CN111662945A - 一种微波辅助酶解法提取诺丽果肽的方法及诺丽果肽粉 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种微波辅助酶解法提取诺丽果肽的方法及诺丽果肽粉，属于肽提取技术领域，方法包括：将诺丽果干品原料粉碎后加水，并加入亚硫酸氢钠、抗坏血酸搅拌浸泡，将浸泡好的原料在胶体磨中研磨，在微波罐中依次加入碱酶和木瓜酶搅拌微波酶解，离心过滤，收集滤液依次进行微滤、两次超滤、钠滤后即得，诺丽果肽粉由诺丽果肽冷冻干燥后得到。本发明的提取方法工艺简便，易于控制，成本低，易实现工业化生产。采用微波辐射辅助酶解，不仅可以为酶解体系提供能量，维持酶解所需温度，而且大大提高酶解效率，降低酶解时间，同时保证了酶解的彻底性与准确性，为诺丽果活性成分工业化生产提供了新途径，具有明显的经济效益。
Description
技术领域
本发明涉及一种肽的提取方法及冻干粉，具体涉及一种微波辅助酶解法提取诺丽果肽的方法及诺丽果肽粉，属于肽提取技术领域。
背景技术
海滨木巴戟(学名：Morinda citrifolia L.)是茜草科、巴戟天属灌木至小乔木，俗称诺丽果，高可达5米；茎直，枝近四棱柱形。叶片交互对生，两端渐尖或急尖，光泽，无毛，叶脉两面凸起，下面脉腋密被短束毛；托叶生叶柄间，无毛。头状花序每隔一节一个，与叶对生，花多数，无梗；萼管彼此间多少粘合，萼檐近截平；花冠白色，漏斗形，裂片卵状披针形，着生花冠喉部，花丝长约3毫米，花药内向，花柱约与冠管等长，子房有时有不育，每室胚珠1颗，胚珠略扁，聚花核果浆果状，卵形，种子小，扁，长圆形，全年花果期。
诺丽果主要生长在南太平洋群岛及赤道附近的印度尼西亚、瓦努阿图、库克群岛、斐济、萨摩亚等地，以大溪地的最著名。北半球的夏威夷群岛、东南亚的菲律宾、柬埔寨、老挝、缅甸也有生长，国内主要产地为海南岛、西沙群岛和台湾岛。
诺丽果被称为“超级水果”，果实富含227种营养成分，其中包括13种维生素(A、B、C、E等)，16种矿物质(钾、钠、锌、钙、铁、镁、磷、铜、硒等)，8种微量元素，还包括9种人体所必需在内的20多种氨基酸(是植物中含氨基酸种类最多的超强组合)，10多种具有抗氧化作用的物质，还含有东莨菪碱等多种生物碱、多醣体、多种酵素等极具医学价值的成分，是非常强效的天然综合维生素。
诺丽果富含人体细胞体细胞成份，有强身的效果。其可促进食物分解消化，容易吸收，促进体力迅速复原。诺丽果还具有改善体质、抗炎、抗菌作用，可调整低血压或高血压，调整血糖值等，提升本身的自愈能力。
然而诺丽成熟的果实具有强烈的臭味，因此又被称为“乳酪果”或是“呕吐果”，果实味道难闻又有苦味且不耐保存，因此人们大多将其加工成果浆.果汁或者酵素，但诺丽果制成果汁和酵素需加入多种调味剂和防腐剂，不利于人体健康，且不易被人体吸收。
通过对诺丽果的深加工利用研究，发现诺丽果富含天然肽及多种有益人体的活性物质，可携带诺丽果多糖生物碱等到相应的把细胞靶器官产生生物效应，因此，提取制备诺丽果肽是诺丽果深加工利用的方向。
发明内容
有鉴于此，本发明提供了一种从诺丽果中提取天然小分子肽的方法，采用微波酶解技术从诺丽果干中提取出诺丽果肽，可以广泛使用于亚健康人群的治疗保健。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种微波辅助酶解法提取诺丽果肽的方法，包括以下步骤：
1)将诺丽果干品原料粉碎后加水，并加入亚硫酸氢钠、抗坏血酸搅拌浸泡10－15min；
2)将浸泡好的原料在胶体磨中研磨，调整浆液pH值至8.5，温度为10－50℃；
3)将浆液置于功率为2－10kw的微波罐中，加入碱酶，搅拌微波酶解45－50min，加入木瓜酶继续搅拌微波酶解45－50min，升温灭活，冷却至45－50℃，离心过滤，收集滤液；
4)将所得滤液依次进行微滤、两次超滤、钠滤后即得所述诺丽果肽。
进一步，步骤1)中所述粉碎为粉碎至粒径为50－100目。
进一步，步骤1)中所述加水的操作为加入诺丽果干品质量20倍的水，所述水的温度为25－30℃；
所述亚硫酸氢钠的加入量为诺丽果干品质量的3‰；
所述抗坏血酸的加入量为诺丽果干品质量的1‰。
进一步，步骤3)中所述搅拌微波酶解的温度为50－55℃；
所述继续搅拌微波酶解的温度为55－60℃；
所述升温灭活的温度为85－90℃。
进一步，步骤3)中所述离心过滤的操作为采用三足离心机，以400目滤布离心过滤。
进一步，步骤4)中所述微滤为用可拦截分子量30000Da的30000膜进行微滤；
所述两次超滤的操作为：第一次超滤采用10000膜过滤，第二次超滤采用5000膜过滤；
所述钠滤为采用300Da的膜进行钠滤。
本发明中还请求保护一种诺丽果肽粉，由上述提取方法提取的诺丽果肽冷冻干燥得到。
本发明的提取方法工艺简便，易于控制，成本低，易实现工业化生产。采用微波辐射辅助酶解，不仅可以为酶解体系提供能量，维持酶解所需温度，而且大大提高酶解效率，降低酶解时间，同时保证了酶解的彻底性与准确性，为诺丽果活性成分工业化生产提供了新途径；无有害物质产生，达到了清洁生产的标准；不会破坏小分子肽的结构，保持了肽活性，提高了诺丽果肽的提取率，提高了诺丽果的食用价值和生理功能；使用多次过滤的技术对其分离纯化，生产工艺简便，提取率高，具有明显的经济效益。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
微波辅助酶解法提取诺丽果肽的方法，包括以下步骤：
1)将诺丽果干品原料粉碎至粒径为60目后加入25－30℃诺丽果干品质量20倍的水，并加入诺丽果干品质量3‰的亚硫酸氢钠、诺丽果干品质量1‰的抗坏血酸搅拌浸泡15min；
2)将浸泡好的原料在胶体磨中研磨，调整浆液pH值至8.5，温度为30℃；
3)将浆液置于功率为2－10kw的微波罐中，调整微波功率为2kw，加入碱酶，55℃搅拌微波酶解45min，加入木瓜酶，55℃继续搅拌微波酶解45min，升温至85℃灭活，冷却至45℃，用400目滤布三足离心机离心过滤，收集滤液；
4)将所得滤液依次进行用可拦截分子量30000Da的30000膜进行微滤、10000膜超滤、5000膜超滤、300Da的膜钠滤，用RO膜浓缩处理即得。
将上述方法提取得到的诺丽果肽通过冷冻干燥的方式制备成诺丽果肽粉，并对其中的氨基酸和蛋白质含量进行了检测，检测项目、结果及方法如下表1：
表1诺丽果肽粉中氨基酸、蛋白质含量检测结果
实施例2
微波辅助酶解法提取诺丽果肽的方法，包括以下步骤：
1)将诺丽果干品原料粉碎至粒径为50目后加入25℃诺丽果干品质量20倍的水，并加入诺丽果干品质量3‰的亚硫酸氢钠、诺丽果干品质量1‰的抗坏血酸搅拌浸泡10min；
2)将浸泡好的原料在胶体磨中研磨，调整浆液pH值至8.5，温度为10－50℃；
3)将浆液置于功率为2－10kw的微波罐中，调整微波功率为2kw，加入碱酶，50℃搅拌微波酶解45min，加入木瓜酶，55℃继续搅拌微波酶解45min，升温至85℃灭活，冷却至45℃，用400目滤布三足离心机离心过滤，收集滤液；
4)将所得滤液依次进行用可拦截分子量30000Da的30000膜进行微滤、10000膜超滤、5000膜超滤、300Da的膜钠滤即得。
实施例3
微波辅助酶解法提取诺丽果肽的方法，包括以下步骤：
1)将诺丽果干品原料粉碎至粒径为100目后加入30℃诺丽果干品质量20倍的水，并加入诺丽果干品质量3‰的亚硫酸氢钠、诺丽果干品质量1‰的抗坏血酸搅拌浸泡15min；
2)将浸泡好的原料在胶体磨中研磨，调整浆液pH值至8.5，温度为50℃；
3)将浆液置于功率为2－10kw的微波罐中，调整微波功率为2kw，加入碱酶，55℃搅拌微波酶解50min，加入木瓜酶，60℃继续搅拌微波酶解50min，升温至90℃灭活，冷却至50℃，用400目滤布三足离心机离心过滤，收集滤液；
4)将所得滤液依次进行用可拦截分子量30000Da的30000膜进行微滤、10000膜超滤、5000膜超滤、300Da的膜钠滤，用RO膜浓缩处理即得。
Claims (10)
1.一种微波辅助酶解法提取诺丽果肽的方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)将诺丽果干品原料粉碎后加水，并加入亚硫酸氢钠、抗坏血酸搅拌浸泡10－15min；
2)将浸泡好的原料在胶体磨中研磨，调整浆液pH值至8.5，温度为10－50℃；
3)将浆液置于功率为2－10kw的微波罐中，加入碱酶，搅拌微波酶解45－50min，加入木瓜酶继续搅拌微波酶解45－50min，升温灭活，冷却至45－50℃，离心过滤，收集滤液；
4)将所得滤液依次进行微滤、两次超滤、钠滤后即得所述诺丽果肽。
2.根据权利要求1所述的天然诺丽果肽提取方法，其特性在于，步骤1)中所述粉碎为粉碎至粒径为50－100目。
3.根据权利要求1所述的天然诺丽果肽提取方法，其特性在于，步骤1)中所述加水的操作为加入诺丽果干品质量20倍的水，所述水的温度为25－30℃；
所述亚硫酸氢钠的加入量为诺丽果干品质量的3‰；
所述抗坏血酸的加入量为诺丽果干品质量的1‰。
4.根据权利要求1所述的天然诺丽果肽提取方法，其特性在于，步骤3)中所述搅拌微波酶解的温度为50－55℃；
所述继续搅拌微波酶解的温度为55－60℃；
所述升温灭活的温度为85－90℃。
5.根据权利要求1所述的天然诺丽果肽提取方法，其特性在于，步骤3)中所述离心过滤的操作为采用三足离心机，以400目滤布离心过滤。
6.根据权利要求1所述的天然诺丽果肽提取方法，其特性在于，步骤4)中所述微滤为用可拦截分子量30000Da的30000膜进行微滤。
7.根据权利要求1所述的天然诺丽果肽提取方法，其特性在于，步骤4)中所述两次超滤的操作为：第一次超滤采用10000膜过滤，第二次超滤采用5000膜过滤。
8.根据权利要求1所述的天然诺丽果肽提取方法，其特性在于，步骤4)中所述钠滤为采用300Da的膜进行钠滤。
9.根据权利要求1－8任一项所述的天然诺丽果肽提取方法，其特性在于，步骤4)还包括钠滤后用RO膜浓缩处理的操作。
10.一种诺丽果肽粉，其特征在于，所述诺丽果肽粉由权利要求1－9任一项所述提取方法提取的诺丽果肽冷冻干燥得到。
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