CN111803482B - 鹿茸单体在制备抑制乳腺肿瘤骨转移的药物中的应用及药物 - Google Patents
鹿茸单体在制备抑制乳腺肿瘤骨转移的药物中的应用及药物 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111803482B CN111803482B CN202010758669.2A CN202010758669A CN111803482B CN 111803482 B CN111803482 B CN 111803482B CN 202010758669 A CN202010758669 A CN 202010758669A CN 111803482 B CN111803482 B CN 111803482B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- monomer
- bone metastasis
- medicine
- hete
- antler
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 title claims abstract description 44
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 title claims abstract description 43
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 title claims abstract description 42
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 title claims abstract description 38
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 37
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 36
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 title claims abstract description 22
- 239000000178 monomer Substances 0.000 title abstract description 34
- JEKNPVYFNMZRJG-UHFFFAOYSA-N 16-hydroxyicosa-5,8,11,14-tetraenoic acid Chemical compound CCCCC(O)C=CCC=CCC=CCC=CCCCC(O)=O JEKNPVYFNMZRJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 210000002997 osteoclast Anatomy 0.000 abstract description 29
- 210000003056 antler Anatomy 0.000 abstract description 28
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 abstract description 14
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 abstract description 12
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 10
- 239000002243 precursor Substances 0.000 abstract description 8
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 abstract description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 6
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 6
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 abstract description 6
- 206010027452 Metastases to bone Diseases 0.000 abstract description 4
- 238000012404 In vitro experiment Methods 0.000 abstract description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 3
- JEKNPVYFNMZRJG-STHMYGMFSA-N 16(R)-HETE Chemical compound CCCC[C@@H](O)\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O JEKNPVYFNMZRJG-STHMYGMFSA-N 0.000 abstract 1
- 241000282994 Cervidae Species 0.000 abstract 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 8
- 102000007651 Macrophage Colony-Stimulating Factor Human genes 0.000 description 7
- 108010046938 Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 7
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 6
- 102000014128 RANK Ligand Human genes 0.000 description 6
- 108010025832 RANK Ligand Proteins 0.000 description 6
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 5
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- 102000007591 Tartrate-Resistant Acid Phosphatase Human genes 0.000 description 4
- 108010032050 Tartrate-Resistant Acid Phosphatase Proteins 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 4
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 4
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 4
- WOVKYSAHUYNSMH-RRKCRQDMSA-N 5-bromodeoxyuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(Br)=C1 WOVKYSAHUYNSMH-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 3
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 3
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 3
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- -1 glidants Substances 0.000 description 3
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 3
- 239000008176 lyophilized powder Substances 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- WOVKYSAHUYNSMH-UHFFFAOYSA-N BROMODEOXYURIDINE Natural products C1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C(Br)=C1 WOVKYSAHUYNSMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000018084 Bone neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 238000003782 apoptosis assay Methods 0.000 description 2
- 229950004398 broxuridine Drugs 0.000 description 2
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 2
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 2
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 2
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 230000000010 osteolytic effect Effects 0.000 description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 2
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 2
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 2
- 102000000412 Annexin Human genes 0.000 description 1
- 108050008874 Annexin Proteins 0.000 description 1
- 208000006386 Bone Resorption Diseases 0.000 description 1
- 206010006002 Bone pain Diseases 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 208000037147 Hypercalcaemia Diseases 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 206010041549 Spinal cord compression Diseases 0.000 description 1
- 208000005250 Spontaneous Fractures Diseases 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 230000000181 anti-adherent effect Effects 0.000 description 1
- 239000003911 antiadherent Substances 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000002449 bone cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 230000024279 bone resorption Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- WUKWITHWXAAZEY-UHFFFAOYSA-L calcium difluoride Chemical compound [F-].[F-].[Ca+2] WUKWITHWXAAZEY-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910001634 calcium fluoride Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 238000002737 cell proliferation kit Methods 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000000498 cooling water Substances 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 239000008393 encapsulating agent Substances 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 239000008394 flocculating agent Substances 0.000 description 1
- 239000004088 foaming agent Substances 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 239000003906 humectant Substances 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 230000000148 hypercalcaemia Effects 0.000 description 1
- 208000030915 hypercalcemia disease Diseases 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000010603 microCT Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000963 osteoblast Anatomy 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 239000004014 plasticizer Substances 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 239000003380 propellant Substances 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 108091006084 receptor activators Proteins 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 208000011581 secondary neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
- A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
- A61K31/20—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids
- A61K31/202—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids having three or more double bonds, e.g. linolenic
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/14—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for lactation disorders, e.g. galactorrhoea
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oncology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Gynecology & Obstetrics (AREA)
- Pregnancy & Childbirth (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明提供了一种鹿茸单体在制备抑制乳腺肿瘤骨转移的药物中的应用及药物，涉及医药技术领域，本发明的发明人通过质谱的手段从鹿茸中筛选出了一类鹿茸单体16(R)‑HETE，并通过体外实验发现，该单体能够有效抑制破骨细胞分化、减少破骨细胞数量，同时不影响前体细胞的增殖或存活；并且，该单体对于小鼠乳腺癌骨转移有良好的治疗效果。因此，可以将鹿茸单体16(R)‑HETE应用于制备抑制乳腺肿瘤骨转移的药物，为乳腺癌骨转移提供一种新的治疗手段。
Description
技术领域
本发明涉及医药技术领域，尤其是涉及一种鹿茸单体在制备抑制乳腺肿瘤骨转移的药物中的应用及药物。
背景技术
乳腺癌是女性中最常见的恶性癌症之一，并且是由于重要器官中继发性肿瘤的发展而导致癌症死亡的主要原因。尽管原发性肿瘤的外科治疗通常有效，但普遍会发生难以根治的转移。据统计，约有百分之八十的乳腺癌患者随着疾病的进展而发生骨转移。骨转移很可能与一系列独特的骨骼并发症有关，包括骨痛、病理性骨折、高钙血症和脊髓压迫，这些并发症会降低患者的生活质量，会对患者的生存、活动能力和生活质量产生负面影响。此外，乳腺癌骨转移的临床并发症给个人和社会带来了巨大的经济负担。乳腺癌细胞在骨内的转移通常是溶骨性的，其典型特征是破骨细胞的过度活化导致的病理性骨吸收。核因子κB配体受体激活剂(RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)是破骨细胞分化和存活中最重要的两个调节因子。在乳腺癌骨转移中，乳腺癌细胞产生一些溶骨因子，其中一些因子通过增加成骨细胞RANKL的表达来激活破骨细胞生成，而另一些因子则与RANKL刺激产生协同作用或以独立于RANKL的方式激活破骨细胞生成。
因此，如何能够有效抑制乳腺肿瘤骨转移是亟待解决的难题。
有鉴于此，特提出本发明。
发明内容
本发明的第一个目的在于提供鹿茸单体16(R)-HETE在制备抑制乳腺肿瘤骨转移的药物中的应用，以至少缓解现有技术中存在的技术问题之一。
本发明的第二个目的在于提供一种用于抑制乳腺肿瘤骨转移的药物。
本发明提供了鹿茸单体16(R)-HETE在制备抑制乳腺肿瘤骨转移的药物中的应用。
进一步的，所述鹿茸单体16(R)-HETE的分子式为C20H32O3，分子量为302.22457。
另外，本发明还提供了一种用于抑制乳腺肿瘤骨转移的药物，所述药物包括鹿茸单体16(R)-HETE。
进一步的，所述鹿茸单体16(R)-HETE的分子式为C20H32O3，分子量为302.22457。
进一步的，所述药物还包括药学上可接受的辅料。
进一步的，所述药物的剂型包括口服制剂。
进一步的，所述口服制剂包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、糖浆剂、口服溶液剂、口服混悬剂或口服乳剂。
进一步的，所述药物的有效给药剂量为50-100mg/kg/天。
进一步的，所述药物的有效给药剂量为75mg/kg/天。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明的发明人通过质谱的手段从鹿茸中筛选出了一类鹿茸单体16(R)-HETE，并通过体外实验发现，该单体能够有效抑制破骨细胞分化、减少破骨细胞数量，同时不影响前体细胞的增殖或存活；并且，该单体对于小鼠乳腺癌骨转移有良好的治疗效果。因此，可以将鹿茸单体16(R)-HETE应用于制备抑制乳腺肿瘤骨转移的药物，为乳腺癌骨转移提供一种新的治疗手段。
以本发明的提供的鹿茸单体16(R)-HETE在制备抑制乳腺肿瘤骨转移的药物中的应用为基础，含有鹿茸单体16(R)-HETE的药物，能够有效抑制抑制乳腺肿瘤骨的转移，具有积极的作用。
附图说明
为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为本发明实施例2提供的TRAP染色结果图；
图2为本发明实施例2提供的破骨细胞数量测试结果柱状图；
图3为本发明实施例2提供的破骨细胞表面积测试结果柱状图；
图4为本发明实施例2提供的破骨细胞核测试结果柱状图；
图5为本发明实施例3提供的细胞凋亡检测结果；
图6为本发明实施例3提供溴脱氧尿苷(BrdU)检测破骨细胞前体增殖结果；
图7为本发明实施例4提供钙离子浓度检测结果图；
图8为本发明实施例5提供肿瘤骨转移扫描检测图；
图9为本发明实施例5提供肿瘤骨转移数统计图；
图10为本发明实施例5提供肿瘤骨转移大小统计图。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
除非本文另有定义，连同本发明使用的科学和技术术语应具有本领域普通技术人员通常理解的含义。术语的含义和范围应当清晰，然而，在任何潜在不明确性的情况下，本文提供的定义优先于任何字典或外来定义。在本申请中，除非另有说明，术语“包括”及其他形式的使用是非限制性的。
一般地，连同本文描述的细胞和组织培养、分子生物学、免疫学、微生物学、遗传学以及蛋白和核酸化学和杂交使用的命名法和其技术是本领域众所周知和通常使用的那些。除非另有说明，本发明的方法和技术一般根据本领域众所周知，且如各种一般和更具体的参考文献中所述的常规方法来进行，所述参考文献在本说明书自始至终引用和讨论。酶促反应和纯化技术根据制造商的说明书、如本领域通常实现的或如本文所述来进行。连同本文描述的分析化学、合成有机化学以及医学和药物化学使用的命名法、以及其实验室程序和技术是本领域众所周知和通常使用的那些。
根据本发明的第一个方面，提供了鹿茸单体16(R)-HETE在制备抑制乳腺肿瘤骨转移的药物中的应用。
鹿茸为我国传统的名贵中药材，鹿茸化学成分复杂且具有补肾壮阳、强筋健骨、抗氧化、抗肿瘤等功效。本发明的发明人通过质谱的手段从鹿茸中筛选出了一类鹿茸单体16(R)-HETE，并通过体外实验发现，该单体能够有效抑制破骨细胞分化、减少破骨细胞数量，同时不影响前体细胞的增殖或存活；并且，该单体对于小鼠乳腺癌骨转移有良好的治疗效果。因此，可以将鹿茸单体16(R)-HETE应用于制备抑制乳腺肿瘤骨转移的药物，为乳腺癌骨转移提供一种新的治疗手段。
其中，本发明提供的所述鹿茸单体16(R)-HETE的分子式为C20H32O3，分子量为302.22457，为本实验室制备得到。
根据本发明的第二个方面，本发明还提供了一种用于抑制乳腺肿瘤骨转移的药物，所述药物包括鹿茸单体16(R)-HETE。
本发明提供的用于抑制乳腺肿瘤骨转移的药物的活性成分包括鹿茸单体16(R)-HETE，基于本发明的提供的鹿茸单体16(R)-HETE在制备抑制乳腺肿瘤骨转移的药物中的应用，该药物能够有效抑制抑制乳腺肿瘤骨的转移，具有积极的作用。需要注意的是，基于本发明提供的鹿茸单体16(R)-HETE具有抑制乳腺肿瘤骨转移的用途，因此，包含该鹿茸单体16(R)-HETE的药物的具体应用可以为预防乳腺肿瘤骨转移，也可以为治疗乳腺肿瘤骨转移。
其中，所述鹿茸单体16(R)-HETE的分子式为C20H32O3，分子量为302.22457。
需要说明的是，本发明对用于抑制乳腺肿瘤骨转移的药物的活性成分不做具体限定，在包含鹿茸单体16(R)-HETE的基础上，根据实际应用，还可以包含在功能上能够起到协同作用或联合用药的其他活性成分。
在一些优选的实施方式中，药物还包括药学上可接受的辅料。
药学上可接受的辅料是指生产药品和调配处方时，使用的赋形剂和附加剂，是指除活性成分外，在安全性方面已进行了合理的评估，并且包含在药物制剂中的物质。同一药用辅料可用于不同给药途径的药物制剂，且有不同的作用和用途。在本发明提供的药物中添加的药学上可接受的辅料，能够起到赋型、充当载体或提高稳定性的作用，此外，还具有增溶、助溶或缓控释等重要功能。
典型但非限制性的药学上可接受的辅料包括：溶剂、抛射剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、着色剂、黏合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、湿润剂、渗透压调节剂、稳定剂、助流剂、矫味剂、防腐剂、助悬剂、包衣材料、芳香剂、抗黏着剂、抗氧剂、螯合剂、渗透促进剂、pH调节剂、缓冲剂、增塑剂、表面活性剂、发泡剂、消泡剂、增稠剂、包合剂、保湿剂、吸收剂、稀释剂、絮凝剂与反絮凝剂、助滤剂或释放阻滞剂中的一种或多种。
在一个优选的实施方式中，药物的剂型包括口服制剂。
当口服用药时，上述药物可制成任意口服可接受的制剂形式，例如可以为，但不限于片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、糖浆剂、口服溶液剂、口服混悬剂或口服乳剂。
其中，片剂使用的载体一般包括乳糖和玉米淀粉，另外也可加入润滑剂如硬脂酸镁。胶囊剂使用的稀释剂一般包括乳糖和干燥玉米淀粉。口服混悬剂则通常是将活性成分与适宜的乳化剂和悬浮剂混合使用。
任选地，以上口服制剂形式中还可加入一些甜味剂、芳香剂或着色剂。
在一些优选的实施方式中，所述药物的有效给药剂量为50-100mg/kg/天，例如可以为，但不限于50mg/kg/天、60mg/kg/天、70mg/kg/天、80mg/kg/天、90mg/kg/或100mg/kg/天。
给药剂量和频率可以根据是预防性处理还是治疗性处理而不同。在预防性应用中，以相对低频率的间隔长期给予相对低的剂量。在治疗性应用中，有时需要以相对短的间隔给予相对高的剂量。
优选地，所述药物的有效给药剂量为75mg/kg/天。
当药物的有效给药剂量在上述优选范围内时，对乳腺癌骨转移能够起到更好的抑制作用。
下面通过具体的实施例进一步说明本发明，但是，应当理解为，这些实施例仅仅是用于更详细地说明之用，而不应理解为用于以任何形式限制本发明。
本发明实施例中用到的主要试剂信息如下：
新鲜鹿茸由中国农业科学院特产研究所左家梅花鹿养殖基地提供，16(R)-HETE由本实验室合成。
实施例1筛选鹿茸有效单体
提前将水在4℃下冷却12h，每10克鹿茸添加1ml水混合后在4℃的条件下提取24小时，300rpm/min离心10min分离上清液，对上清液进行冻干形成冻干粉，进行代谢质谱检测，质谱条件为：
①正模式：加热器温度300℃；鞘气流速：45arb；辅助气流速：15arb；尾气流速：1arb；电喷雾电压：3.0KV；毛细管温度：350℃；S-Lens RF Level，30％；
②负模式：加热器温度300℃；鞘气流速：45arb；辅助气流速：15arb；尾气流速：1arb；电喷雾电压：3.2KV；毛细管温度：350℃；S-Lens RF Level，60％；
然后合成代谢质谱检测到的单体。
检测到如表1和2约200余种物质，人工合成这些单体，筛选出一类有效单体16(R)-HETE，其分子式为C20H32O3，分子量302.22457。
表1鹿茸冻干粉正模式代谢质谱结果
表2鹿茸冻干粉负模式代谢质谱结果
实施例2TRAP染色破骨细胞
从股骨和胫骨分离的骨髓细胞用40μm细胞过滤器纯化，并在含有10％(vol/vol)热灭活胎牛血清(FBS)(Gibco，USA)和50ng/ml小鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)(R&DSystems,USA)培养72h诱导分化为破骨细胞前体。在6孔板每孔培养1×106个细胞，对照组在含有10％胎牛血清、50ng/ml小鼠M-CSF和50ng/ml小鼠NF-KB配体受体或激活剂(RANKL)(R&D Systems,USA)的α-MEM培养基中进一步培养诱导破骨细胞再生和分化。实验组在含有10％胎牛血清、50ng/ml小鼠M-CSF和50ng/ml RANKL及75ng/ml 16(R)-HETE的α-MEM培养基中进一步培养诱导破骨细胞再生和分化。在第4-5天，使抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色破骨细胞。成熟破骨细胞被鉴定为多核(>3核)TRAP+细胞。用CytationTM5细胞成像多模式阅读器结合自动数字广域显微镜(BIOTEK,USA)拍摄染色细胞的照片，并使用CytationTM5细胞成像多模式阅读器结合自动数字广域显微镜分析软件(BIOTEK,USA)计数细胞数并统计细胞体积及细胞核大小。
检测结果如图1-图4所示，根据图1-图4可知，与对照组(0mg/l)相比，加入16(R)-HETE(75ng/ml)实验组的破骨细胞的生成较少，破骨细胞数量减少，破骨细胞表面积和单个破骨细胞核数量均有效减少。
实施例3 16(R)-HETE对破骨细胞前体细胞增殖和凋亡的影响
参照实施例2进行骨细胞的分化和再生处理，并如同实施例2进行对照和实验组分组，在第4-5天，使用AnnexinV：PE凋亡检测试剂盒I(BDBioScIsStices，USA)对凋亡测定进行定量。破骨细胞前体增殖用溴脱氧尿苷(BrdU)细胞增殖检测试剂盒(GEHealthcareLifeSciences，USA)进行定量，数据代表至少三个独立实验的平均值±SEM。
检测结果参见图5和图6，根据图5和图6可知，在浓度为75ng/ml时，16(R)-HETE治疗不影响M-CSF依赖的前体细胞增殖或凋亡率，上述实验在体外证明16(R)-HETE对破骨细胞分化有抑制作用，而不影响细胞增殖或存活。
实施例4 16(R)-HETE对破骨细胞钙离子浓度的影响
参照实施例2进行破骨细胞再生和分化处理，并如同实施例2进行对照和实验组分组，在第4-5天使用钙氟酶联免疫吸附试验进行检测(Lonza,Switzerland)。
检测结果参见图7，根据图7可知，在浓度为75ng/ml时，16(R)-HETE治疗可以较为显著地降低钙离子的活性，上述实验在体外证明16(R)-HETE对破骨细胞分化有抑制作用，而不影响细胞增殖或存活。
实施例5肿瘤骨转移扫描重建结果
6周雌性裸鼠(Balb/c-null)从辽宁长生生物技术股份有限公司购买，并在SPF条件下繁殖。皮下注射MDA-MB-231乳腺癌细胞系建立肿瘤骨转移模型，实验组以灌胃方式给予小鼠75mg/kg 16(R)-HETE治疗，4周后扫描(Quantum GX2 micro-CT Imaging System(PerkinElmer,USA)。统计全身骨肿瘤转移数及骨肿瘤转移大小。
检测结果如图8-10所根据图8-10可知，给予小鼠75mg/kg 16(R)-HETE治疗4周后，可有效抑制小鼠骨转移发生，减少全身骨肿瘤转移数和骨转移肿瘤大小。
根据上述实验可知道，鹿茸单体-16(R)-HETE通过抑制破骨细胞分化抑制乳腺癌骨转移。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。
Claims (1)
1.16-羟基，5,8,11,14-二十四烯酸在制备抑制乳腺肿瘤骨转移的药物中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010758669.2A CN111803482B (zh) | 2020-07-31 | 2020-07-31 | 鹿茸单体在制备抑制乳腺肿瘤骨转移的药物中的应用及药物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010758669.2A CN111803482B (zh) | 2020-07-31 | 2020-07-31 | 鹿茸单体在制备抑制乳腺肿瘤骨转移的药物中的应用及药物 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111803482A CN111803482A (zh) | 2020-10-23 |
| CN111803482B true CN111803482B (zh) | 2021-09-10 |
Family
ID=72863456
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202010758669.2A Expired - Fee Related CN111803482B (zh) | 2020-07-31 | 2020-07-31 | 鹿茸单体在制备抑制乳腺肿瘤骨转移的药物中的应用及药物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN111803482B (zh) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1997044024A1 (en) * | 1996-05-22 | 1997-11-27 | University Of Vermont | Novel arachidonic acid metabolite, 16-hete |
| WO1999059964A1 (en) * | 1998-05-15 | 1999-11-25 | University Of Vermont | Novel analogs of 16-hydroxyeicosatetraenoic acid |
-
2020
- 2020-07-31 CN CN202010758669.2A patent/CN111803482B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1997044024A1 (en) * | 1996-05-22 | 1997-11-27 | University Of Vermont | Novel arachidonic acid metabolite, 16-hete |
| WO1999059964A1 (en) * | 1998-05-15 | 1999-11-25 | University Of Vermont | Novel analogs of 16-hydroxyeicosatetraenoic acid |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| "16(R)-hydroxyeicosatetraenoic acid, a novel cytochrome p450 product of arachidonic acid......";M. M. Bednar;《Neurosurgery》;20001031;第47卷(第6期);第1410-1418页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN111803482A (zh) | 2020-10-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0196415B1 (en) | Trichostatins a and c as antitumour drugs | |
| US11090330B2 (en) | Pharmaceutical solution having a toxicity-reducing effect for antitumor drugs, and pharmaceutical composition comprising same | |
| US12156861B2 (en) | Pharmaceutical composition for treating kidney cancer and application thereof | |
| KR102011105B1 (ko) | 고시폴 및 펜포르민을 유효성분으로 포함하는 췌장암 예방 및 치료용 약학적 조성물 | |
| CN114948938B (zh) | 白术内酯i在制备预防和/或治疗宫颈癌的药物中的用途 | |
| JP2018513130A (ja) | Ｈｓｐ９０阻害ペプチド結合体及びその腫瘍治療における応用 | |
| CN113925867A (zh) | 盐酸决奈达隆联合5-氟尿嘧啶在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
| CN111803482B (zh) | 鹿茸单体在制备抑制乳腺肿瘤骨转移的药物中的应用及药物 | |
| GB2039736A (en) | Pharmaceutical compositions containing thiazolidine-4-carboxylic acid and method of preparation | |
| CN114222580B (zh) | 一种预防和/或治疗卵巢癌的多肽药物及其用途 | |
| CN113577070A (zh) | 一种治疗急性髓系白血病的联合用药物组合物及其应用 | |
| CN104114182A (zh) | 罗米地辛和5-阿扎胞苷在治疗淋巴瘤中的应用 | |
| WO2021023290A1 (zh) | 吡硫锌在肺癌治疗中的应用 | |
| CN107281177B (zh) | 促进造血干细胞归巢和植入的方法 | |
| CN102451183B (zh) | 一种孕甾双烯醇酮类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
| CN117323418B (zh) | 一种含乳铁蛋白的胶囊在阻止hpv病毒感染中的用途 | |
| CN114712379B (zh) | 黄芪甲苷iv在制备预防和治疗腹膜透析肠道并发症药物中的应用 | |
| US12037309B2 (en) | Compound, agent and composition for the suppression of cancer growth | |
| CN116549478B (zh) | 一种药物组合物及其制备方法和用途 | |
| CN117085135B (zh) | 角鲨烯环氧酶抑制剂在制备治疗子宫内膜癌的药物中的用途 | |
| US20220339175A1 (en) | Application of Stachyose in Preparation of Drug for Treating Castration-Resistant Prostate Cancer | |
| CN111728960B (zh) | 富马酸比索洛尔联合多西他赛在制备抗肿瘤药物中的应用 | |
| CN110856718A (zh) | 苯并异硒唑衍生物与铂类药物联合用于制备治疗肿瘤药物与术后肿瘤复发药物中的应用 | |
| CN113827604B (zh) | 瑞德西韦在制备治疗肿瘤或抗肿瘤转移药物中的应用 | |
| CN114222753B (zh) | 一种预防和/或治疗神经母细胞瘤的多肽药物及其用途 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20210910 |