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CN111514301A - Tgf信号抑制剂在防治癌性贫血中的应用 - Google Patents

Tgf信号抑制剂在防治癌性贫血中的应用 Download PDF

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CN111514301A
CN111514301A CN202010435961.0A CN202010435961A CN111514301A CN 111514301 A CN111514301 A CN 111514301A CN 202010435961 A CN202010435961 A CN 202010435961A CN 111514301 A CN111514301 A CN 111514301A
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CN
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tumor
tgf
anemia
mice
cancer
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CN202010435961.0A
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项鹏
汪建成
王博彦
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Sun Yat Sen University
Original Assignee
Sun Yat Sen University
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Publication date
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Abstract

本发明公开了TGF信号抑制剂在制备用于治疗和/或预防癌性贫血的药物中的应用。本发明研究显示，TGF信号抑制剂对癌性贫血有明显的防治效果，它们主要通过减少骨吸收，从而有利于维持骨稳态，改善造血微环境，延缓癌性贫血的发生，而且还有利于减轻或缓解患者的癌性贫血症状，改善肿瘤治疗效果。因此TGF信号抑制剂在治疗和/或预防癌性贫血方面，以及在提高改善肿瘤治疗效果方面具有很好的应用价值。

Description

TGF信号抑制剂在防治癌性贫血中的应用
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，特别是涉及TGF信号抑制剂在制备用于治疗和/或预防癌性贫血的药物中的应用，以及用于治疗和/或预防癌性贫血的药物。
背景技术
癌性贫血是肿瘤患者常见的一种伴发症状，表现为血红蛋白水平进行性下降和红细胞数量的减少。至少有30％癌症患者会发生贫血，而且症状随着肿瘤进展逐渐加重。癌性贫血患者通常伴有疲劳、嗜睡、呼吸困难、厌食和认知功能的逐渐恶化，这些症状显著影响了病人生活质量，而且导致患者在肿瘤治疗方面的耐受性变差，削弱肿瘤的治疗效果。因此，针对癌性贫血的治疗对于延长肿瘤患者生存期和提高患者生活质量都有着十分重要的作用。
随着大量研究的开展，关于癌性贫血的发生机制也有了更深入的了解。癌性贫血的病理生理特征多种多样，其中，造血微环境破坏在当中扮演着重要的作用，这一负性平衡是由肿瘤分泌多种因子及机体代谢紊乱等综合因素造成。尽管目前有许多临床前研究在荷瘤的动物模型中取得不错进展，临床上却仍没有药物被批准应用于癌性贫血的预防和治疗。临床上主要通过红细胞移植和促红细胞生成素注射等手段来进行癌性贫血的治疗，但上述方法可产生免疫反应以及血管栓塞等一系列不良反应。因此，我们急需要深入了解癌性贫血的病因学基础和病理过程，在其发生的早期进行靶向干预，以达到更好的治疗效果。
红细胞是通过造血干细胞逐步的成红分化过程产生的。最早形成的类红细胞祖细胞是爆发形成单位类红细胞，其大部分处于休眠状态，并且能够分化为集落形成单位类红细胞。随后集落形成单位类红细胞在促红细胞生成素的作用下产生原红细胞。原红细胞经历了多个阶段的成熟，包括嗜碱性、多色和正色红细胞，然后成为网织红细胞，最后成为成熟红细胞。近年来，许多研究人员的工作表明，血细胞生成是一个复杂的过程，受到包括周围的骨内膜和骨髓微环境的严格控制。骨内膜微环境主要由成骨细胞和破骨细胞组成，其稳态的维持有赖于骨形成与吸收之间的动态平衡，这一过程被称为骨骼重塑。骨骼重塑活性与造血功能密切相关，它可以通过直接或间接途径调节造血干细胞的增殖、分化和长期造血功能。此外，骨髓微环境作为造血微环境的一部分，也在红系祖细胞的稳态维持及应激诱导的增殖和分化调控中发挥重要作用。
在造血微环境中，转化生长因子β(transforming growth factor beta,TGF-β)属于一类促进细胞生长和转化的细胞因子超家族，是不同细胞类型的增殖和分化的重要调节因子，并且已被证实与多种骨髓疾病的发病机制有关。骨髓中的TGFβ主要来源于骨基质。在骨基质形成过程中，成骨细胞产生无功能的TGFβ，并将其储存在骨基质中。而在骨吸收过程中，这种储存的TGFβ得以从骨基质中释放出来，并进一步被破骨细胞切割而成为活化的TGFβ。在这个过程中，TGFβ发挥着双重作用：活化的TGFβ可以促进骨髓基质细胞向骨吸收部位的迁移并诱导骨形成，进而调控骨平衡。但是骨基质中过量释放的TGFβ是多种疾病的病理诱因和关键的调控因素。一些研究人员已经证明，癌症中出现的肌肉无力与某些浸润性肿瘤的溶骨过程有关，这些肿瘤在肿瘤诱导的骨破坏过程中过度释放TGFβ。例如，在Camurati-Engelmann病的患者中，骨发生异常导致TGFβ的释放引起严重的骨肥大和骨关节炎。但是，TGFβ在癌性贫血的发病机理及发生发展中的作用尚未研究清楚。
发明内容
本发明要解决的技术问题是克服现有癌性贫血防治药物的缺陷和不足，提供一种防治癌性贫血的新思路和新药物选择。发明人通过大量创造性劳动，首次发现，TGF信号抑制剂可以有效地治疗和/或预防癌性贫血，尤其为肿瘤诱导贫血的治疗提供了新的思路，有利于延缓或减轻肿瘤患者的贫血症状，改善肿瘤治疗效果。
本发明的目的在于提供TGF信号抑制剂在制备用于治疗和/或预防癌性贫血的药物中的应用。
本发明的另一目的在于提供一种用于治疗和/或预防癌性贫血的药物，所述药物包括TGF信号抑制剂。
本发明的另一目的在于提供TGF信号抑制剂在制备可提高抗癌药治疗效果的药物中的应用。
本发明的另一目的在于提供一种伴发癌性贫血类癌症的治疗药物，所述药物包括TGF信号抑制剂和对所述癌症具有治疗作用的抗癌药。
本发明的上述目的通过如下技术方案予以实现：
SB505124，化学名为：2-[4-(1,3-苯并二恶茂-5-基)-2-(叔丁基)-1H-咪唑-5-基]-6-甲基吡啶，其结构式如下所示：
Figure BDA0002502270920000031
SB431542，化学名为：4-[4-(3,4-亚甲二氧基苯基)-5-(2-吡啶基)-1H-咪唑-2-基]苯甲酰胺，其结构式如下所示：
Figure BDA0002502270920000032
SB505124在2002年首次合成，是TGF-βI型受体ALK4、ALK5和ALK7的选择性小分子抑制剂，具有潜在抗癌活性，治疗潜能包括缺血性脑损伤、固体肿瘤、软骨损伤、肾功能不全、糖尿病肾病、干细胞动员、炎症性疾病和肺纤维化；SB431542在2002年首次合成，是TGF-βI型受体ALK5的选择性抑制剂，也抑制ALK4和ALK7，同样具有一定的免疫调节及抑制肿瘤生长、转移的功能。
本发明研究显示，SB505124、SB431542等TGF信号抑制剂等在癌性贫血预防和治疗方面具有很重要的应用前景。
因此，本发明提供了TGF信号抑制剂在制备用于治疗和/或预防癌性贫血的药物中的应用。
优选地，所述TGF信号抑制剂为TGF-βI型受体抑制剂。
所述TGF-βI型受体抑制剂优选为SB505124的结构类似物。
更优选地，所述TGF-βI型受体抑制剂为SB505124或其药学上可接受的盐、或SB431542或其药学上可接受的盐。
本文中，所述SB505124为化合物2-[4-(1,3-苯并二恶茂-5-基)-2-(叔丁基)-1H-咪唑-5-基]-6-甲基吡啶。
本文中，所述SB431542为化合物4-[4-(3,4-亚甲二氧基苯基)-5-(2-吡啶基)-1H-咪唑-2-基]苯甲酰胺。
本文中，所述癌性贫血为肿瘤诱导贫血。
本发明所述癌性贫血包括但不限于在肿瘤发生及肿瘤治疗过程中，以显著的外周血红细胞数减少、血红蛋白浓度降低、红系生成障碍等为主症状的综合症。
本发明还提供了一种用于治疗和/或预防癌性贫血的药物，所述药物包括TGF信号抑制剂。
所述TGF信号抑制剂为所述药物中的有效成分。
优选地，所述TGF信号抑制剂为TGF-βI型受体抑制剂。
所述TGF-βI型受体抑制剂优选为SB505124的结构类似物。
更优选地，所述TGF-βI型受体抑制剂为SB505124或其药学上可接受的盐、或SB431542或其药学上可接受的盐。
基于本发明上述成果，本发明还可提供TGF信号抑制剂在制备可提高抗癌药治疗效果的药物中的应用。
所述提高抗癌药治疗效果是指提高对伴随有癌性贫血的癌症的治疗效果。
优选地，所述TGF信号抑制剂为TGF-βI型受体抑制剂。
所述TGF-βI型受体抑制剂优选为SB505124的结构类似物。
更优选地，所述TGF-βI型受体抑制剂为SB505124或其药学上可接受的盐、或SB431542或其药学上可接受的盐。
本发明还提供一种伴发癌性贫血类癌症的治疗药物，所述药物包括TGF信号抑制剂和对所述癌症具有治疗作用的抗癌药，联用改善提高抗癌效果。
优选地，所述TGF信号抑制剂为TGF-βI型受体抑制剂。
所述TGF-βI型受体抑制剂优选为SB505124的结构类似物。
更优选地，所述TGF-βI型受体抑制剂为SB505124或其药学上可接受的盐、或SB431542或其药学上可接受的盐。
本发明所述药物可用作哺乳动物(例如人、小鼠、大鼠、兔、狗、猫、牛、马、猪、猴等)中的癌性贫血的治疗和/或预防。
本文使用的术语“治疗”是指减轻或改善病症，即延缓或抑制病症或至少一种临床症状的发展。
本文使用的术语“预防”是指所述病症的症状出现之前向受试者施用本发明所述药物。
本发明所述受试者可以指任何动物，包括但不限于人、小鼠、大鼠、兔、狗、猫、牛、马、猪、猴等哺乳动物。
本发明所述药物可经由任何生理上可接受途径给药，给药途径例如口服、注射等。
本发明所述药物可制成药学上可接受的剂型。一般来说，制剂中有效成分的量为制剂总重量的1-95％。
药物的剂型要适合不同给药方式。用于口服时，所述药物可制成固体制剂如片剂、粉剂、粒剂、胶囊剂或液体制剂如溶液或混悬液等。用于注射时，所述药物可制成可注射的溶液或混悬液，或可注射的干燥粉末；所述可注射的干燥粉末可在临用前溶解或分散于无菌水或其他无菌可注射介质，可立即使用。各种制剂的制备可以采用药学领域的常规生产方法。
在本发明较佳的实施例中，所述药物的剂型为注射制剂或口服制剂。
本发明所述药物还可以含有药学上允许的辅料或载体，可根据需要任选使用药学上允许的辅料或载体。这些辅料或载体是广泛熟知的，包括：口服制剂使用的粘合剂(如淀粉、明胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮)、稀释剂(如乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纤维素，和/或甘油)、润滑剂(如二氧化硅、滑石、硬脂酸或其盐，通常是硬脂酸镁或硬脂酸钙，和/或聚乙二醇)，以及如果需要，还包含：崩解剂(如淀粉、琼脂、海藻酸或其盐，通常是海藻酸钠)和/或泡腾混合物、助溶剂、稳定剂、悬浮剂、色素、矫味剂等；可注射的制剂使用的防腐剂、加溶剂、稳定剂等；局部制剂用的基质、稀释剂、润滑剂、防腐剂等。
本发明所述“药学上允许”是指该辅料或载体可与药效成分兼容，较佳为能稳定药效成分且对被治疗的个体无害。
本文使用的短语“药学上可接受的盐”是指能保持原有生物活性并且适合于医药用途的某些盐类。化合物SB505124、SB431542能够与不同的无机酸和有机酸生成许多不同的盐。可以制备所述盐的酸为生成无毒性酸加成盐的酸，所述盐包括但不限于柠檬酸盐、马来酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硝酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、乙酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、柠檬酸盐、丁二酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐、延胡索酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐。
当将所述药物用于所述癌性贫血的治疗和/或预防，或其他治疗和/或预防时，本发明化合物的总日用量须由主诊医师在可靠的医学判断范围内做出决定。对于任何具体的患者，具体的治疗有效剂量水平须根据多种因素而定，所述因素包括所治疗的障碍和该障碍的严重程度；所采用的具体化合物的活性；患者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食；所采用的具体化合物的给药时间、给药途径和排泄率；治疗持续时间；及医疗领域公知的类似因素。例如，本领域的做法是，化合物的剂量从低于为得到所需治疗效果而要求的水平开始，逐渐增加剂量，直到得到所需的效果。
如果受试者将在生物学上、医学上或生活质量上受益于治疗，则受试者需要此类治疗。
本发明具有以下有益效果：
本发明通过细胞水平和体内动物实验表明，SB505124、SB431542等TGF信号抑制剂主要通过减少骨吸收，从而有利于维持骨稳态，改善造血微环境，延缓癌性贫血的发生，而且有利于减轻或缓解患者的癌性贫血症状，从而有效地治疗和/或预防癌性贫血，为癌性贫血的防治、提高改善肿瘤治疗效果提供了新的思路。
附图说明
图1-图6中，Control：为对照组，指不作任何处理的C57BL/6小鼠，LLC：指皮下移植有LLC肿瘤细胞(即，荷瘤)的C57BL/6小鼠；图3-图5中：LLC+SB505124：指皮下移植有LLC肿瘤细胞、体内施用SB505124的C57BL/6小鼠；图6中：LLC+DMSO：指皮下移植有LLC肿瘤细胞、体内施用DMSO的C57BL/6小鼠(与LLC+SB505124对应)，LLC+PEG：指皮下移植有LLC肿瘤细胞、体内施用2％DMSO+30％PEG300+68％PBS的C57BL/6小鼠(与LLC+SB431542对应)，LLC+SB431542：指皮下移植有LLC肿瘤细胞、体内施用SB431542的C57BL/6小鼠；
图1为对照小鼠和荷瘤小鼠血常规检测及红系祖细胞分化检测结果；A：外周血红细胞数；B：血红蛋白水平；C：红细胞平均血红蛋白浓度；D：红系祖细胞分化不同阶段(I、II、III、IV、V)的细胞数量；E：红系祖细胞分化不同阶段的数量百分比的统计分析；
图2为对照小鼠和荷瘤小鼠骨髓微环境分析；A：DAPI荧光标记TGFβ检测结果；B：表明Smad2/3的磷酸化水平；图中p-Smad2、p-Smad3分别指磷酸化后的Smad2和Smad3；GAPDH是甘油醛-3-磷酸脱氢酶，用作内参；
图3为对照小鼠、荷瘤小鼠和施用SB505124荷瘤小鼠红系祖细胞分化不同阶段细胞数量检测结果；A：红系祖细胞分化不同阶段的细胞数量；B：红系祖细胞簇分化第III阶段在ter119+细胞中的数量百分比的统计分析；C：红系祖细胞簇分化第V阶段在ter119+细胞中的数量百分比的统计分析；
图4为对照小鼠、荷瘤小鼠和施用SB505124荷瘤小鼠骨质检测结果；A：股骨扫描图，其中，Transverse：横切的，Coronal：冠状的，Sagittal：矢状的；B：以整个软骨下骨内腔为重建区的三维结构图；C：骨表面积与骨体积之比；D：骨体积与总体积之比；E：骨小梁数量；F：骨皮质厚度；
图5为对照小鼠、荷瘤小鼠和施用SB505124荷瘤小鼠骨髓内纤维化因子表达检测结果；
图6为不同TGF-βI型受体抑制剂对癌性贫血的治疗效果；A：外周血内红细胞数；B：血红蛋白水平；C：骨髓内纤维化因子表达水平。
具体实施方式
以下结合说明书附图和具体实施例来进一步说明本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。
除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。
SB505124从美国Selleck公司购买，药物货号为S2186。
SB431542从美国Selleck公司购买，药物货号为S1067。
实施例1路易斯肺癌LLC细胞的培养以及小鼠荷瘤模型的构建
1.1 LLC细胞培养：利用DMEM基础培养基(含10％胎牛血清)培养LLC细胞(ATCC#CRL-1642)，备用。
1.2小鼠饲养方法：用常规小鼠饲料(蛋白质含量在20-25wt％，脂肪含量在5％-10wt％，粗纤维含量在3-5wt％)饲养小鼠。
1.3小鼠荷瘤模型的构建
取8周龄体重相差不超过2g的雄性C57BL/6小鼠(从南京大学模式动物研究所购买)，将小鼠随机分为对照组和LLC细胞移植组，每组6只小鼠。每只LLC组小鼠腹股沟皮下注射约4×106个LLC细胞，实验过程在超净工作台中进行，注意无菌操作。对照组小鼠不作任何处理。LLC细胞移植(即，荷瘤)当天计为0天，然后为1天、2天，依次类推。
实施例2荷瘤小鼠造血功能评价
2.1小鼠血常规检测
取荷瘤21天小鼠和对照组小鼠，用10％水合氯醛麻醉，提取小鼠下腔静脉血样。血样立即用血常规分析仪检测血液中红细胞数量、血红蛋白水平以及红细胞平均血红蛋白浓度。如图1中图A-图C所示，相比对照组，荷瘤小鼠血红细胞数量、血红蛋白水平以及红细胞平均血红蛋白浓度均显著降低，提示荷瘤小鼠出现贫血症状。
2.2小鼠红系祖细胞分化检测
取荷瘤21天小鼠和对照组小鼠，用10％水合氯醛麻醉，分离小鼠股骨，取小鼠骨髓。离心得到细胞悬液，用流式抗体标记Ter119、CD44进行流式分析，得到图1中图D，经统计学分析得到图E。如图E所示，相比对照组，可观察到荷瘤小鼠的红系祖细胞分化在第III阶段(即多色成红血球细胞)与第V阶段(即成熟红细胞)之间明显阻滞，造血功能显著受损。
实施例3荷瘤小鼠TGF信号通路检测
取荷瘤21天小鼠和对照组小鼠，用10％水合氯醛麻醉，分离小鼠股骨。4％多聚甲醛固定过夜后用10％EDTA脱钙2周，进行冰冻切片。通过DAPI荧光标记TGFβ，如图2中图A所示，可观察到荷瘤小鼠骨髓微环境中TGFβ水平增加。
将2.2中得到的细胞悬液用RIPA裂解液提取蛋白质，经SDS-PAGE电泳，转膜，Smad2/3及p-Smad2/3抗体孵育，显影后，得到图2中图B，可观察到荷瘤小鼠骨髓微环境p-Smad2/3水平增加，提示荷瘤小鼠骨髓微环境中TGF信号通路被激活。
实施例4 SB505124对荷瘤小鼠造血功能的影响
取8周龄体重相差不超过2g的雄性C57BL/6小鼠，设对照组(Control)、荷瘤组(LLC)及SB505124施用组(LLC+SB505124)。
对照组：不作任何处理。
荷瘤组：将4×106个LLC细胞移植至小鼠腹股沟皮下。7天后，每天腹腔注射100μLDMSO。
SB505124施用组：LLC细胞移植(即，荷瘤)7天后，每天腹腔注射SB505124(溶于纯DMSO)，持续2周。SB505124的施用量为5mg/kg体重/天。
荷瘤21天后，用10％水合氯醛麻醉，分离小鼠股骨，取小鼠骨髓。经消化，离心得到细胞悬液，用流式抗体标记Ter119、CD44进行流式分析，得到图3中图A，经统计学分析得到图B和图C，可观察到相比LLC组小鼠，施用SB505124的荷瘤小鼠，红系祖细胞分化在第III阶段(即多色成红血球细胞)与第V阶段(即成熟红细胞)之间的阻滞得到缓解。
由实验结果可得，在体内施用SB505124后，荷瘤小鼠的造血功能显著恢复。
实施例5 SB505124对荷瘤小鼠骨质的影响
取8周龄体重相差不超过2g的雄性C57BL/6小鼠，设对照组(Control)、荷瘤组(LLC)、及SB505124施用组(LLC+SB505124)。
对照组：不作任何处理。
荷瘤组：将4×106个LLC细胞移植至小鼠腹股沟皮下。7天后，每天腹腔注射100μLDMSO。
SB505124施用组：LLC细胞移植(即，荷瘤)7天后，每天腹腔注射SB505124，持续2周。SB505124的施用量为5mg/kg体重/天。
荷瘤21天后，用10％水合氯醛麻醉，分离小鼠股骨，4％多聚甲醛固定48小时，用Inveon PET/CT扫描仪(Siemens)对整个股骨进行扫描，得到图4中图A。使用InveonResearch Workplace 4.1软件对图像进行重构和分析，以整个软骨下骨内腔为重建区，进行三维结构分析，得到图4中图B。
如图4图C-图F所示，相比对照组小鼠，荷瘤小鼠的骨表面积与骨体积之比增加，骨质与总体积之比、骨小梁数目、骨皮质厚度降低，表明荷瘤小鼠骨吸收增加。而施用SB505124的荷瘤小鼠，上述症状均得到改善，表明施用SB505124可减缓荷瘤小鼠的骨吸收。
由实验结果可得，体内施用SB505124后，荷瘤小鼠的骨重构能力显著恢复。
实施例6 SB505124对荷瘤小鼠骨髓纤维化的影响
取8周龄体重相差不超过2g的雄性C57BL/6小鼠，设对照组(Control)、荷瘤组(LLC)、及SB505124施用组(LLC+SB505124)。
对照组：不作任何处理。
荷瘤组：将4×106个LLC细胞移植至小鼠腹股沟皮下。7天后，每天腹腔注射100μLDMSO。
SB505124施用组：LLC细胞移植(即，荷瘤)7天后，每天腹腔注射SB505124，持续2周。SB505124的施用量为5mg/kg体重/天。
利用2.2提到得方法得到骨髓细胞悬液，用TRIzol试剂盒裂解细胞，通过逆转录mRNA得到单链cDNA，然后利用Roche公司LC480系统进行荧光定量PCR检测各纤维化基因Acta2、Col3a1和Fn的表达状况。
荧光定量PCR所用的各引物如下：
(1)小鼠Acta2引物为：
5’-CTGACAGAGGCACCACTGAA-3’(F)；和
5’-CATCTCCAGAGTCCAGCACA-3’(R)；
(2)小鼠Col3a1引物为：
5’-ACGTAGATGAATTGGGATGCAG-3’(F)；和
5’-GGGTTGGGGCAGTCTAGTG-3’(R)，
(3)小鼠Fn引物为：
5’-ATGTGGACCCCTCCTGATAGT-3’(F)；和
5’-GCCCAGTGATTTCAGCAAAGG-3’(R)，
如图5所示，相比对照组小鼠，荷瘤小鼠纤维化基因Acta2、Col3a1和Fn的表达显著增加，而施用SB505124的荷瘤小鼠，上述基因的表达显著下调。
由实验结果可得，体内施用SB505124后，荷瘤小鼠的造血微环境得到改善。
本发明通过上述实施例，证实了癌性贫血的发生与TGF信号通路有关，并评估了TGFβ-Smad2/3信号通路在荷瘤小鼠造血微环境中的激活情况。通过对小鼠骨髓进行切片和免疫荧光染色并统计TGFβ水平，发现相对正常小鼠，荷瘤小鼠有更多的TGFβ从骨基质中释放。同时，Western Blot的结果也提示，荷瘤小鼠Smad2/3的磷酸化水平增加。以上结果提示，小鼠发生癌性贫血后，伴随着TGFβ信号通路的激活。
本申请发明人首先利用microCT对荷瘤小鼠的股骨进行扫描，发现小鼠癌性贫血过程中骨质受损，骨平衡被破坏；同时骨髓纤维化增加，骨髓微环境恶化。而通过体内施用SB505124，可以成功减少骨破坏，改善骨平衡和骨髓微环境。以上结果证实在癌性贫血的情况下，施用SB505124可改善造血微环境。
本申请发明人通过对小鼠血常规、红系祖细胞分化检测，发现在荷瘤同等天数，施用SB505124的荷瘤小鼠比不施用SB505124的荷瘤小鼠贫血症状更轻。
上述实施例中的实验结果显示，SB505124对于癌性贫血的预防和治疗有着明显的疗效，提示对肿瘤患者施用SB505124，可以阻断肿瘤对骨髓等全身多种组织的稳态平衡的破坏，有利于延缓癌性贫血的发生，并有利于减轻肿瘤患者的贫血症状，改善肿瘤治疗效果。
实施例7其他TGF-βI型受体抑制剂对癌性贫血的治疗效果
取8周龄体重相差不超过2g的雄性C57BL/6小鼠，设荷瘤组#1(LLC+DMSO)、SB505124施用组(LLC+SB505124)、荷瘤组#2(LLC+PEG)、SB431542施用组(LLC+SB431542)。
荷瘤组#1：将4×106个LLC细胞移植至小鼠腹股沟皮下。7天后，每天腹腔注射100μL DMSO，与实施例4-6中的荷瘤组(LLC)相同。
SB505124施用组：LLC细胞移植(即，荷瘤)7天后，每天腹腔注射SB505124，持续2周。SB505124的施用量为5mg/kg体重/天。本实施例中SB505124施用组与实施例4-6中的SB505124施用组相同。
荷瘤组#2：将4×106个LLC细胞移植至小鼠腹股沟皮下。7天后，每天腹腔注射100μL的2％DMSO+30％PEG300+68％PBS。
SB431542施用组：LLC细胞移植(即，荷瘤)7天后，每天腹腔注射SB431542(溶于2％DMSO+30％PEG300+68％PBS)，持续2周。SB431542的施用量为5mg/kg体重/天。
将荷瘤21天小鼠分为四组，其中两组分别施用SB505124、SB431542两种TGF-βI型受体抑制剂，而为排除药物配置方法中的差异，另外两组分别施用两种药物的配置溶剂。
用10％水合氯醛麻醉，提取小鼠下腔静脉血样。血样立即用血常规分析仪检测血液中红细胞数量及血红蛋白水平。如图6中图A-图B所示，相比单纯荷瘤组，施用SB505124或SB431542的荷瘤小鼠体内血红细胞数量及血红蛋白水平均显著回升，提示两种TGF-βI型受体抑制剂对癌性贫血均具有一定的治疗效果。
为初步探求两类药物的治疗机制，采用同实施例6中方法，利用荧光定量PCR检测骨髓内各纤维化基因Acta2、Col3a1和Fn的表达状况。如图6中图C所示，施用SB505124或SB431542后，骨髓内纤维化相关基因Acta2、Col3a1和Fn的表达量均明显降低，提示两种TGF-βI型受体抑制剂可能均通过缓解骨髓纤维化的程度进而减轻癌性贫血的症状。
以上结果提示，癌性贫血的发生发展与TGF-β通路的激活具有密切关系，且对于癌性贫血，TGF-βI型受体抑制剂的治疗效果具有一定的普适性。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.TGF信号抑制剂在制备用于治疗和/或预防癌性贫血的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述TGF信号抑制剂为TGF-βI型受体抑制剂。
3.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述TGF-βI型受体抑制剂为SB505124或其药学上可接受的盐、或SB431542或其药学上可接受的盐。
4.根据权利要求1-3任一所述应用，其特征在于，所述癌性贫血为肿瘤诱导贫血。
5.一种用于治疗和/或预防癌性贫血的药物，其特征在于，包括TGF信号抑制剂。
6.根据权利要求5所述的药物，其特征在于，所述癌性贫血为肿瘤诱导贫血。
7.TGF信号抑制剂在制备可提高抗癌药治疗效果的药物中的应用。
8.根据权利要求7所述应用，其特征在于，所述提高抗癌药治疗效果是指提高对伴随有癌性贫血的癌症的治疗效果。
9.根据权利要求7所述应用，其特征在于，所述TGF信号抑制剂为TGF-βI型受体抑制剂。
10.一种伴发癌性贫血类癌症的治疗药物，其特征在于，包括TGF信号抑制剂和对所述癌症具有治疗作用的抗癌药，所述TGF信号抑制剂为TGF-βI型受体抑制剂。
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