 3
<211> 20
<212> DNA
<213> 脑钠肽(natriuretic peptide B)
<400> 3
tttgggctgt aacgcactga 20
<210> 4
<211> 21
<212> DNA
<213> 脑钠肽(natriuretic peptide B)
<400> 4
cacttcaaag gtggtcccag a 21
<210> 5
<211> 21
<212> DNA
<213> 心房钠尿肽(atrial natriure ticpeptide )
<400> 5
attgacagga ttggagccca g 21
<210> 6
<211> 21
<212> DNA
<213> 心房钠尿肽(atrial natriuretic peptide)
<400> 6
tcaagcagaa tcgactgcct t 21
<210> 7
<211> 21
<212> DNA
<213> α-肌球蛋白重链(alpha myosin heavy chain)
<400> 7
acattggtgc caagaagatg c 21
<210> 8
<211> 21
<212> DNA
<213> α-肌球蛋白重链(alpha myosin heavy chain)
<400> 8
ggcagagtcg aacgtttatg t 21
<210> 9
<211> 19
<212> DNA
<213> β-肌球蛋白重链(β-myosin heavy chain)
<400> 9
ccgagtccca ggtcaacaa 19
<210> 10
<211> 19
<212> DNA
<213> β-肌球蛋白重链(β-myosin heavy chain)
<400> 10
cttcacgggc acccttgga 19
<210> 11
<211> 20
<212> DNA
<213> I型胶原蛋白(Collagen-I)
<400> 11
agcacgtctg gtttggagag 20
<210> 12
<211> 20
<212> DNA
<213> I型胶原蛋白(Collagen-I)
<400> 12
gacattaggc gcaggaaggt 20
<210> 13
<211> 20
<212> DNA
<213> I型胶原蛋白(Collagen-III)
<400> 13
tgactgtccc acgtaagcac 20
<210> 14
<211> 20
<212> DNA
<213> I型胶原蛋白(Collagen-III)
<400> 14
gagggccata gctgaactga 20
<210> 15
<211> 20
<212> DNA
<213> 结缔组织生长因子(connective tissue growth factor )
<400> 15
agacctgtgc ctgccattac 20
<210> 16
<211> 20
<212> DNA
<213> 结缔组织生长因子(connective tissue growth factor )
<400> 16
acgccatgtc tccgtacatc 20
<210> 17
<211> 20
<212> DNA
<213> 磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3phosphate dehydrogenase)
<400> 17
actccactca cggcaaattc 20
<210> 18
<211> 20
<212> DNA
<213> 磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3phosphate dehydrogenase)
<400> 18
tctccatggt ggtgaagaca 20
Claims (9)
1.一种IRX4作为药物靶标在筛选/制备保护心脏的药物中的应用，其特征在于：所述保护心脏的药物活性成分是IRX4，或者是提高IRX4表达量的试剂。
2.根据权利要求1所述的IRX4作为药物靶标在筛选/制备保护心脏的药物中的应用，其特征在于：所述应用包括利用IRX4作为药物靶标筛选/制备抗心肌纤维化和/或预防、缓解和/或治疗心肌肥厚及相关疾病的药物。
3.根据权利要求2所述的IRX4作为药物靶标在筛选/制备保护心脏的药物中的应用，其特征在于：所述预防、缓解和/或治疗心肌肥厚及其相关疾病药物是提高IRX4表达量的试剂，或者促进IRX4表达，或者增强IRX4作用的药物。
4.根据权利要求3所述的IRX4作为药物靶标在筛选/制备保护心脏的药物中的应用，其特征在于：所述提高IRX4表达量的试剂给药方式为直接裸DNA注射法、脂质体包裹DNA直接注射法、金包被DNA基因枪轰击法、繁殖缺陷细菌携带质粒DNA法、复制缺陷腺病毒携带目的DNA法、PEG修饰蛋白药物注射法、脂质体包裹蛋白静脉注射法或蛋白微球制剂皮下注射法中任一种。
5.根据权利要求2-4中任一项所述的IRX4作为药物靶标在筛选/制备保护心脏的药物中的应用，其特征在于：所述心肌肥厚及其相关疾病包括肥厚性心肌病，缺血性心肌病，心肌缺血和慢性心力衰竭。
6.一种IRX4的诱导剂在筛选/制备保护心脏功能的药物中的应用，其特征在于：所述应用包括利用IRX4的诱导剂制备预防、缓解和/或治疗心肌肥厚及其相关疾病药物。
7.根据权利要求6所述的IRX4的诱导剂在筛选/制备保护心脏功能的药物中的应用，其特征在于：所述IRX4的诱导剂是促进蛋白质活性或蛋白质水平的激动剂、或者促进IRX4的mRNA水平的激动剂，其促进活性是可逆的或不可逆的。
8.根据权利要求7所述的IRX4的诱导剂在筛选/制备保护心脏功能的药物中的应用，其特征在于：所述促进IRX4蛋白质活性或蛋白质水平的激动剂包括促进IRX4蛋白质活性或蛋白质水平的蛋白质、多肽、酶、天然化合物、合成化合物、有机物和无机物。
9.根据权利要求6-8中任一项所述的IRX4的诱导剂在筛选/制备保护心脏功能的药物中的应用，其特征在于：所述心肌肥厚及其相关疾病包括肥厚性心肌病，缺血性心肌病，心肌缺血和慢性心力衰竭。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202011346074.2A CN112353942A (zh) | 2020-11-26 | 2020-11-26 | Irx4及其诱导剂在筛选/制备保护心脏的药物中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202011346074.2A CN112353942A (zh) | 2020-11-26 | 2020-11-26 | Irx4及其诱导剂在筛选/制备保护心脏的药物中的应用 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN112353942A true CN112353942A (zh) | 2021-02-12 |
Family
ID=74533431
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202011346074.2A Pending CN112353942A (zh) | 2020-11-26 | 2020-11-26 | Irx4及其诱导剂在筛选/制备保护心脏的药物中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN112353942A (zh) |
-
2020
- 2020-11-26 CN CN202011346074.2A patent/CN112353942A/zh active Pending
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| BRUNEAU,ET AL: "Cardiomyopathy in Irx4-Deficient Mice Is Preceded by Abnormal Ventricular Gene Expression", 《MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY》 * |
| BRUNEAU,ET AL: "Disruption of the ventricle-specific homeobox gene Irx4 in mice leads to cardiac dysfunction and hypertrophy", 《72ND SCIENTIFIC SESSIONS OF THE AMERICAN HEART ASSOCIATION》 * |
| 宋华: "先天性发育缺陷胎儿FOXC2基因变异分析", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》 * |
| 蒋静等: "影响小鼠胚胎时期心脏发育的相关蛋白", 《实验与检验医学》 * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN112472690B (zh) | 一种制备增强CNPase活性的化合物或生物药物的方法用于治疗心脏疾病 | |
| CN105251020B (zh) | 泛素特异性蛋白酶4（usp4）在治疗心肌肥厚中的功能及应用 | |
| CN104117058B (zh) | 激活素受体样激酶7（alk7）在治疗心肌肥厚中的功能及应用 | |
| CN104107429A (zh) | Sh2b衔接蛋白3（sh2b3）在治疗心肌肥厚中的功能及应用 | |
| CN108187029B (zh) | 白细胞免疫球蛋白样受体亚家族b成员4在制备预防、缓解和/或治疗心肌肥厚药物的应用 | |
| CN114344296B (zh) | Nat10抑制剂在诊治压力超负荷所致心力衰竭中的应用 | |
| CN105194660A (zh) | 泛素特异蛋白酶18（usp18）在治疗心肌肥厚中的功能及应用 | |
| CN112353942A (zh) | Irx4及其诱导剂在筛选/制备保护心脏的药物中的应用 | |
| CN104141012A (zh) | Sh2b衔接蛋白1（sh2b1）在治疗心肌肥厚中的功能及应用 | |
| CN105181976A (zh) | 三结构域蛋白8（trim8）抑制剂在抑制心肌肥厚中的功能及应用 | |
| CN117599190B (zh) | Chchd3表达促进剂在制备心肌梗死药物中的应用 | |
| CN106556706B (zh) | 去整合素金属蛋白酶23在心肌肥厚中的功能及应用 | |
| CN108245667A (zh) | 肿瘤坏死因子α诱导蛋白3在制备治疗糖尿病心肌病药物中的应用 | |
| CN106555002A (zh) | 乳脂肪球表皮生长因子8在心脏重构和心力衰竭的诊断及治疗中的应用 | |
| CN106540275B (zh) | 去整合素金属蛋白酶22在治疗心肌肥厚中的功能及应用 | |
| CN106362167B (zh) | TRAF结合的NF-κB激活因子(TANK)及其抑制剂在治疗心肌肥厚中的应用 | |
| CN105106942A (zh) | 双特异性磷酸酶14（dusp14）在治疗心肌肥厚中的功能及应用 | |
| CN118987018A (zh) | 环状rna或其过表达试剂在制备预防和/或治疗心脏病产品中的应用 | |
| CN116898971A (zh) | Srpk3基因在制备治疗心肌肥厚的药物中的用途 | |
| CN120285195A (zh) | Pxdc1在制备治疗心肌肥厚产品中的应用 | |
| CN120174082A (zh) | Gadd45g作为心肌肥厚和心力衰竭生物标志物及其在治疗药物研发中的应用 | |
| CN118141824A (zh) | 泽泻醇b醋酸酯在预防或治疗肥厚型心肌病中的应用 | |
| CN105106936B (zh) | G蛋白信号转导调节蛋白10（rgs10）在治疗心肌肥厚中的功能及应用 | |
| CN119162184A (zh) | 一种circSamd4及其在制备治疗心肌纤维化药物中的用途 | |
| CN117305431A (zh) | lncRNA NONMMUT067673.2作为生物标志物在用于制备慢性心力衰竭和心肌纤维化检测试剂或抑制剂中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20210212 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |